CN102727412B - 澳洲坚果青皮浸膏的制备方法及化妆水 - Google Patents

澳洲坚果青皮浸膏的制备方法及化妆水 Download PDF

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Abstract

澳洲坚果青皮浸膏的制备方法及化妆水,属于植物提取物的制备及化妆水。本发明将新鲜澳洲坚果青皮冲洗后粉碎后用乙醇溶剂浸出的有效成分,石油醚脱脂后,旋蒸浓缩至所需浓度得浸膏;再用保湿剂、抑菌剂、香精、去离子水等按普通方法制成澳洲坚果青皮化妆水。本发明化妆水含有熊果苷、豆腐果苷及其它药效成分,化妆水物理状态呈现为半透明胶状液体,色泽为微淡黄色,具有良好的舒眠保湿作用,为澳洲坚果青皮资源利用提供了一条途径。

Description

澳洲坚果青皮浸膏的制备方法及化妆水
技术领域
 本发明属于植物提取物的制备及化妆水,特别是澳洲坚果青皮浸膏的制备和以该浸膏为原料生产的化妆水。
背景技术
澳洲坚果Macadamia ternifolia F.Muell为山龙眼科(Proteaceae),澳洲坚果属(Macadamia),属常绿乔木,双子叶植物,原产于澳大利亚昆士兰与新南威尔士的亚热带雨林。澳大利亚坚果果仁具有独特的风味和丰富的营养成分,是世界著名的四大坚果之一,在欧美被认为是世界上最好的桌上坚果之一,有“干果皇后”美誉。
澳洲坚果20世纪60~70年代开始引入中国。近年来,在我国云南省形成初步产业,特别在德宏州引种栽培后,已规模化种植,并将逐步成为德宏州主要经济林产品。澳洲坚果的主要利用部分是果仁,坚果青皮只有极少量用作沤肥和饲料,绝大部分未被开发利用,而作为废弃物大量丢弃。通过文献调研,迄今为止,从该属植物中共分离出5种苷类成分和β-谷甾醇,而同科山龙眼属植物的澳洲坚果青皮的化学成分未见报道,青皮中可能蕴含的大量活性物质基本没有得到合理的开发利用,因此,对云南产的澳洲坚果进行合理的全果开发和综合利用,是坚果行业延伸产业链,资源的综合利用,提高澳洲坚果附加值面临的重要问题。
根据资料和我们以云南省德宏州引种的澳洲坚果青皮进行的研究表明,表明云南产的澳洲坚果青皮中主要含有糖苷类、酚酸类等天然化学成分,其中的豆腐果苷具有镇静安神,舒缓精神压力,有助睡眠的作用,熊果苷对紫外线灼伤所形成的瘢痕具有明显的效果,单宁具有收敛作用和防晒功能,酚酸类还有很强的抗氧化作用。
发明内容
本发明目的是以澳洲坚果青皮为材料提取制备澳洲坚果青皮浸膏,进行药妆产品的研发,以澳洲坚果青皮中所含豆腐果苷为指标成分,作为化妆水的药用活性成分,制备成舒眠保湿化妆水。 
本发明澳洲青皮浸膏制备方法:
(1)取新鲜澳洲坚果青皮阴干后,去除表面附着杂质,青皮粉碎至直径小于1.0cm,加入20倍量的75%~95%乙醇,回流提取3次,每次1小时,回流温度60℃,合并三次滤液,抽滤,得到青皮绿色醇提液;
(2)醇提液减压浓缩至乙醇完全挥发,得到青皮粗提取物;
(3)将粗提物加入超纯水至完全溶解,在30~60℃下用石油醚萃取脱脂,石油醚与提取物水溶液的比例为1:1,萃取3次后,剩余水溶液加入活性炭搅拌30~60分钟得到去除叶绿素的青皮水溶液,以上活性炭与剩余水溶液重量体积比为0.1%~3%;
(4)将去除叶绿素的青皮水溶液减压浓缩至有效成分与水的比例为1:1时,冷藏静置8小时以上,离心30分钟,转速为2500转/分钟,得到澳洲坚果青皮提取物浸膏。
所述浸膏的制备方法步骤(1)中的乙醇浓度为95%。
所述的浸膏的制备方法步骤(4)中的得到澳洲坚果青皮提取物浸膏中豆腐果苷含量大于5%。该结果与具体实施方式中表6青皮化妆水稳定性试验(除第2号试验)对应。
一种使用上述的澳洲坚果青皮浸膏之一种制备的化妆水,该化妆水组分及重量百分比含量为:
