CN102652760A - 用于提高免疫、补血及抗氧化的预防肿瘤复合制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种用于提高免疫、补血及抗氧化的预防肿瘤复合制剂，由以下组分配方组成：冬虫夏草菌丝体多糖，10%；卟啉铁，1%；白藜芦醇的含量，1%；维生素B1，0.025%；维生素B2，0.025%；维生素C，1%；膳食纤维，10%；蜂蜜，10%；余量，水；冬虫夏草菌丝体多糖通过以下工艺获得：取虫草发酵而成的菌粉，加入水；将获得的滤液浓缩获得浓缩液；将浓缩液分装离心管中，离心获得水溶性虫草多糖溶液；收集溶液中的上清液并加入无水乙醇后静置获得醇沉液；将醇沉液分装至离心管中离心获得醇沉多糖；通过乙醇洗醇沉多糖获得所述冬虫夏草菌丝体多糖。本发明解决了现有技术难以同时提高免疫、补血和抗氧化的难题，且可有效降低荷瘤小鼠MDSCs细胞的比例，对肿瘤的预防和辅助治疗具有积极的效果。
Description
技术领域
本发明涉及肿瘤预防，具体涉及一种用于提高免疫、补血及抗氧化的复合制剂。
背景技术
鉴于中年女性处于特定的年龄阶段，和我国膳食结构的变化，乳腺癌已呈现逐年上升趋势，成为妇科肿瘤的第一位，同时由于不正确的饮食结构和营养知识的缺乏，缺铁性贫血在我国中年妇女中也普遍存在，女人爱美的天性也对抗氧化、抗衰老的产品提出了很高的要求，目前市场上迫切需要一种针对该人群的复合型营养制品，起到预防乳腺癌、补铁及抗氧化的复合功效。
目前常见的女性营养品，功效较为单一，如单纯补铁、降脂、调经，缺乏预防癌症和抗氧化的产品，而且所依据的理论较为单一，缺乏中西医的相互验证：要么依据中医理论发掘传统药方，缺乏现代医学的理论和实验证据支持；要么依据现代营养学的观点，缺什么补什么，着眼于所缺乏营养素的单一补充，均不能针对中年女性的生理特点，实现同时预防乳腺癌、补铁及抗氧化、防衰老的需求。
发明内容
本发明提供一种用于提高免疫、补血及抗氧化的复合制剂，此复合制剂解决了现有技术难同时能够提高免疫力、补血和抗氧化的技术难题，且可有效降低荷瘤小鼠免疫负调控细胞（髓样抑制性细胞细胞，MDSCs）的比例，对肿瘤的预防和辅助治疗具有积极的效果。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种用于提高免疫、补血及抗氧化的复合制剂，其特征在于：所述复合制剂由以下组分配方组成：
冬虫夏草菌丝体多糖， 10%；
卟啉铁， 1%；
白藜芦醇的含量， 1%；
维生素B1， 0.025%；
维生素B2， 0.025%；
维生素C， 1%；
膳食纤维， 10%；
蜂蜜， 10%；
余量， 水；
所述冬虫夏草菌丝体多糖通过以下工艺获得：
步骤一、取虫草发酵提取液浓缩而成的菌粉100g，加入4L H2O，煮沸4h后趁热纱布过滤除去残渣；
步骤二、将经步骤一获得的滤液加热浓缩至1L获得浓缩液；
步骤三、将步骤二的浓缩液收集于1L 烧杯中，70℃水浴浓缩至400ml；
步骤四、将步骤三中浓缩液分装至8个50ml 的离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min，获得水溶性虫草多糖溶液；
步骤五、收集经步骤四溶液中的上清液约400ml，去除不溶性杂质，至2L 烧杯中，缓慢加入4倍体积无水乙醇后静置获得醇沉液；
步骤六、将步骤五的醇沉液分装至40个50ml离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min后将所述各个离心管内醇沉多糖收集至4个50ml离心管中；
步骤七、通过100%乙醇洗经步骤六的所述醇沉多糖2次，真空低温冷冻干燥获得所述冬虫夏草菌丝体多糖。
上述技术方案中的进一步改进方案如下：
1、上述方案中，所述步骤二中滤液加热时同时进行搅拌操作。
2、上述方案中，所述步骤二中在70℃水浴中保持时间为24h。
3、上述方案中，所述步骤五中静置温度为4℃，时间为12h。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点和效果：
本发明复合制剂具有更好的清除免疫负调控细胞的功效，其中冬虫夏草菌丝体多糖和白藜芦醇均具有清除免疫负调控细胞的功效，但是各自作用的靶点不同，组合之后能产生协同效应，比单一效果更好；产品能更好保持卟啉铁的生理活性，因为卟啉铁是二价铁，易于吸收，但是暴露在空气中之后容易氧化，而白藜芦醇和维生素C具有抗氧化作用，能维持卟啉铁的亚铁状态，从而保持卟啉铁的良好生物活性。
附图说明
附图1为本发明复合制剂配方图；
附图2为本发明对免疫细胞的促增殖作用示意图；
附图3为本发明肿瘤辅助性细胞（免疫抑制性细胞MDSC）生长受抑制图。
产品具体实施方式
下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：
实施例：一种用于提高免疫、补血及抗氧化的复合制剂，所述复合制剂由以下组分配方组成：
冬虫夏草菌丝体多糖， 10%；
卟啉铁， 1%；
白藜芦醇的含量， 1%；
维生素B1， 0.025%；
维生素B2， 0.025%；
维生素C， 1%；
膳食纤维， 10%；
蜂蜜， 10%；
余量， 水；
所述冬虫夏草菌丝体多糖通过以下工艺获得：
步骤一、取虫草发酵提取液浓缩而成的菌粉100g，加入4L H2O，煮沸4h后趁热纱布过滤除去残渣；
步骤二、将经步骤一获得的滤液加热浓缩至1L获得浓缩液；
