CN102690259B - 具有利尿作用的化合物、其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于具有利尿作用的药物技术领域，公开了具有式Ⅰ结构的一类苯并氮杂卓类化合物及其药学上可接受的盐,R的定义同权利要求书。本发明还公开了上述化合物的制备方法，并同时公开了以该化合物或其药学上可接受的盐作为活性有效成分的药物组合物，以及他们在预防或治疗与精氨酸加压素V1a受体、精氨酸加压素V1b受体、精氨酸加压素V2受体、交感神经系统或肾素-血管紧张素-醛固酮系统相关的疾病中的用途。

Description

具有利尿作用的化合物、其制备方法和用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，更确切地说，是涉及一类具有利尿作用的化合物及其制备方法、含有它们的药物组合物和作为精氨酸加压素受体拮抗剂尤其是精氨酸加压素V2受体拮抗剂的用途。

背景技术

精氨酸加压素(arginine vasopressin，AVP)，又叫抗利尿激素、血管加压素、加压素，是脑垂体分泌的一种肽类激素，经受体-G蛋白-第二信使途径，参与机体体液平衡等多种功能的调节。AVP在人体调节游离水的重吸收、体液的等渗浓度、血液容积、血压、细胞收缩、细胞增殖和肾上腺皮质激素的分泌等方面扮演重要角色。

精氨酸加压素通过与加压素受体(V1a、V1b、V2)结合发挥各种生理作用。加压素受体属于G-蛋白偶联受体家族，根据受体偶联的第二信使的不同，可以分为V1和V2两类。V1类包括V1a和V1b两种亚型，它们偶联于磷酸肌醇信号传导途径，细胞内的Ca2+作为第二信使。激活血管平滑肌和心肌细胞的V1a受体，产生血管收缩、左心室后负荷增高和心肌肥厚；激活垂体前叶的V1b受体，影响促肾上腺皮质激素的分泌；激活肾脏集合管细胞的V2受体，增加肾脏对游离水的重吸收，引起容量负荷过度，增加心室前负荷，并引起低钠血症，导致充血性心力衰竭(Congestive Heart Failure，简称CHF)不良预后。

众多试验证明，精氨酸加压素受体在充血性心力衰竭、肝硬化、抗利尿激素分泌紊乱综合症、高血压、低钠血症的发生、发展和治疗中有着重要作用。而许多有精氨酸加压素受体拮抗活性的药物是目前和未来治疗各种原因所致低钠血症的最佳选择，如托伐普坦等。但由于托伐普坦的水溶性低，肠道吸收不充分，剂型和给药途径受到许多限制。

发明内容

本发明的一个目的是提供一类新型结构的苯并氮杂卓类化合物其药学上可接受的盐。

本发明的另一个目的是提供磷酰化苯并氮杂卓化合物，以提高苯并氮杂卓化合物的水溶性。

本发明的另一个目的是提供磷酰化苯并氮杂卓化合物及其药学上可接受盐的制备方法。

本发明的又一个目的是提供一类苯并氮杂卓化合物及其药学上可接受的盐为主要活性成分的药物组合物。

本发明的再一目的是提供该类化合物的医药用途，这类化合物通常具有精氨酸加压素受体拮抗活性，可用于预防或治疗高血压、雷氏综合症、痛经、早产、促肾上腺皮质激素释放激素分泌紊乱、肾上腺增生、抑郁症、慢性充血性心力衰竭、肝硬化、抗利尿激素分泌紊乱综合症或慢性心力衰竭/肝硬化/抗利尿激素分泌紊乱引起的低钠血症等疾病。

现结合本发明目的，对本发明内容进行详细阐述。

本发明具体涉及具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐：

其中，R为羰基，羟基，

式I化合物药学上可接受的盐指：碱金属盐，其中优选钠盐、钾盐；碱土金属盐，其中优选钙盐、镁盐；铵盐；有机碱盐，其中优选三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐、乙二胺盐、N，N-二苄基乙二胺盐、乙醇胺盐；无机酸盐，其中优选盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐；有机酸盐，其中优选乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐。

