CN102735787A - 一种新健胃片及其相关制剂的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种新健胃片及其相关制剂的质量检测方法，该方法选用黄芩中的汉黄芩苷作为黄芩投料量的检测指标，以1%甲酸为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。本发明创新的提出采用将黄芩中黄芩苷含量测定改为黄芩中汉黄芩苷含量测定的技术，形成中药质量控制方法新体系，技术方法新颖，特别是测定黄芩中汉黄芩苷含量测定的研究成果，含量检测指标稳定，长期稳定性试验证明汉黄芩苷在碱性条件下不衰减，使产品质量得到有效监控。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药制剂的质量检测方法，特别涉及一种新健胃片及其相关制剂的质量检测方法。
背景技术
新健胃片的质量标准收载于国家食品药品监督管理局地方标准上升为国家标准之《国家中成药标准汇编》（内科消化分册）。具体内容如下：
【处方】陈皮40g 苍术(制)40g 黄芩55g
大黄15g 碳酸氢钠350g。
【制法】以上五味，苍术（制）、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒。制得的颗粒喷加挥发油，加入适量淀粉及0.5～1.0%硬脂酸镁混合整粒，压制成1000片，即得。
【性状】本品为淡棕色的片；味微咸。
【鉴别】（1）本品的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应（中国药典2000年版一部附录IV）
（2）取本品10片，研细，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2000年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）取本品5片，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试 品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2000年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，再与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。
（4）取本品10片，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2000年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF251薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水（10：7：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】应符合片剂项下有关的各项规定（中国药典2000年版一部附录Ⅳ）。
【含量测定】
碳酸氢钠取重量差异项下本品，研细，精密称取适量（约相当于碳酸氢钠0.7g）置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与硫酸铵溶液（1→20）17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用盐酸滴定液（0.5mol/l）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/l）相当于42.00mg的NaHCO3。
本品含碳酸氢钠（NaHCO3）应为标示量的93.0％～107.0％。
黄芩照高效液相色谱法（中国药典2000年版一部附录VID）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水－磷酸（45：55：0.2）为流动相；检测波长为276nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.2％磷酸甲醇溶液50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含黄芩以黄芩苷（C21H18O11）计，不得少于3.7mg。
因该片剂每片中含碳酸氢钠0.35g，占自身片重的70%，而黄芩中黄酮类成分黄芩苷在酸碱条件下转化，含量不稳定，受环境因素及其他成分共存（酸碱）的影响较大，导致通过黄芩苷测定黄芩的含量时，存在准确性差，不能有效控制产品质量的缺陷。
发明内容
本发明目的在于提供一种新健胃片及其相关制剂的检测方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的。
本发明检测方法包括如下含量测定方法，具体步骤是：
照高效液相色谱法（《中国药典》一部附录ⅥD）测定；
色谱条件与系统适用性试验为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1%甲酸为流动相A，以乙腈为流动相B，按如下比例进行梯度洗脱：
0～15分钟，流动相A占78%，流动相B占22%；15～25分钟，流动相A由78%降到75%，流动相B由22%升至25%；25～40分钟，流动相A由75%降到68%，流动相B由25%升至32%；40～45分钟，流动相A由68%升至78%，流动相B由32%降到22%；检测波长为280nm；理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得，对照品溶液每1ml中含汉黄芩苷0.02mg。
供试品溶液的制备：取新健胃片及其相关制剂8-12制剂单位，研细，精密称取新健胃片及其制剂粉末0.1-0.3g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.3-0.5%磷酸的65-80%乙醇溶液20-30ml，称定重量，超声处理40～60 分钟，放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每制剂单位含黄芩以汉黄芩苷C22H20O11计，不得少于1.0mg。
优选地，本发明检测方法包括如下含量测定方法：
色谱条件与系统适用性试验为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1%甲酸为流动相A，以乙腈为流动相B，按如下比例进行梯度洗脱：
0～15分钟，流动相A占78%，流动相B占22%；15～25分钟，流动相A由78%降到75%，流动相B由22%升至25%；25～40分钟，流动相A由75%降到68%，流动相B由25%升至32%；40～45分钟，流动相A由68%升至78%，流动相B由32%降到22%；检测波长为280nm；理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得，对照品溶液每1ml中含汉黄芩苷0.02mg。
