CN102846672B - 一种金针菇益智口服液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明所述的一种金针菇益智口服液的制备方法涉及一种来源于菌类材料的医用配制品的制备方法。该制备方法包括以下步骤：（1）将金针菇、猴头菇和香菇子实体按质量比3:2:1-8:1:1在低温中进行脱水并粉碎；（2）向粉碎后的子实体混合物中加入其体积5-20倍的60℃水超声提取1-3小时，然后过滤；（3）向滤渣中加入其体积3-10倍的60℃水超声提取1-3小时，然后过滤；将过滤后获得的滤液与步骤（2）过滤后获得的滤液混合均匀；（4）将滤液浓缩至子实体粉碎后体积的6-20倍；（5）加入牛磺酸混合均匀。本发明制得的金针菇益智口服液具有提高机体免疫和改善记忆，益智的功效。
Description
技术领域
本发明涉及一种来源于菌类材料的医用配制品的制备方法。
背景技术
金针菇又名金钱菌、毛柄金钱菌、朴蕈、金菇、增智菇等。金针菇含有人体必需氨基酸成分较全，其中赖氨酸和精氨酸含量尤其丰富，且含锌量比较高，对增强智力尤其是对儿童的身高和智力发育有良好的作用，而且金针菇能有效地增强机体的生物活性，促进体内新陈代谢，有利于食物中各种营养素的吸收和利用，对生长发育也大有益处，因而有“增智菇”、“一休菇”的美称。
猴头菇又名猴头菌、猴头蘑、刺猬菌等。性平、味甘，利五脏，助消化；具有健胃，补虚，抗癌，益智安神之功效。现代研究发现猴头菇是一种高蛋白、低脂肪、富含矿物质和维生素的一种优良食品。由于富含不饱和脂肪酸，能降低血胆固醇和甘油三酯含量，调节血脂，利于血液循环，是心血管患者的理想食品。此外含有的多糖体、多肽类及脂肪物质，能抑制癌细胞中遗传物质的合成，从而预防和治疗消化道癌症和其他恶性肿瘤。
香菇又名香蕈、冬菇、花菇、天白花菇、伞花菇等。香菇素有"山珍之王"之称，含有丰富的营养成分，具有高蛋白、低脂肪的特点，并含有游离氨基酸，活性多糖、科溶性蛋白及某些微量金属元素（如Ca、Cu、Fe、Mg等）。现代医学和营养学研究发现，香菇多糖对免疫系统具有广泛的作用，在多个层次上对淋巴细胞和巨噬细胞等多种免疫细胞的功能起到增强的作用；此外香菇多糖具有较好的抗肿瘤作用和保护肝损伤的作用。
牛磺酸又称β-氨基乙磺酸，最早由牛黄中分离出来，故得名。牛磺酸广泛分布于动物组织细胞内，海生动物含量尤为丰富，哺乳类组织细胞内亦含有较高的牛磺酸，特别是神经、肌肉和腺体内含量更高，是机体内含量最丰富的自由氨基酸。牛磺酸可促进婴幼儿脑组织和智力发育；提高神经传导和视觉机能；改善内分泌状态，增强人体免疫；改善记忆。在牛磺酸与脑发育关系的动物实验研究中发现，牛磺酸可促进大白鼠的学习与记忆能力。补充适量牛磺酸不仅可以提高学习记忆速度，而且还可以提高学习记忆的准确性，并且对神经系统的抗衰老也有一定作用。
发明内容
本发明旨在提供一种金针菇益智口服液的制备方法，制得的金针菇益智口服液具有改善记忆，益智的功效。
本发明所述的一种金针菇益智口服液的制备方法，包括以下步骤：
（1）将金针菇、猴头菇和香菇子实体按质量比3:2:1-8:1:1在低温中进行脱水并粉碎；
（2）向粉碎后的子实体混合物中加入其体积5-20倍的60℃水超声提取1-3小时，然后过滤；
（3）向滤渣中加入其体积3-10倍的60℃水超声提取1-3小时，然后过滤；将过滤后获得的滤液与步骤（2）过滤后获得的滤液混合均匀；
（4）将滤液浓缩至子实体粉碎后体积的6-20倍；
（5）向浓缩后的滤液中加入牛磺酸并混合均匀。
优选地，步骤（1）中所述的低温是指温度低于20℃。
优选地，步骤（1）中的粉碎至子实体颗粒体积小于1cm3。
优选地，步骤（2）或（3）中的过滤是使用真空泵进行固液分离。
优选地，步骤（5）中牛磺酸的加入量是子实体粉碎后体积的0.012-0.04倍。
本发明有效地提取了金针菇、猴头菇和香菇的活性物质，并添加牛磺酸，使获得的产品具有较好的提高免疫和改善记忆功效。
下面通过相关实验来验证本发明产品（下面简称为本发明）的功效。
使用本发明进行改善记忆功能动物实验。
1.1 动物。
三月龄健康昆明种小鼠22只，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供，许可证号为SCXK(粤)2011-0029。饲养环境温度25±1℃，自然光照，给予充足的饮水和食物，适应3d后开始实验。
1.2 主要药品与仪器。
金针菇等提取物由广东粤微食用菌技术有限公司提供；MG-B型三等分辐射式迷宫，购自江苏张家港市三兴教学器械厂；SOD试剂盒、MDA试剂盒均购自南京建成生化试剂有限公司。
1.3动物分组与处理。
实验动物分为对照组和高、低药物组，其中高、低计量组均为8只，对照组小鼠6只，雌雄小鼠各半。小鼠适应3d后，根据分组情况开始灌胃相应浓度药物或生理盐水。高剂量组小鼠每只每次给药0.2ml，每天一次；低剂量组小鼠每只每次给药0.1ml，隔天一次；对照组小鼠每只每次给予0.2ml生理盐水，每天一次；均为每天中午12：30灌胃给药。共灌胃给药20d，第21天起停止给药并开始进行行为训练；行为训练7天，行为训练期间暂停给药。
行为训练结束后仍按照原定计划给药，直至第32天。取脑，测SOD和MDA。按试剂盒规定操作，用紫外分光光度计检测各项指标的OD值，计算各组SOD和MDA值。
1.4行为学训练。
训练模型为三等分辐射式迷宫箱。检测指标为每实验日正确反应率、达标小鼠的比率及达标所需训练次数。采用固定次数不休息法：安全区以无规则的顺序变换。小鼠受电击后从起步区直接到达安全区为“正确反应”，反之为“错误反应”。给药第21d开始迷宫训练，每天训练20次，电击强度为30~50V，相邻训练间隔时间为20~40s。连续训练7d，当正确反应率≥90%时，表明动物达学会标准（达标）。记下小鼠每天的正确反应率、各组达标率以及达标小鼠所需的训练次数。所有行为训练均在黑暗条件安静环境中进行。
1.5 统计学方法。
各组数据以均值±标准差（ 
±S）表示，组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）。行为达标率用百分比表示，卡方检验，数据处理采用SPSS13.0统计软件进行分析处理。p<0.05为差异具有显著性，p<0.01为差异极显著。
2.实验结果。
2.1金针菇多糖对小鼠达标率及达标所需训练次数的影响
表1 多糖对小鼠达标率及达标所需训练次数的影响
| 对照组（n=6） | 低剂量组(n=7) | 高剂量组(n=5) | |
| 达标率（%） | 33.33 | 57.04## | 40．00 |
| 达标所需训练次数 | 100±0 | 75±15# | 100±20 |
与对照组比较，#：P＜0.05；##：P＜0.01。
结果表1所示。经7天的行为训练，低剂量组小鼠达标率（57.04%）显著高于对照组小鼠的达标率（33.33%），而高剂量组（40.00%）与对照组之间没有显著性差异。提示低剂量的金针菇多糖可以提高小鼠的达标率。
在达标的小鼠中，低剂量组小鼠达标所需训练次数（75±15）显著少于对照组的（100）；而高剂量组与对照组之间不存在显著差异性。
2.2金针菇多糖对小鼠大脑海马组织SOD和MDA的影响
表2 金针菇多糖对小鼠海马SOD和MDA含量的影响 (
±S)
| 对照组(n=6) | 低浓度组(n=7) | 高浓度组(n=5) | |
| 蛋白浓度% | 0.29±0.15 | 0.48±0.10* | 0.21±0.11 |
| SOD活力 （U/mgprot） | 61.01±11.30 | 74.92±14.66* | 74.45±16.41* |
| MDA含量（nmol/mgprot) | 14.07±4.70 | 7.27±2.05* | 16.78±5.00 |
与对照组相比，*：p<0.05；**：p<0.05。
结果如表2所示，与对照组比较，低剂量的金针菇多糖明显提高大脑海马组织中蛋白质的含量（P<0.05）；高低剂量的金针菇多糖对SOD水平均有显著的提高作用（P<0.05）；低剂量的金针菇多糖显著降低MDA含量（P<0.05），而高剂量对MDA含量却没有明显的影响。
SOD和MDA是临床常用的评价抗氧化与脂质过氧化的指标。资料报道，老年痴呆患者海马组织中脂质过氧化水平明显升高，而抗氧化指标SOD（过氧化物歧化酶）的活力通常降低。本实验结果提示：金针菇多糖具有明显的抗氧化功效，低剂量效果优于高剂量。
3.小结。
金针菇多糖对小鼠的学习记忆有一定的促进作用，以低剂量组为佳。表现为提高小鼠的达标率以及减少达标所需的训练次数，而对每天的正确反应率却没有显著的影响。
低剂量的金针菇多糖显著提高大脑海马组织中的蛋白质含量，提高SOD活力，降低MDA含量，显示出明显的抗氧化作用。
【具体实施方式】
实施例一
（1）将30克金针菇、20克猴头菇和10克香菇子实体在20℃以下的低温中进行脱水粉碎；
（2）向粉碎后的子实体混合物中加入其体积15倍的60℃水超声提取2小时，然后过滤；
（3）向滤渣中加入其体积10倍的60℃水超声提取2小时，然后过滤。将过滤后获得的滤液与步骤（2）过滤后获得的滤液混合均匀；
（4）将滤液浓缩至子实体粉碎后体积的12倍，即720ml，测多糖含量；
（5）向浓缩后的滤液中加入牛磺酸1.44克并混合均匀；
（6）高温灭菌分装。
实施例二
（1）将40克金针菇、20克猴头菇和10克香菇子实体在20℃以下的低温中进行脱水粉碎；
（2）向粉碎后的子实体混合物中加入其体积10倍的60℃水超声提取2小时，然后过滤；
（3）向滤渣中加入其体积10倍的60℃水超声提取2小时，然后过滤。将过滤后获得的滤液与步骤（2）过滤后获得的滤液混合均匀；
（4）将滤液浓缩至子实体粉碎后体积的14倍，即980ml，测多糖含量；
（5）向浓缩后的滤液中加入牛磺酸1.96克并混合均匀；
（6）高温灭菌分装。
实施例三
（1）将60克金针菇、30克猴头菇和20克香菇子实体在20℃以下的低温中进行脱水粉碎；
（2）向粉碎后的子实体混合物中加入其体积20倍的60℃水超声提取2小时，然后过滤；
（3）向滤渣中加入其体积15倍的60℃水超声提取2小时，然后过滤。将过滤后获得的滤液与步骤（2）过滤后获得的滤液混合均匀；
（4）将滤液浓缩至子实体粉碎后体积的15倍，即1650ml，测多糖含量；
（5）向浓缩后的滤液中加入牛磺酸3.3克并混合均匀；
（6）高温灭菌分装。
Claims (4)
1.一种金针菇益智口服液的制备方法，其特征在于由以下步骤组成：
（1）将金针菇、猴头菇和香菇子实体按质量比3:2:1-8:1:1在低温中进行脱水并粉碎；
（2）向粉碎后的子实体混合物中加入其体积5-20倍的60℃水超声提取1-3小时，然后过滤；
（3）向滤渣中加入其体积3-10倍的60℃水超声提取1-3小时，然后过滤；将过滤后获得的滤液与步骤（2）过滤后获得的滤液混合均匀；
（4）将滤液浓缩至子实体粉碎后体积的6-20倍；
（5）向浓缩后的滤液中加入牛磺酸并混合均匀；
步骤（1）中所述的低温是指温度低于20℃。
2.如权利要求1所述的金针菇益智口服液的制备方法，其特征在于步骤（1）中的粉碎至子实体颗粒体积小于1cm3。
3.如权利要求1所述的金针菇益智口服液的制备方法，其特征在于步骤（2）或（3）中的过滤是使用真空泵进行固液分离。
4.如权利要求1所述的金针菇益智口服液的制备方法，其特征在于步骤（5）中牛磺酸的加入量是子实体质量的0.012-0.04倍。
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