苯并氮杂卓类化合物II，在丙酮、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、正己烷、二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或四氢呋喃等溶剂中，与5-硝基-2-吡啶酰氯在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾等缚酸剂的催化下，0-5℃反应制得中间体III。中间体III再与氯化亚锡、水合肼/钯碳、铁粉或氢气反应将硝基还原为氨基得到中间体IV。中间体IV与1-甲基吲哚啉-5-磺酰氯在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾等缚酸剂存在下，以丙酮、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、正己烷、二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或四氢呋喃等为溶剂，制得化合物I-1。化合物I-1中的羰基与硼氢化钠作用还原为羟基得到化合物I-2。化合物I-2在二氧六环、四氢呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯等溶剂中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾等缚酸剂的催化下与三氯氧化磷反应，然后水解得到化合物I-3。

式I化合物的制备路线如下：

反应制得化合物I-1和化合物I-2溶于DMF、丙酮、甲醇、乙醇或DMSO中滴加无机酸、有机酸制成药学上可接受的盐。

反应制得化合物I-3溶于DMF、丙酮、甲醇、乙醇或DMSO中滴加无机碱、有机碱制成药学上可接受的盐。

尽管本发明的化合物可以不经任何配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道途径(如静脉、肌肉给药)及口服给药。

本发明化合物的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。

药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本发明化合物)的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节。通常，活性化合物的量范围为组合物的0.5～90％(重量)，另一优选的范围为0.5～70％。

溶解性能实验

根据《中华人民共和国药典》2010版二部凡例的有关规定，精密称取1g的测试化合物，25℃下加入到1mL水中，每隔5分钟强力振摇30秒，观察30分钟内的溶解情况，若无目视可见的溶质颗粒即为溶解。若没有完全溶解，继续加入水，重复上述操作，直至完全溶解。溶解性能实验结果见表1。

表1溶解性能实验结果

表中各化合物的结构见实施例。

实验显示，磷酰化后的化合物在水中显示出较好的溶解性，并且能够通过成盐进一步改善溶解性能。良好的水溶性可以解决潜在的肠道吸收不好等问题，并为多种成药剂型和多种给药途径提供了可能。

人精氨酸加压素受体拮抗实验

制备表达人AVP受体的HeLa细胞，测定本发明中部分化合物对人精氨酸加压素受体的抑制常数Ki，具体结果见表2。

表2人精氨酸加压素受体拮抗实验结果

表中Ki为解离平衡常数，Ki值越大，对受体的亲和作用越小。由上表可知化合物I-1、化合物I-2以及化合物I-3与V1a、V1b受体亲和力相比，对V2受体具有更强亲和力。

利尿作用实验

受试化合物：临用前称取适量化合物用2％吐温80碾磨，混悬于30％PEG中。给药剂量：50mg/kg，对照组给予相同体积的溶媒。

受试SD大鼠体重240±20g；购自天津山川红实验动物有限公司，合格证号：SCXK(津)2009-0001。动物笼饲养，基础饲料为实验鼠全价颗粒饲料，购自天津山川红实验动物有限公司，自由饮水，湿度60-80％，自然光照及大约12h的明暗周期。试验前禁食约12h，但可自由饮水，根据前12h尿量随机分组，给药前灌胃给与5％体重量的生理盐水增加水负荷，灌胃给药后对每只大鼠于0-24h时间内接尿，量筒定量。实验结果见表3。

表3利尿作用实验结果

表中各化合物的结构见实施例。

动物实验结果显示，与对照组相比，该类化合物有明显的利尿作用。该实验进一步表明了此类化合物可以结合精氨酸加压素受体，从而产生拮抗作用，表现出一定的利尿活性。

人精氨酸加压素受体实验及利尿作用实验表明，这类化合物通常具有精氨酸加压素受体拮抗活性，同时又具有利尿作用，因此，此类化合物有预防或治疗高血压、雷氏综合症、痛经、早产、促肾上腺皮质激素释放激素分泌紊乱、肾上腺增生、抑郁症、慢性充血性心力衰竭、肝硬化、抗利尿激素分泌紊乱综合症或慢性心力衰竭/肝硬化/抗利尿激素分泌紊乱引起的低钠血症等疾病的潜在用途。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但不限制本发明。

