CN102933598A - 新型胰高血糖素类似物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有改进的溶解度和稳定性的胰高血糖素肽激动剂，涉及所述肽在治疗中的用途，涉及包括将所述肽给予有需要的患者的治疗方法，并涉及所述肽在制备药物中的用途。就低血糖、糖尿病和肥胖症以及与低血糖、糖尿病和肥胖症有关的各种疾病或病况的治疗而言，本发明的胰高血糖素肽尤其引人关注。

Description

新型胰高血糖素类似物
发明领域
本发明涉及具有改进的物理稳定性的新型胰高血糖素肽类似物，涉及所述肽在治疗中的用途，涉及包括将所述肽给予患者的治疗方法，并涉及所述肽在药物制备中的用途。
发明背景
对血糖水平的精确控制对人以及其它哺乳动物都极其重要。十分确定的是胰岛素和胰高血糖素两种激素对于维持适当的血糖水平很重要。胰岛素通过葡萄糖的外周摄取增加和自肝脏输出的葡萄糖减少来降低血糖水平而作用于肝脏和外周组织，与此同时，胰高血糖素通过糖异生和糖原分解上调来提高血糖水平而主要作用于胰腺和肝脏。另据报告，胰高血糖素增加脂解作用，诱导酮症并降低血浆中的血浆甘油三酯水平[Schade和Eaton，Acta Diabetologica ，1977，14，62]。
人胰高血糖素是长度为29个残基的线性肽，胰高血糖素的大小和序列的独特组合导致在制备和使用中处理肽相当困难。该分子太小而不能拥有大量且稳定性的三级结构，但又大到足以参与相变，例如形成β折叠样聚集体或原纤维结构。因此，除了胰高血糖素在pH 3-9范围内的固有低溶解度外，处理溶液中的胰高血糖素的问题还起因于将完全随机的构象与更有特色的结构分开的相当小的能量屏障，所述更有特色的结构包括例如结合受体所需的结构及能够形成原纤维的结构。在处理胰高血糖素溶液过程中，必须在酸性和碱性制剂之间做出选择，因为在pH 3-9的溶解度极低。由于在天然胰高血糖素中存在易于碱催化的脱酰胺的若干残基，在高pH (>10)时仅可短时间处理胰高血糖素。
市售胰高血糖素(Eli Lilly和Novo Nordisk)作为冻干固体供应，在使用前必须溶解。其该溶液必须在制备后马上注射，因为当其溶解于简单水性制剂时，胰高血糖素容易聚集并原纤化。胰高血糖素溶液在溶解后若干小时可变粘或混浊，因而变得不适于注射。对可能需要快速起作用以消解低血糖的患者或亲属而言，溶解过程本身是个大问题，因为患者可能在精神上受到低血糖的影响，亲属可能未受到关于溶解过程的训练。胰高血糖素除了用于治疗急性低血糖(例如“胰岛素休克”)的周知用途外，最重要的应用基于其对平滑肌的解痉作用，其在临床上与若干成像方法尤其是腹部的X射线联合使用。
公开了不同的基于胰高血糖素的类似物和GLP-1/胰高血糖素受体协同激动剂的若干专利申请是本领域已知的，例如专利WO2008/086086、WO2008/101017、WO2007/056362、WO2008/152403和WO96/29342。公开于这些专利的一些GLP-1/胰高血糖素受体协同激动剂涉及相对于天然人胰高血糖素的特定突变。所公开的其它胰高血糖素类似物在天然人胰高血糖素的特定位置上是聚乙二醇化的(例如WO2007/056362)或者是酰化的(例如WO96/29342)。用于防止低血糖的胰高血糖素公开于例如专利申请US 7314859中。
本发明肽提供在溶液中的物理稳定性得到改进的新型改良胰高血糖素肽。
发明简述
本发明涉及在溶液中的物理稳定性得到改进的新型胰高血糖素肽，涉及所述肽在治疗中的用途，涉及包括将所述肽给予患者的治疗方法，并涉及所述肽在制备用于治疗糖尿病、肥胖症和相关疾病和病况例如低血糖的药物中的用途。
在第一实施方案(实施方案1)中，本发明涉及包含SEQ ID 1的胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中第25位的氨基酸残基即X25代表His、Lys、Ile、Leu、Ala、Met、Cys、Asn、Val、Ser、Gln、Asp、Glu、Thr或(p)Tyr。
本发明进一步涉及本发明化合物在治疗中的用途，涉及包含本发明化合物的药物组合物和本发明化合物在制备药物中的用途。
附图阐述
图1显示来自实施例1的胰高血糖素类似物的ThT测定的结果，其显示所述化合物在物理应力下未形成原纤维。
图2显示来自实施例2的胰高血糖素类似物的ThT测定的结果。1) 250 µM实施例2的胰高血糖素类似物、10 mM Hepes缓冲液、pH 7.5；2) 290 µM胰高血糖素、50 mM甘氨酸、pH 2.5；和 3) 1.45 mM胰高血糖素、50 mM甘氨酸、pH 2.5。
发明阐述
本发明涉及在25位具化学修饰的胰高血糖素肽，所述化学修饰出人意料地改进所述胰高血糖素肽在水溶液中的物理或化学稳定性。
本发明的其它实施方案包括如下实施方案：
2. 实施方案1的胰高血糖素肽，其包含式[I]氨基酸序列：
His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-X25-Leu-Met-Asn-Thr[I]。
3. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表His、Lys或(p)Tyr。
4. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表Lys。
5. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表His。
6. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表(p)Tyr。
7. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X27代表Leu。
8. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表Tyr，X27代表Leu。
9. 实施方案2的胰高血糖素肽，其中X25代表Arg，条件是X27代表Leu。
10. 一种胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中第25位的氨基酸残基即X25代表His、Arg、Lys、Ile、Leu、Ala、Met、Pro、Cys、Asn、Val、Ser、Gln、Asp、Glu、Thr或(p)Tyr；其中所述胰高血糖素肽为胰高血糖素受体的激动剂。
11. 一种胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中第25位的氨基酸残基即X25代表His、Arg、Lys、Ile、Leu、Ala、Met、Cys、Asn、Val、Ser、Gln、Asp、Glu、Thr或(p)Tyr；
其中所述胰高血糖素肽为胰高血糖素受体的激动剂，且EC50 < 1 nM，例如0.1nM。
12. 实施方案10-11的胰高血糖素肽，其包含式[I]氨基酸序列：
His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-X25-Leu-Met-Asn-Thr[I]。
13. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表His、Arg、Lys或(p)Tyr。
14. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表His。
15. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表Arg。
16. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表Lys。
17. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表(p)Tyr。
18. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X27代表Leu。
19. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表Tyr，X27代表Leu。
20. 实施方案10-12中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表Arg，X27代表Leu。
21. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X15代表Glu。
22. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X21代表Glu。
23. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X28代表Ser或Glu。
24. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X28代表Ser。
25. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中X28代表Glu。
26. 选自以下的前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽：
[Glu21,Arg25,Leu27]胰高血糖素
H-H S Q G T F T S D Y S K Y L D S R R A Q E F V Q R L L N T-OH；
[(0-磷酸)Tyr25,Leu27]胰高血糖素
Figure 404095DEST_PATH_IMAGE001
；
[Arg25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 947334DEST_PATH_IMAGE002
；
[Glu21,Arg25,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
Figure 602437DEST_PATH_IMAGE003
；
[His25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 873013DEST_PATH_IMAGE004
；
[Lys25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 562751DEST_PATH_IMAGE005
；
[Glu21,Lys25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 385214DEST_PATH_IMAGE006
；
[Glu15,Glu21,Arg25,Leu27]-胰高血糖素
和
[Arg25,Leu27,Glu28]-胰高血糖素
Figure 601880DEST_PATH_IMAGE008
。
本发明人出人意料地发现了与目前市售产品相比得到改进的基于胰高血糖素的化合物。这些类似物可以以更为安全和方便的预装填即用型装置用于治疗严重低血糖。
本发明人出人意料地发现，具有例如所述胰高血糖素肽在第25位氨基酸的突变的人胰高血糖素类似物适于液体制剂。
用经典肽合成业已制备人胰高血糖素(1-29)的一级序列的突变。业已建立如药理学方法章节的测定(II)中所述的测定，藉此通过在振荡的同时加热到37℃，然后测量所加入的染料(硫磺素T)的荧光，而在pH 4或pH 7.5下检测新类似物的稳定性制剂，本领域已知所述染料与原纤维和β折叠结构结合。当在45小时内未观察到ThT信号且通过UPLC分析完全回收所述类似物时，假定类似物完全稳定。
当在酸性pH溶解时，胰高血糖素视浓度和温度而定可经历各种相变。在将胰高血糖素样品溶于0.01 N盐酸中后，可出现延迟相，其中样品的粘度低，溶液完全透明。在几个小时后(Beaven等，European J. Biochem. 11 (1969) 37-42)，粘度开始增加——表明形成凝胶。在到达稳定水平后，粘度又可开始降低，同时原纤维可出现并自溶液沉淀出。该过程可接种，加入少量预形成的凝胶缩短延迟相。凝胶的形成和原纤维形成高度依赖物理应力，例如加热和振荡，二者都提高该过程的速率。
本发明人亦出人意料地发现，本发明胰高血糖素类似物针对水溶液中凝胶和原纤维的形成具有改进的稳定性。可通过如药理学方法章节的测定(II)中所述的方法来测量本发明化合物的稳定性。
本发明涉及针对凝胶和原纤维形成具有改进的物理稳定性的新型胰高血糖素类似物。
本发明的其它实施方案涉及以下胰高血糖素肽：
27. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽与人胰高血糖素(1-29)相比包含至多5个氨基酸残基取代。
28. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽与人胰高血糖素(1-29)相比包含至多10个氨基酸残基取代。
29. 实施方案27-28中任一个的胰高血糖素肽，其中所述取代位于氨基酸位置X3、X20、X24、X16、X17、X18、X21、X27、X28和/或X29。
30. 实施方案27-28中任一个的胰高血糖素肽，其中所述取代位于氨基酸位置X17、X18、X21、X27、X28和/或X29。
31. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽当与人胰高血糖素(1-29)相比时包含至多3个氨基酸残基取代，其中所述取代位于氨基酸位置X21、X27、X28和/或X29。
32. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽当与人胰高血糖素(1-29)相比时包含至多3个氨基酸残基取代，其中所述取代位于氨基酸位置X27、X28和/或X29。
33. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽选自胰高血糖素(1-29)、胰高血糖素(1-29)-酰胺或其类似物。
34. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽与人胰高血糖素(1-29)序列相比包含不超过15个氨基酸残基被交换、添加或缺失，或与人胰高血糖素(1-29)序列相比包含不超过10个氨基酸残基被交换、添加或缺失。
35. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽与人胰高血糖素(1-29)相比包含不超过6个氨基酸残基被交换、添加或缺失。
36. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含至多3个氨基酸残基的C-末端延伸。
37. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含至多2个氨基酸残基的C-末端延伸。
38. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含1个氨基酸残基的C-末端延伸。
39. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽为C-末端酰胺或C-末端羧酸。
40. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽为C-末端酰胺。
41. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽为C-末端羧酸。
在本发明实施方案中，相对于人胰高血糖素(1-29)，业已修饰(取代、缺失、添加或其任意组合)胰高血糖素肽的最多17个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素肽的最多15个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多10个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多8个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多7个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多6个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多5个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多4个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多3个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的最多2个氨基酸。在本发明实施方案中，业已修饰胰高血糖素类似物的1个氨基酸。
本发明的另外实施方案涉及：
42. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述化合物为胰高血糖素受体的激动剂。
43. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述化合物为胰高血糖素受体的激动剂，且EC50 < 1 nM，例如0.1nM。
44. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽为DPPIV保护的化合物。
45. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽为DPPIV稳定的。
46. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定中具有超过70%的回收率。
47. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定中具有超过90%的回收率。
48. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定中具有约100%的回收率。
49. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定中具有超过7个小时的延迟时间。
50. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定中具有超过20个小时的延迟时间。
51. 前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定中具有45小时或更长的延迟时间。
本文所用术语“多肽”和“肽”意指由通过肽键连接的至少5个组分氨基酸(constituent amino acid)组成的化合物。组分氨基酸可来自由遗传密码编码的氨基酸的组别，且它们可以是不是由遗传密码编码的天然氨基酸，以及合成氨基酸。不是由遗传密码编码的天然氨基酸为例如羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸、鸟氨酸、磷酸丝氨酸、D-丙氨酸和D-谷氨酰胺。合成氨基酸包括通过化学合成制备的氨基酸，即由遗传密码编码的氨基酸的D-异构体，例如D-丙氨酸和D-亮氨酸、Aib (α-氨基异丁酸)、Abu (α-氨基丁酸)、Tle (叔丁基甘氨酸)、β-丙氨酸、3-氨基甲基苯甲酸、邻氨基苯甲酸。
未规定旋光异构体的所有氨基酸要理解为意指L-异构体。
本文所用术语“胰高血糖素肽”意指胰高血糖素肽、胰高血糖素化合物、按照本发明的化合物、本发明的化合物、式I的化合物、胰高血糖素类似物、胰高血糖素衍生物或胰高血糖素类似物的衍生物、人胰高血糖素、人胰高血糖素(1-29)、胰高血糖素(1-30)、胰高血糖素(1-31)、胰高血糖素(1-32)及其保持胰高血糖素活性的类似物、融合肽和衍生物。
至于胰高血糖素化合物的位置编号：对于本发明的目的，相对于天然人胰高血糖素(1-29) (SEQ ID 1)的序列来说明任何的氨基酸取代、缺失和/或添加。人胰高血糖素氨基酸位置1-29在本文中与氨基酸位置X1-X29相同。人胰高血糖素(1-29)序列为His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (SEQ ID 1)。
胰高血糖素(1-30)意指在C端带有1个氨基酸的延伸的人胰高血糖素，胰高血糖素(1-31)意指在C端带有2个氨基酸的延伸的人胰高血糖素，胰高血糖素(1-32)意指在C端带有3个氨基酸的延伸的人胰高血糖素。
本文提及多肽使用的术语“DPP-IV保护的”意指这样的多肽，其经化学修饰从而使所述化合物对血浆肽酶二肽基氨基肽酶-4 (DPP-IV)具有抗性。已知血浆中的DPP-IV酶参与若干肽激素例如胰高血糖素、GLP-1、GLP-2、泌酸调节肽等的降解。因此，正在进行相当多的努力以开发对DPP-IV介导的水解敏感的多肽的类似物和衍生物以降低DPP-IV的降解速率。
此外，在如测定III所述的无白蛋白测定中，本发明胰高血糖素肽对DPP-IV切割是稳定的。
本文所用术语“胰高血糖素激动剂”是指完全或部分激活人胰高血糖素受体的任何胰高血糖素肽。在优选实施方案中，“胰高血糖素激动剂”是按本领域已知方法例如测定1测量，优选以低于1μM、例如低于100nM或低于1nM的亲和常数(KD)或效价(EC50)与胰高血糖素受体结合的任何胰高血糖素肽。
在本文中，术语“激动剂”欲表示激活所述受体类型的物质(配体)。
在本文中，术语“拮抗剂”欲表示阻断、中和或抵消激动剂的作用的物质(配体)。
更具体地讲，可如下对受体配体进行分类：
受体激动剂，其刺激受体；部分激动剂也激活受体，但具有比完全激动剂低的功效。部分激动剂将作为受体部分拮抗剂起作用，部分抑制完全激动剂的作用。
受体中性拮抗剂，其阻断激动剂的作用，但不影响受体组成型活性。
受体逆激动剂，其阻断激动剂的作用，同时减弱受体组成型活性。完全逆激动剂可完全减弱受体组成型活性；部分逆激动剂可将受体组成型活性减至较低程度。
本文所用术语“拮抗剂”包括中性拮抗剂和部分拮抗剂以及逆激动剂。术语“激动剂”包括完全激动剂以及部分激动剂。
本发明其它实施方案涉及药物组合物：
52. 一种包含前述实施方案中任一个的胰高血糖素肽的药物组合物。
53. 实施方案52的药物组合物，所述药物组合物进一步包含一种或多种其它治疗活性化合物或物质。
54. 实施方案52-53中任一个的药物组合物，所述药物组合物呈包含约0.001mg-约100mg (例如约0.01mg-约10mg，例如约0.1mg-约1mg)的实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽的单位剂型。
55. 实施方案52-53中任一个的药物组合物，所述药物组合物适合胃肠外给予。
56. 用于治疗的实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽。
在本文中，术语“药学上可接受的盐”欲表示对患者无害的盐。这类盐包括药学上可接受的酸加成盐、药学上可接受的金属盐、铵盐和烷基化铵盐。酸加成盐包括无机酸以及有机酸的盐。合适无机酸的代表性实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸和硝酸等。合适有机酸的代表性实例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、乙醇酸、乳酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、琥珀酸、甲磺酸、乙磺酸、酒石酸、抗坏血酸、双羟萘酸、双亚甲基-水杨酸、乙二磺酸、葡萄糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、乙醇酸、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等。药学上可接受的无机酸或有机酸加成盐的其它实例包括J. Pharm. Sci. (1977) 66，2中列出的药学上可接受的盐，其通过引用结合到本文中。相关金属盐的实例包括锂盐、钠盐、钾盐和镁盐等。烷基化铵盐的实例包括甲基铵、二甲基铵、三甲基铵、乙基铵、羟基乙基铵、二乙基铵、丁基铵和四甲基铵盐等。
本文所用术语化合物的“治疗有效量”是指足以治愈、减轻或部分抑制指定疾病和/或其并发症的临床表现的量。将适于实现这一目的的量定义为“治疗有效量”。对于每个目的而言，有效量将取决于疾病或损伤的严重程度以及受试者的体重和一般状况。应理解的是，可采用常规实验，通过构建值的矩阵并测定矩阵中的不同点来实现合适剂量的确定，所有这些都属于受过训练的医师或兽医的普通技能水平。
当用于本发明的方法时，本发明化合物的典型剂量的范围为约0.001-约100 mg/kg体重/天，优选约0.01-约10mg/kg体重，更优选约0.01-约5 mg/kg体重/天，例如约0.05-约10 mg/kg体重/天或约0.03-约5mg/kg体重/天，其以一个剂量或多个剂量给予，例如1-3个剂量。确切的剂量可取决于给药的频率和方式、接受治疗的受试者的性别、年龄、体重和一般状况、受治疗病况的性质和严重程度、待治疗的任何伴发疾病和对本领域技术人员而言是显然的其它因素。
可采用本领域技术人员众所周知的技术，将本发明的化合物合宜地配制成单位剂型。欲每天口服给予一次或多次(例如每天1-3次)的典型的单位剂型，可适宜地含有约0.05-约1000mg、优选约0.1-约500mg、例如约0.5-约200mg的本发明的化合物。
本发明的化合物包含被认为是极适于以长于例如一日一次的间隔给予的化合物，因此，适当配制的本发明的化合物可适于例如通过合适的给药途径(例如本文公开的途径之一)一周两次或一周一次给予。
本发明的化合物可与一种或多种其它的治疗活性化合物或物质组合给予或组合施用，合适的其它化合物或物质可选自例如抗糖尿病药、抗高血脂药、抗肥胖症药、抗高血压药和用于治疗由糖尿病产生的并发症或与糖尿病有关的并发症的药物。
在本文中，如不另外说明，则术语“可溶解的”、“溶解度”、“可溶于水溶液”、“水溶性”、“水溶性的”、“可溶于水的”、“水溶解度”和“水溶性”是指化合物在水中或在含水盐溶液或水性缓冲溶液(例如10 mM磷酸盐溶液)中或在含有其它化合物但无有机溶剂的水溶液中的溶解度。
本发明其它实施方案涉及以下胰高血糖素肽：
57. 实施方案1-5151中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖症。
58. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于延迟或预防2型糖尿病的疾病进展。
59. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗肥胖症或预防体重超重。
60. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于减少食物摄取。
61. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于增加能量消耗。
62. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于降低体重。
63. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)向2型糖尿病的进展。
64. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于延迟从2型糖尿病向需要胰岛素的糖尿病的进展。
65. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于调节食欲。
66. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于引起饱满感。
67. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于预防成功减轻体重后体重反弹。
68. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗与体重超重或肥胖症有关的疾病或状况。
69. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗贪食症。
70. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗暴食症(binge-eating)。
71. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗动脉粥样硬化。
72. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗高血压。
73. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗2型糖尿病。
74. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗葡萄糖耐量减低。
75. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗血脂异常(dyslipidemia)。
76. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗冠心病。
77. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗肝脂肪变性。
78. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗肝脂肪变性。
79. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗β-阻断剂中毒。
80. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于抑制胃肠道蠕动，所述抑制可用于与采用X射线、CT扫描和NMR扫描等技术进行的胃肠道检查结合。
81. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防低血糖。
82. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防胰岛素诱导性低血糖。
83. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防反应性低血糖。
84. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防糖尿病性低血糖。
85. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防非糖尿病性低血糖。
86. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防空腹低血糖。
87. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防药物诱发性低血糖。
88. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防胃旁路术诱发性低血糖。
89. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防妊娠期低血糖。
90. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防酒精诱发性低血糖。
91. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防胰岛素瘤。
92. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合用于治疗或预防Von Girkes病。
本发明的其它实施方案涉及以下方法：
93. 一种用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖症的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
94. 一种用于延迟或防止2型糖尿病的疾病进展的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
95. 一种用于治疗肥胖症或预防体重超重的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
96. 一种用于减少食物摄取的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
97. 一种用于增加能量消耗的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
98. 一种用于减轻体重的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
99. 一种用于延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
100. 一种用于延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
101. 一种用于调节食欲的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
102. 一种用于引起饱满感的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
103. 一种用于防止成功减轻体重后体重反弹的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
104. 一种用于治疗与体重超重或肥胖症有关的疾病或状况的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
105. 一种用于治疗贪食症的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
106. 一种用于治疗暴食症的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
107. 一种用于治疗动脉粥样硬化的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
108. 一种用于治疗高血压的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
109. 一种用于治疗2型糖尿病的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
110. 一种用于治疗葡萄糖耐量减低的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
111. 一种用于治疗血脂异常的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
112. 一种用于治疗冠心病的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
113. 一种用于治疗肝脂肪变性的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
114. 一种用于治疗β-阻断剂中毒的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
115. 一种用于抑制胃肠道蠕动的方法，所述抑制可用于与采用X射线、CT扫描和NMR扫描等技术进行的胃肠道检查结合，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
116. 一种用于治疗或预防低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
117. 一种用于治疗或预防胰岛素诱导性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
118. 一种用于治疗或预防反应性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
119. 一种用于治疗或预防糖尿病性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
120. 一种用于治疗或预防非糖尿病性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
121. 一种用于治疗或预防空腹低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
122. 一种用于治疗或预防药物诱发性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
123. 一种用于治疗或预防胃旁路术诱发性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
124. 一种用于治疗或预防妊娠期低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
