CN102631434A - 木瓜总酚酸提取物在制备防治关节炎药物或食品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药技术领域，是木瓜总酚酸提取物在制备防治关节炎药物或食品中的应用，其特征在于所说的关节炎为痛风性关节炎或类风湿性关节炎。本发明用木瓜果实制备木瓜总酚酸提取物，经成分分析，本发明木瓜提取物主要成分为原儿茶酸、氯原酸等多种酚酸类化合物，其中含原儿茶酸30-35％，含氯原酸20-25％，酚酸类化合物占木瓜提取物的50-60％，故称为木瓜总酚酸提取物。经动物实验。本发明木瓜总酚酸提取物具有明显的防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎活性，因此可用于制备防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎的药物或食品。

Description

木瓜总酚酸提取物在制备防治关节炎药物或食品中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是木瓜总酚酸提取物用于制备防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎的药物或食品的新用途。

背景技术

痛风性关节炎是由于嘌呤代谢障碍引起的血尿酸盐浓度增高而导致体内尿酸盐沉积于关节部位所致的一种代谢性骨关节疾病，主要侵犯关节的滑膜、关节软骨和皮下组织。发病时下肢小关节卒然红肿热痛，不能行走，非常痛苦。现代医学认为痛风性关节炎急性发作其主要的病理改变是尿酸结晶(MSU)在关节周围组织沉积引起急性炎症反应。MSU与滑膜液中IgG结合，被白细胞及滑膜细胞吞噬，促使这些细胞立即释放组胺、凝血因子、补体及花生四烯酸(AA)等物质，AA通过环氧化酶和脂氧化酶两条途径分别生成PGE2及白三烯，进而促使IL-1β、IL-8等因子大量分泌，所有这些物质短期中引起局部血管扩张、通透性增加、渗出、水肿、白细胞聚集、发热等炎症反应，并发展到高峰。

痛风性关节炎属于中医学“痹症”范畴，与痹痛、风痹关系密切。其病因是风、寒、湿、热等外部的侵入，内因与正气不足，劳逸不当，体质虚亏有关，主要病机为留滞经脉，气血运行滞涩，肾气亏损，表现有虚有实，以实证为主。目前国内外治疗痛风性关节炎仍以秋水仙碱为首选，但由于临床上的毒副怍用较大，而不能长期应用，在临床应用上受到严格限制。

类风湿性关节炎最早由Alfred Garod(1858年)首先从痛风和风湿性关节炎中区分出来，是一种以关节和关节周围组织的非感染性炎症为主的全身性自身免疫性疾病，其病理特点为关节滑膜的慢性炎症，细胞浸润，滑膜翳形成，软骨及骨组织的侵袭，导致关节结构的破坏，最终导致关节畸形、功能障碍或丧失，甚至残废，丧失生活能力。类风湿性关节炎是一个世界范围性疾病，据统计，其在全世界成人中的发病率约占1％～2％，并随着年龄的增长而增高，35岁以下成人的发病率约0.3％，而65岁以上者发病率超过10％，我国患病率为0.3％～0.5％。

类风湿性关节炎目前尚无特异疗法，药物治疗是目前主要的治疗手段，尽管抗风湿药物很多，或因不良反应严重，或因控制早期症状能力差而一直无重大突破，目前还缺乏令人满意的防治类风湿性关节炎药物，从中药开发标本兼治、安全有效的药物有着重要的实际价值。

中药木瓜为我国常用中药，具有平肝舒筋、和胃化湿等功效，《中国药典》2010年版一部收载木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomelesspeciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实，皱皮木瓜是其果实加工而形成的产品。另外还有两种也广泛作木瓜使用：光皮木瓜为蔷薇科植物榠楂C.sinensis(Thouin)Koehen的果实；木瓜海棠为蔷薇科植物毛叶木瓜C.cathayensis(Hemsl)Schneid的果实。皱皮木瓜主产安徽、山东、浙江、湖北、云南、贵州、四川等地，主要含有机酸、三萜类、黄酮类、多糖等成分。在国内外研究中，目前主要有对木瓜总苷及总酚酸提取物抗感染性炎症和镇痛方面的报道(中国实验方剂学杂志，2011，17(1)：113-116，119；Journal of Medical Food，2009，12(5)：1016-1022)，但尚未见有木瓜总酚酸提取物用于防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎方面的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种木瓜总酚酸提取物用于制备防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎药物的新用途。

本发明木瓜总酚酸提取物的制备方法如下：

按常规将皱皮木瓜果实粉碎后，以30％-80％乙醇水溶液常温下浸泡24-48小时，得浸泡液，再于常温下用30％-80％乙醇水溶液渗漉提取2-5次，合并浸泡液和渗漉液，即得木瓜提取液；

将上述木瓜提取液浓缩后离心或过滤，弃沉淀，将上清液或滤液用大孔树脂吸附，以蒸馏水淋洗除去杂质，然后再以5％-20％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，按同法再用大孔树脂吸附和洗脱，合并洗脱液并浓缩至无醇味，干燥后即为木瓜总酚酸提取物。

经成分分析，本发明木瓜提取物主要成分为原儿茶酸、氯原酸等多种酚酸类化合物，其中含原儿茶酸30-35％，含氯原酸20-25％，酚酸类化合物占木瓜提取物的50-60％，故称为木瓜总酚酸提取物。

动物实验：

一、本发明木瓜总酚酸提取物经如下动物实验，说明其具有防治痛风性关节炎活性：

1.通过制备尿酸结晶致大鼠足趾肿胀模型，观察木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎的预防作用。木瓜总酚酸提取物的低、中、高三个剂量组(按体重剂量依次为50mg/kg，100mg/kg，200mg/kg)与模型对照组比较，均能明显抑制尿酸结晶引起的大鼠踝关节肿胀，特别是高剂量组在造模后1～6小时均具有非常显著的抑制作用。结果表明木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎足趾肿胀具有明显的预防作用。

2.通过制备尿酸结晶诱导家兔痛风性关节炎模型，观察木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎的预防作用。阳性对照组(药物为秋水仙碱)和木瓜总酚酸提取物低、中、高三个剂量组(按体重剂量依次为25mg/kg，50mg/kg，100mg/kg)均可降低MSU致炎家兔的关节液中白细胞渗出，改善关节组织炎症反应程度。其中，中剂量组与模型对照组相比差异显著(P＜0.05)，高剂量组及阳性对照组与模型对照组相比差异非常显著(P＜0.01)。病理切片显示，木瓜总酚酸提取物和阳性对照药秋水仙碱一样，均可明显减轻滑膜组织的毛细血管充血、肿胀、坏死及炎性细胞浸润，从而表明木瓜总酚酸提取物具有抑制痛风性关节炎炎症反应的药效学基础，对痛风性关节炎具有显著的预防和改善作用。

3.按照McCarty，DJ经典造模方法制备家兔痛风性关节炎模型，观察木瓜总酚酸提取物治疗痛风性关节炎的作用机制。与模型对照组比较，木瓜总酚酸提取物组和阳性对照组的家兔关节液IL-1β、IL-8水平均显著下降(P＜0.01)，木瓜总酚酸提取物组甚至比阳性对照组的关节液IL-1β、IL-8水平还低(P＜0.05)，说明木瓜总酚酸提取物对兔痛风性关节炎关节液中IL-1β和IL-8的水平有明显下调作用。

因此木瓜总酚酸提取物可用于制备治疗痛风性关节炎的药物或食品。

二、本发明木瓜总酚酸提取物经如下动物实验，说明其具有防治类风湿性关节炎活性：

通过建立大鼠的佐剂关节炎模型，观察木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎的防治作用。结果显示：木瓜总酚酸提取物预防性给药可明显抑制注射局部的早期炎症反应和8天后的再度肿胀，对大鼠佐剂性关节炎原发病变有显著的消肿、抗炎效果；对继发病变的预防性给药，可抑制对侧足肿胀，使注射侧足肿胀明显消退，减轻再肿胀的程度；对继发病变的治疗性给药，可降低注射对侧足爪的肿胀度、前肢和尾部的病变度。说明木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎的原发病变和继发病变有显著的预防和治疗作用。因此木瓜总酚酸提取物可用于制备防治类风湿性关节炎的药物。

本发明木瓜总酚酸提取物制备方法简便，具有明显的防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎活性，因此可用于制备防治痛风性关节炎或类风湿性关节炎的药物或食品。

附图说明

图1为尿酸结晶诱导痛风性关节炎的各组家兔滑膜病理切片对照图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作详细描述。

实施例1  制备木瓜总酚酸提取物

将100kg的中药木瓜干燥药材粉碎后，过10目筛，投入提取罐，以70％乙醇水溶液200L常温下浸泡24h，于常温下用70％乙醇水溶液1500L渗漉提取3次，合并浸泡液及渗漉液，浓缩至50L，过滤，将滤液按常规用聚苯乙烯多孔性吸附大孔树脂吸附，柱内大孔树脂装量为200L，以1500L蒸馏水淋洗除去杂质，然后再以10％乙醇水溶液进行洗脱，收集2000L洗脱液，浓缩至无醇味，再用同法进行二次大孔树脂吸附、脱附，干燥后即得棕褐色粉末状木瓜总酚酸提取物0.25kg。按生药投药量计算，木瓜总酚酸提取物得率为0.25％。

取实施例1得到的木瓜总酚酸提取物2g，用50％甲醇溶解后通过Sephadex LH-20凝胶柱，用50％甲醇洗脱，薄层层析法检测，收集洗脱液后合并相同部分，得到两个单体化合物，用ESI-MS、NMR等光谱技术和化学方法鉴定所分离化合物为原儿茶酸、氯原酸。再用高效液相色谱法检测木瓜总酚酸提取物中原儿茶酸、氯原酸的含量分别为30-35％、20-25％，确定酚酸类化合物占木瓜提取物的50-60％以上。

动物实验：

实验所用的木瓜总酚酸提取物由实施例1制备，所用的动物由第二军医大学动物中心提供。

一、木瓜总酚酸提取物防治痛风性关节炎的动物实验：

1、木瓜总酚酸提取物对大鼠痛风性关节炎足跖肿胀的预防实验

本实验通过制备尿酸结晶致大鼠足趾肿胀模型，观察木瓜总酚酸提取物对大鼠痛风性关节炎的预防作用。

尿酸结晶的制备：尿酸，sigma公司出品，批号120k5305；碳酸氢钠，泌阳盘古药业有限责任公司，批号071212。将5g尿酸置1000ml沸水中，用NaHC03调pH至7.4，再加热至95℃。室温冷却并轻轻搅拌，4℃冰箱冷却，过滤，得微晶型尿酸钠结晶。临用前高温灭菌，用无菌生理盐水配成100mg/ml。

取雄性Wistar大鼠50只，体重220±20克，随机分成5组，即模型对照组、阳性对照组、木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组，每组10只大鼠。

阳性对照组，其推荐临床平均秋水仙碱剂量为0.05mg/Kg/人/日(人按60Kg体重计算)，转换为大鼠剂量为0.3mg/kg

木瓜总酚酸提取物组，根据预实验结果，木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组按体重给药剂量依次为50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg；

模型对照组给予等体积生理盐水。

给药途径：灌胃，体积为按体重每只大鼠10ml/kg。

给药次数：连续给药7天，每天1次。

实验方法：给药前，测量每只大鼠右后足踝关节圆周长。按上述给药剂量连续灌胃给药七天，每天一次，最后一次给药1h后每只大鼠右后足跖皮下注射MSU混悬液(浓度为100mg/ml)0.1ml致炎，并测量致炎后1h，2h、3h、4h、5h、6h大鼠右踝关节圆周长，计算各组肿胀率，进行组间比较。

计算公式为：肿胀率(％)＝(致炎后周长-致炎前周长)/致炎前周长×100％

实验数据采用SPSS 13.0进行统计分析，组间多项数据比较采用单因素方差分析，数据以

表示，P＜0.05作为显著性差异。

实验结果：结果见表1.

表1.木瓜总酚酸提取物对大鼠痛风性关节炎踝关节肿胀的影响

n＝10)

注：与模型对照组相比：^*P＜0.05；^**P＜0.01

由表1可见，与模型对照组比较，各木瓜总酚酸提取物剂量组均能明显抑制大鼠踝关节肿胀(P＜0.01)，且有剂量依赖性趋势，作用时间持续6h以上；其中，低剂量组1～2h有显著作用(P＜0.05)，中剂量组1～3h时与模型对照组差异非常显著(P＜0.01)，4h时仍差异显著(P＜0.05)；高剂量组与阳性对照组作用相近，与模型对照组相比，抑制大鼠踝关节肿胀非常显著，作用时间持续6h以上(P＜0.01)。结果表明，木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎足趾肿胀具有明显的预防作用。

2、木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎的预防实验

本实验通过制备尿酸结晶诱导家兔痛风性关节炎模型，观察木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎的预防作用。

实验方法

家兔40只，体重(3.0±0.5)kg，雌雄各半，随机分成5组，即模型对照组、阳性对照组、木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组，每组8只家兔。