供试品溶液的制备：取新健胃片及其相关制剂10制剂单位，研细，精密称取新健胃片及其相关制剂粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液25ml，称定重量，超声处理40分钟，超声功率500W、频率40kHz，放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
新健胃片及其相关制剂每制剂单位含黄芩以汉黄芩苷C22H20O11计，不得少于1.0mg。
所述取汉黄芩苷对照品适量按中华人民共和国药典规定的常规取样量取样。
所述供试品溶液的制备中0.4%磷酸的70%乙醇溶液可用0.2%磷酸甲醇溶液替代，用量是0.4%磷酸的70%乙醇溶液的两倍。
本发明新健胃片及其相关制剂的质量检测方法还包括如下鉴别和/或含量测定方法：
鉴别：
A．新健胃片及其相关制剂的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应。
B．取新健胃片及其相关制剂8-12制剂单位，研细，加正己烷20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
C．取新健胃片及其相关制剂4-6制剂单位，研细，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热20-40分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。
D．取新健胃片及其相关制剂8-12制剂单位，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流0.5-1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水（10：7：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
碳酸氢钠的含量测定：
取新健胃片及其相关制剂，研细，精密称取适量（约相当于碳酸氢钠 0.7g）置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与硫酸铵溶液（1→20）17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于42.00mg的NaHCO3。
新健胃片及其相关制剂含碳酸氢钠（NaHCO3）应为标示量的93.0％～107.0％。
优选地，本发明新健胃片及其相关制剂的质量检测方法还包括如下鉴别和/或含量测定方法：
鉴别：
A．新健胃片及其相关制剂的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应。
B．取新健胃片及其相关制剂10制剂单位，研细，加正己烷20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
C．取新健胃片及其相关制剂5制剂单位，研细，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热20-40分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。
D．取新健胃片及其相关制剂10制剂单位，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流0.5-1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml 使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水（10：7：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
碳酸氢钠的含量测定：
取新健胃片及其相关制剂，研细，精密称取适量（约相当于碳酸氢钠0.7g）置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与硫酸铵溶液（1→20）17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于42.00mg的NaHCO3。
新健胃片及其相关制剂含碳酸氢钠（NaHCO3）应为标示量的93.0％～107.0％。
所述新健胃片及其相关制剂是由如下原料药和工艺制成：陈皮20-30重量份、制苍术20-30重量份、黄芩30-60重量份、大黄10-20重量份、碳酸氢钠300-400重量份；以上五味药材，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒,制得的颗粒喷加挥发油，加入常规辅料，按照常规工艺制成片剂，胶囊剂，颗粒剂或丸剂。
所述新健胃片及其相关制剂优选如下原料药和工艺制成：
陈皮40重量份、制苍术40重量份、黄芩55重量份、大黄15重量份碳酸氢钠350重量份；以上五味，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒，制得的颗粒喷加挥发油，加入常规辅料，按照常规工艺制成片剂，胶囊剂，颗粒剂或丸剂。
本发明所述新健胃片及其相关制剂的制剂单位片剂为每片，胶囊剂为每 粒，颗粒剂为每袋，丸剂为每丸。
本发明通过在碳酸氢钠碱性条件下（与碱共存时）的实验研究，通过对黄芩苷和汉黄芩苷的化学结构的研究首次发现，黄芩苷不稳定而汉黄芩苷相对稳定，黄芩苷在酸碱条件下转化，受环境因素及其他成分共存（酸碱）的影响较大，不宜作为法定质量指标进行检测（以前制定质量标准是国家有什么对照，就选什么作对照进行研究）；创新性选用黄芩中的汉黄芩苷作为黄芩投料量的检测指标，技术方法新颖，含量检测指标稳定，长期稳定性试验证明汉黄芩苷在碱性条件下不衰减，使产品质量得到有效监控。
附图说明
图1汉黄芩苷标准曲线
图2新健胃片汉黄芩苷对照品图谱
图3新健胃片阴性空白品图谱
图4新健胃片样品图谱
请在下述实验例中注明图2-图4的来源出处
下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1新健胃片（配方与工艺见实施例1，下同）中黄芩苷不稳定性相关试验
1.首先，将黄芩蒸制灭酶，按工艺制粒压片，但仍不能阻止黄芩苷降解（见表1）；
表1以炮制黄芩粉（蒸制灭酶）按处方压片试验数据
| 批号 | 生产日期 | 留样时间 | 原含量 | 现含量 | 降解％ |
| 1 | 06.6.16 | 2个月 | 7.4mg/片 | 2.7mg/片 | 63.5％ |
| 2 | 06.7.6 | 1个月 | 6.7mg/片 | 4.6mg/片 | 31.3％ |
| 3 | 06.7.8 | 1个月 | 8.6mg/片 | 5.1mg/片 | 40.7％ |
2．进行黄芩（蒸制灭酶）细粉单独压片试验，结果仍不能阻止黄芩苷降解；2006年7月25日测定黄芩苷含量为12.6％，加速试验到2006年8月2日就降解为12.0％。
3.进行分别包裹碳酸氢钠和包裹黄芩细粉的方法试验，但在压片后同样 不能阻止黄芩苷不同程度的降解。
根据上述实验，得出结论：黄芩苷本身不稳定。
