CN102858319A - 用于预防或治疗白发或白癜风的、含有葛属植物提取物或葛根素的组合物 - Google Patents

用于预防或治疗白发或白癜风的、含有葛属植物提取物或葛根素的组合物 Download PDF

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Abstract

本发明涉及用于预防或治疗白发或白癜风的、含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物。

Description

用于预防或治疗白发或白癜风的、含有葛属植物提取物或葛根素的组合物
技术领域
本发明涉及用于预防或治疗白发（poliosis）或白癜风（vitiligo）的组合物。
背景技术
随着岁月流逝白发将增加对年老的印象，因此人们对能用于掩盖白发的染发剂进行了很多研究。然而，由于白发会再生长，染发也只是暂缓之策。尤其，由于如今所用的氧化染发剂含有氧化剂，它们会损伤皮肤。
为了预防白发，通常会使用黑芝麻（black sesame）、核桃（walnut）、旱莲草（herba ecliptae）、蜂蜜与熟地黄（rehmanniae radix preparata）、天门冬（asparagi radix）或山麦冬（liriopes radix）的混合物、在50oC下将何首乌（polygoni multiflori radix）、侧柏叶（thuja leaf）、女贞子（ligustri lucidi fructus）、旱莲草、岩盐（rock salt）、熟地黄、天门冬、山麦冬和黑豆煮沸后获得的液体。此外，可以使用黑芝麻、黑松叶（black pine leaf）、海带（kelp）、五加皮提取物（acanthopanacis cortex extract）、垂体激素（pituitary hormone）、环磷酸腺苷（cAMP，cyclic adenosine monophosphate）或维他命D3，但效果不是很明显。
发明内容
技术问题
本发明涉及提供用于预防或治疗白发或白癜风的组合物。
技术方案
在一个总的方面，本发明提供用于预防或治疗白发的、含有作为活性成分的葛（Pueraria）属植物提取物的组合物。
在另一个总的方面，本发明提供用于预防或治疗白癜风的、含有作为活性成分的葛属植物提取物的组合物。
在另一个总的方面，本发明提供用于预防或治疗白发的、含有作为活性成分的葛根素（puerarin）的组合物。
在另一个总的方面，本发明提供用于预防或治疗白癜风的、含有作为活性成分的葛根素的组合物。
有益效果
本发明提供的组合物包含作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素，其通过增加黑素细胞中的小眼相关转录因子（MITF，microphthalmia-associated transcription factor）的表达对预防或治疗白发或白癜风具有效果，从而激活黑素细胞并促进黑色素的合成。
附图说明
图1展示了在测试实施例1中将葛根素的黑色素合成效果与阳性对照组和阴性对照组作比较的结果。
图2展示了在测试实施例2中将阴性对照物、葛根素或葛属植物提取物涂抹于白发诱导小鼠模型上并测得的黑色素含量的结果(*: p < 0.1, **: p < 0.05)。
图3展示了在测试实施例3中将阳性对照物、阴性对照物或者0.5% 或1%的葛根素涂抹于白发诱导的雄性小鼠模型上并测得的黑色素含量的结果(*: p < 0.1)。
图4展示了在测试实施例3中将阳性对照物、阴性对照物或者0.5% 或1%的葛根素涂抹于白发诱导的雌性小鼠模型上并测得的黑色素含量的结果(*: p < 0.1, **: p < 0.05)。
图5展示了在测试实施例3中将阳性对照物、阴性对照物或者0.5% 或1%的葛根素涂抹于小鼠身上后拍摄的照片。(a), (b)：将阴性对照物涂抹于雄性和雌性小鼠身上；(c), (d)：将0.5%的葛根素组合物涂抹于雄性和雌性小鼠身上；(e), (f)：将1%的葛根素组合物涂抹于雄性和雌性小鼠身上；(g), (h)：将阳性对照物涂抹于雄性和雌性小鼠身上。
具体实施方式
这里使用的“皮肤”是指覆盖动物身体表面的组织且在广义上被使用，其不仅包括覆盖面部或身体的组织，而且还包括头皮和毛发。
这里使用的“毛发”包括体毛和头发。所述毛发包括人体的毛发和动物的毛发。
