CN102573894A - 疫苗 - Google Patents

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Abstract

一种疫苗，用于治疗和/或预防与肾素激活的血管紧张素系统相关的机体病症，所述疫苗包括结合于可药用载体的肽，所述肽具有下式的氨基酸序列：(X1)m(X2)n(X3)oX4X5H PX6 (分子式I)其中X1为G或D，X2为A、P、M、G或R，X3为G、A、H或V，X4为S、A、D或Y，X5为A、D、H、S、N或I，X6为A、L或F，其中，在满足当o为0时m和n为0、当n为0时m为0的前提下，m、n和o独立地为0或1；以及，其中，所述肽不为DRVYIHPF。

Description

疫苗
本发明涉及医学(medicine)、免疫学、分子生物学和病毒学领域所使用的药物，其优先用于治疗和/或预防与肾素激活的血管紧张素系统相关的机体病症，优选高血压症以及与高血压症相关的心血管疾病(cardiovasculardiseases，CVD)。
肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system，RAS)，也称为肾素血管紧张素醛固酮系统(renin angiotensin aldosteron system，RAAS)，是调节体内不同生理过程的激素系统。RAS的活性通过血管紧张肽原被本身为酶的肾素切割成十肽的血管紧张素I(angiotensin I，Ang I)而引发。肾素系统的重要产物是八肽激素的血管紧张素II(angiotensin II，Ang II)，它是由Ang I在血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)作用下形成的。RAS在调节血容量、维持血压方面起到关键作用。但是肾素系统的过度活性则与高血压症和靶标器官的损伤相关联。
近年来逐渐清楚，肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system，RAS)的作用远远超出其传统的调节血压和水-盐平衡的范围。除了调节心血管和肾素组织的生理及病理生理过程，RAS还作用于其他一些组织，包括脑、内分泌腺、感觉神经(sensory)、脂肪和免疫细胞。因此RAS在这些组织的生理及病理生理过程中也起到重要作用。
由于RAS在生理学及病理生理学方面的意义极为广泛，RAS的定向给药治疗已经成为临床治疗心血管病、肾脏病，例如高血压症、心力衰竭、糖尿病肾病(diabetic nephropathy)的关键工具。此外各种研究表明，阻断RAS不仅影响与高血压症相关的心血管病，而且可以减少与炎性过程相关的心血管病，如动脉粥样硬化症的发生。这些基础研究和动物研究强力支持血管紧张素II为促炎介质，它直接诱导动脉粥样硬化斑块的发展和心脏重塑(heartremodeling)。
另外，RAS似乎不仅对于动脉粥样硬化的炎症方面而言很重要，而且对于诸如多发性硬化症的自体免疫性疾病而言也很重要。
更进一步地，有证据显示，阻断肾素-血管紧张素系统将减少新发生的糖尿病的出现和降低糖尿病并发症的风险。其他研究对Ang II导致胰岛素耐受进展的效果及其与糖尿病的关系提供了概述。肾素-血管紧张素系统的组成成分与胰岛素作用及代谢疾病的形成和进程之间有复杂相互作用。
RAS、炎性疾病和自身免疫病(动脉粥样硬化症和多发性硬化症)
动脉粥样硬化是一种慢性炎性疾病，它涉及血管细胞、免疫系统和多个器官。尽管白细胞、内皮细胞及平滑肌细胞已经表现出在动脉粥样硬化性炎症中起到关键作用，最近的证据同样支持细胞因子及炎性趋化因子具有直接活性(direct activity)，已知它们在炎性进程中起调节作用。最近的研究目前提示肽类激素的血管紧张素II具有新的炎性活性。由于血管紧张素II诱导原发动脉粥样硬化性细胞因子的分泌且加剧了血管内皮功能障碍，因此肾素-血管紧张素系统对于促进炎症进程起到重要作用。血管紧张素II不仅调节动脉壁内细胞因子、趋化因子和生长因子的分泌，而且调节粘附分子(VCAM-1，ICAM-1，P选择蛋白)的表达。除此之外，肾素-血管紧张素系统已经表现出可以调节动脉粥样硬化和肾损伤两者中的补体系统的激活。这一炎性级联通过增加血管内膜炎性细胞的聚集来活化血管炎性反应。聚集的细胞可以产生血管紧张素II，结果产生正反馈反应，并维持这一炎性的恶性循环。
近来不同出版物显示，多发性硬化症(multiple sclerosis，MS)一类慢性炎性疾病与动脉粥样硬化症这一人类所有慢性病中最常见的疾病的交集可能远远超过“硬化症”这个名字中共有的部分。它们显示，RAS在自体免疫性疾病中也起到重要作用，这已经被多发性硬化症(MS)及其动物模型——实验性自体免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)所例证。借助蛋白质组学方法，作者发现在MS脑损伤中RAS被上调。通过ACE抑制剂阻断血管紧张素II的产生或通过血管紧张素II受体阻断剂来抑制血管紧张素II的信号，抑制了自体反应性TH1细胞和TH17细胞，促进了抗原特异性CD4_FoxP3调节T细胞(regulatory T cells，Treg cells)。用ACE抑制剂进行处理诱导出大量具有足够扭转瘫痪性EAE(reverse paralytic EAE)能力的CD4_FoxP3T细胞。因此作者总结，RAS调节是应用于人类自体免疫性疾病的一个具有吸引力的治疗策略。
RAS和心血管疾病——高血压症
在世界范围内，心血管疾病(Cardiovascular disease，CVD)是导致死亡的首要原因。据世界卫生组织(World Health Organization，WHO)，全球大约30％的死亡可以归因于CVD。CVD由心脏和血管疾病引起，有多种表现。它们包括心肌梗塞、中风、心力衰竭和终末期肾脏疾病。CVD最主要的流行病风险因素是高血压症。2000年，世界上超过四分之一的成人患有高血压症，并且如果不采取合适的行动(appropriate action)这个数字还会继续增加。
高血压症(通常称为高血压)被定义为长期升高的血压，其中达到心脏收缩压超过140mmHg和/或心脏舒张压超过90mmHg。由“Joint NationalCommittee on Prevention，Detection，Evaluation，and Treatment of High BloodPressure(国家预防、检测、评价和治疗高血压联合委员会)”制订的指南建议，收缩压在120到139mmHg和/或舒张压在80到89mmHg的人应当认为是高血压症前期并且要求改善健康以预防CVD。因此降低血压是预防CVD的重要策略。作为第一步，降低血压可以通过改变生活习惯达到，针对最主要的原因，例如不健康的饮食、不活动和吸烟的生活习惯加以改变。但是，对原发性高血压症的处理则要求特定治疗。一个关键的血压调节器就是肾素血管紧张素系统(RAS)，它已成为有吸引力的治疗性干预的靶标。因此，明确作用于RAS组成成分的药物已经成为高血压症临床治疗的重要工具。
RAS通路是一个级联，起始于肾素对血管紧张素原的切割。肾素为天冬酰胺酶，最初被合成并储存在肾脏的近球细胞颗粒体内，它对于血管紧张素原具有高度底物特异性。血管紧张素原主要由肝细胞合成并组成性分泌进入血液循环。其在N-端被肾素切割后成为十肽的血管紧张素I(Ang I；1-10肽)，然后又很快转变成具有生物学活性的八肽血管紧张素II(Ang II；1-8多肽)。与Ang II不同，Ang I不具有生物学活性，而且只是作为Ang II前体而存在。Ang I的切割基本上由血管紧张素转化酶(angiotensin-convertingenzyme，ACE)介导，但并不绝对。这一膜结合金属蛋白酶在内皮细胞表面表达，所述内皮细胞发现在肺血管上皮处最为集中。除了ACE胰凝乳蛋白酶已知能产生Ang II之外，Ang II还可以经过紧张肽(tonin)和组织蛋白酶一类酶的作用直接从血管紧张素原产生。另外，其他Ang I及Ang II来源的功能性肽也可以在血液循环中发现。它们包括Ang(1-9)、Ang(1-7)、Ang III(2-8肽)和Ang IV(3-8肽)，是通过氨基肽酶、羧基肽酶或肽链内切酶作用产生的。羧基肽酶称为血管紧张素转化酶II(angiotensin-converting enzyme II，ACE2)，它既作用于Ang II同样也作用于Ang I。在ACE2作用下，由Ang I产生Ang1-9，由Ang II产生Ang1-7。然后Ang1-9可以在ACE作用下进一步转化为Ang1-7。Ang II升高血压并且可能是高血压症血管重构的主要介质，与之相反的，Ang1-7肽促进血管扩张，可能藉此抵消Ang II的潜在有害作用。Ang1-7通过它的受体mas癌基因产物(mas oncogen product，MAS)发挥作用。
Ang II和Ang 1-7被认为是RAS系统的主要效应肽，而Ang III和Ang IV则活性较低(大约为Ang II活性的40％)。Ang II的作用主要由两个七次跨膜受体介导，该受体被称为Ang II受体，所述受体分为一型(AT1，其亚型为1a和1b)和二型(AT2)。亚型AT1和AT2均与Ang II结合，但是其细胞定位不相同并且在不同组织上表达。绝大多数Ang II的升高血压作用归因于AT1受体。
Ang II是有效的全身性血管紧张素。它使肾脏内肾小球小动脉收缩以提高系统性动脉血压并减少血流。在肾上腺皮质中，它引起醛固酮的释放，这进而导致肾小管从尿中重新吸收更多的盐和水。它还作用于中枢神经系统以提高人的摄盐食欲，使其感觉口渴。除此之外，Ang II还刺激抗利尿激素(AntiDiuretic Hormone，ADH)的释放。
RAS组成成分的典型作用是充当内分泌因子以维持血压、电解质及体液平衡。除此之外，循环着的RAS作为局部的血管紧张素生成级联存在于一些组织当中。所谓的组织RAS可以充当旁分泌因子和/或自分泌因子在局部起作用，并能够全部地或部分地独立与它们的血液循环对应物而发挥作用。
目前有一些市售的治疗高血压症的药物。所述药物包括诸如利尿药和钙通道阻断剂，并包括特异定向于RAS组成成分的药物。后者包括ACE抑制剂，它通过与ACE的活性侧面结合和干扰该酶结合和切割其底物的能力而起作用。ACE抑制剂的特征性副作用是干咳和首剂低血压/血管神经性水肿。定向于RAS的另一类药物是血管紧张素受体(AT1)阻断剂(ARB)。ABBs通过阻断血管紧张素II与AT1受体的结合来特异性地干扰Ang II的功能。最近，一个定向于RAS的新的化合物，叫做艾力司克林(Aliskerin)的抑制肾素的药物被投放市场。
在现有技术中也有人建议使用Ang II的拮抗剂，它比Ang II对AT1受体表现出更高的的结合亲和力。文献WO 2005/044313A公开了能够用于治疗心脏病的以及与纤维症和动脉粥样硬化症相关的疾病的化合物。文献WO2005/044313A中公开的所述化合物为八肽，其通式为X1X2VYIHPX3，其中X1可以是任意氨基酸残基，X2为精氨酸或N端烷基化的精氨酸或精氨酸类似物，X3可以是一个具有疏水侧链的氨基酸残基。所述化合物具有比血管紧张素II对AT1受体更高的亲和力(拮抗活性)。
文献GB 2001653A公开了一种来源于血管紧张素II的化合物，其通式为XRVYIHPY，其中X代表α-氨基氧基脂肪族酰基基团，Y可以是亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸或苏氨酸。该化合物能够用于治疗肾性高血压症。
文献WO 2002/087504A、WO 2001/043761A、WO 2001/098325A和WO 2000/002905A给出了其功能为血管紧张素II类似物的化合物。
尽管市面上可以买到治疗高血压症的各种药物，高血压症仍然没能被充分控制住。总体上的治疗缺乏成功归因于，一方面高血压症的无症状特性，另一方面要求必须长期药物治疗，每天至少一次自身给药。
最近，主动免疫疗法作为治疗高血压症及相关疾病的潜在的新策略日益令人产生兴趣。
用于高血压症治疗的抗RAS组成成分的疫苗的可行性已经在几种动物模型上显示出来(Michel-JB等人，Am Heart J.1989；117：756)。在最初的方法之一当中，已经显示抗肾素疫苗免疫有效降低血压。但是近年来这一方法并未被加以延用，因为动物开始患上自体免疫性肾炎(Michel-JB等人，Circulation.1990；81(6)：1899-910)。其他方法针对诱导免疫反应来对抗细胞表面以跨膜蛋白质表达的RAS的组成成分，例如ACE和AT1R。几个研究小组研究了抗AT1R的主动免疫接种。尽管一些研究报道了抗AT1R的N端的抗体能够减缓自发性高血压大鼠的高血压症的发展，但是绝大多数方法对于血压没有显著效果。抗ACE主动免疫接种的数据非常有限。一篇报道对家兔的免疫接种进行了描述，然而50只动物中只有1只产生了可检测到的抗ACE抗体(Soffer-RL等人，Fed.Proc.1983；42(19)：2735-9)。抗血管紧张素原的主动免疫接种报道尚未见到，但是有一些研究探索了抗血管紧张素I和抗血管紧张素II疫苗接种的可行性。
用连接在载体蛋白(例如匙孔
Figure BDA0000146516040000051
血蓝蛋白(keyhole limpet haemocyanin，KLH))上的Ang I免疫，结果诱导产生高度抗原特异性的体液免疫反应。在使用不同动物模型的实验组中，免疫诱导的抗血管紧张素I抗体表现出功能性，原因是(i)免疫印记分析得出它们能够与血管紧张素I结合，(ii)血压被显著降低，这说明血管紧张素对RAS的作用被阻断了(Downham等人，Br J ClinPharmacol.2003；56：505-12.)。与此相对的是，没有发现健康人类志愿者血压降低的效果(Downham等人，2003)。这一发现被一项针对高血压病人的研究进一步确证，在该研究中，高血压病人接受了12种氨基酸的Ang I类似物的治疗，该类似物吸附在明矾上并与KLH共价连接(称为PMD3117)(Brown等人，Clin Sci.2004；107：167-73)。重要的是，该治疗法可以被很好地耐受，并且诱导出长期持续的、抗原特异性的体液免疫反应。另外，通过检测肾素和醛固酮水平的变化，所述治疗表现出对肾素系统有效果。而较之安慰剂对照组，用PMD3117来免疫没有表现出对血压产生影响(Brown等人，2004)。与之对比的是，由Protherics公司开发的并将明矾替换为一种新的佐剂的这种Ang I疫苗的进一步轻微改进型，，称为Co Vaccine HTTM，确实显现出效果。施用所述新的疫苗配方，结果临床前期实验组的抗血管紧张素抗体滴度发生10倍升高，同时健康人类受试对象的收缩压和舒张压也发生变化。然而，血压仅为轻微降低且只发生在静息阶段而非活动阶段，这一点可能更加重要。
其他诱导能够阻断RAS的抗体的方法用血管紧张素II衍生的肽为抗原。与注射Ang II-载体蛋白偶联物不会导致血压降低的以往研究相反，用结合在病毒状颗粒(virus-like particles，VLP)上的Ang II来免疫结果诱导产生了高的抗血管紧张素的强烈特异性体液免疫反应，与之平行的是统计学意义上的血压显著降低(Ambühl等人，JHypertension.2007；25：63-72.)。但是在最近的一项临床研究中，用结合在病毒样颗粒上的血管紧张素II免疫后不能监测到这种降低血压的效果，表明通过这种肽疫苗诱导的诱导体液免疫反应可能并不最佳或充分。因此现有技术仍需要提供新的、更加有效的定向于血管紧张素肽的疫苗。
本发明的一个目的是提供一种基于疫苗的药物疗法来预防和治疗与因RAS所致血管紧张素II水平升高相关的症状。
结果得到一种疫苗，其包含结合在可药用载体上的肽，所述肽具有下述氨基酸序列
(X1)m(X2)n(X3)oX4X5HP X6    (分子式I)，
其中
X1为G或D，
X2为A、P、M、G或R，
X3为G、A、H或V，
X4为S、A、D或Y，
X5为A、D、H、S、N或I，
X6为A、L或F，
其中，在满足当o为0时m和n为0、当n为0时m为0的前提下，m、n和o独立地为0或1；以及，其中，所述肽不为DRVYIHPF，能够适用于治疗和/或预防由肾素活化的血管紧张素系统相关的机体病症。
不但具有式I氨基酸序列的肽、而且具有式II和III的氨基酸序列的肽都能够用来治疗和/或预防由肾素活化的血管紧张素系统相关的机体病症。因此，本发明另一方面涉及疫苗，其包含结合在可药用载体上的肽，所述肽具有下述氨基酸序列，用于治疗和/或预防与肾素活化的血管紧张素系统相关的机体病症，
(X1)m(X2)n(X3)oX4X5X6PX7    (分子式II)，
其中
X1为G、A或D，
X2为A、P、M、G或R，
X3为G、A、H或V，
X4为S、A、D或Y，
X5为A、D、H、S、N或I，
X6为Y或H，
X7为A、V、L、I或F、
其中，在满足当o为0时m和n为0、当n为0时m为0的前提下，m、n和o独立地为0或1；以及，其中，所述肽不为DRVYIHPF。
根据本发明的具体优选的实施方式，所述疫苗包含具有下述氨基酸序列的肽：
X1X2X3X4X5X6PX7        (分子式III)
可用来治疗和/或预防由肾素活化的血管紧张素系统相关的机体病症，优选高血压症和与高血压症相关的疾病，其中：
X1为G、A或D，
X2为A、P、M、G或R，
X3为G、A、H或V，
X4为S、A、D或Y，
X5为A、D、H、S、N或I，
X6为Y或H，
X7为A、V、L、I或F、
其中所述肽不为DRVYIHPF。
本发明的疫苗当联接在载体蛋白质(或者含有肽的T细胞表位)上、并施用于哺乳动物时，能够特异性诱导形成抗血管紧张素I或血管紧张素II的抗体。符合分子式I到III的肽可以诱导出识别Ang II的特异性高于Ang I的抗体。包含下述肽的疫苗能诱导出对Ang I的识别特异性比对Ang II的更高的抗体，所述肽具有式I-III所示序列、且其C端为H和L，例如X1X2X3X4X5X6PX7HL(两个氨基酸均衍生自Ang I)。这允许特异性靶向多种血管紧张素肽中的一种或者其组合。由于这些抗体在所述哺乳动物体内与血管紧张素原衍生的肽结合，可以显著影响血管紧张素肽的水平，故这些免疫原可用于免疫疗法以对抗与因RAS或其他蛋白酶(例如胰凝乳蛋白酶)所致血管紧张素II水平升高相关的症状。没有打算受任何具体的分子行为模式理论的限制，本发明的肽变体可充当免疫原，所述免疫原可以诱导出与多于一种的血管紧张素肽相结合、由此而同时中和所有相关种类的血管紧张素肽的抗体。或者，所诱导的抗体可以特异性结合血管紧张素II的C端。在这些条件下，所诱导的抗体额外阻断血管紧张素II与其受体AT1R的结合。
式I-III的氨基酸残基可以被上述氨基酸残基交换。所述变化获得的氨基酸序列可含一、二、三、四、五、六或七个与血管紧张素II原始序列(DRVYIHPF)不同的氨基酸残基。最优选式I到III可与血管紧张素II序列相差至少一个、更优选至少两个氨基酸残基；并且最多相差七个，优选至多六个、更优选至多五个、再更优选至多四个、甚至更优选至多三个氨基酸残基。
上述分子式的肽也可包含五、六、七或八个氨基酸残基(从X1、X2或X3开始到末端氨基酸残基)。
本发明的肽可以是具有5、6、7或8到20个氨基酸残基的肽，优选为5、6、7或8到15个氨基酸残基，尤其有5、6、7、8或9个氨基酸残基。本发明的肽也可以是多肽或蛋白质的一部分，它们具有至多300个氨基酸残基，优选为至多200、更优选为至多150、甚至更优选为至多100个氨基酸残基。
本发明的肽与天然产生的血管紧张素II(DRVYIHPF)不相同。本发明的疫苗在宿主体内激发针对血管紧张素肽的免疫学反应。
本发明的肽可以通过现有技术中已知的化学合成方法来合成，成为分离的肽，或者成为另外一种肽或多肽的一部分。或者，所述肽通过产生该肽的微生物来产生、然后分离、如果需要再进一步纯化。所述肽变体可以在诸如细菌、酵母或真菌等微生物体内、诸如哺乳动物细胞或昆虫细胞等真核细胞内、或在例如腺病毒、痘病毒、疱疹病毒、西门利克森林脑炎病毒(Simlikiforest virus)、杆状病毒、细菌噬菌体、辛德毕斯病毒(Sindbis virus)或仙台病毒(Sendai virus)等重组病毒载体内产生。适于产生所述化合物/肽的细菌包括大肠埃希氏菌、枯草杆菌或者任何其他能够表达肽的细菌。适于表达所述化合物/肽的酵母类型包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、假丝酵母、毕赤巴斯德酵母或者任何其他能够表达肽的酵母。相应的方法在现有技术当中是充分已知的。同样，分离和纯化重组产生的肽的方法在现有技术当中也已是充分知道的，包括诸如凝胶过滤法、亲和层析法、离子交换层析法等等。
为了便于所述肽的分离，可将其制成融合多肽，其中所述肽被翻译性融合(共价联接)到能够被亲和层析法分离的异源性多肽上。典型的异源性多肽为组氨酸标签(例如His6；6个组氨酸残基)、GST-标签等。融合多肽不仅有利于所述肽的纯化，而且也可以防止所述肽在纯化过程中的降解。如果在纯化后想去除所述异源性多肽，那么所述融合多肽在异源性多肽和所述肽之间的连接处可包含切割位点。该切割位点由能被特异于该位点处的氨基酸序列的酶(例如，蛋白酶)切割的氨基酸序列组成。
“连接在可药用载体上的肽”和“连接在载体上的肽”用于此处指的是融合或联接到载体上的肽。如果本发明所述的肽融合或偶联(例如，通过羧基、氨基、巯基、羟基、咪唑基、胍基或吲哚基团偶联)到蛋白质载体上，在所述肽和所述蛋白质载体之间可提供有连接子。
根据本发明的特别优选的实施方式，分子式I的取代可以如下：
X1为G或D，
X2为G、R、A、P或M
X3为A、V或G
X4为Y、A或S
X5为N、I、D、S或A和/或
X6为F。
根据本发明的优选的实施方式，由分子式I衍生的肽选自：
GRVYIHPF、DPVYIHPF、DMVYIHPF、DGVYIHPF、DAVYIHPF、DRGYIHPF、DRAYIHPF、DRHYIHPF、DRVAIHPF、DRVSIHPF、DRVDIHPF、DRVYAHPF、DRVYNHPF、DRVYDHPF、DRVYHHPF、DRVYSHPF、DRVYIHPA、DRVYIHPL、DAAYIHPF、DRAAIHPF、DRVAAHPF、DRAYAHPF、DRAAAHPF、DAAAIHPF、DAGYIHPF、DAHYIHPF、DPGYIHPF、DPAYIHPF、DMGYIHPF、DMAYIHPF、DMHYIHPF、DGGYIHPF、DGAYIHPF、DGHYIHPF、DPVAIHPF、DMVAIHPF、DMVSIHPF、DRGAIHPF、DRHAIHPF、DRGYAHPF、DRGYDHPF、DRGYHHPF、DRGYSHPF、DRGYNHPF、DRAYDHPF、DRAYHHPF、DRAYSHPF、DRAYNHPF、DRHYAHPF、DRHYSHPF、DRHYNHPF、DRHYDHPF、DRHYHHPF、DRGADHPF、DRVAHHPF、DRHADHPF、GRGAIHPF、DPGAIHPF、DPGSIHPF、DMGAIHPF、DMGSIHPF、GPGYIHPF、GPGSIHPF、GMGSIHPF、DRGSIHPF、DPHAIHPF、DMHAIHPF、GPHAIHPF、GMHSIHPF、PVYIHPF、MVYIHPF、GVYIHPF、AVYIHPF、RGYIHPF、RAYIHPF、RHYIHPF、RVAIHPF、RVSIHPF、RVDIHPF、RVYAHPF、RVYNHPF、RVYDHPF、RVYHHPF、RVYSHPF、RVYIHPA、RVYIHPL、AAYIHPF、RAAIHPF、RVAAHPF、RAYAHPF、RAAAHPF、AAAIHPF、AGYIHPF、AHYIHPF、PGYIHPF、PAYIHPF、MGYIHPF、MAYIHPF、MHYIHPF、GGYIHPF、GAYIHPF、GHYIHPF、PVAIHPF、PVSIHPF、MVAIHPF、MVSIHPF、RGAIHPF、RHAIHPF、RGYAHPF、RGYDHPF、RGYHHPF、RGYSHPF、RGYNHPF、RAYDHPF、RAYHHPF、RAYSHPF、RAYNHPF、RHYAHPF、RHYSHPF、RHYNHPF、RHYDHPF、RHYHHPF、RGADHPF、RGAHHPF、RHADHPF、RHSIHPF、PGAIHPF、RHAIHPF、PGSIHPF、MGAIHPF、MGSIHPF、RGSIHPF、PHAIHPF、MHAIHPF、PHSIHPF、MHSIHPF、GYIHPF、AYIHPF、HYIHPF、VYAHPF、VYNHPF、VYDHPF、VYHHPF、VYSHPF、VYIHPA、VYIHPL、AAIHPF、AYAHPF、HYIHPF、GAIHPF、HAIHPF、GYAHPF、GYDHPF、GYHHPF、GYSHPF、GYNHPF、AYDHPF、AYHHPF、AYSHPF、AYNHPF、HYAHPF、HYSHPF、HYNHPF、HYDHPF、HYHHPF、GAIHPF、HSIHPF、GSIHPF、HAIHPF、AIHPF、SIHPF、DIHPF、YAHPF、YNHPF、YDHPF、YHHPF和YSHPF。
特别优选的肽为：
DPVYIHPF、DMVYIHPF、DGVYIHPF、DAVYIHPF、DRGYIHPF、DRAYIHPF、DRHYIHPF、DRVAIHPF、DRVYAHPF、DRVYNHPF、DRVYDHPF、DRVYSHPF、DRVYIHPL、DAAYIHPF、DRAAIHPF、DRVAAHPF、DRAYAHPF、DAGYIHPF、DAHYIHPF、DPGYIHPF、DPAYIHPF、DMGYIHPF、DMAYIHPF、DMHYIHPF、DGGYIHPF、DGAYIHPF、DGHYIHPF、DMVSIHPF、DRGAIHPF、DRGYAHPF、DRGYDHPF、DRGYSHPF、DRGYNHPF、DRAYDHPF、DRAYSHPF、DRAYNHPF、DRHYAHPF、DRHYSHPF、DRHYNHPF、DRHYDHPF、GPGYIHPF、GPGSIHPF、DRGSIHPF、PVYIHPF、GVYIHPF、AVYIHPF、RGYIHPF、RAYIHPF、RHYIHPF、RVAIHPF、RVSIHPF、RVDIHPF、RVYAHPF、RVYNHPF、RVYDHPF、RVYSHPF、RVYIHPL、AAYIHPF、RAAIHPF、RVAAHPF、RAYAHPF、AGYIHPF、AHYIHPF、PGYIHPF、PAYIHPF、GGYIHPF、GAYIHPF、GHYIHPF、PVSIHPF、MVSIHPF、RGAIHPF、RGYAHPF、RGYDHPF、RGYSHPF、RGYNHPF、RAYDHPF、RAYSHPF、RAYNHPF、RHYAHPF、RHYSHPF、RHYNHPF、RHYDHPF、RHSIHPF、PGAIHPF、RHAIHPF、PGSIHPF、MGAIHPF、MGSIHPF、MGYIHPF、RGSIHPF、PHAIHPF、MHAIHPF、PHSIHPF、MHSIHPF、GYIHPF、AYIHPF、VYAHPF、VYNHPF、VYDHPF、VYSHPF、AAIHPF、AYAHPF、HYIHPF、GAIHPF、GYAHPF、GYDHPF、GYSHPF、GYNHPF、AYDHPF、AYSHPF、AYNHPF、GAIHPF、GSIHPF。
更加优选的肽为：
DPVYIHPF、DMVYIHPF、DGVYIHPF、DAVYIHPF、DRGYIHPF、DRAYIHPF、DRHYIHPF、DRVYIHPL、DAAYIHPF、DRAAIHPF、DRVAAHPF、DRAYAHPF、DAGYIHPF、DAHYIHPF、DPGYIHPF、DPAYIHPF、DMGYIHPF、DMAYIHPF、DMHYIHPF、DGGYIHPF、DGAYIHPF、DGHYIHPF、DMVSIHPF、DRGAIHPF、DRGYAHPF、DRGYDHPF、DRGYSHPF、DRGYNHPF、DRAYDHPF、DRAYSHPF、DRAYNHPF、GPGYIHPF、PVYIHPF、GVYIHPF、RGYIHPF、RAYIHPF、RVSIHPF、RVYIHPL、AAYIHPF、RAAIHPF、RAYAHPF、AGYIHPF、PGYIHPF、PAYIHPF、GAYIHPF、PVSIHPF、MVSIHPF、RGAIHPF、RGYAHPF、RGYSHPF、GYIHPF、whereby the most preferred peptides areDPVYIHPF、DMVYIHPF、DAAYIHPF、DRAAIHPF、DRAYAHPF、DAGYIHPF、DPGYIHPF、DGAYIHPF、DMVSIHPF、DRGAIHPF、DRGYDHPF、DRGYSHPF、PVYIHPF、GVYIHPF、AAYIHPF、RAAIHPF、RAYAHPF、PGYIHPF、PVSIHPF、MVSIHPF、RGAIHPF。
根据本发明的优选的实施方式
分子式II和III的X1为G，A或D，
分子式II和III的X2为G，A，P，M或R
分子式II和III的X3为G，A，H或V
分子式II和III的X4为S，A，D或Y
分子式II和III的X5为A，D，H，S，N或I
分子式II和III的X6为Y或H
分子式II和III的X7为A，V，L，I或F。
上述所指氨基酸残基为特别优选的取代基。
本发明的肽可在其N端包含截短，因而这些肽失去第一个、第二个和/或第三个氨基酸残基。
所述肽优选自：
GRVYIHPF、DPVYIHPF、DMVYIHPF、DGVYIHPF、DAVYIHPF、DRGYIHPF、DRAYIHPF、DRHYIHPF、DRVAIHPF、DRVSIHPF、DRVDIHPF、DRVYAHPF、DRVYNHPF、DRVYDHPF、DRVYHHPF、DRVYSHPF、DRVYIYPF、DRVYIHPA、DRVYIHPV、DRVYIHPL、DRVYIHPI、DAAYIHPF、DRAAIHPF、DRVAAHPF、DRAYAHPF、DRAAAHPF、ARAAIHPF、ARVAAHPF、DAAAIHPF、DAAAAHPF、DAVAAHPF、DAGYIHPF、DAHYIHPF、DPGYIHPF、DPAYIHPF、DMGYIHPF、DMAYIHPF、DMHYIHPF、DGGYIHPF、DGAYIHPF、DGHYIHPF、DPVAIHPF、DPVSIHPF、DMVAIHPF、DMVSIHPF、DRGAIHPF、DRHAIHPF、DRGYAHPF、DRGYDHPF、DRGYHHPF、DRGYSHPF、DRGYNHPF、DRAYDHPF、DRAYHHPF、DRAYSHPF、DRAYNHPF、DRHYAHPF、DRHYSHPF、DRHYNHPF、DRHYDHPF、DRHYHHPF、DRHYIYPF、DRGADHPF、DRGAHHPF、DRVAHHPF、DRHADHPF、GRGAIHPF、GRHSIHPF、GRHADYPF、DPGAIHPF、GRHAIHPF、DPGSIHPF、DMGAIHPF、DMGSIHPF、GPGYIHPF、GMGYIHPF、GPGSIHPF、GMGSIHPF、DRGSIHPF、DPHAIHPF、DMHAIHPF、GPHAIHPF、GMHAIHPF、GPHSIHPF、和GMHSIHPF。
失去N端第一个氨基酸残基的截短形式优选选自：
PVYIHPF、MVYIHPF、GVYIHPF、AVYIHPF、RGYIHPF、RAYIHPF、RHYIHPF、RVAIHPF、RVSIHPF、RVDIHPF、RVYAHPF、RVYNHPF、RVYDHPF、RVYHHPF、RVYSHPF、RVYIYPF、RVYIHPA、RVYIHPV、RVYIHPL、RVYIHPI、AAYIHPF、RAAIHPF、RVAAHPF、RAYAHPF、RAAAHPF、RAAIHPF、RVAAHPF、AAAIHPF、AAAAHPF、AVAAHPF、AGYIHPF、AHYIHPF、PGYIHPF、PAYIHPF、MGYIHPF、MAYIHPF、MHYIHPF、GGYIHPF、GAYIHPF、GHYIHPF、PVAIHPF、PVSIHPF、MVAIHPF、MVSIHPF、RGAIHPF、RHAIHPF、RGYAHPF、RGYDHPF、RGYHHPF、RGYSHPF、RGYNHPF、RAYDHPF、RAYHHPF、RAYSHPF、RAYNHPF、RHYAHPF、RHYSHPF、RHYNHPF、RHYDHPF、RHYHHPF、RHYIYPF、RGADHPF、RGAHHPF、RVAHHPF、RHADHPF、RHSIHPF、RHADYPF、PGAIHPF、RHAIHPF、PGSIHPF、MGAIHPF、MGSIHPF、RGSIHPF、PHAIHPF、MHAIHPF、PHSIHPF、和MHSIHPF。
失去N端头两个氨基酸残基的截短形式优选选自：
GYIHPF、AYIHPF、HYIHPF、VAIHPF、VSIHPF、VDIHPF、VYAHPF、VYNHPF、VYDHPF、VYHHPF、VYSHPF、VYIYPF、VYIHPA、VYIHPV、VYIHPL、VYIHPI、AAIHPF、VAAHPF、AYAHPF、AAAHPF、HYIHPF、GAIHPF、HAIHPF、GYAHPF、GYDHPF、GYHHPF、GYSHPF、GYNHPF、AYDHPF、AYHHPF、AYSHPF、AYNHPF、HYAHPF、HYSHPF、HYNHPF、HYDHPF、HYHHPF、HYIYPF、GADHPF、GAHHPF、VAHHPF、HADHPF、GAIHPF、HSIHPF、HADYPF、GSIHPF、和HAIHPF。
失去N端头三个氨基酸残基的截短形式优选选自：
AIHPF、SIHPF、DIHPF、YAHPF、YNHPF、YDHPF、YHHPF、YSHPF、YIYPF、YIHPA、YIHPV、YIHPL、YIHPI、AAHPF、ADHPF、AHHPF、和ADYPF。
根据本发明的优选实施方式，至少一个半胱氨酸残基结合在分子式I、II和/或III的以及前面提到的所有特定肽的氨基酸序列的N端。
本发明的肽可在其N端还包括至少一个半胱氨酸残基。所述半胱氨酸残基可充当反应性基团，用来将所述肽结合到其他分子或载体上。例如，所述基团可用于将所述肽结合到载体蛋白质上。所述半胱氨酸残基也可结合本发明的肽的C端。
本发明的肽被结合到载体上，所述载体优选为蛋白质载体。
为了增加哺乳动物中抗血管紧张素肽的特异性抗体的产生，本发明的化合物被结合到载体上。
根据本发明的优选实施方式，所述载体选自匙孔
Figure BDA0000146516040000141
血蓝蛋白(KLH)、破伤风类毒素(TT)、白喉毒素(DT)或其他含有T细胞表位的蛋白质或肽。
根据本发明优选的实施方式，所述肽结合于可药用载体上，优选为KLH(匙孔
Figure BDA0000146516040000142
血蓝蛋白)、破伤风类毒素、白蛋白结合蛋白、牛血清白蛋白、树枝状化合物(dendrimer)(MAP；Biol.Chem.358：581)、肽连接子(或者旁侧区)以及佐剂类物质，见Singh等人“Nat.Biotech.17(1999)，1075-1081”(尤其该文献的表1中的那些)和O′Hagan等人“Nature Reviews，Drug Discovery 2(9)(2003)，727-735”(尤其文中所述的内源性免疫有效化合物和递送系统)、或者是它们的混合物。本文中的偶联化学反应(例如，通过异源双重功能化合物，如GMBS，以及其他在Greg T.Hermanson的“Bioconjugate Techniques”当中描述的化合物当然也包括在内)可以选自本领域技术人员已知的反应。此外，疫苗组合物中可配有佐剂，优选为低溶解性的铝组合物，尤其为氢氧化铝。当然，也可以使用其他佐剂，例如MF59磷酸铝、磷酸钙、细胞因子(例如，IL-2、IL-12、GM-CSF)、皂苷(例如，QS21)、MDP衍生物、CpG寡聚物、LPS、MPL、聚偶磷氮(polyphosphazenes)、乳剂(例如Freund公司的SAF)、脂质体、病毒体、免疫刺激复合物(iscoms)、cochleates、PLG微粒、泊洛沙姆颗粒、病毒状颗粒、热不稳定性肠毒素(heat-labile enterotoxin，LT)、霍乱毒素(cholera toxin，CT)、突变毒素(例如，LTK63和LTR72)、微粒和/或聚合脂质体等。
根据本发明的优选实施方式，所述肽配有佐剂，优选吸附到明矾上。
在相关的实施方式当中，本发明有助于预防或治疗与RAS相关的疾病、紊乱或症状，包括且不限于高血压症、中风、梗塞、肾衰、充血性心力衰竭、血管损伤或视网膜出血。除此之外，使用本发明实施方式当中的肽来免疫可以用来治疗或预防动脉粥样硬化斑块的形成、动脉血栓形成以及与血管炎症相关事件。此外，对于例如多发性硬化症一类自身免疫病的治疗可以使用本发明实施方式公开的肽进行。
本发明的疫苗可以施用于皮下、肌肉内、皮内、静脉内(参见诸如“Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations”，Sarfaraz Niazi，CRCPress Inc，2004年)。根据施药途径，所述药剂可包括相应的载体、佐剂和/或赋形剂。
本发明的疫苗含有本发明的化合物，含量为0.1ng到10mg，优选为10ng到1mg，尤其为100ng到100μg；或者可为，例如100fmol到10μmol，优选10pmol到1μmol，尤其为100pmol到100nmol。本发明的化合物或肽给药哺乳动物的用量优选每剂为100ng到1mg，更优选为1μg到500μg，甚至更优选为10μg到100μg，特别为20到40或30μg。一般地，所述疫苗也可含有辅助物质(auxiliary substances)，例如，缓冲液、稳定剂等。
然而，本发明的另一方面涉及本发明的肽用于制造药剂的用途，该药剂用于治疗和/或预防与肾素活化的血管紧张素系统相关的机体病症，优选为高血压症和与高血压症相关的疾病。
本发明中公开的氨基酸残基的简称与IUPAC命名法(IUPACrecommendations)一致：
本发明还列举了下列图和实施例，但是并不仅限于此。
图1.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置1的肽变体的免疫原性。
图2.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置2的肽变体的免疫原性。
图3.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置3的肽变体的免疫原性。
图4.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置4的肽变体的免疫原性。
图5.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置5的肽变体的免疫原性。
图6.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置6的肽变体的免疫原性。
图7.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置7的肽变体的免疫原性。
图8.表示Ang II肽CDRVYIHPF位置8的肽变体的免疫原性。
图9.表示有两个或更多个氨基酸被丙氨酸替代的肽变体的免疫原性。
图10.表示肽变体的免疫原性，所述肽变体有三个不同位置的氨基酸被这些位置有利的氨基酸(favorable amino acid)置换物替代。
图11.表示肽变体的免疫原性，所述肽变体有两到四个不同位置的氨基酸被这些位置有利的氨基酸置换物替代。
图12.表示多种失去N端第一个氨基酸的截短型血管紧张素VARIOTOPE的免疫原性。
图13.表示多种失去N端前两个或前三个氨基酸的截短型血管紧张素VARIOTOPE的免疫原性。
每一图中，其X轴上所列为经由标明的肽免疫动物而获得的血清。其Y轴表示的是所诱导血清的相对滴度。由Ang II处理的动物的滴度设为100％。滴度被换算成给出半数最大结合值(即ODmax/2)的血清稀释度。白色柱条表示针对用来免疫的肽的滴度，而黑色柱条代表针对Ang II肽的滴度。
实施例：
实施例1：Ang II肽的位置扫描(Positional-scanning)
血管紧张素II(Ang II)为调节血压的RAS系统当中的关键组成成分，它被选择充当疫苗疗法的靶标。因此，鉴定并选出了能诱导靶向血管紧张素II的体液免疫反应的肽。
术语“位置扫描”是指如下技术，它可以在某一蛋白质或肽区域内系统性地将其每一个位置上的氨基酸(AA)残基用其他AA替换。目前为止，该技术仅被使用或应用于蛋白质-蛋白质相互作用研究、肽-蛋白质相互作用研究和/或用来研究肽或蛋白质区域的功能。
现在，位置扫描技术被转用于免疫学领域，用来确定八肽AngII(DRVYIHPF)的合适的VARIOTOPE。这个实施例的目地是，要确定每个位置上能支持或至少不干扰对靶向Ang II肽的多克隆/寡克隆体液免疫反应的诱导效应的AA。
因此，在第一组实验中，Ang II序列的每个位置都被具有相同或不同特征的氨基酸系统性地替代(见表1位置2)。然后所有这些肽通过附加的N端半胱氨酸化学连接到匙孔
Figure BDA0000146516040000171
血蓝蛋白(KLH)载体上，并与充当佐剂的明矾(Alum)一起给药至小鼠(BALB/c)。用免疫小鼠的血清分析所述肽的免疫原性。为此目的，使用基于肽的ELISA法确定抗所注射肽(即，Ang II肽变体，VARIOTOPEs)的血清滴度，并确定所得的抗Ang II肽的血清的结合能力。
表1.替代了位置2的氨基酸的肽变体
Figure BDA0000146516040000172
Figure BDA0000146516040000181
图中(图1到8的位置1到位置8)显示来自这些实验的结果。X轴列出经所述肽免疫的动物的血清。Y轴表示所诱导血清的相对滴度。由Ang II处理的动物得到的滴度设为100％。滴度被换算成给出半数最大结合值(即ODmax/2)的血清稀释度。白色柱条表示抗用来免疫的肽的滴度，而黑色柱条代表抗Ang II肽的滴度。
尽管所有测试的针对位置1的Ang II肽变体能够诱导出与注射的肽相结合的抗体(图1)，反映出这些氨基酸的交换没有完全消除它们的免疫原性，但是某些肽变体(具有芳香族氨基酸交换的肽变体)诱导出显著更低滴度的血清。与此相反，位置1处具有G的肽变体似乎能够诱导出两倍于Ang II处理动物抗所注射肽的血清的滴度。使用这种变体使抗Ang II的反应性大致增加了50％。源自在第1位包含A、T、E、N、R或H的肽变体的血清与源自Ang II肽的血清没有明显不同。位置1处的芳香族或脂肪族残基，例如L、F、Y，似乎对于诱导识别Ang II的免疫反应不太有利。
因此，位置1可包括下列AA：
-原来的AA：D
-氨基酸G，A
-极性氨基酸，例如E、N、R、H。
如图2所列，采用位置2的精氨酸被P或M替代的肽来免疫，增加了滴度以及与Ang II的反应性。例如R被A替代、或R被K替代的肽，它们诱导的血清滴度表现出与Ang II肽诱导的血清滴度相同。这些结果说明，P或M而非R在位置2，更有利于诱导体液免疫反应。而诸如A和K似乎与R一样好。
位置2可包括下列AA：
-原来的AA：R
-非极性和中性AA：P、M、G和A
-极性氨基酸，例如E、H、K
位置3可包括下列AA：
-原来的AA：V
-AA：G和H(最有利的)
-非极性和中性AAs，例如A
-AA脂肪族的AA，例如L
-极性氨基酸，例如E、H、K
位置4原来的AA Y可以被所有AA取代而无需考虑它们的性质。
AA P和芳香族AA Y和W不能替代位置5原来的AA I。其他任意AA均可用于这一目地。
图6显示的结果来自其位置6的H被指定的氨基酸所替代的肽。芳香族氨基酸H被其他芳香族氨基酸，例如W和Y替代，导致所形成的肽比用于接种的肽能诱导出更好地识别Ang II的血清。对于位置6被非芳香族氨基酸所替代的肽，其诱导的血清对Ang II的反应性被显著降低(多达60％)。这些结果表明，位置6的芳香族氨基酸可以被替代(但不能为F)。
位置6可包括下列AA：
-原来的AA H
-含芳香族侧链的氨基酸，例如Y、W
位置7可包括下列AA：
-原来的AA P
-有可能使用含芳香族侧链的替代氨基酸，例如F、W、H
位置8可包括下列AA：
-原来的氨基酸F
-氨基酸A、L、I、V、P、M
实施例2：在Ang II序列中使用丙氨酸进行两个或更多个AA位置的组合替代
为了验证使用了位置扫描法的第1个体内实验的结果，也为了检验当使用中性的或有利的AA来替代原来的AA时，不同位置的组合AA替代是否具有相加效应，而当组合不太有利的AA时，是否具有消减效应，Ang II序列的两个或更多个氨基酸被替代。为此目的，接下来的一组实验中使用了丙氨酸(表2)。丙氨酸已经被确定为：位置4的有利替代AA(图4)，位置1、2、3、5及位置8的中性替代AA(图1到3、5、8和9)。位置6和7上原来的氨基酸H和P分别被丙氨酸替代后表现为不太有利(图6、7和9)。因此，含有位置4的丙氨酸(有利替代)，以及位置1到3、5和8的丙氨酸(中性替代)的肽变体，有望比Ang II肽诱导更高的或者至少处于同一水平的抗Ang II滴度。位置1到3、5和8有丙氨酸的肽变体应该能诱导出至少与Ang II肽诱导的血清以同等水平识别Ang II的免疫反应。在位置6和7有丙氨酸替代(是这些位置的不太有利的氨基酸替代)的肽变体有望诱导出反应性下降的抗Ang II血清。
所有表2中所列的肽通过其N端化学连接到吸附于明矾的KLH上，并且经皮下注射实验动物(BALB/c小鼠)。血清通过ELISA法进行分析，肽变体诱导的抗体反应与原始的肽诱导的抗体反应加以比较。
表2.氨基酸替代的肽变体的实例
Figure BDA0000146516040000201
所有丙氨酸替代的肽变体均能够诱导出与所注射的肽相结合的抗体，表明氨基酸的替代不能消除其免疫原性(图9)。但是C-DAVYIAAF诱导的血清抗体低于其他抗原诱导的滴度，表明丙氨酸对所述AA的组合替代对于所述肽的免疫原性是不太有利的(图9)。
对肽变体诱导的血清(表2)抗Ang II的反应性的分析显示，下列肽诱导的血清表现出对Ang II的反应性减弱：C-DRVYAAPF、C-DRVYIHAA、C-DRAAAHAF、C-DAVYIAPF、C-DAVYIAAF、C-DAVYIAAA(图9)。这些结果指出，至少在位置6或位置7发生一个丙氨酸替代的Ang II的肽变体(丙氨酸在这些位置是不太有利的AA替代)，其所诱导的血清表现出对Ang II反应性的降低。这与位置扫描实验中得到的结果相一致。
Ang II分子的位置1-5的丙氨酸替代(对于这些位置，丙氨酸已经被明确为中性或有利的AA替代)不干扰对Ang II的反应性。这些位置的丙氨酸替代导致所诱导的滴度超过了Ang II所诱导得到的滴度。尤其当位置4的Y被丙氨酸替代后可以看到这个效果(图9)。
在Wista大鼠体内研究多种经丙氨酸修饰的Ang II表位也显示出类似的结果。它表明所述结果不限于小鼠，也可转用到其他物种。
实施例3：组合不同位置的有利氨基酸以挑选血管紧张素VARIOTOPE
在接下来的多个实验中，测试了每一位置上的有利和/或中性氨基酸的组合。正如图10和11所见，选用位置扫描实验中挑选出来的有利氨基酸在不同位置进行氨基酸替换，结果形成了能诱导出与血管紧张素II诱导的抗血管紧张素II的体液免疫反应相当、或者更强的反应的VARIOTOPE。
实施例4：失去N端头几个氨基酸残基的截短型血管紧张素VARIOTOPE
在接下来的多个实验中，测试了血管紧张素VARIOTOPE的多个截短形式。如图12和13所见，N端变短的血管紧张素VARIOTOPE(如上述选出的)没有失去它们诱导与血管紧张素II所诱导的抗血管紧张素II体液免疫反应相当或者更强反应的能力。

Claims (8)

1.一种疫苗，用于治疗和/或预防与肾素激活的血管紧张素系统相关的机体病症，所述疫苗包括结合于可药用载体的肽，所述肽具有下式的氨基酸序列：
(X1)m(X2)n(X3)oX4X5HPX6   (分子式I)
其中
X1为G或D，
X2为A、P、M、G或R，
X3为G、A、H或V，
X4为S、A、D或Y，
X5为A、D、H、S、N或I，
X6为A、L或F，
其中，在满足当o为0时m和n为0、当n为0时m为0的前提下，m、n和o独立地为0或1；以及，其中，所述肽不为DRVYIHPF。
2.如权利要求1所述的疫苗，其特征在于，所述肽选自：
GRVYIHPF、DPVYIHPF、DMVYIHPF、DGVYIHPF、DAVYIHPF、DRGYIHPF、DRAYIHPF、DRHYIHPF、DRVAIHPF、DRVSIHPF、DRVDIHPF、DRVYAHPF、DRVYNHPF、DRVYDHPF、DRVYHHPF、DRVYSHPF、DRVYIHPA、DRVYIHPL、DAAYIHPF、DRAAIHPF、DRVAAHPF、DRAYAHPF、DRAAAHPF、DAAAIHPF、DAGYIHPF、DAHYIHPF、DPGYIHPF、DPAYIHPF、DMGYIHPF、DMAYIHPF、DMHYIHPF、DGGYIHPF、DGAYIHPF、DGHYIHPF、DPVAIHPF、DMVAIHPF、DMVSIHPF、DRGAIHPF、DRHAIHPF、DRGYAHPF、DRGYDHPF、DRGYHHPF、DRGYSHPF、DRGYNHPF、DRAYDHPF、DRAYHHPF、DRAYSHPF、DRAYNHPF、DRHYAHPF、DRHYSHPF、DRHYNHPF、DRHYDHPF、DRHYHHPF、DRGADHPF、DRVAHHPF、DRHADHPF、GRGAIHPF、DPGAIHPF、DPGSIHPF、DMGAIHPF、DMGSIHPF、GPGYIHPF、GPGSIHPF、GMGSIHPF、DRGSIHPF、DPHAIHPF、DMHAIHPF、GPHAIHPF、GMHSIHPF、PVYIHPF、MVYIHPF、GVYIHPF、AVYIHPF、RGYIHPF、RAYIHPF、RHYIHPF、RVAIHPF、RVSIHPF、RVDIHPF、RVYAHPF、RVYNHPF、RVYDHPF、RVYHHPF、RVYSHPF、RVYIHPA、RVYIHPL、AAYIHPF、RAAIHPF、RVAAHPF、RAYAHPF、RAAAHPF、AAAIHPF、AGYIHPF、AHYIHPF、PGYIHPF、PAYIHPF、MGYIHPF、MAYIHPF、MHYIHPF、GGYIHPF、GAYIHPF、GHYIHPF、PVAIHPF、PVSIHPF、MVAIHPF、MVSIHPF、RGAIHPF、RHAIHPF、RGYAHPF、RGYDHPF、RGYHHPF、RGYSHPF、RGYNHPF、RAYDHPF、RAYHHPF、RAYSHPF、RAYNHPF、RHYAHPF、RHYSHPF、RHYNHPF、RHYDHPF、RHYHHPF、RGADHPF、RGAHHPF、RHADHPF、RHSIHPF、PGAIHPF、RHAIHPF、PGSIHPF、MGAIHPF、MGSIHPF、RGSIHPF、PHAIHPF、MHAIHPF、PHSIHPF、MHSIHPF、GYIHPF、AYIHPF、HYIHPF、VYAHPF、VYNHPF、VYDHPF、VYHHPF、VYSHPF、VYIHPA、VYIHPL、AAIHPF、AYAHPF、HYIHPF、GAIHPF、HAIHPF、GYAHPF、GYDHPF、GYHHPF、GYSHPF、GYNHPF、AYDHPF、AYHHPF、AYSHPF、AYNHPF、HYAHPF、HYSHPF、HYNHPF、HYDHPF、HYHHPF、GAIHPF、HSIHPF、GSIHPF、HAIHPF、AIHPF、SIHPF、DIHPF、YAHPF、YNHPF、YDHPF、YHHPF和YSHPF。
3.如权利要求1或2所述的疫苗，其特征在于，至少有一个半胱氨酸残基结合于符合分子式I的氨基酸序列的N-端。
4.如权利要求1至3中任意一项所述的疫苗，其特征在于，所述载体为蛋白质载体。
5.如权利要求4所述的疫苗，其特征在于，所述蛋白质载体选自匙孔虫戚血蓝蛋白(keyhole limpet haemocyanin，KLH)、破伤风类毒素(TT)或白喉毒素(DT)。
6.如权利要求1至5中任意一项所述的疫苗，其特征在于，所述化合物与佐剂一起配制，优选吸附在明矾上。
7.如权利要求1至6中任意一项所述的疫苗，其特征在于，所述肾素激活的血管紧张素系统相关的机体病症选自高血压症、中风、梗塞、肾衰竭、充血性心力衰竭、动脉粥样硬化、血管损伤、视网膜出血和自身免疫病，优选是多发性硬化症。
8.由权利要求1至6中任意一项所定义的肽在制备疫苗中的用途，所述疫苗用于治疗和/或预防与肾素激活的血管紧张素系统相关的机体病症，优选为高血压症和高血压症相关的疾病。
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