CN102977293B - 一种具有超声和pH双重响应的聚合物囊泡及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于高分子材料和医学工程领域，具体涉及一种具有超声和pH双重响应性的聚合物囊泡及其制备方法。两亲性嵌段-无规聚合物通过溶剂交换法自组装形成囊泡，该聚合物囊泡具有超声和pH双重响应性，可用作药物载体，在超声作用下，囊泡结构发生改变，使包载的药物迅速释放，而体内不同部位pH值的变化可触发pH响应链段作出响应，达到辅助的效果，该聚合物囊泡在载药技术方面有着很大的应用前景。

Description

一种具有超声和pH双重响应的聚合物囊泡及其制备方法

技术领域

本发明属于高分子材料和医学工程领域，涉及一种聚合物囊泡及其制备方法。

背景技术

近年来，随着聚合物合成方法（自由自聚合、阳离子聚合、阴离子聚合、基团转移自由基聚合、原子转移自由基聚合（ATRP）、可逆-加成断裂链转移聚合（RAFT）等和自组装技术的发展，越来越多的智能聚合物囊泡成为了研究热点。

嵌段共聚物由于链段间性能的差异使其各个链段在溶剂中的溶解能力不同，从而使聚合物分子链自组装形成各种形态的组装体，目前发现的聚合物自组装体的形态主要有：球形胶束、棒状胶束、圆盘状胶束、球形囊泡、碗状囊泡、多层囊泡、大复合囊泡、片状、管状、纤维状、树枝状等。其中球形胶束和囊泡最为常见。而聚合物囊泡因其存在空腔结构，在自组装过程中空腔可以包载亲水性药物，而其疏水薄膜则可以承载疏水性药物，且聚合物囊泡水溶液也十分稳定，因此特别适合用作药物载体。

智能聚合物囊泡是指在外界刺激的作用下，聚合物链上的某些特殊链段作出响应性的反应，使自组装形成的聚合物囊泡的形态或尺寸发生变化。外界刺激作用可分为物理作用和化学作用，目前报导的物理刺激作用有：温度、电场、磁场、光（紫外、红外、近红外等）等，而化学刺激则包括pH、氧化还原环境的变化等。然而，这些刺激在药物缓释中或多或少的存在着局限性，例如，目前几乎没有适合的聚合物囊泡可用作温度响应的药物载体；电磁场的作用大多仅限于成像照影；紫外光等对人体有很大的危害；而化学刺激需要额外的化学试剂辅助。超声作用的出现很好的避开了上述外界作用存在的一些缺点，其优点是无创伤性、深穿透能力及能通过调节仪器自身参数实现超声波的可控制性。目前报导的超声触发缓释的载体有脂质体、微乳液、聚电解质微容器、多层胶囊和聚合物胶束等。

中国专利（CN101856537A，公开日2010年10月13日）公开了一种超声介导的黏膜给药系统，通过制剂技术将大量具有声学响应性能的含气囊泡分散于已有的液体型黏膜给药制剂中，超声介导下促使制剂中的药物更快地透过黏膜进入到深层组织和血液循环中，发挥治疗作用。中国专利（CN101618013A，公开日2010年1月6日）公开了一种聚焦超声-聚合物胶束可控药物释放装置及其释放方法，通过透析法或溶剂蒸发法制备聚合物胶束，超声作用下，聚合物胶束作出响应，使疏水药物释放。超声在可控药物释放中的应用已备受关注，而相对稳定且能包载亲疏水性药物的具有超声响应性聚合物囊泡还未报导。

鉴于超声的无创伤性、深穿透能力及其可控制性等种种优点，且药物超声在临床中的应用日趋成熟，本发明提出并制备了一种结合pH和超声双重响应性的嵌段-无规共聚物。该聚合物通过自组装形成囊泡结构，实验证明其确实具有pH和超声双重响应性。该聚合物囊泡可用作药物载体，在超声作用下，囊泡结构发生改变，使包载的药物迅速释放，而体内不同部位pH值的变化可触发pH响应链段作出响应，达到辅助的效果，该聚合物囊泡在载药技术方面有着很大的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于为克服现有技术中的缺陷而提供一种具有超声和pH双重响应的聚合物囊泡及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