按体重给药剂量分别为：

阳性对照组，秋水仙碱，其推荐临床平均剂量为0.05mg/Kg/人/日(人按60Kg体重计算)，转换为家兔剂量为0.15mg/kg；

木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组的剂量依次为按体重25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg；

模型对照组给予等体积生理盐水。

给药途径：灌胃，体积为按体重每只家兔10ml/kg。

给药次数：连续给药七天，1次/日。

按上述剂量分别给各组家兔连续灌胃给药七天，每天一次，最后一次给药1h后，每只家兔左膝关节内注射尿酸结晶混悬液(浓度100mg/ml)0.3ml致炎，右膝注射等体积生理盐水作为对照，致炎后5h处死家兔，收集关节积液，进行白细胞计数，并取滑液膜进行组织学检查。观察滑膜组织、滑膜细胞肿胀、坏死、白细胞和淋巴细胞浸润等炎症反应程度。

病理观察：按常规将滑膜病理标本做成蜡块，切片，HE染色，光镜观察。参照文献(JBJS，1971；53：523)方法改良，进行滑膜组织学改变的组织学评分(评分标准见表2)。

表2滑膜组织学改变的组织学分级评分标准

实验数据以表示，采用秩和检验和方差分析，作显著性检验。

实验结果：

1.病理变化：

滑膜病理切片见图1，滑膜病理切片分析见表3。

表3关节滑膜组织病理切片结果记录

由表3和图1可见：

模型对照组，血管严重充血，滑膜肿胀，大量中性粒细胞浸润，滑膜组织有些标本表现大面积坏死。

阳性对照组，血管充血，滑膜轻微肿胀，中性粒细胞浸润，一些标本可见小面积坏死。

木瓜总酚酸提取物低剂量组，血管充血，滑膜肿胀，中性粒细胞浸润，一些标本可见小面积坏死；中剂量组血管充血，滑膜轻微肿胀，见少量炎性细胞浸润；高剂量组充血及滑膜肿胀程度较轻，明显好于低、中剂量组及阳性对照组。

2.对关节液白细胞渗出的影响：见表4

表4关节液白细胞(WBC)计数比较

×10⁹L^-1)

与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

由表4可知，关节腔内注射生理盐水对各组关节液白细胞渗出无显著影响，秋水仙碱和木瓜总酚酸提取物三个剂量组均可降低MSU致炎家兔的关节液中白细胞渗出，改善关节组织炎症反应程度。与模型对照组相比，中剂量组与模型对照组相差显著(P＜0.05)，高剂量组与模型对照组差异非常显著(P＜0.01)，高剂量组与阳性对照组接近，说明木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎具有显著的预防作用。

以上实验结果说明，木瓜总酚酸提取物可用于制备预防痛风性关节炎的药物或食品。

二、木瓜总酚酸提取物对痛风性关节炎的治疗实验

按照McCarty，DJ经典造模方法制备家兔痛风性关节炎模型，观察木瓜总酚酸提取物治疗痛风性关节炎的治疗作用。

实验方法

家兔40只，体重(3.0±0.5)kg，雌雄各半，随机分成5组，即模型对照组、阳性对照组、木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组，每组8只家兔。

按体重给药剂量分别为：

阳性对照组，秋水仙碱，其推荐临床平均剂量为0.05mg/Kg/人/日(人按60Kg体重计算)，转换为家兔剂量为0.15mg/kg；

木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组的剂量依次为25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg；

模型对照组给予等体积生理盐水。

给药途径：灌胃，体积为按体重每只家兔10ml/kg。

给药次数：连续给药七天，1次/日。

各组家兔正常饲养1周后.均按McCarty，DJ经典造模方法，用20％乌拉坦(按5m/kg)从耳缘静脉注入将兔麻醉，双侧膝关节周围剃毛，消毒皮肤，轻弯曲膝关节，于关节正中或侧位进针，用6号注射针将尿酸钠溶液0.5ml通过髌上韧带注入兔膝关节腔.造成痛风性关节炎病理模型。造模成功过后分别按上述剂量给予木瓜总酚酸提取物、秋水仙碱、生理盐水连续灌胃给药七天，每天一次，七天后应用放免法检测膝关节积液中IL-1β和IL-8水平。

