KR101919938B1 - 신규한 락토바실러스 플란타룸 lm1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물 - Google Patents

신규한 락토바실러스 플란타룸 lm1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101919938B1
KR101919938B1 KR1020170121823A KR20170121823A KR101919938B1 KR 101919938 B1 KR101919938 B1 KR 101919938B1 KR 1020170121823 A KR1020170121823 A KR 1020170121823A KR 20170121823 A KR20170121823 A KR 20170121823A KR 101919938 B1 KR101919938 B1 KR 101919938B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
cells
lactobacillus
immune
limited
Prior art date
Application number
KR1020170121823A
Other languages
English (en)
Inventor
손민
김현수
홍경은
정일선
박용일
이지선
최지원
Original Assignee
주식회사 락토메이슨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 락토메이슨 filed Critical 주식회사 락토메이슨
Application granted granted Critical
Publication of KR101919938B1 publication Critical patent/KR101919938B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/169—Plantarum
    • A23Y2220/67—

Abstract

락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는 면역 증강용 조성물, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는 면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 면역 증강용 건강기능식품, 및 면역 증강용 사료첨가제를 제공한다. 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는, 면역세포, 특히 대식세포에 대하여 현저한 면역 증강 효과를 가지며, 염증성 사이토카인인 TNF-α와 IL-6의 분비량과 면역반응을 매개하는 iNOS의 발현을 증가시키는 효과가 있고, 마우스 비장세포의 증식률과 혈액내의 사이토카인의 분비량을 증가시킴으로써 면역 증강 활성을 가지고 있는 면역 증강용 약학 조성물, 건강기능식품, 기능성 음료, 발효 제품 등 다양하게 이용될 수 있다.

Description

신규한 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물{COMPOSITION COMPRISING HEAT-KILLED LACTOBACILLUS PLANTARUM LM1004 HAVING IMMUNOSTIMULATING ACTIVITY}
본원은, 신규한 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체, 및 상기 신규한 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 유효성분으로 함유하는 제품에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 대식세포 및 마우스 동물 모델에서 면역지표인 TNF-α 및 IL-6의 생산을 유도함으로써 면역 증강 활성을 가지는, 신규한 락토바실러스 플란타룸 LM1004 및 이를 유효성분으로 함유하는 면역 증강용 조성물, 약학적 조성물, 건강기능식품, 사료첨가제, 기능성 음료, 및 발효제품에 관한 것이다.
유산균은 보통 젖산균이라고도 칭하는 최종 대사산물로 젖산을 만드는 박테리아로, 사람이나 동물의 소화관, 우유, 요쿠르트, 치즈, 김치, 식물 및 토양 등 자연계에 널리 분포되어 있으며, 인체의 소화계에 공생하면서 섬유질 및 복합 단백질들을 분해하여 중요한 영양 성분으로 만드는 역할을 담당한다. 이와 같이 사람을 포함한 동물의 위장관 내에서 숙주의 장내 미생물 환경을 개선하여 숙주의 건강에 유익한 영향을 주는 살아있는 미생물을 통칭하여 프로바이오틱스 (probiotics)라고 한다. 최근에는 유산균에 대한 연구가 활발히 진행되어 일반식품뿐만 아니라 건강식품 및 약품으로써 이용되는 등 그 응용범위가 넓어지고 있다. 여기에 속하는 유산균은 스트렙토코코스 (Streptococcus) 속, 페디오코커스 (Pediococcus) 속, 류코노스톡 (Leuconostoc) 속, 락토바실러스 (lactobacillus) 속, 스포로락토바실러스 (Sporolactobacillus) 속과 비피도박테리움 (Bifidobacterium) 등이 있다.
특히, 그 중에서도, 락토바실러스 플란타룸은 락토바실러스 속 유산균으로 주로 채소나 과일과 같은 식물, 혹은 김치와 같은 과채류를 발효한 식품에서 분리해 낸 후, 그 기능이 밝혀지면서 새로운 기능성 소재로 떠오르고 있다. 락토바실러스 플란타룸 J124 (대한민국특허출원 제 2002-0049220호)의 내산성, 내담즙성 및 항생제 내성효과, 락토바실러스 플란타룸 J9 (대한민국특허출원 제 2003-0067073호)의 리스테리아 모노사이토제네스 및 엔테로코커스 패칼리스에 대한 항균성, 락토바실러스 플란타룸 CJLP243 (대한민국특허출원 제2009-0102822호)의 장 질환 치료 및 면역력을 증강효과, 락토바실러스 플란타룸 HY7711 (대한민국특허출원 제2009-0058180호)의 항산화 및 항염증 효능 효과가 개시된 바 있다. 가장 최근에는 항암 또는 항균 활성을 가지는 락토바실러스 플란타룸 PM5 08 (대한민국특허출원 제2009-0130699호)가 개시된 바 있다.
그러나, 상기 결과들은 유산균 생균의 생리활성을 검증한 것으로 유산균 사균의 효과를 고려하지 않았으며, 유산균의 고유기능을 증진시키기 위한 방법에 대해 고려하지 않은 제한점이 있었다.
이러한 제한점을 고려하여, 프로바이오틱스의 정의는 시대가 흐름에 따라 조금씩 확대되고 있다. 1989년 Fuller는 Probiotcis를 "장내 균종을 개선시켜 줌으로써 숙주에게 유익한 영향을 주는 생균제제"라고 정의하였고, 살아있는 미생물로서의 정립이 이루어졌으나, 1999년 Salminen 등이 "숙주에 유익한 작용을 갖는 미생물 또는 미생물의 성분"으로 정의함으로 Probiotcis의 범위를 사균 (死菌) 및 그 균체 성분으로까지 확대시켰다. 유산균 사균체는 생균의 반대되는 개념으로서 발효를 통해 얻어진 생균과 대사산물들을 열처리 등에 의해 균의 성장이 일어나지 못하도록한 형태이다. 세포질 (cytoplasm), 세포벽 (cell wall), 박테리오신 (bacteriocin)등의 항균활성 물질, 다당류 (polysaccharide), 유기산 등을 포함하는 것을 특징으로 한다. 유산균 사균체라는 용어는 유산균 사균체 (乳酸菌 死菌體), 유산균 배양물 (乳酸菌 培養物), 유산균 추출물 (乳酸菌 抽出物), 유산균 균체성분 (乳酸菌 菌體性分) 등의 용어로 사용되고 있다.
유산균 사균체 제품은 생균제품과 비교하여 높은 안정성을 가지고 있다. 특히 내열성이 우수하며, 외부 환경에 대한 안정성이 높아 기존 유산균 제품보다 보관이 용이하고 유통기간을 늘일 수 있다는 장점을 가지고 있다. 따라서 사균체 제품은 건강기능식품, 식품첨가제, 의약품, 동물사료 등과 같은 기존의 유산균 생균이 적용되어 온 분야 외에도 화장품 원료로도 적용이 가능하다. 또한, 항생제 사용에 대한 규제가 강화되고 있기 때문에 대체제로서의 활용성과 아직 사균체 제품 생산에 본격적으로 뛰어든 업체가 손에 꼽을 정도이기 때문에 시장성과 성장 가능성은 크다고 할 수 있다. 특히 일본에서는 이미 사균체 제품이 많이 출시되어 꽃가루 알러지 등 면역 관련 효능을 기반으로 홍보하고 있다. 하지만 국내는 아직 개별인정소재로 인정받은 소재가 없을 뿐 아니라 관련 제품 또한 수입에 의존하고 있다.
그러나, 유산균의 사균체가 산업적 이용성이 더 유리함에도 불구하고, 이들 생리효능에 대한 세포 및 인체 내에서의 작용기전이나 보다 다양한 생리 기능성에 대한 연구는 우리나라뿐만 아니라 전 세계적으로도 많이 이루어지지 않고 있는 상태이다. 특히, 유산균 중 락토바실러스 플란타룸 LM1004에 대한 면역 증강 활성에 대하여 현재까지 연구되거나 보고된 바가 없다.
본원은, 면역 증강 활성을 가지는 신규한 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체, 및 상기 면역 증강 활성을 가지는 신규한 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 유효성분으로 함유하는 제품을 제공하고자 한다.
그러나, 본원이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본원의 제 1 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물을 제공한다.
본원의 제 2 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본원의 제 3 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 건강기능식품을 제공한다.
본원의 제 4 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 사료첨가제를 제공한다.
본원의 일 구현예에 따른 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)는, 면역세포, 특히 대식세포에 대하여 현저한 면역 증강 효과를 가지며, 염증성 사이토카인인 TNF-α와 IL-6의 분비량과 면역반응을 매개하는 iNOS의 발현을 증가시키는 효과가 있고, 또한, 마우스의 비장세포 증식률과 혈액 내 사이토카인의 분비량을 증가시킴으로서 면역 증강에 효과적이다.
본원의 일 구현예에 따르면, 면역체계의 파괴로 인한 면역부전이나 면역결핍을 증강시키거나 회복시킬 수 있는 약제는 거의 드문 실정으로, 설사 면역 증강 활성이 높은 합성 및/또는 천연 약제가 있다고 하더라도 부작용 등으로 인해 실제로 사용하기에는 어려운 문제들이 있다. 따라서, 본 발명은 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 조성물을 제공함으로써 상술한 문제의 해결을 모색하였다. 본원의 일 구현예에 따르면, TNF-α와 IL-6의 분비를 증가시키고, NO 합성효소(iNOS) 발현을 증가시켜 면역 증강 활성이 높은 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 조성물을 제공함으로써, 종래 합성 조성물보다 인체에 무해하며, 장기간 사용하여도 부작용이 거의 없는 조성물을 제공할 수 있다는 효과가 있다.
도 1은, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 마우스유래 대식세포 (RAW264.7 cells)에 처리하여 배양하고, MTT 실험으로 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 세포독성을 확인한 그래프를 나타낸다.
도 2의 (a) 및 (b)는, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 마우스유래 대식세포 (RAW264.7 cells)에 농도별로 처리한 후, 배지로 분비된 TNF-α와 IL-6의 농도를 ELISA 방법으로 측정한 결과이다.
도 3은, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 마우스유래 대식세포 (RAW264.7 cells)에 처리한 후 RT-PCR 방법을 이용하여 iNOS의 mRNA 발현량 변화를 나타낸 것이다.
도 4의 (a) 및 (b)는, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 마우스유래 대식세포 (RAW264.7 cells)에 처리한 후, RT-PCR 방법을 이용하여 TLR-2 및 TLR-4의 mRNA 발현량 변화(a) 및 웨스턴 블럿 방법을 이용하여 Phospho-ERK의 단백질 발현량 변화(b)를 나타낸 것이다.
도 5는, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 마우스유래 대식세포 (RAW264.7 cells)에 처리한 세포를 세포면역염색 방법을 이용하여 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동을 확인한 결과이다.
도 6 의 (a) 및 (b)는, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 마우스에 투여한 후 비장세포의 증식률을 확인한 결과이다.
도 7 의 (a) 및 (b)는, 본원의 일 실시예에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 마우스에 투여한 후 혈액 내 사이토카인의 분비량을 확인한 결과이다.
아래에서는 첨부한 도면을 참조하여 본원이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본원의 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본원은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. 그리고 도면에서 본원을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 다른 부분과 “연결”되어 있다고 할 때, 이는 “직접적으로 연결”되어 있는 경우뿐 아니라, 그 중간에 다른 소자를 사이에 두고 “전기적으로 연결”되어 있는 경우도 포함한다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부재가 다른 부재 “상에” 위치하고 있다고 할 때, 이는 어떤 부재가 다른 부재에 접해 있는 경우뿐 아니라 두 부재 사이에 또 다른 부재가 존재하는 경우도 포함한다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 “포함” 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 “약”, “실질적으로” 등은 언급된 의미에 고유한 제조 및 물질 허용오차가 제시될 때 그 수치에서 또는 그 수치에 근접한 의미로 사용되고, 본원의 이해를 돕기 위해 정확하거나 절대적인 수치가 언급된 개시 내용을 비양심적인 침해자가 부당하게 이용하는 것을 방지하기 위해 사용된다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 “~(하는) 단계” 또는 “~의 단계”는 “~ 를 위한 단계”를 의미하지 않는다.
본원 명세서 전체에서, 마쿠시 형식의 표현에 포함된 “이들의 조합(들)”의 용어는 마쿠시 형식의 표현에 기재된 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 혼합 또는 조합을 의미하는 것으로서, 상기 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것을 의미한다.
본원 명세서 전체에서, “A 및/또는 B”의 기재는 “A 또는 B, 또는 A 및 B”를 의미한다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본원의 구현예 및 실시예를 상세히 설명한다. 그러나, 본원이 이러한 구현예 및 실시예와 도면에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 제 1 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물을 제공한다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 (주)락토메이슨의 특허 기술인 세라믹 막 분리 배양기 (membrane bioreactor; MBR)에서 배양 후, 열교환기를 이용한 초고온순간가열 (ultrahigh temperature 이하 UHT 열처리) 공정으로 사균화한 사균체를 의미하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역 증강용 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 것이라면 그 함량을 특별히 제한하지 않으며, 예를 들어, 약 102 내지 약 108 ea/ml, 약 103 내지 약 107 ea/ml, 또는 약 104 내지 약 106 ea/ml의 농도로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 만약, 약 102 ea/ml 농도 이하의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함할 경우, 면역 증강용 조성물의 면역 증강 활성이 낮아 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으며, 약 108 ea/ml의 농도를 초과하는 경우, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 과면역반응 유도로 인해 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역반응을 활성화하여 면역을 증강시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 염증성 사이토카인의 분비량을 증가시키거나; 또는 iNOS의 발현을 증가시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 염증성 사이토카인은 TNF-α 또는 IL-6를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 TNF-α 및 IL-6 사이토카인의 분비를 증가시켜 면역 증가 활성을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 NO 합성효소 (iNOS)의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역세포에서 TLR-2/ERK/NF-κB로 이루어지는 신호전달경로를 활성화 시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 활성화함으로써 면역 증강 활성을 나타낼 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 마우스에서 활성화하여 면역 증강 활성을 나타내는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 TNF-α와 IL-6 분비의 증가와 NO 합성효소(iNOS) 발현의 증가는 TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 통해 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역 증강용 조성물은 TNF-α와 IL-6 분비를 증가시키고, NO 합성효소 (iNOS) 발현을 증가시킬 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역 증강용 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, IL-6가 약 37 pg/㎖ 내지 약 690 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역 증강용 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TNF-α가 약 98 pg/㎖ 내지 약 3740 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 제 2 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 (주)락토메이슨의 특허 기술인 세라믹 막 분리 배양기 (membrane bioreactor; MBR)에서 배양 후, 열교환기를 이용한 초고온순간가열 (ultrahigh temperature 이하 UHT 열처리) 공정으로 사균화한 사균체를 의미하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 나아가, 상기 약학적 조성물은 면역 증강이 필요한 증상이 나타나는 질병에 사용되는 것이라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 면역질환일 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 면역질환은 루프스(Lupus), 류마티스 관절염(Reumatoid Arthritis), 건선(Psoriasis), 염증성 장질환(Inflammatory Bowel Diseases), 알러지성 비염(Allergic Rhinitis), 천식(Asthma), 신장 섬유증(Renal Fibrosis), 심장 염증(Carditis), B 세포 림프종(B cell Lymphoma), 고혈압(Hypertension), 종양(Tumor), 암(Cancer), 호흡기 감염, 조류 독감, 베체트병, 다발성 근육염, 피부 근육염, 자가면역 혈구감소증, 자가면역 심근염, 아토피 피부염, 천식, 일차성 간경변, 피부근염, 굿파이처 증후군, 자가면역 뇌수막염, 쇼그렌 증후군, 원형 탈모증, 강직성 척수염, 자가면역성 간염, 자가면역성 이하선염, 크론병, 인슐린 의존성 당뇨병, 이영양성 수포성 표피박리증, 부고환염, 사구체 신염, 그레이브스병, 길랑바레 증후군, 하시모토병, 용혈성 빈혈, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 심상천포창, 류마티스열, 유육종증, 피부 경화증, 척추관절증, 갑상선염, 혈관염, 백반증, 점액수종, 악성빈혈, 미토콘드리아 관련 증후군, 궤양성 대장염, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질환을 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게는 염증성 장질환, B세포 림프종, 종양, 암, 아토피 피부염, 자가면역 뇌수막염, 크론병, 부고환염, 중증 근무력증, 갑상선염, 미토콘드리아 관련 증후군, 궤양성 대장염, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 종 이상의 질병을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 더욱 바람직하게는 상기 약학적 조성물은 장 기능, 위장병, 변비, 위궤양, 위염, 위암 증상, 호흡기 감염, 피부질환, 조류독감, 각종 암, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 종 이상의 질병을 예방 또는 치료할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제제화하여 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물을 제제화할 경우, 일반적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 또는 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 또는 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose), 락토오스 (lactose), 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 예를 들어, 단순한 부형제 이외에도 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 비경구 투여를 위한 제제로는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 비수성용제 또는 현탁제로는, 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 좌제로는, 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 것이라면 그 함량을 특별히 제한하지 않으며, 예를 들어, 약 102 내지 약 108 ea/ml, 약 103 내지 약 107 ea/ml, 또는 약 104 내지 약 106 ea/ml의 농도로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 만약, 약 102 ea/ml 농도 이하의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함할 경우, 약학적 조성물의 면역 증강 활성이 낮아 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으며, 약 108 ea/ml의 농도를 초과하는 경우, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 과면역반응 유도로 인해 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역반응을 활성화하여 면역을 증강시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 마우스에서 활성화하여 면역 증강 활성을 나타내는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 염증성 사이토카인의 분비량을 증가시키거나; 또는 iNOS의 발현을 증가시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 염증성 사이토카인은 TNF-α 또는 IL-6를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 TNF-α 및 IL-6 사이토카인의 분비를 증가시켜 면역 증가 활성을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, IL-6가 약 37 pg/㎖ 내지 약 690 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TNF-α가 약 98 pg/㎖ 내지 약 3740 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 NO 합성효소 (iNOS)의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, NO 합성효소(iNOS) 발현이 증가할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TLR-2의 발현 정도를 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, MAPK (ERK)의 인산화 정도를 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, 마우스의 비장세포 증식률을 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, 마우스 혈액 내 IL-6의 분비량을 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역세포에서 TLR-2/ERK/NF-κB로 이루어지는 신호전달경로를 활성화 시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 활성화함으로써 면역 증강 활성을 나타낼 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 TNF-α와 IL-6 분비의 증가와 NO 합성효소 (iNOS) 발현의 증가는 TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 통해 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 TNF-α와 IL-6 분비를 증가시키고, NO 합성효소 (iNOS) 발현을 증가시킬 수 있다.
본원의 제 3 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 건강기능식품을 제공한다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 (주)락토메이슨의 특허 기술인 세라믹 막 분리 배양기 (membrane bioreactor; MBR)에서 배양 후, 열교환기를 이용한 초고온순간가열 (ultrahigh temperature 이하 UHT 열처리) 공정으로 사균화한 사균체를 의미하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 건강기능식품은 장 기능, 위장병, 변비, 위궤양, 위염, 위암 증상, 호흡기 감염, 피부질환, 조류독감, 암, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질병을 예방 또는 개선하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 것이라면 그 함량을 특별히 제한하지 않으며, 예를 들어, 약 102 내지 약 108 ea/ml, 약 103 내지 약 107 ea/ml, 또는 약 104 내지 약 106 ea/ml의 농도로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 만약, 약 102 ea/ml 농도 이하의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함할 경우, 상기 건강기능식품의 면역 증강 활성이 낮아 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으며, 약 108 ea/ml의 농도를 초과하는 경우, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 과면역반응 유도로 인해 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역반응을 활성화하여 면역을 증강시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 마우스에서 활성화하여 면역 증강 활성을 나타내는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 염증성 사이토카인의 분비량을 증가시키거나; 또는 iNOS의 발현을 증가시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 염증성 사이토카인은 TNF-α 또는 IL-6를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 TNF-α 및 IL-6 사이토카인의 분비를 증가시켜 면역 증가 활성을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, IL-6가 약 37 pg/㎖ 내지 약 690 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TNF-α가 약 98 pg/㎖ 내지 약 3740 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 NO 합성효소 (iNOS)의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, NO 합성효소 (iNOS) 발현이 증가할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TLR-2의 발현 정도를 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, MAPK (ERK)의 인산화 정도를 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, 마우스의 비장세포 증식률을 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, 마우스 혈액 내 IL-6의 분비량을 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역세포에서 TLR-2/ERK/NF-κB로 이루어지는 신호전달경로를 활성화 시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 활성화함으로써 면역 증강 활성을 나타낼 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 TNF-α와 IL-6 분비의 증가와 NO 합성효소 (iNOS) 발현의 증가는 TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 통해 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 TNF-α와 IL-6 분비를 증가시키고, NO 합성효소 (iNOS) 발현을 증가시킬 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 첨가할 수 있는 식품은, 예를 들어, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 또는 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있으며, 통상적인 의미에서의 건강 기능성 식품을 모두 포함하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품 중, 음료 조성물은, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한은 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 천연 탄수화물은, 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어, 말토스, 슈크로스 등; 폴리사카라이드, 예를 들어, 덱스트린, 시클로덱스트린; 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은, 향미제로서 천연 향미제, 예를 들어, 타우마틴, 스테비아 추출 (예를 들어, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등), 또는 합성 향미제 (예를 들어, 사카린, 아스파르탐 등)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은, 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (예를 들어, 치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건강기능식품은, 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본원의 제 4 측면은, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 사료첨가제를 제공한다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 (주)락토메이슨의 특허 기술인 세라믹 막 분리 배양기 (membrane bioreactor; MBR)에서 배양 후, 열교환기를 이용한 초고온순간가열 (ultrahigh temperature 이하 UHT 열처리) 공정으로 사균화한 사균체를 의미하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역 증강용 사료첨가제를 사료에 첨가하는 대상 동물은 포유동물일 수 있으며, 예를 들어, 쥐, 소, 개, 말, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 동물을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함하는 것이라면 그 함량을 특별히 제한하지 않으며, 예를 들어, 약 102 내지 약 108 ea/ml, 약 103 내지 약 107 ea/ml, 또는 약 104 내지 약 106 ea/ml의 농도로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 만약, 약 102 ea/ml 농도 이하의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 포함할 경우, 상기 사료첨가제의 면역 증강 활성이 낮아 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으며, 약 108 ea/ml의 농도를 초과하는 경우, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 과면역반응 유도로 인해 약제로 사용하기 힘든 문제가 발생할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역반응을 활성화하여 면역을 증강시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 마우스에서 활성화하여 면역 증강 활성을 나타내는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 염증성 사이토카인의 분비량을 증가시키거나; 또는 iNOS의 발현을 증가시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 염증성 사이토카인은 TNF-α 또는 IL-6를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 TNF-α 및 IL-6 사이토카인의 분비를 증가시켜 면역 증가 활성을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, IL-6가 약 37 pg/㎖ 내지 약 690 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TNF-α가 약 98 pg/㎖ 내지 약 3740 pg/㎖로 분비될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 NO 합성효소 (iNOS)의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, NO 합성효소 (iNOS) 발현이 증가할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 103 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, TLR-2의 발현 정도를 증가시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, MAPK (ERK)의 인산화 정도를 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, 마우스의 비장세포 증식률을 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 약 102 내지 약 108 ea/ml의 농도로 포함할 때, 마우스 혈액 내 IL-6의 분비량을 증가 시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역세포에서 TLR-2/ERK/NF-κB로 이루어지는 신호전달경로를 활성화 시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 활성화함으로써 면역 증강 활성을 나타낼 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 TNF-α와 IL-6 분비의 증가와 NO 합성효소 (iNOS) 발현의 증가는 TLR-2/MAPK/NF-κB 신호전달경로를 통해 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사료첨가제는 TNF-α와 IL-6 분비를 증가시키고, NO 합성효소 (iNOS) 발현을 증가시킬 수 있다.
이하, 본원의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 하나, 하기의 실시예는 본원의 이해를 돕기 위하여 예시하는 것 일뿐, 본원의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[ 실시예 ]
실시예 1: 세포 독성 측정 ( MTT assay)
마우스 유래 대식세포주인 RAW264.7 cell을 10% 소태아혈청 (Gibco-BRL, USA)과 1% 페니실린-스트렙토마이신 (+5,000 Units/ml 페니실린, +5,000 μg/μl 스트렙토마이신, Gibco-BRL, USA)을 넣은 DMEM 배양액으로 5% CO2 가 공급되는 배양기에서 37℃ 조건으로 배양하였다. RAW264.7 cell을 2.5×104 cells/ml로 96-웰 플레이트 (SPL, Korea)에 200 μl씩 첨가하여 24 시간 동안 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양한 후, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 102 내지 108 ea/ml의 농도로 제조하여 RAW264.7 cell에 처리하였다. 24 시간 동안 배양한 후, 각 well에 PBS 완충액에 녹인 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT, 5 mg/ml) 용액을 20 μl씩 첨가하여 다시 4 시간 동안 배양시켰다. 포르마잔 (Formazan) 형성을 확인한 후, 배지를 완전히 제거하고, 웰의 바닥에 형성된 포르마잔을 녹이기 위해 100 μl의 DMSO를 첨가한 후, ELISA 측정기를 이용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 108 ea/ml 농도까지는 세포에 대한 독성이 거의 없는 것을 확인하였다. 따라서, 본 실험에서는 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 102 내지 107 ea/ml농도 범위 내에서 사용하기로 정하였다 (도 1).
실시예 2: 사이토카인 측정
RAW264.7 cell을 2.5×105 cells/ml로 6-well culture plate에 1 ml씩 첨가하여 24 시간 동안 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양한 후, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 103~108 ea/ml의 농도로 제조하여 RAW264.7 cell에 처리하였다. 24 시간 배양한 후 세포배양액을 얻은 다음 배양액에 함유된 사이토카인인 TNF-α (Mouse TNF-α EIA kit, Enzo Life Sciences, USA)과 IL-6(Mouse IL-6 EIA kit, Enzo Life Sciences, USA)를 각각의 ELISA 키트를 이용하여 측정하였다.
그 결과, 아무것도 처리하지 않은 대조군 (Con)에 비해 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 농도별로 처리했을 때의 TNF-α와 IL-6의 분비량이 농도 의존적으로 유의하게 증가하는 것으로 보아 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 면역 증강 효과가 상당히 크다는 것을 알 수 있었으며, 특히, 106 ea/ml의 농도로 처리했을 때에는 TNF-α와 IL-6 각각 6 배, 25 배씩 증가하였으며, 107 ea/ml의 농도로 처리했을 때에는 TNF-α와 IL-6 각각 2 배, 7 배씩 증가하였다 (도 2). 이것으로 보았을 때, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체가 대식세포로 하여금 면역반응매개 사이토카인인 TNF-α 및 IL-6의 분비를 증가시켜 면역 증강 효과를 가져다주는 것을 알 수 있었다.
실시예 3: RT- PCR 법에 의한 NO 합성효소 ( iNOS ), Toll-유사수용체 ( TLR -2 and TLR-4, Toll-like receptor) mRNA 발현량 측정
3-1. RAW264.7 대식세포에서의 RNA 분리
RAW264.7 세포를 60 mm 접시 (dish)에 배양한 후, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 103 내지 107 ea/ml의 농도로 처리하였다. 이후 인산완충식염수로 씻어낸 후 트리졸 (Trizol)을 1 ㎖씩 처리하여 세포를 잘 모아서 에펜도르프 튜브 (EP tube, eppendorf tube)에 옮겼다. 이후 RNA 추출용 (Korea, Intron biotechnology, Total RNA Extraction Kit)인 클로로포름 (chloroform)을 Trizol 1 ㎖당 200 μl씩 넣고 섞은 후 원심분리 (13,000 rpm, 10 분, 4℃)하여 제일 윗부분의 상등액에서 RNA을 회수하였다. 회수한 RNA에 결합 완충액 (Binding Buffer) 400 μl씩 넣고 약 1 분간 손으로 섞어주었다. 이후 RNA만 회수하기 위해 RNA 전용 컬럼 (column)과 세척 완충액 (Washing Buffer) 1(700 μl) 및 세척 완충액 2 (700 μl)를 사용해 클로로포름을 제거한 후 RNA만 남은 컬럼을 빼서 새로운 EP 튜브에 옮기고 용출 완충액 (Elution Buffer)로 RNA을 녹여 컬럼 밑으로 빠지게 해서 RNA만 회수하였다.
3-2. RAW264.7 대식세포에서의 cDNA 합성
상기 실시예 3-1에서 회수한 RNA를 마이크로플레이트 리더기 (Bio-Tek, USA)로 정량하여 정량한 RNA를 준비하고, 디에틸 피로칼보네이트 워터 (DEPC water; dimethyl pyrocarbonate water)를 준비하였다. PCR 전용 튜브에 정량한 RNA와 DEPC 워터를 넣어준 후 역전사효소와 Oligo(dT)15를 1 μl씩 넣어주었다. 이후 PCR 기계를 이용하여 75℃에서 5 분 동안 반응시키고 cDNA 합성 키트 (Intronbio, Korea)를 잘 혼합하여 넣어주었다. 이후 스핀 다운하여 침전시킨 후 42℃에서 1 시간 반응시킨다. 이후 75℃에서 5 분간 반응시켜 획득한 cDNA에 DEPC 워터를 50 μl씩 넣어서 합성하여 최종적으로 RT-PCR에 사용하였다.
3-3. cDNA를 이용한 RAW264.7 대식세포의 mRNA 발현량 조사
상기 실시예 3-2에서 합성한 cDNA 1 μl, 하기 표 1에 나타낸 프라이머 2 μl를 마스터 믹스 솔루션 (Master Mix Solution; iNtRON, i-StatTaq, Korea)에 넣은 후 DEPC water 17 μl를 넣고 PCR 방법으로 증폭시켰다. 이후 PCR 반응 산물은 2% 아가로 겔 (agarose gel)에서 전기영동 후 브롬화에티듐 (ethidium bromide)으로 염색하여, UV 램프에서 확인하였다.
도 3에서 확인되는 바와 같이, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 103 내지 107 ea/ml의 농도로 처리하였을 때 iNOS의 mRNA 발현량이 농도의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 iNOS의 발현을 증가시켜 면역 증강 효과를 가져다주는 것을 알 수 있었다.
다음으로, 도 4의 (a)에서 확인되는 바와 같이, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 103 내지 107 ea/ml의 농도로 처리하였을 때 TLR-2의 mRNA 발현량이 대조군과 비교하여 농도의존적으로 증가하는 반면, TLR-4의 mRNA 발현량에는 아무런 영향을 주지 않는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체는 면역반응의 중요한 수용체인 Toll-유사수용체 중에서도 TLR-2를 통하여 면역 증강 효과를 가져다주는 것을 알 수 있었다.
Figure 112017092279865-pat00001
실시예 4: MAPK ( mitogen activated protein kinases , pERK ) 신호전달경로를통한 면역 증강 기전 조사
락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 마우스 대식세포 (RAW264.7 cells)에 대한 면역 증강 기전을 조사하기 위해 MAPK 신호전달경로를 통한 면역 증강 기전을 웨스턴 블럿 방법으로 조사하였다. MAPK (ERK) 신호전달경로는 세포 생존에 관여하는 대표적인 신호전달 경로로 알려져 있다. 마우스 대식세포 (RAW264.7 cell)를 6-웰 플레이트에서 24 시간 동안 배양하고, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 103 내지 107 ea/ml의 농도로 제조하여 세포에 24 시간 동안 처리하였다. 24시간 후 PBS 세척하고 1400 rpm에서 5 분 동안 원심분리 하여 세포를 수득하였다. 각각 60 μl의 용해 버퍼를 첨가한 후에 30 분 동안 얼음 상에서 반응시키고 12,000 rpm에서 10 분 동안 원심분리 하여 단백질을 수확하였다. 브래드포드 분석법을 이용하여 단백질을 정량하고 샘플 로딩 버퍼를 넣고 95℃에서 5 분 동안 변성 시킨 뒤에 SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis) 겔을 이용하여 전기영동 하였다. 니트로셀룰로즈 (Nitrocellulose; NC) 막에 전송한 뒤 5% 탈지분유로 실온에서 1 시간 동안 블로킹 (blocking) 한 후 1차 항체 (1:1000)를 5% 탈지분유에 각각의 비율로 희석한 후 4℃에서 밤새 반응시켰다. TBST (TBS, 0.1% Tween 20)로 10 분마다 3 번 세척하고 HRP (horeseradish peroxidase)-컨쥬게이티드 2 차 항체를 5% 탈지분유에 1:2000으로 희석한 후 실온에서 1 시간 동안 반응시켰다. 위와 같은 방법으로 TBST로 3 차례 세척한 후 ECL (Enchanced Chemiluminescence) 기질 용액을 막에 1 분 동안 반응시킨 후에 X-ray 필름에 현상하였다.
그 결과, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 농도별로 처리한 후, MAPK중 ERK의 인산화를 측정한 결과, 아무것도 처리하지 않은 대조군과 비교하였을 때 ERK의 인산화가 농도 의존적으로 증가됨을 확인하였다 [도 4의 (b)]. 따라서, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체가 마우스 대식세포에서 나타내는 면역 증강 활성이 면역반응에 관여하는 MAPK (ERK) 신호전달경로를 활성화시킴으로서 일어난다는 것을 알 수 있었다.
실시예 5: 면역관련 전사인자인 NFκB를 통한 면역 증강 기전 조사
락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 마우스 대식세포 (RAW264.7 cells)에 대한 면역 증강 기전을 조사하기 위해 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 103∼107 ea/ml의 농도로 처리한 후, 세포 생존에 관여하는 대표적인 전사인자인 NFκB를 통한 면역 증강 기전을 세포면역화학법 (Immunocytochemistry)을 이용하여 확인하였다. 그 결과, 아무것도 처리하지 않은 대조군과 비교하였을 때 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체를 107 ea/ml 농도로 처리하였을 때 세포질에 위치했던 NF-κB가 핵 내로 유입되는 것을 확인할 수 있었다(도 5). 따라서 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체가 마우스유래 대식세포에서 나타내는 면역 증강 활성이 면역반응에 관여하는 NF-κB 전사인자를 활성화시킴으로써 일어난다는 것을 규명하였다.
실시예 6: 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체의 면역 증강 활성에 대한 in vivo 시험
6-1. 실험동물 사육, 실험군 설정 및 처리
본 연구에 사용된 동물은 6 주령된 암컷 Balb/c 마우스를 (주)오리엔트 바이오로부터 분양받아 고형 사료와 물을 자유로이 공급하면서 7 일 동안 사육실에서 적응시킨 후 체중이 17 g 내외인 마우스를 실험에 사용하였다. 사육실 온도는 22 ± 2℃, 습도는 40% 내지 60%로 유지하였고, 명암주기 (light and dark cycle)는 12 시간 단위로 조절하였다. 마우스를 임의 배치법에 의해 대조군과 투여군으로 하기 [표 2]에서 보는 바와 같이 나누었으며, 실험군마다 6 마리 내지 7 마리씩 사용하였다. 대조군에는 생리 식염수를, 투여군에는 (주)락토메이슨으로부터 공급받은 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 각각 저용량 (4 x 109 ea/kg/day), 고용량 (4 x 1011 ea/kg/day)으로 28 일간 경구투여용 존데를 사용하여 경구 투여하였고, 본 연구는 가톨릭대학교 동물실험윤리위원회 (IACUC)로부터 과학성과 윤리성에 대한 심사를 거쳐 승인 (승인번호: 2016-021)을 받아 수행하였다.
Figure 112017092279865-pat00002
6-2. 사균체 시료 (LM1004)에 의한 마우스 비장세포 증식능 측정
비장은 T 림프구, B 림프구, 대식세포 등 여러 가지 림프구가 밀집되어 있는 대표적인 면역 기관으로 비장세포의 크기와 수가 개체의 면역능력과 밀접한 관련이 있는 것으로 알려져 있다. 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료가 in vivo 동물 모델에서 비장세포의 T 림프구 분화능 및 B림프구 분화능을 촉진시키는지 확인하기 위해 다음과 같은 실험을 진행하였다. 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 저용량 (4 x 109 ea/kg/day), 고용량 (4 x 1011 ea/kg/day)으로 마우스 모델에 28 일간 경구투여한 뒤, 마우스로부터 비장을 적출하고 RPMI 1640 배양액 내에서 70 μm nylon cell strainer (BD Biosciences, USA)를 이용하여 세포를 분리하였다. 얻어진 세포를 300 x g에서 10 분간 원심 분리한 후 red blood lysis buffer (Sigma, USA)를 이용하여 적혈구를 파괴하고 원심분리를 반복하여 비장세포를 분리한 뒤, 5 x 106 cells/well의 농도로 12 well plate에 분주하고 RPMI 1640 배양액과 함께 선택적으로 T 림프구로의 분화를 촉진하는 concavanalin A (5 μg/ml, Con A)와 B 림프구로의 분화를 촉진하는 LPS (15 μg/ml)를 첨가하여 48 시간 동안 5% CO2가 포함된 37℃ 배양기에서 배양하였다. 48 시간 뒤 MTT (1 mg/ml) 시약을 처리하고, 4 시간 후 570 nm에서 흡광도를 측정하여 비장세포 증식율을 조사하였다.
그 결과, LPS를 처리했을 경우 비장세포 증식율에 유의적인 변화가 없었던 반면, ConA를 처리했을 경우, 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 투여한 군에서 생리 식염수를 투여한 대조군 (Con)보다 더 높은 비장세포 증식율을 나타냈다. 특히, 고용량인 4 x 1011 ea/kg/day를 투여 했을 때 생리식염수를 투여한 대조군 비장세포 증식율보다 2.3 배 더 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료가 동물레벨에서 면역 증강 효과가 뛰어남을 알 수 있었고, 이는 T세포 분화능을 증가시킴으로서 나타나는 효과임을 확인할 수 있었다 (도 6).
6-3. 사균체 시료 (LM1004)에 의한 마우스 혈액 내 사이토카인 분비량 측정
면역반응 중에서 외부 인자를 탐식하여 제거하는 탐식세포로서 면역작용에 가장 중요한 역할은 대식세포가 담당하고 있으며, 대식세포는 외부병원균의 감염시 다양한 염증인자 및 항균물질분비, 식균작용등을 통해 host defense에 중요한 역할을 수행한다고 알려져 있다. 대식세포는 선천면역계 및 적응면역계 모두에서 중요한 역할을 수행하여 secondary lymphoid organ뿐 아니라 거의 모든 조직에 광범위하게 분포한다. 또한 병원균유래 위험인자 등에 반응하여 이들을 제거하고 각종 cytokines, chemokine 및 inflammatory mediators를 생성하여 개체의 다른 면역체계에 생체 내 감염이나 injury가 있음을 알리는 일차적인 역할을 수행한다. 이러한 대식세포는 TNF와 같은 사이토카인을 생산하여 T-세포로부터 생산되는 다양한 사이토카인에 의해 기능이 증강 될 수 있다. 또한 대식세포에 의해 분비되는 사이토카인 중 IL-6는 염증반응으로부터 B 림프구의 항체 생성을 촉진시키고 T 림프구의 분화를 유도하는 것으로 알려져 있다.
이에 사균체 시료가 in vivo 동물 모델에서 사이토카인 분비를 촉진시키는지 확인하기 위해 다음과 같은 실험을 진행하였다. 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 저용량 (4 x 109 ea/kg/day)과 고용량 (4 x 1011 ea/kg/day)으로 마우스 모델에 28 일간 경구투여한 뒤, 마우스 심장으로부터 혈액을 얻어 혈청분리 후, 혈액내의 TNF-α (Thermo Fisher Scientific, USA), 및 IL-6 (R&D systems, USA) 생성량을 ELISA kit를 이용하여 측정하였다. Capture antibody가 부착되어 있는 well에 각 cytokine 표준액 및 마우스 혈청을 120 μl 분주하여 2 시간 동안 실온에서 반응시켰다. 세척용액으로 4회 세척한 후, detection anti-body을 2 시간 동안 실온에서 반응 시킨 후 세척용액으로 4 회 세척하였다. streptavidin-HPR 용액을 100 μl 첨가하여 빛을 차광한 상태로 실온에서 20 분간 더 반응시켰다. 다시 세척용액으로 4 회 세척한 후, 기질인 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine과 hydrogen peroxide 1:1 혼합 용액을 100 μl 분주 후 빛을 차광하여 상온에서 30 분간 반응시켰다. 각 well에 반응정지 용액을 50 μl씩 첨가한 후, microplate reader를 이용하여 450 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 각 cytokine 의 농도는 표준액을 사용하여 얻은 표준곡선에 따라 계산하였다.
그 결과, 마우스에 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 저용량 (4 x 109 ea/kg/day)과 고용량 (4 x 1011 ea/kg/day)으로 투여하였을 때, TNF-α의 생성량 [도 7의 (a)]에는 아무런 영향을 미치지 않은 반면, IL-6의 경우에 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 투여한 군에서는 IL-6 생성량이 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 저용량 (4 x 109 ea/kg/day), 고용량 (4 x 1011 ea/kg/day)의 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료를 투여한 군에서 생성된 IL-6의 양은 아무것도 처리하지 않은 음성대조군 (Con)과 비교하여 1.6 배, 2.0 배 증가하였다 [도 7의 (b)]. 따라서 락토바실러스 플란타룸 LM1004의 사균체 시료의 투여가 마우스로 하여금 IL-6의 분비를 촉진시켜 B 림프구의 항체 생성을 촉진시키고 T 림프구의 분화를 유도함으로서 면역 증강 효능을 나타낸다는 것을 확인할 수 있었고, 이는 비장세포 증식능이 나타낸 결과 [도 6의 (b)]와 같은 맥락으로 T세포 분화능을 증가시킴으로서 나타나는 효과임을 확인 할 수 있었다 (도 7).
전술한 본원의 설명은 예시를 위한 것이며, 본원이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본원의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
한국미생물보존센터(국외) KCCM43246 20161028

Claims (11)

  1. 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물로서,
    상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것인, 면역 증강용 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 면역 증강용 조성물은 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 102 내지 108 ea/ml 의 농도로 포함하는 것인, 면역 증강용 조성물.
  3. 삭제
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 염증성 사이토카인의 분비량을 증가시키거나; 또는 iNOS의 발현을 증가시키는 것인, 면역 증강용 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역세포에서 TLR-2/ERK/NF-κB로 이루어지는 신호전달경로를 활성화 시키는 것인, 면역 증강용 조성물.
  6. 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
    상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것인, 면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  7. 제 6 항에 있어서,
    상기 면역질환은 루프스(Lupus), 류마티스 관절염(Reumatoid Arthritis), 건선(Psoriasis), 염증성 장질환(Inflammatory Bowel Diseases), 알러지성 비염(Allergic Rhinitis), 천식(Asthma), 신장 섬유증(Renal Fibrosis), 심장 염증(Carditis), B 세포 림프종(B cell Lymphoma), 고혈압(Hypertension), 종양(Tumor), 암(Cancer), 호흡기 감염, 조류 독감, 베체트병, 다발성 근육염, 피부 근육염, 자가면역 혈구감소증, 자가면역 심근염, 아토피 피부염, 천식, 일차성 간경변, 피부근염, 굿파이처 증후군, 자가면역 뇌수막염, 쇼그렌 증후군, 원형 탈모증, 강직성 척수염, 자가면역성 간염, 자가면역성 이하선염, 크론병, 인슐린 의존성 당뇨병, 이영양성 수포성 표피박리증, 부고환염, 사구체 신염, 그레이브스병, 길랑바레 증후군, 하시모토병, 용혈성 빈혈, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 심상천포창, 류마티스열, 유육종증, 피부 경화증, 척추관절증, 갑상선염, 혈관염, 백반증, 점액수종, 악성빈혈, 미토콘드리아 관련 증후군, 궤양성 대장염, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질병인, 면역질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  8. 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 건강기능식품으로서,
    상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것인, 면역 증강용 건강기능식품.
  9. 제 8 항에 있어서,
    상기 건강기능식품은 장 기능, 위장병, 변비, 위궤양, 위염, 위암 증상, 호흡기 감염, 피부질환, 조류독감, 암, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질병을 예방 또는 개선하는 것인, 면역 증강용 건강기능식품.
  10. 제 8 항에 있어서,
    상기 건강기능식품은 상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체를 102 내지 108 ea/ml의 농도로 포함하는 것인, 면역 증강용 건강기능식품.
  11. 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체 (Lactobacillus plantarum LM1004, 수탁번호: KCCM 43246)를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 사료첨가제로서,
    상기 락토바실러스 플란타룸 LM1004 사균체는 면역 반응을 활성화하는 것인, 면역 증강용 사료첨가제.
KR1020170121823A 2017-06-16 2017-09-21 신규한 락토바실러스 플란타룸 lm1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물 KR101919938B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170076933 2017-06-16
KR20170076933 2017-06-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR101919938B1 true KR101919938B1 (ko) 2019-02-08

Family

ID=65365027

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170121823A KR101919938B1 (ko) 2017-06-16 2017-09-21 신규한 락토바실러스 플란타룸 lm1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101919938B1 (ko)

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102106737B1 (ko) * 2019-09-27 2020-05-04 (주)바이오일레븐 면역증강 활성을 가진 락토바실러스 퍼멘텀 BioE LF11 사균체를 포함하는 면역증강 조성물
KR102139024B1 (ko) 2020-02-24 2020-07-28 에스케이바이오랜드 주식회사 용암해수 유래 소수성 단백질 코팅 파라프로바이오틱스의 제조방법 및 이를 이용하여 제조한 면역활성이 우수한 용암해수 유래 소수성 단백질 코팅 파라프로바이오틱스와 면역증강용 조성물
KR102139732B1 (ko) * 2020-04-27 2020-08-03 주식회사 항신바이탈 유산균을 함유하는 면역 기능 개선용 조성물
WO2020261055A1 (en) * 2019-06-24 2020-12-30 Mendes S.R.L. Composition with antibacterial and re-epithelializing action including probiotics
KR102262646B1 (ko) 2020-04-02 2021-06-09 주식회사 메디뉴트롤 락토바실러스 플란타룸 v135 균주의 사균체를 유효성분으로 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물
KR20210073823A (ko) 2019-12-11 2021-06-21 주식회사 메디뉴트롤 락토바실러스 플란타룸 v135 균주 또는 상기 균주의 사균체를 유효성분으로 함유하는 알코올성 간염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20210090570A (ko) * 2020-01-10 2021-07-20 이뮤노바이옴 주식회사 신규한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주, 균주 유래 다당체 및 이의 용도
KR20220032418A (ko) * 2020-09-07 2022-03-15 건국대학교 산학협력단 락토바실러스 플란타룸 200655 균주 사균체를 포함하는 면역증강용 조성물
WO2022065848A1 (ko) * 2020-09-23 2022-03-31 피비엘바이오랩 주식회사 신규 유산균 및 이의 용도
KR20220125785A (ko) 2021-03-05 2022-09-14 주식회사 지에프퍼멘텍 리포테이코산을 지표물질로 포함하는 김치 유래 유산균 사균체의 인체 유래 효소분해능 및 면역 기능 증진용 조성물
KR102445903B1 (ko) * 2021-07-06 2022-09-22 롯데제과 주식회사 혈당 상승 저해 및 스트레스 조절 효과가 우수한 열처리된 락토바실러스 플랜타럼 lrcc5314 균주 및 용도
KR20220143231A (ko) * 2021-04-15 2022-10-25 (주) 바이텍 상황버섯 유래 균주의 사균체 분말 제조방법, 사균체 분말 및 이의 용도
KR20220162284A (ko) 2021-06-01 2022-12-08 주식회사 메디뉴트롤 락토바실러스 플란타룸 v135 균주의 사균체를 유효성분으로 함유하는 알코올 및 아세트알데히드 분해효소의 활성 증가용 조성물

Cited By (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20230310522A1 (en) * 2019-06-24 2023-10-05 Mendes S.R.L. Composition with antibacterial and re-epithelializing action including probiotics
WO2020261055A1 (en) * 2019-06-24 2020-12-30 Mendes S.R.L. Composition with antibacterial and re-epithelializing action including probiotics
KR102106737B1 (ko) * 2019-09-27 2020-05-04 (주)바이오일레븐 면역증강 활성을 가진 락토바실러스 퍼멘텀 BioE LF11 사균체를 포함하는 면역증강 조성물
KR20210073823A (ko) 2019-12-11 2021-06-21 주식회사 메디뉴트롤 락토바실러스 플란타룸 v135 균주 또는 상기 균주의 사균체를 유효성분으로 함유하는 알코올성 간염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR102507852B1 (ko) 2020-01-10 2023-03-09 이뮤노바이옴 주식회사 신규한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주, 균주 유래 다당체 및 이의 용도
KR20210090570A (ko) * 2020-01-10 2021-07-20 이뮤노바이옴 주식회사 신규한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주, 균주 유래 다당체 및 이의 용도
KR20210090571A (ko) * 2020-01-10 2021-07-20 이뮤노바이옴 주식회사 신규한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주, 균주 유래 다당체 및 이의 용도
KR102568343B1 (ko) * 2020-01-10 2023-08-22 이뮤노바이옴 주식회사 신규한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주, 균주 유래 다당체 및 이의 용도
US11690884B2 (en) 2020-01-10 2023-07-04 Immunobiome Inc. Lactobacillus plant arum strain, polysaccharides derived from strain, and use thereof
KR102139024B1 (ko) 2020-02-24 2020-07-28 에스케이바이오랜드 주식회사 용암해수 유래 소수성 단백질 코팅 파라프로바이오틱스의 제조방법 및 이를 이용하여 제조한 면역활성이 우수한 용암해수 유래 소수성 단백질 코팅 파라프로바이오틱스와 면역증강용 조성물
KR102262646B1 (ko) 2020-04-02 2021-06-09 주식회사 메디뉴트롤 락토바실러스 플란타룸 v135 균주의 사균체를 유효성분으로 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물
KR102139732B1 (ko) * 2020-04-27 2020-08-03 주식회사 항신바이탈 유산균을 함유하는 면역 기능 개선용 조성물
KR20220032418A (ko) * 2020-09-07 2022-03-15 건국대학교 산학협력단 락토바실러스 플란타룸 200655 균주 사균체를 포함하는 면역증강용 조성물
KR102443627B1 (ko) * 2020-09-07 2022-09-14 건국대학교 산학협력단 락토바실러스 플란타룸 200655 균주 사균체를 포함하는 면역증강용 조성물
WO2022065848A1 (ko) * 2020-09-23 2022-03-31 피비엘바이오랩 주식회사 신규 유산균 및 이의 용도
KR20220125785A (ko) 2021-03-05 2022-09-14 주식회사 지에프퍼멘텍 리포테이코산을 지표물질로 포함하는 김치 유래 유산균 사균체의 인체 유래 효소분해능 및 면역 기능 증진용 조성물
KR20220143231A (ko) * 2021-04-15 2022-10-25 (주) 바이텍 상황버섯 유래 균주의 사균체 분말 제조방법, 사균체 분말 및 이의 용도
KR102606626B1 (ko) 2021-04-15 2023-11-30 (주)바이텍 상황버섯 유래 균주의 사균체 분말 제조방법, 사균체 분말 및 이의 용도
KR20220162284A (ko) 2021-06-01 2022-12-08 주식회사 메디뉴트롤 락토바실러스 플란타룸 v135 균주의 사균체를 유효성분으로 함유하는 알코올 및 아세트알데히드 분해효소의 활성 증가용 조성물
KR102445903B1 (ko) * 2021-07-06 2022-09-22 롯데제과 주식회사 혈당 상승 저해 및 스트레스 조절 효과가 우수한 열처리된 락토바실러스 플랜타럼 lrcc5314 균주 및 용도

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101919938B1 (ko) 신규한 락토바실러스 플란타룸 lm1004의 사균체를 유효성분으로 포함하는, 면역 증강용 조성물
KR101768678B1 (ko) 한국 장수마을에서 개발된 건강기능성이 우수한 비피도박테리움 롱검 아종 인판티스 bi9988
KR101736033B1 (ko) 항비만 활성을 가지는 락토바실러스 사케아이
KR101705548B1 (ko) 아피오스 추출물 또는 아피오스 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강용 조성물
KR20120100608A (ko) 면역관련 및 염증성 질환의 예방 및 치료 활성을 갖는 신규한 락토바실러스 사케이(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉ) Ｋ101
US20170368089A1 (en) Composition for preventing or treating colitis
US20210353697A1 (en) Composition comprising molokhia extract as active ingredient for improving gut microbiome or for alleviating, preventing, or treating intestinal inflammation, leaky gut syndrome, obesity, or metabolic disease
KR20190002036A (ko) 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식을 위한 프리바이오틱스 및 이의 용도
KR20160016280A (ko) 타히보 추출물 또는 인삼잎 추출물을 포함하는 면역 증강용 조성물
KR100865075B1 (ko) 장내 정착성이 우수한 신규 락토바실러스속 ｓｍ1 균주 및이들이 생산하는 생균제
KR20200070081A (ko) 충치 억제 활성을 갖는 락토바실러스 살리바리우스를 포함하는 조성물
KR20210056771A (ko) 새싹귀리 추출물을 포함하는 면역증강 조성물
KR101534498B1 (ko) 단박 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증 질환의 예방 및 치료용 조성물
KR102191363B1 (ko) 꾸지뽕잎 추출물을 포함하는 헬리코박터 파이로리 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물
KR20190014305A (ko) 베타 글루칸과 유산균을 유효성분으로 포함하는 과민성 면역질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20220091428A (ko) 류코노스톡 시트리움 유래 세포밖 소포체를 유효성분으로 포함하는 지방간 개선, 예방 또는 치료용 조성물
KR101420268B1 (ko) 오배자 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 대장염 예방 또는 치료용 조성물
KR20200070080A (ko) 충치 억제 활성을 갖는 락토바실러스 루테리 mg505 를 포함하는 조성물
KR20100055952A (ko) 감잎으로부터 추출된 헬리코박터 파이로리균에 대한 항균성추출물
KR101862282B1 (ko) 황칠나무 및 가시오가피로 구성된 복합생약 추출물을 함유한 면역증강용 조성물
KR102540263B1 (ko) 인삼 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 장내 미생물 균총 개선용 조성물
KR101376629B1 (ko) 신규한 락토바실러스 아리조넨시스 ｂｃｎｕ 9200 균주 및 이를 유효성분으로 포함하는 생균제 조성물
KR101081460B1 (ko) 항알러지, 항염증 또는 항천식 활성을 가진 류코노스톡 메센테로이드 ｅ―１을 함유하는 조성물
KR102626672B1 (ko) 락토바실러스 헬베티커스 ckdb001 균주를 포함하는 알코올성 간질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물
KR102586723B1 (ko) 꽃새우 추출물을 함유하는 염증성 장질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물