CN102846806A - 通脉降脂颗粒及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种通脉降脂颗粒及其制备方法，使用该方法制备通脉降脂颗粒时，原料药的提取率高。本发明通脉降脂颗粒的制备方法包括以下步骤：1）取三七、川芎、花椒和荷叶，分别粉碎；2）取三七粉蒸2小时；3）另取荷叶和笔管草，加水煎煮3次，将第1煎、2煎和3煎用水分别调至pH 2.0、pH 7.0和pH 8.5，将三次煎煮液过滤并合并，调节所得滤液的pH值至7.5后浓缩；4）加乙醇使含醇量为40%，静置后滤过，浓缩；5）加入步骤1所得川芎粉、花椒粉和荷叶粉以及步骤2所得三七粉；6）加入糊精、羧甲基纤维素钠、聚维酮K30、阿斯帕坦，混匀制粒、干燥、整粒、加入甜橙粉末香精、混匀；7）通过瞬间高温灭菌后，包装。

Description

通脉降脂颗粒及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂及其制备方法，特别是涉及一种通脉降脂颗粒及其制备方法。

背景技术

通脉降脂颗粒处方来源于国家中成药标准汇编内科心系分册210页通脉降脂胶囊标准，其功能为降脂化浊，活血通脉，用于治疗高血脂症，防治动脉粥样硬化。现有通脉降脂胶囊内容物的提取方法为：1）取三七83.2份、川芎100份、花椒25份和荷叶83.3份分别粉碎成粉，单独将三七粉蒸2小时；2）另取笔管草1250份和荷叶416.7份水提醇沉，浓缩得到稠膏；3）将步骤1所得各原料药粉与稠膏混合。该方法采用传统的水体醇沉方法，提取率较低，且没有经过灭菌过程，残存微生物较多。

我国的中药生产水平与世界先进的天然药物提取水平差距甚大，国内中药和天然产物生产企业要想在竞争中赢得主动，必须采用先进的提取分离技术，才可能使我国中药产品生产和销售在国际市场占有更多的份额。半仿生提取法是模仿口服药物在胃肠道的运转过程，采用选定pH值的酸性水和碱性水依次连续提取的中药提取新技术。由于复方中药内在化学成分复杂，很难用其中某一成分的药效或药代参数代表整个复方的药效或药代参数，同时因为中药复方中部分有效成分未知的现实，采用半仿生提取时坚持“有成分论，不唯成分论，重在机体的药效学反应”的原则。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种通脉降脂颗粒及其制备方法，使用该方法制备通脉降脂颗粒时原料药的提取率高，所得产品治疗高血脂症时效果好。

一种通脉降脂颗粒的制备方法，包括以下步骤：

1、取三七83.2质量份、川芎100质量份、花椒25质量份和荷叶83.3质量份，分别粉碎成80-100目的三七粉、川芎粉、花椒粉和荷叶粉；

2、取步骤1所得三七粉蒸2小时；

3、半仿生提取：另取荷叶416.7质量份和笔管草1250质量份，加水煎煮3次，将第1煎、2煎和3煎用水分别调至pH 2.0、pH 7.0和pH 8.5，第1煎、2煎和3煎的用水量分别为药材重量的10倍、8倍和8倍，第1煎、2煎和3煎的煎煮时间分别为3小时、2小时和1小时，将三次煎煮液过滤并合并，调节所得滤液的pH值至7.5后浓缩成相对密度为1.02～1.04（70～75℃测）的清膏；

4、乙醇沉淀：向清膏中加乙醇使含醇量为40%（体积/质量，即每1kg清膏中加入400ml乙醇），静置24h后滤过，将所得滤液浓缩成相对密度为1.14～1.19（25℃测）的稠膏；

5、向稠膏中加入步骤1所得川芎粉、花椒粉和荷叶粉以及步骤2所得三七粉；

6、向步骤5所得产物中加入592质量份糊精、23质量份羧甲基纤维素钠、34质量份聚维酮K30、11质量份阿斯帕坦，混匀制粒、干燥、整粒、加入11质量份甜橙粉末香精、混匀；

7、通过瞬间高温灭菌后，包装，即得。

本发明通脉降脂颗粒的制备方法，其中调节pH的方法为加入HCl或NaOH。本发明中HCl和NaOH均为0.1mol/L的水溶液。

本发明通脉降脂颗粒的制备方法，其中所述瞬间高温灭菌的条件为300-400℃灭菌3-4s。

本发明还提供了一种通过上述方法得到的通脉降脂颗粒。

本发明通脉降脂颗粒的制备方法对原料药的提取率高，半仿生提取与水提法相比，清膏的提取率提高了53.7%，半仿生提取-乙醇沉淀与水提法-乙醇相比，稠膏提取率提高了47.4%。使用本发明方法制备的通脉降脂颗粒用于高血脂大鼠，降血脂功能好，在高剂量试验组中TC、TG、HDL-c、LDL-c与高脂模型组的都有显著差异，与阳性对照组相比，高剂量试验组中TC、TG、HDL-c、LDL-c水平均有所改善。

