CN102600412B - 中药组合物在制备预防和改善肺部pm2.5沉积的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备预防和改善肺部PM2.5沉积的药物中的应用，制成该中药组合物的有效成分的原料重量份组成为：枇杷叶5-8份，水半夏1-3份，桔梗0.4-3份，甘草0-2份，川贝母1-4份，动物胆汁0.1-1份，薄荷脑0.01-0.05份或薄荷1-5份，白前0-3份，百部0-3份。本发明所述的中药组合物可以显著改善肺部PM2.5沉积导致的肺功能下降和呼吸系统免疫损伤，是一种疗效确切、毒副作用小的中剂量中成药。

Description

中药组合物在制备预防和改善肺部PM2.5沉积的药物中的应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体地说，本发明涉及中药组合物在制备预防和改善肺部PM2.5沉积的药物中的应用。

背景技术

PM2.5(particular matter 2.5)是指空气动力学。≤2.5μm的细颗粒物，在大气颗粒物中占有相当大的比重，约为70％。国务院总理温家宝2012年2月29日主持召开国务院常务会议，同意发布新修订的《环境空气质量标准》，PM2.5指数成为我国一个重要的测控空气污染程度的指数，写入“国标”，纳入各省市强制监测范畴。

诸多医学专家在临床上发现，由细颗粒物造成的阴霾天气对人体健康的危害巨大。当颗粒物粒径≥10μm时，会被挡在人的鼻子外面；粒径2.5μm-10μm时，能够进入上呼吸道，但部分可通过痰液等排出体外，另外也会被鼻腔内部的绒毛阻挡，对人体健康危害相对较小；而粒径≤2.5μm的细颗粒物，直径相当于人类头发的1/10大小，不易被阻挡，被吸入人体后会直接进入支气管，造成肺部PM2.5沉积。由于细颗粒物表面吸附着大量的有毒有害物质，并可通过呼吸沉积在肺泡，最终造成呼吸系统结构和功能的损害，引发包括哮喘、急慢性支气管炎等疾病，临床上主要表现为胸闷、咳嗽、气喘、痰多等症状。而且PM2.5还可成为病毒和细菌的载体，为呼吸道传染病的传播推波助澜。PM2.5引发的肺部以及次生疾病已经严重影响到每个人的健康和生活质量。

明·赵献可《医贯·内经十二官·形影图说》曰：“喉下为肺，两叶白莹，谓之华盖，以覆诸脏，虚如蜂巢，下无透窍，故吸之则满，呼之则虚。”中医认为，肺脏是质地疏松的分叶状脏器。由于肺叶娇嫩，且与自然环境息息相通，易被外邪侵害又不耐寒热，故有“肺乃娇脏”之说。中医的病因学说包括外感六淫和内伤七情，PM2.5属中医“外邪”范畴，由口鼻而入客于肺络则消灼肺津，以至津气失濡，气阴两亏，痰浊阻肺，气机升降失常，实为外来之燥邪。现代病理学研究表明，PM2.5可能通过氧化、炎症刺激及对遗传物质的作用对机体造成损伤，如产生细胞毒性，肺功能障碍等恶性后果。然而，PM2.5的病因和治病机理尚缺乏突破性的进展。

针对预防PM2.5的方法，目前主要集中在改善和治理环境，如增加绿化、减少工业和汽车污染排放等，或者采取减少外出等消极应对方法。目前，尚未出现预防和改善PM2.5致肺部沉积的药物。

本发明的申请人已于2008年申请了一种中药组合物的相关专利，专利申请名称：一种呼吸系疾病治疗剂(专利号：200810026801.X)。其主要公开该中药组合物的治疗急性气管、支气管炎以及风热感冒引发的燥热伤肺证等呼吸道疾病。鉴于各种病的发病机理和治疗策略的不同，对于能否改善PM2.5致肺部沉积仍需要技术人员进行创造性的工作。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是提供了的新应用。

解决上述技术问题的技术方案如下：

一种中药组合物在制备预防和改善肺部PM2.5沉积的药物中的应用，制成该中药组合物的有效成分的原料重量份组成为：枇杷叶5-8份，水半夏1-3份，桔梗0.4-3份，甘草0-2份，川贝母1-4份，动物胆汁0.1-1份，薄荷脑0.01-0.05份或薄荷1-5份，白前0-3份，百部0-3份。

在其中一个实施例中，所述动物胆汁为蛇胆汁。

所述中药组合物制备的药物是膏剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、栓剂、滴丸剂、口服液或注射剂。

本发明是在研究现代中医改善肺部PM2.5沉积的理论基础上，在临床医生观察本产品涉及PM2.5肺部沉积引发的疾病有确切疗效的情况下，进行了大量的药效学试验，应用现代科学技术手段研究其作用机理而发明的。为了达到本发明的目的，现将本发明的思路、发明过程和方案做如下说明：

从中医理论研究方向分析，PM2.5属中医病因学说中的“燥邪”范畴，又肺为娇脏，喜清肃滋润而恶燥，肺主呼吸，开窍于鼻，直接与自然界的大气相通，外合皮毛，燥邪伤人，多从口鼻入，故燥邪最易伤肺。燥邪犯肺，使肺津受损，清肃失职，从而出现干咳少痰、喘息胸痹等症状。针对肺部PM2.5沉积，中医药以清肺润燥为治疗的基本原则。

本发明研究发现，所述的蛇胆川贝枇杷膏可以显著改善肺部PM2.5沉积导致的肺功能下降，呼吸系统免疫损伤和氧化应激损伤，其作用机理在于全身性的调节作用和局部多靶位直接作用的综合。主要表现在：(1)本发明物可以显著提高用力肺活量(FVC)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)、用力中期呼气流速(FEF25-75)、最大呼气中期流速(MMF)、用力最大呼气流速(PEF)等肺功能，并且改善动脉气血。(2)本发明物能显著逆转细胞毒效应引起的乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、白蛋白(ALB)升高；显著逆转氧化应激效应引起的一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)升高，超氧化物歧化酶(SOD)降低；并通过降低细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)起到免疫调节作用。因此，蛇胆川贝枇杷膏是一种改善肺部PM2.5沉积引发肺功能下降，呼吸系统免疫受损，氧化应激损伤等症状的疗效确切、毒副作用小的中剂量中成药

具体实施方式

应用传统和先进的制造方法，分别制成膏剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、栓剂、滴丸剂、口服液、注射剂等。以下实施例中所用到的本发明物为：蛇胆川贝枇杷膏，其有效成分的原料重量份组成为：枇杷叶5-8份，水半夏1-3份，桔梗0.4-3份，甘草0-2份，川贝母1-4份，动物胆汁0.1-1份，薄荷脑0.01-0.05份或薄荷1-5份，白前0-3份，百部0-3份，所述动物胆汁为蛇胆汁。按照现有方法制备成膏剂。

实施例1：改善肺部PM2.5沉积致肺功能下降

在广州工业区和交通要道，用大流量采样器聚四氟乙烯滤膜采样PM2.5连续2周，将载有颗粒物的滤膜浸入去离子蒸馏水中，超声振荡3次，每次40min，洗脱颗粒物。振荡液经纱布过滤，滤液4℃、12000r/min离心30min，收集下层悬液冷冻真空干燥，低温冰箱保存备用。用生理盐水配成所需浓度后超声振荡15min混合，4℃保存，临用前振荡使颗粒物充分混匀。

选用SPF级健康Wistar雄性大鼠，60只，体重220-250g，随机分为5组，每组12只，分别为空白对照组、模型组、低剂量组(本发明物1.5g/kg/ml，生理盐水配制)、中剂量组(本发明物3g/kg/ml，生理盐水配制)、高剂量组(本发明物6g/kg/ml，生理盐水配制)。空白对照组灌服生理盐水19d；模型组灌服同体积生理盐水12d后，采用气管滴注法染毒PM2.5混悬液8mg/kg/ml，连续染毒7d，每天染毒2h；低剂量组、中剂量组和高剂量组以不同剂量分别连续给药12d，每天1次，再同模型组方法造模。禁食12h后检测相关指标。

将大鼠用0.7％的戊巴比妥钠(5ml/kg)腹腔麻醉后，仰卧位置于小动物肺功能测定仪的密闭体描箱内，分离气管，在第三第四气管环中间正中切开倒T型切口。插入连接有三通开关的气管插管，气管插管一端与动物呼吸机连接。用实验小动物肺功能测定仪测定肺功能的各项指标，包括用力肺活量(FVC)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)、用力中期呼气流速(FEF25-75)、最大呼气中期流速(MMF)、用力最大呼气流速(PEF)。肺功能测毕后，迅速打开腹腔，自腹主动脉抽取0.5ml动脉血迅速进行血气分析。测定酸碱度(pH)、氧分压(Pa_O2)、二氧化碳分压(Pa_CO2)、氧饱和度(SaO₂)。实验数据采用均数±标准差

表示，以SPSS13.0统计软件分析，组间采用t检验进行比较。

实验结果显示：模型组大鼠FVC、FEV0.3、FEF25-75、MMF、PEF较空白组均显著降低(P＜0.01)，提示PM2.5导致气道阻力增加，气流受阻，肺通气功能障碍。本发明物给药中剂量和高剂量组大鼠FVC、FEV0.3、FEF25-75、MMF、PEF较模型组显著升高(P＜0.05或P＜0.01)，提示本发明物在一定剂量作用下，具有改善肺部PM2.5沉积致肺功能障碍。模型组大鼠pH、Pa_O2、SaO₂较空白组显著降低(P＜0.05)，Pa_CO2显著升高(P＜0.01)，本发明物给药中剂量和高剂量组大鼠pH、Pa_O2、SaO₂较模型组显著升高(P＜0.05或P＜0.01)，Pa_CO2显著降低，提示本发明物在一定剂量下，可以改善肺部PM2.5沉积致动脉血气。实现结果见表1，2。

表1本发明物对PM2.5致肺功能的影响(n＝12，

)

注：与空白对照组比较*P＜0.05**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05

表2本发明物对PM2.5致肺动脉血气的影响(n＝12，)

注：与空白对照组比较*P＜0.05**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05

实施例2：改善肺部PM2.5沉积致呼吸系统免疫损伤和氧化损伤

在广州工业区和交通要道，用大流量采样器聚四氟乙烯滤膜采样PM2.5连续2周，将载有颗粒物的滤膜浸入去离子蒸馏水中，超声振荡3次，每次40min，洗脱颗粒物。振荡液经纱布过滤，滤液4℃、12000r/min离心30min，收集下层悬液冷冻真空干燥，低温冰箱保存备用。用生理盐水配成所需浓度后超声振荡15min混合，4℃保存，临用前振荡使颗粒物充分混匀。

选用雄性昆明小鼠，50只，体重20-22g，随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、低剂量组(本发明物1.5g/kg/ml，生理盐水配制)、中剂量组(本发明物3g/kg/ml，生理盐水配制)、高剂量组(本发明物6g/kg/ml，生理盐水配制)。空白对照组灌服生理盐水2ml/kg；模型组采用气管滴注法染毒PM2.5混悬液8mg/kg/ml，气管一次滴注量为2ml/kg，染毒24h；低剂量组、中剂量组和高剂量组以不同剂量分别连续给药14d，每天1次，同时照模型组方法染毒。染毒结束后处死小鼠，暴露气管，插入带有聚乙烯管的肺灌洗针头，结扎固定。缓慢注入0.5ml生理盐水，然后缓慢抽出灌洗液，边操作边轻轻按摩胸部以增加灌洗液的洗出率。每只小鼠灌洗8次，提取的灌洗液立即4℃保存。

肺灌洗液分为两部分，一部分经4℃、3000r/min离心15min后，下层细胞沉淀加入细胞裂解液(50mmol/L Tris-HCl，PH8.0；150mmol/LNaCl；0.02％NaN₃；100μg/mL PMSF；1μg/mL aprotinin；1％Triton X100)，4℃下放置30min，再于4℃、1200r/min，离心30min，取上清液用于一氧化氮合酶(NOS)和超氧化物歧化酶(SOD)的测定；另一部分上清液在4℃、10000r/min离心20min，吸取上清液用于乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、白蛋白(ALB)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量测定和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)的活性测定。实验数据采用均数±标准差

表示，以SPSS13.0统计软件分析，组间采用t检验进行比较。

实验结果表明：模型组大鼠灌洗液中细胞毒效应指LDH、AKP、ACP、ALB较空白组均显著升高(P＜0.01)；氧化应激指标NO、MDA、NOS较空白组显著升高，超氧化物歧化酶(SOD)较空白组均显著降低(P＜0.01)；免疫指标TNF-α、I L-1较空白对照组均显著升高(P＜0.01)。本发明物中剂量和高剂量组较模型组可以显著降低LDH、AKP、ACP、ALB、NO、MDA、NOS、TNF-α和IL-1，并且较模型组显著升高SOD含量(P＜0.05或P＜0.01)。提示本发明物在一定剂量下，具有改善肺部PM2.5沉积致肺组织免疫损伤和氧化应激损伤的作用。实验结果见表3、表4、表5

表3本发明物对PM2.5致细胞毒效应的影响(n＝10，

)

注：与空白对照组比较**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05；##P＜0.01

表格4本发明物对PM2.5致氧化应激指标的影响(n＝10，)

注：与空白对照组比较**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05；##P＜0.01

表格5本发明物对PM2.5致免疫指标的影响(n＝10，)

注：与空白对照组比较**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05；##P＜0.01

以上实验充分证实了，蛇胆川贝枇杷膏具有改善肺部PM2.5沉积引起的肺功能下降，呼吸系统免疫功能受损和氧化应激损伤的作用。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (3)

1.一种中药组合物在制备预防和改善肺部PM2.5沉积的药物中的应用，制成该中药组合物的有效成分的原料重量份组成为：枇杷叶5-8份，水半夏1-3份，桔梗0.4-3份，甘草0-2份，川贝母1-4份，动物胆汁0.1-1份，薄荷脑0.01-0.05份或薄荷1-5份，白前0-3份，百部0-3份。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述动物胆汁为蛇胆汁。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物制备的药物是膏剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、栓剂、滴丸剂、口服液或注射剂。