本发明采用原子转移自由基聚合（ATRP）的方法制备得到的两亲性嵌段-无规共聚物为聚乙二醇-嵌段-聚（甲基丙烯酸二乙胺基乙酯-无规-甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯）[PEO₄₃-b-P（DEA_x-stat-TMA_y）]其中x=15～60;y=15～60。该聚合物在有机溶剂中溶解，而后再逐滴加入2倍的去离子水自主装得到结构规整的空心球结构，其内外表面都附着有舒展的聚乙二醇（PEO）亲水链段，而支撑形成空心球的膜则由聚（甲基丙烯酸二乙胺基乙酯-无规-甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯）P(DEA_x-stat-TMA_y)疏水链段组成，这样的一个稳定的空心球结构，我们称之为囊泡。而在该囊泡膜上的聚甲基丙烯酸二乙胺基乙酯（PDEA）和聚甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯（PTMA）链段分别提供pH和超声响应性。

一种聚合物囊泡，为空心球结构，该空心球结构的内外表面均附着有舒展的聚乙二醇（PEO）亲水链段，而支撑形成空心球的膜则由聚（甲基丙烯酸二乙胺基乙酯-无规-甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯）分子式P(DEA_x-stat-TMA_y)的疏水链段组成，其中x=15～60，y=15～60。

所述的囊泡的粒径为140~500nm。

一种上述具有超声和pH双重响应性聚合物囊泡的制备方法，具体步骤如下：

（1）大分子引发剂PEO₄₃-Br的合成

聚聚乙二醇（PEO）和甲苯加入到烧瓶中，共沸除水；

冷却至室温后，将2-溴异丁酰溴和三乙胺加入到烧瓶中，进行反应；然后过滤、萃取、洗涤、溶解、沉淀，最后真空干燥得到大分子引发剂PEO₄₃-Br；

（2）单体甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙脂（TMA）的合成

将甲基丙烯酸羟乙酯（HEMA）、2,3-二氢呋喃和催化剂加入到反应器中，进行反应，反应完毕后，经过滤、旋蒸、过柱子处理后得到透明液体，置于冰箱中保存；

（3）原子转移自由基聚合法（ATRP）合成PEO₄₃-b-P（DEA_x-stat-TMA_y）聚合物

将步骤（1）制得的大分子引发剂PEO-Br、配体联吡啶（bpy）、催化剂溴化亚铜（CuBr）、步骤（2）中制得的单体甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙脂（TMA）与甲基丙烯酸二乙胺基乙酯（DEA）加入到反应器中，随后加入有机溶剂，在氩气或氮气的保护下进行反应，合成聚合物PEO-b-P（DEA-stat-TMA）；聚合物过柱子、旋蒸、泵抽及真空干燥处理进行纯化；

（4）自组装形成聚合物囊泡

以5~10mg/mL的浓度将聚合物溶解在PEO₄₃-b-P（DEA_x-stat-TMA_y）四氢呋喃中，在搅拌条件下，向溶液中滴加去离子水，随后透析去除有机溶剂，得到聚合物囊泡溶液。

随后，可将制得聚合物囊泡进行超声和pH性能测试

将聚合物囊泡溶液稀释至一定浓度，以动态光散射（DLS）为表征手段，分别测试超声作用时间和pH变化对囊泡粒径影响。

所述的步骤（1）中，PEO的甲苯溶液的质量分数为2～4%，共沸除水的温度为140°C。

所述的步骤（1）中PEO的分子量为1900。

所述的步骤（1）中2-溴异丁酰溴与聚环氧乙烷的摩尔比为（1～3）：1。

所述的步骤（1）中三乙胺与2-溴异丁酰溴的摩尔比为1：（1～2）。

所述的步骤（1）中加入三乙胺后，反应时间为12～40h，反应温度为0～30°C。

所述的步骤（2）中，甲基丙烯酸羟乙酯（HEMA）、2,3-二氢呋喃和催化剂的摩尔比1：（1.5～2）：（0.01～0.03）。

所述的步骤（2）中，催化剂为聚4-乙烯吡啶盐酸盐（P4VP·HCl），其中P4VP·HCl是用自由基聚合得到的P4VP经盐酸酸化而得到的淡黄色固体。

所述的步骤（2）中反应温度为20～45°C，反应时间为8～24小时。

所述的步骤（3）中嵌段共聚物PEO-b-P（DEA-stat-TMA）的相对分子量为8000～30000。

所述的步骤（3）中大分子引发剂PEO-Br、配体联吡啶（bpy）、催化剂溴化亚铜（CuBr）、单体甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙脂（TMA）与甲基丙烯酸二乙胺基乙酯（DEA）的摩尔比为1：1：（1～2）：（15~60）：（15~60）。

所述的步骤（3）中的反应时间为8～36h，反应温度为30～50°C。

所述的步骤（3）中的有机溶剂为甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇或苯甲醚中的一种或一种以上。

所述的步骤（4）中以3～10秒每滴的速度向溶液中滴加去离子水。

相对于现有技术中的方案，本发明的优点是：

（1）采用原子转移自由基聚合（ATRP）制备得到的聚合物分子量分布较窄且结构可控。

（2）聚合物通过溶剂置换法自组装形成囊泡，操作简单方便，且得到的聚合物囊泡水溶液十分稳定。

（3）得到的聚合物囊泡具有超声和pH双重响应性，且囊泡结构的变化程度随超声时间而变化。

（4）超声具有无创伤性、深穿透能力和可控制性等优点。

（5）pH响应性很好的辅助了超声作用，在pH值低的部位可以达到药物突释和缓释的作用。

附图说明

图1为本发明实施例1超声单体TMA的氢核磁图谱。

图2为本发明实施例1中嵌段-无规聚合物PEO₄₃-b-P（DEA₃₇-stat-TMA₅₂）的氢核磁图谱。

图3为本发明实施例1中嵌段-无规聚合物PEO₄₃-b-P（DEA₃₇-stat-TMA₅₂）囊泡的粒径分布图。

具体实施方式

实施例1

（1）大分子引发剂PEO₄₃-Br的合成

10g PEO（分子量：1900）和250mL甲苯加入到500mL圆底烧瓶中，于140°C的温度下，共沸除水；

冷却至室温后，将烧瓶置于冰盐浴中，加入2mL三乙胺，用恒压滴液漏斗以3秒每滴的速度滴加20mL溶有2mL 2-溴异丁酰溴的甲苯溶液，滴加结束后，反应在密封搅拌下进行30小时（其中，2-溴异丁酰溴与聚环氧乙烷的摩尔比为2：1，三乙胺与2-溴异丁酰溴的摩尔比1：1）。过滤、萃取、洗涤、干燥、溶解、沉淀最后真空干燥得到白色粉末状大分子引发剂PEO₄₃-Br（分子量：2025）；

（2）甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙脂（TMA）单体的合成

7.27g甲基丙烯酸羟乙酯（HEMA）、5.92g 2,3-二氢呋喃（DHF）和0.26g P4VP·HCl加入到50mL圆底烧瓶中（摩尔比：HEMA：DHF：P4VP·HCl=1：1.53：0.03），室温搅拌下，反应24小时。过滤、旋蒸、过柱子得到无色透明液体，核磁谱图（图1）氢的积分面积和归属明确，表明反应产物为甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯；

（3）ATRP合成PEO₄₃-b-P（DEA₃₇-stat-TMA₅₂）聚合物

0.12g大分子引发剂PEO₄₃-Br、8.6mg催化剂CuBr、18.5mg配体联吡啶0.5g甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯（TMA）单体、0.54g甲基丙烯酸二乙胺基乙酯（DEA）单体和4mL甲醇加入到25mL圆底烧瓶中（摩尔比：PEO₄₃-Br：CuBr：bpy：TMA：DEA=1：1：2：45：45）。在无水无氧及氮气的保护、温度为50°C、磁搅拌的条件下反应进行36小时。获得的聚合物旋蒸、过硅胶柱子、反复溶解旋蒸、泵抽，最后放真空烘箱24h，得到的聚合物在25°C室温下为淡黄色较粘的固体，核磁结果（图2）表明该聚合物为嵌段-无规聚合物PEO₄₃-b-P（DEA₃₇-stat-TMA₅₂）（分子量：19300）；