4.此外，测定黄芩苷含量的相关品种的质量标准中对清肺抑火丸（水丸）进行稳定性试验考察，一年零两个月黄芩苷含量由5.0mg/g降解到3.5mg/g，降解速度达到30.0%。对龙胆泻肝丸（水丸）进行稳定性试验考察，发现三个月黄芩苷含量由8.43mg/g降解到7.88mg/g。
5、2007-2009年20批新健胃片产品的黄芩苷含量变化，见表2。
表220072009年20批新健胃片黄芩苷含量考察
6.黄芩苷对照品在碳酸氢钠碱性条件下稳定性考察
母液a：取黄芩苷对照品10mg，加70%乙醇50ml溶解。
①取母液a 20ml，加0.35g碳酸氢钠（模拟新健胃片），超声30分钟，液相检测无含量。
②取母液a 20ml，加0.35g碳酸氢钠，再加0.1ml磷酸，超声30分钟， 液相检测峰面积与母液的峰面积一致。
结论：黄芩苷在碳酸氢钠碱性下不稳定，加磷酸将溶液调为近中性后稳定。
7.黄芩苷、汉黄芩苷在碳酸氢钠碱性条件下稳定性考察。
取同一批次的新健胃片样品两份（样品中已含碳酸氢钠），每份0.2g，加70%乙醇50ml溶解。①一份超声30分钟（功率500W、频率40kHz）；②另一份加0.1ml磷酸，超声30分钟（功率500W、频率40kHz），两份样品液相检测结果：
表3样品批号：080810含量结果
| 不加酸 | 加酸 | |
| 黄芩苷（mg/片） | 0 | 1.5 |
| 汉黄芩苷（mg/片） | 1.3 | 1.3 |
结论：在碳酸氢钠碱性条件下（与碱共存时），黄芩苷不稳定而汉黄芩苷相对稳定，与以上结论相符。
8.为了验证以上实验，对比黄芩苷、汉黄芩苷的分子结构差异：
黄芩苷结构式：
汉黄芩苷结构式：
黄酮类物质在碱性条件下开环分解，在强碱性下，破坏黄酮母核：
汉黄芩苷与黄芩苷相比，黄酮母核上少个邻位（6位）羟基，在黄酮母核8位上具有甲氧基，使结构相对稳定，汉黄芩苷在碱性条件下也不易被破坏。所以在碳酸氢钠碱性条件下，汉黄芩苷相对稳定。
9.摸索黄芩药材的含量变化情况及其他成分含量测定方法。
表4不同批次黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷含量考察
| 批号 | 黄芩苷 | 汉黄芩苷 |
| 010448 | 14.26% | 3.66% |
| 010570 | 17.22% | 3.28% |
[0094]
| 010524 | 12.96% | 2.48% |
| 010430 | 15.61% | 3.28% |
| 010330 | 13.19% | 3.32% |
| 010167 | 10.03% | 2.28% |
| 赤峰1年生 | 11.83% | 2.76% |
| 赤峰2年生 | 15.50% | 3.23% |
| 赤峰3年生 | 12.89% | 2.79% |
| 上板城家种 | 7.14% | 1.83% |
| 围场坝上野生090731-3 | 8.25% | 1.72% |
| 围场坝上野生090731-4 | 10.99% | 2.51% |
| 邯郸涉县0908041 | 11.50% | 2.25% |
| 平均 | 12.41% | 2.72% |
实验例2新健胃片中汉黄芩苷含量测定方法研究
1.仪器及试药
选用Agilent HP 1100高效液相色谱仪;Agilent eclipse plus C18(4.6mm*150mm 5μm)色谱柱
汉黄芩苷对照品从上海诗丹德生物技术有限公司购买；乙腈为色谱纯（美国Fisher）、甲酸色谱纯（天津佳兴化工玻璃仪器工贸有限公司）、乙醇分析纯（天津佳兴化工玻璃仪器工贸有限公司）、磷酸分析纯（天津标准科技有限公司）、水（三级反渗透法制得纯化水）。新健胃片为承德颈复康药业集团有限公司生产。
2.色谱条件
色谱柱：用Agilent eclipse plus C18(4.6mm*150mm 5μm)色谱柱、Agilent TC-C18(4.6mm*250mm 5μm)等色谱柱进行分离，均能达到满意的分离效果。
流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）
梯度洗脱程序见下表：
表5
检测波长：280nm
3.流动相的选择
用Agilent eclipse plus C18(4.6mm*150mm 5μm)色谱柱分离，检测波长280nm；分别用①甲醇-水-冰醋酸（40：60：0.3）②乙腈-0.2%磷酸（21：79）③流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）梯度洗脱,梯度洗脱程序同表5。
结果：在以③为流动相的检测中，对照品及新健胃片中汉黄芩苷均得到较好的分离。
4.提取方法：
因黄芩中含有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等黄酮类成分，难溶于水，可溶于甲醇、乙醇，易溶于乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂中。而新健胃片中每片含有70%的碳酸氢钠，偏碱性，在提取过程中如不加酸中和，可能有些成分因色原酮开环分解而检测不到。
4.1本品采用不同提取方法做如下对比实验：
①取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水（3:1）25ml，称定重量，超声处理30分钟（功率500W、频率40kHz），放至室温，称定重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
②取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯—甲醇（3:1）溶液25ml，称定重量，超声处理35分钟（功率500W、频率40kHz），放至室温，称定重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
③取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇溶液溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟（功率500W、频率40kHz，放至室温，称定重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
④取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.2%磷酸甲醇溶液50ml，称定重量，超声处理30分钟（功率500W、频率40kHz），放至室温，称定重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
⑤取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分 钟（功率500W、频率40kHz），放至室温，称定重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
结果表明第①、②、③种方法因提取溶剂中未加酸，检测到汉黄芩苷含量低；第④、⑤种方法中在提取溶剂中加了酸，汉黄芩苷的含量值相近并与理论值接近，考虑甲醇的毒性大于乙醇的毒性，所以确定在方法⑤的基础上进一步对对提取溶剂中加酸量、提取时间进行考察。
4.2对提取溶剂中加酸量、提取时间考察(样品批号101104)
①取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g三份，置50ml具塞锥形瓶中，分别加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液溶液25ml,0.8%磷酸的70%乙醇溶液溶液25ml，1.0%磷酸的70%乙醇溶液溶液25ml，超声30分（功率500W、频率40kHz），结果如下：
表6
结果：样品0.2g加0.4%磷酸的70%乙醇溶液的pH值为6，样品0.2g加0.8%磷酸的70%乙醇溶液的pH值为3，样品0.2g加1.0%磷酸的70%乙醇溶液的pH值为2，黄酮类物质在碱性条件下开环分解，在强酸性条件下部分生成烊盐，只有在弱酸性溶液中稳定。以上三个实验也证实了这一结果，所以选择0.4%磷酸的70%乙醇溶液为提取溶液。
②取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液溶液25ml,⑴超声30分，⑵超声40分，⑶超声50分，⑷回流1小时。分别进行考察，结果如下：
表7
| 提取时间（分钟） | 30分 | 40分 | 50分 | 回流1小时 |
| 汉黄芩苷（mg/片） | 1.31 | 1.33 | 1.33 | 1.32 |
结果：超声提取30分钟的含量偏低，超声提取40分钟、50分钟与加热回流1小时的结果一致，所以选择超声提取40分钟为提取方法。
5.实验条件：
同实施例1。
6.空白实验：
按处方中药味比例配制不含黄芩的阴性样品，依法制备阴性对照液测定。结果表明阴性对照液在汉黄芩苷相应的保留时间无吸收峰，故认为空白无干扰。
7.线性关系考察
精密量取汉黄芩苷对照品溶液（0.04969mg/ml）2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、10ml、分别置10ml量瓶中，用乙醇定容，分别取上述溶液10ul进样，按上述色谱条件进行HPLC分析。见下表8，图1。
表8汉黄芩苷含量测定线性关系考察结果
结果:汉黄芩苷在0.009939mg/ml-0.04969mg/ml范围内呈良好的线性关系。
8.精密度考察
①对照品的精密度考察
精密吸取汉黄芩苷对照品溶液（0.04969mg/ml）10ul,连续进样6次,记录每次的峰面积,结果如下表9:
表9汉黄芩苷对照品精密度
结果：上述数据表明汉黄芩苷对照品精密度良好。
②供试品的精密度考察
精密吸取新健胃片供试品溶液10ul,连续进样6次,记录每次的峰面积,结果如下：
表10供试品的精密度
| 次数 | 汉黄芩苷 |
| 1 | 776.11786 |
| 2 | 773.98334 |
| 3 | 772.60101 |
| 4 | 772.17627 |
| 5 | 772.47491 |
| 6 | 773.03198 |
| 平均值 | 773.397561 |
| RSD | 0.2% |
结果：上述数据表明供试品具有良好的精密度。
9.稳定性考察
①对照品溶液的稳定性
精密吸取汉黄芩苷对照品溶液（0.04969mg/ml）10ul，每隔1h进样一次，连续进样10次，记录每次的峰面积，结果如下表11：
表11汉黄芩苷对照品稳定性
结果：表明汉黄芩苷对照品溶液在10小时内稳定。
②供试品的稳定性
精密吸取新健胃片（批号101103）供试品溶液10ul，每隔50分钟进样 一次，连续进样11次，记录每次的峰面积，结果如下表12：
表12供试品的稳定性
| 进样次数 | 汉黄芩苷（峰面积） |
| 1 | 776.11786 |
| 2 | 773.98334 |
| 3 | 772.60101 |
| 4 | 772.17627 |
| 5 | 772.47491 |
| 6 | 773.03198 |
| 7 | 772.02081 |
| 8 | 772.02081 |
| 9 | 770.93170 |
| 10 | 771.50922 |
| 11 | 769.91449 |
| 平均值 | 772.43476 |
| RSD | 0.3% |
结果：表明供试品溶液在10小时之内稳定。
10.汉黄芩苷回收率试验
取汉黄芩苷10.09mg（含量98.5%）用0.4%磷酸的70%乙醇溶液至200ml容量瓶中，定容至刻度，再分别取10ml、20ml、30ml用0.4%磷酸的70%乙醇溶液至100ml容量瓶中，定容至刻度，分别得对照品溶液①、②、③。精密称定样品0.1g,共9份，1-3精密加入对照品溶液①25ml；4-6精密加入对照品溶液②25ml；7-9精密加入对照品溶液③25ml，按供试品制备方法制成供试品液，进行HPLC分析，计算回收率。结果如下表13:（已知新健胃片批号101103，汉黄芩苷2.79mg/g）
表13汉黄芩苷回收率实验
结果：上述数据表明，回收率在98.15%～100.73%之间，符合要求。
11.重复性试验
精密称取同一批新健胃片（批号101103）粉末9份,1-3份每份0.1g,4-6份每份0.2g,7-9份每份0.4g，按供试品的提取条件制成供试液，按上述色谱条件进行HPLC分析,测定汉黄芩苷峰面积,计算含量。结果如下表14。
表14汉黄芩苷重复性实验
结果：上述数据表明该方法的重复性很好。
12.样品测定
取不同批号的新健胃片,按上述方法测定,结果见表15。
表15不同批号新健胃片中黄芩苷、汉黄芩苷的含量
| 批号 | 汉黄芩苷（mg/片） |
| 070121 | 1.43 |
| 070332 | 1.32 |
| 070411 | 1.43 |
| 070513 | 1.42 |
| 070608 | 1.14 |
[0174]
| 070826 | 1.27 |
| 080128 | 1.30 |
| 080322 | 1.48 |
| 080504 | 1.42 |
| 080611 | 1.38 |
| 080810 | 1.34 |
| 080830 | 1.22 |
| 090107 | 1.53 |
| 090210 | 1.51 |
| 090309 | 1.44 |
| 090414 | 1.22 |
| 090617 | 1.31 |
| 090805 | 1.39 |
| 100101 | 1.17 |
| 100208 | 1.21 |
| 100317 | 1.26 |
| 100405 | 1.27 |
| 100423 | 1.16 |
| 100505 | 1.31 |
| 100512 | 1.22 |
| 101002 | 1.10 |
| 101016 | 1.30 |
| 101017 | 1.30 |
| 101018 | 1.26 |
| 101103 | 1.32 |
| 平均 | 1.31 |
13.对我公司一年内的黄芩药材样品及不同产地的黄芩样品共13批进行含量测定，结果见表16。
表16不同批次黄芩中汉黄芩苷含量考察
| 批号 | 汉黄芩苷 |
| 010448 | 3.66% |
[0178]
| 010570 | 3.28% |
| 010524 | 2.48% |
| 010430 | 3.28% |
| 010330 | 3.32% |
| 010167 | 2.28% |
| 赤峰1年生 | 2.76% |
| 赤峰2年生 | 3.23% |
| 赤峰3年生 | 2.79% |
| 上板城家种 | 1.83% |
| 围场坝上野生090731-3 | 1.72% |
| 围场坝上野生090731-4 | 2.51% |
| 邯郸涉县0908041 | 2.25% |
| 平均 | 2.72% |
14.说明
上述13批次黄芩药材中汉黄芩苷的平均含量2.72%，按药材平均含量的80%确定药材的含量应不低于2.18%。按此药材投料，新健胃片的汉黄芩苷理论含量为0.096mg/片（按80%转移率计算），采用此方法测定的以上30批样品实测平均含量为1.31mg/片，最低含量1.10mg/片，因此新健胃片汉黄芩苷含量应不少于1.0mg/片。
具体实施方式
下述实施例均能实现上述实验例所述效果。
实施例1新健胃片的质量检测方法
【处方】陈皮40g、制苍术40g、黄芩55g、大黄15g、碳酸氢钠350g、淀粉适量、硬脂酸镁适量，制成1000片。
【制法】以上五味药材，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒。制得的颗粒喷加挥发油，加入适量淀粉及0.5-1.0%硬脂酸镁混合整粒，压制成1000片，即得。
【含量测定】
黄芩照高效液相色谱法（《中国药典》一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）按表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为 280nm。理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得对照品溶液（每1ml中含汉黄芩苷0.02mg）。
供试品溶液的制备：取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液25ml，称定重量，超声处理40分钟（超声功率500W、频率40kHz），放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含黄芩以汉黄芩苷(C22H20O11)计，不得少于1.0mg。
实施例2新健胃片的质量检测方法
处方、制法同实施例1。
【鉴别】（1）本品的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应（《中国药典》一部附录Ⅳ）
（2）取本品10片，研细，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）取本品5片，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试 品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。
（4）取本品10片，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水（10：7：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】应符合片剂项下有关的各项规定（《中国药典》一部附录ID）。
【含量测定】
碳酸氢钠
取重量差异项下本品，研细，精密称取适量（约相当于碳酸氢钠0.7g）置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与硫酸铵溶液（1→20）17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于42.00mg的NaHCO3。
本品含碳酸氢钠（NaHCO3）应为标示量的93.0％～107.0％。
黄芩照高效液相色谱法（《中国药典》一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）按表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为280nm。理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得对照品溶液（每1ml中含汉黄芩苷0.02mg）。
供试品溶液的制备取本品10片，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.2%磷酸甲醇溶液50ml，称定重量，超声处理40分钟（超声功率500W、频率40kHz），放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含黄芩以汉黄芩苷(C22H20O11)计，不得少于1.0mg。
实施例3新健胃胶囊制剂的质量检测方法
陈皮40g、制苍术40g、黄芩55g、大黄15g、碳酸氢钠350g，制成1000粒。
以上五味药材，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒。制得的颗粒喷加挥发油，加入适量淀粉及0.5-1.0%硬脂酸镁混合整粒，装胶囊1000粒，即得。
【含量测定】
黄芩照高效液相色谱法（《中国药典》一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）按表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为280nm。理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得对照品溶液（每1ml中含汉黄芩苷0.02mg）。
供试品溶液的制备：取新健胃片及其相关制剂10粒，研细，精密称取粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.2%磷酸甲醇溶液50ml，称定重量，超声处理40分钟（超声功率500W、频率40kHz），放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含黄芩以汉黄芩苷(C22H20O11)计，不得少于1.0mg。
实施例4新健胃颗粒剂的质量检测方法
陈皮40g、制苍术40g、黄芩55g、大黄15g、碳酸氢钠350g，制成1000粒。
以上五味药材，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒。制得的颗粒喷加挥发油，加入适量淀粉及0.5-1.0%硬脂酸镁混合整粒，制成颗粒剂1000袋，即得。
【鉴别】（1）本品的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应（《中国药典》一部附录Ⅳ）
（2）取本品10袋，研细，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）取本品5袋，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一 硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。
