CN102895438B - 石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,该提取物通过将石菖蒲进行超声提取和阳离子交换树脂解析步骤获得第一部分提取物和对残渣通过有机溶剂提取的第二部分提取物组成,其中超声提取的溶剂为水,超声频率为30-40kHz,阳离子换树脂柱的解析用氢氧化钠水溶液,解析液用盐酸解析,有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。本发明提供的石菖蒲提取物作为防治老年痴呆症疾病的用途具有优异的效果,防治老年痴呆症效果明显,该用途中的石菖蒲提取物的获得方法相比较于其他常规方法也具有优异的效果。

Description

石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途
技术领域
本发明属于药物制备领域,特别是涉及一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途。
背景技术
阿尔茨海默病即所谓的老年痴呆症。是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病,临床表现为认知和记忆功能不断恶化,日常生活能力进行性减退,并有各种神经精神症状和行为障碍。据中国阿尔茨海默病协会2011年的公布调查结果显示,全球有约3650万人患有痴呆症,每七秒就有一个人患上此病,平均生存期只有5.9年,是威胁老人健康的“四大杀手”之一。
老年痴呆根据其病因主要分为脑变性疾病引起的痴呆——阿尔茨海默病性痴呆(又叫老年性痴呆,Alzheimer’s Disease,简称AD)、脑血管病引起的痴呆(血管性痴呆,Vascular Dentia,简称VaD)、混合性痴呆(Mixed Dementia,简称MixD)三大类。其次还包括路易小体痴呆(Dementia with Lewy Bodies,简称DLB),额颞叶痴呆(Frontotemporal Dementia,简称FTD),帕金森病性痴呆(Parkinson’s Disease,简称PD),克罗伊茨费尔特-雅各布病痴呆(Creutzfeldt-Jakob Di sease,简称CJD),正常颅压脑积水性痴呆(NormalPressure Hydrocephalus,简称NPH),韦-科二氏综合征痴呆(Wernicke-Korsakoff Syndrome,简称WKS),由维生素B12、叶酸缺乏所致的痴呆等。
老年痴呆症多起病于老年期,潜隐起病,病程缓慢且不可逆,临床上以智能损害为主。病理改变主要为皮质弥漫性萎缩,沟回增宽,脑室扩大,神经元大量减少,并可见老年斑,神经原纤维结等病变,胆碱乙酰化酶及乙酰胆碱含量显著减少。起病在65岁以前者旧称老年病前期痴呆,或早老性痴呆,多有同病家族史,病情发展较快,颞叶及顶叶病变较显著,常有失语和失用。65岁以上发病者称晚发型痴呆,多为散发,病变发展较慢,研究发现,除了发病年龄早晚有区别外,它们在临床症状和脑病理改变方面明显不同。
目前治疗老年痴呆的药物主要有胆碱酯酶抑制剂,脑血管扩张药,钙拮抗药,防止A β沉积药,α-分泌酶激动剂、β-分泌酶抑制剂、γ-分泌酶抑制剂和调控剂等。这些药物绝大多数为化学合成药物或肽类药物,由于一些化学合成药物在长期服用过程中存在的毒副作用,肽类药物存在的口服生物利用度低、在体内易被水解、选择性不强、分子质量较大而不易通过血脑屏障等缺点,使得它们的研究面临着巨大的挑战。这为开展从天然产物和中草药中发掘具有抗老年性痴呆活性的药物研究提供了一个很好的机会。如:从中草药蛇足石杉中分离所得到的天然产物石杉碱甲(huperzine A)和从石蒜中提取的加兰他敏均是胆碱酯酶的可逆抑制剂,有确切的治疗效果,具有选择性高、毒性低和药效时间长等特点,是目前为止国际上治疗老年痴呆较为理想的候选药物。另外,研究表明γ-分泌酶是决定老年斑形成的关键因素,因此现在的研究多集中于γ-分泌酶抑制剂的设计上。
石菖蒲为我国传统中药,对其抗老年痴呆活性分子机理的研究有重要应用前景,石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)为天南星科菖蒲属植物,异名九节菖蒲(江苏、浙江、江西、湖南)、紫耳、石蜈蚣、臭菖(广东)、水蜈蚣、野韭菜、香草(云南)、夜晚香、回手香、山艾(四川)等,生长于湿地或溪旁石上,主要分布于我国黄河以南各省区。其根茎入药,具有芳香化湿、开窍豁痰、醒神益智的功能,临床广泛用于健忘、中风失语、耳鸣、老年性痴呆等病症。石菖蒲的化学成分的研究比较深入,以挥发油部位研究居多,非挥发部位研究较少,主要包括苯丙素类、萜类、生物碱类、醛酸类、醌酮类、甾醇类、氨基酸类和糖类等化合物。大量的药理学研究表明,石菖蒲对中枢神经、心血管、呼吸和消化等多种系统均具有调节作用,但其发挥药效作用的物质基础一直没有明确,多年来认为石菖蒲主要有效成分是挥发油,故对其研究也集中在挥发油部分,对于其它部位的研究则相对较少。但部分现代药理结果认为,非挥发性组分同样具有良好的作用,也是有效部位之一。因此,石菖蒲的真正有效成分尚缺乏研究。
目前利用石菖蒲防治老年痴呆症主要是通过将石菖蒲作为中药中的一味药来使用,也有利用石菖蒲的提取物制备治疗老年痴呆药物的,例如专利CN101721567B和CN102526383A。
CN101721567B公开了一种石菖蒲提取物的制备方法包括如下步骤:将石菖蒲用水提取,将提取液浓缩得浓缩液,之后上非极性大孔吸附树脂柱,梯度洗脱,洗脱梯度为从水至35%乙醇水溶液,收集15~35%的乙醇水溶液的洗脱液,干燥,即可制得石菖蒲提取物;百分比为体积百分比。
