CN102988290B - 一种含有pga1的脂质乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种含有PGA1的脂质乳剂制剂及其制备方法，具体为一种以脂质剂作为软质外壳结构，包裹含有主药PGA1的油性成分组成而制得的PGA1脂质乳剂制剂，其中该制剂中加入了磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠，可以提高主药PGA1的稳定剂，使其与外部的包裹脂质剂结构能够更好的融合，同时，该制剂处方中还含有提高脂质剂结构稳定性的稳定剂。磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠的加入能够与PGA1形成化学结合，增加其稳定性，同时避免高温、高压等制备条件对其的破坏，显著延长药物有效期和贮存期，也避免了已有PGA1制剂所存在的血管刺激性等不良反应、毒副作用以及使用不便等诸多缺陷。

Description

一种含有PGA1的脂质乳剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种脂质乳剂，特别是一种可长期稳定保存的PGA1脂质乳剂及其制备方法。

背景技术

前列腺素A1（PGA1）化学名称为(13E,15S)-15-Hydroxy-9-Oxo-Prosta-10,13-dien-1-Oic acid，属于天然前列腺素（prostaglandin，PG）类似物。在体内由细胞膜脂质转化而来，是一种活性极强的内源性生理活性物质。临床上应用前列腺素A1治疗原发性高血压、肾性高血压、糖尿病性高血压及嗜铬细胞瘤的高血压等均有显著的降压作用。有文献报道其能显著减少因缺血造成的神经元损伤，在动物实验中减少脑梗死面积40%以上，尤其在缺血后给药仍然有效。

PGA1的化学稳定性差，不溶于水，对水、热不稳定，很容易降解。在胃肠道内易被代谢失活，不宜口服给药，目前临床上使用的水针剂静脉滴注，但是由于前列腺素类物质本身对血管的刺激性比较大，静脉滴注后病人的静脉血管会出现凸显、变红、有强烈的疼痛感等，这些副作用限制了其临床使用。中国专利CN1416815A公开了一种含有PGE1、PGA1和PGB1的复方制剂及其制备方法，该复方制剂为无水乙醇的溶液针剂或冻干粉针，虽然处方中含有环糊精类物质提高了前列腺素物质的溶解性，但是以无水乙醇作为溶液载体，在活性成分产生刺激性的同时，溶液载体也会加重这种刺激性，加入右旋糖酐-40制成冻干粉针后，虽然可以使前列腺素类物质的稳定性增加，但是，研究发现，冻干保护剂的加入会破坏一部分主药，而且冻干粉针复溶后存在均一性的问题，另外，冻干粉针这一剂型本身还存在注射处疼痛的问题，仍然没有解决血管刺激性的问题，且给药繁琐、临床应用不便，同时也增加了成本。目前，没有关于PGA1制剂的其他文献报道。

脂质乳剂制剂是一种新型的“药物导弹”型靶向制剂，它是通过将药物溶于脂肪油并经磷脂乳化分散于水相而制成的具有软质外壳的微球结构，由平均粒径为0.2微米左右的粒子组成的一种微粒分散体系。脂质乳剂是新型靶向药物制剂，可选择性地在病变部位聚积、将治疗药物最大限度地运送到靶区，使治疗药物在靶区的浓度超出传统制剂的数倍至数百倍，治疗效果明显提高；同时药物在正常组织的分布量极少，药物的毒副作用和不良反应明显减轻，达到高效低毒的效果。

发明内容

针对目前PGA₁水针剂中普遍存在的主药稳定性差、对血管有严重刺激性、有效期短的问题，本发明的目的是通过采用具有软质结构外壳的卵磷脂包裹活性成分PGA₁的油性溶剂，从而提高PGA₁的主药稳定性和避免PGA₁的血管刺激性的副作用，提供一种能够显著延长药物有效期且避免已有制剂存在的缺陷的PGA₁的脂质乳剂及其制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种含有PGA₁的脂质乳剂，该制剂处方中按重量份数计，含有PGA₁ 0.01～0.05份，注射用油80～150份，磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠5～10份，脂质剂15～50份、注射用甘油20~40份、稳定剂1~5份，余量为注射用水。

