CN102977378B

CN102977378B - 一种两亲性肝素基嵌段聚合物及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN102977378B
Application number: CN201210567974.9A
Authority: CN
Inventors: 杨惠康; 张黎明
Original assignee: National Sun Yat Sen University
Current assignee: Sun Yat Sen University; National Sun Yat Sen University
Priority date: 2012-12-24
Filing date: 2012-12-24
Publication date: 2015-05-27
Anticipated expiration: 2032-12-24
Also published as: CN102977378A

Abstract

本发明公开了一种两亲性肝素基嵌段聚合物及其制备方法与应用。本发明以肝素作为原料，通过点击化学反应途径将端叠氮基肝素与α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）按物质的量的比为1.25：1制备两亲性嵌段聚合物。肝素是一种具有优良生物相容性、可生物降解性且具有重要生物活性的水溶性天然多糖，以肝素为原料制备得到的两亲性嵌段聚合物及其自组装纳米胶束具有抗凝血、抗肿瘤等生物活性，可作为药物载体在医药领域中进行应用。本发明的制备条件温和，高效实用；制备得到的两亲性嵌段聚合物，具有在水溶液中形成纳米胶束的能力，可用作性能优良、功能独特的新型药物控释载体。

Description

一种两亲性肝素基嵌段聚合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于功能高分子材料领域，特别涉及一种两亲性肝素基嵌段聚合物及其制备方法与应用。

背景技术

两亲性嵌段聚合物能够通过自组装方式形成胶束、囊泡等聚集体，在生物医学、化学催化等领域有广阔的应用前景，近年来成为功能高分子材料领域的研究热点。天然多糖来源丰富、可再生，且具有优良的生物相容性、可生物降解性和易化学修饰等特性，将其作为亲水性链段用于医用两亲性嵌段聚合物的设计制备，目前已引起国内外研究者的极大兴趣和广泛关注。

肝素是一种具有重要生物活性的水溶性天然多糖，它不仅具有突出的抗凝血作用，还可与一些生长因子产生较强的特异性作用。研究发现，肝素可通过抑制肿瘤血管形成和细胞扩散而具有良好的抗癌功效。若能以肝素为亲水性链段设计制备出两亲性嵌段聚合物，则可望使其自组装胶束或囊泡具有独特的生物活性，进而在抗癌药物传递以及抗癌药物与生长因子共传递等方面获得重要应用。但迄今为止，国内外尚未见有关两亲性肝素基嵌段聚合物的研究报道。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种两亲性肝素基嵌段聚合物。该两亲性肝素基嵌段聚合物为两亲性肝素/聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）嵌段聚合物（Hep-b-PZLL），具有在水溶液中自组装形成纳米胶束的能力，含有的肝素基使得该类嵌段聚合物及其自组装纳米胶束具有独特的生物活性。

本发明的另一目的在于提供所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种两亲性肝素基嵌段聚合物，其分子结构式如下：

其中：X为H或SO₃ ^-，优选为H；Y为H、SO₃ ^-或COCH₃，优选为SO₃ ^-；m优选为20～25；n优选为37～111；

所述的两亲性肝素基嵌段聚合物包括聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）链段和肝素链段；

所述的聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）链段的数均分子量优选为8461～29097g/mol；

所述的肝素链段的数均分子量优选为17100～19400g/mol；

所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）的制备：

氩气保护下将N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与三聚光气按质量比2.80～10.40：1.20～3.60加入四氢呋喃中，50～60℃反应0.5～1h后于30～35℃除去四氢呋喃，得到油状物；往得到的油状物中加入乙酸乙酯，摇匀，得到乙酸乙酯混合液；用冷的5wt%碳酸氢钠水溶液洗涤乙酸乙酯混合液，分层，取有机层用无水硫酸镁干燥过夜后过滤，30～35℃蒸干滤液，得到N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸环内酸酐（Lys(Z)-NCA）；将物质的量的比为1：50～100的炔丙胺、N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸环内酸酐加入无水N，N-二甲基甲酰胺中，每毫升无水N，N-二甲基甲酰胺含有0.00037～0.0011克炔丙胺，氩气保护下室温反应3天，得到反应液；在搅拌下将反应液按体积比1：20～30加入甲醇中，过滤后取沉淀，用甲醇洗涤干净后干燥，得到α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）（α-alkyne PZLL）；