（4）取本品10袋，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水（10：7：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
碳酸氢钠
取重量差异项下本品，研细，精密称取适量（约相当于碳酸氢钠0.7g）置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与硫酸铵溶液（1→20）17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于42.00mg的NaHCO3。
本品含碳酸氢钠（NaHCO3）应为标示量的93.0％～107.0％。
黄芩照高效液相色谱法（《中国药典》一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）按表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为280nm。理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得对照品溶液（每1ml中含汉黄芩苷0.02mg）。
供试品溶液的制备取本品10袋，研细，精密称取新健胃片粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液25ml，称定重量，超声处理40分钟（超声功率500W、频率40kHz），放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含黄芩以汉黄芩苷(C22H20O11)计，不得少于1.0mg。
实施例5新健胃丸剂的质量检测方法
陈皮40g、制苍术40g、黄芩55g、大黄15g、碳酸氢钠350g，制成1000粒丸剂。
以上五味药材，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒。制得的颗粒喷加挥发油，加入适量淀粉及0.5-1.0%硬脂酸镁混合整粒，制成丸剂，即得。
【含量测定】
黄芩照高效液相色谱法（《中国药典》一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：1%甲酸（A）；乙腈（B）按表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为280nm。理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得对照品溶液（每1ml中含汉黄芩苷0.02mg）。
供试品溶液的制备：取本品10丸，研细，精密称取粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.2%磷酸甲醇溶液50ml，称定重量，超声处理40 分钟（超声功率500W、频率40kHz），放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每丸含黄芩以汉黄芩苷(C22H20O11)计，不得少于1.0mg。
Claims (10)
1.一种新健胃片相关制剂的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定方法：
照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1%甲酸为流动相A，以乙腈为流动相B，按如下比例进行梯度洗脱：0～15分钟，流动相A占78%，流动相B占22%；15～25分钟，流动相A由78%降到75%，流动相B由22%升至25%；25～40分钟，流动相A由75%降到68%，流动相B由25%升至32%；40～45分钟，流动相A由68%升至78%，流动相B由32%降到22%；检测波长为280nm；理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得，对照品溶液每1ml中含汉黄芩苷0.02mg；
供试品溶液的制备：取新健胃片相关制剂8-12制剂单位，研细，精密称取新健胃片制剂粉末0.1-0.3g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.3-0.5%磷酸的65-80%乙醇溶液20-30ml，称定重量，超声处理40～60分钟，放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
每制剂单位含黄芩以汉黄芩苷C22H20O11计，不得少于1.0mg；
所述新健胃片相关制剂是由如下原料药和工艺制成：陈皮20-30重量份、制苍术20-30重量份、黄芩30-60重量份、大黄10-20重量份、碳酸氢钠300-400重量份；以上五味药材，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒,制得的颗粒喷加挥发油，加入常规辅料，按照常规工艺制成片剂，胶囊剂，颗粒剂或丸剂。
2.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于该方法为：
照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1%甲酸为流动相A，以乙腈为流动相B，按如下比例进行梯度洗脱：0～15分钟，流动相A占78%，流动相B占22%；15～25分钟，流动相A由78%降到75%，流动相B由22%升至25%；25～40分钟，流动相A由75%降到68%，流动相B由25%升至32%；40～45分钟，流动相A由68%升至78%，流动相B由32%降到22%；检测波长为280nm；理论板数按汉黄芩苷峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：精密称取汉黄芩苷对照品适量，加乙醇溶解即得，对照品溶液每1ml中含汉黄芩苷0.02mg；
供试品溶液的制备：取新健胃片相关制剂10制剂单位，研细，精密称取新健胃片相关制剂粉末0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入0.4%磷酸的70%乙醇溶液25ml，称定重量，超声处理40分钟，超声功率500W、频率40kHz，放至室温，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
新健胃片相关制剂每制剂单位含黄芩以汉黄芩苷C22H20O11计，不得少于1.0mg。
3.如权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于该方法中所述新健胃片相关制剂由如下原料药和工艺制成：
陈皮40重量份、制苍术40重量份、黄芩55重量份、大黄15重量份、碳酸氢钠350重量份；以上五味，制苍术、大黄、黄芩粉碎成细粉，过筛，混匀；陈皮加水适量提取挥发油，药渣加适量水煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至适量，与上述细粉、碳酸氢钠及适量淀粉喷雾制粒，制得的颗粒喷加挥发油，加入常规辅料，按照常规工艺制成片剂，胶囊剂，颗粒剂或丸剂。