具体实施方式

实施例1

1、取三七83.2g、川芎100g、花椒25g和荷叶83.3g，分别粉碎成80-100目的三七粉、川芎粉、花椒粉和荷叶粉；

2、取步骤1所得三七粉蒸2小时；

3、半仿生提取：另取荷叶416.7g和笔管草1250g，加水煎煮3次，将第1煎、2煎和3煎用水分别调至pH 2.0、pH 7.0和pH 8.5，第1煎、2煎和3煎的用水量分别为药材重量的10倍、8倍和8倍，第1煎、2煎和3煎的煎煮时间分别为3小时、2小时和1小时，将三次煎煮液过滤并合并，调节所得滤液的pH值至7.5后浓缩成相对密度为1.02～1.04（70～75℃测）的清膏，得到清膏310.0g；

4、乙醇沉淀：向清膏310.0g中加乙醇使含醇量为40%，静置24h后滤过，将所得滤液浓缩成相对密度为1.14～1.19（25℃测）的稠膏，得到稠膏175.0g；

5、向稠膏中加入步骤1所得川芎粉、花椒粉和荷叶粉以及步骤2所得三七粉；

6、向步骤5所得产物中加入592质量份糊精、23质量份羧甲基纤维素钠、34质量份聚维酮K30、11质量份阿斯帕坦，混匀制粒、干燥、整粒、加入11质量份甜橙粉末香精、混匀；

7、300-400℃灭菌3-4s后，包装，即得1137.5g通脉降脂颗粒。

实施例2  半仿生提取和乙醇沉淀的考察

半仿生提取的考察是以清膏提取率、总生物碱提取率和总黄酮提取率为指标。清膏提取率=清膏质量/步骤3所用荷叶和笔管草的原料质量，总黄酮提取率=清膏中总黄酮质量/步骤3所用荷叶和笔管草原料中的总黄酮质量，总生物碱提取率=清膏中总生物碱质量/步骤3所用荷叶和笔管草原料中的总生物碱质量。步骤3所用荷叶和笔管草原料中的总黄酮含量为0.6mg/g、总生物碱含量为4.5mg/g。

（1）本发明中总黄酮含量的测定

选取芦丁代表总黄酮。

标准溶液配制：称取干燥至恒重的芦丁对照品加甲醇溶解,配成150μg/mL的芦丁标准溶液。

标准曲线的绘制：准确吸取芦丁标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL，相当于芦丁0、75、150、300、450、600μg移入10mL刻度比色管中，加入30%乙醇水溶液至5mL,各加5%亚硝酸钠水溶液0.3mL，振摇后放置5min，加入10%硝酸铝水溶液0.3mL摇匀后放置6min，加1.0 mol/L氢氧化钠溶液4mL，用30%乙醇水溶液定容至刻度，摇匀后放置10min；以零管为空白，摇匀后用1cm的比色杯、在510nm的波长处测定吸光度，以吸收度为纵坐标、芦丁含量为横坐标绘制标准曲线或求取线性回归方程。

样品处理：称取1.0g待测物质研磨，装入滤纸筒，置索氏提取器内，以乙醚为溶剂，加热回流，脱脂脱色，待脱色完全后弃去乙醚；再加200mL 70%乙醇水溶液作为溶剂，80℃加热回流2h，提取液过滤后定容至250mL，为待测试样溶液。

样品测定：准确吸取试样溶液1mL，按上述标准曲线制作中的操作步骤，于510 nm处进行吸光度的测定，并根据标准曲线求取芦丁含量。

（2）本发明中总生物碱含量测定，采用溴甲酚绿比色法。

标准溶液配制：称取荷叶碱标准品，加甲醇溶解，配制成63.0mg/L标准品溶液；

标准曲线的绘制：分别吸取标准品溶液0.2、0.5、0.8、1.0、1.5ml挥干甲醇，加入pH1.0的领苯二甲酸氢钾缓冲液2ml，再加入溴甲酚绿3ml，摇匀，加入三氯甲烷10ml萃取，静置分层后取三氯甲烷层于413nm波长处测定吸光度值，以对照品用量为横坐标、吸光度值为中坐标，绘制标准曲线。

样品的制备：取待测物质0.5g研磨，加入甲醇50ml，称定质量，加热回流2.5h，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减少的质量，摇匀，过滤即得待测试样溶液。

样品测定：准确吸取试样溶液1mL，按上述标准曲线制作中的操作步骤，于413 nm处进行吸光度的测定，并根据标准曲线求取总生物碱含量。

与半仿生提取做比较的是普通水提法，水提法中不调整煎煮用水和滤液的pH值，其余条件与实施例1中相同，比较结果如表1所示：

表1

	清膏提取率(%)	总黄酮提取率(％)	总生物碱提取率(%)
				水提法	12.1%	49.5%	57.2%
实施例1	18.6%	72.4%	91.8%

乙醇沉淀的考察是指在保持实施例1中步骤1-3不变的情况下，仅将步骤4中的含醇量做调整。稠膏提取率=稠膏质量/步骤3所用荷叶和笔管草的原料质量，总黄酮提取率=稠膏中总黄酮质量/步骤3所用荷叶和笔管草原料中的总黄酮质量，总生物碱提取率=稠膏中总生物碱质量/步骤3所用荷叶和笔管草原料中的总生物碱质量。具体结果如表2所示：

