CN102584858B

CN102584858B - 乳酸左旋尤利沙星晶体及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN102584858B
Application number: CN201110461859.9A
Authority: CN
Inventors: 彭锋; 应军; 王玉平; 倪庆纯; 林丽薇; 郑浩君; 陈洁斌; 冯颂延
Original assignee: GUANGZHOU GENERAL PHARMACEUTICAL RESEARCH INSTITUTE
Current assignee: GUANGZHOU GENERAL PHARMACEUTICAL RESEARCH INSTITUTE
Priority date: 2011-12-31
Filing date: 2011-12-31
Publication date: 2014-11-12
Anticipated expiration: 2031-12-31
Also published as: CN102584858A

Abstract

本发明提供一种乳酸左旋尤利沙星晶体，所述晶体使用Cu-Kα辐射的X-射线粉末衍射图具有以下以2θ角度表示的峰：5.1±0.2°、10.3±0.2°和25.6±0.2°。本发明还提供所述晶体的制备方法、包含所述晶体的药物组合物、以及所述晶体和药物组合物的制药用途。本发明提供的晶体具有良好的再现性，且制备方法简单，快速。实验证明，所述晶体在溶解度、稳定性、吸湿性以及体内治疗效果方面都优于该化合物的现有晶体，还可制备成多种剂型使用，具有良好的临床应用潜力。

Description

乳酸左旋尤利沙星晶体及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及乳酸左旋尤利沙星的新晶体、其制备方法，以及包含所述新晶体的药物组合物以及它们在制备用于治疗感染性疾病的药物中的用途。

背景技术

乳酸左旋尤利沙星是一种氟喹诺酮类药物，其化学名为：乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸(结构式1)，其杀菌机理是以细菌的DNA为作用靶点，通过阻碍DNA拓扑异构酶使细菌DNA无法形成超螺旋，进一步造成染色体的不可逆损害，导致细菌细胞无法分裂繁殖。

相比于消旋体，左旋尤利沙星的活性更强，而且毒性降低，因此生物医药领域应用前景广阔。乳酸左旋尤利沙星的水溶性良好，可以注射给药，迅速达到抗菌的作用。

中国发明专利申请200410030643.7公开了一种消旋体尤利沙星乳酸盐，熔点216～219℃，但并未公开其是否为晶体，更未给出任何关于晶体的数据。依据该文献公开的方法制备的消旋体尤利沙星乳酸盐。在DSC中100℃以下的吸热峰是因为样品中吸附的水份，在约200℃分解。在红外光谱在1698cm^-1，1629cm^-1，1605cm^-1，1501cm^-1，1396cm^-1和1257cm^-1有峰。在XRD中在下述2θ角处具有衍射峰：5.5，9.4，10.5，11.1，17.6，18.0，19.0，22.9，24.7和26.9(°)。

中国发明专利申请200810027211.9公开了一种乳酸左旋尤利沙星，旋光度[α]_D ²⁰为-112.5～-118.2°，红外光谱特征峰为IR 1698cm^-1，1629cm^-1，1605cm^-1，1501cm^-1，1396cm^-1和1257cm^-1。我们依照该文献方法制备的乳酸左旋尤利沙星的XRD、DSC和红外光谱具有如图1-3的所示的XRD、DSC和红外光谱，其同上述中国发明专利申请200410030643.7中公开的消旋体尤利沙星乳酸盐具有相同的XRD、DSC和红外光谱。在本文中，我们将乳酸左旋尤利沙星的这种晶体称为晶体A。

然而，上述乳酸左旋尤利沙星晶体A在制药工业领域具有诸如以下的明显缺点：稳定性差，体现在吸潮性强，并导致含水量不够稳定，进而导致制剂过程中化学计量不准确，以及性质不稳定，容易产生分解产物；静电性强，从而导致一些制剂工艺操作步骤(如过筛、装瓶等)不易操作。