125. 一种用于治疗或预防酒精诱发性低血糖的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
126. 一种用于治疗或预防胰岛素瘤的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
127. 一种用于治疗或预防Von Girkes病的方法，所述方法包括将任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的实施方案1-51中任一个的化合物给予有需要的患者。
本发明的其它实施方案涉及以下用途：
128. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽在制备药物中的用途。
129. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽在制备用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖症的药物中的用途。
130. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽在制备用于以下方面的药物中的用途：延迟或防止2型糖尿病的疾病进展、治疗肥胖症或预防体重超重、减少食物摄取、增加能量消耗、减轻体重、延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展；延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展；调节食欲；引起饱满感；防止成功减轻体重后体重反弹；增加能量消耗；治疗与体重超重或肥胖症有关的疾病或状态；治疗贪食症；治疗暴食症；治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT、血脂异常、冠心病、肝脂肪变性；治疗β-阻断剂中毒；抑制胃肠道蠕动，所述抑制可用于与采用X射线、CT扫描和NMR扫描等技术进行的胃肠道检查结合。
131. 实施方案1-51中任一个的胰高血糖素肽在制备用于治疗或预防以下疾病的药物中的用途：低血糖、胰岛素诱导性低血糖、反应性低血糖、糖尿病性低血糖、非糖尿病性低血糖、空腹低血糖、药物诱发性低血糖、胃旁路术诱发性低血糖、妊娠期低血糖、酒精诱发性低血糖、胰岛素瘤和Von Girkes病。
本发明的其它实施方案涉及以下方面：
132. 一种胰高血糖素肽(1-29)激动剂或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中第25位的氨基酸残基即X25代表His、Arg、Lys、Ile、Phe、Leu、Ala、Met、Pro、Cys、Asn、Val、Gly、Ser、Gln、Tyr、Asp、Glu、Thr或(p)Tyr。
133. 实施方案132的胰高血糖素肽，所述胰高血糖素肽包含下式[I]氨基酸序列：
His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-X25-Leu-Met-Asn-Thr[I]。
134. 选自以下的实施方案132-133的化合物：
[Glu21,Arg25,Leu27]胰高血糖素
H-H S Q G T F T S D Y S K Y L D S R R A Q E F V Q R L L N T-OH
和
[(0-磷酸)Tyr25,Leu27]胰高血糖素
Figure 270758DEST_PATH_IMAGE009
135. 实施方案132-134中任一个的胰高血糖素肽，其中X25代表His、Arg、Lys、Glu、Asp、Gly、Pro、Tyr或(p)Tyr。
136. 实施方案132的胰高血糖素肽，其中X25代表Arg或Tyr。
137. 实施方案132的胰高血糖素肽，其中X25代表Arg。
138. 实施方案132的胰高血糖素肽，其中X25代表Tyr。
139. 一种包含实施方案132-133中任一个的肽的药物组合物。
140. 实施方案139的药物组合物，其进一步包含一种或多种其它治疗活性化合物或物质。
141. 适于胃肠外给予的实施方案139-140中任一个的药物组合物。
142. 用于治疗的实施方案132-133中任一个的肽。
143. 实施方案132-133中任一个的肽用于制备药物的用途。
144. 实施方案132-133中任一个的肽在制备用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖症的药物中的用途。
145. 实施方案132-133中任一个的肽在制备用于以下方面的药物中的用途：延迟或防止2型糖尿病的疾病进展、治疗肥胖症或预防体重超重、减少食物摄取、增加能量消耗、减轻体重、延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展；延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展；调节食欲；引起饱满感；防止成功减轻体重后体重反弹；治疗与体重超重或肥胖症有关的疾病或状态；治疗贪食症；治疗暴食症；治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT；抑制胃肠道蠕动，所述抑制可用于与采用X射线、CT扫描和NMR扫描等技术进行的胃肠道检查结合。
146.实施方案132-133中任一个的肽在制备用于治疗或预防以下疾病的药物中的用途：低血糖、胰岛素诱导性低血糖、反应性低血糖、糖尿病性低血糖、非糖尿病性低血糖、空腹低血糖、药物诱发性低血糖、胃旁路术诱发性低血糖、妊娠期低血糖、酒精诱发性低血糖、胰岛素瘤和Von Girkes病。
本文所用术语“治疗”、“医疗”及其其它的变化形式是指为了对抗病况(例如疾病或病症)而对患者进行管理和护理。该术语欲包括对患者所患的指定病况的全面治疗，例如给予所述活性化合物以减轻其症状或并发症，延迟疾病、病症或病况的进展，治愈或消除疾病、病症或病况和/或预防病况，其中预防要理解为为了对抗疾病、病况或病症而对患者进行管理和护理，并包括给予所述活性化合物以预防症状或并发症的发作。待治疗的患者优选为哺乳动物，特别是人类，但狗、猫、牛、马、绵羊、山羊或猪等其它动物的治疗也落入本发明的范围。。
术语“肥胖症”意指脂肪组织过量。当能量摄取超过能量消耗时，过量的卡路里便保存在脂肪组织中，如果这种净的正平衡持续，便导致肥胖症，即体重平衡有两个组分，任一端(摄取或消耗)异常都可导致肥胖症。在这种情况下，最好把肥胖症视为引起健康风险的任何程度的过量脂肪组织。正常和肥胖个体之间的区别可能仅仅是近似的，但肥胖症引起的健康风险或许随脂肪组织增加而持续。然而，在本发明的情况下，体重指数(BMI =体重(千克)除以身高(米)的平方)超过25的个体被视为肥胖。
在本发明的用途和方法的某些实施方案中，本发明的化合物可与不止一种上述合适的其它治疗活性化合物或物质组合给予或施用，例如与以下活性化合物或物质组合：二甲双胍和磺脲例如格列本脲；磺脲和阿卡波糖；那格列奈和二甲双胍；阿卡波糖和二甲双胍；磺脲、二甲双胍和曲格列酮；胰岛素和磺脲；胰岛素和二甲双胍；胰岛素，二甲双胍和磺脲；胰岛素和曲格列酮；胰岛素和洛伐他汀，等等。
本文所用氨基酸缩写词具有下列含义：
Aib 2-氨基异丁酸
Ala 丙氨酸
Asn 天冬酰胺
Asp 天冬氨酸
Arg 精氨酸
Cit 瓜氨酸
Cys 半胱氨酸
Gln 谷氨酰胺
Glu 谷氨酸
Gly 甘氨酸
His 组氨酸
Hyp 4-羟脯氨酸
Ile 异亮氨酸
Leu 亮氨酸
Lys 赖氨酸
Met 甲硫氨酸
Orn 鸟氨酸
Phe 苯丙氨酸
Pro 脯氨酸
Ser 丝氨酸
Thr 苏氨酸
Tyr 酪氨酸
p(Tyr)
Trp 色氨酸
Val 缬氨酸
以D-开始、接着三字母代码的氨基酸缩写词，例如D-Ser、D-His等，是指相应氨基酸的D-对映异构体，例如D-丝氨酸，D-组氨酸等。
药物组合物
含有本发明化合物的药物组合物可通过常规技术制备，例如以下文献所述方法：Remington's Pharmaceutical Sciences ，1985或Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995。
正如已提及的一样，本发明的一个方面是提供包含以下列浓度存在的本发明化合物的药物制剂：约0.01 mg/mL-约25 mg/mL，例如约1mg/mL-约10mg/mL和约1mg/mL-约5mg/mL，且其中所述制剂的pH为2.0-10.0。药物制剂可包含以约0.01 mg/ml-约50 mg/ml的浓度存在的本发明的化合物，且其中所述制剂的pH为2.0-10.0。所述制剂还可包含缓冲系统、防腐剂、等渗剂、螯合剂、稳定剂和表面活性剂。在本发明的一个实施方案中，所述药物制剂是含水制剂，即包含水的制剂。这类制剂通常是溶液剂或混悬剂。在本发明的又一个实施方案中，药物制剂是含水溶液剂。术语“含水制剂”定义为包含至少50% w/w水的制剂。同样地，术语“含水溶液剂”定义为包含至少50% w/w水的溶液剂，术语“含水混悬剂”定义为包含至少50% w/w水的混悬剂。
在又一个方面，本发明涉及包含本发明化合物的含水溶液和缓冲剂的药物制剂，其中所述化合物以0.1 mg/ml或更高的浓度存在，且其中所述制剂的pH为约2.0-约10.0。
在又一个方面，本发明涉及包含本发明化合物的含水溶液和缓冲剂的药物制剂，其中所述化合物以0.1 mg/ml或更高的浓度存在，且其中所述制剂的pH为约7.0-约8.5。
在本发明的另一个实施方案中，制剂的pH选自2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9和10.0。优选制剂的pH离本发明化合物的等电点至少1 pH单位，甚至更优选制剂的pH离本发明化合物的等电点至少2 pH单位。
在本发明的又一个实施方案中，缓冲剂选自乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟基甲基)-氨基甲烷、hepes、N-二(羟乙基)甘氨酸、曲辛(tricine)、苹果酸、琥珀酸盐、马来酸、富马酸、酒石酸、天冬氨酸或其混合物。这些具体缓冲剂的每一种都构成本发明的备选实施方案。
在本发明的又一个实施方案中，所述制剂还包含药学上可接受的防腐剂。在本发明的又一个实施方案中，防腐剂选自苯酚、邻甲酚、间甲酚、对甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯基乙醇、苯甲醇、乙醇、三氯叔丁醇和硫柳汞(thiomerosal)、溴硝丙二醇、苯甲酸、咪脲、氯己定(chlorohexidine)、脱氢醋酸钠、氯甲酚、对羟基苯甲酸乙酯、苄索氯铵、氯苯甘醚(chlorphenesine) (3(对氯苯氧基)丙烷-1,2-二醇)或其混合物。在本发明的又一个实施方案中，防腐剂以0.1 mg/ml-30 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，防腐剂以0.1 mg/ml-20 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，防腐剂以0.1 mg/ml-5 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，防腐剂以5 mg/ml-10 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，防腐剂以10 mg/ml-20 mg/ml的浓度存在。这些具体防腐剂的每一种都构成本发明的备选实施方案。药物组合物中防腐剂的使用为技术人员所熟知。为方便起见，作出对Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995的引用。
在本发明的又一个实施方案中，所述制剂还包含等渗剂。在本发明的又一个实施方案中，等渗剂选自盐(例如氯化钠)、糖或糖醇、氨基酸(例如L-甘氨酸、L-组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)、糖醇(例如甘油(丙三醇)、1,2-丙二醇(丙二醇)、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇)、聚乙二醇(例如PEG400)或其混合物。可以使用任何糖例如单糖、二糖或多糖，或水溶性葡聚糖，包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、普鲁兰(pullulan)、糊精、环糊精、可溶性淀粉、羟乙基淀粉和羧甲基纤维素-Na。在一个实施方案中，糖添加剂为蔗糖。糖醇定义为具有至少一个-OH基团的C4-C8烃，包括例如甘露醇、山梨糖醇、肌醇、半乳糖醇(galacititol)、卫矛醇、木糖醇和阿拉伯糖醇。在一个实施方案中，糖醇添加剂为甘露醇。上述糖或糖醇可单独或组合使用。用量无固定限制，只要糖或糖醇可溶于液体制剂，并且不会不利地影响采用本发明的方法达到的稳定作用即可。在一个实施方案中，糖或糖醇浓度介于约1 mg/ml和约150 mg/ml之间。在本发明的又一个实施方案中，等渗剂以1 mg/ml-50 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，等渗剂以1 mg/ml-7 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，等渗剂以8 mg/ml-24 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，等渗剂以25 mg/ml-50 mg/ml的浓度存在。这些具体等渗剂的每一种构成本发明的备选实施方案。药物组合物中等渗剂的使用为技术人员所熟知。为方便起见，作出对Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995的引用
在本发明的又一个实施方案中，所述制剂还包含螯合剂。在本发明的又一个实施方案中，螯合剂选自乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸和天冬氨酸的盐及其混合物。在本发明的又一个实施方案中，螯合剂以0.1mg/ml-5mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，螯合剂以0.1mg/ml-2mg/ml的浓度存在。在本发明的又一个实施方案中，螯合剂以2mg/ml-5mg/ml的浓度存在。这些具体螯合剂的每一种都构成本发明的备选实施方案。药物组合物中螯合剂的使用为技术人员所熟知。为方便起见，作出对Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995的引用。
在本发明的又一个实施方案中，所述制剂还包含稳定剂。药物组合物中稳定剂的使用为技术人员所熟知。为方便起见，作出对Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995的引用。
更具体地说，本发明的组合物是稳定的液体药物组合物，其治疗活性组分包括在液体药物制剂保存期间可能出现聚集体形成的多肽。所谓“聚集体形成”意指导致寡聚体形成的多肽分子间的物理相互作用，该寡聚物可保持可溶性，或者是从溶液中沉淀出的大的可见聚集物。所谓“保存期间”意指液体药物组合物或制剂一旦制备，不会立即给予受试者。更确切地讲，在制备后，将其包装以液体形式、冷冻结态，或以稍后复溶成液体形式的干燥形式或以适于给予受试者的其它形式保存。所谓“干燥形式”意指通过以下方法干燥的液体药物组合物或制剂：冷冻干燥(即冻干；参见例如Williams和Polli (1984) J. Parenteral Sci. Technol. 38:48-59)、喷雾干燥(参见Masters (1991)，载于Spray-Drying Handbook (第5版；Longman Scientific and Technical, Essez, U.K.)，第491-676页；Broadhead等(1992) Drug Devel. Ind. Pharm. 18:1169-1206；以及Mumenthaler等(1994) Pharm. Res. 11:12-20)或风干(Carpenter和Crowe (1988) Cryobiology 25:459-470；及Roser (1991) Biopharm. 4:47-53)。在液体药物组合物保存期间多肽的聚集体形成可不利地影响该多肽的生物活性，导致药物组合物的治疗效能损失。此外，聚集体形成可引起其它问题，例如当使用输注系统给予含有多肽的药物组合物时管道、滤膜或泵的阻塞。
本发明的药物组合物还可包含足以减少组合物保存期间多肽的聚集体形成的量的氨基酸碱(amino acid base)。所谓“氨基酸碱”意指氨基酸或氨基酸的组合，其中任何给定的氨基酸以其游离碱的形式或以其盐的形式存在。如果使用氨基酸的组合，全部氨基酸可以其游离碱形式存在，全部可以其盐形式存在，或者一些可以其游离碱形式存在，而另一些以其盐形式存在。在一个实施方案中，用于制备本发明组合物的氨基酸是具有带电荷的侧链的氨基酸，例如精氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和谷氨酸。在一个实施方案中，用于制备本发明组合物的氨基酸是甘氨酸。具体氨基酸(例如甲硫氨酸、组氨酸、咪唑、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸和其混合物)的任何立体异构体(即L或D)或这些立体异构体的组合都可存在于本发明的药物组合物中，只要具体的氨基酸以其游离碱形式或其盐形式存在。在一个实施方案中，使用L-立体异构体。本发明的组合物还可用这些氨基酸的类似物配制。所谓“氨基酸类似物”意指天然存在的氨基酸的衍生物，其产生减少在本发明的液体药物组合物保存期间的多肽聚集体形成的所需效果。合适的精氨酸类似物包括例如氨基胍、鸟氨酸和N-单乙基L-精氨酸，合适的甲硫氨酸类似物包括乙硫氨酸和丁硫氨酸(buthionine)，合适的半胱氨酸类似物包括S-甲基-L半胱氨酸。与其它氨基酸一样，将氨基酸类似物以其游离碱形式或其盐形式掺入组合物中。在本发明的又一个实施方案中，以足以防止或延迟蛋白质聚集的浓度，使用氨基酸或氨基酸类似物。
在本发明的又一个实施方案中，当作为治疗剂起作用的多肽是包含至少一个易受氧化的甲硫氨酸残基时，可加入甲硫氨酸(或其它含硫氨基酸或氨基酸类似物)以抑制甲硫氨酸残基氧化成甲硫氨酸亚砜。所谓“抑制”意指甲硫氨酸氧化物质(oxidized species)随时间的推移发生的最小积聚。抑制甲硫氨酸氧化导致多肽以其适合的分子形式得到更大的保留。可以使用甲硫氨酸的任何立体异构体(L、D或其混合物)。要加入的量应是足以抑制甲硫氨酸残基氧化的量，使得甲硫氨酸亚砜的量可被管理机构接受。这通常意味着组合物含有不超过约10%-约30%的甲硫氨酸亚砜。这一般可通过加入甲硫氨酸，使得所加入的甲硫氨酸与甲硫氨酸残基之比的范围为约1:1-约1000:1、例如10:1-约100:1来实现。
在本发明的又一个实施方案中，所述制剂还包含选自高分子量聚合物或低分子量化合物的稳定剂。在本发明的又一个实施方案中，稳定剂选自聚乙二醇(例如PEG 3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧基/羟基纤维素或其衍生物(例如HPC、HPC-SL、HPC-L和HPMC)、环糊精、含硫物质如单硫代甘油、巯基乙酸和2-甲基硫代乙醇和不同的盐(例如氯化钠)。这些具体稳定剂的每一种都构成本发明的备选实施方案。
药物组合物还可包含其它稳定剂，其进一步提高其中的治疗活性多肽的稳定性。对本发明特别有益的稳定剂包括但不限于甲硫氨酸和EDTA，其保护多肽免受甲硫氨酸氧化；以及非离子型表面活性剂，其保护多肽免于与冻融或机械剪切有关的聚集。
在本发明的又一个实施方案中，所述制剂还包含表面活性剂。在本发明的又一个实施方案中，表面活性剂选自洗涤剂、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化(polyglycolyzed)甘油酯、乙酰化单甘油酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物(例如泊洛沙姆例如Pluronic® F68、泊洛沙姆188和407、Triton X-100)、聚氧乙烯化山梨糖醇酐脂肪酸酯、星形PEO、聚氧乙烯和聚乙烯衍生物例如烷基化和烷氧基化衍生物(吐温例如Tween-20、Tween-40、Tween-80和Brij-35)、聚氧乙烯羟基硬脂酸酯、单甘油酯或其乙氧基化衍生物、二甘油酯或其聚氧乙烯衍生物、醇类、甘油、凝集素类和磷脂类(例如磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、双磷脂酰甘油和鞘磷脂)、磷脂衍生物(例如二棕榈酰磷脂酸)和溶血磷脂衍生物(例如棕榈酰溶血磷脂酰-L-丝氨酸和乙醇胺、胆碱、丝氨酸或苏氨酸的1-酰基-sn-甘油-3-磷酸酯)及溶血磷脂酰胆碱和磷脂酰胆碱的烷基、烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)衍生物，例如溶血磷脂胆碱的月桂酰和肉豆蔻酰衍生物、二棕榈酰磷脂酰胆碱以及极性头基团(即胆碱类、乙醇胺类、磷脂酸、丝氨酸类、苏氨酸类、甘油、肌醇)的修饰物，和带正电的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血磷脂酰丝氨酸和溶血磷脂酰苏氨酸以及甘油磷脂类(例如脑磷脂)、甘油糖脂类(例如吡喃型半乳糖苷(galactopyransoide))、鞘糖脂类(例如神经酰胺、神经节苷脂)、十二烷基磷酸胆碱、鸡蛋溶血卵磷脂、梭链孢酸衍生物(例如牛磺二氢梭链孢酸钠等)、长链脂肪酸及其C6-C12盐(例如油酸和辛酸)、酰基肉碱类及衍生物、赖氨酸、精氨酸或组氨酸的Nα-酰化衍生物、或者赖氨酸或精氨酸的侧链酰化衍生物、包括赖氨酸、精氨酸或组氨酸与中性或酸性氨基酸的任何组合的二肽的Nα-酰化衍生物、包括一个中性氨基酸与两个带电氨基酸的任何组合的三肽的Nα-酰化衍生物、DSS (多库酯钠，CAS登记号[577-11-7])、多库酯钙，CAS登记号[128-49-4])、多库酯钾，CAS登记号[7491-09-0])、SDS (十二烷基硫酸钠或月桂基硫酸钠)、辛酸钠、胆酸或其衍生物、胆汁酸及其盐、甘氨酸或牛磺酸缀合物、熊脱氧胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠、N-十六烷基-N,N-二甲基-3-铵基-1-丙磺酸盐、阴离子(烷基-芳基-磺酸盐类)一价表面活性剂、两性离子表面活性剂(例如N-烷基-N,N-二甲基铵基-1-丙磺酸盐、3-氯酰氨基-1-丙基二甲基铵基-1-丙磺酸盐、阳离子表面活性剂(季铵碱) (例如溴化十六烷基三甲铵、氯化十六烷基吡啶
Figure 769184DEST_PATH_IMAGE011
)、非离子型表面活性剂(例如十二烷基β-D-吡喃葡萄糖苷)、poloxamine (例如Tetronic's)，其为衍生自依次将环氧丙烷和环氧乙烷加成至乙二胺的四官能嵌段共聚物，或者所述表面活性剂可选自咪唑啉衍生物或其混合物。这些具体表面活性剂的每一种都构成本发明的备选实施方案。
药物组合物中表面活性剂的使用为技术人员所熟知。为方便起见，作出对Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995的引用。
其它成分也可存在于本发明的药物制剂中。这类其它成分可包括润湿剂、乳化剂、抗氧化剂、填充剂、张度改性剂(tonicity modifier)、螯合剂、金属离子、油性溶媒、蛋白质(例如人血清白蛋白、明胶或蛋白质)和两性离子(例如氨基酸，例如甜菜碱、牛磺酸、精氨酸、甘氨酸、赖氨酸和组氨酸)。当然，这类其它成分不应不利地影响本发明药物制剂的整体稳定性。
可将含有本发明化合物的药物组合物在若干部位给予需要这类治疗的患者，所述部位例如在局部部位例如皮肤和粘膜部位，在避开吸收的部位例如在动脉中、静脉中、心脏中给予，以及在涉及吸收的部位，例如在皮肤中、在皮肤下、在肌肉中或在腹部给予。
可以通过若干给药途径将本发明的药物组合物给予需要这类治疗的患者，例如舌部、舌下、口腔、口内、口服、胃肠中、经鼻、经肺(例如通过细支气管和肺泡或其组合)、表皮、真皮、透皮、阴道、直肠、眼(例如通过结膜)、输尿管和胃肠外给药。
可以若干剂型给予本发明的组合物，例如作为溶液剂、混悬剂、乳剂、微乳剂、复合型乳剂、泡沫剂、药膏剂、糊剂、硬膏剂(plaster)、软膏剂、片剂、包衣片剂、冲洗剂、胶囊剂(例如硬明胶胶囊剂和软明胶胶囊剂)、栓剂、直肠胶囊剂、滴剂、凝胶剂、喷雾剂、散剂、气雾剂、吸入剂、滴眼剂、眼用软膏剂、眼用冲洗剂、阴道栓剂、阴道冲洗剂、阴道软膏剂、注射用溶液剂、原位转化溶液剂(in situ transforming solution) (例如原位胶凝剂、原位沉降剂、原位沉淀剂、原位结晶剂)、输液剂和植入剂。
本发明的组合物还可例如通过共价、疏水和静电相互作用与药物载体、药物递送系统和高级药物递送系统复合或连接，以进一步提高化合物的稳定性，提高生物利用度，提高溶解度，降低不良作用，实现本领域技术人员熟知的按时疗法(chronotherapy)及提高患者依从性或其任何组合。载体、药物递送系统和高级药物递送系统的实例包括但不限于聚合物(例如纤维素和衍生物)、多糖(例如葡聚糖和衍生物、淀粉和衍生物)、聚乙烯醇、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯聚合物、聚乳酸和聚乙醇酸及其嵌段共聚物、聚乙二醇、载体蛋白质例如白蛋白、凝胶剂(例如热胶凝系统、例如本领域技术人员熟知的嵌段共聚物系统)、胶束、脂质体、微球体、纳米颗粒、液晶及其分散体、脂质-水系统的相特性领域技术人员熟知的L2相及其分散体、聚合物胶束、复合型乳剂、自乳化剂、自微乳化剂、环糊精和其衍生物以及树枝状大分子(dendrimer)。
使用全部为本领域众所周知的装置，例如定量吸入器、干粉吸入器和喷雾器，本发明的组合物可用于固体剂、半固体剂、粉剂和溶液剂的制剂中以用于经肺给予化合物。
本发明的组合物特别可用于控释、缓释、延长释放、迟释和慢释药物递送系统的制剂。更具体地讲(但不限于)组合物可用于本领域技术人员众所周知的胃肠外控释系统和缓释系统(两个系统均导致给药次数减少许多倍)的制剂。甚至更优选为皮下给药的控释和缓释系统。在不限制本发明范围的情况下，有用的控释系统和组合物的实例为水凝胶、油性凝胶、液晶、聚合物胶束、微球体、纳米粒。
可用于本发明组合物的产生控释系统的方法包括但不限于结晶、缩合、共结晶、沉淀、共沉淀、乳化、分散、高压匀浆、包囊化、喷雾干燥、微胶囊化、凝聚、相分离、溶剂蒸发以产生微球、挤出和超临界流体法。对以下文献作出整体参考：Handbook of Pharmaceutical Controlled Release (Wise, D.L.主编. Marcel Dekker, New York, 2000)和Drug and the Pharmaceutical Sciences 第99卷: Protein Formulation and Delivery (MacNally, E.J.主编Marcel Dekker, New York, 2000)。
胃肠外给药可以用注射器(任选笔型(pen-like)注射器)，通过皮下、肌内、腹膜内或静脉内注射进行。或者，胃肠外给药可以用输注泵进行。另外的选择是用于以经鼻或经肺喷雾剂的形式给予本发明化合物的组合物，其可为溶液剂或混悬剂。作为又一个选择，含有本发明化合物的药物组合物还可适于透皮给药例如通过无针注射或由贴剂、任选离子电渗贴剂或者跨黏膜(例如口腔)给药。
术语“稳定化制剂”是指物理稳定性提高、化学稳定性提高或物理和化学稳定性提高的制剂。
本文所用关于蛋白制剂的术语“物理稳定性”是指由于蛋白暴露至热-机械应力和/或与破坏稳定的界面和表面(例如疏水表面和界面)的相互作用，所述蛋白形成蛋白的生物失活和/或不溶性聚集体的趋势。在将装于合适的容器(例如药筒或小瓶)中的制剂于不同温度下暴露于机械/物理应力(例如搅拌)中达各种时期后，通过目视检查和/或浊度测定评估水性蛋白制剂的物理稳定性。制剂的目视检查在黑暗背景下于聚焦强光中进行。制剂的浊度通过将浊度分级为例如0至3等级的目视评分来表征(未呈现混浊的制剂对应于目视评分0，而在日光中呈现可视混浊的制剂对应于目视评分3)。当其在日光中呈现可视混浊时，将制剂分类为关于蛋白聚集的物理不稳定。或者，可通过技术人员熟知的简易浊度测量来评估制剂的浊度。水性蛋白制剂的物理稳定性还可通过使用蛋白构象状态的光谱剂或光谱探测物来评估。所述探测物优选为优先结合至蛋白的非天然构象异构体的小分子。蛋白结构的小分子光谱探测物的一个实例为硫磺素T。硫磺素T为已广泛用于检测淀粉状原纤维的荧光染料。在存在原纤维以及也可能的其它蛋白构型下，硫磺素T当结合至原纤维蛋白形式时在约450 nm下产生新的激发极值并在约482 nm下发射增强。未结合的硫磺素T在所述波长下基本无荧光。
其它小分子可用作蛋白结构从天然状态向非天然状态变化的探测物。例如优先结合至蛋白的外露疏水补丁(hydrophobic patch)的“疏水补丁”探测物。所述疏水补丁通常埋藏于处于其天然状态的蛋白三级结构之内，但随着蛋白开始解折叠或变性而暴露。这些小分子光谱探测物的实例为芳族疏水染料，例如蒽(antrhacene)、吖啶、菲咯啉等。其它光谱探测物为金属-氨基酸络合物，例如疏水氨基酸(例如苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸和缬氨酸)的钴金属络合物等。
本文所用关于蛋白制剂的术语“化学稳定性”是指蛋白结构的化学共价变化，所述变化导致形成与天然蛋白结构相比具有潜在较小生物效力和/或潜在增加的免疫原性的化学降解产物。根据天然蛋白的类型和性质以及所述蛋白所暴露的环境，可形成各种化学降解产物。如本领域技术人员所熟知，几乎不可能完全避免化学降解的消除，并且在储存和使用蛋白制剂期间常常见到化学降解产物的量不断增加。多数蛋白容易发生脱酰胺作用，其中谷氨酰胺酰或天冬酰胺酰残基的侧链酰胺基被水解而形成游离羧酸的过程。其它降解途径涉及高分子量转化产物的形成，其中两个或更多个蛋白分子通过转酰胺基作用和/或二硫化物相互作用相互共价结合，导致形成共价结合的二聚体、寡聚体和多聚体降解产物(Stability of Protein Pharmaceuticals, Ahern. T.J. 和 Manning M.C., Plenum Press, New York 1992)。可提及作为化学降解另一种变体的氧化(例如甲硫氨酸残基的氧化)。可通过在暴露至不同环境条件(可通常通过例如增加温度来加速降解产物的形成)下之后的各个时间点测量化学降解产物的量，来评估蛋白制剂的化学稳定性。通常通过利用各种色谱技术(例如SEC-HPLC和/或RP-HPLC)根据分子大小和/或电荷将降解产物分离来测量各种降解产物的量。
因此，如上文所概述，“稳定化制剂”是指物理稳定性增加、化学稳定性增加或物理和化学稳定性增加的制剂。总之，制剂在使用和保存(依照推荐的使用和保存条件)期间必须稳定直至达到失效期。
在本发明的一个实施方案中，包含本发明化合物的药物制剂的使用稳定期超过6周，且保存稳定期超过3年。
在本发明的另一个实施方案中，包含本发明化合物的药物制剂的使用稳定期超过4周，且保存稳定期超过3年。
在本发明的又一个实施方案中，包含本发明化合物的药物制剂的使用稳定期超过4周，且保存稳定期超过2年。
在本发明的另一个实施方案中，包含所述化合物的药物制剂的使用稳定期超过2周，且保存稳定期超过2年。
在本发明另一实施方案中，包含所述化合物的药物制剂的使用稳定期超过2周，且保存稳定期超过1年。
在本发明另一实施方案中，包含所述化合物的药物制剂的使用稳定期超过2周，且保存稳定期超过6个月。
可将含有本发明的胰高血糖素肽的药物组合物胃肠外给予需要这类治疗的患者。胃肠外给药可以用注射器(任选笔型注射器)，通过皮下、肌内或静脉内注射进行。或者，胃肠外给药可以用输注泵进行。另一个选择是用于以经鼻或经肺喷雾剂的形式给予胰高血糖素肽的组合物，其可为粉剂或液体剂。作为又一个选择，本发明的胰高血糖素肽还可透皮给药例如由贴剂、任选离子电渗贴剂或者跨黏膜(例如口腔)给药。
因此，本发明的胰高血糖素肽的注射用组合物可采用制药业的常规技术制备，所述常规技术包括适当时溶解并混合各成分，以得到所需的最终产物。
按照本发明的一个实施方案，提供适于通过注射给药的组合物形式的胰高血糖素肽。这类组合物可以是即用型注射用溶液剂，或者可以是一定量的固体组合物，例如冻干产物，在可注射前，必须将其溶于溶剂中。
本发明的胰高血糖素肽可用于治疗各种疾病。待使用的具体胰高血糖素肽和用于任何患者的最佳剂量水平将取决于待治疗的疾病和各种因素，包括所用具体肽衍生物的功效、患者的年龄、体重、体力活动和饮食，取决于与其它药物的可能组合，并取决于病例的严重程度。建议由本领域技术人员来确定用于每个个体患者的本发明胰高血糖素肽的剂量。
用本发明化合物的治疗还可与例如选自以下的第二种或更多种药理活性物质结合：抗糖尿病药、抗肥胖症药、食欲调节药、抗高血压药、用于治疗和/或预防由糖尿病导致的或与糖尿病有关的并发症的药物和用于治疗和/或预防由肥胖症导致的或与肥胖症有关的并发症和病症的药物。在本文中，表述“抗糖尿病药”包括用于治疗和/或预防胰岛素抵抗和其中胰岛素抵抗是病理生理机制的疾病的化合物。
这些药理活性物质的实例为：胰岛素、GLP-1激动剂、磺脲(例如甲苯磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪和格列齐特)、双胍类例如二甲双胍、美格列奈类、葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖(acorbose))、胰高血糖素拮抗剂、DPP-IV (二肽基肽酶-IV)抑制剂、参与刺激糖异生和/或糖原分解的肝酶的抑制剂、葡萄糖摄取调节剂、噻唑烷二酮类例如曲格列酮和环格列酮、改进脂质代谢的化合物例如抗高血脂药如HMG CoA抑制剂(他汀类)、减少食物摄取的化合物、RXR激动剂和作用于β细胞的依赖于ATP的钾通道的药物例如格列本脲、格列吡嗪、格列齐特和瑞格列奈；消胆胺、考来替泊、氯贝丁酯、吉非贝齐、洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、普罗布考、右旋甲状腺素、那格列奈(neteglinide)、瑞格列奈；β-阻断剂例如阿普洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔和美托洛尔、ACE (血管紧张素转化酶)抑制剂例如贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、alatriopril、喹那普利和雷米普利；钙通道阻断剂例如硝苯地平、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地尔硫
Figure 506196DEST_PATH_IMAGE012
和维拉帕米及α-阻断剂例如多沙唑嗪、乌拉地尔、哌唑嗪和特拉唑嗪；CART (可卡因-苯丙胺调节的转录物)激动剂、NPY (神经肽Y)拮抗剂、MC4 (黑皮质素 4)激动剂、食欲肽拮抗剂、TNF (肿瘤坏死因子)激动剂、CRF (促肾上腺皮质素释放因子)激动剂、CRF BP (促肾上腺皮质素释放因子结合蛋白)拮抗剂、尿皮质素激动剂、β3激动剂、MSH (促黑素细胞激素)激动剂、MCH (黑素细胞集群激素)拮抗剂、CCK (缩胆囊素)激动剂、5-羟色胺再摄取抑制剂、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂、混合的5-羟色胺和去甲肾上腺素能化合物、5HT (5-羟色胺)激动剂、铃蟾肽激动剂、甘丙肽拮抗剂、生长激素、生长激素释放化合物、TRH (促甲状腺素(thyreotropin)释放激素)激动剂、UCP 2或3 (解偶联蛋白质2或3)调节剂、瘦蛋白激动剂、DA激动剂(溴隐亭、doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制剂、RXR (类视黄醇X受体)调节剂、TR β激动剂；组胺H3拮抗剂。
应理解的是，本发明的化合物与一种或多种上述化合物和任选一种或多种其它药理活性物质的任何合适组合都视为属于本发明的范围。
通过下列实施例对本发明作进一步说明，然而，所述实施例不得解释为限制保护的范围。上述说明书和下列实施例中公开的特征单独地和以其任何组合可为以其不同形式实现本发明的材料。
实施例
缩略词表
DCM:　二氯甲烷
DIC: 　二异丙基碳二亚胺
Fmoc:　9-芴基甲基氧基羰基
HOAt:　1-羟基-7-氮杂苯并三唑
HPLC:　高效液相色谱法
LCMS:　液相色谱质谱联用法
MeCN　乙腈
NMP: 　N-甲基吡咯烷酮
RP:　　反相
RP-HPLC:　反相高效液相色谱法
RT: 　室温
Rt:　　保留时间
SPPS:　固相肽合成
TFA: 　三氟乙酸
TIPS: 　三异丙基甲硅烷
UPLC:　超高效液相色谱法
通用方法
该部分涉及用于合成树脂结合的肽的方法(SPPS方法，包括氨基酸脱保护的方法、从树脂上切割肽的方法及其纯化的方法)以及用于检测和表征所得肽的方法(LCMS和UPLC方法)。
通用方法
所用的Fmoc保护的氨基酸衍生物是推荐的标准物：Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(BOC)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Trp(BOC)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH和Fmoc-Val-OH，由例如Anaspec、Bachem、Iris Biotech或NovabioChem供应。
用基于Fmoc的化学在Protein Technologies (Tucson, AZ 85714 U.S.A.)的Prelude 固相肽合成仪上实施SPPS。用于制备C端羧酸的合适树脂是预装柱的可获自NovabioChem的低负载Wang树脂(例如低载fmoc-Thr(tBu)-Wang树脂，LL，0.27 mmol/g)。用于合成带C-末端酰胺的胰高血糖素类似物的合适树脂为可自Matrix-Innovation获得的PAL-ChemMatrix树脂。用Boc保护N-末端α氨基酸。
用含20%哌啶的NMP达2 x 3分钟来实现Fmoc-脱保护。偶联化学法是含DIC/HOAt/三甲基吡啶的NMP。向树脂中依次加入氨基酸/HOAt溶液(0.3 M/0.3 M在NMP中，以3-10倍摩尔过量)、相同摩尔当量的DIC (3 M在NMP中)和三甲基吡啶(3 M在NMP中)。例如，在下列标度反应中，每次偶联使用以下量的0.3 M氨基酸/HOAt溶液：标度/ml，0.05 mmol/1.5 mL、0.10 mmol/3.0 mL、0.25 mmol/7.5 mL。偶联时间为2 x 30分钟或1 x 240分钟。
从树脂上切割
在合成后，将树脂用DCM洗涤，通过用TFA/TIS/水(95/2.5/2.5)处理2-3小时，接着用乙醚沉淀，将肽从树脂上切割下来。沉淀物用乙醚洗涤。
纯化和定量测定
将粗制肽溶于水和MeCN的合适混合物(例如水/MeCN (4:1))中，在含有C18-硅胶的柱上，通过反相制备型HPLC (Waters Deltaprep 4000或Gilson)纯化。用递增梯度的含有0.1% TFA的MeCN/水进行洗脱。相关流分用分析型HPLC或UPLC检查。将含有纯的靶标肽的流分混合，减压浓缩。分析所得溶液(HPLC、LCMS)，使用化学发光氮特异性HPLC检测器(Antek 8060 HPLC-CLND)或者通过测量280 nm下的UV吸收，定量测定产物。将产物分装入玻璃小瓶中。将小瓶用Millipore玻璃纤维预滤器盖住。冻干得到肽三氟乙酸酯，为白色固体。
用于检测和表征的方法
LCMS 方法
LCMS
在由Waters Acquity UPLC系统和来自Micromass的LCT Premier XE质谱仪组成的装置上实施LCMS。将UPLC泵与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A: 0.1%甲酸/水
B: 0.1%甲酸/乙腈
通过注射合适体积(优选2-10µl)的样品到柱上在RT实施分析，用A和B的梯度洗脱所述柱。
UPLC条件、检测仪设置和质谱仪设置为：
柱：Waters Acquity UPLC BEH, C-18, 1.7µm, 2.1mm x 50mm
梯度：4分钟(或者8分钟)期间以0.4ml/min线性5% - 95%乙腈
检测：214 nm (来自TUV (可调UV检测仪)的模拟输出)
MS电离模式：API-ES
扫描：100-2000 amu (或者500-2000 amu)，步进0.1 amu
UPLC 方法
方法 05_B5_1
UPLC (方法05_B5_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，40℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：0.2 M Na2SO4、0.04 M H3PO4、10% CH3CN (pH 3.5)
B：70% CH3CN、30% H2O
使用下列线性梯度：60% A，40% B至30% A，70% B，在8分钟内，流速为0.35 ml/分钟。
方法 04_A3_1
UPLC (方法04_A3_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，40℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：90% H2O、10% CH3CN、0.25 M碳酸氢铵
B：70% CH3CN、30% H2O
使用下列线性梯度：75% A，25% B至45% A，55% B，在16分钟内，流速为0.35 ml/分钟。
方法 04_A4_1
UPLC (方法04_A4_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。使用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，40℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：90% H2O、10% CH3CN、0.25 M碳酸氢铵
B：70% CH3CN、30% H2O
使用下列线性梯度：65% A，35% B至25% A，65% B，在16分钟内，流速为0.35 ml/分钟。
方法 08_B2_1
UPLC (方法08_B2_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，40℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：99.95%H2O、0.05% TFA
B：99.95% CH3CN、0.05% TFA
使用下列线性梯度：95% A，5% B至40% A，60% B，在16分钟内，流速为0.40 ml/分钟。
方法 08_B4_1
UPLC (方法08_B4_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，40℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：99.95%H2O、0.05% TFA
B：99.95% CH3CN、0.05% TFA
使用下列线性梯度：95% A，5% B至5% A，95% B，在16分钟内，流速为0.40 ml/分钟。
方法 10_B4_2
UPLC (方法08_B4_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。使用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，50℃，收集214nm和254nm的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：99.95%H2O、0.05% TFA
B：99.95% CH3CN、0.05% TFA
使用下列线性梯度：95% A，5% B至5% A，95% B，在12分钟内，流速为0.40 ml/分钟。
方法 10_B5_2
UPLC (方法08_B4_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。使用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，50℃，收集214nm和254nm的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：70% MeCN、30%水
B：0.2M Na2SO4、0.04 M H3PO4、10% MeCN，pH 2.25
使用下列线性梯度：1分钟内40% A，7分钟内40--> 70% A，流速为0.40 ml/分钟。
方法 05_B7_1
UPLC (方法05_B7_1):利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130Å，1.7um，2.1 mm x 150 mm柱，40℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：0.2 M Na2SO4、0.04 M H3PO4、10% CH3CN (pH 3.5)；
B：70% CH3CN、30% H2O。
使用下列线性梯度：80% A，20% B至40% A，60% B，在8分钟内，流速为0.40 ml/分钟。
方法 04_A9_1
UPLC (方法04_A9_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18, C18, 1.7um , 2.1 mm x 150 mm柱，60℃，收集214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：90% H2O/10% CH3CN中的200 mM Na2SO4 + 20 mM Na2HPO4 + 20mM NaH2PO4，pH 7.2
B：70% CH3CN、30% H2O
使用下列阶段梯度：90% A，10% B至80% A，20% B，在3分钟内；80%A, 20% B到50% A , 50% B，在17分钟内；流速为0.40 ml/分钟。
实施例 1
[Glu21,Arg25,Leu27]胰高血糖素
H-H S Q G T F T S D Y S K Y L D S R R A Q E F V Q R L L N T-OH
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 08_B2_1：Rt = 8.595分钟；98%纯度。
UPLC 08_B4_1：Rt = 5.829分钟；100%纯度。
LCMS：m/z = 1150.1 (M+3H)3+, 862.9 (M+4H)4+, 690.5 (M+5)5+
实施例 2
[(O-膦酰基)Tyr25,Leu27]胰高血糖素
Figure 904947DEST_PATH_IMAGE013
用Fmoc-Tyr(PO(NMe2)2)-OH (Novabiochem)基本上按照通用方法所述制备了该肽。通过将水加入到自树脂切割后的切割混合物至总计10% (V/V)，来脱保护受保护的(O-膦酰基)-酪氨酸。让TFA-水混合物保持16小时以确保去掉对磷酸酪氨酸的保护。
UPLC 08_B2_1：Rt = 9.0
UPLC 08_B4_1：Rt = 6.1
UPLC 05_B5_1：Rt = 1.2
LCMS：m/z = 1174.499 ((M/3)+3)；881.11 ((M/4)+4)。
实施例 3
将胰高血糖素类似物[Glu21,Arg25,Leu27]胰高血糖素(实施例1)溶于1 µM ThT、10 mM甘氨酰甘氨酸缓冲液pH 4.0中到250 µM浓度。对该样品进行ThT原纤维形成测定，在37℃剧烈振荡(960 rpm)下孵育45小时。在这些条件下未出现ThT发射。此外，在完成该测定后的溶液中发现与初始样品同样浓度的胰高血糖素类似物[Glu21,Arg25,Leu27]胰高血糖素(实施例1)，即回收率为100%。
在同样测定中检测了表2中所示的类似物。以延迟时间和回收率在最后两列中描述结果。对于任何类似物均未观察到原纤维形成。
实施例 4
将胰高血糖素类似物[(O-膦酰基)Tyr25,Leu27]胰高血糖素(实施例2)在1 µM ThT, 10 mM Hepes缓冲液pH 7.5中溶解至250 µM。为了比较，将290 µM胰高血糖素、50 mM甘氨酸pH 2.5和1.45 mM胰高血糖素、50 mM甘氨酸pH 2.5 (二者都含有1 µM ThT)包括在ThT原纤维形成测定中。胰高血糖素类似物[(O-膦酰基)Tyr25,Leu27]胰高血糖素(实施例2)在原纤维形成前有大约16小时的延迟时间。这显著长于天然胰高血糖素，其在290 µM和1.45 mM时分别具有大约1.5小时和不到半小时的延迟时间。
实施例 5
[Arg25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 334792DEST_PATH_IMAGE014
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 08_B2_1：Rt = 8.5分钟；98%纯度
UPLC 04_A9_1：Rt = 5.1分钟；100%纯度
LCMS：m/z = 1145.2 (M+3H)3+, 859.1 (M+4H)4+, 687.5 (M+5)5+