澳洲坚果青皮浸膏     3%~10% ;
保湿剂               5%~20%;
抑菌剂               1%~3%;
香精               0.05%~0.15%;
去离子水              余量。
青皮化妆水配制:将澳洲坚果青皮浸膏、保湿剂、抑菌剂加入去离子水中,在室温下不断搅拌至物料完全溶解后,加入香精,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。         
本发明依据澳洲坚果的青皮富含豆腐果苷、熊果苷、单宁等药妆活性成分的前期研究,开发利用澳洲坚果使其成为附加值高的产品,本发明具有如下积极效果:
云南是澳洲坚果引种的主产地之一,气候和土壤条件具有发展澳洲坚果的优势和潜力。以云南省德宏州的澳洲坚果的主要种植基地为例,全州规划种植澳洲坚果30万亩、面积广阔,唯资金、技术、信息滞后,坚果经济结构单一,青皮资源的利用迫在眉睫。本发明以澳洲坚果青皮成为成药物化妆品的核心材料,可充分发挥云南热区的资源优势,并加快边疆山区民族经济的发展,如按亩产壳果400公斤,青皮200公斤,预计可增加果农年收入60000万元左右。除外,对于提高该地区森林覆盖率,恢复热区生态环境也具有十分重要的意义,势必为坚果产区农民增加一条致富门路。
本发明以一直被废弃的澳洲坚果青皮为研究对象,废物利用,变废为宝,并且首次较为系统地对澳洲坚果青皮的化学成分进行研究和分析,分析了其中的活性成分,确定其青皮含有豆腐果苷、熊果苷、单宁等活性成分,利用这些成分的安神、美白、收敛作用加以开发,制备出可进入市场的药妆产品。
本发明将新鲜澳洲坚果青皮以无菌水冲洗去除附着杂质,粉碎后用乙醇溶液回流提取后,再经石油醚脱脂,活性炭脱色,旋蒸浓缩得浸膏。该工艺简单,易于掌握。
市场对含植物天然活性成分的药效型化妆水有巨大的需求。以本发明获得的浸膏中再通过添加适量保湿剂、香精、去离子水等制成澳洲坚果青皮化妆水,其物理状态呈现为半透明胶状液体,色泽为微淡黄色,具有良好的流动性,涂抹后具有很好的延展性和舒眠保湿作用,并迅速渗透,温和,无刺激感,能长效滋润皮肤,安全,可靠。
在半年试用期中,本发明青皮化妆水的舒眠保湿效果良好。
附图说明
图1 豆腐果苷标准品色谱图。
图2 熊果苷标准品色谱图。
图3 澳洲坚果青皮提取物色谱图。其中,1:豆腐果苷标准品色谱峰;2:熊果苷标准品色谱峰。
图4 澳洲坚果青皮提取物制备流程图。
图5 澳洲坚果青皮化妆水保湿试验。
图6 青皮化妆水制备流程图。
以下结合具体实施方式对本发明附图做进一步说明。
具体实施方式
(一)澳洲坚果青皮的提取工艺考察
1、豆腐果苷线性关系考察
紫外分光光度法测定:以豆腐果苷标准品配制0、0.05、0.1、0.5、1.0、3.0、6.0 mg· mL-1的标准溶液,在紫外可见光分光光度计上271nm波长处测其吸收值,标准曲线图确定线性关系,得线性方程:y=13985x-29.37,相关系数r为0.9995,结果表明,豆腐果苷在0.05~6.0 mg· mL-1 范围内线性关系良好。
2、提取溶剂考察
考虑到澳洲坚果青皮中的有效成分豆腐果苷、熊果苷、单宁酸等都是水溶性成分,以及安全性和成本的因素,本实验设定提取溶剂为不同浓度的药用乙醇和纯水。试验结果表明,用95%乙醇提取获得的青皮提取物最多,提取率最高,所以本实验选择采用95%的乙醇提取澳洲坚果果皮成分。
3、正交试验设计
称取10g澳洲坚果果皮,用纯净水洗净,粉碎。以乙醇的浓度、提取时间、提取次数为考察因素,以提取量、提取物水溶性、提取物的色泽、有效成分(豆腐果苷)为指标,用                                                
