CN102905558A

CN102905558A - 免疫系统印记的营养组合物

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Publication number: CN102905558A
Application number: CN2011800255838A
Authority: CN
Inventors: K·本阿默; L·M·J·尼普斯; A·J·纳奥塔; J·加森
Original assignee: Nutricia NV
Current assignee: Nutricia NV
Priority date: 2010-05-25
Filing date: 2011-05-25
Publication date: 2013-01-30
Anticipated expiration: 2031-05-25
Also published as: HUE042621T2; EP2575504B1; PL2575504T3; WO2011149345A1; EP2575504A1; TR201902529T4; CN102905558B; WO2011149335A1; ES2711255T3

Abstract

本发明涉及短双歧杆菌在减少以后生命中哮喘和哮喘样症状的发生以及减少哮喘药物使用中的用途。

Description

免疫系统印记的营养组合物

技术领域

本发明涉及包括益生菌的婴儿营养物，其对免疫系统，尤其是哮喘，具有的超越所述组合物已有给予时间的长期效果；并且/或者其可避免哮喘的药物治疗。

背景技术

在过去的数十年里，西方国家中变应性疾病的发病率已经上升了。这种上升被认为是微生物暴露减少，导致肠道微生物群的组成改变的结果。已经发现，肠道微生物群组成在具有特应性和没有特应性的儿童之间不同。

已经进行了几个随机对照试验，以研究用益生菌（具有免疫调节效应的活微生物）对肠道微生物群进行处理是否能降低特应性皮炎（AD）的严重度。患有AD的儿童在儿童后期有大约40%的几率发生哮喘，相比之下一般人群中为5-10%。因为AD经常是所谓的特应性历程(allegicmarch)的起始点，益生菌可以使这些儿童中的特应性历程停止。但是，到目前为止，研究在高危儿童中用益生菌预防变应性疾病的人试验发现，对以后生的哮喘或哮喘样症状的发病率没有效果，并且不具有超过给予所述组合物的时间的长期效果。

在具有高变应性疾病风险的健康婴儿中研究益生菌效果的两项预防性研究没有显示出对1-2岁的反复喘鸣发病率的效果（Taylor et al,2007,J Allerg Clin Immunol 119:184-191;Abrahamsson et al,2007,JAllerg Clin Immunol 119:1174-1180），并且一项研究甚至显示在益生菌组中喘鸣支气管炎的反复发作（≥5）的发病率增加（Kopp et al,2008,Pediatrics 121:e850-e.856）。在高危婴儿中的其他两项预防性研究中，一项用益生菌，一项用合生素，在4-5岁年龄测定哮喘发病率，发现在治疗组和安慰剂组之间没有不同（Kalliomaki et al,2003,Lancet 361:1869-1871,Kuitinen et al,2009,J Allerg Clin Immunol 123:335-341）。在Kukkonen et al,2007J Allergy Clin Immunol.2007Jan;119(1):192-8中，在2岁年龄时，除了IgE阳性婴儿的亚组，在总的变应性疾病上没有观察到效果；Arslanoglu et al,2008,J.Nutr.138:1091–1095，公开了在生命早期给予包括益生菌的组合物对反复喘鸣的累积发生率最多到2岁年龄的效果。

US 2006/233772公开了在围产期使L GG来预防后代哮喘。公开了小鼠实验。

WO 2008/153391公开了非消化性寡糖混合物和灭活的短双歧杆菌（B.breve）用于包括治疗和/或预防哮喘在内的用途。

发明内容

发明人意外地发现，在婴儿期被给予包括短双歧杆菌的益生菌组合物的儿童，在以后生命中的随访过程中检查时，比那些在婴儿期被给予安慰剂的儿童具有统计上显著更低的哮喘样症状发病率，并且使用更少的哮喘药物。这些结果指示，这种具体的益生菌组合物对以后生命中的哮喘发生有预防效果。

具体实施方式

因此，本发明涉及一种用于避免人受试者使用哮喘药物治疗的方法，所述方法包括给予所述人受试者包括短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）的营养组合物。

换句话说，本发明涉及包括短双歧杆菌的组合物在制备用于避免使用哮喘药物治疗的营养组合物中的用途。

本发明还可以表述为一种用于避免使用哮喘药物治疗的包括短双歧杆菌的营养组合物。

除了用于避免使用哮喘药物治疗之外或者另外单独，在一个实施方案中，本发明方法、用途或组合物用于避免给予哮喘药物。

本发明还涉及一种预防在人受试者超过12月龄时所述人受试者有选自支气管高反应性、喘鸣、杂音呼吸和罗音呼吸的哮喘或哮喘样症状的方法，所述方法包括当所述人受试者年龄在0-12个月时，给予所述人受试者包括短双歧杆菌的营养组合物持续至少4周的时间。

换句话说，本发明涉及包括短双歧杆菌的组合物在制备营养组合物中的用途，所述营养组合物用于预防在人受试者超过12月龄时所述受试者有选自支气管高反应性、喘鸣、杂音呼吸和罗音呼吸的哮喘或哮喘样症状，所述预防是通过当所述人受试者年龄在0-12个月时，给予所述人受试者所述包括短双歧杆菌的营养组合物持续至少4周的时间来实现的。

本发明还可以表述为一种用于预防在人受试者超过12月龄时所述受试者有选自支气管高反应性、喘鸣、杂音呼吸和罗音呼吸的哮喘或哮喘样症状的包括短双歧杆菌的营养组合物，所述预防是通过当所述人受试者年龄在0-12个月时，给予所述人受试者所述包括短双歧杆菌的营养组合物持续至少4周的时间来实现的。

在一个实施方案中，本发明涉及包括短双歧杆菌的组合物在制备营养组合物中的用途，其中所述营养组合物被给予年龄在0-12个月，更优选0-6个月，的人受试者，用于预防在所述人受试者超过16月龄时所述人受试者的选自支气管高反应性、喘鸣、杂音呼吸和罗音呼吸的哮喘或哮喘样症状。

换句话说，本发明涉及一种包括短双歧杆菌的营养组合物，所述营养组合物可被给予或用于给予年龄在0-12个月，更优选0-6个月，的人受试者，用于预防在所述人受试者超过16月龄时所述受试者的选自支气管高反应性、喘鸣、杂音呼吸和罗音呼吸的哮喘或哮喘样症状。

在一个实施方案中，本发明涉及包括短双歧杆菌的组合物在制备营养组合物中的用途，其中所述营养组合物被给予年龄在0-12个月，更优选0-6个月，的人受试者，用于避免或减少在所述人受试者超过16月龄时所述人受试者使用哮喘药物治疗，优选避免或减少给予哮喘药物。

换句话说，本发明涉及一种包括短双歧杆菌的营养组合物，所述营养组合物被给予或用于给予年龄在0-12个月，更优选0-6个月，的人受试者，用于避免或减少在所述人受试者超过16月龄时所述人受试者使用哮喘药物治疗，优选避免或减少给予哮喘药物。

除了用于预防哮喘或哮喘样症状之外或者另外单独，在一个实施方案中，本发明方法、用途或组合物用于，优选与未接受所述包括短双歧杆菌的营养组合物的受试者相比，减少所述哮喘样症状。

短双歧杆菌

本发明组合物包括短双歧杆菌。短双歧杆菌是革兰氏阳性的、厌氧的、分枝的杆状细菌。与短双歧杆菌ATCC 15700的典型株相比，本发明的短双歧杆菌优选具有至少95%的16S rRNA序列的同一性，更优选为至少97%的同一性（Stackebrandt&Goebel,1994,Int.J.Syst.Bacteriol.44:846-849）。优选的短双歧杆菌菌株是从健康的人乳喂养婴儿的粪便中分离的菌株。一般地，这些可以从乳酸菌生产商购买，但是它们也可以直接从粪便分离、鉴定、表征和生产。根据一个优选的实施方案，本发明的组合物含有至少一种选自短双歧杆菌Bb-03(Rhodia/Danisco)、短双歧杆菌M-16V(Morinaga)、短双歧杆菌R0070(Institute Rosell,Lallemand)、短双歧杆菌BR03(Probiotical)、短双歧杆菌BR92(Cell Biotech)、DSM 20091、LMG 11613、YIT4065、FERMBP-6223和CNCM 1-2219的短双歧杆菌。最优选地，所述短双歧杆菌选自短双歧杆菌M-16V和短双歧杆菌CNCM 1-2219。