（2）端叠氮基肝素钠制备：

于55～65℃将肝素钠和叠氮丙胺溶解于pH为5.6的醋酸盐缓冲溶液中，加入催化剂氰基硼氢化钠，搅拌反应7～8天后透析纯化；取透析液，调节透析液的pH值至1，真空冷冻干燥，得到端叠氮基肝素（α-azido heparin）；每毫升醋酸盐缓冲溶液中含有0.10～0.30g肝素钠，叠氮丙胺与肝素钠的物质的量的比为50～100：1，每毫升醋酸盐缓冲溶液中含有氰基硼氢化钠0.40～0.80mg；

（3）两亲性肝素基嵌段聚合物的制备：

将步骤（1）制备的α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）与步骤（2）制备的端叠氮基肝素溶解于二甲基亚砜中，并通入氩气，待反应物完全溶解时加入11.5～5.7mg五水硫酸铜，继续通气5min后再加入9.2～4.6mg抗坏血酸钠，50～60℃油浴反应2～3天后透析纯化，取透析液，真空冷冻干燥，得到两亲性肝素基嵌段聚合物（即肝素/聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）嵌段聚合物，Hep-b-PZLL）；每毫升二甲亚砜中含有0.0339～0.0685g α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸），每毫升二甲亚砜中含有0.080～0.040g端叠氮基肝素，端叠氮基肝素与α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）的物质的量的比为1.25：1；

步骤（1）中：

所述的N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与四氢呋喃的质量体积比优选为0.028～0.208g/mL；

所述的质量体积比是指N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸的质量与四氢呋喃的体积的比；

所述的乙酸乙酯的体积优选为四氢呋喃的体积的1～3倍；

所述的5wt%碳酸氢钠水溶液与乙酸乙酯的体积比优选为8～12：10～15；

所述的洗涤的次数优选为2次；

所述的无水硫酸镁与N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸的质量比优选为2.80～10.40：10.00～15.00；

所述的干燥优选于30～40℃真空干燥；

所述的端炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）的数均分子量优选为8461～29097g/mol；

步骤（2）中：

所述的反应7～8天，每天补加0.10～0.20mg氰基硼氢化钠；

所述的透析采用分子量截留3500Da的透析袋进行透析；

所述的pH值的调节优选采用浓度为5～10mol/L的盐酸进行调节；

所述的端叠氮基肝素的数均分子量优选为17100～19400g/mol；

步骤（3）中：

所述的透析纯化优选采用以下方法进行：先用pH值3.5的透析液进行透析，再用分子量截留50kDa的透析袋进行纯化以除去多余的肝素；

所述的两亲性肝素基嵌段聚合物可作为药物载体在医药领域中进行应用；

所述的两亲性肝素基嵌段聚合物优选以聚合物纳米胶束的形式进行应用；

所述的聚合物纳米胶束优选采用以下方法进行制备：将5～10mg两亲性肝素基嵌段聚合物溶解于1～2mL二甲亚砜中，得到均一溶液；然后将溶液装入透析袋中，在去离子水中进行透析，随着二甲基亚砜不断地被水代替，溶液的极性发生变化，亲水的肝素链段溶解在水中形成亲水层，而疏水的聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）链段不能溶解在水中，倾向于相互聚集形成疏水核层，得到两亲性肝素基嵌段聚合物纳米胶束，动态光散射测定结果表明胶束为球形、大小比较均一、稳定性好。

本发明的反应机理为：

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

（1）本发明以肝素作为原料、通过点击化学反应途径制备两亲性嵌段聚合物。肝素是一种具有优良生物相容性、可生物降解性且具有重要生物活性的水溶性天然多糖，以肝素为原料制备得到的两亲性嵌段聚合物及其自组装纳米胶束具有抗凝血、抗肿瘤等生物活性，可作为药物载体在医药领域中进行应用。

