CN102636639A - 碱性磷酸酶标记物的稀释液 - Google Patents
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Abstract
本发明设计一种医药试剂,具体的说是一种碱性磷酸酶标记物的稀释液,由如下物质组成:Tris缓冲液,50mM;蛋白,占总稀释液的1%;镁离子,0.01~0.2mol/L;钠离子,0.05~1mol/L;锌离子,0.001~0.01mol/L;表面活性剂,占总稀释液的0.5%;防腐剂,占总稀释液的0.05%。本发明同现有技术相比,够提供测定血清的微环境,排除血清测定的干扰。
Description
[技术领域]
本发明涉及一种医药试剂,具体的说是一种碱性磷酸酶标记物的稀释液,该稀释液通过向Tris缓冲液中加入蛋白质、金属离子、表面活性剂以及防腐剂而得到。该稀释液能够排除临床测定的干扰。
[背景技术]
在适宜的缓冲体系中,碱性磷酸酶可以催化含磷酸根基团的显色底物和化学发光底物,因此,碱性磷酸酶作为一种标记酶,广泛应用于临床免疫测定中。
碱性磷酸酶的标记物溶液是体外诊断试剂盒的组分之一,参考国内外多数试剂盒的设计,当被测定血清反应时,反应微环境几乎全由酶标记物的稀释液提供。换句话说,抗原抗体反应是在酶标记物稀释液中进行的。
抗原抗体作为生物活性物质,其反应需要满足一定的条件,比如酸、碱、各种无机及有机离子、蛋白、粘度等等。
模拟抗原抗体反应微环境,最好的参考物质是血清,因为这是抗原抗体反应的天然环境。
[发明内容]
本发明为了克服现有技术的不足,提供了一种碱性磷酸酶标记物的稀释液。
为了实现上述目的,本发明设计了一种碱性磷酸酶标记物的稀释液,由如下物质组成:
Tris缓冲液 50mM;
蛋白 占总稀释液的1%;
镁离子 0.01~0.2mol/L;
钠离子 0.05~1mol/L;
锌离子 0.001~0.01mol/L;
表面活性剂 占总稀释液的0.5%;
防腐剂 占总稀释液的0.05%。
所述蛋白为牛血清白蛋白或酪蛋白中的一种。
所述表面活性剂为吐温-80或Triton X-100中的一种。
所述锌离子为ZnCl。
所述镁离子为MgCl。
所述钠离子为NaCl。
所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠或庆大霉素中的一种。
本发明同现有技术相比,够提供测定血清的微环境,排除血清测定的干扰。
[附图说明]
图1为本发明实施例1中样本测定浓度与罗氏相关性的趋势图。
图2为本发明实施例2中样本测定浓度与罗氏相关性的趋势图。
图3为本发明实施例3中样本测定浓度与罗氏相关性的趋势图。
图4为本发明实施例4中样本测定浓度与罗氏相关性的趋势图。
图5为本发明实施例5中样本测定浓度与罗氏相关性的趋势图。
图6为本发明实施例6中样本测定浓度与罗氏相关性的趋势图。
[具体实施方式]
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解这些实施例仅用于说明本发明不用于限制本发明的范围。
实施例1:
本发明实施例以AFP磁微粒化学发光免疫分析为例。
采购自罗氏的两株AFP单抗,分别做包被和标记,AFP-碱性磷酸酶标记物用以下描述的稀释液稀释至合适的工作浓度。以20份血清为样本,测定并计算样本浓度值,并与罗氏测定结果比较符合率。
上述稀释液,其组分和浓度为:
Tris缓冲 50mM,pH7.4;
ZnCl 0.1mM;
MgCl 1mM;
NaCl 30g/L;
P-300 0.05%;
吐温-80 0.5%;
由图1结果可知,在本例未加蛋白的稀释液中,样本测定浓度与罗氏相关性仅为R2=0.821。
实施例2:
本发明实施例以AFP磁微粒化学发光免疫分析为例。
采购自罗氏的两株AFP单抗,分别做包被和标记,AFP-碱性磷酸酶标记物用以下描述的稀释液稀释至合适的工作浓度。以20份血清为样本,测定并计算样本浓度值,并与罗氏测定结果比较符合率。
上述稀释液,其组分和浓度为:
由图2结果可知,在本例未加锌离子的稀释液中,样本测定浓度与罗氏相关性仅为R2=0.888。
实施例3:
本发明实施例以AFP磁微粒化学发光免疫分析为例。
采购自罗氏的两株AFP单抗,分别做包被和标记,AFP-碱性磷酸酶标记物用以下描述的稀释液稀释至合适的工作浓度。以20份血清为样本,测定并计算样本浓度值,并与罗氏测定结果比较符合率。
上述稀释液,其组分和浓度为:
由图3结果可知,在本例未加镁离子的稀释液中,样本测定浓度与罗氏相关性仅为R2=0.904。
实施例4:
本发明实施例以AFP磁微粒化学发光免疫分析为例。
采购自罗氏的两株AFP单抗,分别做包被和标记,AFP-碱性磷酸酶标记物用以下描述的稀释液稀释至合适的工作浓度。以20份血清为样本,测定并计算样本浓度值,并与罗氏测定结果比较符合率。
上述稀释液,其组分和浓度为:
由图4结果可知,在本例未加钠离子的稀释液中,样本测定浓度与罗氏相关性仅为R2=0.707。
实施例5:
本发明实施例以AFP磁微粒化学发光免疫分析为例。
采购自罗氏的两株AFP单抗,分别做包被和标记,AFP-碱性磷酸酶标记物用以下描述的稀释液稀释至合适的工作浓度。以20份血清为样本,测定并计算样本浓度值,并与罗氏测定结果比较符合率。
上述稀释液,其组分和浓度为:
由图5结果可知,在本例未加表面活性剂的稀释液中,样本测定浓度与罗氏相关性仅为R2=0.940。
实施例6:
本发明实施例以AFP磁微粒化学发光免疫分析为例。
采购自罗氏的两株AFP单抗,分别做包被和标记,AFP-碱性磷酸酶标记物用以下描述的稀释液稀释至合适的工作浓度。以20份血清为样本,测定并计算样本浓度值,并与罗氏测定结果比较符合率。
上述稀释液,其组分和浓度为:
由图6结果可知,在本例稀释液中,样本测定浓度与罗氏相关性为R2=0.991。
通过从以上实施例1至实施例6可见,本发明的稀释液能很好的排除临床测定中的干扰。
已通过上述各实施例对本发明作出说明,但本领域技术人员可以在不偏离本发明宗旨和范围的情况下,可对本发明作出任何修改、变更和替换。
Claims (7)
1.一种碱性磷酸酶标记物的稀释液,由如下物质组成:
Tris缓冲液 50mM;
蛋白 占总稀释液的1%;
镁离子 0.01~0.2mol/L;
钠离子 0.05~1mol/L;
锌离子 0.001~0.01mol/L;
表面活性剂 占总稀释液的0.5%;
防腐剂 占总稀释液的0.05%。
2.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶标记物的稀释液,其特征在于:所述蛋白为牛血清白蛋白或酪蛋白中的一种。
3.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶标记物的稀释液,其特征在于:所述表面活性剂为吐温-80或Triton X-100中的一种。
4.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶标记物的稀释液,其特征在于:所述锌离子为ZnCl。
5.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶标记物的稀释液,其特征在于:所述镁离子为MgCl。
6.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶标记物的稀释液,其特征在于:所述钠离子为NaCl。
7.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶标记物的稀释液,其特征在于:所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠或庆大霉素中的一种。
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