CN102613065A - 一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法 - Google Patents
一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102613065A CN102613065A CN201210084964XA CN201210084964A CN102613065A CN 102613065 A CN102613065 A CN 102613065A CN 201210084964X A CN201210084964X A CN 201210084964XA CN 201210084964 A CN201210084964 A CN 201210084964A CN 102613065 A CN102613065 A CN 102613065A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- algae
- skinning
- crusts
- sheath
- sand
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Cultivation Of Seaweed (AREA)
Abstract
本发明公开了利用混合藻类构建人工藻结皮的方法,通过在沙漠选择充分发育的藻结皮,采集,风干后研磨,将裸沙过0.2mm筛后按照每升BG11液体培养基加入100g裸沙中,接种量是50g干土/升培养基,在室温,光照强度4000lux,3周后将藻种和所固着的沙粒一并收集;培养的混合藻,优势物种是以微鞘藻、鞘丝藻、席藻为主的丝状藻占总生物量的80%;颤藻、土生绿球藻、小球藻、衣藻、舟形藻和菱板藻等物种占总生物量的20%;将收集的藻种风干后研磨成藻粉置于冰箱内-20℃;在土壤为20℃在裸沙上接种,接种量是80g·m-2,每天施加水分3L·m-2。本发明成功地避开了藻类的纯化分离问题,具有广泛的应用性。
Description
发明领域
本发明涉及利用生物材料构建人工生物结皮的生物技术领域,具体的说,本发明涉及利用混合藻种来快速构建藻结皮的技术领域。
背景技术
近年来我国是世界上沙漠化最严重的国家之一,沙漠化土地总面积已达373万平方公里,年扩展率为2460平方公里,荒漠化越来越严重,每年因沙漠化造成的直接经济损失高达540亿元。针对这严重的现状,寻求有效的途径防止土地资源沙化已是当务之急。
传统的防风固沙措施如植树造林、草方格沙障和粘土沙障表面上看是有效的,但不能从根本上解决沙化和沙漠化土地的治理问题。主要是因为高等植物生长缓慢,生长周期长,难以在短时间内起到防风固沙的作用。另外,每棵高等植物因其巨大的抽水作用使本已贫乏的地下水更加贫乏。
生物结皮作为干旱荒漠地区特殊环境的产物,是由微生物、藻类、真菌、地衣、苔藓与土壤颗粒形成的有机复合体。生物结皮在其发育过程中,积极参与土壤的形成,对于增加土壤养分和盐分,提高抗侵蚀性能、促进种子植物的植入发挥着重要的生态与地学效应。生物结皮在荒漠生态系统中所具有的重要生态功能引起了生态学家的普遍重视。生物结皮的相关研究成果又为荒漠化防治提供了低成本、高效益的新途径。实现人工生物结皮的快速繁殖对沙漠治理和生态环境改善具有重要的科学意义和现实意义。
藻结皮是生物结皮的早期阶段,也是沙漠固定的首要标志。而在人工藻结皮的恢复中,国内藻类学家多是先将藻种纯化分离,经规模化培养,再将若干个优势藻种混合后接种构建藻结皮(胡春香等,荒漠藻对流沙的固定方法,2004),此方法在野外也取得较好的固沙效果,但是在藻种分离、培养过程周期较长,投入较大等不足。
发明内容
针对国内外本领域中普遍存在土壤藻类分离步骤复杂,培养过程容易污染,且耗费大量的人力物力的现状。本发明的目的在于提供了一种利用生物结皮中藻类进行混合培养,然后返接裸沙中形成生物结皮的方法,成功地避开了藻类的纯化分离问题,在人工藻结皮的构建中效果良好,在荒漠恢复中发挥重要作用。
本发明具体提供了一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法,其具体构建方法步骤如下:
(1)在沙漠选择充分发育的藻结皮,采集,风干后研磨,然后将土样收集;土样中所含藻类以具鞘微鞘藻、鞘丝藻、席藻、颤藻、念珠藻、单歧藻、伪枝藻丝状蓝藻为主体,其中具鞘微鞘藻是优势物种,还有以土生绿球藻、小球藻、色球藻等球形藻类常见物种。
(2)在培养盘中接入配制好的BG11液体培养基,将裸沙过0.2mm筛后按照每升培养基加入100g裸沙加入培养基中,加入裸沙将培养盘底铺满,置于培养架上;然后将上述步骤(1)的研磨结皮土样加入液体培养基进行培养,接种量是50g干土/升培养基,培养温度是室温,光照强度80μE·m-2·s-1,3周后将藻种和所固着的沙粒一并收集;经镜检,其培养的混合藻类中,优势物种是以微鞘藻、鞘丝藻、席藻为主的丝状藻占总生物量的80%;除此以外,还有颤藻、土生绿球藻、小球藻、衣藻、舟形藻和菱板藻等属的一些物种占总生物量的20%。
(3)将收集的藻种自然风干后,利用手动石磨低速研磨成藻粉,手动石磨可以保证低速研磨,有效地保护藻细胞的完整性。藻粉装入封口塑料袋,置于冰箱内-20℃保存。