Figure 742946DEST_PATH_IMAGE001
正交试验确定最佳提取参数。
表1正交试验因素及其水平
Figure 997079DEST_PATH_IMAGE002
表2正交试验结果统计表
设计列号 A(液料比) B(次数) C(时间h) 空白 吸光度 含量(%)
1 10:1 1 2   0.197 3.21
2 10:1 2 3   0.248 7.83
3 10:1 3 4   0.253 7.99
4 20:1 1 3   0.219 6.91
5 20:1 2 4   0.251 7.92
6 20:1 3 2   0.261 9.25
7 30:1 1 4   0.221 6.97
8 30:1 2 2   0.236 7.45
9 30:1 3 3   0.262 8.27
K1 0.233 0.212 0.231 0.237    
K2 0.244 0.245 0.243 0.243    
K3 0.240 0.259 0.242 0.236    
R 0.011 0.047 0.012 0.007    
从表2中可以看出,各因素对豆腐果苷的含量的影响程度有所不同,按其影响的主次顺序,依次为提取次数﹥乙醇浓度﹥提取时间。通过正交试验,得到澳洲坚果青皮最佳的提取条件为。考虑到成本,用75%~95%的乙醇以液料比20:1回流提取3次,每次1h。
3、澳洲坚果青皮提取物的制备
澳洲坚果青皮上述实验结果表明,澳洲坚果青皮采用75%~95%乙醇回流提取时,以95%乙醇提取时豆腐果苷含量较高,但醇提取物呈浅绿色,需要除去色素,考虑到青皮化妆水应该是水溶性,因此对青皮乙醇提取物,用超纯水溶解,过滤,去除不溶于水的杂质,采用石油醚脱脂,除去一部分色素,水层仍然有色素未除尽,采用活性炭脱色法,脱去色素,水层减压浓缩得到澳洲坚果青皮浸膏。具体是:
实施例1:
(1)取新鲜澳洲坚果青皮阴干后,去除表面附着杂质,青皮粉碎至直径小于1.0cm,加入20倍量的75%乙醇,回流提取3次,每次1小时,回流温度60℃,合并三次滤液,抽滤,得到青皮绿色醇提液;
(2)醇提液减压浓缩至乙醇完全挥发,得到青皮粗提取物;
(3)将粗提物加入超纯水至完全溶解,在30℃下用石油醚萃取脱脂,石油醚与提取物水溶液的比例为1:1,萃取3次后,剩余水溶液加入活性炭搅拌60分钟得到去除叶绿素的青皮水溶液,以上活性炭与剩余水溶液重量体积比为0.1%;
(4)将去除叶绿素的青皮水溶液减压浓缩至有效成分与水的比例为1:1时,冷藏静置8小时以上,离心30分钟,转速为2500转/分钟,得到澳洲坚果青皮提取物浸膏。
实施例2:
(1)取新鲜澳洲坚果青皮阴干后,去除表面附着杂质,青皮粉碎至直径小于1.0cm,加入20倍量的80%乙醇,回流提取3次,每次1小时,回流温度60℃,合并三次滤液,抽滤,得到青皮绿色醇提液;
(2)醇提液减压浓缩至乙醇完全挥发,得到青皮粗提取物;
(3)将粗提物加入超纯水至完全溶解,在60℃下用石油醚萃取脱脂,石油醚与提取物水溶液的比例为1:1,萃取3次后,剩余水溶液加入活性炭搅拌45分钟得到去除叶绿素的青皮水溶液,以上活性炭与剩余水溶液重量体积比为3%;
(4)将去除叶绿素的青皮水溶液减压浓缩至有效成分与水的比例为1:1时,冷藏静置8小时以上,离心30分钟,转速为2500转/分钟,得到澳洲坚果青皮提取物浸膏。
实施例3:
(1)取新鲜澳洲坚果青皮阴干后,去除表面附着杂质,青皮粉碎至直径小于1.0cm,加入20倍量的95%乙醇,回流提取3次,每次1小时,回流温度60℃,合并三次滤液,抽滤,得到青皮绿色醇提液;
(2)醇提液减压浓缩至乙醇完全挥发,得到青皮粗提取物;
(3)将粗提物加入超纯水至完全溶解,在50℃下用石油醚萃取脱脂,石油醚与提取物水溶液的比例为1:1,萃取3次后,剩余水溶液加入活性炭搅拌30分钟得到去除叶绿素的青皮水溶液,以上活性炭与剩余水溶液重量体积比为2%;
(4)将去除叶绿素的青皮水溶液减压浓缩至有效成分与水的比例为1:1时,冷藏静置8小时以上,离心30分钟,转速为2500转/分钟,得到澳洲坚果青皮提取物浸膏。
以上实施例1~3浸膏的制备方法步骤(4)中的得到澳洲坚果青皮提取物浸膏中豆腐果苷含量均大于5%。
(二)澳洲坚果青皮中的主要化学成分检测
1、澳洲坚果青皮中豆腐果苷及熊果苷的HPLC检测
1)材料来源:豆腐果苷标准品(自制,纯度≥98%);熊果苷标准品(纯度≥98%)购自中国生物制品检定所;澳洲坚果青皮采自云南省德宏州盈江县。 
2)供试品溶液的制备
分别精密称取澳洲坚果青皮样品超微粉1g,置于具塞锥形瓶中,按照青皮最佳提取工艺,95%乙醇20mL回流提取3次,每次1h,合并三次滤液,过滤,减压浓缩。浓缩后的提取物置100mL容量瓶中,加乙腈,定容。作为供试品溶液,备用。
3)对照品溶液的制备
    分别精密称定豆腐果苷和熊果苷标准品各10.0mg,分别置于10mL容量瓶中,使每1mL中含标准品1mg。加乙腈定容,摇匀。作为对照品溶液,备用。
4)色谱条件
色谱仪:安捷伦1200系列;色谱柱:Eclipse XDB-C18(4.6×150mm, 5μm)。柱温:25℃。流动相:乙腈:水=10:90(V/V)。紫外检测波长:270nm。进样量:5μl,流速1 mL /min。
5)样品测定
准确吸取制备液样品5μL,注入高效液相色谱仪进行色谱测定。
对照品、样品色谱图分别见图1、图2和图3。
2、澳洲坚果青皮中主要化学成分的类别检测(如表3)
表3 澳洲坚果青皮化学成分实验结果
    “+++”表示反应很明显;“++”表示反应较明显;“+”表示有反应。
    通过对澳洲坚果青皮中的化学成分的初步检测,证明澳洲坚果青皮中主要含有单宁、酚酸、糖苷等药妆活性成分。
(三)澳洲坚果青皮化妆水保湿效果和抑菌效果试验及分析
1、澳洲坚果青皮化妆水保湿效果的测定
1)原理
根据化妆品成分吸湿、保湿性的差异,不同的保湿剂分子对水分子的作用力不同,吸收水分和保持水分的能力不同。吸湿作用力大的,对水分子结合力强,吸收和保持水分的量也比较大,封闭性好的,水分散失的也少。利用胶带模仿角质层、表皮等的生物材料,在胶带上涂布化妆品,模拟实际化妆品的应用状况。在恒温恒湿的条件下一定时间后,称量样品放置前后的质量差,求出样品量的损失,可以计算出保湿成分保湿的效果。
2)材料
干净玻璃板若干块,3cm胶布,2ml移液管,分析天平。
3)试验方法
体外称重法
4)测试步骤
(1)称量6块贴有3cm胶布的玻璃板质量(M0),分别记录,1、2、3组为滴加甘油,4、5、6组为滴加丙二醇;
(2)分别用移液管取0.2 mL 5%、10%、15%的甘油和5%、10%、15%的丙二醇滴加于贴有3cm胶布的6块玻璃板上,用分析天平称量该质量M1(精确到0.0001g),将样品涂匀,将玻璃板置于室温下;
(3)在放置2h后,称量该玻璃板的质量(M2),测试其保湿率;
本实验的注意事项:涂抹样品时要尽量均匀,不能有样品遗留在涂抹器上。图5
5)结果计算
保湿率计算公式: 
    保湿率=×100%                     (1)
式中:M0为空板质量(g);M1为加样后玻璃板质量(g);M2为干燥器中放置若干小时后质量(g)。
表4 保湿率计算结果
Figure 317016DEST_PATH_IMAGE006
1、2、3组为滴加甘油,4、5、6组为滴加丙二醇
6)结果分析
由表2看出,以甘油为保湿剂配制成的化妆水保湿效果好于以丙二醇为保湿剂配制成的化妆水。但在实际配置过程中,只加入甘油做保湿剂制成的化妆水不够澄清,而加入等量丙二醇可解决此问题,故最终配制方案采用加入等量的甘油和丙二醇做保湿剂。
