CN102596980A - 源自脂磷壁酸的糖脂及含有该糖脂的组合物 - Google Patents
源自脂磷壁酸的糖脂及含有该糖脂的组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102596980A CN102596980A CN2010800486522A CN201080048652A CN102596980A CN 102596980 A CN102596980 A CN 102596980A CN 2010800486522 A CN2010800486522 A CN 2010800486522A CN 201080048652 A CN201080048652 A CN 201080048652A CN 102596980 A CN102596980 A CN 102596980A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- glycolipid
- acyl chain
- plta
- lactobacillus
- pharmaceutical composition
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 title claims abstract description 194
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 239000002253 acid Substances 0.000 title abstract description 12
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 42
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 191
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 86
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 50
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 38
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 38
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 35
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 34
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 28
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 27
- -1 sodium glycerophosphate ester Chemical class 0.000 claims description 27
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 claims description 26
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 26
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 21
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 19
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 19
- 229960002901 sodium glycerophosphate Drugs 0.000 claims description 19
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 18
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 18
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 18
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 16
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 13
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 claims description 13
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 claims description 13
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 12
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims description 11
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims description 11
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 11
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 10
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 claims description 10
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 claims description 10
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 9
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 9
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 9
- 206010048768 Dermatosis Diseases 0.000 claims description 8
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 claims description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 8
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 8
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 8
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 8
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 7
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims description 7
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 7
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 7
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 7
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 7
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 6
- 241000186606 Lactobacillus gasseri Species 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims description 5
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 5
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 4
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 claims description 4
- 241001468157 Lactobacillus johnsonii Species 0.000 claims description 4
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 claims description 4
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 claims description 4
- 150000007524 organic acids Chemical group 0.000 claims description 4
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 claims description 4
- MEIRRNXMZYDVDW-MQQKCMAXSA-N (2E,4E)-2,4-hexadien-1-ol Chemical compound C\C=C\C=C\CO MEIRRNXMZYDVDW-MQQKCMAXSA-N 0.000 claims description 3
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 claims description 3
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 claims description 3
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 claims description 3
- 208000030939 Chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy Diseases 0.000 claims description 3
- 241001550206 Colla Species 0.000 claims description 3
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 claims description 3
- 206010053177 Epidermolysis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010015218 Erythema multiforme Diseases 0.000 claims description 3
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 claims description 3
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 claims description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims description 3
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 208000004732 Systemic Vasculitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 claims description 3
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 claims description 3
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000027207 Whipple disease Diseases 0.000 claims description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 3
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 claims description 3
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 claims description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 201000005795 chronic inflammatory demyelinating polyneuritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061811 demyelinating polyneuropathy Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 3
- 201000009580 eosinophilic pneumonia Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000007192 granulomatous hepatitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037903 inflammatory enteropathy Diseases 0.000 claims description 3
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 claims description 3
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 claims description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 claims description 3
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 3
- 201000009732 pulmonary eosinophilia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000009146 rhinoscleroma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 claims description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 claims description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 claims description 2
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 2
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 claims description 2
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 2
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 claims 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 26
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 26
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 15
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 abstract description 8
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 abstract description 8
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 73
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 62
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 62
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 59
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 43
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 description 26
- 108090000765 processed proteins & peptides Chemical class 0.000 description 25
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 24
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 24
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 22
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 21
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 20
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 19
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000001741 anti-phlogistic effect Effects 0.000 description 18
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 18
- 101001125026 Homo sapiens Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2 Proteins 0.000 description 15
- 102100029441 Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2 Human genes 0.000 description 15
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 11
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 11
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 10
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 10
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 10
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 10
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 10
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 9
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 7
- 241000607762 Shigella flexneri Species 0.000 description 7
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 6
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 6
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 6
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 6
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 6
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 6
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 5
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 5
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 5
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 5
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 5
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 5
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 4
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100024193 Mitogen-activated protein kinase 1 Human genes 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 4
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 4
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 238000003929 heteronuclear multiple quantum coherence Methods 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 4
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- SZHOJFHSIKHZHA-UHFFFAOYSA-N tridecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC(O)=O SZHOJFHSIKHZHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 3
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 3
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 3
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 102100039337 NF-kappa-B inhibitor alpha Human genes 0.000 description 3
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 3
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N methanediyl Chemical compound [CH2] HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 3
- 229940083608 sodium hydroxide Drugs 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005084 2D-nuclear magnetic resonance Methods 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 2
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 2
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 2
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 2
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 2
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 description 2
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 description 2
- 241000186612 Lactobacillus sakei Species 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 2
- 108010052419 NF-KappaB Inhibitor alpha Proteins 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N alpha-D-mannose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 2
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 description 2
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 235000021185 dessert Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 2
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 2
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 2
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 description 2
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium;hydroxide;hydrate Chemical class [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 2
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000002512 suppressor factor Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000002525 ultrasonication Methods 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 235000019160 vitamin B3 Nutrition 0.000 description 2
- 239000011708 vitamin B3 Substances 0.000 description 2
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 2
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 description 1
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N (R)-alpha-Tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXWGSYGVWLIZOX-UHFFFAOYSA-N 1H-imidazole trimethylsilane Chemical class N1C=NC=C1.C[SiH](C)C AXWGSYGVWLIZOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YNVZDODIHZTHOZ-UHFFFAOYSA-K 2-hydroxypropanoate;iron(3+) Chemical compound [Fe+3].CC(O)C([O-])=O.CC(O)C([O-])=O.CC(O)C([O-])=O YNVZDODIHZTHOZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 3-octoxypropane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCCOCC(O)CO GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WIGIZIANZCJQQY-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-3-methyl-N-[2-[4-[[[(4-methylcyclohexyl)amino]-oxomethyl]sulfamoyl]phenyl]ethyl]-5-oxo-2H-pyrrole-1-carboxamide Chemical compound O=C1C(CC)=C(C)CN1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)NC2CCC(C)CC2)C=C1 WIGIZIANZCJQQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 206010004542 Bezoar Diseases 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- DCERHCFNWRGHLK-UHFFFAOYSA-N C[Si](C)C Chemical compound C[Si](C)C DCERHCFNWRGHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100454807 Caenorhabditis elegans lgg-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000002804 Calluna vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000007575 Calluna vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 1
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100027152 Dihydrolipoyllysine-residue acetyltransferase component of pyruvate dehydrogenase complex, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 238000004252 FT/ICR mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 241001284615 Frangula californica Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 101001122360 Homo sapiens Dihydrolipoyllysine-residue acetyltransferase component of pyruvate dehydrogenase complex, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 102000008379 I-kappa B Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010021699 I-kappa B Proteins Proteins 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102100039065 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005395 NF-kappa B p50 Subunit Human genes 0.000 description 1
- 108010006401 NF-kappa B p50 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 101710083073 NF-kappa-B inhibitor alpha Proteins 0.000 description 1
- 238000012565 NMR experiment Methods 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N O6-alpha-D-Galactopyranosyl-D-galactose Natural products OCC1OC(OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O)C(O)C(O)C1O AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPJNLYLHSKCJGK-UHFFFAOYSA-L P(=O)([O-])([O-])O.[Na+].[Cl+] Chemical compound P(=O)([O-])([O-])O.[Na+].[Cl+] OPJNLYLHSKCJGK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 206010033733 Papule Diseases 0.000 description 1
- 241000237509 Patinopecten sp. Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282405 Pongo abelii Species 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000242743 Renilla reniformis Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 235000004433 Simmondsia californica Nutrition 0.000 description 1
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 101150076937 TLR2 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 102000005747 Transcription Factor RelA Human genes 0.000 description 1
- 108010031154 Transcription Factor RelA Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102100035100 Transcription factor p65 Human genes 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710165474 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Proteins 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- NJUISRMVIKYYCN-UHFFFAOYSA-N acetic acid;chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.CC(O)=O.ClC(Cl)Cl NJUISRMVIKYYCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 159000000013 aluminium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910000329 aluminium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000013527 bean curd Nutrition 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000031709 bromination Effects 0.000 description 1
- 238000005893 bromination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940045110 chitosan Drugs 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 1
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- SEGLCEQVOFDUPX-UHFFFAOYSA-N di-(2-ethylhexyl)phosphoric acid Chemical compound CCCCC(CC)COP(O)(=O)OCC(CC)CCCC SEGLCEQVOFDUPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940061607 dibasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000012581 double quantum filtered COSY Methods 0.000 description 1
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonylcarbamate Chemical compound CCOC(=O)NC(=O)OCC PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 150000002190 fatty acyls Chemical group 0.000 description 1
- 150000002194 fatty esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013332 fish product Nutrition 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N gentiobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- 239000008359 glycogelatin Substances 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 238000003919 heteronuclear multiple bond coherence Methods 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012204 lemonade/lime carbonate Nutrition 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide Inorganic materials [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940040692 lithium hydroxide monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000014380 magnesium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001708 magnesium carbonate Drugs 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002160 maltose Drugs 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- QPJSUIGXIBEQAC-UHFFFAOYSA-N n-(2,4-dichloro-5-propan-2-yloxyphenyl)acetamide Chemical compound CC(C)OC1=CC(NC(C)=O)=C(Cl)C=C1Cl QPJSUIGXIBEQAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008486 nectar Nutrition 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000467 phytic acid Substances 0.000 description 1
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Substances [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001508 potassium citrate Substances 0.000 description 1
- QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K potassium citrate (anhydrous) Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940093916 potassium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000013606 potato chips Nutrition 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960000342 retinol acetate Drugs 0.000 description 1
- QGNJRVVDBSJHIZ-QHLGVNSISA-N retinyl acetate Chemical compound CC(=O)OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C QGNJRVVDBSJHIZ-QHLGVNSISA-N 0.000 description 1
- 235000019173 retinyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011770 retinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229940092258 rosemary extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020748 rosemary extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000001233 rosmarinus officinalis l. extract Substances 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 235000020637 scallop Nutrition 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 1
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 1
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 229940084106 spermaceti Drugs 0.000 description 1
- 239000012177 spermaceti Substances 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Natural products CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 235000015870 tripotassium citrate Nutrition 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960004418 trolamine Drugs 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
- C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
- C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
- C07H13/06—Fatty acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/04—Antipruritics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H11/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by inorganic acids; Metal salts thereof
- C07H11/04—Phosphates; Phosphites; Polyphosphates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Obesity (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
Abstract
本发明涉及一种源自脂磷壁酸的糖脂,及包含所述源自脂磷壁酸的糖脂的药品、食品、化妆品组合物及疫苗佐剂。根据本发明的源自脂磷壁酸的糖脂,通过抑制炎性细胞因子的生成具有抗炎效果。因此包含所述源自脂磷壁酸的糖脂的药品、食品和化妆品组合物可以用于预防和治疗炎症性疾病,并且所述源自脂磷壁酸的糖脂也可以用作疫苗佐剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种源自脂磷壁酸的糖脂及含有该糖脂的药物组合物、食品组合物、化妆品组合物及疫苗佐剂。
背景技术
脂磷壁酸(LTA)为革兰氏阳性菌的细胞壁的成分之一。脂磷壁酸通常分为两种结构:包含葡萄糖或D-丙氨酸取代基的聚甘油磷酸酯、及包含糖单元和脂肪酸链的糖脂。众所周知,根据聚甘油磷酸酯中的D-丙氨酸的含量可以调控诸如TNF-α的炎性细胞因子的表达。(Morath,S.,A.Geyer,等2001,Structure-function relationship of cytokine induction by LTA from Staphylococcusaureus.J.Exp.Med.193:393-397)。
尤其是人们已经知道分离自金黄色葡萄球菌的LTA(aLTA)可诱发革兰氏阳性菌败血症,aLTA可被Toll样受体(TLR2,例如巨噬细胞的免疫细胞)和细胞膜相关的CD14识别,从而诱导增强炎性细胞因子表达。炎性细胞因子表达受NF-κB和MAP激酶活性的影响。
但是,分离自乳酸菌(乳杆菌)的LTA具有与aLTA不同的免疫活性(de Vos,W.J.2005.Lipoteichoic acid in lactobacilli:D-alanine makes the differences.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102(31):10763-4)。即,aLTA诱导免疫细胞引起的过度炎症反应,而分离自乳杆菌的LTA抑制免疫细胞的炎症反应。LTA免疫活性的这种差异被认为是两种LTA的结构的差异所引起的。因此,从阐明LTA的功能以调控免疫活性的方面分析LTA的结构是非常重要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗炎效果的糖脂、及包含所述糖脂的药物组合物、食品组合物或化妆品组合物及疫苗佐剂。
为了解决上述问题,本发明提供一种源自脂磷壁酸的糖脂,及包含该糖脂的药物组合物、食品组合物、化妆品组合物及疫苗佐剂。
本发明的源自脂磷壁酸的糖脂通过抑制炎性细胞因子的生成,从而具有抗炎效果。因此包含源自脂磷壁酸的糖脂的药物组合物、食品组合物和化妆品组合物可以用于预防和治疗炎症性疾病,并且源自脂磷壁酸的糖脂也可以用作疫苗佐剂。
附图说明
图1为源自植物乳杆菌的LTA的1H、13C及2D-NMR波谱示意图;
图2为源自植物乳杆菌的LTA的COSY波谱示意图;
图3为源自植物乳杆菌的LTA的HMQC波谱示意图(A:与烯烃中的碳原子相连的α-亚甲基和亚甲基,B:α-D-半乳糖和α-D-葡萄糖的异头质子);
图4为LTA水解物的GC/MS分析结果示意图;
图5为LTA糖脂的MALDI-TOF MS波谱示意图(A:金黄色葡萄球菌,B:植物乳杆菌);
图6为(A)aLTA和(B)pLTA的全糖脂及O-乙酰化糖脂的MALDI-TOF MS波谱示意图;
图7为pLTA糖脂的结构示意图;
图8示出pLTA糖脂的质量分析表格;
图9为(A)aLTA糖脂和(B)pLTA糖脂的LTQ-Orbitrap FTMS波谱示意图;
图10示出LTA糖脂的阴离子CID波谱示意图(A:二己糖基二酰甘油B:三己糖基二酰甘油);
图11示出aLTA糖脂的质量分析表格;
图12示出aLTA的脱酰化糖脂的MALDI-TOF MS波谱示意图(a:完整的糖脂b:氢氧化钠处理后的糖脂c:氢氧化钙处理后的糖脂);
图13示出对pLTA、dLTA、rLTA及sLTA的糖脂部分进行的MALDI-TOF分析结果示意图;
图14示出了完整的aLTA和pLTA、及源自其的糖脂及聚甘油磷酸酯诱导TNF-α表达能力的实验结果;
图15示出了完整的aLTA、去丙氨酸aLTA及去酰基aLTA的抑制TNF-α表达能力的实验结果;
图16示出了完整pLTA、去丙氨酸pLTA及去酰基pLTA的抑制TNF-α表达能力的实验结果;
图17示出了利用源自pLTA的糖脂进行预处理的细胞中减小TNF-α表达的示意图;
图18为从不同的LTA分离出的糖脂的抑制TNF-α表达的效果示意图;
图19示出根据pLTA处理的福氏志贺菌肽聚糖诱导抑制TNF-α及IL-1β表达的效果示意图(A:TNF-α的表达测量,B:IL-1β的表达测量,C:多粘菌素B处理后的TNF-α的表达测量);
图20示出福氏志贺菌肽聚糖诱导的炎症反应中根据p-LTA处理的(A)NOD2mRNA表达量的变化,(B)NOD2蛋白质的表达量的变化,及(C)NF-κB的活性变化的示意图;
图21示出福氏志贺菌肽聚糖诱导的炎症反应中根据p-LTA处理的TNF-α的表达变化的测量结果示意图(A:利用控制siRNA转化的THP-1细胞,B:利用TLR2siRNA转化的THP-1细胞C:从正常小鼠分离的BMM及D:从TLR2基因剔除小鼠分离的BMM);
图22示出根据pLTA处理的MAP激酶和NF-κB的活性变化示意图(A:磷-ERK及磷-SAPK/JNK活性B:IκB-α降解活性C:依据免疫荧光染色法测量的NF-κB活性);
图23为腹腔注射PBS或pLTA后诱发败血症的小鼠(A)生存率及(B)血液内TNF-α的含量的示意图;
图24为根据pLTA处理的(A)DNCB诱导特应性老鼠的皮肤损伤及(B)皮肤组织内IL-4的分布示意图;
图25为经rLTA预处理的细胞中TNF-α表达量减少的示意图;
图26示出各种LTA的抑制TNF-α表达的效果的示意图;
图27为根据特定信号抑制剂处理的各种LTA的抑制TNF-α表达的效果的示意图。
具体实施方式
源自乳酸菌的脂磷壁酸诱导抗炎活性来抑制炎性细胞因子的表达。本发明人通过本发明发现源自作为乳酸菌的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的脂磷壁酸(pLTA)与诱导炎症反应的aLTA具有不同的糖脂结构。尤其发现不仅pLTA本身,去除聚甘油磷酸酯部分的pLTA的糖脂部分也具有抑制炎性细胞因子表达的抗炎效果。即,基于pLTA的糖脂结构,制造与其类似的各种糖脂变体,从而使具有抗炎效果的各种糖脂变体可以有效地灵活应用。
本发明提供一种糖脂,在该糖脂的α键连接的二己糖或三己糖的C1、C3、C4及C6位置中的至少一个位置上结合2至6个饱和或不饱和的C10至C30酰基链。
此时,上述己糖可以为葡萄糖、半乳糖、甘露糖或果糖,优选为葡萄糖或半乳糖。
而且所述糖脂优选包含至少一种不饱和的酰基链。
根据本发明的一具体实施例,所述糖脂可以是具有下列化学式I结构的糖脂。
【化学式I】
在上述化学式I中,R1至R4可以分别独立地为羟基、 其中,R’可以分别独立地为饱和或不饱和的C10至C30酰基链,具体可为饱和或不饱和的C14至C26酰基链、饱和或不饱和的C14至C24酰基链、饱和或不饱和的C14至C22酰基链、饱和或不饱和的C14至C20酰基链、饱和或不饱和的C14至C18酰基链、饱和或不饱和的C16至C20酰基链、或饱和或不饱和的C16至C18酰基链。n可以为0或1,Cm可以为C4至C30的烷基,具体可为C6至C26的烷基或C10至C24的烷基,所述糖脂内酰基链的总数为2至6个,具体可为2至4个或2至3个。
更具体地,所述化学式I中R1可以为其中,R’可以分别独立地表示饱和或不饱和的C10至C30酰基链,具体可为饱和或不饱和的C14至C26酰基链、饱和或不饱和的C14至C24酰基链、饱和或不饱和的C14至C22酰基链、饱和或不饱和的C14至C20酰基链、饱和或不饱和的C14至C18酰基链、饱和或不饱和的C16至C20酰基链、或饱和或不饱和的C16至C18酰基链。R2至R4可以为羟基,n可以为1,并且所述糖脂可以包含至少一个具有1至14个双键的酰基链,上述1至14个双键具体可为:1至10个双键、1至8个双键、1至6个双键、1至4个双键、1至3个双键或1至2个双键。
具体地,所述化学式I中R1可以为此时R2、R3和R4中的其中一个可以为其它的可以为羟基。其中,R’可以分别独立地表示饱和或不饱和的C10至C30酰基链,具体可为饱和或不饱和的C14至C26酰基链、饱和或不饱和的C14至C24酰基链、饱和或不饱和的C14至C22酰基链、饱和或不饱和的C14至C20酰基链、饱和或不饱和的C14至C18酰基链、饱和或不饱和的C16至C20酰基链、或饱和或不饱和的C16至C18酰基链。n可以为1,并且所述糖脂可以包含至少一个具有1至14个双键的酰基链,上述1至14个双键具体可为:1至10个双键、1至8个双键、1至6个双键、1至4个双键、1至3个双键或1至2个双键。
例如,化学式I的所述糖脂可以为具有下列化学式I-1或化学式I-2结构的糖脂。
【化学式I-1】
【化学式I-2】
此时,在化学式I-1或化学式I-2中所标示出的双键的位置可以不同。
根据本发明的另一具体实施例,所述糖脂可以为源自乳酸菌的糖脂。所述乳酸菌可以为乳酸杆菌(Lactobacillus)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、链球菌(Streptococcus)或乳球菌(Lactococcus),但并不仅限于此。乳酸杆菌可以为诸如植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonn)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)或干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei),双歧杆菌可以为诸如两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifido)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)或动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)。链球菌例如可以为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)。乳球菌例如可以为乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)。
脂磷壁酸(LTA)中,已知结构最为明确的是源自金黄色葡萄球菌(S.aureus)的LTA(aLTA)。源自病原微生物金黄色葡萄球菌的aLTA通过诱导免疫刺激活性,提高炎性细胞因子的表达。如下列化学式III所示,已知aLTA的骨架为β键[β1→6连接]连接两个葡萄糖的龙胆二糖,并在葡萄糖C6位置上通过1,3磷酸二酯键连接有聚甘油磷酸酯链。而且,平均具有15个碳原子的两个饱和脂肪酸链(C15:0)由酯键连接到葡萄糖的C1上。
【化学式III】
而源自乳酸菌的pLTA诱导抑制炎性细胞因子表达的抗炎活性,在本发明中揭示的pLTA糖脂的结构的特征在于:由α键连接三个己糖作为骨架,由1,3磷酸二酯键连接的聚甘油磷酸酯链被连接至末端己糖的C6位置,该末端己糖在与脂肪酸酰基链连接的己糖的相反侧。pLTA的糖脂的特征还在于,在第一己糖的C1或C6位置上由酯键连接2个或3个脂肪酸酰基链。具体地,源自pLTA的糖脂可以具有化学式I-1或化学式I-2的结构,但是,在上述化学式中双键的位置可以不同。化学式I-1表示第I组pLTA的糖脂,其中,具有18个碳原子的饱和脂肪酸酰基链(C18:0)和具有18个碳原子的不饱和脂肪酸酰基链(C18:2)连接到己糖的C1位置。化学式I-2表示第II组pLTA的糖脂,所述第II组pLTA的糖脂,在化学式I-1的糖脂的己糖C6位置还包含具有16个碳原子的饱和脂肪酸链(C16:0)。结合的己糖、脂肪酸链的数量及其结合位置、碳原子、及是否具有不饱和脂肪酸在TLR2识别脂磷壁酸方面起着重要的作用。因此,LTA的这种结构特性为诱导抗炎活性的重要因素。
已知现有技术中,根据脂磷壁酸的聚甘油磷酸酯中的D-丙氨酸含量,调控例如TNF-α炎性细胞因子的表达。而本发明与此不同,根据下述实施例,可以看出,在pLTA中,相比聚甘油磷酸酯的D-丙氨酸,包含脂肪酸酰基链的糖脂结构在调控炎性细胞因子的表达方面起着更重要的作用。本发明人发现:源自pLTA的糖脂自身即可通过抑制炎性细胞因子TNF-α表达,从而显示抗炎效果。除了源自pLTA的糖脂之外,还证实了,具有与pLTA相似的结构的源自鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)的rLTA及源自德氏乳杆菌(L.delbrueckii)的dLTA中也同样,仅通过糖脂部分就可抑制炎性细胞因子TNF-α表达,从而显示抗炎效果。
此外,本发明还提供一种糖脂,在该糖脂中,在与酰基链连接的己糖的相反侧的末端己糖的C6位置上还连接有聚甘油磷酸酯。
根据本发明的一具体实施例,所述糖脂可以为具有下列化学式II的结构的糖脂。
【化学式II】
在所述化学式II中,R1至R4可以分别独立地表示羟基、 在这种情况下,R’可以分别独立地表示饱和或不饱和的C10至C30酰基链,具体可为:饱和或不饱和的C14至C26酰基链、饱和或不饱和的C14至C24酰基链、饱和或不饱和的C14至C22酰基链、饱和或不饱和的C14至C20酰基链、饱和或不饱和的C14至C18酰基链、饱和或不饱和的C16至C20酰基链、或饱和或不饱和的C16至C18酰基链。R”可以分别独立地表示N-乙酰氨基葡萄糖、D-丙氨酸或羟基。N可以为0或1,Cm可以表示C4至C30的烷基,具体可为C6至C26的烷基或C10至C24的烷基,并且l可以在0至80具体为0至60、0至40或0至20的范围内。所述糖脂的酰基链的总数可以为2至6个,具体可为2至4个或2至3个的范围内。
具体地,在所述化学式II中,R1可以为在这种情况下,R’可以分别独立地表示饱和或不饱和的C10至C30酰基链,具体可为饱和或不饱和的C14至C26酰基链、饱和或不饱和的C14至C24酰基链、饱和或不饱和的C14至C22酰基链、饱和或不饱和的C14至C20酰基链、饱和或不饱和的C14至C18酰基链、饱和或不饱和的C16至C20酰基链、或饱和或不饱和的C16至C18酰基链。R”可以分别独立地表示N-乙酰氨基葡萄糖、D-丙氨酸或羟基。R2至R4可以为羟基。n为1。l可以在0至80范围内,具体为0至60、0至40或0至20的范围内。并且所述糖脂可以包含至少一个具有1至14个双键的酰基链,具体为1至10个双键、1至8个双键、1至6个双键、1至4个双键、1至3个双键或1至2个双键。
更具体地,在所述化学式II中,R1可以为R2、R3和R4中的其中一个为其它的可以为羟基。在这种情况下,R’可以分别独立地表示饱和或不饱和的C10至C30酰基链,具体可为饱和或不饱和的C14至C26酰基链、饱和或不饱和的C14至C24酰基链、饱和或不饱和的C14至C22酰基链、饱和或不饱和的C14至C20酰基链、饱和或不饱和的C14至C18酰基链、饱和或不饱和的C16至C20酰基链、或饱和或不饱和的C16至C18酰基链。R”可以分别独立地表示N-乙酰氨基葡萄糖、D-丙氨酸或羟基。n为1。l可以在0至80范围内,具体可为0至60、0至40或0至20的范围内。并且所述糖脂可以包括具有1至14个双键,具体可为1至10个双键、1至8个双键、1至6个双键、1至4个双键、1至3个双键或1至2个双键的至少一个酰基链。
例如,所述化学式II可以为下列化学式II-1或化学式II-2。
【化学式II-1】
【化学式II-2】
在所述化学式中,R”可以分别独立地表示N-乙酰氨基葡萄糖、D-丙氨酸或羟基。并且1可以在0至80范围内,具体可为0至60、0至40或0至20的范围内。
而且,化学式II-1或化学式II-2中的双键的位置可以不同。
根据本发明的一具体实施例,还连接有聚甘油磷酸酯的糖脂可以为源自乳酸菌的脂磷壁酸,所述乳酸菌可以为乳酸杆菌(Lactobacillus)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、链球菌(Streptococcus)或乳球菌(Lactococcus),但并不局限于此。乳酸杆菌例如可以为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonn)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)或干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),双歧杆菌例如可以为两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifido)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、婴儿双歧杆菌(bifidobacterium infantis)或动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis),链球菌例如可以为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),乳球菌例如可以为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)。
本发明还提供一种包含所述糖脂的药物组合物。
如下列实施例可知,根据本发明的糖脂,通过抑制由内毒素LPS刺激引起的NF-kB的活性及IkB-α的降解,并且抑制TLR2的表达,从而具有抑制炎性细胞因子TNF-α及IL-8的表达的抗炎效果。
含有本发明糖脂的药物组合物,根据常规方法,可以以粉剂、粒剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、乳液,糖浆或气溶胶的形式制成口服制剂、外用制剂、栓剂或无菌注射溶液。上述药物组合物还可以包含至少一种合适的添加剂,上述添加剂选自广泛用于制备药物组合物的抗生素、载体、赋形剂和稀释剂。
具体地,所述载体、赋形剂及稀释剂可以使用乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯橡胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、甲基羟苯酸酯、丙基羟苯酸酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。当对药物组合物进行制剂时,可以使用背景技术中广泛使用的稀释剂或赋形剂进行配置,例如,填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂或表面活性剂。用于口服的固形制剂包括片剂、丸剂、粉剂、粒剂、胶囊等。这种固形制剂可以通过将至少一种赋形剂(例如,淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等)与所述提取物混合形成。除了简单地添加的赋形剂以外,还可以使用润滑剂,例如,硬脂酸镁和滑石粉。配置用于口服的液体制剂是可使用悬浮液、内用液体、乳剂、糖浆等,并且除了常用的简单稀释剂(例如,水、液体石蜡)之外,可以包含各种赋形剂,例如,润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂等。制备用于非口服外投药的制剂时可使用无菌水溶液、非水溶剂、悬浮液、乳状液、冻干制剂或栓剂。非水溶剂或悬浮液可以使用植物油(例如,丙二醇、聚乙二醇或橄榄油)或注射酯(油酸乙酯)。栓剂基质可以使用半合成脂肪酸酯、聚乙二醇、吐温61、可可油脂、劳林黄油、甘油明胶等。
根据本发明的药物组合物中,相对于100重量份的药物组合物,可以包含0.01至99.9重量份、0.1至90重量份、1至80重量份、或10至80重量份的糖脂,但本发明并不受限于此。糖脂的含量可以根据患者的状态、疾病的种类及进展程度进行改变。
本发明的糖脂具有抗炎活性,因此可以用于预防及治疗炎症性疾病或免疫相关疾病。因此,本发明提供一种药物组合物,该药物组合物包含所述糖脂,用于预防及治疗炎症性疾病或免疫相关疾病;本发明提供一种糖脂的用途,该糖脂用于制造预防及治疗炎症性疾病或免疫相关疾病的药物;及本发明提供一种预防及治疗炎症性疾病的方法,该方法包括将治疗有效量的糖脂给药受治疗者。
具体地,所述炎症性疾病或免疫相关疾病可以包括败血病、动脉硬化、菌血症、全身炎症反应综合症、多器官功能障碍综合症、癌症、骨质疏松、牙周炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、骨关节炎、幼年型慢性关节炎、强直性脊柱炎、系统性硬结、肌肉特发性炎症性疾病、干燥综合症syndrome)、系统性血管炎、结节病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性血小板减少症、甲状腺炎、糖尿病、免疫介导性肾脏疾病、中枢神经系统或周围神经系统的脱髓鞘疾病、特发性脱髓鞘性多发性神经病、格林-巴利综合症(Guillain-Barre syndrome)、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、肝胆疾病、传染性或自身免疫性慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、肉芽肿性肝炎、硬化性胆管炎、发炎性肠病(infiammatory bowel disease,IBD)、溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)、克罗恩病(Crohn’s disease)、肠易激综合症(irritable bowelsyndrome)、麸胶肠易激综合症(gluten)、惠普尔病(Whipple’s disease)、自身免疫或免疫介导的皮肤疾病,大疱性皮肤疾病、多形性红斑、接触性皮炎、牛皮癣、过敏性疾病、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎、食物过敏、荨麻疹、肺部免疫疾病、嗜酸细胞性肺炎、特发性肺纤维化、过敏性肺炎、移植相关疾病、移植排斥或移植物抗宿主病。
本发明的一具体实施例,糖脂可以通过口服给药、直肠给药或静脉内注射给药、肌内注射给药、皮下注射给药、子宫内膜注射给药或侧脑室注射给药的方式对患者给药。
本发明的糖脂的适宜剂量可以根据患者的状态及体重、疾病的种类及程度、药物的类型、服用的路径及周期进行改变,本领域的技术人员可进行适当选择。但是,每天的给药量为0.01至10,000mg/kg,具体为0.1至10,000mg/kg,更具体地,优选0.1至1,000mg/kg的剂量。可以一天给药一次,或分成数次给药,本发明的范围并不受限于此。
本发明中,术语“患者”包括人类、猩猩、黑猩猩、小鼠、大鼠、狗、牛、鸡、猪、山羊、羊等,但并不受限于此。
本发明还提供一种包含所述糖脂的食品组合物。所述食品组合物可用于制备功能性食品和常规食品,所述功能性食品具有预防和治疗炎症性疾病和免疫相关疾病,所述炎症性疾病和免疫相关疾病选自败血病、动脉硬化、菌血症、全身炎症反应综合症、多器官功能障碍综合症、癌症、骨质疏松、牙周炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、骨关节炎、幼年型慢性关节炎、强直性脊柱炎、系统性硬结、肌肉特发性炎症性疾病、干燥综合症syndrome)、系统性血管炎、结节病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性血小板减少症、甲状腺炎、糖尿病、免疫介导性肾脏疾病、中枢神经系统或周围神经系统的脱髓鞘疾病、特发性脱髓鞘性多发性神经病、格林-巴利综合症(Guillain-Barresyndrome)、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、肝胆疾病、传染性或自身免疫性慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、肉芽肿性肝炎、硬化性胆管炎、发炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)、溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)、克罗恩病(Crohn’s disease)、肠易激综合症(irritable bowel syndrome)、麸胶肠易激综合症、惠普尔病(Whipple’s disease)、自身免疫或免疫介导的皮肤疾病,大疱性皮肤疾病、多形性红斑、接触性皮炎、牛皮癣、过敏性疾病、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎、食物过敏、荨麻疹、肺部免疫疾病、嗜酸细胞性肺炎、特发性肺纤维化、过敏性肺炎、移植相关疾病、移植排斥或移植物抗宿主病。
在本发明的一具体实施例中,所述食品组合物可以进一步包含选自有机酸、磷酸盐、抗氧化剂、乳糖、酪蛋白、糊精、葡萄糖、糖和山梨醇中的至少一种添加剂,但并不受限于此。所述有机酸可以为柠檬酸、富马酸、己二酸、乳酸或苹果酸,但并不仅限于此。所述磷酸盐可以为磷酸钠、磷酸钾、焦磷酸或聚磷酸盐,但并不收受限于此。抗氧化剂可以为天然抗氧化剂,例如,茶多酚、儿茶素、α-生育酚、迷迭香提取物、甘草提取物、壳聚糖、鞣酸或植酸,但并不受限于此。
在本发明中,相对于100重量份的食品组合物,可以包含0.01至99.9重量份,具体为1至90重量份、或30至80重量份的糖脂。
此外,在本发明的一具体实施例中,食品组合物的制剂也可以为固体、粉剂、粒剂、片剂、胶囊或液体形式,但并不受限于此。
包含本发明的糖脂的食品组合物可以用于制备食品,例如,点心、糖类、冰淇淋产品、乳制品、肉制品、鱼制品、豆腐或果冻、食用油和油脂、面类食品、茶、饮料、特殊营养食品、保健品食品、调味品、冰、人参制品、泡菜腌制食品、干贝类、水果、蔬菜、水果或蔬菜干制品、切碎的产品、果汁、蔬菜汁、混合果汁、薯片、薄片食物、加工的禽畜食品、加工的海产食品、加工乳制品、发酵乳食品、豆类食品、谷类食品、微生物发酵食品、烤甜点、佐料、加工肉制品、酸性饮料、甘草或草药,但并不受限于此。食品的类型包括固体、粉剂、粒剂、片剂、胶囊剂、液体或饮料形式,但并不受限于此。
在本发明的另一具体实施例中,当包含所述糖脂的组合物用于制备保健食品时,所述组合物可为整个食品重量的0.01至15%,当用于制备饮料时,可以为整个饮料重量的0.02至10%或0.3至1%。
除了所述糖脂之外,本发明的食品组合物可以包含各种营养素、维生素、矿物质(电解质)、合成调味剂或天然调味剂等调味剂、着色剂、增味剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸及其盐、褐藻酸及其盐、有机酸、保护胶体增稠剂、pH值调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精,用于碳酸饮料的碳化剂,但并不受限于此。而且,根据本发明的食品组合物可以包含果肉,该果肉用于制造天然果汁、果汁饮料、蔬菜饮料。这种添加剂的含量相对于100重量份本发明的组合物,在0至约20重量份的范围内选择,但并不受限于此。
本发明还提供一种包含所述糖脂的化妆品组合物。
在本发明中,相对于100重量份的化妆品组合物,可以包含0.01至99.9重量份、具体为1至90重量份、或30至80重量份的所述糖脂。
使用本发明的化妆品组合物的化妆品制剂例如可以包括,柔肤乳液、营养皮肤乳液、按摩霜、营养霜、面膜、胶体、精华素、唇膏、底妆、粉底、乳液、软膏、凝胶、霜、清洁霜、洁面剂、肥皂、洗发水、护发素、焗油膏、美容液,但并不受限于此。这种化妆品可以包含常规成分,例如,水性维生素、油性维生素、高分子肽、高分子多糖、鞘脂,并且本领域的技术人员可以利用广泛共知的技术容易地制造。
与所述成分一起,所述化妆品可以进一步包含选自添加剂,例如,维生素、氨基酸、蛋白质、表面活性剂、乳化剂、香料、色素、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、紫外线阻断剂、pH值调节剂和螯合剂中的至少一种添加剂。
本发明还提供一种由所述糖脂组成或包含所述糖脂的疫苗佐剂。
本发明的糖脂可用于各种目的。一种较佳的用途为作为包含免疫原性多核苷酸、多肽、抗体、T-细胞或抗原呈递细胞(APC)的药用组合物的免疫兴奋剂或佐剂使用所述糖脂。
所述佐剂指的是底物,所述底物通过诱导更快地形成疫苗抗体,增强对抗原的免疫反应。本发明的糖脂不仅影响炎性细胞因子的表达,而且影响例如粘附分子的表达等免疫作用,从而可以增强对抗原的免疫反应。而且,因为其自身没有免疫原性(immunogenicity),可以用作疫苗佐剂。
本发明的糖脂可以刺激的一种免疫反应为Th1或Th2类型,因此,本发明的佐剂可以设计成主要诱导Th1或Th2类免疫反应。高浓度的Th1类细胞因子(例如,TNF-α,IFN-γ,IL-2及IL-12)有助于诱导对服用抗原的细胞介导的免疫反应。另一方面,高浓度的Th2类细胞因子(例如,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10及TNE-B)有助于诱导体液免疫反应。在适应包含本发明的糖脂的疫苗后,患者体内可以保持包括Th1或Th2类反应的免疫反应。当反应主要为Th1类反应时,Th1类型细胞因子的浓度增加到大于Th2类型细胞因子的浓度。可以采用标准检测法容易地测量这种细胞因子的浓度被。为了调查细胞因子家族,可以参照文献【Mosmann and Coffman,Ann.Rev.Immunol.7:145-173,1989】。含有CpG的寡核苷酸(CpG二核苷酸未被甲基化)通常用于诱导Th1免疫反应,对这种寡核苷酸人们是耳熟能详,例如WO96/02555中就有记载。
用于主要诱导Th1或Th2型反应的佐剂优选可以包含与铝盐相结合的糖脂。
为了帮助理解本发明,以下参考实施例对本发明进行详细地描述。下述实施例仅用于示例性目的,并不意图限制本发明的范围。具有通常知识的本发明所属领域的普通技术人员应该明白,本发明的实施例是为了更完整地描述本发明。
<实验例>
下列实验例在本发明的各个实施例中均可适用。
LTA及源自LTA的糖脂和聚甘油磷酸酯的分离和提纯
参考已有的报告(Morath,S.,A.Geyer,et al.2001.Structure-functionrelationship of cytokine induction by lipoteichoic acid from Staphylococcus aureus.J.Exp.Med.193(3):393-7.)方法进行LTA的分离。将100g的细胞(湿重)悬浮于400ml的0.1M的柠檬酸钠缓冲液(pH 4.7)后,通过进行超声波处理,裂解细胞。添加等量正丁醇,混合30分钟后,通过离心分离从而分离出含LTA的水层。添加15%的正丙醇和0.1M柠檬酸钠缓冲液(pH4.7),分离LTA切片后,用半透膜透析。此后,采用辛基琼脂糖凝胶交换柱CL-4B(2.5cmx10cm)进行疏水作用色谱分析。用含15%的正丙醇和0.1M柠檬酸钠缓冲液(pH4.7)的200ml缓冲液清洗所述色谱柱后,用300ml的洗脱缓冲液(35%的正丙醇,0.1M柠檬酸钠,pH4.7)收集LTA。在添加平衡缓冲液(30%的正丙醇,0.1M醋酸盐缓冲液,pH4.7)后,将含LTA的切片充填到所述交换柱中,从而再次进行DEAE-琼脂糖凝胶离子交换色谱(1.5cmx10cm)分析。用300ml的含系列NaCl(0至1M)的平衡缓冲液收集LTA。
将30mg的完整LTA溶解在500ml、98%(v/v)的醋酸水溶液中,进行30分钟超声波处理,在100℃下加热3小时,从而从LTA分离糖脂。在真空条件下去除溶剂后,用氯仿/甲醇/水(1∶1∶0.9,v/v/v)分离糖脂。在有机层中提取糖脂,在溶剂层中提取聚甘油磷酸酯被萃取到。
核磁共振(NMR)光谱
使用装备有X、Y、Z-屏蔽梯度三重共振探针或Z-屏蔽梯度三重共振冷冻探针的Avance-600MHz和Avance-800MHz高分辨率核磁共振分光镜进行NMR实验。将10mg的LTA溶解于0.5ml的2H2O溶液中。2H2O用作参考信号(4.75ppm,1H)。从相关谱(COSY)、双量子滤波相关谱(DQF-COSY)、总相关谱(TOCSY)、旋转框奥佛豪塞增强光谱(rotating frame Overhauser enhancementspectroscopyROSEY)的波谱中获得同核分配。13C分配是基于异核多量子相关(HMQC)和异核多键相关(HMBC)实验。在300K中记录所有的波谱,并且使用程序nmrPipe28处理NMR数据及使用Sparky可视化NMR数据。
糖脂的弱碱性水解(Mild alkaline hydrolysis)
为了确定糖脂中的弱碱性不稳定的成分,在56℃下将50μg的试样溶解于200μl、0.5M的氢氧化钠中,放置60分钟。然后,用3N盐酸酸化后与正己烷(hexane)混合。去除含脂肪酸的上清液,并且干燥下层溶液从而去除盐份。用氯仿/甲醇/水(8∶4∶3,v/v)溶液层析残留物,通过离心分离使溶液分层并去除上清液。再干燥下层溶液从而去除盐。然后,将残留物溶解在氯仿/甲醇(1∶1,v/v)溶液后,用于MALDI-TOF MS分析。
外切糖苷酶(Exoglycosidase)处理
将糖脂悬浮在含0.1%牛黄脱氧胆酸钠的50μl的50mM碳酸氢铵缓冲液后,添加α-葡萄糖苷酶(酿酒酵母)、β-葡萄糖苷酶(杏仁)、α-半乳糖苷酶(绿色咖啡豆)或β-半乳糖苷酶(大肠杆菌),在37℃时处理48小时。此后,添加1.35ml氯仿∶甲醇(1∶1,v/v)和100ul的蒸馏水,进行层分离,并且干燥下层溶液进行连锁分析(linkage analysis)。
MALDI-TOF MS
将0.5μl的糖脂溶液添加到基质溶液(2,5-二羟基苯甲酸溶液、30mg/ml 70%的乙腈/30%的水[v/v],0.5μl)后,进行MALDI探针分析。提纯后的糖脂可直接通过MALDI-TOF MS分析或经O-乙酰化后再进行分析。在80℃时利用200μl的吡啶∶乙酸酐(1∶1,v/v)O-乙酰化净化后的糖脂2小时。此后,去除溶剂,并且通过MALDI-TOF MS分析糖脂。
利用氢氟酸部分水解LTA
为了实现部分或完全水解聚(甘油磷酸盐)主链,将1mg LTA添加到100μl48%的氢氟酸(HF)后,在4℃时处理5至48小时。此后,利用饱和氢氧化锂(LiOH)中和产生的混合物后,通过离心分离(12,000x g,10分钟)去除沉淀物。收集上清液用于TLC和ESI-LIT MS分析。
气相色谱/质谱(GC/MS)
为了从LTA水解产物中分析单糖组分,进行GC/MS分析。将标准参考化合物(Authentic reference compound)(半乳糖、葡萄糖、甘露糖或N-乙酰氨基葡萄糖)或LTA水解产物试样溶解于吡啶后,常温放置48小时。添加50μl的三甲基硅烷咪唑后,在67℃时加热30分钟。将试样溶解于200μl的氯仿后,在Finnigan MAT系统(气相色谱模型GCQ,HP19091J-433)中使用。将所述试样上样到非极性毛细管柱(5%苯基甲基硅氧烷毛细管30mx250μm i.d.,0.25μm的薄膜厚度,HP-5)。在100℃时将所述毛细管柱柱放置2分钟后,以4℃/秒的速度加热至220℃,并且保持5分钟。此后,以15℃/秒的速度将所述柱加热至300℃并且保持5分钟。在具有85℃的离子试样温度、65eV的电子能量和300mA的发射电流的正离子化学电离模式中使用质谱仪。甲烷作为分析气体(analyte gas),其压力维持在0.5托。
通过将0.1μg的十三酸添加到200μg的LTA试样中,并且利用4N KOH(100℃、4hours)水解LTA试样来确定糖脂的脂肪酸成分。调整水解产物的pH值,使其接近1.0后,从氯仿中提取游离脂肪酸(3次,1ml),用氮气干燥。将干燥的脂肪酸溶解于乙腈(30μl)中后,利用10μl 35%的溴化无氟苄基(在乙腈中)和10μl的二异丙基乙胺处理。在40℃时将溶液加热20分钟后,利用氮气干燥。利用N,O-双(三甲基硅基)-三氟乙酰胺将生成物无氟苄基酯处理一整夜。将保持在85℃的毛细管柱柱以7℃/秒的速度加热至265℃后,保持10分钟。利用检测基峰离子的选择性的离子检测方法,确定羟基脂肪酸的量,并且通过十三酸的内标法避免了提取物损失。
薄层色谱法(TLC)
在预涂层硅胶HPTLC板上,利用氯仿-甲醇-醋酸-水(100∶20∶12∶5,v/v/v/v)进行糖脂分析。用5%的硫酸处理糖脂并且在120℃下加热,从而检测TLC方法中的糖脂。
为了分析磷酸甘油,使用n-丁醇-吡啶-水(15∶30∶20,v/v/v)进行TLC分析。为了用TLC方法检测丙氨酸和糖取代基,分别使用0.5%的茚三酮(在正丁醇中)和5%的硫酸(在甲醇中)。此后,在120℃下加热磷酸甘油,以使其可视化。从TLC板收集可见斑点后,使用甲醇从硅胶粉提取试样,用于MS分析。
ESL-LIT MS
利用连接到LTQ-Orbitrap混合线性离子阱的质谱仪Ultimate 3000nano LC,进行液相色谱-串联质谱法。注入5μl试样后,利用Ultimate 3000nano LC上样到Zorbax300扩展的-C18柱(3.5μm,0.3mm i.dx150长度)中。流动相A为含0.1%甲酸的100%的水,流动相B为含0.1%甲酸的100%的乙腈。使用C18柱进行相分离。使用电喷雾离子化(ESI)技术分析从LC系统分离的试样。在高压(5kV磷酸甘油及4.5kV糖脂)下,通过金属毛细管,以3μl/秒的速度将试样溶液注入离子源。毛细管被保持在180℃,并且氮气被用作鞘气(以8个任意单位的流速)。分析仪在负离子模式下运行。离子入口毛细管电压和管镜头偏移电压分别为-45V和-206V。35~37%的归一化碰撞能量和2.5至3Da的隔离宽度用于MSn碎片。最大的离子收集时间设置成50毫秒,并且使用3个微型扫描计算平均值。
实施例1:LTA及LTA糖脂的结构分析
使用1H、13C及2D-NMR波谱探明pLTA的整个结构
根据报告,在aLTA的1H-NMR波谱中,α-D-N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)的乙酰基共振信号的化学位移(δH)为2.1。但是,在pLTA的1H-NMR波谱中,化学位移(δH)为2.1处的峰形与aLTA不同。相比aLTA,pLTA的共振形状分布的范围更广泛,并且没有观测到自由乙酰基(δH1.9)发出的信号(图1)。使用COSY波谱分析的结果,证实δH2.01与(γ-ω)-亚甲基(-CH2-;δH1.28)和烯烃质子(-CH=CH-;δH5.38)相关联(图2)。从HMQC波谱的分析结果,也证实δH2.01中的质子是从亚甲基(CH2;δc27)分配的(图3A)。基于COSY和HMQC波谱的分析,可以看出,化学位移(δH)2.01是来自附着到脂肪酸中的烯碳(-CH2-CH2-CH=CH-CH2-CH2-)的亚甲基的信号。因此,还可以看出,在pLTA的磷酸甘油骨架上,没有GlcNAc取代基。
δH2.01(CH2-CH=CH)和δH5.38(CH=CH)的信号的相互关系还说明存在不饱和脂肪酸(图2)。而且,通过1H及13C NMR波谱中的两个异头质子信号[δH5.08(d,J=Hz)和5.17(d,J=3Hz)]及两个异头碳信号(δc96.5和97.7ppm),确定糖脂中存在两个糖单位。通过LTA水解产物的GC/MS分析进行糖的测量(图4),并且证实源自p-LTA的糖脂是例如葡萄糖和半乳糖等糖取代形成的。最后,确定具有两个糖单位的异头物的J值指示D-吡喃糖的异头中心位于α方向,δH5.08和5.17的信号分别产生于与在δc96.5和97.7中共振的异头碳相应的α-D-葡萄糖和α-D-半乳糖的异头质子(图3B)。综上所述,源自p-LTA糖脂的己糖以α-键连接。
pLTA糖脂的结构分析
采用MALDI-TOF MS方法分析LTA的糖脂试样。
pLTA的糖脂的质谱分为两组(图5B)。第I组的离子信号在1,103m/z至1,227m/z的范围内,并且第II组的离子信号在1,368m/z至1,464m/z的范围内。已确定属于第I组的糖脂为三己糖基-二酰基-甘油(Hex3-DAG),并且在C16位置具有C22酰基链。已确定属于第II组的糖脂为还具有己糖残基或酰基链。采用对糖脂进行O-乙酰化的方式确定还有己糖残基(图6A)。
对羟基残基的乙酰化使质量单位增加42。第I组pLTA的糖脂显示增加420质量单位(10个羟基残基),并可确认为三己糖基(图6B)。而且,第II组中的大部分糖脂增加378质量单位(9个羟基残留物)。根据O-乙酰化分析,可以看出第II组中的糖脂在己糖残基中还含酰基链(图7)。
此外,波谱显示了12质量单位的差异,这表明发生了烯碳的增减,从而可以判断糖脂具有不饱和的脂肪酸链。上述内容的可能性可通过COSYNMR确定(图2)。图8示出预测的pLTA糖脂分子结构。接着,为了进行串联MS分析,利用ESI-FT MS(负离子模式)分析糖脂(图9),从ESI-FT MS结果中选择代表性的峰值并进行分析,从而确定了酰基链分布(图10A和B)。
从分析结果可知:如图9所示,pLTA糖脂的结构具有三个己糖骨架,为含不饱和脂肪酸的三己糖基-二酰基甘油(第I组)和三己糖基-三酰基甘油(第II组),并且酰基链平均含18个碳原子。
aLTA糖脂的结构分析
通过糖脂中质量与电荷(m/z)比率可确定:aLTA为含C15至C21的链(图5A和图11)的脂肪酸。在aLTA的糖脂中,几乎所有的m/z信号都增加了294质量单位。这表明7个羟基发生了乙酰化,这相当于两个己糖。因此,可判断aLTA的糖脂具有二己糖基。而且,通过弱碱性水解,可以确认糖脂中存在脂肪酸酰基链(图12)。
dLTA、rLTA及sLTA的糖脂的结构分析
为了分析dLTA、rLTA及sLTA的糖脂部分的结构,进行MALDI-TOF分析。dLTA、rLTA及sLTA分别表示源自德氏乳杆菌(L.delbreukii)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)及清酒乳杆菌(L.sakei)的LTA。
如图13所示,MALDI-TOF分析结果显示,与pLTA一样,源自dLTA的糖脂被分成分别含三己糖基-二酰基甘油和三己糖基-三酰基甘油的两组。此外,还观察到在源自dLTA的糖脂中存在具有四个酰基链的第三组,并且各酰基链平均具有18个碳原子。通过观察可知,源自rLTA衍生糖脂具有比pLTA更低分子量的两组。因为一个糖的分子量为160Da,观察到源自dLTA的糖脂含二己糖基-二酰基甘油和二己糖基-三酰基甘油,它们均含两个己糖骨架,而不是三个己糖骨架,并且各酰基链平均含15个碳原子。观察到源自sLTA的糖脂也具有二己糖基-二酰基甘油和二己糖基-三酰基甘油,各酰基链平均具有18个碳原子,酰基链长度比rLTA更长。
实施例2:源自LTA的糖脂的抗炎效果
源自LTA的糖脂的TNF-α表达抑制效果
用完整LTA、和分离自完整LTA的源自LTA的糖脂和源自LTA的聚甘油磷酸酯分别对THP-1细胞处理4小时。然后通过ELISA方法,从培养液测量TNF-α的表达量。
如图14所示,完整的aLTA诱导TNF-α的高表达,但是,完整的pLTA不能诱导TNF-α的表达。而且,源自aLTA的糖脂和聚甘油磷酸酯,虽然比完整的aLTA的表达量少,但可以相当程度地诱导TNF-α表达,相反,源自pLTA的糖脂及聚甘油磷酸酯几乎不能诱导TNF-α表达。由此可知,与aLTA不同,不仅完整的pLTA,源自pLTA的糖脂也不能诱导TNF-α表达。
根据LTA改性的抗炎效果实验
为了使aLTA及pLTA发生改性(modification)并测量其活性,人们进行了实验。首先,在Tris-HCl(pH 8.5)中对LTA进行隔夜培养,以去除聚甘油磷酸酯的D-丙氨酸。而且,用0.1N氢氧化钠处理LTA,以去除糖脂的脂肪酸酰基链。此后,中和产生的培养液,并且利用辛基色谱提纯改性后的LTA,将其冻干后定量放置,用于实验。用100μg/ml的去除D-丙氨酸的LTA(de-acyl)和去除脂肪酸酰基链的LTA(de-alanine)预处理THP-1细胞18小时后,利用0.5μg/ml的LPS再处理4小时。然后,通过ELISA方法,从培养液测量TNF-α的表达量。
图15示出使用aLTA的实验结果。在aLTA的情况下,在利用完整的aLTA预处理的THP-1细胞中,虽然多少能看出LPS的TNF-α表达抑制效果,但是,去除了D-丙氨酸和脂肪酸酰基链的aLTAs(去除丙氨酸、去除酰基)却几乎没有表现出这种抑制效果。
图16示出利用pLTA进行的采用相同方法进行的实验结果。与aLTA不同,完整的pLTA几乎彻底抑制了由LPS诱导的TNF-α表达,并且去除聚甘油磷酸酯中的丙氨酸的pLTA(de-alanine)也表现相同效果。不过,去除了糖脂中的酰基链的pLTA(de-acyl)没有显示抑制TNF-α表达的效果。
这种结果显示aLTA和pLTA具有不同的生物学特性。尤其是,在pLTA的TNF-α表达抑制效果方面,比起聚甘油磷酸酯内的D-丙氨酸,糖脂的酰基链起着更重要的作用。
源自pLTA的糖脂的抗炎效果
为了了解从pLTA分离出的糖脂的抗炎效果,利用各种浓度的糖脂预处理THP-1细胞20分钟后,利用浓度为10μg/ml的flexPGN再处理4小时。此后,通过ELISA方法,从培养液中测量TNF-α表达量。
如图17所示,当仅用10μg/ml的flexPGN处理THP-1细胞时,高度诱导TNF-α的表达。然而,当利用糖脂预处理THP-1细胞时,可以观察出根据预处理的浓度TNF-α表达减小。相比相同浓度的完整的pLTA,这种表达抑制效果多少会差一些,但是,仅pLTA的糖脂部分也充分显示具有抑制TNF-α表达的效果。
其它源自LTA的糖脂的抗炎效果
通过实施例中记载的方法,利用LPS(来自E.coli 111:B4的LPS)和从各LTA(aLTA、rLTA、pLTA、dLTA或sLTA)分离的浓度为0.1μg/ml的糖脂,处理THP-1细胞(5×105细胞/ml)6小时。此后,通过ELSIA方法,从培养液中测量TNF-α的表达量。
图18示出从不同的LTA分离的糖脂的TNF-α表达抑制效果。可以看出,源自aLTA及sLTA衍生的糖脂几乎没有抑制TNF-α表达的效果,但是,源自rLTA、pLTA及dLTA的糖脂则非常有效地抑制TNF-α表达。
实施例3:针对pLTA抗炎效果的体外实验
依据pLTA的弗氏志贺菌肽聚糖(PGN)诱导的TNF-α和IL-1β表达抑制效果实验
使用含经过热处理的10%无活性FBS、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的RPMI 1640培养基,在37℃和5%CO2的条件下,培养人体单核细胞THP-1细胞。为了进行THP-1细胞的细胞因子诱导实验,将密度为4×105细胞/孔的THP-1细胞转移到96孔板后,在37℃和5%CO2的条件下,培养24小时以稳定细胞。用各种浓度(0至100μg/ml)的pLTA预处理THP-1细胞24小时后,利用浓度为10μg/ml的肽聚糖再处理4小时。
通过离心分离从细胞培养液收集细胞上清液后,使用通常的三明治ELISA方法,进行TNF-α及IL-1B的表达量测量。分别使用从R&D系统(R&D system)买入的抗TNF-α单克隆鼠lgG1(克隆#28410)/生物素化的抗人TNF-α特定山羊lgG和抗人IL-1β单克隆鼠IgG1(克隆2805)/生物素化的抗人IL-1β特定山羊IgG,进行ELISA实验。使用链霉亲和素HRP处理后,邻苯二胺被用作底物以发射光。使用酶标仪从OD 450nm的测量值减去OD 550nm的测量值得到的值作为有效值。
如图19所示,当利用LTA预处理THP-1细胞时,依据肽聚糖表达增加的TNF-α(图19A)和IL-1β(图19B)的表达随着LTA浓度的增加而减小。为了确定抗炎细胞因子的表达是否由内毒素诱导,进行多粘菌素B的实验。多粘菌素B用于与LPS的脂质A结合并且抑制LPS的活性。因此,如果实验结果是由内毒素引起的,当利用多粘菌素B处理THP-1细胞时,不能抑制抗炎细胞因子的表达。然而,pLTA在含多粘菌素(polymyxin)B的培养基中,也诱导TNF-α表达的抑制,这表明内毒素(LPS)不诱导LTA的耐性(图19C)。
来自革兰氏阴性菌的肽聚糖通过刺激免疫细胞的NOD2,增强来自所述免疫细胞的大量的促炎性细胞因子的表达。然而,通过利用pLTA预处理免疫细胞,可以抑制由革兰氏阴性菌的肽聚糖引起的促炎性细胞因子的特异性表达。
pLTA对肽聚糖诱导NOD2的表达抑制的效果实验
pLTA对败血症关联受体NOD2表达变化的测量按如下方式x实施。将浓度为8x105细胞孔的THP-1细胞转移到24孔板后,在37℃和5%CO2的条件下培养24小时以稳定细胞。用浓度为100μg/ml的pLTA预处理THP-1细胞24小时后,利用浓度为10μg/ml的福氏志贺菌肽聚糖再处理,然后,培养2小时。离心分离培养液收集各细胞后,从总RNA合成cDNA后,使用实时PCR,测量NOD2的表达的变化。使用蛋白质印迹法测量NOD2的蛋白质的变化。在上述条件下,利用肽聚糖处理由pLTA预处理的THP-1细胞2小时。将细胞裂解后,添加SDS-PAGE加载型染料。此后,将THP-1细胞煮沸5分钟,通过12%SDS-PAGE分离蛋白质。将分离的蛋白质转移到尼龙膜后,利用抗-TLR2、抗-TLR4和抗-NOD2抗体进行蛋白质印迹实验。
在由福氏志贺菌肽聚糖诱导的过度的炎症反应中,为了探明NOD2的作用,进行如下实验。分别利用NOD2表达载体和pNF-κB-Luc/pRL-SV40载体对U937细胞进行形质转化。24小时后,利用浓度为100μg/ml的pLTA预处理各形质转化后的细胞24小时后,利用浓度为10μg/ml的肽聚糖再处理12小时。通过由酶标仪测量的NF-κB的活性值除以海肾属的活性值,测量根据NOD2表达量的NF-κB的活性变化。
如图20所示,福氏志贺菌肽聚糖显著增加了THP-1细胞中的NOD2的表达。另一方面,利用pLTA预处理的THP-1细胞中的NOD2mRNA的表达倾向于随着预处理的pLTA的浓度的增加而减小(图20A),比起未使用pLTA预处理的细胞,利用pLTA预处理的细胞中的NOD2蛋白质的表达量也显著地减小(图20B)。这种结果表明pLTA可以通过抑制败血症相关受体NOD2的表达,抑制NOD2和肽聚糖之间的相互作用引起的信号传输。
此外,可以确定,比起未利用pLTA预处理的细胞,利用pLTA预处理的细胞中的肽聚糖-诱导NF-κB的活性显著地减小(图20C)。然而,NOD2表达载体的性质转换,使这种NF-κB的活性抑制消失。这种结果表明NOD2作为肽聚糖的主要受体而发挥作用,并且通过利用pLTA预处理THP-1细胞,抑制作为NOD2的主要转录因子的NF-κB的活性,因此,可以降低NOD2的mRNA表达。
pLTA和TLR2的相关性实验
在pLTA对细胞因子的表达抑制作用中,为了检验与TLR2的相关性,进行TLR2 siRNA实验。以TLR2为靶点的siRNA双链是从Santacruz Biotechnology(Santa Cruz,USA)购买的。利用TransIT-TKO感染试剂(Mirus,WI)以TLR2siRNA和对照siRNA形质转化THP-1细胞后,培养72小时。利用浓度为100μg/ml的pLTA预处理由TLR2siRNA和对照siRNA形质转化后的细胞24小时后,利用浓度为10μg/ml的肽聚糖再处理4小时。此后,使用ELISA方法测量培养液中的TNF-α表达量。
作为另一个实验,从剔除TLR2的小鼠(C57BL/6)中分离来自骨髓的巨噬细胞(BMM)后,接种于96孔板,在37℃和5%CO2的条件下培养24小时。利用浓度为100μg/ml的pLTA预处理BMM 24小时后,利用浓度为10μg/ml的肽聚糖再处理4小时。此后,使用ELISA方法测量来自培养液的TNF-α的表达量。
如图21所示,在利用对照siRNA进行形质转化的THP-1细胞中,由于发生由pLTA预处理诱导的耐受性,肽聚糖诱导TNF-α表达减少(图21A)。另一方面,在由TLR2siRNA进行形质转化的THP-1细胞中未出现这种表达减少(图21B)。这种结果在剔除TLR2的BMM中也出现。在从正常的小鼠分离出的BMM中,TNF-α表达本来随肽聚糖的浓度而增加,但这种表达增加由于pLTA预处理而减少(图21C)。而在TLR2-/-BMM中,可以看出,与pLTA的预处理无关,TNF-α表达随肽聚糖的浓度而增加(图21D)。因此可知,针对肽聚糖诱导TNF-α超表达的pLTA诱导耐受表明,TLR2是必须受体。
pLTA对NF-κB活性及TNF-α表达的抑制
依据内毒素LPS处理的TNF-α的超表达是由MAP激酶的磷酸化和NF-κB活性增加引起的。为了确定pLTA如何影响MAP激酶的磷酸化和NF-κB活性,进行下列蛋白质印迹和免疫荧光染色实验。
蛋白质印迹:将浓度为8x105细胞/孔的THP-1细胞转移至24孔板后,在37℃和5%CO2的条件下培养24小时,以稳定细胞。利用浓度为100μg/ml的pLTA预处理THP-1细胞24小时后,添加浓度为0.1μg/ml的LPS,再培养1小时。通过离心分离培养液收集细胞后,在Laemmli缓冲液中裂解细胞。添加SDS-PAGE加载染料,煮沸5分钟后,用12%的SDS-PAGE分离蛋白质。将分离的蛋白质转移到尼龙膜后,利用抗磷酸化MAP激酶抗体(抗磷酸化ERK和抗磷酸化JNK)、抗NF-κB抗体和抗β-肌动蛋白抗体进行蛋白质印迹测试。
免疫荧光染色(immunofluorescence staining):将浓度为8×105细胞/孔的THP-1转移至24孔板后,在37℃和5%CO2的条件下培养24小时,以稳定细胞。利用浓度为100μg/ml的pLTA预处理THP-1细胞24小时后,利用浓度为0.5μg/ml的LPS再处理,然后,培养2小时。培养后的细胞被以3500rpm的速度离心分离15分钟,使其附着在载物玻璃上,然后,利用4%的甲醛固定细胞。此后,利用0.5%氚核X-100(氚核X-100),提高细胞膜的透过性,利用抗NF-κBp50和抗NF-κB p65抗体处理固定的细胞2小时。再利用驴抗鼠IgG-FITC抗体处理90分钟后,使用共聚焦显微镜,测量细胞内的NF-κB p50和NF-κB p65的磷酸化程度。
如图22所示,可以看出,经pLTA处理后MAP激酶的活性减小(图22A)。即,从图中可观察到:未给予pLTA耐受性的细胞中,用LPS处理60分钟时,ERK及JNK的活性(磷酸化)急剧增加。另一方面,可以看出,相比未受pLTA耐受性影响的细胞,受pLTA耐受性影响的的细胞中,ERK及JNK的活性减小。
LPS诱导NF-κB的活性需要IKK激酶的磷酸化。活性IKK激酶诱导I-κB蛋白质群的磷酸化,从NF-κB分离出I-κB。将NF-κB移动至细胞核中,促进细胞附着及基因(细胞因子和细胞因子受体等)转录。从本实验的结果可以看出,未给予pLTA耐受性的细胞中,在LPS处理后,I-κBα的降解加速。然而,给予pLTA耐受性的细胞的情况,这种I-κBα的降解很少发生(图22B)。这种结果表明相比给予pLTA耐受性的细胞,给予pLTA耐受性的细胞中NF-κB的活性被抑制。
为了确认这些结果,进行使用抗NF-κB抗体的免疫荧光染色方法,以确认NF-κB的活性被pLTA耐受性所抑制(图22C)。这种一系列的信号传输关联要素的活性抑制表明pLTA在抑制LPS诱导的TNF-α超表达方面起着重要的作用。
实施例4:对pLTA抗炎效果的活体内实验
pLTA的败血症抑制效果
将浓度为300mg/kg的pLTA或PBS腹腔注射至15只4周龄雄性小鼠(BALB/c)。24小时后,腹腔注射200μl败血症诱发水溶液(250mg/kg aLTA+25mg/kg MDP),以诱发内毒素性休克,观察小鼠的存活率直到诱发败血症后的第4天为止。
作为另一个实验,对腹腔注射pLTA的小鼠和腹腔注射PBS的小鼠(各5只)注射败血症诱发物质。12小时后,从小鼠的心脏采血,分离血清,然后,采用ELISA方法测量血中TNF-α的含量。
如图23所示,经PBS预处理的小鼠,腹腔注射败血症诱发物质后,在48小时内全部死亡。而经pLTA预处理的小鼠,截止第4天为止仍有大约90%的存活率(图23A)。此外还确定,相比利用PBS预处理的小鼠,经pLTA预处理的小鼠,其血液内的TNF-α的量显著降低(图23B)。
这种结果表明pLTA在抑制由aLTA+MDP诱导的活体内的过度的炎症反应及抑制革兰氏阳性菌衍生败血症方面是有效的。
pLTA处理对过敏性皮肤疾病的缓和效果
特异性皮肤疾病由各种原因引起,如细菌感染、接触化学药品等。购买4周龄的SPF(无特异性病原)雄性ICR小鼠(Central Lab.Animal Inc.)和4周龄的SPF雄性NC/Nga小鼠(Central Lab.Animal Inc.),在实验动物饲养室中适应7天后,用于实验。所述小鼠被分成两个实验组,每组各有20只ICR小鼠和5只NC/Nga小鼠。对于所有的实验组,在涂布实验材料的前一天,对小鼠的背部区域进行脱毛,参照以往的研究,以4天间隔,在小鼠的背部区域涂布1%DNCB两次,然后在4周内每隔3天在小鼠的背部区域涂布0.2%DNCB,诱发特异性皮炎。特异反应后,对小鼠腹腔注射浓度为350μg/kg的pLTA,然后,观察皮肤病变。利用免疫组织化学(IHC)方法,测量与血液中的Th2偏向性有关的,在皮炎瘙痒症周围的皮肤组织中与皮炎和过敏性疾病关联的细胞因子(IL-4)的分布和水平。
如图24所示,DNCB涂布的结果显示:ICR小鼠模型和NC/Nga小鼠模型用肉眼不仅可观测整个背部区域的红斑和水肿,还可以观测到外壳脱皮和脓肿丘疹,而且因个体而异,严重的甚至能看到出血部位。这种皮肤病变与人类特应性皮炎的症状大体类似。而且相比其它的小鼠模型严重诱导了皮炎。但是可观察到这些症状可通过注射pLTA得以缓和(图24A)。为了观察可认为是特异性皮炎病因的Th2偏向性,测量IHC,以测量发病的皮肤组织内相关的细胞因子的水平。在ICR和NC/Nga小鼠模型中,可以看出皮肤组织内的IL-4成显著上升的分布趋势,而IFN-r分布则基本没有差别。另一方面,经pLTA处理的小鼠,可以看出皮肤组织内IL-4的分布减小(图24B),这表明pLTA通过抑制诱导Th2反应的IL-4的表达,从而缓和特异性皮炎的症状。
实施例5:其它LTA的抗炎效果实验
rLTA的抗炎效果
为了调查从其它种类的乳酸菌鼠李糖乳杆菌(rLTA)分离的LTA的抗炎效果,利用浓度为100μg/ml的rLTA处理THP-1细胞,并且刺激4小时。此后,通过ELISA方法,测量培养液中的TNF-α的表达量。
如图25所示,随着预处理的rLTA的浓度的增加,TNF-α的表达量减少。
aLTA、rLTA、pLTA、dLTA和sLTA的抗炎效果比较
利用LPS和各LTA处理THP-1细胞,以确定TNF-α的表达量。
如图26所示,当利用LPS和浓度为10μg/ml的各LTA处理THP-1细胞时,可以看出,aLTA和sLTA不抑制TNF-α的表达,而其它的LTA有效地抑制TNF-α的表达。
而且,假设根据LTA的种类具有不同的TNF-α表达模式是基于如下事实:由于各LTA的结构差异,各LTA对细胞信号通路(cell signal pathway)活性具有不同影响。为了确认这种假设,利用与细胞信号通路关联的信号抑制剂处理THP-1信号后,确认根据不同的LTA形成的TNF-α。
因此,如图27和列出定量各LTA的TNF-α表达抑制率的下列表1所示,可以看出,利用特定的信号抑制剂处理各LTA时,TNF-α表达减小或增加。从这些结果可以确认LTA的结构差异对特定的细胞信号通路具有不同的影响。
表1
TNF-α | DMSO | ERK | NF-κB | JNK | p38 | Akt | IKK | P13K | AFI | |
aLTA | 4.8 | -46.7 | -31.8 | -9.1 | -13.6 | -40.0 | -7.3 | -10.3 | 8.3 | -18.8 |
pLTA | 64.3 | 66.7 | 54.5 | 9.1 | 54.5 | 28.6 | 63.4 | 51.7 | 50.0 | 56.3 |
dLTA | 42.9 | -16.7 | -9.1 | 0.0 | 27.3 | -28.6 | -17.1 | 0.0 | 25.0 | -9.4 |
rLTA | 57.1 | 36.7 | 31.8 | 0.0 | 45.5 | -14.3 | 22.0 | 27.6 | 37.5 | 18.8 |
sLTA | 23.8 | -46.7 | -36.4 | -9.1 | 0.0 | -28.6 | -26.8 | -3.4 | -4.2 | -9.4 |
实施例6:利用源自pLTA的糖脂诱发抗体反应
利用2.5μg B型肝炎病毒表面抗原(“HBsAg”)在第0天对小鼠进行第1次免疫。在第21天,使小鼠接受第2次免疫(200μl/注射)。在上述第1次免疫后第20天和第2次免疫后第27天对小鼠采血。收集血清,并利用标准ELISA对抗HBsAg抗体进行检查。下列表2示出,当本发明的糖脂与HBsAg一起对动物给药时,诱导生成抗HBsAg抗体。
表2
制备例1:含pLTA的医药
粉剂的制备
10mg pLTA或pLTA类似物
100mg乳糖
10mg滑石
混合所述成分后,填充到气密封装中以制备粉剂
片剂的制备
5mg pLTA或pLTA衍生物
100mg玉米淀粉
100mg乳糖
2mg硬脂酸镁
按照通常的制备片剂的方法,混合所述成分后,打锭以制备片剂
胶囊的制备
10mg pLTA或pLTA衍生物
3mg纤维素晶体
14.8mg乳糖
0.2mg硬脂酸镁
根据通常的制备胶囊的方法,混合所述成分后,填充到明胶胶囊中以制备胶囊。
注射剂的制备
50mg pLTA或pLTA衍生物
180mg甘露醇
2,974mg注射用的无菌蒸馏水
26mg12水磷酸氢二钠
根据通常的注射剂制备方法,以每安瓿(2ml)含所述含量的成分。
液剂的制备
10mg pLTA或pLTA衍生物
10g异构化糖
5g甘露醇
适量的蒸馏水
根据通常的制备液剂的方法,在蒸馏水中添加上述成分并使其溶解,并且添加适量的柠檬香精。此后,混合所述成分,添加蒸馏水定容至100ml。然后注入到褐色瓶中并灭菌,以制备溶液。
制备例2:含pLTA的健康食品
100mg pLTA或pLTA衍生物
适量的维生素混合物
70μg维生素A醋酸盐
1.0mg维生素E
0.13mg维生素B1
0.15mg维生素B2
0.5mg维生素B6
0.2μg维生素B12
10mg维生素C
10μg生物素
1.7mg烟酰胺
50μg叶酸
0.5mg泛酸钙
适量的无机物混合物
1.75mg硫酸亚铁
0.82mg氧化锌
25.3mg碳酸镁
15mg磷酸一钾
55mg磷酸氢二钾
90mg柠檬酸钾
100mg碳酸钾
24.8mg氯化镁
混合比较适合健康食品的上述成分,以调节较佳实施例中的维生素和矿物混合物的组成比例,但是,混合比例可以选择性地任意改变。根据通常的健康食品制造方法,混合所述成分后,制备粒剂,所述粒剂用于根据通常的方法制备健康食品组合物。
制备例3:含pLTA的饮料
100mg pLTA或pLTA衍生物
15g维生素C
100g维生素E(粉末)
19.75g乳酸亚铁
3.5g氧化锌
3.5g烟酰胺
0.2g维生素A
0.25g维生素B1
0.3g维生素B2
定量的水
根据通常的健康饮料的制备方法,制备饮料。即,混合上述成分后,在85℃时搅拌加热大约1小时后,过滤生成的溶液并放置在2L无菌容器中,将其密封、消毒后,冷藏保管,然后用于制备根据本发明的健康饮料成分。
根据喜爱确定适合的饮料成分上述混合比,以调节较佳实施例中的成分的组成比例,但是根据需求阶层、需求国家、使用用途等地域或民族性偏好,可以任意更改混合比例。
制备例4:含pLTA的化妆品
柔肤乳液的制备
0.1重量份%的pLTA或pLTA衍生物
3.0重量份%的甘油
2.0重量份%的丁二醇
2.0重量份%丙二醇
1.00重量份%的聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油
10.0重量份%的乙醇
0.1重量份%的三乙醇胺
微量防腐剂
微量色素
微量香料
剩余重量份%的蒸馏水
营养皮肤乳液的制备
0.1重量份%的pLTA或pLTA衍生物
1.70重量份%的谷甾醇
1.50重量份%的聚甘油2-油酸酯
1.2重量份%的乳化剂及润肤成分-4
1.5重量份%的胆固醇
0.4重量份%的磷酸二鲸蜡脂
5.0重量份%的浓缩甘油
10.0重量份%的向日葵油
0.2重量份%的聚羧乙烯
0.3重量份%的黄原胶
微量的防腐剂
微量的香料
剩余重量份%的蒸馏水
制备例5:含pLTA的佐剂
包括pLTA的佐剂的制备
25μg pLTA或pLTA衍生物
500μg二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)
125μg胆固醇
剩余重量份%的磷酸盐氯化钠缓冲溶液和水
总计:0.5ml
如专利号为WO96/33739的专利中所述,制备包括上述成分的佐剂。
表3
制备含pLTA佐剂的流感疫苗成分
所述流感疫苗的单剂量相当于1ml。
Claims (31)
1.一种糖脂,含2至6个饱和或不饱和的C10至C30酰基链,所述酰基链结合在以α键连接的二己糖或三己糖的C1、C3、C4及C6位置中的至少一个位置。
6.如权利要求1所述的糖脂,所述糖脂为源自乳酸菌的糖脂。
7.如权利要求6所述的糖脂,所述乳酸菌为乳酸杆菌、双歧杆菌、链球菌或乳球菌属。
8.如权利要求7所述的糖脂,其中,所述乳酸菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、德氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、干酪乳杆菌、两岐双岐杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、动物双歧杆菌、嗜热链球菌、或乳酸乳球菌。
9.如权利要求1所述的糖脂,聚甘油磷酸酯还连接到未结合有酰基链的己糖的C6位置。
14.如权利要求9所述的糖脂,所述糖脂为源自乳酸菌的脂磷壁酸。
15.如权利要求10所述的糖脂,所述乳酸菌为乳酸杆菌、双歧杆菌、链球菌或乳球菌属。
16.如权利要求10所述的糖脂,所述乳酸菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、德氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、干酪乳杆菌、两岐双岐杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、动物双歧杆菌、嗜热链球菌、或乳酸乳球菌。
17.一种药物组合物,所述药物组合物包含如权利要求1至16中任一项所述的糖脂。
18.如权利要求17所述的药物组合物,还包含选自抗生素、载体、赋形剂和稀释剂中的至少一种添加剂。
19.如权利要求17所述的药物组合物,所述药物组合物以粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、乳液,糖浆或气溶胶的形式制成口服制剂、外用制剂、栓剂或无菌注射溶液。
20.如权利要求17所述的药物组合物,其中,基于所述药物组合物的重量为100重量份计,所述药物组合物包含0.01至99.9重量份的糖脂。
21.一种用于预防和治疗炎症性疾病或免疫相关疾病的药物组合物,所述药物组合物包括如权利要求1至16中任一项所述的糖脂。
22.如权利要求21所述的药物组合物,所述炎症性疾病或免疫相关疾病选自败血病、动脉硬化、菌血症、全身炎症反应综合症、多器官功能障碍综合症、癌症、骨质疏松、牙周炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、骨关节炎、幼年型慢性关节炎、强直性脊柱炎、系统性硬结、肌肉特发性炎症性疾病、干燥综合症、系统性血管炎、结节病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性血小板减少症、甲状腺炎、糖尿病、免疫介导性肾脏疾病、中枢神经系统或周围神经系统的脱髓鞘疾病、特发性脱髓鞘性多发性神经病、格林-巴利综合症、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、肝胆疾病、传染性或自身免疫性慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、肉芽肿性肝炎、硬化性胆管炎、发炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、肠易激综合症、麸胶肠易激综合症、惠普尔病、自身免疫或免疫介导的皮肤疾病,大疱性皮肤疾病、多形性红斑、接触性皮炎、牛皮癣、过敏性疾病、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎、食物过敏、荨麻疹、肺部免疫疾病、嗜酸细胞性肺炎、特发性肺纤维化、过敏性肺炎、移植相关疾病、移植排斥和移植物抗宿主病中的至少一种。
23.如权利要求21所述的药物组合物,所述药物组合物通过口服给药、直肠给药、静脉内注射给药、肌内注射给药、皮下注射给药、子宫内膜注射给药或侧脑室注射给药。
24.如权利要求21所述的药物组合物,所述糖脂1天的给药量为0.01至10000mg/kg。
25.一种食品组合物,所述食品组合物包含如权利要求1至16中任一项所述的糖脂。
26.如权利要求25所述的食品组合物,还包含选自有机酸、磷酸盐、抗氧化剂、乳糖、酪蛋白、糊精、葡萄糖、糖和山梨醇中的至少一种添加剂。
27.如权利要求25所述的食品组合物,其中,基于所述食品组合物的重量为100重量份计,所述食品组合物包含0.01至99.9重量份的所述糖脂。
28.如权利要求25所述的食品组合物,食品组合物的剂型为固体、粉剂、粒剂、片剂、胶囊或液体形式。
29.一种化妆品组合物,所述化妆品组合物包含如权利要求1至16中任一项所述的糖脂。
30.如权利要求29所述的化妆品组合物,还包含选自维生素、氨基酸、蛋白质、表面活性剂、乳化剂、香料、色素、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、紫外线阻断剂、pH值调节剂和螯合剂中的至少一种添加剂。
31.一种佐剂,所述佐剂由如权利要求1至16中任一项所述的糖脂组成或包含如权利要求1至16中任一项所述的糖脂。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR10-2009-0079482 | 2009-08-26 | ||
KR20090079482 | 2009-08-26 | ||
PCT/KR2010/005755 WO2011025286A2 (ko) | 2009-08-26 | 2010-08-26 | 리포테이코익산 유래 당지질 및 이를 포함하는 조성물 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102596980A true CN102596980A (zh) | 2012-07-18 |
Family
ID=43628616
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2010800486522A Pending CN102596980A (zh) | 2009-08-26 | 2010-08-26 | 源自脂磷壁酸的糖脂及含有该糖脂的组合物 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20120190634A1 (zh) |
EP (1) | EP2471801A4 (zh) |
JP (1) | JP2013502456A (zh) |
KR (1) | KR101242669B1 (zh) |
CN (1) | CN102596980A (zh) |
WO (1) | WO2011025286A2 (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103089553A (zh) * | 2013-01-17 | 2013-05-08 | 清华大学 | 一种铰接式桁架定变桨组合叶片装置 |
CN109125357A (zh) * | 2018-10-24 | 2019-01-04 | 南京益恒寿生命科技有限公司 | 一种治疗肠易激综合症的益生菌-粪菌液复合液 |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101599769B1 (ko) * | 2012-08-10 | 2016-03-04 | 한국생명공학연구원 | 신규한 락토코쿠스 종 균주 및 이의 용도 |
CN103397060B (zh) * | 2013-07-16 | 2015-07-08 | 宁波大学 | 一种磷酸化肽聚糖的制备方法 |
KR101518866B1 (ko) * | 2013-08-08 | 2015-05-21 | 연세대학교 원주산학협력단 | 락토바실러스 플랜타룸 및 이의 용도 |
JP7057059B2 (ja) * | 2016-08-22 | 2022-04-19 | 株式会社明治 | ラクトバチルス・プランタラムの培養物の製造方法 |
AU2019274351B2 (en) | 2018-05-23 | 2022-04-07 | Kobiolabs, Inc. | Lactobacillus gasseri KBL697 strain and use thereof |
KR20190137397A (ko) * | 2018-06-01 | 2019-12-11 | 경희대학교 산학협력단 | 리포테이코익산, TNF-α 및 IFN-γ를 유효성분으로 함유하는 항암용 조성물 |
KR102271530B1 (ko) | 2018-12-31 | 2021-07-01 | 경희대학교 산학협력단 | 리포테이코익산 유래 당지질을 포함하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물 |
US11779683B2 (en) | 2019-04-08 | 2023-10-10 | Loubert S. Suddaby | Extended release immunomodulatory implant to facilitate bone morphogenesis |
US11369473B2 (en) | 2019-04-08 | 2022-06-28 | Loubert S. Suddaby | Extended release immunomodulatory implant to facilitate bone morphogenesis |
EP4081225A1 (en) | 2019-12-27 | 2022-11-02 | Biopolis, S.L. | Uses of lipoteichoic acid from bifidobacteria |
CN111821761A (zh) * | 2020-08-06 | 2020-10-27 | 张雪燕 | 一种麦芽糖浆液除渣设备 |
JPWO2022215568A1 (zh) * | 2021-04-08 | 2022-10-13 | ||
CN114213476B (zh) * | 2021-12-29 | 2022-11-01 | 江南大学 | 巴旦木中4-戊三醇-β-甲基龙胆二糖苷的分离方法及应用 |
KR20240044750A (ko) * | 2022-09-29 | 2024-04-05 | 서울대학교산학협력단 | 리포테이코익산을 포함하는 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1173206A (zh) * | 1995-01-30 | 1998-02-11 | 彼得·特鲁格 | 含有链球菌脂磷壁酸质的抗肿瘤和抗胆固醇制剂 |
US20040137554A1 (en) * | 1998-05-28 | 2004-07-15 | Oxoid Limited | Diagnosis and treatment of bacterial infections |
WO2005049631A1 (en) * | 2003-11-18 | 2005-06-02 | The Malaghan Institute Of Medical Research | Synthetic molecules having immune activity |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4542212A (en) * | 1975-10-14 | 1985-09-17 | Institut Pasteur | Phosphorylated 3-glyceryl-esters of glucose |
EP1167379A3 (en) | 1994-07-15 | 2004-09-08 | University Of Iowa Research Foundation | Immunomodulatory oligonucleotides |
UA56132C2 (uk) | 1995-04-25 | 2003-05-15 | Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. | Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини |
EP1260227A1 (en) * | 2001-05-23 | 2002-11-27 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Lipoteichoic acid from lactic acid bacteria and its use to modulate immune responses mediated by gram-negative bacteria, potential pathogenic gram-positive bacteria |
JP4637491B2 (ja) * | 2004-03-01 | 2011-02-23 | 株式会社東洋発酵 | 抗アレルギー用組成物 |
KR20060007968A (ko) * | 2004-07-23 | 2006-01-26 | (주)애니텍시스템 | 무전원 정압 대용량 잉크 공급장치 |
JP4387972B2 (ja) * | 2005-04-14 | 2009-12-24 | 大洋香料株式会社 | 抗酸化剤 |
KR100745013B1 (ko) * | 2006-01-25 | 2007-08-10 | 주식회사 알엔에이 | 알러지 질환 예방 및 치료를 위한 유산균 |
-
2010
- 2010-08-26 EP EP10812299.5A patent/EP2471801A4/en not_active Withdrawn
- 2010-08-26 JP JP2012526660A patent/JP2013502456A/ja active Pending
- 2010-08-26 CN CN2010800486522A patent/CN102596980A/zh active Pending
- 2010-08-26 US US13/392,429 patent/US20120190634A1/en not_active Abandoned
- 2010-08-26 WO PCT/KR2010/005755 patent/WO2011025286A2/ko active Application Filing
- 2010-08-26 KR KR1020100083196A patent/KR101242669B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1173206A (zh) * | 1995-01-30 | 1998-02-11 | 彼得·特鲁格 | 含有链球菌脂磷壁酸质的抗肿瘤和抗胆固醇制剂 |
US20040137554A1 (en) * | 1998-05-28 | 2004-07-15 | Oxoid Limited | Diagnosis and treatment of bacterial infections |
WO2005049631A1 (en) * | 2003-11-18 | 2005-06-02 | The Malaghan Institute Of Medical Research | Synthetic molecules having immune activity |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
AHARON OREN,等: "Characterization of the dominant halophilic archaea in a bacterial bloom in the Dead Sea", 《FEMS MICROBIOLOGY ECOLOGY》 * |
HIROTO IMAI,等: "Concise Synthesis of 3-O-(2-O-α-D-Glucopyranosyl-6-O-acyl-α-D-glucopyranosyl)-1,2-di-O-acyl-sn-glycerols", 《TETRAHEDRON》 * |
SIEGFRIED MORATH,等: "Structure–Function Relationship of Cytokine Induction by Lipoteichoic Acid from Staphylococcus aureus", 《BRIEF DEFINITIVE REPORT》 * |
WERNER FISCHER: "Lipoteichoic acid and lipids in the membrane of Staphylococcus aureus", 《MED MICROBIOL IMMUNOL》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103089553A (zh) * | 2013-01-17 | 2013-05-08 | 清华大学 | 一种铰接式桁架定变桨组合叶片装置 |
CN109125357A (zh) * | 2018-10-24 | 2019-01-04 | 南京益恒寿生命科技有限公司 | 一种治疗肠易激综合症的益生菌-粪菌液复合液 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2011025286A2 (ko) | 2011-03-03 |
JP2013502456A (ja) | 2013-01-24 |
US20120190634A1 (en) | 2012-07-26 |
WO2011025286A3 (ko) | 2011-07-14 |
EP2471801A4 (en) | 2013-12-04 |
KR20110021699A (ko) | 2011-03-04 |
EP2471801A2 (en) | 2012-07-04 |
KR101242669B1 (ko) | 2013-03-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102596980A (zh) | 源自脂磷壁酸的糖脂及含有该糖脂的组合物 | |
KR100497895B1 (ko) | 인삼의 유산균 발효물, 그를 함유하는 인삼 요구르트 및그에 이용되는 유산균 균주 | |
KR101919938B1 (ko) | 신규한 락토바실러스 플란타룸 lm1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물 | |
WO2004095949A1 (en) | Fermented red ginseng comprising metabolites of ginseng saponins by the action of human intestinal bacteria and the preparation method thereof | |
KR101409194B1 (ko) | 에쿠올 농도 조절제 | |
KR20170061959A (ko) | 체내 흡수율이 증진된 활성형 진세노사이드가 함유된 발효인삼 또는 발효흑홍삼 추출물 제조방법 | |
US20200179466A1 (en) | Novel Bacterial Strain Of Lactobacillus And Immunostimulant Comprising The Same | |
KR100824285B1 (ko) | 당화 인삼 및 인삼 추출물의 제조방법 | |
KR101829526B1 (ko) | 발효 녹용 추출물 또는 그의 분획물을 함유하는 면역 강화용 조성물 | |
KR20190081895A (ko) | 신규한 락토바실러스 프란타럼(Lactobacillus plantarum) 균주 DU.LAB.H01를 이용한 바다제비집-홍삼 복합 발효물 및 이의 제조방법 | |
WO2007099997A1 (ja) | 免疫賦活剤とその製造方法 | |
Chitisankul et al. | Soyasaponin composition complexities in soyfoods relating nutraceutical properties and undesirable taste characteristics | |
KR101345226B1 (ko) | 신규한 패니바실러스 속 엠비티213 균주, 이를 이용한 발효인삼 및 이를 이용한 발효인삼 추출물을 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20190018204A (ko) | 위액산 내성과 담즙산 내성이 탁월하고 높은 가바 생산성을 갖는 락토바실러스 브레비스 wcp02 균주, 이를 이용한 생균제제 및 발효식품 | |
JP4962754B2 (ja) | 抗腫瘍剤、腫瘍細胞増殖抑制剤、免疫賦活剤及び食品 | |
US20060234980A1 (en) | Antiinflammatory agent, agent for preventing/ameliorating allergic diseases and functional food | |
KR20100074382A (ko) | 인삼발효음료 및 그의 제조방법 | |
KR100773059B1 (ko) | 배당체 가수분해능을 가진 신규한 미생물, 이를 함유한 프로바이오틱스 및 이의 제조방법 | |
AU2019260951C1 (en) | Composition for type I allergy | |
KR102048623B1 (ko) | 홍삼 박 유래 산성 다당체를 유효성분으로 함유하는 조성물 및 이의 제조방법 | |
KR100945670B1 (ko) | 청국장 분말을 포함하는 건강 식품 조성물 | |
KR101200584B1 (ko) | 발효 당침지 검정콩 스낵의 제조방법 | |
TWI838990B (zh) | 腸管免疫賦活劑、IgA産生促進劑及基因表現促進劑 | |
WO2018123910A1 (ja) | 男性ホルモン増加促進用組成物 | |
KR102685690B1 (ko) | 유산균 식혜의 제조방법 및 이에 따라 제조된 유산균 식혜 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C05 | Deemed withdrawal (patent law before 1993) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120718 |