这里使用的“提取物”是指从自然物质中提取的物质且不论其提取方法或成分。所述术语在广义上所使用，其包括如通过使用水或有机溶剂从天然物质中提取的可溶于所述溶剂的成分，或提取天然物质的特定成分如油类。
下面将进一步详细地描述本发明。
已知白发是由黑素干细胞的流逝和黑素细胞活性的降低而引起的。尤其，已知与衰老相关的白发是由干细胞的流逝而引起的，然而与衰老不相关的白发是由现代社会中环境和精神上的压力而降低黑素细胞的活性而引起的。
在本发明的一方面，一种或多种的葛属植物的提取物包含一种或多种的豆科葛属植物的提取物。在本发明的另一方面，一种或多种的葛属植物的提取物将选自泰国野葛（Pueraria mirifica）、块茎葛（Pueraria tuberosa DC.，Roxb. ex Willd）、粉葛（Pueraria thomsonii Benth）、野葛（Pueraria thunbergiana Benth）、苦葛（Pueraria peduncularis Grah）、峨眉葛藤（Pueraria omeiensis Wang et Tang）、三裂叶野葛（Pueraria phaseoloides (Roxb.) Benth）、山葛（Pueraria montana (Lour.) Merr）和食用葛（Pueraria edulis Pamp）。
在本发明的一方面，根据常用的方法可以通过提取葛属植物来获得所述葛属植物提取物。在本发明的另一方面，可以通过控制温度和压力下使用水或包括乙醇的有机溶剂来提取葛属植物而获得所述葛属植物提取物。在一方面，所述有机溶剂不受特别的限制，其可以为C1-C5低级醇。所述C1-C5低级醇可以为如选自甲醇，乙醇，异丙醇，正丙醇，正丁醇和异丁醇中的至少一种的醇。
在本发明的一方面，所述葛属植物提取物包括葛雌素（miroesterol）、大豆苷（daidzin）、大豆甙元（daidzein）、染料木甙（genistin）、染料木素（genistein）、葛根素（puerarin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、豆甾醇（stigmasterol）、香豆雌酚（coumestrol）、mirificoumestan、mirificine、菜油甾醇（campesterol）或kwakhurin。在本发明的另一方面，所述葛属植物提取物包含作为活性成分的葛根素。
所述葛根素属于大豆异黄酮类化合物且为大豆甙元（daidzein）的8-葡萄糖苷。
所给出的所述葛根素的化学式为化学式1，并且可以将其表达为黄豆苷元-8-C-吡喃葡糖苷（daidzein-8-C-glucopyranoside）、8-C-β-D-吡喃葡糖基-4'，7-二羟基异黄酮（8-C-β-D-glucopyranosyl-4’,7-dihydroxyisoflavone）、8-C-β-D-吡喃葡糖基-7-羟基-3-（4-羟基苯基）-4H-1-苯并吡喃-4-酮（8-C-β-D-glucopyranosyl-7-hydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one）。
化学式1 
                                                     
Figure 985331DEST_PATH_IMAGE001
 在本发明的一方面，所述葛根素可以从自然界中获取或被合成。在自然界中，其主要存在于豆科葛属植物的块根中。在本发明的一方面，所述葛根素可以从属豆科的葛属植物中获取。在本发明的另一方面，所述葛根素可以从葛属植物中提取，所述葛属植物包括泰国野葛（Pueraria mirifica）、块茎葛（Pueraria tuberosa DC，Roxb. ex Willd）、粉葛（Pueraria thomsonii Benth）、野葛（Pueraria thunbergiana Benth）、苦葛（Pueraria peduncularis Grah）、峨眉葛藤（Pueraria omeiensis Wang et Tang）、三裂叶野葛（Pueraria phaseoloides (Roxb.) Benth）、山葛（Pueraria montana (Lour.) Merr）、食用葛（Pueraria edulis Pamp）和葛麻姆（Pueraria lobata (Willd.) Ohwi）。
小眼相关转录因子（MITF）对黑素细胞中所述黑色素的合成活性的影响非常大。包含葛属植物提取物或葛根素的组合物可以通过促进MITF的表达来有效地提高黑素细胞中黑色素的生成。换言之，在本发明的一方面，包含作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物可以通过显著地提高黑素细胞中MITF的表达来诱导黑色素的合成而预防或治疗白发或白癜风。
在本发明的一方面，含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物可以包含占所述组合物总重量的0.1-10wt%的葛属植物提取物或葛根素。在本发明的另一方面，含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物可以包含占所述组合物总重量的0.1-5wt%的葛属植物提取物或葛根素。在本发明的另一方面，含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物可以包含占所述组合物总重量的0.1-2.5wt%的葛属植物提取物或葛根素。所含的葛属植物提取物或葛根素的含量占所述组合物总重量的0.1-10wt%时，在同时满足稳定性和安全性的同时可以达到本发明的预期效果，并且取得良好的成本效益。
在本发明的一方面，可以将含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物涂抹于头发或头皮上。在本发明的另一方面，可以将含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的组合物涂抹于皮肤上。
在一方面，本发明提供含有作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的美容组合物。所述美容组合物可以为化妆品组合物。所述化妆品组合物可以包含在美容或皮肤学上可接受的介质或基底物。可以提供应用于任何局部的剂型，其包括如溶液、凝胶、固体、无水浆剂、水包油型乳剂、油包水型乳剂、复合乳剂、悬浮液、微乳剂，微胶囊，微粒剂，离子型（脂质体）或非离子型泡状分散剂、霜剂，调色剂，洗剂、粉末剂、膏剂、喷剂、清洁剂或遮瑕笔。此外，本发明的组合物可以以泡沫、进一步包含加压推进剂的气溶胶或贴剂的形式来使用。这些组合物可以通过本领域中常用的方法来制备。
所述化妆品组合物可以进一步包含能带来协同效果的其他成分并对预期效果没有负面影响的其他成分。根据所述化妆品组合物的制备形式或使用目的，本领域的技术人员可以容易地选取这些成分。
例如，所述化妆品组合物可以包含皮肤吸收促进剂，以加强预期效果。此外，本发明公开的化妆品组合物可以包含选自水溶性维生素、脂溶性维生素、聚合物肽、高分子多糖、鞘脂（sphingolipid）和海藻提取物中的物质。除所述活性成分之外，本发明公开的化妆品组合物可以进一步包含其他成分，其能与常用化妆品组合物一起使用。其他能添加的成分包括油、脂肪、保湿剂、润肤剂、表面活性剂、有机或无机颜料、有机粉末剂、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、植物提取物、pH调节剂、乙醇、着色剂、调味剂、血液循环促进剂、冷却剂、止汗剂、纯净水等。包含于所述化妆品的成分不会受限于上述的成分，而且这些成分的含量在不与本发明的目的和效果相冲突的范围内确定。
所述化妆品组合物没有受所述剂型的特别限制，可以根据使用目的适当地决定所述剂型。例如，所提供的所述化妆品组合物可以为选自柔肤乳液、滋养乳液、精华液、滋润霜、按摩霜、面膜、凝胶、妆前乳、粉底液、粉、口红、遮瑕膏、喷剂、眼霜、眼部精华液、洁面霜、洁面泡沫、清洁水、清洁剂、洗发剂、护发剂、头发护理产品、头发精华素、发乳、头皮/头发滋养剂、头皮精华素、发胶、发剂、发膜、身体乳、身体霜、身体油和身体精华素中的一种或多种的剂型，但不限于这些剂型。
在一方面，本发明提供包含作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的药物组合物。除所述活性成分之外，所述药物组合物可以进一步包含如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化加速剂、用于控制渗透压的盐和/或缓冲剂、稀释剂（如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素或甘氨酸）、润滑剂（如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸和其镁或钙盐或者聚乙二醇）、粘合剂（如硅酸铝镁盐、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮）等的药物佐剂，或者其他治疗上有用的物质。如有必要，可以进一步包含其他药物添加剂，例如淀粉、琼脂、藻酸或其钠盐的崩解剂、吸收剂，着色剂，调味剂，甜味剂等。
所述药物组合物可以被制成各种用于口服或肠胃外给药的剂型。用于肠胃外给药的剂型可以包括如滴剂、膏剂、洗剂、凝胶、霜剂、喷剂、悬浮剂、乳剂、栓剂、贴剂等，但不限于这些剂型。
在本发明的一方面，所述药物组合物可以口服、肠胃外、局部或经皮给药。
所述活性成分的给药剂量将根据受试者的年龄、性别和体重、具体疾病或病理情况、疾病或病理情况的严重程度，给药途径和医生的诊断而有所不同。考虑到这些因素所确定的给药剂量是在本领域普通技术人员的知识范围内。通常，所述给药剂量可以为0.001-2000mg/kg/天，优选为0.5-500mg/kg/天。
在一方面，本发明提供包含作为活性成分的葛属植物提取物或葛根素的保健食品组合物。所述保健食品可以被制成如片剂、颗粒剂、饮剂、焦糖、减肥棒等。除所述活性成分之外，所述保健食品组合物的每种剂型可以包括本领域中常用的成分。根据使用目的，本领域的技术人员可以容易地选取所述成分，而且所述成分可以提供协同效果。
实施例
本发明将通过测试实施例详细地描述其特征和效果。然而，下列测试实施例仅用于说明为目的，不会限制本发明的范围。
[测试实施例1] 对促进黑色素合成效果的评估
为了评估所述葛根素对促进黑色素合成的效果，将黑素细胞melan-A（5.0×104）注入24孔板内并在37oC、10%的CO2的状态下将其培养一夜。在含有10%的FBS和TPA的RPMI培养基内，使用被稀释至10μM、50μM或100μM的葛根素对其进行处理。将未经处理的相同的实验作为阴性对照组(CTL)或将使用100μM的甲基丙烯酸异丁酯（IBMX）处理的相同的实验作为阳性对照组。5天后，细胞的黑色素溶解于1N的NaOH中，并且通过Lowry法测量其蛋白质。在405nm下测量吸光度并由此计算黑色素的含量。
图1展示了阳性对照组和测试组相对于阴性对照组的黑色素含量。
如图1所示，由于黑色素的含量高于阴性对照组，葛根素对促进黑色素的合成有效。从而得知，促进黑色素合成的效果将取决于浓度。
 [测试实施例2] 葛属植物提取物和葛根素对预防白发效果的评估
通过使用从Jackson Lab（美国）购买的白发诱导鼠（Mitfmi-vit），如下对预防白发的效果进行测试。由于毛囊中黑色素的合成将减少，随着时间流逝所述小鼠会经历毛发变白。在被麻醉的状态下，对10周龄的雌性小鼠进行脱毛以诱导进入生长期。将所有小鼠的脱毛部位保持一致。从第二天开始，在所述脱毛部位涂抹0.1mL的测试物质或阴性对照物，一天两次。这个过程将进行3周，每周5次。
所述测试物质为1%的葛根素组合物和各1%的泰国野葛、块茎葛、粉葛、野葛、苦葛、峨眉葛藤、三裂叶野葛、山葛和食用葛的提取物。使用EtOH、1,3-BG和DW的混合物作为所述测试物质的载体。此外，所述载体本身被用作阴性对照物。
3周后，从小鼠的测试部位收集毛发并测量黑色素含量。通过使用含有蛋白酶Esperase（诺维信）的Tris缓冲液对所述毛发进行处理来测量所述黑色素的含量，然后在400nm下测量吸光度。
图2展示了将所述阴性对照物或所述测试物质适用3周并测量黑色素含量的结果。
如图2所示，经由葛根素或葛属植物提取物处理的组合展示出更高的黑色素含量。因此，可以得知它们对提高白发诱导鼠的毛发中黑色素含量有效，从而对预防毛发变白有效。
[测试实施例3] 葛根素对预防白发的效果的评估
使用与测试实施例2相同的方法通过使用从Jackson Lab（美国）购买的白发诱导鼠（Mitfmi-vit）来测试预防白发的效果。在被麻醉的状态下，对10周龄的雄性小鼠和雌性小鼠进行脱毛以诱导进入生长期。将所有小鼠的脱毛部位保持一致。从第二天开始，在所述脱毛部位涂抹0.1mL的测试物质、阳性对照物或阴性对照物，一天两次。这个过程将进行3周，每周5次。
所述测试物质为0.5%和1%的葛根素组合物。使用EtOH、1,3-BG和DW（v/v/v = 3:2:5）的混合物作为所述测试物质的载体。所述载体本身被用作阴性对照物，而且50mM的IBMX（1.1%）被用作阳性对照物。
3周后，从所述小鼠的测试部位收集毛发并测量黑色素的含量。通过使用含有蛋白酶Esperase（诺维信）的Tris缓冲液对所述毛发进行处理来测量所述黑色素含量，然后在400nm下测量吸光度。
图3展示了将所述阳性对照物（IBMX）、阴性对照物或所述测试物质对白发诱导雄性小鼠适用3周并测量黑色素含量的结果。图4展示了将所述阳性对照物、阴性对照物或所述测试物质对白发诱导雌性小鼠适用3周并测量黑色素含量的结果。图5展示了将所述阳性对照物、阴性对照物或所述测试物质对雄性和雌性小鼠适用3周后拍摄的照片。在图5中，(a)和(b)展示将阴性照物适用于雄性和雌性小鼠的结果，(c)和(d)展示将0.5%的葛根素组合物适用于雄性和雌性小鼠的结果，(e)和(f)展示将1%的葛根素组合物适用于雄性和雌性小鼠的结果，以及(g)和(h)展示将阳性对照物适用于雄性和雌性小鼠的结果。
如图3至图5所示，葛根素对提高白发诱导雌雄小鼠的毛发中黑色素含量有效，从而对预防毛发变白有效。此外，可以得知所述效果会根据葛根素的浓度的增加而提高。
下面将描述本发明组合物的剂型实施例。然而，其他剂型也同样可行且本发明的范围不因下列实施例而受到限制。
 [剂型实施例1] 洗发剂
表1
成分 wt%
月桂基硫酸鈉溶液(30%) 20.0
椰子油脂肪酸二乙醇酰胺 5.0
聚季铵盐-10 0.3
丙二醇 2.0
葛属植物提取物或葛根素 0.1-2.5
吡啶酮乙醇胺盐 0.5
黄色203 适量
对羟基苯甲酸酯 0.2
混合调味剂 适量
柠檬酸 适量
纯净水 余量
[剂型实施例2] 护发剂 
 表2
成分 wt%
十六烷基三甲基氯化铵(29%) 7.0
二甲基二硬脂酰氯化铵(75%) 4.0
鲸蜡硬脂醇 3.5
聚氧乙烯硬脂酰酯 1.0
液体石蜡 2.0
丙二醇 1.5
葛属植物提取物或葛根素 0.1-2.5
混合调味剂 适量
柠檬酸 适量
纯净水 余量
 [剂型实施例3] 头皮/头发滋养剂
表3
成分 wt%
薄荷醇 0.1
D-泛醇 0.6
水杨酸 0.05
甘油 1.0
聚氧乙烯氢化蓖麻油 0.8
醋酸生育酚 0.03
组合调味剂 适量
葛属植物提取物或葛根素 0.1-2.5
乙醇 30.0
纯净水 余量
 [剂型实施例4] 头皮精华素
表4
成分 wt%
乙醇 30.0
聚山梨醇酯60 1.5
甘油 3.0
羧乙烯聚合物 0.1
三乙醇胺 0.2
葛属植物提取物或葛根素 0.1-2.5
防腐剂 适量
调味剂和着色剂 适量
纯净水 余量
 [剂型实施例5] 膏剂
表5
成分 wt%
癸/辛酸甘油三酯 10
液体石蜡 10
失水山梨醇倍半油酸酯 6
辛基十二醇聚醚-25 9
鲸蜡醇乙基己酸酯 10
角鲨烷 1
水杨酸 1
甘油 15
山梨糖醇 1
葛属植物提取物或葛根素 2
防腐剂、调味剂和着色剂 适量
纯净水 余量
 [剂型实施例6] 洗剂
表6
成分 wt%
葛属植物提取物或葛根素 0.1-2.5
蜂蜡 4.0
聚山梨醇酯60 1.5
失水山梨醇倍半油酸酯 1.5
液体石蜡 0.5
癸/辛酸甘油三酯 5.0
甘油 3.0
丁二醇 3.0
丙二醇 3.0
 [剂型实施例7] 片剂
表7
成分 wt%
葛属植物提取物或葛根素 0.1-2.5
硬脂酸镁 2.0
维生素C 2.0
玉米淀粉 50.0
乳糖 余量

Claims (6)

1.用于预防或治疗白发或白癜风的组合物，该组合物包含选自泰国野葛、块茎葛、粉葛、野葛、苦葛、峨眉葛藤、三裂叶野葛、山葛和食用葛中的一种或多种葛属植物的提取物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述葛属植物的提取物包含葛根素。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述葛属植物的提取物占所述组合物总重量的0.1-10 wt%。
4.用于预防或治疗白发或白癜风的组合物，其包含作为活性成分的葛根素。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述葛根素占所述组合物总重量的0.1-10 wt%。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物可用于口服、肠胃外、局部或经皮给药。
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