因此，现有技术中还需要提供稳定性更好和/或便于制剂操作的乳酸左旋尤利沙星新晶体。

发明内容

本发明人通过对乳酸左旋尤利沙星结晶特性的研究，出乎意料地发现了乳酸左旋尤利沙星的新晶体(即下文所述的晶体C，或称C晶)，所述晶体具有更好的稳定性，并且更利于制剂工艺过程中的操作。

本发明提供了乳酸左旋尤利沙星的一种新晶体(即晶体C)，以及所述晶体C的制备方法、包含所述晶体C的药物组合物，以及所述晶体C和该药物组合物在制备用于治疗感染性疾病的药物中的用途。

具体而言，

本发明的技术方案如下：

一方面，本发明提供一种乳酸左旋尤利沙星晶体(即晶体C)，所述晶体使用Cu-Kα辐射的X-射线粉末衍射图具有以下以2θ角度表示的峰：5.1±0.2°、10.3±0.2°和25.6±0.2°。

优选地，所述晶体使用Cu-Kα辐射的X-射线粉末衍射图还具有以下以2θ角度表示的峰：9.3±0.2°、17.4±0.2°和22.2±0.2°；进一步优选地，所述晶体使用Cu-Kα辐射的X-射线粉末衍射图如图4所示。

还可进一步或单独通过DSC图谱确认和表征晶体C，所述DSC图谱在约125～135℃有吸热峰，在约200℃分解，与TG曲线相符。或者，所述晶体C还可进一步或单独通过红外光谱加以确认和表征，所述红外光谱(KBr压片法)在以下波数处具有吸收峰：1711cm^-1，1631cm^-1，1601cm^-1，1504cm^-1，1396cm^-1和1259cm^-1。

另一方面，本发明提供了上述乳酸左旋尤利沙星晶体(晶体C)的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

1)将乳酸左旋尤利沙星加至甲醇水溶液中并加热；和

2)使溶液冷却，搅拌析晶，分离得到晶体并干燥。

其中，所述步骤1)中的甲醇水溶液的浓度(体积/体积)为40％～80％，优选50％～70％，进一步优选60％；本文中使用的甲醇水溶液和丙酮水溶液的浓度都以体积/体积计。

优选地，所述步骤1)中的甲醇水溶液与乳酸左旋尤利沙星的比率为0.5～35ml∶1g，优选2～30ml∶1g，进一步优选8～25ml∶1g；

优选地，所述步骤1)中的加热为回流加热；优选地，所述步骤1)中的加热为回流加热1分钟～2小时，例如回流加热30分钟；

优选地，在所述步骤1)中，加热时甲醇水溶液中加入活性炭，并在加热后滤除；进一步优选地，加热时甲醇水溶液中加入乳酸左旋尤利沙星重量的5％～6％的活性炭，并在加热后滤除。

根据本发明的具体实施方式，所述步骤1)包括：

以1g乳酸左旋尤利沙星：24ml 60％的甲醇水溶液：0.05g～0.06g活性炭的比例，混合所述乳酸左旋尤利沙星、60％的甲醇水溶液和活性炭，并回流加热混合物30分钟，然后滤除活性炭。

根据本发明的具体实施方式，在所述步骤2)中，在10～30℃下使溶液冷却，析晶；

根据本发明的具体实施方式，所述步骤2)中，在室温下使溶液冷却，搅拌析晶，分离得到晶体后在60℃真空干燥；

任选地，所述步骤2)还包括析晶前加入所述乳酸左旋尤利沙星晶体(晶体C)作为晶种，以促进结晶。

又一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含上述乳酸左旋尤利沙星晶体C，以及任选的药学上可接受的赋形剂和/或载体。

优选地，所述药物组合物为注射剂、注射用粉末或注射冻干粉的形式。

再一方面，本发明提供上述乳酸左旋尤利沙星晶体和/或包含上述晶体的药物组合物在制备用于治疗感染的药物中的用途。其中所述药物还可包含其他抗感染药物活性化合物。

本发明所述的其他抗感染药物活性化合物包括抗生素、抗病毒剂、抗菌药物(如喹诺酮类药物)、抗原虫药物等，其中抗生素类包括β-内酰胺类，氨基糖苷类，大环内酯类，四环素类，氯霉素类，利福霉素类等抗生素，例如头孢唑林、头孢拉定、头孢哌酮、头孢曲松、头孢呋辛，青霉素、苄星青霉素、青霉素G、青霉素V、甲氧苯青霉素、双氯西林、氟氯西林等。对于所述其他抗感染药物活性化合物，本领域技术人员可根据技术常识并结合实际需要加以选择。

需要指出的是，本发明的乳酸左旋尤利沙星晶体可单独通过上述X-射线粉末衍射图加以确认，或通过X-射线粉末衍射的上述特征峰加以确认。另一方面，本发明的乳酸左旋尤利沙星晶体的差示扫描量热法(DSC)或红外光谱(IR)也可用于单独表征所述乳酸左旋尤利沙星晶体。当然，也可以使用所述X-射线粉末衍射数据并结合DSC和/或IR数据进行表征。优选地，采用所述X-射线粉末衍射数据并结合DSC和/或IR数据进行表征。

需要说明的是，对于本发明的乳酸左旋尤利沙星晶体的红外光谱(IR)而言，实际测量值可与前述给出的峰的波数值具有不超过±1cm^-1的误差。

为制备本发明的药物组合物，可将有效量的所述乳酸左旋尤利沙星晶体与可药用载体组合于充分混合的混合物中，所述载体可采取各种各样的形式，并且取决于所需施用的制剂的形式，例如适于口服、直肠、经皮、胃肠外特别是注射施用或通过吸收施用的剂型。例如，可制备其中载体包含盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合物的注射溶液。可制备其中可使用合适的液体载体、助悬剂等的注射混悬液。还包括旨在在使用前不久转化成液体形式制剂的固体形式制剂。这些组合物和以各种方式施用，例如作为透皮贴剂、作为软膏剂等。

本文所用的“药学上可接受的赋形剂或载体”或“可药用赋形剂或载体”包括任何和所有的溶剂、分散介质、等渗剂、防腐剂、增溶剂、包衣材料、抗菌剂和抗真菌剂、吸收延缓剂等。这些用于药物活性物质的介质和试剂的用途是本领域众所周知的。例如，对于注射剂而言，所述载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇以及液体聚乙二醇等，其合适的混合物)以及植物油的溶剂或分散介质。除了任何常规介质或试剂与活性成分不相容的情况以外，可以预计其在本发明治疗组合物中的用途。

本发明的乳酸左旋尤利沙星晶体或者包含该晶体的所述药物组合物特别适于用于配制呈供注射或输注的药物剂型。其可包括无菌水溶液或分散系或含有适于即时制备无菌注射溶液或输注溶液或分散系的无菌粉末。在所有情形下，最终的剂型都应该是无菌流体并且在生产和贮存的条件下稳定的。所述液体载体或赋形剂可以是包含例如以下成分的溶剂或液体分散介质：水，乙醇，多元醇(例如甘油、乙二醇、液体聚乙二醇等)，植物油，无毒的甘油酯，及其合适的混合物。可例如通过形成脂质体、在分散系情况下通过保持所需的颗粒大小或者通过使用表面活性剂来保持合适的流动性。

对本发明而言，特别合适的药物剂型是各种注射剂型，例如注射水溶液、不同容量的输液，特别优选的注射剂型是注射用粉末，尤其是灭菌注射用粉末。在一个特别优选的实施方案中，所述注射用粉末是注射用冻干粉末。药学领域的普通技术人员可根据常规技术选择合适的药学可接受的各种赋形剂和载体来制备所需的药物组合物。

综上所述，本发明提供了乳酸左旋尤利沙星的新晶体，这种晶体形式完全区别于现有已公开的该化合物的晶体形式。经大量实验证明，该新晶体具有良好的再现性，且制备方法简单，快速，析晶后通过简单过滤和干燥即可获得。此外，实验证明，这种新晶体在溶解度、稳定性、吸湿性以及体内治疗效果方面都优于该化合物的现有晶体或与其相似，还可制备成多种剂型使用，具有良好的临床应用潜力。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1是乳酸左旋尤利沙星晶体A的X-射线粉末衍射图。

图2是乳酸左旋尤利沙星晶体A的DSC图谱。

图3是乳酸左旋尤利沙星晶体A的红外光谱图。

图4是乳酸左旋尤利沙星晶体C的X-射线粉末衍射图。

图5是乳酸左旋尤利沙星晶体C的DSC图谱。

图6是乳酸左旋尤利沙星晶体C的红外光谱图。

图7是乳酸左旋尤利沙星晶体C的TG图谱。

具体实施方式

通过以下详细描述，本发明的其它特征和优势将显而易见。然而，应当理解，虽然所述详细描述和具体实例表明了本发明优选的实施方案，但它们仅是以举例说明的方式给出的，因为对于本领域技术人员而言，根据这些详细描述，在本发明精神和范围内的各种变化和改变将显而易见。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。

本发明中图谱测定所用的仪器和测定条件如下：

XRD：

D/max-3A X射线仪，Cu靶Ka1，电压25mA，发射狭缝1°，防散射狭缝1°，接收狭缝0.3mm、0.3mm，2θ范围3°-50°。

DCS：

德国NETZSCH公司DSC204差示扫描量热仪；检测条件：气氛N₂，20ml/min升温至245℃，记录升温曲线；检测样品质量：约2.00-3.00mg(使用铝质样品盘)。

热重分析：

德国NETZSCH公司的TG209F1热重分析仪；检测条件：气氛N₂，20ml/min；扫描程序：室温～300℃；升温速率：10℃/min。

红外光谱：

FT-IR NICOLET 6700，溴化钾压片法，参照2005年版《中华人民共和国药典》的《药品红外光谱集》的说明。

具体而言，本发明采用的制备方法可以示例性地包括：

1、(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸(左旋尤利沙星)的制备

将105克消旋尤利沙星溶解于1500ml的二甲基亚砜中，搅拌下滴加405ml D-酒石酸(27克)的二甲基亚砜溶液，出现浑浊和沉淀，室温下搅拌20小时；过滤，所得固体在真空下干燥得86克，将此固体于二甲基亚砜中重结晶纯化，得到(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸-D-酒石酸盐37克。将此盐加入水成悬浮液，搅拌下用2％NaOH水溶液调节pH值到7～8，沉淀过滤干燥，得到(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-(7-1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸24.5克，光学纯度e.e.＝98％。

2、乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸(乳酸左旋尤利沙星)A晶体的制备(参照中国发明专利申请200810027211.9方法制备)

在室温下，向反应瓶中加入30ml水，搅拌下加入乳酸1.6克，再加入5克(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，搅拌60分钟后得到基本澄清的溶液，加入(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸重量的5％的活性炭脱色30分钟后过滤，滤液于搅拌下滴加无水乙醇200ml，此时析出固体，继续搅拌2小时，过滤，滤饼粉碎，在50℃真空干燥，得到3.6克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸的A晶。

3、乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸B晶的制备

在室温下，向反应瓶中加入水，搅拌下加入乳酸，再加入(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，加入(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸重量的5％至6％的活性炭50℃保温搅拌30分钟脱色后过滤，滤液减压蒸去溶剂，加入乙醇，过滤，固体真空60℃干燥，得到乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸的粗品。

乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸粗品，混合活性炭，在50％的丙酮水溶液回流30分钟后过滤，在15℃放置析出晶体，过滤，60℃真空干燥，得到乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸B晶。

4、乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸C晶的制备

乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸粗品，混合活性炭，在60％的甲醇水溶液水中回流30分钟后过滤，在室温下搅拌析出晶体，过滤，60℃真空干燥，得到乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸C晶。

乳酸左旋尤利沙星A晶和C晶可以转化为B晶，A晶和B晶也可以转化为C晶，转化方法同上述方法，只是用相应晶体样品代替乳酸左旋尤利沙星粗品。

下面结合具体实施例来阐述本发明的乳酸左旋尤利沙星晶体B和C及其制备方法。

实施例1

乳酸左旋尤利沙星晶体A的制备(参照中国发明专利申请CN200810027211.9方法制备)

在室温20℃下，向反应瓶中加入30ml水，搅拌下加入乳酸2.1克，再加入5克(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，搅拌60分钟后得到基本澄清的溶液，加入(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸重量的5％的活性炭脱色30分钟后过滤，滤液于搅拌下1小时内滴加无水乙醇200ml，此时析出固体，继续搅拌2小时，固体过滤，60℃真空干燥，得到4.0克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸。

分别以X射线粉末衍射法、差示扫描量热法和红外光谱法表征获得的化合物，其表征图谱分别见图1至图3，即A晶。

实施例2

乳酸左旋尤利沙星晶体B的制备

在室温下，向反应瓶中加入150ml水，搅拌下加入乳酸14.7克，再加入35克(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，加入(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸重量的5％的活性炭50℃保温搅拌30分钟脱色后过滤，滤液减压蒸去溶剂，加入100ml乙醇，过滤，收集固体真空60℃干燥，得到34克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸的粗品。

5克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸粗品，0.25克活性炭，100ml 50％的丙酮水溶液回流30分钟后过滤，在15℃放置析出晶体，过滤，60℃真空干燥，得到4.6克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸。

分别以X射线粉末衍射法、差示扫描量热法、红外光谱法和热重分析法表征获得的化合物，即为晶体B。

实施例3

乳酸左旋尤利沙星晶体C的制备

5克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸粗品，0.25克活性炭，120ml 60％的甲醇水溶液回流30分钟后过滤，滤液在室温下搅拌析出晶体，过滤，60℃真空干燥，得到4.0克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸。

分别以X射线粉末衍射法、差示扫描量热法、红外光谱法和热重分析法表征获得的化合物，其表征图谱分别见图4至图7，即为晶体C。

实施例4晶体转化

A晶转化为C晶

5克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸A晶，120ml 60％的甲醇水溶液回流溶解，溶液放冷到室温下搅拌充分结晶析出，过滤，60℃真空干燥，得到4.05克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，经表征鉴定为C晶。

乳酸左旋尤利沙星A、B和C三种晶体间可以相互转化，在上述方法中，用相应晶体样品作原料，应用适当的溶液回流，过滤后冷却析晶，即可得目标的晶体。

实施例5注射剂的制备

取乳酸左旋尤利沙星B晶或C晶251.2克(相当于左旋尤利沙星200克)，加入20升配料桶中，加水8L，搅拌至溶清，加入针用活性炭，加热升温到60℃，保温搅拌10分钟，冷却至30℃，过滤脱碳，补加注射用水至10L，再经0.22μm的滤膜精滤，灌装，压盖，110℃灭菌30分钟。

本例制备的输液可灌装成50mg∶2.5ml；100mg∶5ml的规格(按主药左旋尤利沙星计)。可肌注直接使用，或用氯化钠输液或葡萄糖输液稀释静脉滴注使用。

实施例6灭菌注射用粉的制备

灭菌注射用乳酸左旋尤利沙星(C晶)的制备

50克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，3克针用活性炭，1200ml 60％的甲醇水溶液回流30分钟后过滤，再经0.22μm的滤膜精滤，在室温下搅拌析出晶体，过滤，固体60℃真空干燥，得到41克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸C晶。

灭菌注射用乳酸左旋尤利沙星(B晶)的制备

50克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸，3克针用活性炭，1000ml 50％的丙酮水溶液回流30分钟后过滤，再经0.22μm的滤膜精滤，在15℃放置析出晶体，过滤，60℃真空干燥，得到47克乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸B晶。

实施例7注射用冻干粉的制备

取乳酸左旋尤利沙星B晶或C晶125克(相当于左旋尤利沙星100克)，加入1500毫升加水，加入针用活性炭，加热升温到60℃，保温搅拌10分钟，冷却至30℃，过滤脱碳，补加注射用水配成每3毫升含主药(左旋尤利沙星)100毫克的溶液，再经0.22μm的滤膜精滤除菌。

将最后的滤液无菌灌装于5ml西林瓶中，每瓶1.5ml(含主药左旋尤利沙星50mg)，盖上瓶塞并保留出气口，然后进行冷冻干燥：先将药品从常温降至-20℃，保温40分钟，继续降温至-40℃的温度条件下预冻4小时，然后将药品从-40℃升温至-25℃，保温8小时，然后在-25～10℃压力10～12Pa条件下减压真空干燥，这过程总共时间为20小时，升温至35℃压力10～12Pa干燥6小时。最后关闭真空泵，充氮气，压塞，取出西林瓶，扎盖即得含主药左旋尤利沙星50mg/瓶的乳酸左旋尤利沙星冻干粉针剂。得到的乳酸左旋尤利沙星冻干粉针中的水份小于0.5％。

实施例8溶解性试验

样品：分别取乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸的A、B、C三种晶体样品。

方法：参照2005年版《中华人民共和国药典》凡例中药品溶解度测定方法，称取样品适量，加入25℃±2℃的一定量的水中，每隔5分钟摇匀30秒，30分钟观察溶解情况，如无目视可见的固体颗粒时，即视为完全溶解；如观察到未完全溶解，则添加水直到完全溶解，经过计算可得到各个样品的溶解度。结果见下表1。

表1水溶解试验结果

样品名称	溶解度(mg/ml)
		A	116
B	114
		C	121

结果表明：乳酸(S)-6-氟-1-甲基-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-1H，4H-[1，3]硫氮杂环丁烷并[3，2-a]喹啉-3-羧酸的A、B、C三种晶体水溶性相似。

实施例9稳定性试验

将乳酸左旋尤利沙星的A、B、C晶三个样品，在温度60℃±2℃、相对湿度90％±5％的条件下避光放置30天。干燥恒重后用高效液相法测定零时间和30天样品的杂质和含量，含量测定方法使用外标法，以尤利沙星为对照(乳酸左旋尤利沙星无水物的理论含量79.50％)，并记录样品外观。

可见，在温度60℃±2℃、相对湿度90％±5％的条件下避光放置，B、C晶体的稳定性优于A晶。

表2稳定性试验结果

实施例10吸湿性试验

乳酸左旋尤利沙星的A、B、C晶三个样品于真空80℃干燥恒重，计算失重量，DSC和XRD同恒重前一样。恒重后的样品在25±2℃下，分别在湿度为75％±5％(条件一)及90％±5％(条件二)两个条件下放置24小时，计算增重量。情况如下表3。

表3吸湿性试验结果

B、C晶在两种条件下吸湿增重基本一致，可见B、C晶的含水量比A晶更稳定。

实施例11乳酸左旋尤利沙星A、B、C晶体对大肠埃希氏菌感染小鼠的体内保护作用

本研究以NIH小鼠为试验对象，试验菌株自医院临床分离得到。动物分成8组(乳酸尤利沙星试药7组)，各组动物给予试验药的剂量为mg/kg体重(以左旋尤利沙星计)，小鼠腹腔注射应用菌液10分钟后，皮下注射给药。试验期间小鼠按正常条件饲养，观察给药后小鼠48小时内的生存情况。

ED₅₀的计算方法采用bliss法的数据处理、计算而得。

结果如下表4至表7所示，乳酸左旋尤利沙星A、B和C三种晶体治疗大肠埃希氏菌感染小鼠的ED₅₀分别为0.50456mg/kg、0.51131mg/kg、0.512mg/kg，无显著性差别。试验表明，在小鼠中，乳酸左旋尤利沙星对大肠埃希氏菌所致感染有明显治疗效果。乳酸尤利沙星治疗大肠埃希氏菌感染小鼠的ED₅₀为1.22093mg/kg，与乳酸左旋尤利沙星A、B和C三种晶体的ED₅₀有显著性差别，乳酸左旋尤利沙星对大肠埃希氏菌所致感染的治疗效果明显优于乳酸尤利沙星。