步骤三、将步骤二的浓缩液收集于1L 烧杯中，70℃水浴浓缩至400ml；
步骤四、将步骤三中浓缩液分装至8个50ml 的离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min，获得水溶性虫草多糖溶液；
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步骤六、将步骤五的醇沉液分装至40个50ml离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min后将所述各个离心管内醇沉多糖收集至4个50ml离心管中；
步骤七、通过100%乙醇洗经步骤六的所述醇沉多糖2次，真空低温冷冻干燥获得所述冬虫夏草菌丝体多糖。
上述步骤二中滤液加热时同时进行搅拌操作。
上述步骤二中在70℃水浴中保持时间为24h。
上述步骤五中静置温度为4℃，时间为12h。
具体阐述如下。
（1）、取虫草发酵提取液浓缩而成的菌粉菌粉100g，加入4L H2O，煮沸4h，趁热纱布过滤除去残渣。重复3次；
（2）、收集所有滤液（约5L）加热浓缩至1L。注意边加热边搅拌，防止粘底；
（3）、浓缩液收集于1L 烧杯中，70℃水浴浓缩至400ml，在该温度下，溶剂挥发速度较快，温度过高，则会影响多糖活性，防止加热过程中多糖碳化。需要24h；
（4）、浓缩液分装至8个50ml 的离心管中，4500 rpm离心10min，获得水溶性虫草多糖溶液；
（5）、收集上清液约400ml，除去不溶性杂质；至2L 烧杯中，缓慢加（120ml/分钟）入4倍体积（4倍体积乙醇处理后获得的虫草多糖生物活性好）无水乙醇，至乙醇终浓度（400ml上清液加入1600ml乙醇后，体系的总体积为2L，1600ml除以2L就是终浓度）75%，4℃静置12h。注意边加乙醇边搅拌；
（6）、2000ml 醇沉液分装至40个50ml离心管中，4500rpm离心10min，倾去上清液，所有醇沉多糖收集至4个50ml离心管中；
（7）、100%乙醇洗沉淀物2次，真空低温冷冻干燥，达到完全脱水的目的；
（8）、虫草多糖放置在干燥环境中保存。
如附图2所示， 2产品对免疫细胞的促增殖作用（左图是对照组，右图是产品组。放大倍数为200倍）；取FB61肿瘤细胞皮下接种的荷瘤小鼠（C57，雌性，3个月大），制备脾脏单细胞悬液；实验分为2组：对照组、产品组（1mg/ml）。每组设置3个复孔，接种细胞于6孔板，接种浓度为4×106/孔。37 ℃，5% CO2 培养3天；显微镜下观察、拍照。由图2可见，使用本产品后，免疫细胞明显增殖，细胞数量较多，铺满整个培养皿，而且细胞状态良好，而对照组免疫细胞数少，状态一般。说明本产品对免疫细胞具有较好的促增殖作用。
如附图3所示，取FB61肿瘤细胞皮下接种的荷瘤小鼠（C57，雌性，3个月大），制备脾脏单细胞悬液；实验分为4组：对照组、产品低浓度组（3mg/ml）、中浓度组（5mg/ml）、高浓度组（8mg/ml）。每组设置3个复孔，接种细胞于6孔板，接种浓度为4×106/孔。37 ℃，5% CO2 培养3天；收集细胞，流式染色FITC-Gr1，Percp-CD11b，流式细胞学检测。由图3可见，使用本产品后，免疫负调控细胞比例明显减少，呈现剂量-效应关系，其中对照组为25.8%，低浓度组为4.5%，中浓度组为3.8%，高浓度组为2.4%，说明本产品具有降低免疫负调控细胞在免疫细胞中比例的作用。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种用于提高免疫、补血及抗氧化的预防肿瘤复合制剂，其特征在于：所述复合制剂由以下组分配方组成：
冬虫夏草菌丝体多糖， 10%；
卟啉铁， 1%；
白藜芦醇的含量， 1%；
维生素B1， 0.025%；
维生素B2， 0.025%；
维生素C， 1%；
膳食纤维， 10%；
蜂蜜， 10%；
余量， 水；
所述冬虫夏草菌丝体多糖通过以下工艺获得：
步骤一、取虫草发酵提取液浓缩而成的菌粉100g，加入4L H2O，煮沸4h后趁热纱布过滤除去残渣；
步骤二、将经步骤一获得的滤液加热浓缩至1L获得浓缩液；
步骤三、将步骤二的浓缩液收集于1L 烧杯中，70℃水浴浓缩至400ml；
步骤四、将步骤三中浓缩液分装至8个50ml 的离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min，获得水溶性虫草多糖溶液；
步骤五、收集经步骤四溶液中的上清液约400ml，去除不溶性杂质，至2L 烧杯中，缓慢加入4倍体积无水乙醇后静置获得醇沉液；
步骤六、将步骤五的醇沉液分装至40个50ml离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min后将所述各个离心管内醇沉多糖收集至4个50ml离心管中；
步骤七、通过100%乙醇洗经步骤六的所述醇沉多糖2次，真空低温冷冻干燥获得所述冬虫夏草菌丝体多糖。
2.根据权利要求1所述的预防肿瘤复合制剂，其特征在于：所述步骤二中滤液加热时同时进行搅拌操作。
3.根据权利要求1所述的预防肿瘤复合制剂，其特征在于：所述步骤二中在70℃水浴中保持时间为24h。
4.根据权利要求1所述的预防肿瘤复合制剂，其特征在于：所述步骤五中静置温度为4℃，时间为12h。
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