（2）本发明采用点击化学方法合成两亲性嵌段聚合物，制备条件温和，高效实用。制备得到的两亲性嵌段聚合物，具有在水溶液中形成纳米胶束的能力，可用作性能优良、功能独特的新型药物控释载体。

附图说明

图1是实施例1的端炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）的¹HNMR谱图。

图2是实施例1的两亲性肝素基嵌段聚合物的¹HNMR谱图。

图3是实施例4的两亲性肝素基嵌段聚合物胶束在水溶液中的粒径分布图。

图4是实施例4的两亲性肝素基嵌段聚合物胶束在水溶液中的形貌图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

（1）氩气保护下将10.40g N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与三聚光气3.60g加入含有100mL四氢呋喃的三口圆底烧瓶中，50℃反应1h；然后30℃减压蒸馏除去四氢呋喃，得到油状物；往得到的油状物中加入150mL乙酸乙酯，摇匀，得到乙酸乙酯混合液；用120mL冷的5%碳酸氢钠溶液洗涤乙酸乙酯混合液2次，转入梨形分液漏斗中分离出有机相，用15g无水硫酸镁干燥过夜后过滤，于30℃蒸干滤液，得到的白色针状物为N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸环内酸酐（Lys(Z)-NCA）；按物质的量比1：50将0.011g炔丙胺、2.900g Lys(Z)-NCA置于含10mL无水N，N-二甲基甲酰胺的反应瓶中，通入氩气，室温反应3天，得到反应液；在搅拌下将反应液用200mL甲醇（体积为N，N-二甲基甲酰胺的体积的20倍）沉淀、过滤得到白色固体，沉淀物再用50mL甲醇洗涤2次，30℃真空干燥，得到α-炔基聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）（α-alkyne PZLL），产率为90%；经凝胶渗透色谱分析，得到的α-alkyne PZLL数均分子量为8461；

α-alkyne PZLL的核磁共振数据：¹H NMR(CDCl₃/CF₃CO₂D(v/v=85:15),δ,ppm):1.24(m,2H,-CHCH₂CH₂-),1.39(m,2H,-CHCH₂CH₂-),1.7(t,2H,-CHCH₂CH₂-),3.09(2H,-NHCH₂CH₂),3.95(2H,-CCH₂NH-)4.41(s,1H,-NHCH),5.08(s,2H,-OCH₂Ph),7.30(s,5H-Ph),8.27(s,1H,-CONH-)；

（2）往30mL、pH为5.6的醋酸盐缓冲溶液中依次加入3.0g肝素钠（M_n＝19400g/mol，M_w/M_n=1.45）、1.7g叠氮丙胺以及1.3g氰基硼氢化钠，55℃连续搅拌一个星期，其间每天添加20mg氰基硼氢化钠；反应结束后采用分子量截留3500Da的透析袋进行提纯，用浓度为10mol/L的盐酸将透析液的pH调节至1，所得透析液真空冷冻干燥，得到端叠氮基肝素（α-azido heparin）；

α-azido heparin的红外光谱数据：FT-IR(KBr,cm^-1):3200-3600(νN-H and νO-H),2883(νC-H),2110(νN₃),1650(νC=O),1110(νC-O)；

（3）将0.339g步骤（1）制得的α-alkyne PZLL与0.8g步骤（2）制得的α-azidoheparin溶解在10mL的二甲基亚砜中，并通入氩气除氧气，20min后，待反应物溶解完全时，加入11.5mg五水硫酸铜后继续通气5min，再加入9.2mg抗坏血酸钠，于60℃的油浴中搅拌反应2天；反应结束后用pH值为3.5的透析液进行透析，多余的肝素用分子量截留50kDa的透析袋进行纯化，真空冷冻干燥，得到白色的肝素/聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）嵌段聚合物（Hep-b-PZLL），即两亲性肝素基嵌段聚合物，产率为80.0%；