表4乳酸尤利沙星对大肠埃希氏菌感染小鼠的体内保护作用

表5乳酸左旋尤利沙星A晶对大肠埃希氏菌感染小鼠的体内保护作用

表6乳酸左旋尤利沙星B晶对大肠埃希氏菌感染小鼠的体内保护作用

表7乳酸左旋尤利沙星C晶对大肠埃希氏菌感染小鼠的体内保护作用

Claims

1.一种乳酸左旋尤利沙星晶体，所述晶体使用Cu-Kα辐射的X-射线粉末衍射图具有以下以2θ角度表示的峰：5.1±0.2°、10.3±0.2°、25.6±0.2°、9.3±0.2°、17.4±0.2°和22.2±0.2°，并且

所述X-射线粉末衍射图如图4所示。

2.一种制备根据权利要求1所述的乳酸左旋尤利沙星晶体的方法，所述方法包括以下步骤：

1)将乳酸左旋尤利沙星加至甲醇水溶液中并加热；和

2)使溶液冷却，搅拌析晶，分离得到晶体并干燥。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中的甲醇水溶液的浓度为40％～80％。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述浓度为50％～70％。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述浓度为60％。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中的甲醇水溶液与乳酸左旋尤利沙星的比率为0.5～35ml：1g。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述比率为2～20ml：1g。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述比率为8～25ml：1g。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中的加热为回流加热。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中的加热为回流加热1分钟～2小时。

11.根据权利要求9或10所述的方法，其特征在于，所述加热为回流加热30分钟。

12.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在所述步骤1)中，加热时甲醇水溶液中加入活性炭并在加热后滤除。

13.根据权利要求2或12所述的方法，其特征在于，加热时甲醇水溶液中加入乳酸左旋尤利沙星重量5％～6％的活性炭并在加热后滤除。

14.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1)包括：

以1g乳酸左旋尤利沙星：24ml60％的甲醇水溶液：0.05g～0.06g活性炭的比例，混合所述乳酸左旋尤利沙星、60％的甲醇水溶液和活性炭，并回流加热混合物30分钟，然后滤除活性炭。

15.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在所述步骤2)中，在10～30℃下使溶液冷却，析晶。

16.根据权利要求2或15所述的方法，其特征在于，在所述步骤2)中，使溶液在室温下冷却，搅拌析晶，分离得到晶体后在60℃下真空干燥。

17.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤2)包括析晶前加入所述乳酸左旋尤利沙星晶体作为晶种，以促进结晶。

18.一种药物组合物，其包含根据权利要求1所述的乳酸左旋尤利沙星晶体，以及任选的药学上可接受的赋形剂和/或载体。

19.根据权利要求18所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为注射剂或注射用粉末的形式。

20.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于，所述注射用粉末为注射冻干粉。

21.根据权利要求1所述的乳酸左旋尤利沙星晶体和/或根据权利要求18至20中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗感染的药物中的用途。

22.根据权利要求21所述的用途，其中所述药物还包含其他抗感染药物活性化合物，所述其他抗感染药物活性化合物为抗病毒剂、抗菌药物或抗原虫药物。

23.根据权利要求22所述的用途，其特征在于，所述抗菌药物是抗生素。

24.根据权利要求21或22所述的用途，其特征在于，所述其他抗感染药物活性化合物选自喹诺酮类、β-内酰胺类，氨基糖苷类，大环内酯类，四环素类，氯霉素类和利福霉素类中的一种或多种。

25.根据权利要求24所述的用途，其特征在于，所述其他抗感染药物活性化合物选自头孢唑林、头孢拉定、头孢哌酮、头孢曲松、头孢呋辛，青霉素、苄星青霉素、青霉素G、青霉素V、甲氧苯青霉素、双氯西林和氟氯西林中的一种或多种。