CN1027991C - 生物组织冰冻切片包埋剂及其配制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种生物组织冰冻切片包埋剂及其配制方法，其配方中含有聚乙烯醇、甲醛、聚乙二醇、甲基纤维素以及除离子水；其配制方法是用聚乙烯醇的水溶液于反应釜中在高温条件下与甲醛发生缩聚反应；并以甲基纤维素的水溶液作为基质，聚乙二醇作为添加剂共同合成的一种水溶性透明胶样惰性化合物；本发明可广泛用于对生物标本尤其是人体各器官进行包埋冰冻切片，而不影响对组织切片的染色和观察。

Description

本发明涉及一种生物组织冰冻切片包埋剂及其配制方法。

冰冻切片对外科手术急诊病理诊断具有重要的指导作用。随着免疫组化实验的开展，其应用范围更加广泛。良好的包埋剂是切片质量的重要因素。经检索《中国专利文献通报》1985年至今，《科技文献索引》医学部分1974至今，《科学技术成果公报》1982至今，《医学期刊目录》1985至今，《病理学》教科书1965至今及《病理技术手册》1960至今，均未公开过有关包埋剂技术：在国内绝大多数医疗卫生部门均依靠从国外进口包埋剂代用品，少数单位因外汇不够，只能用水配制粘合剂作为包埋剂代用品。前者价格昂贵（120元/110ml或15美元/110ml），加上购买不便，切片韧性差;后者冻结后质地坚硬，破坏刀具，切片皱折多和组织不全等不足，均给诊断和观察带来诸多困难。

本发明的目的是为了避免上述现有技术的不足之处而提供一种不破坏生物组织、冻结速度快、切片无皱折、韧性较好的生物组织冰冻切片包埋剂及其配制方法。

本发明的目的可通过如下措施来实现：

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：

聚乙烯醇    6-9%

甲醛    4.2-7%

聚乙二醇    0.42-0.7%

甲基纤维素    0.7-1.2%，其余量为除离子水。

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配制方法为：①先将聚乙烯醇溶于除离子水于反应釜中，在30分钟-1小时内将其加温至200℃-250℃，再用真空泵吸入甲醛，并加盐酸调节其pH值至2.5-3;然后关闭反应釜，待其自然冷却至室温加聚乙二醇;②将甲基纤维素溶于90℃的除离子水中;③再将①、②用除离子水混合备用，反应过程中各物质的含量按上述配方百分组份。

本发明的目的还可通过如下措施来实现：

生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：

聚乙烯醇    6.2-8%

甲醛    4.6-6.29%

聚乙二醇    0.46-0.62%

甲基纤维素    0.77-1.15%，其余量为除离子水。

配方中聚乙二醇可用碳蜡代替，其配方百分组份不变。

本发明的使用方法：打开冰冻切片机，先在支持器上滴少许包埋剂，将组织标本平放在其上面，然后在标本四周加上适当包埋剂，当切片机降到一定的温度时即可切片。

本发明相比现有技术具有如下优点：

1、本发明为水溶性透明胶样惰性化合物，制片容易，在染色体中易除去，并不与标本发生反应，避免了使用包埋剂代用品对组织的破坏。

2、本发明中含有甲基纤维素作为基质克服了国外同类产品的韧性差的弊端，使其切片无皱折。

3、本发明中含有游离聚乙二醇，增加了包埋剂的水溶性，同时也加快了冻结速度。

4、本发明使用方便，成本低为国外包埋剂代用品成本的1%，并且生产工艺简便。

本发明还将结合实施例作进一步详述：

实施例1：

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：聚乙烯醇6%、甲醛4.2%、聚乙二醇0.42%、甲基纤维素0.7%，其余量为除离子水。

其配制方法为：①先将聚乙烯醇溶于除离子水于反应釜中，在30分钟内将其加温至200℃，再用真空泵吸入甲醛，并加盐酸调节其pH值至2.5;然后关闭反应釜，待其自然冷却至室温加聚乙二醇;②将甲基纤维素溶于90℃的除离子水中，③再将①、②用除离子水混合备用，反应过程中各物质的含量按上述配方百分组份。

实施例2：

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：聚乙烯醇9%、甲醛7%、聚乙二醇0.7%、甲基纤维素1.2%，其余量为除离子水。

其配制方法为：①先将聚乙烯醇溶于除离子水于反应釜中，在1小时内将其加温至250℃，再用真空泵吸入甲醛，并加盐酸调节其pH值至3;然后关闭反应釜，待其自然冷却至室温加聚乙二醇;②将甲基纤维素溶于90℃的除离子水中;③再将①、②用除离子水混合备用，反应过程中各物质的含量按上述配方百分组份。

实施例3：

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：聚乙烯醇6.2%、甲醛4.6%、聚乙二醇0.46%、甲基纤维素0.77%，其余量为除离子水。

其配制方法为：①先将聚乙烯醇溶于除离子水于反应釜中，在40分钟内将其加温至220℃，再用真空泵吸入甲醛，并加盐酸调节其pH值至2.7;然后关闭反应釜，待其自然冷却至室温加聚乙二醇;②将甲基纤维素溶于90℃的除离子水中;③再将①、②用除离子水混合备用，反应过程中各物质的含量按上述配方百分组份。

实施例4：

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：聚乙烯醇8%、甲醛6.29%、聚乙二醇0.62%、甲基纤维素1.15%，其余量为除离子水。

其配制方法与上述相同。

实施例5：

一种生物组织冰冻切片包埋剂的配方百分组份为：聚乙烯醇7.4%、甲醛5.5%、碳蜡0.54%、甲基纤维素0.92%，其余量为除离子水。

其配制方法与上述相同。

本发明的使用情况见附表一、二、三。

附表（一）：是对我院近两年来应用本包埋剂在外科急诊冰冻切片1031例应用情况统计（按总后卫生部颁部的切片评分标准）。

组织来源    例数    切片打分

（100分计算）

子宫肌瘤    119    91

乳腺腺病    113    92.5

卵巢肿瘤    108    93.5

甲状腺腺病    95    95.5

脑肿瘤    74    97

甲状腺癌    31    94

乳腺癌    60    94

肺癌    29    96

上颌窦肿瘤    25    94

疱疹样皮肤    91    90.5

胃癌    23    91.5

大肠癌    18    92

喉癌    11    90

肾癌    11    98.5

其它肿瘤组织    255    96.4

附表（二）：对二十只家兔的不同组织器官分别应用我院生产的包埋剂与美国进口的OCT包埋剂在同一实验条件下进行切片质量比较。

组织来源    例数    LZP包埋剂    OCT包埋剂

切片打分    切片打分

心    20    98    98

肝    20    98.5    96

脑    20    97    92

脾    20    98    96

肾    20    97.5    96

胰腺    29    97    97

卵巢    16    94    90

子宫    16    92.5    89

肌肉    15    92    88.5

皮肤    15    90.5    80

肺    15    95    95

大肠    13    93    91

小肠    12    92.5    90

附表（三）：是对五十只大白鼠的主要脏器分别与小白鼠的胃放在一起进行复合制片情况统计。

组织来源    制片例数    制片分数

心、肝、肾    40    95.7

骨骼肌、胃

心、胰腺、肌肉    18    97

肾、胃

脑、心、肝、胃    15    93

肌肉

肾、胰腺、脑、    15    92

皮肤、胃

Claims (4)

1、一种生物组织冰冻切片包埋剂，其特征是包埋剂的配方重量百分组份为：

聚乙烯醇    6-9%

甲    醛    4.2-7%

聚乙二醇    0.42-0.7%

甲基纤维素  0.7-1.2%，其余量为除离子水。

2、一种生物组织冰冻切片包埋剂的配制方法，其特征是：①先将聚乙烯醇溶于除离子水于反应釜中，在30分钟-1小时内将其加温至200℃-250℃，再用真空泵吸入甲醛，并加盐酸调节其pH值至2.5-3;然后关闭反应釜;待其自然冷却至室温加聚乙二醇;②将甲基纤维素溶于90℃的除离子水中;③再将①、②用除离子水混合备用，反应过程中各物质的含量按上述配方百分组份。

3、如权利要求1所述的生物组织冰冻切片包埋剂，其特征是包埋剂的配方重量百分组份为：

聚乙烯醇  6.2-8%

甲醛  4.6-6.29%

聚乙二醇  0.46-0.62%

甲基纤维素  0.77-1.15%，其余量为除离子水。

4、如权利要求1所述的生物组织冰冻切片包埋剂，其特征是包埋剂配方中聚乙二醇可用碳蜡代替，其配方重量百分组份不变。