本发明的组合物优选含有，以干重计每克本发明的组合物中，10²到10¹³个菌落形成单位（cfu）的短双歧杆菌，优选为10⁴到10¹²，更优选为10⁵到10¹⁰，最优选为，以干重计每克本发明的组合物中，10⁵到1×10⁹cfu的短双歧杆菌。根据本发明的短双歧杆菌的剂量优选，以10²到10¹³，更优选10⁵到10¹²，最优选10⁸到5×10¹⁰个菌落形成单位（cfu）的每日剂量给予。优选地，所述组合物包括，每100ml中，10³到10¹³cfu的短双歧杆菌，更优选每100ml中10⁶到10¹¹cfu的短双歧杆菌，最优选每100ml中10⁷到10¹⁰cfu的短双歧杆菌。

本发明的组合物优选包括有活短双歧杆菌。或者，本发明的组合物优选包括相当于如上所述cfu的量的灭活短双歧杆菌。所述cfu的当量可以通过如下方法来确定，在包括灭活短双歧杆菌的产品（即婴儿配方物）中用WO 2005/039319中公开的短双歧杆菌探针和引物进行5'核酸酶测定，并将其与从可比较产品（例如标准婴儿配方物）获得的校准曲线相比较，其中所述可比较产品中已添加已知cfu量的（优选干的）活短双歧杆菌。所述干的活双歧杆菌可以按如上所述购得。短双歧杆菌细胞可以通过本领域已知的方法灭活，所述方法包括加热处理步骤（包括灭菌、巴斯德消毒法、UHT处理）、辐射（UV）、用氧气处理、用杀菌剂例如乙醇处理、声裂解、应用超高压、高压匀浆和使用细胞破碎机。优选地，所述短双歧杆菌被热灭活。灭活短双歧杆菌的存在有利地提供许多产品技术上的益处，包括增加贮藏期限、减少细菌污染发生率、降低产品的后酸化、改善剂量控制和改善复原便利性。

本发明的短双歧杆菌优选未被遗传修饰。对于安全性和消费者接受，遗传修饰是不利的。此外，遗传修饰是昂贵的并且通常消极地影响菌株的生长性质。

非消化性寡糖

优选地，本发明的组合物包括聚合度（DP）在2-250，更优选3-60，之间的非消化性寡糖。非消化性寡糖进一步支持对以后生命中哮喘和对哮喘药物治疗的所述预防性效果。这些效果是协同的。本发明中使用的术语“寡糖”优选是指聚合度（DP）为2-250，优选2-100，更优选2-60，的糖。可以理解，在本发明的上下文中，具有确定范围DP的糖可以包括具有不同平均DP的糖的混合物，例如，如果DP为2-100的寡糖被包括在本发明的组合物中，这可以包括，含有平均DP为2-5、平均DP为50-70和平均DP为7-60的寡糖的组合物。本发明中使用的术语“非消化性寡糖”是指在肠中不被或只部分被存在于人上消化道（小肠和胃）中的酸或消化酶的作用消化、但是可以被人肠内菌丛发酵的寡糖。例如，蔗糖、乳糖、麦芽糖和麦芽糖糊精被认为是可消化的。例如，低聚半乳糖、低聚果糖被认为是非消化性寡糖。

所述非消化性寡糖优选选自低聚果糖（例如菊粉）、低聚半乳糖（例如反式低聚半乳糖或低聚β半乳糖）、低聚葡糖（例如龙胆低聚糖、黑曲霉寡糖和环糊精寡糖）、低聚阿拉伯糖、低聚甘露糖、低聚木糖、低聚岩藻糖、低聚阿拉伯糖半乳糖、低聚葡糖甘露糖、低聚半乳糖甘露糖、含唾液酸的寡糖和糖醛酸寡糖。优选地，所述组合物包括与非消化性寡糖结合的阿拉伯胶。

优选地，本发明的组合物包括低聚果糖和/或低聚半乳糖，更优选低聚半乳糖，最优选反式低聚半乳糖。在一个优选的实施方案中，所述组合物包括反式低聚半乳糖和低聚果糖的混合物。优选地，本发明的组合物包括DP为2-10，优选平均DP为2-10，的低聚半乳糖，和/或DP为2-60，优选平均DP为2-60，优选平均DP为10-60，优选平均DP为20-60，的低聚果糖。优选地，所述组合物包括重量比为20到0.5，更优选20到1，最优选12到2，的低聚半乳糖和低聚果糖。