所述脂质乳剂制剂的注射用油，优选包含一种或多种选自大豆油、花生油、氢化玉米油、茶油、芝麻油、红花油、棉籽油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、植物油聚乙二醇甘油酯、中链甘油三酯和长链甘油三酯的注射用油。

所述脂质乳剂制剂中的脂质剂，优选包含一种或多种选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油油酸聚乙二醇甘油酯的乳化剂。

所述脂质乳剂制剂中含有的稳定剂包含组分A和组分B，组分A选自油酸、油酸钠和胆固醇中的一种或多种；以及组分B选自维生素E、辅酶Q10、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯和维生素C中的一种或多种；其中组分A和组分B按重量份计的重量比为1∶3～3∶1。

其中，大豆卵磷脂优选为精制大豆卵磷脂。

其中，所述脂质乳剂制剂为注射剂，优选为静脉注射剂。

其中，所述脂质乳剂制剂中的脂质乳剂粒径范围为0.1～0.2微米。

其中制备该脂质乳剂的方法包括如下步骤：

a. 预热处方量的注射用油，加入处方量的脂质剂、稳定剂、二硬脂酸磷脂酰甘油钠或磷脂酰肌醇，搅拌形成均一的油相；

b. 缓慢加入PGA₁，高速搅拌使其溶解在油相中；

b. 将注射用甘油用预热的注射用水稀释形成均一的水相；

c. 在高速搅拌条件下，将油相缓慢滴入水相中，形成乳液；

d. 在高压条件下，将乳液匀化8至12次，使其平均粒径低于0.2微米；

e．将d中制得的脂质乳剂在120℃下高温灭菌3至5秒，充填、熔封后制得产品。

其中，高速搅拌的转速为8000~10000转/分钟；所述高压为10000～15000 Psi。

具体地，本发明所述的PGA₁脂质乳剂制剂的制备方法包括如下步骤：

a、称取处方量的原料药、各种辅料；

b、将处方量的注射用油预热，加入乳化剂、稳定剂、二硬脂酸磷脂酰甘油钠或磷脂酰肌醇，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入PGA₁原料药，高速搅拌使其均匀地溶解在油相中；

c、将注射用甘油用适量的预热注射用水稀释后形成均一的水相；

d、将上述水相倒入到搅拌器内，在高速搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，均匀分散后形成乳白色的初乳；

e、取上述初乳转移到高压乳匀机内，匀化8至12次至平均粒径达0.2微米以下，调pH值，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

更具体地，本发明所述的用于静脉给药的脂质乳剂制剂的制备方法包括如下步骤：

a、称取各种原料PGA₁ 10～50mg、注射用油80～150g、磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠5～10g、脂质剂15～50g、注射用甘油20～40g、稳定剂1～5g、其余为注射用水；

b、将乳化剂、稳定剂加入到预热至60~70℃的注射用油中，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入PGA₁原料药，高速搅拌使其均匀地溶解在油相中；

c、将注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一的水相；

d、将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；

e、取上述初乳加入预热至60~70℃的注射用水，注射用水达全量，转移到高压乳匀机内，匀化8～10次，取样测定粒径直至平均粒径达0.2微米以下，调pH值为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂制剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

由于PGA₁的水溶性差、不稳定，常需要借助有机溶剂等作为溶剂载体将其制备成水溶液后应用，对患者血管的刺激性很大，使患者疼痛难忍，目前，还没有关于PGA₁其他制剂剂型的报道。为了解决PGA₁水溶性差、血管刺激性严重、稳定性差不易保存的现有技术的缺陷，本发明人经过长期的研究与筛选，研发出了一种新型的PGA₁脂质乳剂，本发明人意外地发现通过加入磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠，可以与PGA₁共价结合形成了药物前体，增加了PGA₁的稳定性，降低了其本身的刺激性，同时，加入稳定剂进一步增加脂质乳剂的稳定性，它能够使包裹的药物分子处于脂质乳剂稳定存在所需的相对稳定的弱酸环境中，通过对药物分子的脂质包裹，进一步减轻了其在静脉给药过程中对血管的直接刺激作用，同时，该稳定剂还能够降低脂质乳剂制剂中油水两相的界面张力，稳固脂质乳剂的磷脂双分子膜，具有提高活性药物本身的化学稳定性和制剂稳定性的双重作用，显著延长药物有效期和贮存期，也避免了已有的PGA₁制剂中存在的不良反应、毒副作用以及使用不便等诸多缺陷。