观测指标：放免法检测IL-1β和IL-8，以N/T、B/T计算NSB、SO结合百分率，以B/BO计算标准及待测物结合百分率，由放免γ-测量仪直接读出结果。

实验数据以

表示，采用秩和检验和方差分析，作显著性检验。

实验结果：结果见表5

表5各组关节液中关节液中IL-1β和IL-8的含量的影响

n＝8)

与模型对照组比较，^*P＜0.05；^**P＜0.01；与阳性对照组比较，^▲P＜0.05。

由表5可知，与模型对照组比较，阳性对照组和木瓜总酚酸提取物中、高剂量组关节液的IL-1β和IL-8水平显著下降(P＜0.05，P＜0.01)，木瓜总酚酸提取物高剂量组关节液IL-1β和IL-8水平甚至比阳性对照组有明显下降(P＜0.05)，说明木瓜总酚酸提取物对兔痛风性关节炎的关节液中IL-1β和IL-8的水平有明显下调作用，因此木瓜总酚酸提取物可用于制备治疗痛风性关节炎的药物或食品。

三、木瓜总酚酸提取物防治类风湿关节炎动物实验：

本实验通过建立大鼠的佐剂关节炎模型，观察木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎的防治作用。

实验方法

大鼠佐剂性关节炎是一种免疫性炎症模型，其特征是多发性关节炎，发病机制和病理特征与人类风湿性关节炎类似，对抗炎、免疫药物敏感，是筛选和研究治疗关节炎药物的常规模型。佐剂性关节炎模型可分为二个时相，即原发性反应期和继发性反应期。其原发病变主要表现为致炎局部的炎症反应，致炎后18h肿胀达峰值，持续3d后逐渐减轻，8d后再度肿胀。继发病变一般出现于致炎后10d左右，主要表现为多发性关节炎，病理组织学特征可见滑膜充血水肿增生、单核巨噬细胞浸润、纤维素沉着、关节软骨破坏等。

实验分三个，即药物对原发病变的影响、药物对继发病变的预防作用和药物对继发病变的治疗作用。每个实验所用动物为Wistar大鼠，雄性，体重170±20g，50只，随机分成5组，即模型对照组、阳性对照组、木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组，每组10只。

按体重给药剂量分别为：

阳性对照组，奥沙普秦肠溶片，其推荐临床平均剂量为5mg/Kg/人/日(人按60Kg体重计算)，转换为大鼠剂量为30mg/kg；

木瓜总酚酸提取物组，木瓜总酚酸提取物低、中、高剂量组分别为50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg；

模型对照组给予等体积生理盐水。

给药途径：灌胃，体积为按体重每只大鼠10ml/kg。

给药方式：由于迟发型超敏反应所致的继发病变一般出现于致炎后10d左右，观察对继发性病变的预防作用时，选择致炎7d后给药；观察对继发性病变的治疗作用时，选择致炎19d后给药。具体操作如下：

1.药物对原发病变的影响

取雄性Wistar大鼠50只，随机分为5个组，测量大鼠右后足踝关节圆周长，致炎前1d开始给药，每只大鼠右后足跖皮下注射注射完全Freund′s佐剂0.1ml致炎，连续给药15d，于致炎后第3、8、15d分别测量各组大鼠右踝关节圆周长，计算各组肿胀率，进行组间比较，观察该药对原发病变的影响。

计算公式为：肿胀率(％)＝(致炎后周长-致炎前周长)/致炎前周长×100％

2.药物对继发病变的预防作用

取雄性Wistar大鼠50只，随机分为5个组，测量大鼠右后足踝关节圆周长，再每只大鼠右后足跖皮下注射注射完全Freund′s佐剂0.1ml致炎，致炎后第7d开始给药，连续给药7天，并测量致炎后第6d、9d、12d、15d、18d、21d大鼠右踝关节圆周长，计算各组肿胀率，观察体重变化，以及前肢、耳和尾部病变的发生率及严重程度(按五级评分法：0级：无红肿；1级：小趾关节稍肿；2级：趾关节和足跖肿胀；3级：踝关节以下足肿胀；4级：包括踝关节在内全部足爪肿胀)。观察该药对继发病变的预防作用，进行组间比较。

计算公式为：肿胀率(％)＝(致炎后周长-致炎前周长)/致炎前周长×100％

3.药物对继发病变的治疗作用

取雄性Wistar大鼠50只，随机分为5个组，测量大鼠右后足踝关节圆周长，再每只大鼠右后足跖皮下注射注射完全Freund′s佐剂0.1ml致炎，致炎后第19d开始给药，连续给药7天，并测量致炎后第18d、21d、24d、27d、30d大鼠右踝关节圆周长，计算各组肿胀率，观察体重变化，以及前肢、耳和尾部病变的发生率及严重程度，观察方法及结果表示方法同上，进行组间比较。