两亲性肝素基嵌段聚合物的核磁共振数据：¹H NMR(DMSO-6d)δ,ppm):5.28[氨基葡萄糖的H₁(A)],5.09[艾杜糖醛酸的H₁(I)],4.82[I-5],4.406-4.28[A-6],4.14-4.25[I-3],4.01[I-4],3.94[A-5],3.73[I-2],3.91[A-4],3.70-3.56[A-3],3.24[A-2],1.90[CH₃CON-],1.24[-CHCH₂CH₂-],1.39[-CHCH₂CH₂-],1.7[-CHCH₂CH₂-],3.09[-NHCH₂CH₂],3.95[-CCH₂NH-],4.41[-NHCH),5.08[-OCH₂Ph],7.30[-Ph],8.27[-CONH-]；

该聚合物的结构：

其中，聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）链段的数均分子量为8461g/mol，肝素链段的数均分子量为19400g/mol；X为H，Y为SO₃ ^-，m为20，n为37。

实施例2

（1）氩气保护下将5.60g N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与三聚光气2.40g加入含有50mL四氢呋喃的三口圆底烧瓶中，50℃反应1h；然后35℃减压蒸馏除去四氢呋喃，得到油状物；往得到的油状物中加入100mL乙酸乙酯，摇匀，得到乙酸乙酯混合液；用85mL冷的5%碳酸氢钠溶液洗涤乙酸乙酯混合液2次，转入梨形分液漏斗分离出有机相，用10g无水硫酸镁干燥过夜后过滤，35℃蒸干滤液，得到的白色针状产物Lys(Z)-NCA；按物质的量比1：80将0.0069g炔丙胺、2.9g Lys(Z)-NCA置于含12mL无水N，N-二甲基甲酰胺的反应瓶中，通入氩气，室温反应3天，得到反应液；在搅拌下将反应液用240mL甲醇（体积为N，N-二甲基甲酰胺的体积的20倍）沉淀、过滤得到白色固体，沉淀物再用30mL甲醇洗涤2次，35℃真空干燥，得到α-alkyne PZLL产物，产率：92%；经凝胶渗透色谱分析，α-alkyne PZLL数均分子量为17123g/mol；

步骤（2）：同实施例1步骤（2）；

（3）将0.685g步骤（1）制得的α-alkyne PZLL与0.8g步骤（2）制得的α-azido heparin溶解在10mL二甲基亚砜中，并通入氩气除氧气，20min后，待反应物溶解完全时，加入11.5mg五水硫酸铜，继续通气5min后再加入9.2mg抗坏血酸钠，于60℃的油浴中搅拌反应2天，反应结束后用pH值为3.5的透析液进行透析，多余的肝素用分子量截留50kDa的透析袋进行纯化，真空冷冻干燥，得到白色的肝素/聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）嵌段聚合物（Hep-b-PZLL），即两亲性肝素基嵌段聚合物，产率为77.1%；

该聚合物的结构如下：其中，聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）链段的数均分子量为17123g/mol，肝素链段的数均分子量为19400g/mol；X为H，Y为SO₃ ^-，m为22，n为68。

实施例3

（1）氩气保护下将2.80g N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与三聚光气1.20g加入含有100mL四氢呋喃的三口圆底烧瓶中，60℃反应0.5h，然后33℃减压蒸馏除去四氢呋喃，得到油状物；往得到的油状物中加入125mL乙酸乙酯，摇匀，得到乙酸乙酯混合液；用100mL冷的5%碳酸氢钠溶液洗涤乙酸乙酯混合液2次，转入梨形分液漏斗分离出有机相，用12.5g无水硫酸镁干燥过夜后过滤，30℃蒸干滤液，得到白色针状的产物Lys(Z)-NCA；按物质的量比1：100将0.0055g炔丙胺、2.90g Lys(Z)-NCA置于含15mL无水N，N-二甲基甲酰胺的反应瓶中，通入氩气，室温反应3天，得到反应液；在搅拌下将反应液用300mL甲醇（体积为N，N-二甲基甲酰胺的体积的20倍）沉淀、过滤得到白色固体，沉淀物再用30mL甲醇洗涤2次，40℃真空干燥，得到α-alkyne PZLL产物，产率：92%；经凝胶渗透色谱分析，得到的α-alkyne PZLL数均分子量为29097g/mol；

（2）在20mL、pH为5.6的醋酸盐缓冲溶液中溶解2.0g肝素钠（M_n=17100g/mol，M_w/M_n＝1.4），添加1.2g叠氮丙胺，再加入1.0g氰基硼氢化钠，60℃连续搅拌一个星期，其间每天添加20mg氰基硼氢化钠；反应结束后采用分子量截留3500Da的透析袋进行提纯，用浓度为5mol/L的盐酸将透析液的pH调节至1，所得透析液真空冷冻干燥，得到端叠氮基肝素（α-azido heparin）；

（3）将0.685g步骤（1）制得的α-alkyne PZLL与0.4g步骤（2）制得的α-azidoheparin溶解在10mL的二甲基亚砜中，并通入氩气除氧气，20min后，待反应物溶解完全时，加入5.7mg五水硫酸铜后继续通气5min，再加入4.6mg抗坏血酸钠，于50℃油浴中搅拌反应3天；反应结束后用pH值为3.5的透析液进行透析，多余的肝素用分子量截留50kDa的透析袋进行纯化，真空冷冻干燥，得到白色的肝素/聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）嵌段聚合物（Hep-b-PZLL），即两亲性肝素基嵌段聚合物，产率为75.4%；

两亲性肝素基嵌段聚合物的核磁共振数据：¹H NMR(DMSO-6d)δ,ppm):5.28[氨基葡萄糖的H₁(A)],5.09[艾杜糖醛酸的H₁(I)],4.82[I-5],4.406-4.28[A-6],4.14-4.25[I-3],4.01[I-4],3.94[A-5],3.73[I-2],3.91[A-4],3.70-3.56[A-3],3.24[A-2],1.90[CH₃CON-],1.24[-CHCH₂CH₂-],1.39[-CHCH₂CH₂-],1.7[-CHCH₂CH₂-],3.09[-NHCH₂CH₂],3.95[-CCH₂NH-],4.41[-NHCH),5.08[-OCH₂Ph],7.30[–Ph],8.27[-CONH-]；

该聚合物的结构：

其中，聚（N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）链段的数均分子量为29097g/mol，肝素链段的数均分子量为17100g/mol；X为H，Y优选为SO₃ ^-，m为25，n为111。

实施例4

将10mg实施例1中制备的Hep-b-PZLL溶解在2ml二甲亚砜中，充分溶解后装入分子量截留3500Da的透析袋，用去离子水进行透析，制得胶束溶液；多角度动态光散射测定结果表明，胶束大小与散射角无关，说明胶束为球形；90°下测定得到胶束的有效粒径为220nm、多分散系数在0.2以下，大小比较均一；动态光散射跟踪测定结果表明胶束大小及分布在7天内保持基本不变，说明其稳定性好。

实施例5

将10mg实施例2中制备的Hep-b-PZLL溶解在2ml二甲亚砜中，充分溶解后装入分子量截留3500Da的透析袋，用去离子水进行透析，制得胶束溶液；多角度动态光散射测定结果表明，胶束大小与散射角无关，说明胶束为球形；90°下测定得到胶束的有效粒径为250nm、多分散系数在0.2以下，大小比较均一；动态光散射跟踪测定结果表明胶束大小及分布在7天内保持基本不变，说明其稳定性好。

实施例6

将5mg实施例3中制备的Hep-b-PZLL溶解在1ml二甲亚砜中，充分溶解后装入分子量截留3500Da的透析袋，用去离子水进行透析，制得胶束溶液；多角度动态光散射测定结果表明，胶束大小与散射角无关，说明胶束为球形；90°下测定得到胶束的有效粒径为265nm、多分散系数在0.2以下，大小比较均一；动态光散射跟踪测定结果表明胶束大小及分布在7天内保持基本不变，说明其稳定性好。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种两亲性肝素基嵌段聚合物，其特征在于其分子结构式如下：