表2

含醇量（%）	稠膏提取率(%)	总黄酮提取率(%)	总生物碱提取率(%)
				30%	8.5%	46.8%	64.1%
40%	11.5%	65.2%	82.3%
				50%	8.2%	49.9%	61.9%
60%	7.6%	32.1%	53.7%

半仿生提取法获得的稠膏采用乙醇沉淀，最适含醇量为40%，稠膏的提取率为11.5%，总生物碱提取率为82.3%，总黄酮提取率为65.2%。

实施例3

（1）动物模型的建立

高脂饲料配方为：78.8%基础饲料、1%胆固醇、10%蛋黄粉、10%猪油、0.2%胆盐。

取3月龄SD大鼠雄鼠50只，给予高脂饲料18天后，取尾静脉血，分别测定血清中甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）的含量，确定形成高脂血症模型后，将其随机分为5组，分别为高脂模型组、阳性对照组、高剂量试验组、中剂量试验组和低剂量试验组，每组10只，每组大鼠TG、TC、HDL-c、LDL-c水平无显著差异。

（2）给药方式

高剂量试验组：每kg大鼠每天服用相当于200mg原料药（各原料药按处方比例）经本方法中步骤1-5所得的产品；中剂量试验组：每kg大鼠每天服用相当于150mg原料药（各原料药按处方比例）经本方法中步骤1-5所得的产品；低剂量试验组模型组：每kg大鼠每天服用相当于100mg原料药（各原料药按处方比例）经本方法中步骤1-5所得产品；阳性对照组：服用通脉降脂胶囊，每kg大鼠每天服用相当于200mg原料药（各原料药按处方比例）的通脉降脂胶囊（按照现有标准制备）；高脂模型组：与阳性对照组胶囊等质量的生理盐水，

以上各组均为灌胃给药，每周称量体重，连续42天。实验结束禁食16h后，取尾静脉血，分别测定血清中TC、TG、HDL-c、LDL-c水平，计算动脉粥样硬化指数[AI=(TC-HDL)/HDL]。

表3

*表示与高脂模型组比较p<0.05，**表示与高脂模型组比较p<0.01；

正常组与高脂模型组相比差异极显著（p<0.01），表明造模成功。高、中、低剂量组与高脂模型组对比，血清TC含量分别下降了38.95%、28.77%和15.09%，差异均极显著（p<0.01）；高剂量组与高脂模型组相比，降血清TG的效果极显著（p<0.01），而中、低剂量组与高脂模型组相比，降血清TG的效果均不显著；高剂量组与高脂模型组相比，降HDL-c的效果极显著（p<0.01），中剂量组与高脂模型组相比，降HDL-c的效果显著（p<0.05），低剂量组与高脂对照组相比，降血清HDL-c水平的效果不显著；高、中、低剂量组与高脂模型组相比，降LDL-c和动脉粥样硬化指数的效果均极显著（p<0.01）。

综上，本发明方法制备的通脉降脂颗粒具有治疗高血脂症，防治动脉粥样硬化的效用。

以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (4)

1.一种通脉降脂颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取三七83.2质量份、川芎100质量份、花椒25质量份和荷叶83.3质量份，分别粉碎成80-100目的三七粉、川芎粉、花椒粉和荷叶粉；

2）取步骤1所得三七粉蒸2小时；

3）半仿生提取：另取荷叶416.7质量份和笔管草1250质量份，加水煎煮3次，将第1煎、2煎和3煎用水分别调至pH 2.0、pH 7.0和pH 8.5，第1煎、2煎和3煎的用水量分别为药材重量的10倍、8倍和8倍，第1煎、2煎和3煎的煎煮时间分别为3小时、2小时和1小时，将三次煎煮液过滤并合并，调节所得滤液的pH值至7.5后浓缩成相对密度为1.02～1.04的清膏；

4）乙醇沉淀：向清膏中加乙醇使含醇量为40%，静置24h后滤过，将所得滤液浓缩成相对密度为1.14～1.19的稠膏；

5）向稠膏中加入步骤1所得川芎粉、花椒粉和荷叶粉以及步骤2所得三七粉；

6）向步骤5所得产物中加入592质量份糊精、23质量份羧甲基纤维素钠、34质量份聚维酮K30、11质量份阿斯帕坦，混匀制粒、干燥、整粒、加入11质量份甜橙粉末香精、混匀；

7）通过瞬间高温灭菌后，包装，即得。

2.根据权利要求1所述的通脉降脂颗粒的制备方法，其特征在于：调节pH的方法为加入HCl或NaOH。

3.根据权利要求1所述的通脉降脂颗粒的制备方法，其特征在于：所述瞬间高温灭菌的条件为300-400℃灭菌3-4s。

4.权利要求1-3之一所述方法制备的通脉降脂颗粒。