(4)在土壤温度为20℃时即可接种,利用上述步骤(3)培养后收集的混合藻种在裸沙上接种,接种量是80g·m-2,在前15天内每天施加水分,施水量是3L·m-2,一个月内可初步形成藻结皮,3个月内形成稳定的藻结皮。
本发明中,每升BG11培养基组分如下:NaNO3 1.5g,,K2HPO4 0.04g,MgSO4·7H2O 0.07g,CaCl2·2H2O 0.036g,柠檬酸0.006g,柠檬酸铁胺0.006g,乙二胺四乙酸钠盐0.001g,碳酸钠0.02g,微量元素A5溶液1mL。其中,A5溶液组分:每升重蒸水中加入H3BO32 .86g,MnCl2·4H2O 1.86g,ZnSO4·7H2O 0.22g,Na2MoO4·2H2O 0.39g,CuSO4·5H2O 0.08g,Co(NO3)2·6H2O 0.05g。
通过实施本发明具体的技术内容,可以达到以下有益效果。
1.通过本发明提供构建人工藻结皮的方法可以迅速扩繁藻种,从野外收集的自然藻结皮,其平均生物量是0.016±0.005mg叶绿素a/干土,在BG11液体培养基中经室内培养2-3周后,藻种及沙粒经收集干燥后,其生物量是0.663±0.054mg叶绿素a/干土,生物量扩大了124倍之多。
2.通过本发明构建人工藻结皮的方法培养的混合藻种接种在裸沙上,经前期管理后,在3个月内能形成稳定的藻结皮,其形成藻结皮的藻类生物量、结皮厚度、抗压强度分别是5.77±0.87mg叶绿素a/干土,2.75±0.42mm,2.77±1.00N cm-2。与相同生物量接种的单藻种、混合藻种和野外自然藻结皮藻种相比较,其形成藻结皮的生物量、结皮厚度、抗压强度、土壤肥力和酶活性均无显著差异,这说明该技术的可行性和巨大的应用潜力。
附图说明
图1为是不同藻种处理形成藻结皮的生物量、结皮厚度和抗压强度图,图中,A,B,C,D是指不同的藻种处理,图中相同小写字母表示不同处理间差异不显著。
具体实施方式
下面,举实施例说明本发明,但是,本发明并不限于下述的实施例。
本发明中选用的所有原辅材料、试剂和仪器都为本领域熟知的,其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明以下实施方式的实施。
实施例一:利用混合藻类构建人工藻结皮
本发明具体提供了一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法,其具体构建方法步骤如下:
(1)接种材料的准备:在沙漠选择充分发育的藻结皮,采集,风干后研磨,然后将土样收集。土样中所含藻类以具鞘微鞘藻、鞘丝藻、席藻、颤藻、念珠藻、单歧藻、伪枝藻丝状蓝藻占优势,其中具鞘微鞘藻是优势物种,另外、土生绿球藻、小球藻、色球藻等球形藻类常见物种。
(2)培养:在培养盘中接入配制好的BG11液体培养基,将裸沙过0.2mm筛后按照每升培养基加入100g裸沙加入培养基中,加入裸沙将培养盘底铺满,置于培养架上;然后将上述步骤的研磨结皮土样加入液体培养基进行培养,接种量是50g干土/升培养基,培养温度是室温,光照强度80μE·m-2·s-1,3周后将藻种和所固着的沙粒一并收集;经镜检,其优势物种是以微鞘藻、鞘丝藻、席藻为主的丝状藻类占总生物量的80%,是形成生物结皮的关键物种;除此以外,还有颤藻、土生绿球藻、小球藻、衣藻、舟形藻和菱板藻等属的一些物种占总生物量的20%,它们保持了生物结皮中藻类的物种多样性。
(3)藻种处理与保存:收集的藻种自然风干后,利用手动石磨低速研磨成藻粉,手动石磨可以保证低速研磨,有效地保护藻细胞的完整性。藻粉装入封口塑料袋,置于冰箱内-20℃保存。
(4)接种:在土壤温度为20℃时即可接种,利用上述步骤(3)培养后收集的混合藻种在裸沙上接种,接种量是80g·m-2在前15内每天施加水分,施水量是3L·m-2,一个月内可初步形成藻结皮,3个月内形成稳定的藻结皮。
本发明中,每升BG11培养基组分如下:NaNO3 1.5g,,K2HPO4 0.04g,MgSO4·7H2O 0.07g,CaCl2·2H2O 0.036g,柠檬酸0.006g,柠檬酸铁胺0.006g,乙二胺四乙酸钠盐0.001g,CaCO3 0.02g,微量元素A5溶液1mL。其中,A5溶液组分:每升重蒸水中加入H3BO3 2.86g,MnCl2·4H2O 1.86g,ZnSO4·7H2O 0.22g,Na2MoO4·2H2O 0.39g,CuSO4·5H2O 0.08g,Co(NO3)2·6H2O 0.05g。
该发明利用BG11液体培养培养的混合藻种,最大限度地保持了自然藻结皮中的物种多样性,它们不仅有具鞘微鞘藻、隐鞘鞘丝藻、席藻、小颤藻、美丽颤藻、颤藻、眼点伪枝藻等丝状藻类,是形成生物结皮的关键物种;还具有不同类型的球形藻类,如色球藻、集球藻、土生绿球藻、小球藻和衣藻;另外,还发现一些硅藻,如舟形藻和菱板藻等。混合藻类中丰富的藻类物种多样性,包含了更多抗干扰的物种,接种形成的地表生物结皮系统更稳定,有利于抵抗干扰。
实施例二:本发明利用混合藻类构建人工藻结皮的效果试验
利用土壤中叶绿素a的含量表示藻类生物量,测定方法参见文献(Xie et al.,2007,Soil Biology&Biochemistry,567-572),根据接种量和土壤中藻类生物量含量,计算出接种的藻类总生物量,收获藻种生物量是藻种生物量含量与收获藻种土壤重量的乘积。
通过本发明提供构建人工藻结皮的方法可以迅速扩繁藻种,从野外收集的自然藻结皮,其平均生物量是0.016±0.005mg叶绿素a/克干土,在BG11液体培养基中经室内培养2-3周后,藻种及沙粒经收集干燥后,其生物量是0.663±0.054mg叶绿素a/克干土,生物量扩大了124倍之多。
实施例三:本发明利用混合藻类构建人工藻结皮的效果试验
本实验在大棚中设置4个2.5m×2.5m的样方,铺上厚度为10cm的流沙,然后分别采用不同的藻种处理:
A具鞘微鞘藻
B:几种生物结皮中常见的优势藻种按常规比例混合
C自然藻结皮经液体培养形成的混合藻种
D:自然藻结皮藻种。
藻种经研磨后,测定叶绿素含量,将其藻类生物量折合相等,用总生物量均为100mg叶绿素a的藻种进行接种,其他条件均相同。培养3个月后,采集土样,土样深度为0.5cm,自然干燥后测定叶绿素a含量。采用游标卡尺测定所形成藻结皮的厚度,抗压强度采用抗压力计(TE-3,南京,中国)进行测定,每个样方均5个重复。
数据统计方法:藻类生物量、结皮厚度和抗压强度不同样方处理之间的差异显著性采用单因素方差分析检验,软件采用SPSS(13.0)完成。
参见附图1,通过本发明构建人工藻结皮的方法培养的混合藻种接种在裸沙上,在3个月内能形成稳定的藻结皮,其形成藻结皮的藻类生物量、结皮厚度、抗压强度分别是5.77±0.87mg叶绿素a/干土,2.75±0.42mm,2.77±1.00Ncm-2。与相同生物量接种的具鞘微鞘藻、以常规比例组合的混合藻种和野外自然藻结皮藻种相比较,自然藻结皮经液体培养形成的混合藻种形成藻结皮的生物量、结皮厚度、抗压强度、土壤肥力和酶活性均无显著差异。该技术具有的明显优势是在最小限度破坏自然藻结皮的条件下快速扩繁藻种,并且最大限度地保持了自然藻结皮的藻类物种多样性,这充分说明该技术的可行性和巨大的应用潜力。
Claims (1)
1.一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法,其特征在于,其具体方法包括以下步骤:
(1)在沙漠选择充分发育的藻结皮,采集,风干后研磨,然后将土样收集;土样中所含藻类以具鞘微鞘藻、鞘丝藻、席藻、颤藻、念珠藻、单歧藻、伪枝藻丝状蓝藻为主体,其中具鞘微鞘藻是优势物种,还有以土生绿球藻、小球藻、色球藻等球形藻类常见物种;
(2)在培养盘中接入配制好的BG11液体培养基,将裸沙过0.2mm筛后按照每升培养基加入100g裸沙加入BG11液体培养基中,加入裸沙将培养盘底铺满,置于培养架上;然后将上述步骤(1)的研磨结皮土样加入液体培养基进行培养,接种量是50g干土/升培养基,培养温度是室温,光照强度80μE·m-2·s-1,3周后将藻种和所固着的沙粒一并收集;经镜检,其培养的混合藻类中,优势物种是以微鞘藻、鞘丝藻、席藻为主的丝状藻占总生物量的80%;除此以外,还有颤藻、土生绿球藻、小球藻、衣藻、舟形藻和菱板藻等属的一些物种占总生物量的20%;
(3)将收集的藻种自然风干后,利用手动石磨低速研磨成藻粉,藻粉装入封口塑料袋,置于冰箱内-20℃保存;
(4)在土壤温度为20℃时即可接种,利用上述步骤(3)培养后收集的混合藻种在裸沙上接种,接种量是80g·m-2,在前15天内每天施加水分,施水量是3L·m-2,一个月内可初步形成藻结皮,3个月内形成稳定的藻结皮;
(5)本发明中,每升BG11培养基组分如下为,NaNO3 1.5g,,K2HPO4 0.04g,MgSO4·7H2O 0.07g,CaCl2·2H2O 0.036g,柠檬酸0.006g,柠檬酸铁胺0.006g,乙二胺四乙酸钠盐0.001g,CaCO3 0.02g,微量元素A5溶液1mL;其中,A5溶液组分为每升重蒸水中加入H3BO3 2.86g,MnCl2·4H2O 1.86g,ZnSO4·7H2O 0.22g,Na2MoO4·2H2O 0.39g,CuSO4·5H2O 0.08g,Co(NO3)2·6H2O 0.05g。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210084964XA CN102613065B (zh) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | 一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210084964XA CN102613065B (zh) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | 一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102613065A true CN102613065A (zh) | 2012-08-01 |
CN102613065B CN102613065B (zh) | 2013-09-11 |
Family
ID=46553548
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210084964XA Expired - Fee Related CN102613065B (zh) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | 一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102613065B (zh) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105092495A (zh) * | 2015-08-05 | 2015-11-25 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 一种生物土壤结皮中藻类生物量的测定方法 |
CN108702886A (zh) * | 2018-05-25 | 2018-10-26 | 湖南农业大学 | 利用锰盐-生物结皮钝化稻田外源输入重金属的方法 |
CN111248077A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-06-09 | 中山大学 | 一种用于金属尾矿库修复的生态毯及其构建方法 |
CN113163722A (zh) * | 2019-03-29 | 2021-07-23 | 日本工营株式会社 | 促进自然侵入的施工方法及散布材料 |
CN113287478A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-08-24 | 西北农林科技大学 | 一种苔藓结皮的快速培育方法 |
WO2023010620A1 (zh) * | 2021-08-04 | 2023-02-09 | 江西省生态环境科学研究与规划院 | 一种促离子型稀土尾矿区生态恢复的生物结皮修复材料及应用、修复方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1563345A (zh) * | 2004-03-27 | 2005-01-12 | 中国科学院水生生物研究所 | 一种荒漠藻培养的方法 |
JP2006067955A (ja) * | 2004-09-06 | 2006-03-16 | Institute For Environmental Sciences | 海草育成方法および海草育成に用いる閉鎖水系 |
CN1833484A (zh) * | 2005-03-18 | 2006-09-20 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种菌藻联合固定荒漠流沙的方法 |
CN1843075A (zh) * | 2005-04-06 | 2006-10-11 | 中国科学院新疆生态与地理研究所 | 生物结皮的固沙技术 |
CN102204434A (zh) * | 2011-03-25 | 2011-10-05 | 北京市农林科学院 | 一种利用生物结皮防治水蚀荒漠化的方法 |
-
2012
- 2012-03-28 CN CN201210084964XA patent/CN102613065B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1563345A (zh) * | 2004-03-27 | 2005-01-12 | 中国科学院水生生物研究所 | 一种荒漠藻培养的方法 |
JP2006067955A (ja) * | 2004-09-06 | 2006-03-16 | Institute For Environmental Sciences | 海草育成方法および海草育成に用いる閉鎖水系 |
CN1833484A (zh) * | 2005-03-18 | 2006-09-20 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种菌藻联合固定荒漠流沙的方法 |
CN1843075A (zh) * | 2005-04-06 | 2006-10-11 | 中国科学院新疆生态与地理研究所 | 生物结皮的固沙技术 |
CN102204434A (zh) * | 2011-03-25 | 2011-10-05 | 北京市农林科学院 | 一种利用生物结皮防治水蚀荒漠化的方法 |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105092495A (zh) * | 2015-08-05 | 2015-11-25 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 一种生物土壤结皮中藻类生物量的测定方法 |
CN108702886A (zh) * | 2018-05-25 | 2018-10-26 | 湖南农业大学 | 利用锰盐-生物结皮钝化稻田外源输入重金属的方法 |
CN113163722A (zh) * | 2019-03-29 | 2021-07-23 | 日本工营株式会社 | 促进自然侵入的施工方法及散布材料 |
CN113163722B (zh) * | 2019-03-29 | 2023-04-18 | 日本工营株式会社 | 促进自然侵入的施工方法及散布材料 |
CN111248077A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-06-09 | 中山大学 | 一种用于金属尾矿库修复的生态毯及其构建方法 |
CN113287478A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-08-24 | 西北农林科技大学 | 一种苔藓结皮的快速培育方法 |
WO2023010620A1 (zh) * | 2021-08-04 | 2023-02-09 | 江西省生态环境科学研究与规划院 | 一种促离子型稀土尾矿区生态恢复的生物结皮修复材料及应用、修复方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102613065B (zh) | 2013-09-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Rossi et al. | Cyanobacterial inoculation (cyanobacterisation): perspectives for the development of a standardized multifunctional technology for soil fertilization and desertification reversal | |
Lan et al. | Artificially accelerating the reversal of desertification: cyanobacterial inoculation facilitates the succession of vegetation communities | |
CN102613065B (zh) | 一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法 | |
CN102613056B (zh) | 一种铁皮石斛的原生态栽培方法 | |
Duponnois et al. | Nurse shrubs increased the early growth of Cupressus seedlings by enhancing belowground mutualism and soil microbial activity | |
Hu et al. | Semi-arid regions and deserts | |
CN102612953B (zh) | 一种荒漠环境中人工藻结皮的构建模式 | |
KR101543134B1 (ko) | 지의류 지의체의 대량 생산 방법, 이에 의하여 생산된 지의체를 이용한 생태복원 방법 및 그 생태복원용 조성물 | |
CN105950502A (zh) | 一种复合内生细菌菌剂及其在重金属污染土壤植物修复中的应用 | |
CN103756930B (zh) | 一株花生根际生防菌及其制备方法和应用 | |
CN105475363B (zh) | 一种促进黄瓜生长的复合菌剂及其应用 | |
CN102172136A (zh) | 接种丛枝菌根真菌提高胡杨人工育苗成活率的方法 | |
CN104195056B (zh) | 一种二型伞霉及其在铁皮石斛促生、抗旱中的应用 | |
CN105961010B (zh) | 利用兰花根菌栽培公石松的方法 | |
CN101748088B (zh) | 一种根瘤固氮菌株系ry3菌株及其应用 | |
CN102511278A (zh) | 微生物肥沙生植物专用肥治沙技术 | |
CN104195054A (zh) | 一种二型伞霉及其在铁皮石斛促生与抗旱中的应用 | |
CN106069676A (zh) | 一种杜鹃花容器苗专用栽培介质及其培育方法 | |
CN103355149A (zh) | 一种闽楠育苗专用基质及其生产工艺 | |
CN103896662B (zh) | 一种适合苇蘑生长的液态培养基及其应用 | |
CN102199542B (zh) | 一种具鞘微鞘藻的纯化分离方法 | |
CN102181391A (zh) | 一种提高豆科树种抗干、热能力的t49ma菌株及其根瘤化种苗的培养方法 | |
CN109574720B (zh) | 一种促进杨树快速生长的方法 | |
CN101781630B (zh) | 一种根瘤固氮菌株系ry1菌株及其应用 | |
CN102268376B (zh) | 具鞘微鞘藻在室内生物结皮培养的管理模式及利用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130911 Termination date: 20160328 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |