发明内容
本发明的目的在于,提供一种新型复方消毒剂,可有效用于畜禽圈舍、运输车辆、手术器械消毒及带畜消毒、重大疫病防控和防治寄生原生动物病害。本发明复方消毒剂主要由酚类化合物和有机酸组成,在表面活性剂的作用下可深入污物深处,彻底杀灭病原菌,不留死角。同时本发明复方消毒剂性质稳定、作用迅速,持久杀菌,安全性好,成本低廉。
本发明的另一目的在于提供了该复方消毒剂的制备方法及其用途。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
本发明提供的一种复方消毒剂,其含有酚类化合物、有机酸、表面活性剂及稳定剂,所述的酚类化合物为2-叔丁基-4-甲基苯酚、6-叔丁基-3-甲基苯酚、3-异丙基-4-甲基苯酚中的一种或几种。
其中,上述原料的重量配比如下:酚类化合物1-70份、有机酸1-70份、表面活性剂1-50份、稳定剂1-20份。
进一步,上述原料的重量配比如下:酚类化合物5-60份、有机酸10-60份、表面活性剂7-40份、稳定剂3-15份。
更进一步,上述原料的重量配比如下:酚类化合物10-50份、有机酸20-50份、表面活性剂15-35份、稳定剂5-10份。
其中,有机酸是甲酸、乙酸、丙酸、乳酸和水杨酸的一种或几种者组合。
其中,表面活性剂是硬脂酸、十二烷基苯磺酸的一种或者它们的组合物。
其中,稳定剂是乙醇、石油醚、柴油、丙酮的一种或几种组合。
本发明提供的复方消毒剂是一种溶液,该复方消毒剂可以与水任意比例混溶,其1%稀释溶液的pH在3.0以下。
本发明还提供了该复方消毒剂的制备方法,包括如下步骤:
按重量配比称取各原料,先将酚类化合物倒入表面活性剂中,再加入有机酸,充分混合均匀后加入稳定剂,混合均匀即得。
本发明的复方消毒剂,它用于畜禽场舍、运输车辆、手术器械消毒方面的应用。
本发明的复方消毒剂,它用于带畜消毒方面的应用。
本发明的复方消毒剂,它用于防治寄生原生动物方面的应用。
1)本发明复方消毒剂为强力广谱消毒剂,除对畜禽养殖中常见的病毒、细菌、支原体、真菌有效外,还对细菌芽孢和部分寄生原虫有效。
2)本发明复方消毒剂杀菌效果稳定,受环境条件(有机物、温度及水质硬度)影响小,在冬季低温情况下及泥地、有大量有机物的存在或更复杂的条件下,仍然具有强大的杀灭作用。
3)本发明复方消毒剂作用迅速,3分钟内可杀灭大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌等常见病原菌及绝大部分病毒、真菌、支原体。
4)本发明复方消毒剂作用持久,能长效持久杀灭环境中的各种病原微生物。
5)本发明复方消毒剂消毒彻底,能渗入物体死角,杀灭深藏底部或角落的病原微生物,彻底杀灭病原微生物,特别适用于重度污染场所的消毒。
6)本发明复方消毒剂组方科学,性质稳定,价格低廉,使用方便,可以直接使用,也可用水稀释后喷洒或浸泡等。
7)本发明复方消毒剂,刺激性小,对人畜、环境无污染,安全性高。
本发明的复方消毒剂,具有多种消毒杀菌成分,可以起到协同杀菌效果,对畜禽养殖期间常见病原菌、病毒、真菌、芽孢及部分寄生原虫均有很好的杀灭效果;且药物成分稳定、消毒效果稳定,受有机物、温度、水质硬度及盐度的影响小,非常适合重度污染场 所的消毒;本发明的复方消毒剂安全性好,使用浓度下无刺激性气味、不具有腐蚀性,对人畜安全,解决了当前消毒剂成分单一、消毒效率低下、消毒效果不稳定及安全性差等问题。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例1
2-叔丁基-4-甲基-苯酚1份、乙酸70份、十二烷基苯磺酸1份、石油醚1份。
按重量配比称取各原料,先将2-叔丁基-4-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,再加入乙酸,充分混合均匀后加入石油醚,混合均匀即得。
实施例2
2-叔丁基-4-甲基-苯酚40份、6-叔丁基-3-甲基-苯酚30份、甲酸1份、十二烷基苯磺酸40份、硬脂酸10份、乙醇5份、石油醚15份。
按重量配比称取各原料,先将十二烷基苯磺酸和硬脂酸混合均匀,再依次将2-叔丁基-4-甲基-苯酚、6-叔丁基-3-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸和硬脂酸的混合液中,混合均匀后再加入甲酸,充分混合均匀后依次加入乙醇和石油醚,混合均匀即得。
实施例3
6-叔丁基-3-甲基-苯酚3份、丙酸35份、水杨酸30份、十二烷基苯磺酸5份、石油醚2份。
按重量配比称取各原料,先将6-叔丁基-3-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,再加入丙酸和水杨酸,充分混合均匀后加入石油醚,混合均匀即得。
实施例4
2-叔丁基-4-甲基-苯酚35份、3-异丙基-4-甲基苯酚30份、甲酸5份、十二烷基苯磺酸35份、硬脂酸10份、柴油10份、丙酮7份。
按重量配比称取各原料,先将十二烷基苯磺酸和硬脂酸混合均匀,再依次将2-叔丁基-4-甲基-苯酚、3-异丙基-4-甲基苯酚倒入十二烷基苯磺酸和硬脂酸的混合液中,混合均匀后再依次加入甲酸,充分混合均匀后加入柴油、丙酮,混合均匀即得。
实施例5
2-叔丁基-4-甲基-苯酚5份、乙酸30份、水杨酸30份、十二烷基苯磺酸7份、乙醇3份。
按重量配比称取各原料,先将2-叔丁基-4-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,混合均匀后再依次加入乙酸、水杨酸,充分混合均匀后加入乙醇,混合均匀即得。
实施例6
2-叔丁基-4-甲基-苯酚30份、6-叔丁基-3-甲基-苯酚30份、十二烷基苯磺酸60份、乙酸7份、乙醇5份、柴油10份。
按重量配比称取各原料,先将2-叔丁基-4-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,混合均匀后再依次加入乙酸、水杨酸,充分混合均匀后加入乙醇、柴油,混合均匀即得。
实施例7
2-叔丁基-4-甲基-苯酚7份、甲酸40份、水杨酸15份、十二烷基苯磺酸10份、石油醚4份。
按重量配比称取各原料,先将2-叔丁基-4-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,混合均匀后再依次加入甲酸、水杨酸,充分混合均匀后加入石油醚,混合均匀即得。
实施例8
2-叔丁基-4-甲基-苯酚10份、乙酸40份、水杨酸10份、十二烷 基苯磺酸15份、石油醚5份。
按重量配比称取各原料,先将2-叔丁基-4-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,混合均匀后再依次加入乙酸、水杨酸,充分混合均匀后加入石油醚,混合均匀即得。
实施例9
6-叔丁基-3-甲基苯酚25份、3-异丙基-4-甲基苯酚25份、甲酸10份、乳酸10份、十二烷基苯磺酸25份、硬脂酸10份、乙醇5份、柴油5份。
按重量配比称取各原料,先将十二烷基苯磺酸和硬脂酸混合均匀,再依次将6-叔丁基-3-甲基苯酚、3-异丙基-4-甲基苯酚倒入十二烷基苯磺酸和硬脂酸的混合液中,混合均匀后再依次加入甲酸、乳酸,充分混合均匀后加入乙醇、柴油,混合均匀即得。
实施例10
2-叔丁基-4-甲基-苯酚30份、乙酸30份、十二烷基苯磺酸20份、乙醇3份、石油醚5份。
按重量配比称取各原料,先将2-叔丁基-4-甲基-苯酚倒入十二烷基苯磺酸中,混合均匀后再加入乙酸,充分混合均匀后加入乙醇、石油醚,混合均匀即得。
试验例1
本发明复方消毒剂对部分细菌的杀灭效果试验观察
