背景技术
在过去50年间人类精子质量不断下降 ,主要表现为精子活力和活率下降、精子畸形发生率升高。有报道称锌直接参与精子的生成、成熟、激活和获能过程,锌对精子的活动力影响主要表现为:(1)锌可延缓细胞膜的脂质氧化,以维持细胞结构稳定性和生理通透性,从而使精子有良好的活动力。精子良好的活动力,主要由线粒体和“9+2结构”维持。(2)精子在射出过程中吸收精浆内锌与细胞染色质的巯基结合,使染色质免于过早解聚,而有利于受精,从多数资料看,高锌有利于提高精子的活动力。
缺硒也被认为是引起人类精子质量下降的原因之一,人类精子密度与精液中硒浓度呈明显正相关 。在不育者饮食中添加适量的硒 ,可明显改善精子活力和活率 ,并降低精子畸形,硒在男性生殖过程中的作用已经越来越引起人们的重视。Ursini等发现在精子线粒体囊中,约有50%的囊物质为硒蛋白磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化酶(PHG-Px),硒是其重要组成成分。在精子形成初期,PHG-Px具有与其他过氧化酶(GSH-Px)相同的过氧化物酶活性,但随着精子的成熟,过氧化物酶逐渐失去活性,并最终成为镜子线粒体结构蛋白的一部分,对维持精子鞭毛结构和功能的完整性有重要作用。硒还是精子线粒体外膜硒蛋白的成分之一,可防止膜上的脂质氧化,对胞膜及线粒体有保护作用。若细胞生物膜受到损害,则影响DNA复制及RNA的转录,从而影响蛋白质、粘多糖及酶的合成,进而最终影响精子的形成,因此硒与精子的产生密切相关。
维生素E在营养素中最根本的作用是抗不育作用,故有“抗不育维生素”之称,当人类缺乏维生素E时,则精子运动异常或出现精子缺乏,对精子形成障碍患者,给予维生素E后,则精液中的精子个数、运动性均有所改善,尿中17-甾酮类的排泄量亦有所增加,可见维生素E在男性不育及预防畸形胎形成有显著的作用。
维生素C的作用是降低精子的凝聚力,有利于精液液化。据美国国家科学院发表的报告表明,男人体内的维生素C水平低会导致精子遗传损伤。加州大学维生素C研究小组对15名维生素C水平低于正常值的男人进行精液分析后发现,其中8人精液中遗传损伤精子的水平较高。人体内维生素C含量偏低会使精子聚集成团,这种病症被称为精子凝聚,把精子放在显微镜下进行观察后能很快被诊断出来。再每天服用500毫克维生素C补充药物的男性当中,发生精子凝聚的比例从20%降到11%。存在与精子细胞中的遗传基因DNA(脱氧核糖核酸)主要通过维生素C的抗氧化功能得到保护,遗传基因被破坏导致精子能力减弱以及不育,或导致胎儿畸形。
果糖为精子直接利用,果糖浓度与精子活动、精子运动及受精能力有关。精子的能量代谢途径主要是糖酵解,其中以果糖酵解为主,当精浆果糖浓度低于正常时,提示不能提供精子能源,影响精子运动以致于不易受孕,精囊炎、雄激素不足及老年人精液果糖含量下降,影响精子活动力。
维生素B12的生理活性在很大程度上决定于钴,钴能够减少组织的耗氧量,从而提高对缺氧的耐受性,促进机体组织在缺氧环境下的活力,长期素食的男子因缺乏维生素B12,精液中精子的浓度比其他人明显低,精液产生量也较其他人少,影响正常的性功能。此外,维生素B12参与脱氧核糖(DNA)的合成,脂肪、碳水化合物及蛋白质的代谢,增加核糖与蛋白质的合成,促进精子细胞的成熟。
叶酸是提高精子质量的重要物质,当叶酸在男性体内呈现不足时,精液的浓度及精子活动能力下降,会减少受孕机会。此外,由于叶酸参与了体内遗传物质DNA和RNA的合成,所以传递着遗传信息的“种子”也离不开叶酸。
柠檬酸在精浆含量最高,其作用是络合钙离子,通过与钙离子结合,而调节精浆钙离子的浓度,并影响射精后精液凝固与液化过程,具有前列腺酸性磷酸酶激活剂的作用从而影响精子的活力。
精液中包含了抗坏血酸(维生素C)、钙、胆固醇、胆碱、血型抗原、柠檬酸、氨酸、去氧核醣核酸(DNA)、果糖、肌醇、乳酸、镁、氮、磷、钾、丙酮酸、钠、山梨醇、精液素、尿素、尿酸、精氨酸、维他命B12、及锌等 。
目前临床上改善及提高人类精子活动力和质量的制剂较为单一,且治疗剂量较大,如:硫酸锌、维生素E等长期使用易产生副作用,中草药或中成药制剂中亦含有多种维生素及矿物质,但成分及含量均不确定。
具体实施方式
下面结合附图给出本发明较佳实施例,以详细说明本发明的技术方案。
本发明改善人类精子活动力与质量的组合物由锌、硒、维生素E、叶酸、维生素B12、维生素C、果糖组成,本发明的形式可以做成独立包装的各种含锌、硒、维生素E、叶酸、维生素B12、维生素C、果糖的联合制剂,本发明是适于口服或者非胃肠给药形式。
每100g本发明的组合物含60mg的维生素B12、10g的维生素C、5g的天然维生素E、260mg的叶酸、9g的葡萄糖酸锌、3g的富硒酵母、3g的柠檬酸和10g的果糖。
本发明改善人类精子活动力与质量的组合物可通过本领域所属技术人员公知的方法制备,例如本文中实施方案所述的组合物可以使用列举的微量元素及多种维生素原料,辅以精氨酸粉、微晶纤维素、甘露醇、甜菊糖苷、硬脂酸镁,在洁净度符合条件的生产环境下,经混合、制粒、干燥、灭菌、压片制成。
给与需此治疗的对象口服或者非经胃肠按以下表1-范围内剂量实施的用含锌、硒、维生素E、叶酸、维生素B12、维生素C、果糖、柠檬酸的组合物。
表1 剂量实施量
名称 |
最低量 |
最高量 |
锌,Zn |
5mg/天 |
20mg/天 |
硒,Se |
15μg/天 |
100μg/天 |
维生素E,VitE(以α-生育酚当量计) |
5mg α-TE/天 |
150mg α-TE/天 |
叶酸 |
100μg/天 |
400μg/天 |
维生素B12,VitB12 |
1μg/天 |
10μg/天 |
维生素C,VitC |
30mg/天 |
500mg/天 |
果糖 |
2g/天 |
无限制 |
柠檬酸 |
0.1g/天 |
无限制 |
精液硒浓度为0.63~0.87μmol/L时精子活力最高,精液硒浓度为0.50~0.80μmol/L时精子受孕率最高,精液硒浓度低于0.46μmol/L时即引起男性不育。维生素C1g/Kg、ig.Qd(ig.指胃内给药,Qd指每日给予1次)×10或维生素E0.5g/Kg、igQd×10均能对抗氯化镉致精子畸形作用。精浆中果糖正常值为850~5730mg/L时具有临床意义。正常男性精液锌浓度200μg/ml,补充以上组合物为维持正常精液指标水平具有重要意义。
氧化过程与抗氧化保护都是生殖过程中不可获缺的步骤,两者的均衡保证了生殖的顺利进行,生殖过程中需要氧化功能,不可避免地会产生大量的活性氧(ROS)。
人体的抗氧化体系包括一组维生素(维生素E、类胡萝卜素和维生素C)和含微量元素(锌、硒)的一系列酶,实际上维生素E、维生素C在发挥抗氧化作用时需要其他抗氧化剂(尤其是硒-依赖型酶)协同保护集体免受损伤,硒在保护细胞膜免受氧化方面,对维生素E起补偿和协调作用,防御因维生素E引起的肝受损,提高维生素E的吸收利用率,反之,维生素E也可维持体内硒的活性,减少机体硒损伤。人类精子含有高比例的多不饱和脂肪酸,所以他对氧化反应非常敏感,硒与维生素E在抗氧化反应中的协同作用中,血浆硒与血浆维生素E含量呈正相关,补硒有助于维持机体较高水平的维生素E,然而,维生素E可防治脂化氧化和活性氧化物(ROS)的产生,因而清除ROS所需的GSH-Rx量减少,对硒需要量也随之减少。维生素C和维生素E同样具有抗氧化作用,可以防止活性氧类物质对精子的氧化损伤引起的精子活力下降。维生素C还能提高精浆中微量元素锌和硒的含量,改善精子的转运功能。维生素E还可以减少或组织不饱和酸和维生素A的氧化并增加维生素A的利用,抑制前列腺素的氧化产物。叶酸和维生素B12对于正常细胞的生长和DNA合成至关重要。叶酸和维生素B12与蛋氨酸的合成密切相关两者中任何一种缺失都将影响该途径并产生相似的临床症状,即使叶酸的摄入正常,但维生素B12的缺乏亦会减低红细胞对叶酸的摄取和利用,使红细胞内叶酸浓度下降。维生素B12和叶酸缺乏,胸腺嘧啶核苷酸减少,DNA合成速度减慢。叶酸、维生素B12是同型半胱氨酸(homocysteine
,Hcy)代谢必需的辅因子,叶酸、维生素B12灌胃可降低大鼠体内Hcy水平,提高SOD抗氧化酶的活性,通过加强Hcy的代谢,减少体内Hcy的堆积,保护谷胱甘肽系统,提高机体抗氧化能力。实验研究表明,ROS与精子形态异常呈正相关,维生素B12和叶酸与ROS均呈负相关。维生素b12对精子生成和维持精子正常功能是必需的,ROS水平与精子功能缺陷有关,维生素B12和叶酸可通过降低ROS以维持精子的正常功能。
精子的生成周期约为74天,分4-5个小周期。本发明的组合物鉴于长期服用的安全性及长期服用才能达到的目的性,优选给予/服用每日最低剂量组合物至少6个月。
实施例一
预混原料维生素B12(0.6g)、维生素C(200g)、天然维生素E(50g)、叶酸(0.26g)、葡萄糖酸锌(50g)、富硒酵母(25g)、果糖、柠檬酸、精氨酸等(674.14g),由上述制备方法制成组合物2000片,每片0.5g。取雄性大鼠适应性喂养5天后,随机分4组,每组15只,正常组大鼠食用普通饲料,三个样品组大鼠分别食用普通饲料同时灌胃给予0.5g/kg、1.0g/kg、2.5g/kg的以上组合物,30天后各组大鼠主动脉取血,同时解剖取睾丸。见表2,检测结果统计学处理表明:三个样品组各组大鼠睾丸重量、精子计数及活动百分率均显著高于正常组(P<0.01),另外样品组大鼠血浆睾酮及睾丸睾酮水平对于正常组亦有显著提高(P<0.01)。
表2 大鼠睾丸重量及指数、精子计数及活力、血浆睾酮及睾丸睾酮的变化(均数±标准差)
________________________________________________________________________________
Groups Dose n 睾丸重量 精子计数 活动百分率 血浆睾酮 睾丸睾酮
(g) (万/100mg附睾) (%) (nd/dl) (ng/g)
正常组 15 3.25±0.28 4010.72±629.24 75.9±6.8 75.75±7.23 47.71±5.57
样品组 0.5g/kg 15 3.29±0.20 3957.35±555.19 73.1±7.3 70.13±9.17 43.92±6.38
样品组 1.0g/kg 15 3.47±0.30 4273.36±687.35 77.3±9.4 80.43±10.86 50.12±7.99
样品组 2.5g/kg 15 3.52±0.40 4358.12± 726.69 79.4±10.2 96.06±11.42 58.27±9.02
________________________________________________________________________________
实施例二
复合配方维生素B12(0.3mg)、维生素C(50mg)、天然维生素E(25mg)、叶酸(1.3mg)、葡萄糖酸锌(45mg)、富硒酵母(15mg)、果糖(50mg)、柠檬酸(15mg)及精氨酸粉(196.7mg)制成复方粉剂,每剂0.5克,选35例23-38岁之间2年以上不育病程的不育患者与20例对照组正常男性进行90天临床观察。每日1次,每次2剂组合物制剂给予不育患者,连续口服90天,每月月末进行计算机辅助精液分析(CASA),服用60天和90天后,见表3,患者精子质量明显改善,与服用前相比,患者的精子密度、精子活动率、(a+b)级精子、精子存活率、前向活动精子百分率均有显著提高(P<0.01)。60天后不育患者组与正常组测定精液锌离子浓度、精子密度、精子活动率、精子活力及血浆锌浓度对比发现差异均无显著性(P>0.05)(见表4),基本接近正常水平且无任何毒副作用。
表3 不育组服用前后精液CASA分析结果比较
观察指标 治疗前平均值 治疗60天后平均值 治疗90天后平均值 治疗前后增加(%)
精液量(m) 3.11 3.10 3.38 8.68
精子密度(106/ml)19.62 26.43 45.19 130.33
精子总数(106/l) 61.02 81.93 152.74 150.32
精子活率(%) 29.08 43.93 63.93 119.84
精子活力(%)
a 9.13 16.58 23.98 162.65
b 13.93 20.47 26.24 88.37
c 6.52 6.88 13.71 110.28
d 70.02 56.07 36.07 -48.49
精子运动特征
曲线运动(VCL、μm/s) 38.94 43.23 45.30 16.33
直线运动(VSL、μm/s) 22.38 26.81 28.69 28.19
平均路径速度(VAP、μm/s) 26.02 30.39 32.37 24.40
平均移动角度(MAD、°) 51.21 53.26 52.71 2.93
侧摆幅度(ALH、μm) 3.07 3.66 3.51 14.33
鞭打频率(BCF、Hz) 6.17 5.39 5.36 -13.13
直线运动精子比值(LIN、%) 48.20 61.56 62.98 30.66
摆动运动精子比值(WOB、%)67.52 70.96 72.26 7.02
前向运动精子比值(STR、%) 74.73 85.86 86.51 15.76
——————————————————————————————
表4 不育组与对照组精液CASA分析结果比较
(用原子吸收光谱仪测定锌离子)
_______________________________________________________________
观察指标 正常男性对照组 不育组服用60天后 P值
——————————————————————————————————————
精液锌离子浓度 198.88±84.43 177.65±86.39 > 0.05
血浆锌离子浓度 0.94±0.15 0.97±0.10 >0.05
精子密度(106/ml) 29.40±14.1 26.43±13.0 > 0.05
精子活动率(%) 51.7±15.8 43.93±15.6 > 0.05
精子活力(%,a+b) 39.8±14.9 37.25±12.6 > 0.05
________________________________________________________________________________
上述实施例不作为对本发明的限定,凡在本发明的范围内所作的任何修改、等同替换、改进等,均属于本发明的保护范围。