本发明制备的脂质乳剂制剂的粒径范围在100纳米～200纳米之间，属于纳米乳剂范畴，可靶向地作用于病灶部位，疗效增加。外观不透明，呈乳状。安全性试验结果表明，本发明制备的脂质乳剂制剂无菌、热原检查合格，且无溶血性、无刺激性，符合临床用药对安全性和稳定性的要求。

附图说明

图1为本发明的PGA₁脂质乳剂的粒径及其分布图。

图2为本发明的PGA₁脂质乳剂的微观形态。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明的内容所实现的技术均属于本发明的范围。显然，根据本发明的内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明的基本技术思想的前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

 实施例1 

将80g注射用大豆油预热至60～70℃，加入15g精制大豆磷脂、1g稳定剂（质量比为油酸：辅酶Q10=1：1）、5g磷脂酰肌醇，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入10mg PGA1原料药，在60～70℃下高速搅拌（8000转/分钟）3分钟，使其均匀溶解在油相中；将20g注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一的水相；将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；将初乳加到预热至60~70℃的注射用水中达全量，转移到高压乳匀机内，于10000～15000 Psi压力下均质8～10次，取样测定粒径至平均粒径达0.2微米以下，调pH为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂制剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。 

 实施例2

将100g氢化玉米油预热至60～70℃，加入20g蛋黄卵磷脂、1.5g稳定剂（质量比为胆固醇：维生素E=1：1）、5g二硬脂酰磷脂酰甘油钠，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入20mg PGA1原料药，在60～70℃下高速搅拌（8000转/分钟）3分钟，使其均匀溶解在油相中；将20g注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一的水相；将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；将初乳加到预热至60~70℃的注射用水中达全量，转移到高压乳匀机内，于10000～15000 Psi压力下均质8～10次，取样测定粒径至平均粒径达0.2微米以下，调pH为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

 实施例3

将100g棉籽油预热至60～70℃，加入20g椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、2g稳定剂（质量比为油酸钠：维生素C=1：1）、10g磷脂酰肌醇，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入30mg PGA1原料药，在60～70℃下高速搅拌（8000转/分钟）3分钟，使其均匀溶解在油相中；将30g注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一的水相；将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；将初乳加到预热至60~70℃的注射用水中达全量，转移到高压乳匀机内，于10000～15000 Psi压力下均质8～10次，取样测定粒径至平均粒径达0.2微米以下，调pH为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂制剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

 实施例4

将120g注射用大豆油和中链甘油三酯的混合物（质量比为3：2）预热至60～70℃，加入30精制大豆卵磷脂、2g稳定剂（质量比为油酸：抗坏血酸棕榈酸酯=3：1）、10g二硬脂酰磷脂酰甘油钠，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入40mg PGA1原料药，在60～70℃下高速搅拌（8000转/分钟）3分钟，使其均匀溶解在油相中；将30g注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一的水相；将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；将初乳加到预热至60~70℃的注射用水中达全量，转移到高压乳匀机内，于10000～15000 Psi压力下均质8～10次，取样测定粒径至平均粒径达0.2微米以下，调pH为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂制剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

 实施例5

将150g注射用大豆油和茶油的混合物（质量比为5：2）预热至60～70℃，加入50g大豆卵磷脂、4g稳定剂（质量比为油酸：胆固醇：辅酶Q10=2：1：1）、8g磷脂酰肌醇，手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入50mg PGA1原料药，在60～70℃下高速搅拌（8000转/分钟）3分钟，使其均匀溶解在油相中；将40g注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一的水相；将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；将初乳加到预热至60~70℃的注射用水中达全量，转移到高压乳匀机内，于10000～15000 Psi压力下均质8～10次，取样测定粒径至平均粒径达0.2微米以下，调pH为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂制剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

 实施例6

将110g注射用大豆油、氢化玉米油和花生油的混合物（质量比为4：1：1）预热至60～70℃，加入40g精制大豆卵磷脂、4.5g稳定剂（质量比为油酸：胆固醇：维生素E=1：1：1），手持搅拌形成均一的油相后缓慢加入35mg PGA1原料药，在60～70℃下高速搅拌（8000转/分钟）3分钟，使其均匀溶解在油相中；将40g注射用甘油用适量的预热至60~70℃的注射用水稀释后形成均一水相；将上述水相倒入到搅拌器内，在10000转/分钟的搅拌条件下将油相缓慢滴入水相中，搅拌10分钟，均匀分散后形成乳白色的初乳；将初乳加到预热至60~70℃的注射用水中达全量，转移到高压乳匀机内，于10000Psi～15000Psi压力下均质8～10次，取样测定粒径至平均粒径达0.2微米以下，调pH为4.5～5.9，通过0.22微米的微孔滤膜，120℃下高温灭菌3至5秒，所得的脂质乳剂制剂灌封于安瓿中，充氮气，即得。

以下试验例为对上述实施例制备的脂质乳剂制剂进行的理化性质及安全性检测试验。

试验例1：药物粒径的测定

对本发明的脂质乳剂制剂的粒径及分布进行了测定，具体方法如下：取本发明制备的脂质乳剂制剂用静态蒸发光散射粒径分析仪（LS13320，Beckman Coulter，美国），测定所得的脂质乳剂制剂的粒径及其分布，结果见图1。

由图1可见，所得的静脉注射用脂质乳剂制剂的粒径大小符合正态分布。静脉注射用脂质乳剂制剂的粒径小于183nm，90%的粒径小于200nm。该测定结果符合静脉注射用脂质乳剂制剂的相关要求。

 试验例2：稳定性试验

采用恒温加速试验法，分别在25℃、40℃下进行加速试验，测定实施例和比较例在加速条件下的稳定性。PGA₁降解率的结果如表1和2所示：

 表1  25℃加速试验中实施例稳定性比较

时间（天）	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5	实施例6
							3	0.86%	0.76%	0.58%	1.01%	0.95%	0.73%
5	1.01%	1.12%	1.76%	1.31%	1.72%	1.5%
							7	2.34%	2.44%	2.7%	1.98%	2.25%	2.35%
10	3.92%	4.1%	3.34%	3.42%	4.03%	4.66%

 表中的百分比为PGA₁的降解百分率。

表2  40℃加速试验中实施例稳定性比较

时间（天）	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5	实施例6
							10	1.79%	1.56%	1.87%	1.62%	1.01%	1.21%
20	2.21%	2.96%	2.33%	2.78%	2.97%	2.11%
							30	3.45%	3.7%	3.88%	3.92%	3.99%	3.13%
40	5.36%	4.34%	4.89%	5.78%	5.67%	6.01%
							50	6.21%	6.55%	7.09%	6.22%	7.06%	6.85%

表中的百分比为PGA₁的降解百分率。

由表1和2可见：按照本发明制备的PGA₁脂质乳剂注射液，由于加入了磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠，与PGA₁通过共价结合形成稳定的药物前体，大大增加了药物的稳定性，同时脂质乳剂稳定剂的加入，使PGA₁前体处于一个相对稳定的弱酸环境中，能够防止PGA₁的氧化降解，大大降低了其化学不稳定性；同时研究还表明该稳定剂还能发挥降低本发明的脂质乳剂制剂的油水两相的界面张力，牢固脂质乳剂的磷脂双分子膜的作用，因此大大降低了主药PGA₁的降解百分率，从而延长了PGA₁的贮存有效期。

 试验例3：本发明制剂的无菌检查：

取以本发明方法制备脂质乳剂制剂，按照无菌检查法（中国药典2000版附录XI D）检查，以本发明方法制备的脂质乳剂制剂的无菌检查合格。

 试验例4：本发明制剂的热原检查：

取以本发明方法制备脂质乳剂制剂，按照热原检查法（中国药典2000版附录XI D）检查，以本发明方法制备的脂质乳剂制剂的热原检查合格。

 试验例5 本发明制剂的血管刺激性试验

试验方法：选取新西兰白种雄性兔（NZW）12只，体重3.0~3.8kg，随机分成2组，一组均于左后耳缘静脉缓慢注射提高稳定性的PGA₁脂质乳剂制剂100μg/只，右耳缘静脉缓慢注射10%的葡萄糖注射液100μg/只，每天一次，连续注射三天，于注射第一次开始，每天观察注射部位有无水肿、红斑；另一组采用相同的方式静脉内注射市售PGA₁水溶液，观察有无水肿、红线、血管突出、红斑、刺激等症状。末次注射2小时后，将含有饱和氯化钾的溶液注入心脏，使兔猝死。马上从侧耳部，每一只连续切取含有耳缘静脉的约5×15mm的组织共4片，固定于10%中性缓冲福尔马林液中，将固定后的组织，按常法包埋，切成薄片HE染色，在光学显微镜下观察。