制备实施例

1H-NMR用BRUKERAV400型仪测定，MS用VGZAB-HS或者VG-7070型仪测定，除特殊注明外均为EI源(70ev)；所有溶剂在使用前均经过重蒸馏，所使用的无水溶剂均是按标准方法干燥处理获得的；除特殊说明外，所有反应均是在氮气保护下进行并进行TLC跟踪，产品的纯化除特殊说明外均使用硅胶(300-400目)柱色谱法；其中硅胶(300-400目)由青岛海洋化工厂生产，GF254薄层硅胶板由烟台江友硅胶开发有限公司生产；所制备的化合物均经1H-NMR和MS确证结构。

实施例1：

中间体III的制备

向1000ml反应瓶中分别加入II(50g，260mmol)、三乙胺(40g，390mmol)和二氯甲烷(350ml)冰浴冷却至0℃，搅拌至溶清，分批加入5-硝基-2-吡啶酰氯(57.2g，300mmol)，室温反应30分钟。TLC[展开剂：乙酸乙酯-石油醚(1∶1)，下同]检测反应完全后，向反应液中加入碳酸氢钠的饱和溶液100ml，搅拌10分钟，过滤，滤饼用二氯甲烷(50ml×3))洗涤，合并有机相，用饱和食盐水(50ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压回收溶剂，得粗品，无水乙醇重结晶，得淡黄色粉末55.1g(62.4％，HPLC 95.5％)。

实施例2：

中间体IV的制备

向1000ml反应瓶中加入中间体III(50g，145mmol)，然后加入无水乙醇250ml和浓盐酸200ml，搅拌半小时，缓慢向混合溶液中滴加氯化亚锡(115g，510mmol)的乙醇溶液150ml。30℃反应四小时。TLC[展开剂：乙酸乙酯-石油醚(1∶1)]检测反应完全后，减压蒸出乙醇约300ml，冷却，析出固体，过滤。将滤饼倒入500ml水中，用20％氢氧化钠溶液约300ml调PH至9，过滤，得粗品。无水乙醇重结晶，得淡黄色固体粉末31.6g(69.2％，HPLC 96.6％)。

实施例3：

化合物I-1的制备

在装有搅拌、温度计的250ml反应瓶中依次加入中间体IV(30g，95mmol)、吡啶(100ml)，搅拌溶清，然后逐滴向混合液中加入1-甲基吲哚啉-5-磺酰氯(23g，100mmol)的吡啶溶液，室温反应1小时，TLC检测反应完全后，倒入冰水中，充分搅拌，过滤，所得固体经无水甲醇-石油醚(2∶1)重结晶，得淡黄色固体粉末42.7g，(88％，HPLC 96.1％)。

实施例4：

化合物I-2的制备

在装有搅拌、温度计的500ml反应瓶中依次加入I-1(30g，59mmol)、无水甲醇(250ml)，搅拌，然后向反应液中分批加入硼氢化钠(2.6g，70mmol)，加毕，室温反应1h，TLC检测反应完全后，减压回收甲醇100ml，残留物用150ml二氯甲烷稀释，饱和食盐水洗涤(250ml×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压回收溶剂，残留物经无水甲醇-石油醚(2∶1)重结晶，得白色结晶状粉末28.9g(96.1％，HPLC 97.2％)。

实施例5：

化合物I-3的制备

在装有搅拌、温度计的250ml反应瓶中依次加入I-2(15g，29mmol)、二氧六环(100ml)、三乙胺(30g，30mmol)，氮气保护下冷却到-15℃，搅拌溶解，向混合物中滴加三氯氧化磷(13.5g，90mmol)，搅拌2小时。将混合物分批加入到250ml的氢氧化钠(0.6mmol/ml)溶液中，将溶液加热至50℃，用100ml甲苯萃取两次。将水层冷却至10℃，加入9mmol/ml的HCl溶液20ml，再用100ml乙酸乙酯萃取两次。无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩滤液。室温下减压干燥浓缩液，得到白色粉末5.9g(34.1％，HPLC 98.3％)。