所述低聚半乳糖优选选自反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖（LNT）、乳糖-N-新四糖（neo-LNT）、岩藻糖基乳糖、岩藻糖基化的LNT和岩藻糖基化的neo-LNT。在一个特别优选的实施方案中，本发明的方法包括给予反式低聚半乳糖（[半乳糖]_n-葡萄糖；其中n为1-60的整数，即2、3、4、5、6、…、59、60；优选地，n选自2、3、4、5、6、7、8、9或10）。例如，有以Vivinal^TM(Borculo Domo Ingredients,Netherlands)商标销售的反式低聚半乳糖（TOS）。优选地，所述反式低聚半乳糖中的糖是β连接的。

本发明的组合物优选地含有低聚果糖。本文使用的术语“低聚果糖”是指包括至少2个β连接的果糖单元的链的非消化性多糖，其DP为2-250，优选7-100，更优选20-60。优选使用菊粉。例如，有商品名为的菊粉(Orafti)。本发明的低聚果糖的平均DP优选为至少7，更优选至少10，优选100以下。所使用的低聚果糖优选具有（大部分）以β(2→1)键连接的果糖单元。低聚果糖的其他术语包括菊粉、果糖多聚糖、多聚果糖、果聚糖和寡果糖。本发明的组合物优选包括DP为2-200的低聚果糖。

优选地，所述组合物，每100ml中，包括80mg到2g非消化性寡糖，更优选每100ml中包括150mg到1.50g非消化性寡糖，甚至更优选每100ml中包括300mg到1g非消化性寡糖。以干重计，所述组合物优选包括0.25wt.%到20wt.%，更优选0.5wt.%到10wt.%，甚至更优选1.5wt.%到7.5wt.%，的非消化性寡糖。较低量的非消化性寡糖在预防以后生命中的哮喘方面不太有效，而过高的量将导致胃气胀和腹部不适的副作用。

优选地，所述组合物包括以干重计每克10²到10¹³cfu的短双歧杆菌和0.25wt.%到20wt.%的非消化性寡糖，更优选以干重计每克10⁵到10¹⁰cfu的短双歧杆菌和0.5wt.%到10wt.%的非消化性寡糖。优选地，所述组合物每100ml中包括10³到10¹³cfu的短双歧杆菌和80mg到2g的非消化性寡糖，更优选为每100ml中包括10⁶到10¹¹cfu的短双歧杆菌和300mg到1g的非消化性寡糖。

优选地，所述营养组合物包括i）每克干重中1×10⁵cfu到1×10¹⁰cfu的短双歧杆菌，更优选1×10⁶cfu到1×10¹⁰cfu；并且包括ii）以干重计0.5到20wt.%的低聚半乳糖，更优选0.5到10wt.%的低聚半乳糖，或iii）以干重计0.05到2wt.%的低聚果糖，更优选0.1到1wt.%的低聚果糖，或者ii）和iii）两者。

组合物

本发明的组合物优选经肠内给予，更优选口服给予。

本发明的组合物优选为营养配方物，优选婴儿配方物。本发明的组合物可以有利地用作婴儿的完全营养物。本发明的组合物优选包括脂质、蛋白质和碳水化合物，并优选以液体形式给予。本发明包括干的组合物，例如粉末，其附有关于将所述干的组合物（尤其是营养配方物）与适合的液体（例如水）混合的说明书。

本发明有利地涉及一种组合物，其中所述脂质提供总热量的5%到50%，所述蛋白质提供总热量的5%到50%，所述碳水化合物提供总热量的15%到90%。优选地，在本发明的组合物中，所述脂质提供总热量的35%到50%，所述蛋白质提供总热量的7.5%到12.5%，所述碳水化合物提供总热量的40%到55%。为计算所述蛋白质成分占总热量的%，需要计算蛋白质、肽和氨基酸提供的总能量。

本发明的组合物优选包括选自动物脂质（人脂质除外）和植物脂质的至少一种脂质。优选地，本发明的组合物包括植物脂质与至少一种选自鱼油、动物油、藻油、真菌油和细菌油的油的结合物。包括非消化性寡糖的本发明的组合物不包括人乳。在所述营养制剂中使用的蛋白质组分优选选自非人的动物蛋白质（优选乳蛋白，优选来自牛乳的蛋白质）、植物蛋白质(优选大豆蛋白质和/或稻谷蛋白质)、游离氨基酸以及它们的混合物。本发明的组合物优选包括酪蛋白、乳清、水解的酪蛋白和水解的乳清蛋白。优选地，所述蛋白质包括完整蛋白质，更优选完整牛乳清蛋白和/或完整牛酪蛋白。因为本发明的组合物优选适合患有变态反应的婴儿使用，所述蛋白质优选选自水解的乳蛋白，更优选水解的乳清蛋白。

所述液体营养组合物优选具有0.1到2.5kcal/ml的热量密度，甚至更优选0.5到1.5kcal/ml，的热量密度，最优选为0.6到0.8kcal/ml的热量密度。

每天给予的所述营养组合物的量优选为50到2000ml，更优选200到1500ml，最优选400到1000ml。

应用

本发明的婴儿和/或幼儿的营养物已经被发现作为营养物对以下人群尤其有用：早产婴儿；足月婴儿（阴道生产婴儿和剖腹产婴儿）；处于对固体食物适应期的婴儿；具有增加的变应性湿疹、变态反应风险或患有变应性湿疹、变态反应的婴儿和/或幼儿；和/或具有增加的感染风险的婴儿和/或幼儿（例如参加日托中心的婴儿和/或幼儿）或患有感染的婴儿和/或幼儿。本发明对阴道出生的婴儿是尤其有利的。本发明对剖腹产的婴儿尤其有利，这是因为这些婴儿大肠微生物群落受损且以后生命中发生哮喘的风险增加。本发明对阴道出生的婴儿是尤其有利的。本发明对患有变应性湿疹（还称为特应性皮炎、特应性湿疹或变应性皮炎）的婴儿是尤其有利的，这是因为这些婴儿以后生命中发生哮喘的风险增加。

因此，本发明提供了一种为人婴儿和/或幼儿提供营养物的方法，所述方法包括给予所述婴儿和/或幼儿本发明的组合物。优选地，所述婴儿和/或幼儿的年龄为0到36个月，更优选0到18个月，甚至更优选0到12个月，最优选0到6个月。优选地，对哮喘、哮喘药物治疗和哮喘症状的所述效果在以后的生命中，优选当所述人受试者的年龄超过12月时，优选超过16个月时，更优选超过24个月时，更优选超过36个月时，更优选超过5年时。应注意，所述短语“x到y个月”意指所述数字x和y是包括在内的，例如0到12个月意指从受试者出生的第一天起到所述受试者出生后第12个月的最后一天（包括最后一天），因此是从0到12个月。因此“x和y个月之间”意指“x到y个月”。

优选地，本发明的组合物被给予至少4周，更优选至少8周，最优选至少12周，的时间。更短时间的给予会导致以后生命中效果较差。

本发明特别提供了一种如上文所述的组合物，其附有包括陈述的说明书（例如文字材料），其中所述陈述为给予所述组合物（例如给予婴儿）预防以后生命中的哮喘并且/或者减少和/或避免以后生命中的哮喘药物治疗。

哮喘被定义为一种其中支气管（bronchial tube，bronchi）的慢性炎症使所述支气管肿胀并使气管狭窄的病症。哮喘可侵袭所有年龄组，但经常在儿童期开始。它是一种以气喘和喘鸣的反复发作所表征的疾病，其在严重度和频率上因人而异。在个体中，它们可以每小时及每天发生。这种病症是由于肺中的气道的炎症，并影响气道中神经末梢的敏感度，因此它们变得容易发炎。在发作中，所述通道的内层肿胀，导致气道变窄并且减少了进出肺的空气流。

已经确定了哮喘实际发生的几种推测性因素。这些包括患有AD、频繁喘鸣和非感冒造成的喘鸣。因为本研究中包括的所有儿童均有AD，并且发现了这些具体推测性变量的显著组间差异，因此本发明人相信以后生命中的哮喘发病率也会有组间差异。

本发明还可以用于避免或减少哮喘药物治疗，尤其是在以后的生命中。哮喘药物治疗可以包括使用消炎药和支气管扩张药。

消炎药对于大多数患有哮喘的人是最重要的治疗物类型，这是因为这些哮喘药物治疗可持续地预防哮喘发作。类固醇，也称为“可的松”或“皮质甾醇药”，对于患有哮喘的人是一种重要的消炎药物类型。这些哮喘药物治疗可减少气道中的肿胀和粘液产生。结果，气道敏感度降低，对触发物作出反应的可能性降低。潜在的副作用包括治疗突然中断或减少太快时的死亡。还有对感染的检测可能被延误，这是危险的并且可降低应付创伤、外科手术和感染的能力。其他副作用包括痤疮、多毛、矮化生长、食欲增加、体重增加、圆脸、腹痛、血压上升、白内障、口干、瘀伤、疲劳、腿痉挛、出汗增加、念珠菌病（鹅口疮）、发声困难、声嘶、液体潴留、情绪波动、胆固醇增加、骨质疏松、皮肤变薄、糖尿病、白内障和肌无力。

支气管扩张药通过放松紧缩气道的肌肉带减轻哮喘的症状。这种作用迅速地打开气道，让更多的空气进出肺。结果，呼吸改善。支气管扩张药还帮助从肺中清除粘液。当气道打开时，粘液移动更自由，并且可以被更容易地咳出。支气管扩张药包括β-拮抗剂，茶碱和抗胆碱能类。通常的潜在副作用是恶心、呕吐、头痛、神经质、烦躁不安、失眠。β-激动剂的特异性副作用是颤抖、震颤、面红、头痛、心率过快和/或不规则，过度使用可以导致气管痉挛。茶碱的特异性副作用是肠不适、恶心、呕吐、颤抖、腹泻、头痛、失眠、抑郁、心率增加和/或不规则以及腿痉挛。抗胆碱能类的具体副作用是头痛、口干、咳嗽。

在一个实施方案中，本发明涉及避免或减少使用哮喘药物治疗，尤其是使用选自消炎药和支气管扩张药，更尤其是选自β-2激动剂、抗胆碱能药、吸入性皮质甾醇药，的哮喘药物治疗。这是有利的，原因是它避免了由所述药物治疗导致的副作用并且/或者避免了哮喘药物治疗与其他药物治疗的干扰。

因为许多哮喘药物是通过吸入法给予的，所以潜在的副作用是化学挥发剂的使用可以作为眼睛、皮肤或呼吸系统的刺激物并且还可以进入血流并使神经系统迟钝。

因此减少或避免哮喘药物治疗是有利的。

实施例1

招募了90个足月婴儿，年龄为0-7个月，满足特应性皮炎的Hanifin和Rajka标准。准入标准包括特应性皮炎评分系统（SCORAD）得分>15，在加入时未喂食配方物，没有其他重大医学问题，以及在加入前4周不使用益生菌或免疫调节药物。从所有参与者的双亲获得了书面知情同意书。

参与者随机接受含有额外的合生素的基于广泛水解的乳清的配方物（Nutrilon

Nutricia,Zoetermeer，the Netherlands）作为测试组合物，或接受没有合生素的相同配方物作为安慰剂，持续12周的时间。研究者、参加者自己的医师和父母都对所述的治疗分组不知情。在所述干预期开始一年后，参加者返回做随访，这由相同的研究者进行，其仍然对所述治疗分组不知情。在这次访问中，使用验证的调查问卷询问父母关于他们孩子的呼吸症状（咳嗽、呼吸浅短、杂音/罗音呼吸、喘鸣）和药物使用。合生素是由90%低聚半乳糖（来自Vivinal GOS,Borculo）与10%低聚果糖（来自raftilin HP，Orafti）的0.8g/100ml的混合物和1.3×10⁹cfu/100ml的短双歧杆菌M16-V组成。年龄在6个月以下的儿童接受一段配方物(starter formula)。年龄在6个月或超过6个月的儿童接受二段配方物(follow on formula)。配方物按需要供给。

所述随机对照试验的初步结果量度是干预12周后的特应性皮炎严重度的改变。随访时的呼吸结果量度为：1）可预测哮喘的呼吸症状：频繁喘鸣（定义为干预期后≥3次发作）和非感冒造成的喘鸣的发病率，2）当前使用的哮喘药物（β-2激动剂、抗胆碱能药、吸入性皮质甾醇药）。

参数数据用非配对t检验进行分析。非参数数据用Mann-Whitney U检验进行分析。二元数据使用卡方检验（χ²-test）分析，或适当时使用Fisher精确检验（Fisher’s exact test）进行分析，结果表示为95%置信区间（CI）的绝对危险降低（ARR）。对于所有分析均使用SPSS软件（15.0）。

在最初的研究中90个婴儿是随机的，意向性治疗由85个婴儿组成，其中75个（88%）完成了一年的随访评价。所述儿童的基线表征（性别、年龄、SCORAD指数、母乳喂养持续时间、父母哮喘、父母吸烟、宠物、日托、年长兄弟姐妹、干预期后的益生菌使用、哮喘药物的使用、咳嗽、喘鸣和杂音/罗音呼吸）在所述两组之间没有统计上的差异。在12周干预期结束时，由SCORAD量度的特应性皮炎的发生率和严重度在所述两组之间没有显著不同。随访时，测试组的平均年龄为17.5个月（标准差1.6），安慰剂组为17.2个月（标准差1.8）。

测试组和安慰剂组在以后生命中的哮喘样症状发病率和哮喘药物的使用在表1中显示。测试组中频繁喘鸣（干预期后≥3次发作）、非感冒引起的喘鸣和喘鸣和/或非感冒引起的杂音/罗音呼吸的发生率显著地低于安慰剂组（非感冒引起的喘鸣的ARR是显著的，但是χ²-检验的P值是0.056）。在随访时，测试组中使用哮喘药物的儿童显著少于安慰剂组。测试组中新使用哮喘药物者（在随访时使用哮喘药物，但在基线时未使用的儿童）显著少于安慰剂组。

总之，证明了接受短双歧杆菌3个月时间的患有AD的婴儿在一年随访时，哮喘样症状发病率和哮喘药物的使用都低于接受安慰剂的婴儿。这些结果指示了对哮喘样症状和随后的哮喘发生的预防效果。

表1在一年随访时哮喘样症状的发病率和哮喘药物的使用

a干预期后≥3次发作

Claims

1.包括短双歧杆菌的组合物在制备营养组合物中的用途，其中所述营养组合物被给予年龄在0-12个月，更优选0-6个月，的人受试者，用于预防在所述人受试者中超过16月龄时所述人受试者有选自支气管高反应性、喘鸣、杂音呼吸和罗音呼吸的哮喘或哮喘样症状。

2.包括短双歧杆菌的组合物在制备营养组合物中的用途，其中所述营养组合物被给予年龄在0-12个月，更优选为0-6个月，的人受试者，用于避免或减少所述人受试者在超过16月龄时使用哮喘药物治疗。

3.根据权利要求2的用途，其中所述哮喘药物选自β-2激动剂、抗胆碱能物和吸入性皮质甾醇药。

4.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物被给予至少4周，更优选至少8周，的时间。

5.根据前述权利要求任一项的用途，其中被给予所述营养组合物的人受试者患有皮炎和/或湿疹。

6.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物每克干重包括至少1×10⁵cfu的短双歧杆菌。

7.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述短双歧杆菌为短双歧杆菌M16-V。

8.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物还包括选自低聚果糖、低聚半乳糖、低聚葡糖、低聚阿拉伯糖、低聚甘露糖、低聚木糖、低聚岩藻糖、低聚阿拉伯糖半乳糖、低聚葡糖甘露糖、低聚半乳糖甘露糖、包含唾液酸的寡糖和糖醛酸寡糖的非消化性寡糖。

9.根据权利要求8的用途，其中所述营养组合物包括低聚半乳糖和/或低聚果糖。

10.根据权利要求8或9的用途，其中所述营养组合物包括以干重计多于0.25wt.%的非消化性寡糖。

11.根据权利要求8-10任一项的用途，其中所述营养组合物包括

i.每克干重1×10⁵到1×10¹⁰cfu的短双歧杆菌，并且包括

ii.以干重计0.5到20wt.%的低聚半乳糖或

iii.以干重计0.05到2wt.%的低聚果糖

或者ii.和iii.两者。

12.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物包括提供总热量的5%到50%的脂质、提供总热量的5%到50%的蛋白质和提供总热量的15%到90%的碳水化合物。

13.根据前述权利要求任一项的用途，其中每天给予的所述组合物的量为至少50ml。