试验结果：本发明的提高稳定性的PGA₁脂质乳剂制剂，给兔耳缘静脉每日注射一次，连续三天，注射本发明实施例的6只兔耳注射部位未见有红肿和红斑、炎症的发生。病理组织学观察，兔耳表皮结构正常。表皮下乳头层及网织层无炎细胞渗出、无出血，血管内无血栓形成。附件结构正常。而另一组注射市售PGA₁水溶液针剂的加入耳部出现红肿、红斑、折射后耳缘现血管红线凸起，家兔的顺应性较差。病理组织学观察显示，表皮下乳头层及网织层有炎性细胞渗出，有出血点，血管壁变薄，血管内有小块血栓形成，附件结构红肿发炎。

 试验例6：本发明制剂的溶血性试验：

试验方法：取试管7支，1～5管分别加入0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL的提高稳定性的PGA₁脂质乳剂制剂，并用10%的葡萄糖注射液稀释至2.5mL，6号试管中加入10%葡萄糖注射液2.5mL、7号试管中加入蒸馏水2.5mL（完全溶血对照）。最后每管均加入2%兔红细胞悬液2.5mL，轻轻摇匀，置37℃水浴中，分别记录15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、3小时、4小时各管的溶血和凝集情况。

试验结果：本发明制备的提高稳定性的PGA₁脂质乳剂制剂1～5管在4小时内均未引起溶血和凝集反应。

Claims (9)

1. 一种含有PGA1的脂质乳剂，其特征在于该制剂处方中按重量份数计，含有PGA1 0.01～0.05份，注射用油80～150份，磷脂酰肌醇或二硬脂酰磷脂酰甘油钠5～10份，脂质剂15～50份、注射用甘油20~40份、稳定剂1~5份，余量为注射用水；

其中，所述稳定剂包含组分A和组分B，组分A选自油酸、油酸钠和胆固醇中的一种或多种；以及组分B选自维生素E、辅酶Q10、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯和维生素C中的一种或多种；其中组分A和组分B按重量份计的重量比为1∶3～3∶1。

2.根据权利要求1所述的脂质乳剂制剂，其特征在于，所述脂质乳剂制剂的注射用油，包含一种或多种选自大豆油、花生油、氢化玉米油、茶油、芝麻油、红花油、棉籽油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、植物油聚乙二醇甘油酯、中链甘油三酯和长链甘油三酯的注射用油。

3.根据权利要求1所述的脂质乳剂制剂，其特征在于，所述脂质乳剂制剂中的脂质剂，包含一种或多种选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油油酸聚乙二醇甘油酯的乳化剂。

4.根据权利要求3中所述的脂质乳剂制剂，其特征在于，所述大豆卵磷脂为精制大豆卵磷脂。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的脂质乳剂制剂，其特征在于，所述脂质乳剂制剂为注射剂。

6.根据权利要求5所述的脂质乳剂制剂，其特征在于，所述脂质乳剂制剂为静脉注射剂。

7.根据权利要求5所述的脂质乳剂制剂，其特征在于，所述脂质乳剂制剂中的脂质乳剂粒径范围为0.1～0.2微米。

8.根据权利要求5所述的脂质乳剂制剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：

a. 预热处方量的注射用油，加入处方量的脂质剂、稳定剂、二硬脂酸磷脂酰甘油钠或磷脂酰肌醇，搅拌形成均一的油相；

b. 缓慢加入PGA1，高速搅拌使其溶解在油相中；

b. 将注射用甘油用预热的注射用水稀释形成均一的水相；

c. 在高速搅拌条件下，将油相缓慢滴入水相中，形成乳液；

d. 在高压条件下，将乳液匀化8至10次，使其平均粒径低于0.2微米；

e．将d中制得的脂质乳剂在120℃下高温灭菌3至5秒，充填、熔封后制得产品。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述高速搅拌的转速为8000~10000转/分钟；所述高压为10000～15000 Psi。