（4）自组装形成聚合物囊泡

20mg聚合物与2mL四氢呋喃（THF）加入到20mL小瓶子中，搅拌充分溶解，配成初始浓度为10mg/mL的溶液。在搅拌下，以3秒每滴的速率滴加4mL的去离子水，随后透析去除有机溶剂，最终得到浅蓝色的聚合物囊泡溶液。DLS（动态光散射）（图3）及TEM测试结果显示囊泡的粒径在500nm左右。

聚合物囊泡超声和pH性能测试

将聚合物囊泡溶液稀释至0.15mg/mL，分别取10mL加入到两个20mL的小瓶子中。将其中一个小瓶子置于超声清洗器的正中间位置，间断超声150分钟，每隔10分钟取样用DLS表征，观察其粒径及粒径分布的变化趋势。

另外一个样品则通过改变其pH值，pH值变化范围为12~2，每将一个单位取样用DLS表征，观察其粒径及粒径分布的变化趋势。DLS结果表明随着超声时间的增加，聚合物囊泡的粒径减小，粒径分布基本稳定；当pH由12降到6.5时，聚合物囊泡的粒径基本不变，粒径分布较稳定，但当pH值低于6时，随着pH值降低，聚合物囊泡的粒径减小，粒径分布变宽。

实施例2

（1）大分子引发剂PEO₄₃-Br的合成

10g PEO（分子量：1900）和250mL甲苯加入到500mL圆底烧瓶中，于140°C的温度下，共沸除水。冷却至室温后，将烧瓶置于冰盐浴中，加入2mL三乙胺，用恒压滴液漏斗以3秒每滴的速度滴加20mL溶有2mL 2-溴异丁酰溴的甲苯溶液，滴加结束后，反应在密封搅拌下进行30小时（其中，2-溴异丁酰溴与聚环氧乙烷的摩尔比为2：1，三乙胺与2-溴异丁酰溴的摩尔比1：1）。过滤、萃取、洗涤、干燥、溶解、沉淀最后真空干燥得到白色粉末状大分子引发剂PEO₄₃-Br（分子量：2025）。

（2）甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙脂（TMA）单体的合成

7.27g甲基丙烯酸羟乙酯（HEMA）、5.92g 2,3-二氢呋喃（DHF）和0.26g P4VP·HCl加入到50mL圆底烧瓶中（摩尔比：HEMA：DHF：P4VP·HCl=1：1.53：0.03），室温搅拌下，反应24小时。过滤、旋蒸、过柱子得到无色透明液体，核磁谱图（图1）表明反应产物为甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯。

（3）ATRP合成PEO₄₃-b-P（DEA₂₀-stat-TMA₂₅）聚合物

0.27g大分子引发剂PEO₄₃-Br、19.5mg催化剂CuBr、41.7mg配体联吡啶0.68g甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯（TMA）单体、0.50g甲基丙烯酸二乙胺基乙酯（DEA）单体和4mL甲醇加入到25mL圆底烧瓶中（摩尔比：PEO₄₃-Br：CuBr：bpy：TMA：DEA=1：1：1.5：27：18）。在无水无氧及氮气的保护、温度为50°C、磁搅拌的条件下反应进行24小时。获得的聚合物旋蒸、过硅胶柱子、反复溶解旋蒸、泵抽，最后放真空烘箱24h，得到的聚合物在25°C室温下为淡黄色较粘的固体，核磁结果表明该聚合物为嵌段-无规聚合物PEO₄₃-b-P（DEA₂₀-stat-TMA₂₅）（分子量：10700）。

（4）自组装形成聚合物囊泡

20mg聚合物与2mL四氢呋喃（THF）加入到20mL小瓶子中，搅拌充分溶解，配成初始浓度为10mg/mL的溶液。在搅拌下，以3秒每滴的速率滴加4mL的去离子水，随后透析去除有机溶剂，最终得到浅蓝色的聚合物囊泡溶液。DLS（动态光散射）及TEM测试结果显示囊泡的粒径在140nm左右。

聚合物囊泡超声和pH性能测试

将聚合物囊泡溶液稀释至0.15mg/mL，分别取10mL加入到两个20mL的小瓶子中。将其中一个小瓶子置于超声清洗器的正中间位置，间断超声150分钟，每隔10分钟取样用DLS表征，观察其粒径及粒径分布的变化趋势。

另外一个样品则通过改变其pH值，pH值变化范围为12~2，每将一个单位取样用DLS表征，观察其粒径及粒径分布的变化趋势。DLS结果表明随着超声时间的增加，聚合物囊泡的粒径减小，粒径分布基本稳定；当pH由12降到7时，聚合物囊泡的粒径基本不变，粒径分布较稳定，但当pH值低于7时，随着pH值降低，聚合物囊泡的粒径减小，粒径分布变宽。

实施例3

（1）大分子引发剂PEO₄₃-Br的合成

10g PEO（分子量：1900）和250mL甲苯加入到500mL圆底烧瓶中，于140°C的温度下，共沸除水。冷却至室温后，将烧瓶置于冰盐浴中，加入2mL三乙胺，用恒压滴液漏斗以3秒每滴的速度滴加20mL溶有2mL 2-溴异丁酰溴的甲苯溶液，滴加结束后，反应在密封搅拌下进行30小时（其中，2-溴异丁酰溴与聚环氧乙烷的摩尔比为2：1，三乙胺与2-溴异丁酰溴的摩尔比1：1）。过滤、萃取、洗涤、干燥、溶解、沉淀最后真空干燥得到白色粉末状大分子引发剂PEO₄₃-Br（分子量：2025）。

（2）甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙脂（TMA）单体的合成

7.27g甲基丙烯酸羟乙酯（HEMA）、5.92g 2,3-二氢呋喃（DHF）和0.26g P4VP·HCl加入到50mL圆底烧瓶中（摩尔比：HEMA：DHF：P4VP·HCl=1：1.53：0.03），室温搅拌下，反应24小时。过滤、旋蒸、过柱子得到无色透明液体，核磁谱图（图1）表明反应产物为甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯。

（3）ATRP合成PEO₄₃-b-P（DEA₂₈-stat-TMA₃₅）聚合物

0.18g大分子引发剂PEO₄₃-Br、13.0mg催化剂CuBr、27.8mg配体联吡啶0.63g甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯（TMA）单体、0.50g甲基丙烯酸二乙胺基乙酯（DEA）单体和4mL甲醇加入到25mL圆底烧瓶中（摩尔比：PEO₄₃-Br：CuBr：bpy：TMA：DEA=1：1：2：35：35）。在无水无氧及氮气的保护、温度为50°C、磁搅拌的条件下反应进行30小时。获得的聚合物旋蒸、过硅胶柱子、反复溶解旋蒸、泵抽，最后放真空烘箱24h，得到的聚合物在25°C室温下为淡黄色较粘的固体，核磁结果表明该聚合物为嵌段-无规聚合物PEO₄₃-b-P（DEA₂₈-stat-TMA₃₅）（分子量：14200）。

（4）自组装形成聚合物囊泡

20mg聚合物与2mL四氢呋喃（THF）加入到20mL小瓶子中，搅拌充分溶解，配成初始浓度为10mg/mL的溶液。在搅拌下，以3秒每滴的速率滴加4mL的去离子水，随后透析去除有机溶剂，最终得到浅蓝色的聚合物囊泡溶液。DLS（动态光散射）及TEM测试结果显示囊泡的粒径在330nm左右。

聚合物囊泡超声和pH性能测试

将聚合物囊泡溶液稀释至0.15mg/mL，分别取10mL加入到两个20mL的小瓶子中。将其中一个小瓶子置于超声清洗器的正中间位置，间断超声150分钟，每隔10分钟取样用DLS表征，观察其粒径及粒径分布的变化趋势。

另外一个样品则通过改变其pH值，pH值变化范围为12~2，每将一个单位取样用DLS表征，观察其粒径及粒径分布的变化趋势。DLS结果表明随着超声时间的增加，聚合物囊泡的粒径减小，粒径分布基本稳定；当pH由12降到6.8时，聚合物囊泡的粒径基本不变，粒径分布较稳定，但当pH值低于6.8时，随着pH值降低，聚合物囊泡的粒径减小，粒径分布变宽。

注：在上述3个实施例中，PEO₄₃-Br的合成以及TMA单体的制备步骤完全相同是因为实施例用的引发剂（PEO₄₃-Br）和超声单体（TMA）相同，不需要重新合成，且PEO₄₃-Br的合成方法完全参照本课题组已发表的文献(Polymer Chemistry,2012,3,2217-2227)。

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和应用本发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于这里的实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种聚合物囊泡，其特征在于：该聚合物囊泡为空心球结构，该空心球结构的内外表面均附着有舒展的聚乙二醇亲水链段，而支撑形成空心球的膜则由聚（甲基丙烯酸二乙胺基乙酯-无规-甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯）分子式为P(DEA_x-stat-TMA_y)的疏水链段组成，其中x=15～60，y=15～60；

所述的囊泡的粒径为140～500nm。

2.一种上述权利要求1中所述的聚合物囊泡的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）大分子引发剂PEO₄₃-Br的合成

聚乙二醇和甲苯加入到烧瓶中，共沸除水；

冷却至室温后，将2-溴异丁酰溴和三乙胺加入到烧瓶中，进行反应；然后过滤、萃取、洗涤、溶解、沉淀，最后真空干燥得到大分子引发剂PEO₄₃-Br；

（2）单体甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯TMA的合成

将甲基丙烯酸羟乙酯、2,3-二氢呋喃和催化剂加入到反应器中，进行反应，反应完毕后，经过滤、旋蒸、过柱子处理后得到透明液体，置于冰箱中保存；

（3）原子转移自由基聚合法合成PEO₄₃-b-P（DEA_x-stat-TMA_y）聚合物

将步骤（1）制得的大分子引发剂PEO-Br、配体联吡啶、催化剂溴化亚铜、步骤（2）中制得的单体甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯与甲基丙烯酸二乙胺基乙酯加入到反应器中，随后加入有机溶剂，在氩气或氮气的保护下进行反应，合成聚合物PEO-b-P（DEA-stat-TMA）；聚合物过柱子、旋蒸、泵抽及真空干燥处理进行纯化；

（4）自组装形成聚合物囊泡

以5～10mg/mL的浓度将聚合物溶解在PEO₄₃-b-P（DEA_x-stat-TMA_y）四氢呋喃中，在搅拌条件下，向溶液中滴加去离子水，随后透析去除有机溶剂，得到聚合物囊泡溶液。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中，PEO的甲苯溶液的质量分数为2～4%，共沸除水的温度为140℃；或所述的步骤（1）中PEO的分子量为1900。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中2-溴异丁酰溴与聚乙二醇的摩尔比为（1～3）：1；

所述的步骤（1）中三乙胺与2-溴异丁酰溴的摩尔比为1：（1～2）。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中加入三乙胺后，反应时间为12～40h，反应温度为0～30℃；

或所述的步骤（2）中，甲基丙烯酸羟乙酯、2,3-二氢呋喃和催化剂的摩尔比1：（1.5～2）：（0.01～0.03）。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（2）中，催化剂为聚4-乙烯吡啶盐酸盐；

或所述的步骤（2）中反应温度为20～45℃，反应时间为8～24小时。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（3）中嵌段共聚物PEO-b-P（DEA-stat-TMA）的相对分子量为8000～30000；

或所述的步骤（3）中大分子引发剂PEO-Br、配体联吡啶（bpy）、催化剂溴化亚铜、单体甲基丙烯酸四氢呋喃羟乙酯与甲基丙烯酸二乙胺基乙酯的摩尔比为1：1：（1～2）：（15～60）：（15～60）。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（3）中的反应时间为8～36h，反应温度为30～50℃；

或所述的步骤（3）中的有机溶剂为甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇或苯甲醚中的一种以上。

9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤（4）中以3～10秒每滴的速度向溶液中滴加去离子水。