CN102526383A公开了一种石菖蒲水提物,其特征在于所述石菖蒲水提物按照以下方法制备:(1)去挥发油:将石菖蒲与水混合,浸泡1.5~2h,加热至沸腾并保持6h,收集挥发油,收集完毕后冷却,过滤,保存滤液,滤饼加水回流提取1~1.5h,冷却,过滤,合并两次滤液,获得一次滤液,最终所得滤饼为一次滤饼,将一次滤饼干燥,一次滤液即为石菖蒲去挥发油水提液;(2)石油醚提取:将步骤(1)一次滤液用石油醚重复萃取,分别合并有机相和水相,获得一次萃取有机相和一次萃取水相;将步骤(1)一次滤饼用石油醚浸泡1~2h,回流提取1~1.5h,重复提取,过滤,合并重复提取过滤所得滤液,获得二次滤液,重复提取后的滤饼为二次滤饼,二次滤饼干燥,将二次滤液和一次萃取有机相合并,减压浓缩,获得浓缩物,即石油醚提取物;(3)乙酸乙酯提取:将步骤(2)一次萃取水相用乙酸乙酯重复萃取,合并重复萃取的有机相获得二次萃取有机相,重复萃取后最终水相为二次萃取水相;将步骤(2)二次滤饼用乙酸乙酯重复回流提取,过滤,合并重复回流提取滤液,获得三次滤液,重复回流提取最终的滤饼为三次滤饼,三次滤饼干燥,将三次滤液和二次萃取有机相合并,减压浓缩,获得浓缩物,即乙酸乙酯提取物;(4)正丁醇提取:将步骤(3)二次萃取水相用正丁醇重复萃取,合并用正丁醇重复萃取的有机相获得三次萃取有机相,用正丁醇重复萃取最终余下的水相为三次萃取水相;将步骤(3)三次滤饼用正丁醇重复回流提取,过滤,用正丁醇重复回流提取的滤液为四次滤液,用正丁醇重复回流提取最终余下的滤饼为四次滤饼,四次滤饼干燥,将四次滤液和三次萃取有机相合并,减压浓缩,获得浓缩物,即正丁醇提取物;(5)乙醇提取:将步骤(4)四次滤饼用乙醇重复回流提取,过滤,合并用乙醇重复回流提取得到的滤液,为五次滤液,用乙醇重复回流提取后最终得到的滤饼为五次滤饼,五次滤饼干燥,将五次滤液减压浓缩,获得浓缩物,即乙醇提取物;(6)水提物:将步骤(4)三次萃取水相减压浓缩,获得浓缩物,即石菖蒲水提物,所述石菖蒲水提物进一步分离纯化获得糖苷和生物碱。
这些专利公开的石菖蒲的提取物在防治老年痴呆症上的效果并不理想,可能原因是限于对石菖蒲中有效成分的提取方法不合理,导致有效成分没有被尽可能地提取出来。
由于石菖蒲的提取物是混合物,所以其活性与石菖蒲的提取方法及其相关,为了获得本发明的能够防治老年痴呆症药物,本发明通过大量筛选,发现石菖蒲作为提取防治老年痴呆症药物的植物具有优异的效果,通过大量实验,获得了能够获得针对老年痴呆症具有防治效果的提取方法以及在治疗老年痴呆症中的有效剂量。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供了一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途。
具体的,本发明提供了一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物是通过将石菖蒲进行超声提取和阳离子交换树脂解析步骤获得第一部分提取物和对残渣通过有机溶剂提取的第二部分提取物组成,其中超声提取的溶剂为水,超声频率为30-40kHz,阳离子换树脂柱的解析用氢氧化钠水溶液,解析液用盐酸解析,有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。
优选地,上述用途中,第一部分提取物的制备方法如下:
(1)将粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30-50,浸泡100-150min,超声频率30-40kHz,提取温度50-60℃,提取时间110-170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用4-8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6-8,在50-60℃减压浓缩,获得第一部分石菖蒲提取物。
优选地,上述用途中,第二部分提取物的制备方法如下:
(3)将获取第一部分提取物时获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20-30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5-10ml,提取物合并减压浓缩获得第二部分提取物;
具体的,本发明提供了一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物通过如下步骤的方法获得:
(1)将粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30-50,浸泡100-150min,超声频率30-40kHz,提取温度50-60℃,提取时间110-170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用4-8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6-8,在50-60℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20-30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5-10ml,提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物混合物。
具体的,本发明提供了一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物通过如下步骤的方法获得:
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30,浸泡100min,超声频率30kHz,提取温度50℃,提取时间110min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过001×7阳离子交换树脂,用4%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6,在50℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20℃下浸提3小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物。
具体的,本发明提供了一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物通过如下步骤的方法获得:
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶50,浸泡150min,超声频率40kHz,提取温度60℃,提取时间170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=8,在60℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:10ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物。
本发明提供的石菖蒲提取物作为防治老年痴呆症疾病的用途具有优异的效果,防治老年痴呆症效果明显,该用途中的石菖蒲提取物的获得方法相比较于其他常规方法也具有优异的效果。
具体实施方式
为了理解本发明,下面以实施例进一步说明本发明,但不限制本发明。
实施例1石菖蒲提取物1的制备
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30,浸泡100min,超声频率30kHz,提取温度50℃,提取时间110min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过001×7阳离子交换树脂,用4%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6,在50℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20℃下浸提3小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物1。
实施例2石菖蒲提取物2的制备
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶50,浸泡150min,超声频率40kHz,提取温度60℃,提取时间170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=8,在60℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:10ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物2。
对比实施例1对比石菖蒲提取物1
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于蒸馏提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶50,提取时间170min,提取后获得蒸馏液和残渣,蒸馏液在50℃下减压浓缩得石菖蒲水提物;
(2)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:10ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲有机提取物;
(4)合并石菖蒲水提物和石菖蒲有机提取物,获得防治老年痴呆症疾病的对比石菖蒲提取物1。
对比实施例2对比石菖蒲提取物2
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30,浸泡100min,超声频率30kHz,提取温度50℃,提取时间110min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过001×7阳离子交换树脂,用4%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6,在50℃减压浓缩,获得对比石菖蒲提取物2;
实验实施例1
为了测试石菖蒲提取物是否能够调节Aβ水平,将夹心式酶联免疫吸附测定法(ELISA)用于测定分泌的Aβ(Aβ42和/或Aβ40)水平。在本实施例中,将表达野生型APP695的H4细胞以200,000个细胞/孔接种在6孔平板上并在37℃与5%二氧化碳下孵育过夜。分别将实施例1和2的石菖蒲提取物1和2、对比实施例1-2的对比石菖蒲提取物的1-2配制成10mg/l、50mg/l、100mg/l、150mg/l、200mg/l、250mg/l浓度的1.5ml培养基,用配制的培养基处理细胞48小时。将来自处理的细胞上清液收集入埃彭道夫管并进行分析。测试各提取物对H4细胞中Aβ42和Aβ40含量的影响,所述数值表示与标准对照后Aβ42和Aβ40含量变化比率。
表1:实施例1和实施例2的提取物对H4细胞中Aβ42的影响
表2:实施例1和实施例2的提取物对H4细胞中Aβ40的影响
表1和表2表明通过实施例1和实施例2制备的石菖蒲提取物能够有效地降低H4细胞中的Aβ42和Aβ40的含量。而对比实施例1和2则效果不好。
同时对APP淀粉样蛋白过表达的稳定的细胞系H4用wasted bottle检测实施例1和2提取物,有明显反映。
本发明的实施例1和2的提取物能够实现对老年痴呆症细胞模型的良好效果。
实验实施例2
将正常组和模型组每天灌胃生理盐水0.2ml/10g,药物组1灌胃给药实施例1的提取液0.2ml/10g。药物组2灌胃给药对比实施例1的提取液0.2ml/10g,正常组是正常小鼠,模型组和药物组1和2是获得记忆障碍的小鼠,每组20只,18-22克,按照体重随机分组。对记忆的保护时间取平均值,数值单位为秒。
表3石菖蒲提取物对记忆障碍小鼠的实验结果
到第14天的时候,药物组的测试成绩与模型组比较差别显著(p<0.01)
结果表明,实施例1的石菖蒲提取物对获得记忆障碍小鼠有明显的保护作用。方法不同,对比实施例1的石菖蒲提取物在对小鼠的记忆障碍的保护作用不明显。

Claims (5)

1.一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物是通过将石菖蒲进行超声提取和阳离子交换树脂解析步骤获得第一部分提取物和对残渣通过有机溶剂提取的第二部分提取物组成,其中超声提取的溶剂为水,超声频率为30-40kHz,阳离子换树脂柱的解析用氢氧化钠水溶液,解析液用盐酸解析,有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯和正丁醇;其中第一部分提取物的制备方法如下:
(1)将粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30-50,浸泡100-150min,超声频率30-40kHz,提取温度50-60℃,提取时间110-170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用4-8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6-8,在50-60℃减压浓缩,获得石菖蒲第一部分提取物。
2.根据权利要求1所述的用途,其中第二部分提取物的制备方法如下:
(3)将获取第一部分提取物时获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20-30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5-10ml,提取物合并减压浓缩获得第二部分提取物。
3.一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物通过如下步骤的方法获得:
(1)将粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30-50,浸泡100-150min,超声频率30-40kHz,提取温度50-60℃,提取时间110-170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用4-8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6-8,在50-60℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20-30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5-10ml,提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物。
4.一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物通过如下步骤的方法获得:
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶30,浸泡100min,超声频率30kHz,提取温度50℃,提取时间110min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在40-50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过001×7阳离子交换树脂,用4%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=6,在50℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在20℃下浸提3小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:5ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物。
5.一种石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途,其中石菖蒲提取物通过如下步骤的方法获得:
(1)将100g粉碎的石菖蒲叶粉置于超声提取器中,石菖蒲与水的重量比为1∶50,浸泡150min,超声频率40kHz,提取温度60℃,提取时间170min,超声提取后的提取液进行抽滤,获得清液和残渣,清液在50℃下减压浓缩得石菖蒲粗提取物;
(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量10倍的水搅拌成粗提取物悬浮液,将该悬浮液通过阳离子交换树脂,用8%的氢氧化钠水溶液对阳离子交换树脂进行解析获得解析液;用盐酸酸化所述解析液到pH=8,在60℃减压浓缩,获得石菖蒲提取物I;
(3)将第(1)步获得的残渣依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇在30℃下浸提3-4小时,残渣和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的重量体积比为1g:10ml,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并减压浓缩获得石菖蒲提取物II;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II,获得防治老年痴呆症疾病的石菖蒲提取物。
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