2、澳洲坚果青皮化妆水抑菌效果测定
根据化妆品微生物标准检验方法总则及注解GB7918.1-87检验微生物指标。
1)抑菌试验
用化妆水对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌进行抑菌实验。
用牛津杯抑菌法对致病菌的抑菌效果如表4所示(表中数据为3次独立实验均值)。
表5 化妆水抑菌结果
病原菌 抑菌圈直径(cm)
金黄色葡萄球菌 3.22
大肠杆菌 2.87
枯草杆菌 2.65
澳洲坚果果皮化妆水对致病菌金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用,对大肠杆菌、枯草杆菌具有一定的抑制作用。
以苯甲酸钠和苯甲醇水溶液做为抑菌剂制备成的化妆水抑菌效果较好,可以作为药妆的抑菌剂,起到较好的抑菌作用,且对人体皮肤无副作用,保证化妆水的质量,防止其变质。但是以苯甲醇做抑菌剂配制的化妆水具有一种刺激性气味,影响化妆水的品质,而以苯甲酸钠为抑菌剂配制的化妆水无任何异味,品质较好,因此,最终选择苯甲酸钠作为抑菌剂制备化妆水。
2)试用结果
对制备的15瓶(每瓶200ml)澳洲坚果果皮美白保湿化妆水在学校内部进行试用。结果表明:该化妆水香气宜人,对皮肤无刺激,没有引起过敏反应,有一定的保湿功效,睡前使用,有安神,有助于睡眠的作用。
3、化妆水稳定性检测
如表6所示,按照澳洲坚果青皮化妆水处方设计,其他条件不变,分别配制青皮浸膏含量为1%、3%、6%、10%、15%的化妆水样品5份(2-6号),在一5℃冰箱和40℃的电热恒温培养箱中各放24h后,取出,恢复室温后观察,与没有处理过的样品,(1号,青皮浸膏含量10%)进行比较。
表6 青皮化妆水稳定性试验
序号 状态 色泽 分层 青皮浸膏含量(%) 豆腐果苷含量(%)
1 清澈透明 淡黄色 10 10.2
2 清澈透明 淡黄色 1 1.3
3 清澈透明 淡黄色 3 5.6
4 清澈透明 淡黄色 6 7.4
5 清澈透明 淡黄色 10 10.2
6 略浑浊 深黄色 15 11.3
稳定性试验结果表明,青皮化妆水的耐热性和耐寒性较好,符合中青皮浸膏加入量为3%-10%之间,所获得的化妆水性质稳定,有效成分(以豆腐果苷为指标)含量较高。
(四)澳洲坚果青皮化妆水制备工艺
根据化妆品卫生化学标准检验方法GB7917,确定化妆水的配方(如表7所示)。
表7 澳洲坚果青皮舒眠保湿化妆水处方设计表
化学成分 作用 含量%(w/w)
青皮浸膏 天然美白成分 10%
甘油/丙二醇 保湿剂 10%
香橙 香料 0.1%
苯甲酸钠 抑菌剂 5%
超纯水 溶剂 74.9%
分别将天然美白成分、保湿剂、抑菌剂与超纯水溶解,然后混合搅拌均匀,最后加入香精一滴,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。
根据化妆品安全性评价程序和方法GB7919-1987进行试用。配制出的化妆水感官理化指标结果见表8。
表8 感官、理化指标结果
Figure 242247DEST_PATH_IMAGE007
配制1000ml化妆水:分别将药物成分、保湿剂、抑菌剂与超纯水溶解,然后混合搅拌均匀,最后加入香精一滴,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。
根据处方设计如表7,别以甘油和丙二醇为保湿剂,苯甲酸钠为抑菌剂,加入药物成分青皮浸膏和香橙,初步被制成具有舒眠保湿效果的化妆水,并对其制备工艺进行了初步探索,得到可行的制备工艺。
因为,青皮浸膏在化妆水中所占重量百分比小于3%时,有效成分含量太低;大于10%,则青皮化妆水比较浑浊,颜色较深;且当青皮浸膏在化妆水中所占重量百分比3%时,豆腐果苷含量为5.6%,因此将豆腐果苷含量定为>5%。又因为每批样品的含量都会有所变化,因而确定青皮浸膏在化妆水中所占重量百分比为3%~10% 较为适宜。
实施例1:
化妆水基本组分及含量为:
澳洲坚果青皮浸膏       3%; 
保湿剂                20%;
抑菌剂                 1%;
香精                0.05%; 
去离子水             余量。
化妆水的配制:按上述比例将澳洲坚果青皮浸膏、保湿剂、抑菌剂加入去离子水中,在室温下不断搅拌至物料完全溶解后,加入香精,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。
实施例2:
化妆水基本组分及含量为:
澳洲坚果青皮浸膏       6%; 
保湿剂                15%;
抑菌剂                 2%;
香精                 0.1%; 
去离子水             余量。
化妆水的配制:按上述比例将澳洲坚果青皮浸膏、保湿剂、抑菌剂加入去离子水中,在室温下不断搅拌至物料完全溶解后,加入香精,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。
实施例3:
化妆水基本组分及含量为:
澳洲坚果青皮浸膏      10%; 
保湿剂                10%;
抑菌剂                 3%;
香精                0.15%; 
去离子水             余量。
化妆水的配制:按上述比例将澳洲坚果青皮浸膏、保湿剂、抑菌剂加入去离子水中,在室温下不断搅拌至物料完全溶解后,加入香精,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。

Claims (4)

1.澳洲坚果青皮浸膏的制备方法,其特征在于:
(1)取新鲜澳洲坚果青皮阴干后,去除表面附着杂质,青皮粉碎至直径小于1.0cm,加入20倍量的75%~95%乙醇,回流提取3次,每次1小时,回流温度60℃,合并三次滤液,抽滤,得到青皮绿色醇提液;
(2)醇提液减压浓缩至乙醇完全挥发,得到青皮粗提取物;
(3)将粗提物加入超纯水至完全溶解,在30~60℃下用石油醚萃取脱脂,石油醚与提取物水溶液的比例为1:1,萃取3次后,剩余水溶液加入活性炭搅拌30~60分钟得到去除叶绿素的青皮水溶液,以上剩余水溶液与活性炭重量体积比为0.1%~3%;
(4)将去除叶绿素的青皮水溶液减压浓缩至有效成分与水的比例为1:1时,冷藏静置8小时以上,离心30分钟,转速为2500转/分钟,得到澳洲坚果青皮浸膏。
2.根据权利要求1所述的浸膏的制备方法,其特征在于步骤(1)中的乙醇浓度为95%。
3.根据权利要求1或2所述的浸膏的制备方法,其特征在于步骤(4)中的得到澳洲坚果青皮浸膏中豆腐果苷含量大于5%。
4.一种使用如权利要求1~3所述的澳洲坚果青皮浸膏之一种制备的化妆水,其特征在于化妆水组分及重量百分比含量为:
澳洲坚果青皮浸膏     3%~10% ;
保湿剂               5%~20%;
抑菌剂               1%~3%;
香精               0.05%~0.15%;
去离子水              余量;
所述化妆水的配制:按上述比例将澳洲坚果青皮浸膏、保湿剂、抑菌剂加入去离子水中,在室温下不断搅拌至物料完全溶解后,加入香精,装瓶并超声波振荡,排除气泡,密封。
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