实施例6：

化合物I-1的盐酸盐I-1-1的制备

取1.5g化合物I-1，溶于10mL无水乙醇。冰水浴冷却至5℃，滴加11.1％盐酸乙醇溶液至pH为2，继续于冰水浴下搅拌约1h。过滤，真空干燥，得白色固体粉末。

实施例7：

化合物I-1的硫酸盐I-1-2的制备

取1.2g化合物I-1，溶于15mL甲醇。冰水浴冷却至0℃，滴加10％硫酸甲醇溶液至pH为3，继续于冰水浴下搅拌约1h。过滤，得白色固体。

实施例8：

化合物I-2的牛磺酸盐I-2-1的制备

取2.0g化合物I-2，溶于10mL丙酮。加热至回流后加入等摩尔牛磺酸，继续于回流下搅拌反应约1.5h。反应完毕，于室温下静置24h。析出白色结晶，过滤，真空干燥。

实施例9：

化合物I-3的单钠盐I-3-1的制备

在冰浴冷却下，将化合物I-3(0.9g，1.5mmol)溶解于10ml甲醇中，加入等摩尔的氢氧化钠溶液，室温下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，再用甲醇-水进行重结晶，得到白色粉末状化合物。

实施例10：

化合物I-3的二钾盐I-3-2的制备

将化合物I-3(0.9g，1.5mmol)溶解于10ml甲醇中，向1mol/L的氢氧化钾溶液中缓缓滴加。充分搅拌5分钟，将混合物减压浓缩，用异丙醇重结晶，过滤，用水洗涤，干燥，得到白色粉末状化合物。

为了更充分地说明本发明的苯并氮杂卓化合物的药物组合物，下面提供下列制剂实施例，所述实施例仅用于说明，而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可以使用本发明化合物中的任何活性化合物及其盐。

实施例11：

用下述成分制备硬明胶胶囊：

制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。按处方量将上述成分混合后，填充入硬明胶胶囊中。

实施例12：

用下述成分制备片剂：

制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。先将处方量的辅料充分混匀。将原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混匀2-3次，保证药与辅料充分混匀，过20目筛，在55℃通风烘箱中干燥2h，干颗粒过16目筛整粒，测定中间体含量，混合均匀，在压片机上压片。

实施例13：

注射液的制备：

制备方法：取活性成分加入到已溶解聚山梨酯和丙二醇的注射用水中，加入药用碱调节pH值至4～8使其溶解。加入活性炭，搅拌吸附30min，除炭、精滤、灌封、灭菌。

实施例14：

注射用冻干粉的制备：

化合物I-3-1           100mg

药用碱                0.1-7.0％

甘露醇                55-85％

制备方法：取活性成分加入注射用水，用药用碱调节pH值至4-8使其溶解。再加入甘露醇，按注射剂的要求进行高压灭菌，加入活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，封口，即得。

Claims (6)

1.具有式Ⅰ结构的化合物及其药学上可接受的盐：

其中,R为羰基，羟基，

2.根据权利要求1所述的具有式Ⅰ结构的化合物及其药学上可接受的盐，其药学上可接受的盐为：碱金属盐；碱土金属盐；有机碱盐；无机酸盐；有机酸盐。

3.如权利要求2所述的具有式Ⅰ结构的化合物及其药学上可接受的盐，其药学上可接受的盐为：钠盐、钾盐，钙盐、镁盐，三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐、乙二胺盐、N,N-二苄基乙二胺盐、乙醇胺盐，盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐，乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐。

4.权利要求1中具有式Ⅰ结构的化合物的制备方法，其特征在于：化合物Ⅱ与5-硝基-2-吡啶酰氯在催化剂作用下，0-5℃反应制得中间体Ⅲ，中间体Ⅲ与氯化亚锡反应得到中间体Ⅳ，中间体Ⅳ与1-甲基吲哚啉-5-磺酰氯在催化剂作用下，反应制得化合物Ⅰ-1，化合物Ⅰ-1与硼氢化钠作用得到化合物Ⅰ-2，化合物Ⅰ-2在催化剂的作用下与三氯氧化磷反应，然后水解得到化合物Ⅰ-3，

5.一种药物组合物，其包含权利要求1所述的具有式Ⅰ结构的化合物及其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的一种或多种药用载体。

6.如权利要求1所述的具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗高血压、雷氏综合症、痛经、早产、促肾上腺皮质激素释放激素分泌紊乱、肾上腺增生、抑郁症、慢性充血性心力衰竭、肝硬化、抗利尿激素分泌紊乱综合症或慢性心力衰竭/肝硬化/抗利尿激素分泌紊乱引起的低钠血症的药物中的用途。