实施例 6
[Glu21,Arg25,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
Figure 576417DEST_PATH_IMAGE015
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 08_B2_1：Rt = 8.8分钟；97%纯度
UPLC 04_A9_1：Rt = 10,0分钟；100%纯度
LCMS：m/z = 1140.9 (M+3H)3+, 855.9 (M+4H)4+, 684.9 (M+5)5+
实施例 7
[His25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 726907DEST_PATH_IMAGE016
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 08_B2_1：Rt = 8.2分钟；96%纯度
UPLC 04_A9_1：Rt = 9.2分钟；96%纯度
LCMS：m/z = 1139.2 (M+3H)3+, 854.6 (M+4H)4+, 683.9 (M+5)5+
实施例 8
[Lys25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 581681DEST_PATH_IMAGE017
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 05_B7_1：Rt = 5.3分钟；98%纯度
UPLC 04_A9_1：Rt = 8.6分钟；100%纯度
LCMS：m/z = 1139.2 (M+3H)3+, 854.6 (M+4H)4+, 683.9 (M+5)5+
实施例 9
[Glu21,Lys25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 916848DEST_PATH_IMAGE018
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 05_B7_1：Rt = 5.4分钟；98%纯度
UPLC 04_A9_1：Rt = 9.3分钟；100%纯度
LCMS：m/z = 1140.6 (M+3H)3+, 855.7 (M+4H)4+, 684.7 (M+5)5+
实施例 10
[Glu15,Glu21,Arg25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 521136DEST_PATH_IMAGE019
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 05_B7_1：Rt = 5.2分钟；100%纯度
UPLC 04_A9_1：Rt = 7.9分钟；98%纯度
LCMS：m/z = 1154.5 (M+3H)3+, 866.1 (M+4H)4+, 693.1 (M+5)5+
实施例 11
[Arg25,Leu27,Glu28]-胰高血糖素
Figure 475316DEST_PATH_IMAGE020
基本上按照通用方法所述制备了该肽。
UPLC 05_B7_1：Rt = 5.9分钟；100%纯度
LCMS：m/z = 1150.8 (M+3H)3+, 863.3 (M+4H)4+
药理学方法
测定 (I)
胰高血糖素活性
将胰高血糖素受体克隆至具有膜结合的cAMP生物传感器(ACTOne™)的HEK-293细胞中。将细胞(14000个/孔)在384孔板中温育(37℃，5% CO2)过夜。次日，使细胞负载只分布于胞质中的钙反应性染料。加入有机阴离子转运蛋白抑制剂丙磺舒以防止染料离开细胞。加入PDE抑制剂以防止形成的cAMP降解。将板置于FLIPRTETRA中，加入胰高血糖素类似物。6分钟后收集终点数据。胞内cAMP的增加与胞质中钙浓度的增加成比例。当钙结合染料时，便产生荧光信号。用Prism5计算EC50值。
表1. 受体结合的体外数据
Figure 848660DEST_PATH_IMAGE021
表2. 受体结合的体外数据和物理稳定性数据
Figure 620307DEST_PATH_IMAGE022
测定 (II)
用于评价蛋白质制剂的物理稳定性的 ThT 原纤维形成测定
肽的低物理稳定性可导致淀粉状原纤维形成，其是所观察到的样品中的井然有序的线状大分子结构，最终导致凝胶形成。传统上通过目视检查样品来测量。然而，这种测量是非常主观的，取决于观测者。因此，应用小分子指示物探测物要有利得多。硫磺素T (ThT)便是这类探测物，当与原纤维结合时，具有截然不同的荧光特性[Naiki等(1989) Anal. Biochem. 177, 244-249; LeVine (1999) Methods. Enzymol. 309, 274-284]。
可用下列表达式，通过S形曲线描述原纤维形成的时程[Nielsen等(2001) Biochemistry 40，6036-6046]：
　方程式(1)
式中，F是时间t时的ThT荧光。常数t0是达到最大荧光50%所需要的时间。描述原纤维形成的两个重要参数是通过t0 - 2τ计算的延迟时间和表观速率常数kapp 1/τ。
Figure 328817DEST_PATH_IMAGE024
肽的部分折叠的中间体的形成被视作原纤维形成的一般引发机制。少量的这些中间体核形成模板，更多的中间体可在其上装配，并继续进行原纤维形成。延迟时间相当于其中建立核的临界质量的间隔，而表观速率常数是原纤维本身形成的速率。
在每次测定前新鲜制备样品。图例中描述了各样品的组成。用适当量的浓NaOH和HCl调节样品的pH至所需值。将硫磺素T自储液在H2O中加入样品中至终浓度1 μM。
将200 μl等分量的样品置于96孔微量滴定板(Packard OptiPlateＴＭ-96，白色聚苯乙烯)中。通常，将各样品一式4份或8份(相当于一种试验条件)置于一列孔中。将板用Scotch Pad (Qiagen)密封。
在规定温度下温育，振荡，在Fluoroskan Ascent FL荧光读板仪(Thermo Labsystems)中进行ThT荧光发射的测量。调节温度至所需值，通常为30℃或37℃。在无振荡(无外部物理应力)或用调节至960 rpm、幅度为1 mm的定轨振荡将板温育。采用通过444 nm滤光片的激发和通过485 nm滤光片发射的测量，进行荧光测量。
每轮一开始都是将板在测定温度下温育10分钟。在所需时间内每20分钟对板进行测量。在每次测量之间，按照所述将板振荡和加热。
在ThT测定法完成后，合并各样品的一式4份或8份，在18℃下以20000 rpm离心30分钟。上清液通过0.22 µm过滤器过滤，将等分量转移至HPLC小瓶中。
使用合适的标准品作为参比，通过反相HPLC测定初始样品中和经过滤的上清液中的肽浓度。过滤样品的浓度占初始样品浓度的百分比报告为回收率。
将测量点存于Microsoft Excel格式用于进一步处理，利用GraphPad Prism绘制曲线并拟合。在缺乏原纤维时得自ThT的背景发射可忽略。数据点通常为4或8个样品的平均值，用标准差误差棒表示。在同一曲线中仅提供同一实验(即同一板中的样品)中得到的数据以确保实验之间原纤维形成的相对测量。
可将数据集拟合至方程式(1)。然而，可通过目视检查曲线，识别ThT荧光显著高于背景水平的时间点，来评价原纤维形成前的延迟时间。

Claims (15)

1.一种包含SEQ ID 1的胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中所述胰高血糖素肽第25位的氨基酸残基X25代表His、Lys、Ile、Leu、Ala、Met、Cys、Asn、Val、Ser、Gln、Asp、Glu、Thr或(p)Tyr。
2.权利要求1的胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中所述第25位的氨基酸残基即X25代表His、Lys或(p)Tyr。
3.一种包含SEQ ID 1的胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中所述胰高血糖素肽第25位的氨基酸残基X25代表His、Arg、Lys、Ile、Leu、Ala、Met、Cys、Asn、Val、Ser、Gln、Asp、Glu、Thr或(p)Tyr；其中所述胰高血糖素肽为胰高血糖素受体的激动剂。
4.权利要求3的胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或前药，其中所述第25位的氨基酸残基即X25代表His、Arg、Lys或(p)Tyr。
5.前述权利要求中任一项的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽与人胰高血糖素(1-29)相比包含至多10个氨基酸残基取代。
6.权利要求5的胰高血糖素肽，其中所述取代位于氨基酸位置X3、X20、X24、X16、X17、X18、X21、X27、X28和/或X29。
7.选自以下的前述权利要求中任一项的胰高血糖素肽：
[Glu21,Arg25,Leu27]胰高血糖素
H-H S Q G T F T S D Y S K Y L D S R R A Q E F V Q R L L N T-OH；
[(0-磷酸)Tyr25,Leu27]胰高血糖素
Figure DEST_PATH_IMAGE001
；
[Arg25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 125042DEST_PATH_IMAGE002
；
[Glu21,Arg25,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
；
[His25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 370079DEST_PATH_IMAGE004
；
[Lys25,Leu27]-胰高血糖素
Figure DEST_PATH_IMAGE005
；
[Glu21,Lys25,Leu27]-胰高血糖素
Figure 946554DEST_PATH_IMAGE006
；
[Glu15,Glu21,Arg25,Leu27]-胰高血糖素
Figure DEST_PATH_IMAGE007
和
[Arg25,Leu27,Glu28]-胰高血糖素
Figure 171124DEST_PATH_IMAGE008
。
8.包含权利要求1-7中任一项的肽的药物组合物。
9.权利要求8的药物组合物，其进一步包含一种或多种其它治疗活性化合物或物质。
10.适于胃肠外给予的权利要求9-10中任一项的药物组合物。
11.用于治疗的权利要求1-7中任一项的胰高血糖素肽。
12.权利要求1-7中任一项的胰高血糖素肽在制备药物中的用途。
13.权利要求1-7中任一项的胰高血糖素肽在制备用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖症的药物中的用途。
14.权利要求1-7中任一项的胰高血糖素肽在制备用于以下方面的药物中的用途：延迟或防止2型糖尿病的疾病进展、治疗肥胖症或预防体重超重、减少食物摄取、增加能量消耗、减轻体重、延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展；延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展；调节食欲；引起饱满感；防止成功减轻体重后体重反弹；治疗与体重超重或肥胖症有关的疾病或状态；治疗贪食症；治疗暴食症；治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT、血脂异常、冠心病、肝脂肪变性，治疗β-阻断剂中毒，抑制胃肠道蠕动，所述抑制可用于与采用X射线、CT扫描和NMR扫描等技术进行的胃肠道检查结合。
15.权利要求1-7中任一项的胰高血糖素肽在制备用于治疗或预防以下疾病的药物中的用途：低血糖、胰岛素诱导性低血糖、反应性低血糖、糖尿病性低血糖、非糖尿病性低血糖、空腹低血糖、药物诱发性低血糖、胃旁路术诱发性低血糖、妊娠期低血糖、酒精诱发性低血糖、胰岛素瘤和Von Girkes病。
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