4.如权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别和/或含量测定方法：
鉴别：
A．新健胃片相关制剂的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应；
B．取新健胃片相关制剂8-12制剂单位，研细，加正己烷20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C．取新健胃片相关制剂4-6制剂单位，研细，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热20-40分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15：5：1的30～60℃石油醚－甲酸乙酯－甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
D．取新健胃片相关制剂8-12制剂单位，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流0.5-1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以10：7：5：3的醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
碳酸氢钠的含量测定：
取新健胃片相关制剂，研细，精密称取适量，置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与1→20硫酸铵溶液17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用0.5mol/L盐酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正；每1ml的0.5mol/L盐酸滴定液相当于42.00mg的NaHCO3；
新健胃片相关制剂含碳酸氢钠NaHCO3应为标示量的93.0％～107.0％。
5.如权利要求3所述的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别和/或含量测定：
鉴别：
A．新健胃片相关制剂的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应；
B．取新健胃片相关制剂8-12制剂单位，研细，加正己烷20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C．取新健胃片相关制剂4-6制剂单位，研细，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热20-40分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2-3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15：5：1的30～60℃石油醚－甲酸乙酯－甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
D．取新健胃片相关制剂8-12制剂单位，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流0.5-1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以10：7：5：3的醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
碳酸氢钠的含量测定：
取新健胃片相关制剂，研细，精密称取适量，置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与1→20硫酸铵溶液17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用0.5mol/L盐酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正；每1ml的0.5mol/L盐酸滴定液相当于42.00mg的NaHCO3；
新健胃片相关制剂含碳酸氢钠（NaHCO3）应为标示量的93.0％～107.0％。
6.如权利要求1、2或5所述的质量检测方法，其特征在于该方法所述供试品溶液的制备中0.4%磷酸的70%乙醇溶液可用0.2%磷酸甲醇溶液替代，用量是0.4%磷酸的70%乙醇溶液的两倍。
7.如权利要求3所述的质量检测方法，其特征在于该方法所述供试品溶液的制备中0.4%磷酸的70%乙醇溶液可用0.2%磷酸甲醇溶液替代，用量是0.4%磷酸的70%乙醇溶液的两倍。
8.如权利要求4所述的质量检测方法，其特征在于该方法所述供试品溶液的制备中0.4%磷酸的70%乙醇溶液可用0.2%磷酸甲醇溶液替代，用量是0.4%磷酸的70%乙醇溶液的两倍。
9.如权利要求1、2或5所述的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别和含量测定方法：
鉴别：
A．新健胃片相关制剂的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应；
B．取新健胃片相关制剂10制剂单位，研细，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C．取新健胃片相关制剂5制剂单位，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15：5：1的30～60℃石油醚－甲酸乙酯－甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
D．取新健胃片相关制剂10制剂单位，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以10：7：5：3的醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
碳酸氢钠的含量测定：
取新健胃片相关制剂，研细，精密称取适量，置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与1→20硫酸铵溶液17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用0.5mol/L盐酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正；每1ml的0.5mol/L盐酸滴定液相当于42.00mg的NaHCO3；
新健胃片相关制剂含碳酸氢钠应为标示量的93.0％～107.0％。
10.如权利要求3所述的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别和含量测定方法：
鉴别：
A．新健胃片相关制剂的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应；
B．取新健胃片相关制剂10制剂单位，研细，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C．取新健胃片相关制剂5制剂单位，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，弃去乙醚液，水液加盐酸2ml，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15：5：1的30～60℃石油醚－甲酸乙酯－甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个黄色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
D．取新健胃片相关制剂10制剂单位，研细，加甲醇30ml，盐酸4ml，摇匀，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，滤过，不溶物用醋酸乙酯30ml分次洗涤，合并洗涤液，加入水溶液中，振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以10：7：5：3的醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
碳酸氢钠的含量测定：
取新健胃片相关制剂，研细，精密称取适量，置250ml蒸馏瓶中，加水100ml与1→20硫酸铵溶液17ml,进行水蒸汽蒸馏，馏出液收集至饱和的硼酸溶液40ml中，至150ml，停止蒸馏，加溴甲酚绿指示液5滴，用0.5mol/L盐酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正；每1ml的0.5mol/L盐酸滴定液相当于42.00mg的NaHCO3；
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110907562A (zh) * | 2019-12-19 | 2020-03-24 | 湖南新汇制药股份有限公司 | 和胃解毒胶囊的质量检测方法 |
| CN115166128A (zh) * | 2022-06-22 | 2022-10-11 | 四川逢春制药有限公司 | 一种滇黄芩和黄芩的鉴别方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1846730A (zh) * | 2005-04-11 | 2006-10-18 | 安徽科创中药天然药物研究所有限责任公司 | 柴黄软胶囊的制备方法和质量控制技术 |
| CN1919256A (zh) * | 2005-08-23 | 2007-02-28 | 上海市中药研究所 | 一种黄芩提取物质量标准及其含量测定方法 |
| CN102018801A (zh) * | 2010-11-09 | 2011-04-20 | 承德颈复康药业集团有限公司 | 一种新健胃片及其制备方法 |
| CN102435689A (zh) * | 2011-10-09 | 2012-05-02 | 刘树民 | 一种黄芩药材的uplc-ms指纹图谱测定方法 |
| CN102139046B (zh) * | 2010-02-03 | 2012-08-29 | 天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂 | 连翘败毒片的检测方法 |
-
2012
- 2012-06-26 CN CN201210213322.5A patent/CN102735787B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1846730A (zh) * | 2005-04-11 | 2006-10-18 | 安徽科创中药天然药物研究所有限责任公司 | 柴黄软胶囊的制备方法和质量控制技术 |
| CN1919256A (zh) * | 2005-08-23 | 2007-02-28 | 上海市中药研究所 | 一种黄芩提取物质量标准及其含量测定方法 |
| CN102139046B (zh) * | 2010-02-03 | 2012-08-29 | 天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂 | 连翘败毒片的检测方法 |
| CN102018801A (zh) * | 2010-11-09 | 2011-04-20 | 承德颈复康药业集团有限公司 | 一种新健胃片及其制备方法 |
| CN102435689A (zh) * | 2011-10-09 | 2012-05-02 | 刘树民 | 一种黄芩药材的uplc-ms指纹图谱测定方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 国家药品监督管理局: "新健胃片", 《国家药品标准（试行）颁布件》, 16 November 2002 (2002-11-16) * |
| 郭洁等: "双黄连冻干粉HPLC指纹图谱特征色谱峰的归属研究", 《天津中医药》, vol. 26, no. 6, 12 December 2009 (2009-12-12), pages 497 - 498 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110907562A (zh) * | 2019-12-19 | 2020-03-24 | 湖南新汇制药股份有限公司 | 和胃解毒胶囊的质量检测方法 |
| CN115166128A (zh) * | 2022-06-22 | 2022-10-11 | 四川逢春制药有限公司 | 一种滇黄芩和黄芩的鉴别方法 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 067000 Chengde high tech Industrial Development Zone, Hebei Applicant after: Jingfukang Pharmaceutical Group Co., Ltd. Address before: 067000 Chengde high tech Industrial Development Zone, Hebei Applicant before: Jingfukang Pharmaceutical Group Co., Ltd., Chengde |
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| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: APPLICANT; FROM: JINGFUKANG PHARMACEUTICAL GROUP CO., LTD., CHENGDE TO: JINGFUKANG PHARMACEUTICAL GROUP CO., LTD. |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |