CN102578116A - 一种含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂，制得的该植物源增效复配杀菌剂由苦参碱和蛇床子素为主要成分并加入助剂复配而成，制剂形态是环保型乳油、微乳剂、水剂或可溶性液剂；制剂中含有苦参碱0.1％～20％，蛇床子素0.1％～20％，其余为助剂。主要应用于防治霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病。该植物源增效复配杀菌剂不含任何化学农药成分，在环境中易于降解，无环境污染及残毒之虑，对人、畜、环境安全，病菌对其不易产生抗药性；在瓜、果、蔬菜、茶叶、药材等出口创汇的主要农副产品上具有极大应用推广价值，是理想的新型无公害杀菌剂。

Description

一种含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂及其制备方法

技术领域

本发明属于农药技术领域，具体来说是一种以苦参碱和蛇床子素两种植物源物质为活性成分的增效杀菌剂及其制备方法，主要应用于防治瓜、果、蔬菜及茶树上的霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病等农业病害。

背景技术

霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病等是瓜、果、蔬菜上的主要病害，危害范围广，在防治上难度较大。目前防治这些病害的药剂主要是化学杀菌剂，然而长期大量的化学用药导致产生了抗药性、环境污染、危害人类健康等问题的出现；另外，农产品出口屡遭“绿色壁垒”的冲击，致使国家不得不限制许多化学农药的使用。从天然资源宝库中寻找杀菌活性物质，正在成为新型杀菌剂创制的重要途径和研究热点。特别是通过多种成份的科学复配之后，植物源杀菌活性物质的效果可显著提高。

苦参碱(matrine)是从中草药植物苦参的根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成的，是生物碱，一般为苦参总碱，其主要成分有苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱等多种生物碱，以苦参碱、氧化苦参碱含量最高。其对蔬菜、茶树、枸杞上的霜霉病、灰霉病、黑星病、炭疽病、软腐病、茎基腐病等多种病害有较好防治效果；室内生测和田间药效测定结果表明，苦参碱对葡萄霜霉病、番茄灰霉病、辣椒炭疽病等均有很好的防治效果。

蛇床子，别名野胡萝卜子，为伞形科植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cuss.的干燥成熟果实。蛇床子素主要用于防治十字花科蔬菜蚜虫、菜青虫以及贮粮害虫。蛇床子素还应用于防治水稻稻曲病、黄瓜霜霉病、南瓜病毒病、黄瓜白粉病菌等作物病害。

根据申请人所作的资料检索，目前苦参碱与蛇床子素复配或以苦参碱、蛇床子素复配为基础的混配杀菌剂主要有：王政国等申请了小檗碱·苦参碱杀菌杀虫水剂的专利，公开号为CN1401235，该发明主要用含有小檗碱0.5％～2.5％和苦参碱0.1～2.0％的组合物防治粘虫等害虫和杀灭细菌等。张恒山等申请了苦参碱杀菌水剂及其生产工艺的专利，公开号为CN1421140，该发明公开了一种苦参碱杀菌水剂及其生产工艺，其工艺特征为首先进行中草药洗涤，然后进行切片，接着进行提取，随后进行提取液的浓缩，再进行复配，经过检验得到所述苦参碱杀菌水剂产品；产品特征为：苦参提取液10～20％、柴胡提取液2～12％、苦楝子提取液10～30％、胡椒提取液5～15％、鱼藤提取液3～13％、助剂15～25％、大蒜提取液13～23％。申书银等申请了0.3％苦参碱乳油杀菌剂的加工方法的专利，专利公开号为CN1390461，该发明涉及一种0.3％苦参碱乳油杀菌剂的加工方法，它由中草药苦参、藜芦、朝天椒加工制成。其加工方法为将各味中草药粉碎，再将粉碎后的中草药按配比要求称重，然后将称重后的中草药、生石灰、水按31-44∶1∶2的重量份数比投入生化池中进行生化处理，再经醇提、浓缩后加入乳化剂制成产品。张文龙申请了苦参碱水剂植物杀菌剂及其制备方法的专利，专利公开号为CN101233867，该发明公开了一种苦参碱水剂植物杀菌剂及其制备方法，包括含有苦参碱的中药提取液17-25份，乳化剂10-20份，渗透剂4-8份，抗氧化剂0.1份，去离子水48-56份，所述含有苦参碱的中药提取液为按重量份数由苦参30-35份，山豆根20-35份，茶籽10-15份，胡黄藤12-19份，山苍7-10份，黄柏6-9份，厚朴5-9份混合后的提取液。该杀菌剂中含有约2.6％的超高含量苦参碱，对杀灭梨黑星病有特效，渗透性强，有利于植物的吸收，高效、低毒、无残留、无污染、无抗药性。王锐等申请了一种含苦参碱和腐植酸的组合物杀菌剂及其制备方法的专利，专利公开号为CN102283252A，该发明公开了一种含苦参碱和腐植酸的组合物杀菌剂，采用植物源和矿物源等纯天然成分原料，对苹茶树腐烂病防治有效，符合绿色或有机生产标准要求。范永坚等申请了蛇床子素及其复配组合物防治作物白粉病的专利，专利公开号为CN1586198，该发明公开了蛇床子素单剂及其复配组合物在农业领域应用，特别是针对作物白粉病防治的应用研究。该发明提供了蛇床子素在防治作物白粉病上的应用，还提供了专用于防治作物白粉病的农药组合物，它包括(A)蛇床子素和(B)一种抑制真菌麦角甾醇合成的杀菌剂，如选自腈菌唑、三唑酮、戊唑醇或丙环唑四种成分之一的成分，并且两种成分的重量比为A/B＝1∶1～1∶20，更优选地为，1∶1～1∶10。它特别适用于防治黄瓜、南瓜、草莓、蚕豆和葡萄白粉病。石志琦等申请了蛇床子素及其复配物在制备防治水稻稻曲病农药中的发明专利，专利公开号为CN1973626，该发明公开了蛇床子素在制备防治水稻稻曲病农药中的应用以及蛇床子素和腈菌唑、或井冈霉素组成的复配组合物在制备防治水稻稻曲病农药中的应用。

王英姿申请了蛇床子素与苦参碱的复配杀虫剂及其应用的专利，专利公开号为CN101589716，该发明涉及由蛇床子素与苦参碱组成的复配杀虫剂，尤其用于防治葡萄绿盲蝽的应用研究。复配组合物中蛇床子素和苦参碱两种成分的重量比为4∶1～1∶4，优选比例为1∶1～1∶4，最佳比例为1∶2。

纵观上述专利，大都是以苦参碱或蛇床子素与植物提取物或农药进行混配，仅有王英姿的专利有蛇床子素和苦参碱两种物质，但主要用途为防治葡萄绿盲蝽，而将苦参碱和蛇床子素复配应用于植物病原菌上的专利和产品迄今未见公开报道。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种以植物源物质苦参碱和蛇床子素为杀菌活性物质及其增效复配制剂的制备方法，主要应用于防治瓜、果、蔬菜及茶树上的霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病等农业病害。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案得以实现：

一种含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂，其特征在于，制得的该植物源增效复配杀菌剂由苦参碱和蛇床子素为主要成分并加入助剂复配而成，制剂形态是环保型乳油、微乳剂或水乳剂；其中：

所述的环保型乳油由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，乳化剂：5～15％，增效剂：0～20％，余量为有机溶剂，原料的重量百分比之和为100％；

所述的微乳剂由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，有机溶剂：0～20％，表面活性剂：5～15％，增效剂：0～20％，防冻剂：4～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％；

所述的水剂由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，有机溶剂：0～20％，表面活性剂：5～20％，增效剂：0～20％，防冻剂：0～10％，增稠剂：0.2～1％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％。

所述的可溶性液剂由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，表面活性剂：5～20％，增效剂：0～20％，余量为有机溶剂，原料的重量百分比之和为100％。

所述的有机溶剂为乙酸乙酯、环己酮、油酸甲酯、乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合物；

所述的乳化剂是烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、斯潘系列、吐温中的一种或几种的混合物；

所述的表面活性剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、蓖麻油与环氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

所述的增效剂为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

所述的防冻剂为乙二醇或丙二醇；

所述的增稠剂为聚乙烯醇、黄原胶、羧甲基纤维素钠、硅酸铝镁中的一种或几种的混合物。

上述含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂的制备方法，其特征在于，制得的制剂形态是环保型乳油、微乳剂、水剂或可溶性液剂；其中：

环保型乳油的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、乳化剂、有机溶剂、增效剂混合，在反应釜中搅拌均匀，经过质量检验即得成品；

微乳剂的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、有机溶剂、表面活性剂、增效剂、防冻剂和水混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验即得成品；

水剂的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、有机溶剂、表面活性剂、增效剂、防冻剂和水混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，制成成品；

可溶性液剂的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、表面活性剂、增效剂和有机溶剂混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，制成成品。

本发明的含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂是一种新型的杀菌剂，可以用于防治瓜、果、蔬菜及茶树上的霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病等农业病害，具有较好的防治效果，在有机农产品生产上具有极大应用推广价值，是理想的新型无公害杀菌剂。

本发明的优点如下：

1、苦参碱和蛇床子素均为天然活性物质，在环境中易降解，对人畜等哺乳动物低毒，对害虫天敌及其它有益生物安全，且病菌对其不易产生抗药性。

2、所采用的剂型主要为环保型乳油、微乳剂、水乳剂等，不用二甲苯等芳烃类溶剂，大大降低了对环境的破坏，降低了施药过程中对施药者的毒害。

3、光稳定性提高、持效期适宜，能够降低施药频率和防治成本，并有利于进一步减轻对环境的压力。

4、对霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病等经济作物病害具有良好的防治效果，可取得较大的经济、社会和生态效益。

具体实施方式

申请人经过对苦参碱和蛇床子素研究，确定两者经过合理复配后，通过添加助剂加工成的环保型乳油、微乳剂或水乳剂，用于防治多种农业病害，尤其是对于葡萄霜霉病、番茄灰霉病、辣椒炭疽病、黄瓜白粉病、烟草黑星病、白菜软腐病等具有良好的防治效果。

本发明的含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂，以苦参碱和蛇床子素为活性成分，加入一定比例的溶剂和助溶剂以及其它农药助剂，进行剂型加工，可以制得环保型乳油、微乳剂、水剂或可溶性液剂。其中，苦参碱用量按重量百分比计0.1～20％，蛇床子素用量按重量百分比计0.1～20％，其余是助剂。

经发明人的试验证明，在本发明的含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂中，苦参碱和蛇床子素重量比例为1∶2～1∶4之间是合适的，制剂形态是环保型乳油、微乳剂、水剂或可溶性液剂。主要应用于防治霜霉病、灰霉病、炭疽病、白粉病、黑星病、软腐病、茎基腐病等经济作物病害。

1、环保型乳油：

苦参碱用量按重量计为0.1～20％，蛇床子素用量按重量计为0.1～20％，其余是助剂，助剂包括：乳化剂、有机溶剂、增效剂。其中：

乳化剂：5～10％，为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、Well201、Well205、M30、斯潘系列、吐温中的一种或几种的混合物；

增效剂：0～20％，为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

余量为有机溶剂补齐至100％：为乙酸乙酯、丙酮、乙醇中的一种或几种的混合物。

2、微乳剂：

苦参碱含量按重量计为0.1～20％，蛇床子素用量按重量计为0.1～20％；其余是助剂，助剂包括：表面活性剂、有机溶剂、增效剂、防冻剂、水。其中：

表面活性剂：5～30％，为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、蓖麻油与环氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

有机溶剂：0～20％，为甲醇、环己酮、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙酸乙酯、丙酮、乙醇中一种或几种的混合物；

增效剂：0～20％，为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

防冻剂：4～10％，可以是乙二醇、丙二醇中一种；

余量用水补齐至100％。

3、水剂：

苦参碱含量按重量计0.1～20％，蛇床子素用量按重量计为0.1～20％；其余是助剂，助剂包括：表面活性剂、有机溶剂、增效剂、防冻剂和水。其中：

表面活性剂：5～20％，为烷基磷酸酯类、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯类、芳烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯类、脂肪酸聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物、蓖麻油与环氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

有机溶剂：0～20％，为甲醇、环己酮、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙酸乙酯、丙酮、乙醇中一种或几种的混合物；

增效剂：0～20％，为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

防冻剂：0～10％，为乙二醇或丙二醇的任一种；

余量用水补齐至100％。

4.可溶性液剂：

苦参碱含量按重量计为0.1～20％，蛇床子素按重量计为0.1～20％；其余是助剂，助剂包括：表面活性剂、有机溶剂、增效剂和有机溶剂。其中：

表面活性剂：5～20％，为烷基磷酸酯类、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯类、芳烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯类、脂肪酸聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物、蓖麻油与环氧乙烷加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

增效剂：0～20％，为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

余量为有机溶剂补齐至100％：为甲醇、环己酮、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙酸乙酯、丙酮、乙醇中一种或几种的混合物；

上述含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂的生产方法为：

环保型乳油的生产方法是：将原料按配方称量药剂，依次加入混合，并在反应釜中搅拌均匀，经过质量检验后，最后制成成品。

微乳剂的生产方法为：将原料配方称量，依次加入混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，最后制成成品。

水剂的生产方法为：将原料按配方称量，依次加入混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，最后制成成品。

可溶性液剂的生产方法为：将原料按配方称量，依次加入混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，最后制成成品。

制备实施例：

为了更好的理解发明的实质，下面用实施例来详细说明发明的技术内容，但发明的内容并不局限于这些实施例。

实施例1：3％苦参碱·蛇床子素环保型乳油配制

在室温下，取3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物基础上依次加入6份有机硅，4份十二烷基苯磺酸钠和1份辛基酚聚氧乙烯醚和1份苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚，以乙醇+乙酸乙酯+二甲基甲酰胺(6∶3.5∶0.5)补足至100份，以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得3％苦参碱·蛇床子素环保型乳油。

实施例2：2％苦参碱·蛇床子素环保型乳油配制

在室温下，取2份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物基础上依次加入3份有机硅，2份十二烷基苯磺酸钠和1份辛基酚聚氧乙烯醚和1份苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚，以乙醇+乙酸乙酯+二甲基甲酰胺(7∶2.8∶0.2)补足至100份，以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得2％苦参碱·蛇床子素环保型乳油。

实施例3：1.3％苦参碱·蛇床子素环保型乳油配制

在室温下，取1.3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为2∶1)，在上述混合物基础上依次加入2份有机硅，1份十二烷基苯磺酸钠和1份辛基酚聚氧乙烯醚和1份苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚，以乙醇+乙酸乙酯+二甲基甲酰胺(6∶3.5∶0.5)补足至100份，以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得1.3％苦参碱·蛇床子素环保型乳油。

实施例4：3％苦参碱·蛇床子素水剂配制

在室温下，取3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物中依次加入1份有机硅，5份壬基酚聚氧乙烯醚，壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯3份，甘油4份，混合均匀后水溶液补齐至100份，以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得3％苦参碱·蛇床子素水剂。

实施例5：2％苦参碱·蛇床子素水剂配制

在室温下，取2份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物中依次加入1份有机硅，3份壬基酚聚氧乙烯醚，壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯2份，甘油3份，混合均匀后水溶液补齐至100份，以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，，即可制得2％苦参碱·蛇床子素水剂。

实施例6：1.3％苦参碱·蛇床子素水剂配制

在室温下，取1.3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物中依次加入1份有机硅，2份壬基酚聚氧乙烯醚，壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯1份，甘油2份，水溶液补齐至100份，以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得1.3％苦参碱·蛇床子素水剂。

实施例7：3％苦参碱·蛇床子素微乳剂配制

在室温下，取3份份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，然后在上述混合物中依次加入2份有机硅、6份十二烷基苯磺酸钙、3份苯乙烯酚聚氧乙烯(n30)醚、2份乙二醇，水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得3％苦参碱·蛇床子素微乳剂。

实施例8：2％苦参碱·蛇床子素微乳剂配制

在室温下，取2份份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，然后在上述混合物中依次加入1份有机硅、3份十二烷基苯磺酸钙、2份苯乙烯酚聚氧乙烯(n30)醚、1份乙二醇，水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得2％苦参碱·蛇床子素微乳剂。

实施例9：1.3％苦参碱·蛇床子素微乳剂配制

在室温下，取1.3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，然后在上述混合物中依次加入1份有机硅、2份十二烷基苯磺酸钙、1份苯乙烯酚聚氧乙烯(n30)醚、1份乙二醇，水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得1.3％苦参碱·蛇床子素微乳剂。

实施例10：3％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂配制

在室温下，取3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物中依次加入5份壬基酚聚氧乙烯醚，壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯3份，甘油4份有机溶剂补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得3％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂。

实施例11：2％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂配制

在室温下，取2份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物中依次加入3份壬基酚聚氧乙烯醚，壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯2份，甘油3份，用有机溶剂补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得2％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂。

实施例12：1.3％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂配制

在室温下，取1.3份苦参碱·蛇床子素(苦参碱和蛇床子素的复配比为1∶2)，在上述混合物中依次加入2份壬基酚聚氧乙烯醚，壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯1份，甘油2份，用有机溶剂补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100转/分钟～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得1.3％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂。

实验实施例1：十二种植物源增效复配杀菌剂番茄灰霉病菌的田间药效试验

为明确十二种植物源增效复配杀菌剂的田间药效情况，申请人于2011年在陕西省高陵县对该药剂进行了防治番茄灰霉病的田间小区药效试验。

1、供试药剂

3％苦参碱·蛇床子素微乳剂，药剂代号KSW1；

2％苦参碱·蛇床子素微乳剂，药剂代号KSW2；

1.3％苦参碱·蛇床子素微乳剂，药剂代号KSW3；

3％苦参碱·蛇床子素水剂，药剂代号KSS1；

2％苦参碱·蛇床子素水剂，药剂代号KSS2；

1.3％苦参碱·蛇床子素水剂，药剂代号KSS3；

3％苦参碱·蛇床子素环保型乳油，药剂代号KSR1；

2％苦参碱·蛇床子素环保型乳油，药剂代号KSR2；

1.3％苦参碱·蛇床子素环保型乳油，药剂代号KSR3；

3％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂，药剂代号KSY1；

2％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂，药剂代号KSY2；

1.3％苦参碱·蛇床子素可溶性液剂，药剂代号KSY3；

75％百菌清可湿性粉剂，由成都田丰农业有限公司生产。

2、试验物品

注射器(10ml)3支，背负式喷雾器两个，吊牌(300个)，搪瓷缸(1000ml)1个，1000ml量筒3个，100ml量筒2个，铅笔3支，记录本1个，以及照相机一部。

3、供试作物

甘蓝。

4、试验设计及方法

小区试验为随机排列，重复3次，小区面积视实际情况而定。供试药剂按有效成分的含量分别稀释成浓度为500μg/ml，250μg/ml，125μg/ml进行叶面常量喷雾(即叶面上出现一层水膜为宜)，75％百菌清可湿性粉剂1000倍液为对照药剂进行叶面常量喷雾，并设清水对照。根据空白对照发病情况分级调查。采用如下分级方法：

0级：无病；

1级：病斑面积占整片叶面积的5％以下；

3级：病斑面积占整片叶面积的6％～15％；

5级：病斑面积占整片叶面积的16～25％；

7级：病斑面积占整片叶面积的26～50％；

9级：病斑面积占整片叶面积的50％以上；

根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。

病情指数按公式(1)计算，计算结果保留小数点后两位：

$X=\frac{\mathrm{\Σ}(N_i\×i)}{N\×9}\×100---\left(1\right)$

式中：X：病情指数；N_i：各级病叶数；i：相对级数值；N：调查总叶数。

防治效果按公式(2)计算：

$P=\frac{\mathrm{CK}-\mathrm{PT}}{\mathrm{CK}}\×100---\left(2\right)$

式中：P：防治效果，单位为百分率(％)；CK：空白对照病情指数；PT：药剂处理病情指数。

5、试验结果与统计

采用常规喷雾法对苦参碱和蛇床子素12种复配剂对番茄灰霉病的田间防效进行了试验，结果见表1。

表1：十二种植物源杀菌剂对番茄灰霉病的田间药效试验结果

注：“防效”栏中，数列后标相同小写字母者表示在方差分析(DMRT法)中，于5％水平上无显著差异，下同。

由上表可以看出，12种植物源药剂有效成分浓度为500μg/ml时，防效均在80％以上，与药剂对照75％百菌清可湿性粉剂2000倍液的防治效果无显著差异。有效成分浓度为125μg/ml时，12种药剂的防效均在60％以上。综合来看，12种植物源药剂中以药剂KSW-1、药剂KSS-2、药剂KSS-3、药剂KSW-2、药剂KSY-3和药剂KSR-2的对番茄灰霉病防治效果较其他药剂为佳。

实验实施例2：十二种植物源增效复配杀菌剂防治白菜软腐病田间药效试验

申请人于2011年申请人按实验实施例1的方法将供试药剂在陕西渭南进行了十二种植物源增效复配杀菌剂防治白菜软腐病的田间小区药效试验，对照药剂为20％噻菌铜，药效试验结果如表2：

表2：植物源杀菌剂对白菜软腐病的田间药效试验结果

由上表可以看出，12种植物源药剂有效成分浓度为800μg/ml时，防效均在75％以上，其中4个植物源药剂对照20％噻菌铜1000倍液的防治效果无显著差异。有效成分浓度为400μg/ml时，12种药剂的防效均在60％以上。综合来看，12种植物源药剂中以药剂KSR-1、药剂KSR-2、药剂KSW-1、药剂KSY-2和药剂KSS-2对大白菜软腐病菌的防治效果较其他药剂为佳。

实验实施例3：十二种植物源增效复配杀菌剂防治苹果炭疽病田间药效试验

申请人按实验实施例1的方法将供试药剂于2011年在陕西汉中进行了12种植物源增效复配杀菌剂防治苹果炭疽病的田间小区药效试验，对照药剂为40％灭菌丹可湿性粉剂400倍液，药效试验结果如表3：

表3植物源杀菌剂对苹果炭疽病的田间药效试验结果

由上表可以看出，12种植物源药剂有效成分浓度为500μg/ml时，防效均在80％以上，与药剂对照40％灭菌丹可湿性粉剂400的防治效果无显著差异。有效成分浓度为250μg/ml时，12种药剂的防效均在60％以上。综合来看，12种植物源药剂中以药剂KSR-1、药剂KSW-1、药剂KSY-1和药剂KSW-2对苹果炭疽病的防治效果较其他药剂为佳。

综合以上三个的大田试验结果，12种植物源杀菌剂在田间试验中，都表现出了较强的抑菌活性，有些药剂与化学药剂抑菌性能无显著差异。分析原因，这可能是由植物活性物质复杂的构成成分决定的，作用的本质正是由于多种成分之间相互作用的结果。另外，植物源杀菌剂具有一定的持效期，且对非靶标生物和环境友好，因此在经济作物和有机食品开发中极为适用，具有很大的应用推广价值。

实验例1：苦参碱与蛇床子素复配对辣椒炭疽病菌室内联合毒力测定

1.1材料与方法

1.1.1供试菌种

辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici(syd.)Butl.)(菌种由西北农林科技大学植保学院杀菌剂试验室提供)

1.1.2供试药剂

A.3％蛇床子素原药，由山西德威生化有限责任公司提供。

B.3.37％苦参碱原液，由山西德威生化有限责任公司提供。

1.2药剂处理

处理编号	药剂	原药量(g，ml)	有效成分(g，ml)
				①	3％蛇床子素原药	4.000g	0.120g
②	3.37％苦参碱原药	3.561ml	0.120ml
				③	0.6％蛇床子素+0.9％苦参碱	1.600g+2.136ml	0.048g+0.072ml
④	0.8％蛇床子素+0.7％苦参碱	2.133g+1.662ml	0.064g+0.056ml
				⑤	1％蛇床子素+0.5％苦参碱	2.667g+1.187ml	0.080g+0.040ml
⑥	1.2％蛇床子素+0.3％苦参碱	3.200g+0.712ml	0.096g+0.024ml
				⑦	1.4％蛇床子素+0.1％苦参碱	3.733g+0.237ml	0.112g+0.008ml
⑧	空白对照	-	-

在无菌操作条件下，从低浓度到高浓度依次吸取各处理药液各2ml，分别加入无菌锥形瓶中，再将预先融化的灭菌培养基量取18ml加入上述无菌锥形瓶中，充分摇匀。然后立即倒入直径为9cm的培养皿中，制成相应浓度的含药平板(此时药液稀释10倍)；另设不含药液的处理作为空白对照。共设8个处理，重复4次。将培养好的病原菌，在无菌条件下用直径为5mm的打孔器，自菌落边缘切取菌饼，用接种针将菌饼接种于含药平板中央，菌丝面靠培养基，盖上皿盖，置28℃恒温箱中培养72小时。采用游标卡尺测量菌落直径，单位为毫米(mm)。在供试菌落培养72小时后，每个菌落采用十字交叉法垂直测量直径各一次，取其平均值。

1.3联合毒力评价

1.3.1计算方法

根据调查数据，计算各处理浓度对供试靶标菌的菌丝生长抑制率，单位为百分率(％)，计算结果保留小数点后两位：

D＝D₁-D₂     ----------------------------(1)

式中：D：菌落增长直径；D₁：菌落直径；D₂：菌饼直径。

$I=\frac{D_0-D_t}{D_0}\×100---\left(2\right)$

式中：I：菌丝生长抑制率；D₀：空白对照菌落增长直径；D_t：药剂处理菌落增长直径。

1.3.2统计分析

进行药剂联合毒力测定时，本试验采用Wadley法计算混剂的增效系数(SR)，评价混剂的联合作用类型。

Wadley法：根据增效系数(SR)来评价药剂混用的增效作用，即SR＜0.5为拮抗作用，0.5≤SR≤1.5为相加作用，SR＞1.5为协同增效作用。增效系数(SR)按公式(1)、(2)计算：

$X_1=\frac{P_A+P_B}{P_A/A+P_B/B}\×100---\left(1\right)$

式中：

X₁-混剂EC50理论值，单位为毫克每升(mg/L)；

PA-混剂中A的百分含量，单位为百分率(％)；

PB-混剂中B的百分含量，单位为百分率(％)；

A-混剂中A的EC50值，单位为毫克每升(mg/L)；

B-混剂中B的EC50值，单位为毫克每升(mg/L)。

$\mathrm{SR}=\frac{X_1}{X_2}---\left(2\right)$

式中：SR：混剂的增效系数；X₁：混剂的EC50理论值，单位为毫克每升(mg/L)；X₂：混剂的EC50实测值，单位为毫克每升(mg/L)。

1.4结果与分析

1.4.1苦参碱和蛇床子素对辣椒炭疽病菌室内毒力测定结果

采用菌丝生长抑制法测定了苦参碱和蛇床子素对辣椒炭疽病菌的室内毒力，结果见表4。

表4：苦参碱和蛇床子素混配组合对辣椒炭疽病菌室内配方筛选试验结果

上述结果表明，5个不同混配组合对辣椒炭疽病菌抑制效果较单剂均有不同程度增加，其中以1％蛇床子素+0.5％苦参碱的混配组合相加作用最显著，其增效系数(SR)为1.08，为相加作用。因此，选用1％蛇床子素+0.5％苦参碱混配组合最为经济、合适。

实验例2：苦参碱与蛇床子素复配对番茄灰霉病菌室内联合毒力测定

番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)(菌种由西北农林科技大学植保学院杀菌剂试验室提供)。实验操作过程实验例1所述，实验结果见表5。

表5蛇床子素与苦参碱不同混配组合对番茄灰霉病菌室内配方筛选试验结果

试验结果表明(见表1)，5个不同混配组合对番茄灰霉病菌抑制效果较单剂均有不同程度增加，其中以1％蛇床子素+0.5％苦参碱的混配组合相加作用最显著，其增效系数(SR)为1.05，为相加作用。因此，综合考虑认为选用1％蛇床子素+0.5％苦参碱混配组合作为加工该混剂的混配配方是科学合理的。

实验例3：苦参碱与蛇床子素复配对葡萄霜霉病菌室内联合毒力测定

1、材料与方法

1.1供试菌种

葡萄霜霉病(Plasmopara uiticola Berl.& de Toni)(由西北农林科技大学杀菌剂生测室提供)

1.2试验设计和安排

1.2.1试材准备(本试验采用盆栽法测定)

供试作物：葡萄，待幼苗长至2叶期备用。

供试品种：巨峰。

1.2.2药剂

试验药剂

1.2.3试验步骤

将试验药剂按下列表格称取

处理编号	药剂	原药量(g，ml)
			①	3％蛇床子素原药	3.333g
②	3.37％苦参碱原液	2.968ml
			③	0.6％蛇床子素+0.9％苦参碱	1.333g+1.780ml
④	0.8％蛇床子素+0.7％苦参碱	1.778g+1.385ml
			⑤	1％蛇床子素+0.5％苦参碱	2.222g+0.989ml
⑥	1.2％蛇床子素+0.3％苦参碱	2.667g+0.593ml
			⑦	1.4％蛇床子素+0.1％苦参碱	3.111g+0.198ml
⑧	空白对照	-

将3％蛇床子素原药、3.37％苦参碱原药和5个蛇床子素原药+苦参碱原药混配组合共7个处理按上述列表称好后加入灭菌三角瓶中，再加适量甲醇使其充分溶解，然后加无菌水稀释定容至1000ml，分别制成浓度为100μg/g的试验母液各1000ml备用。

在预备试验的基础上，将配制好的试验母液分别按照浓度由高到低依次稀释成5个浓度梯度：100μg/g、50μg/g、25μg/g、12.5μg/g、6.25μg/g。

1.2.4药剂处理

处理编号	药剂	原药量(g，ml)	有效成分(g，ml)
				①	3％蛇床子素原药	3.333g	0.100g
②	3.37％苦参碱原液	2.968ml	0.100ml
				③	0.6％蛇床子素+0.9％苦参碱	1.333g+1.780ml	0.040g+0.060ml
④	0.8％蛇床子素+0.7％苦参碱	1.778g+1.385ml	0.053g+0.047ml
				⑤	1％蛇床子素+0.5％苦参碱	2.222g+0.989ml	0.067g+0.033ml
⑥	1.2％蛇床子素+0.3％苦参碱	2.667g+0.593ml	0.080g+0.020ml
				⑦	1.4％蛇床子素+0.1％苦参碱	3.111g+0.198ml	0.093g+0.007ml
⑧	空白对照	-	-

施药器械为容量1千克、喷孔直径为1.0mm的小型喷雾器，用喷雾法将药剂均匀洒于备用叶面上(即叶面上出现一层水膜为宜)自然晾干。试验药剂分别设5个不同浓度处理，另设不含药剂的清水对照处理1个，共设8个处理，每个处理4盆，每盆3株。

1.2.5接种与培养

人工喷药后24小时喷药，将新鲜孢子悬浮液喷施与接种叶片上，在适宜的条件下培养。待清水对照充分发病后调查药效。

1.2.6调查

根据空白对照发病情况分级调查。采用如下分级方法：

0级：无病；

1级：病斑面积占整片叶面积的5％以下；

3级：病斑面积占整片叶面积的6％～15％；

5级：病斑面积占整片叶面积的16～25％；

7级：病斑面积占整片叶面积的26～50％；

9级：病斑面积占整片叶面积的50％以上；

1.2.7数据统计分析

1.2.7.1计算方法

根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。

病情指数按公式(1)计算，计算结果保留小数点后两位：

$X=\frac{\mathrm{\Σ}(N_i\×i)}{N\×9}\×100---\left(1\right)$

式中：X：病情指数；N_i：各级病叶数；i：相对级数值；N：调查总叶数。

防治效果按公式(2)计算：

$P=\frac{\mathrm{CK}-\mathrm{PT}}{\mathrm{CK}}\×100---\left(2\right)$

式中：P：防治效果，单位为百分率(％)；CK：空白对照病情指数；PT：药剂处理病情指数。

2、结果与分析

以药剂浓度的对数值为自变量，以相对抑制率的机率值(Y)为因变量，采用最小二乘法求出供试药剂的毒力回归方程和EC₅₀及R值，详见表6。

结果表明(见表6)，5个混配组合对葡萄霜霉病菌的抑制效果均有不同程度增加。其中，以1％蛇床子素+0.5％苦参碱混配组合相加作用最显著，其增效值(SR)为1.04，因此，综合考虑认为选用1％蛇床子素+0.5％苦参碱混配组合作为加工该混剂的混配配方是科学合理的。

表6：蛇床子素与苦参碱不同混配组合对葡萄霜霉病测定结果

实验例：4：苦参碱与蛇床子素复配对花卉白粉病菌室内联合毒力测定

花卉白粉病菌(Sphaerotheca pannosa)(由西北农林科技大学杀菌剂生测室提供)实验操作过程实验例3所述，实验结果见表7。

表7：蛇床子素与苦参碱不同混配组合对花卉白粉病配方筛选测定结果

结果表明(见表4)，5个混配组合对花卉白粉病菌的抑制效果均有不同程度增加。其中，1％蛇床子素+0.5％苦参碱混配组合的增效值(SR)为1.05，从抑制效果、生产成本、加工技术等方面综合考虑，认为选用1％蛇床子素+0.5％苦参碱混配组合作为加工该混剂的混配配方是科学合理的。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (4)

1.一种含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂，其特征在于，制得的该植物源增效复配杀菌剂由苦参碱和蛇床子素为主要成分并加入助剂复配而成，制剂形态是环保型乳油、微乳剂、水剂或可溶性液剂；其中：

所述的环保型乳油由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，乳化剂：5～10％，增效剂：0～20％，余量为有机溶剂，原料的重量百分比之和为100％；

所述的微乳剂由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，有机溶剂：0～20％，表面活性剂：5～15％，增效剂：0～20％，防冻剂：4～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％；

所述的水剂由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，有机溶剂：0～20％，表面活性剂：5～20％，增效剂：0～20％，防冻剂：0～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％。

所述的可溶性液剂由以下原料按重量百分比配制：

苦参碱：0.1～20％，蛇床子素：0.1～20％，表面活性剂：5～20％，增效剂：0～20％，余量为有机溶剂，原料的重量百分比之和为100％。

2.如权利要求1所述的含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂，其特征在于：

所述的有机溶剂为乙酸乙酯、环己酮、油酸甲酯、乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合物；

所述的乳化剂是烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、Well201、Well205、M30、斯潘系列、吐温中的一种或几种的混合物；

所述的表面活性剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、蓖麻油与环氧乙烷加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

所述的增效剂为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

所述的防冻剂为乙二醇或丙二醇；

所述的增稠剂为聚乙烯醇、黄原胶、羧甲基纤维素钠、硅酸铝镁中的一种或几种的混合物。

3.权利要求1所述的含苦参碱和蛇床子素的植物源复配增效杀菌剂的制备方法，其特征在于，制得的制剂形态是环保型乳油、微乳剂、水剂或可溶性液剂；其中：

环保型乳油的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、乳化剂、有机溶剂、增效剂混合，在反应釜中搅拌均匀，经过质量检验即得成品；

微乳剂的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、有机溶剂、表面活性剂、增效剂、防冻剂和水混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验即得成品；

水剂的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、有机溶剂、表面活性剂、增效剂、防冻剂和水混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，制成成品；

可溶性液剂的制备方法是：按照配方量将苦参碱、蛇床子素、表面活性剂、增效剂和有机溶剂混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，制成成品。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的有机溶剂为乙酸乙酯、环己酮、油酸甲酯、乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合物；

所述的乳化剂是烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、Well201、Well205、M30、斯潘系列、吐温中的一种或几种的混合物；

所述的表面活性剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、蓖麻油与环氧乙烷加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

所述的增效剂为有机硅、增效醚、增效胺、碳酸烷基酯、月桂氮酮中的一种或几种的混合物；

所述的防冻剂为乙二醇或丙二醇；

所述的增稠剂为聚乙烯醇、黄原胶、羧甲基纤维素钠、硅酸铝镁中的一种或几种的混合物。