计算公式为：肿胀率(％)＝(致炎后周长-致炎前周长)/致炎前周长×100％

观测指标：关节肿胀度、胸腺、脾重量(湿重)。

数据及统计学分析：实验数据以

表示，采用秩和检验和方差分析，作显著性检验。

实验结果：

1.药物对原发病变的影响：结果见表6。

表6木瓜总酚酸提取物对大鼠弗氏佐剂诱导原发性关节炎踝关节肿胀的影响

n＝10)

^*P＜0.05，^**P＜0.01与溶剂对照组比较

由表6可见，木瓜总酚酸提取物预防性给药可明显抑制注射局部的早期炎症反应和8d后的再度肿胀，对大鼠佐剂性关节炎原发病变有显著的消肿、抗炎效果。实验结果表明，木瓜总酚酸提取物低剂量组可显著抑制早期炎症反应引起的踝关节肿胀(P＜0.05)，对8d后的再肿胀无显著作用；中、高剂量组及阳性对照组对早期炎症反应及8d后的再肿胀均有显著或非常显著的抑制作用。说明木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎原发病变有预防作用。

2.药物对继发病变的预防作用：结果见表7。

表7木瓜总酚酸提取物对大鼠弗氏佐剂诱导继发性关节炎踝关节肿胀的预防作用

n＝10)

^*P＜0.05，^**P＜0.01与溶剂对照组比较

由表7可见，木瓜总酚酸提取物可抑制大鼠佐剂注射对侧足因迟发型超敏反应引起的足肿胀，也使注射佐剂侧足肿胀明显消退，并显著减轻再肿胀的程度；耳部、前肢和尾部病变的发生率、结节数及严重程度均低于模型组。踝关节肿胀率除低剂量组12d与模型对照组无显著差异外，木瓜总酚酸提取物各剂量组各时间点与模型对照组相比均有显著或非常显著抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)。说明木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎继发病变有预防作用。

3.药物对继发病变的治疗作用：结果见表8。

表8木瓜总酚酸提取物对大鼠弗氏佐剂诱导继发性关节炎踝关节肿胀的治疗作用

n＝10)

^*P＜0.05，^**P＜0.01与溶剂对照组比较

由表8可见，木瓜总酚酸提取物可使佐剂注射对侧足爪的肿胀度和耳部、前肢和尾部病变的严重度降低，较模型对照组为轻；踝关节肿胀率除低剂量组18d、21d与模型对照组相比无显著差异外，木瓜总酚酸提取物各剂量组各时间点与模型对照组相比均有显著或非常显著抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)。说明木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎继发病变有治疗作用。

实验结果表明，木瓜总酚酸提取物预防性给药对类风湿性关节炎原发病变有显著的消肿、抗炎效果；对继发病变的预防性给药，可抑制对侧足肿胀，使注射侧足肿胀明显消退，减轻再肿胀的程度；对继发病变的治疗性给药，可降低注射对侧足爪的肿胀度、前肢和尾部的病变度。说明木瓜总酚酸提取物对类风湿性关节炎的原发病变和继发病变有显著的预防和治疗作用，因此可用于制备防治类风湿关节炎的药物或食品。

Claims (1)

1.木瓜总酚酸提取物在制备防治关节炎药物或食品中的应用，其特征在于所说的关节炎为痛风性关节炎或类风湿性关节炎，木瓜总酚酸提取物的制备方法如下：

1)按常规将木瓜果实粉碎后，以30％-80％乙醇水溶液常温下浸泡24-48小时，得浸泡液，再于常温下用30％-80％乙醇水溶液渗漉提取2-5次，合并浸泡液和渗漉液，即为木瓜提取液；

2)纯化：

将上述木瓜提取液浓缩后离心或过滤，弃沉淀，将上清液或滤液用聚苯乙烯多孔性大孔树脂吸附，以蒸馏水淋洗去除杂质，然后再以5％-20％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，按同法再用大孔树脂吸附和洗脱，合并洗脱液并浓缩至无醇味，干燥后即为木瓜总酚酸提取物，其中含原儿茶酸30-35％，含氯原酸20-25％，酚酸类化合物占木瓜提取物的50-60％。

Images