其中：X为H或SO₃ ^-；Y为H、SO₃ ^-或COCH₃；m为20～25；n为37～111。

2.权利要求1所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)α-炔基聚(N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸)的制备：氩气保护下将N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与三聚光气按质量比2.80～10.40：1.20～3.60加入四氢呋喃中，50～60℃反应0.5～1h后于30～35℃除去四氢呋喃，得到油状物；往得到的油状物中加入乙酸乙酯，摇匀，得到乙酸乙酯混合液；用冷的5wt％碳酸氢钠水溶液洗涤乙酸乙酯混合液，分层，取有机层用无水硫酸镁干燥过夜后过滤，30～35℃蒸干滤液，得到N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸环内酸酐；将物质的量的比为1：50～100的炔丙胺、N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸环内酸酐加入无水N,N-二甲基甲酰胺中，每毫升无水N,N-二甲基甲酰胺含有0.00037～0.0011克炔丙胺，氩气保护下室温反应3天，得到反应液；在搅拌下将反应液按体积比1：20～30加入甲醇中，过滤后取沉淀，用甲醇洗涤干净后干燥，得到α-炔基聚(N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸)；

(2)端叠氮基肝素钠制备：于55～65℃将肝素钠和叠氮丙胺溶解于pH为5.6的醋酸盐缓冲溶液中，加入催化剂氰基硼氢化钠，搅拌反应7～8天后透析纯化；取透析液，调节透析液的pH值至1，真空冷冻干燥，得到端叠氮基肝素；每毫升醋酸盐缓冲溶液中含有0.10～0.30g肝素钠，叠氮丙胺与肝素钠的物质的量的比为50～100：1，每毫升醋酸盐缓冲溶液中含有氰基硼氢化钠0.40～0.80mg；

(3)两亲性肝素基嵌段聚合物的制备：将步骤(1)制备的α-炔基聚(N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸)与步骤(2)制备的端叠氮基肝素溶解于二甲基亚砜中，并通入氩气，待反应物完全溶解时加入11.5～5.7mg五水硫酸铜，继续通气5min后再加入9.2～4.6mg抗坏血酸钠，50～60℃油浴反应2～3天后透析纯化，取透析液，真空冷冻干燥，得到两亲性肝素基嵌段聚合物；每毫升二甲亚砜中含有0.0339～0.0685gα-炔基聚(N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸)，每毫升二甲亚砜中含有0.080～0.040g端叠氮基肝素，端叠氮基肝素与α-炔基聚(N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸)的物质的量的比为1.25：1。

3.根据权利要求2所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸与四氢呋喃的质量体积比为0.028～0.208g/mL。

4.根据权利要求2所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的无水硫酸镁与N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸的质量比为2.80～10.40：10.00～15.00。

5.根据权利要求2所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的乙酸乙酯的体积为四氢呋喃的体积的1～3倍，所述的5wt％碳酸氢钠水溶液与乙酸乙酯的体积比为8～12：10～15。

6.根据权利要求2所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的干燥为于30～40℃真空干燥；所述的端炔基聚(N^ε-苄氧羰基-L-赖氨酸)的数均分子量为8461～29097g/mol。

7.根据权利要求2所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的搅拌反应7～8天中，每天补加0.10～0.20mg氰基硼氢化钠，所述的端叠氮基肝素的数均分子量为17100～19400g/mol。

8.根据权利要求2所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的透析纯化采用以下方法进行：先用pH值3.5的透析液进行透析，再用分子量截留50kDa的透析袋进行纯化。

9.权利要求1所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的应用，其特征在于：所述的两亲性肝素基嵌段聚合物作为药物载体在医药领域中进行应用。

10.根据权利要求9所述的两亲性肝素基嵌段聚合物的应用，其特征在于：所述的两亲性肝素基嵌段聚合物以聚合物纳米胶束的形式进行应用。