本实验在北京大北农动保技术中心微生物实验室进行,试验参照《消毒技术规范》2002版消毒剂杀微生物试验部分。试验菌种为大肠杆菌CVCC2059、金黄色葡萄球菌CVCC2086和沙门氏菌ATCC14028,消毒剂为本发明实施例1制备的复方消毒剂、本发明实施例10制备的复方消毒剂、国内某厂家生产的复合酚和国外某厂家生产的复方煤焦油酸溶液。消毒剂浓度分别设置为0.25%、 0.167%、0.125%、0.1%、0.083%、0.071%、0.063%、0.056%。
试验采用悬液定量杀灭试验法,先将稀释好的消毒剂分别与培养好的菌悬液(9:1)充分混合,静置10分钟,再将上述加有消毒剂的菌悬液混合液与中和剂(2%的吐温-80)按1:9比例充分混合,然后取中和后的混合液加入平板培养基上,每板加入量100μL,置于37℃培养箱中培养18h后观察菌落生长情况,每组设置2个重复。同时设置空白对照组。
杀菌浓度判定:恒温培养箱培养18h后,观察平皿有无菌落生长。有菌落生长即判定为该浓度下该消毒剂对试验菌未完全杀灭,无菌落生长的最小浓度即为该消毒剂对细菌的最小杀菌浓度。具体试验结果见表1。
表1各消毒剂对细菌的杀灭试验结果
试验结果表明,本发明实施例1和本发明实施例10制备的复方消毒剂在低浓度下均能有效杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌杀灭效果优于国内外同类产品,且本发明实施例10复方消毒剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭效果更为优异。
试验例2
本发明实施例2制备的复方消毒剂对伪狂犬病毒的杀灭效果试验观察
本实验在北京大北农动物医学研究中心微生物试验室进行。消毒剂为本发明实施例2复方消毒剂,病毒为伪狂犬病病毒国内分离株,细胞为猪肾细胞PK 15。
试剂:2%吐温-80,DMEM培养基,胰酶、胎牛血清等细胞培养基。
病毒毒价的测定培养PK 15细胞,采用96孔细胞培养板,24h形成单层后,倒掉原培养液,分别接种10倍递比稀释的病毒液,用含5%胎牛血清细胞培养液进行对照,观察96h,每24h记录细胞病变情况,然后计算出病毒的TCID50。
消毒剂和中和剂对细胞的最大无毒剂量测定将本发明实施例2复方消毒剂用0.22μm滤器过滤。使用含5%胎牛血清细胞培养液按1:200、1:400、1:600、1:800、1:1000、1:1200倍进行稀释,中和剂则从1:10进行2倍递比稀释。将稀释液作为维持液培养已长成单层的PK 15细胞,观察96h内的细胞生长情况。
消毒剂与中和剂的反应产物对细胞的影响将上述稀释的消毒剂分别与中和剂按一定比例混合10min,接种PK 15细胞单层,观察96h细胞生长情况。
消毒剂对病毒的杀灭率试验采用Klein-Defors悬浮方法进行伪狂犬病病毒的杀灭试验,以细胞培养液配制的中和剂对消毒剂进行中和,系列稀释接种并检测病毒感染率。
试验具体结果见表2-4。其中,病毒毒价为1×108.5/0.1ml;消毒剂对细胞的最大无毒剂量本发明实施例2复方消毒剂比复方煤焦油酸溶液的要小,为1:800倍;中和剂接种细胞后不引起细胞病变,表明对细胞无眼观的毒害作用;消毒剂和中和剂的反应产物接种细胞后减小了消毒剂对细胞的毒害作用;从表4中可看出,达到对伪狂犬病毒100%杀灭率的各消毒剂的稀释度分别为,本发明复方消毒剂消毒剂700倍稀释,复方煤焦油酸溶液600倍稀释。
表2消毒剂对细胞的最大无毒剂量
表3中和产物对细胞的最大无毒剂量
注:/前指有细胞生长孔数,/后指细胞总孔数
表4不同浓度的两种消毒剂对伪狂犬病病毒的杀灭作用
注:表/前的指细胞生长孔数,/后的指细胞总孔数。
采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法。结果表明,本发明实施例2复方消毒剂700倍稀释时,杀毒率为100%;而复方煤焦油酸溶液600倍稀释时,杀毒率为100%。可见,本发明实施例2消毒剂对伪狂犬病病毒的杀灭效果明显优于国外同类产品。
试验例3
温度对本发明实施例3制备的复方消毒剂杀菌效果影响的试验观察
本实验在北京大北农动保技术中心微生物实验室进行。温度设置10℃±1℃、20℃±1℃、30℃±1℃三个梯度,以10℃为间隔。消毒剂作用时间设置为4个,分别为5、10、15、20分钟。试验用细菌繁殖体为大肠杆菌CVCC2059。本发明实施例3复方消毒剂浓度根据试验,20℃下5min合格的杀菌稀释倍数为1000倍,10min合格的杀菌稀释倍数为1200倍,15min合格的杀菌稀释倍数为1300倍,20min合格的杀菌稀释倍数为1400倍。
试验采用悬液定量杀灭试验法进行,具体参考《消毒技术规范》2002版消毒剂杀微生物试验部分。试验重复3次,计算各组的活菌浓度(cfu/ml),并换算为对数值(N),然后按下式计算杀灭对数值:
杀灭对数值(KL)=对照组平均活菌浓度的对数值(No)-试验组活菌浓度对数值(Nx)
效果评价:1)该组第1个~4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果均合格,判为该组所试因素无影响。2)该组第2个~4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果合格,判为该组所试因素有轻度影响。3)该组第3个~4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果合格,判为该组所试因素有中度影响。4)该组只第4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果合格,判为该组所试因素有重度影响。
具体试验结果见表5。
表5温度对本发明实施例4复方消毒剂杀灭大肠杆菌的影响
结果显示,在10℃、20℃、30℃下,不同作用时间下本发明实施例3复方消毒剂相应浓度对大肠杆菌的杀灭效果均符合要求,表明温度对本发明实施例3复方消毒剂的杀菌效果没有影响。
试验例4
有机物干扰对本发明实施例4制备的复方消毒剂杀菌效果影响的试验观察
本实验在大北农微生物实验室进行,试验参照《消毒技术规范》2002版消毒剂杀微生物试验部分。以小牛血清为有机干扰物,设置有机干扰物组1、有机干扰物组2、空白对照组。有机干扰物组1为细菌菌悬液与有机干扰物按1:1比例混合作为菌悬液,有机干扰物组2为细菌菌悬液与有机干扰物按3:1比例混合作为菌悬液,空白对照组为未加有机干扰物的菌悬液。消毒剂作用时间设置为4个,分别为5、10、15、20分钟。试验用细菌繁殖体为大肠杆菌CVCC2059。本发明实施例4复方消毒剂浓度根据试验,空白对照组5min合格的杀菌稀释倍数为1000倍,10min合格的杀菌稀释倍数为1200倍,15min合格的杀菌稀释倍数为1300倍,20min合格的杀菌稀释倍数为1400倍。
试验采用悬液定量杀灭试验进行。试验重复3次,计算各组的活菌浓度(cfu/ml),并换算为对数值(N),然后按下式计算杀灭对数值:
杀灭对数值(KL)=对照组平均活菌浓度的对数值(No)-试验组活菌浓度对数值(Nx)
效果评价:1)该组第1个~4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果均合格,判为该组所试因素无影响。2)该组第2个~4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果合格,判为该组所试因素有轻度影响。3)该组第3个~4个作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果合格,判为该组所试因素有中度影响。4)该组只第4个 作用时间的试验,对所试微生物杀灭效果合格,判为该组所试因素有重度影响。
表6有机物对本发明实施例4复方消毒剂杀灭大肠杆菌的影响
结果显示,添加50%小牛血清后对本发明实施例4复方消毒剂的杀菌效果有轻度影响,添加50%小牛血清后对本发明实施例4复方消毒剂的杀菌效果有轻度度影响,表明有机干扰物对本发明实施例4复方消毒剂的杀菌效果影响较小。
试验例5
本发明实施例5制备的复方消毒剂速效杀菌试验观察
本实验在大北农微生物实验室进行。试验参照《消毒技术规范》2002版消毒剂杀微生物试验部分进行。消毒剂为本发明实施例5复方消毒剂和某国外复方煤焦油酸溶液产品,实验菌株为大肠杆菌CVCC2059。时间点设置为0、5、15、30min,即消毒剂和菌悬液接触时间分别为0、5、15、30min,考察在相应作用时间内对大肠杆菌的杀灭效果。
试验在平板培养基上进行,每组设置3个重复。先将消毒剂按1:500倍稀释,然后将稀释好的消毒剂与菌悬液(9:1)充分混合,静置设置时间分钟;再将处理好的消毒剂+菌悬液与中和剂按1:9比例充分混合,然后再取混合液加入平板培养基上,每板加入量10μL,置于37℃培养箱中培养18h后观察菌落生长情况。
效果判定:没有菌落生长的最小时间点即判定为该消毒剂在1:1000倍稀释下的有效作用时间。具体结果见表7。
表7实施例5复方消毒剂速效杀菌试验结果
试验结果表明,本发明实施例5复方消毒剂1:1000倍稀释下5min就彻底杀灭了大肠杆菌,而某国外复方煤焦油酸溶液1:1000倍稀释下15min才彻底杀灭了大肠杆菌,故本发明实施例5复方消毒剂作用迅速,能快速杀灭常见病原菌,且优于国内外同类产品。
试验例6
本发明实施例6制备的复方消毒剂长久抑菌、杀菌试验观察
本试验在北京大北农动保微生物实验室进行。消毒剂为本发明实施例6复方消毒剂和国外某厂生产复方煤焦油酸溶液,消毒剂浓度设置为500倍稀释,试验菌悬液为大肠杆菌CVCC2059、金黄色葡萄球菌CVCC2086和沙门氏菌ATCC14028。
实验方法分别将稀释好的消毒剂中加入培养好的菌悬液(按9:1),充分混合,敞口放置于阴暗通风处,分别于第0、5、10、15天做杀菌试验,杀菌试验方法参考《消毒技术规范》2002版消毒剂杀微生物试验部分进行。取样100μL,均匀涂布于营养琼脂培养基上,置于37℃培养箱中培养24h观察菌落生长情况。
具体结果见表8。试验结果显示,本发明实施例6复方消毒剂在放置10天未见有菌落生长,而复方煤焦油酸溶液放置10天开始有菌落生长。表明本发明实施例6复方消毒剂的抑菌、杀菌效果优于国外同类产品复方煤焦油酸溶液。
表8本发明实施例6复方消毒剂长久抑菌、杀菌试验结果
试验例7
本发明实施例7制备的复方消毒剂现场消毒试验
本试验在北京市怀柔区某规模化猪场进行,试验方法参照《消毒技术规范》2002版消毒剂现场模拟实验。试验前先彻底清理猪圈。消毒剂为本发明实施例7复方消毒剂,消毒剂浓度为1:300倍稀释液,消毒时将上述稀释液按每立方米空间喷洒300毫升。
样品采集在猪圈地面用直尺标定面积为900cm2(30×30)的区块,每30平米标定1块,每块区域在四角绘出4块(5×5)区域,分别编号1、2、3、4。其中1、3为消毒前采样区域,2、4为消毒后采样区域。采样方法:将无菌棉签于含5ml稀释液试管中沾湿,对一区块涂抹采样,横竖往返各8次。采样后,以无菌操作方式将棉签采样端剪入原稀释液试管内备用。
取样培养对以上取回的样品在实验室进行培养。取样100μL,均匀涂布于营养琼脂培养基上,置于37℃培养箱中培养24h观察菌落生长情况,试验重复3次,计算活菌浓度(cfu/ml),并换算为对数值(N),然后按下式计算杀灭对数值:
杀灭对数值(KL)=消毒前平均活菌浓度的对数值(No)-消毒后活菌浓度对数值(Nx)
具体结果见表9。试验结果显示,300倍稀释液消毒前后细菌菌落数对数值的差距均在3以上。表明均本发明实施例7复方消毒剂300倍稀释液对猪场的消毒效果均达到标准要求,消毒效果良好。
表9本发明实施例7复方消毒剂现场消毒试验结果
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。