KR20120052348A

KR20120052348A - 백신

Info

Publication number: KR20120052348A
Application number: KR1020127004797A
Authority: KR
Inventors: 귄터 슈타플러; 페트라 뤼어스; 안드레아스 마이로퍼; 프랑크 마트너; 발터 슈미트; 안드레아 돌리쉬카
Original assignee: 아피리스 아게
Priority date: 2009-07-23
Filing date: 2010-07-23
Publication date: 2012-05-23
Also published as: AU2010276069A1; PT2529748E; JP5785542B2; DK2529748T3; IL217194A0; RU2534883C2; JP2012533572A; EP2529748A3; JP2015214552A; EP2529748A2; CN102573894A; US20120269836A1; RU2012106506A; CA2767187A1; RU2014116169A; AR077423A1; BR112012001521A2; AU2010276069B2; US20140255435A1; EP2671592A2

Abstract

레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애의 치료 및/또는 예방을 위한 약제학적으로 허용되는 담체에 결합된 펩티드를 포함하는 백신으로서,
상기 펩티드가 하기의 아미노산 서열을 가지며, 상기 펩티드가 DRVYIHPF가 아닌 백신:
(X₁)_m(X₂)_n(X₃)_oX₄X₅HPX₆ (화학식 I),
상기 식에서,
X₁은 G 또는 D이고,
X₂는 A, P, M, G 또는 R이며,
X₃은 G, A, H 또는 V이고,
X₄는 S, A, D 또는 Y이며,
X₅는 A, D, H, S, N 또는 I이고,
X₆은 A, L 또는 F이며,
m, n 및 o는, o가 0인 경우에 m 및 n이 0이고, n이 0인 경우에 m이 0이라는 전제 하에, 독립적으로 0 또는 1이다.

Description

백신{Vaccine}

본 발명은 바람직하게는 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애(disorder), 바람직하게는 고혈압 및 고혈압-관련 심혈관 질환(CVD)을 예방하고/하거나 치료하기 위한 의약(medicine), 면역학, 분자 생물학 및 바이러스학의 분야에서 사용될 약제(medicament)에 관한 것이다.

레닌 앤지오텐신 알도스테론계(RAAS)로도 알려져 있는 레닌 앤지오텐신계(RAS)는 신체 내의 상이한 생리적 과정을 조절하는 호르몬계이다. RAS 활성은 효소 레닌에 의한 펩티드 앤지오텐시노겐의 데카펩티드 앤지오텐신 I(Ang I)으로의 절단에 의해 개시된다. 레닌계의 주요 생성물은 옥타펩티드 호르몬 앤지오텐신 II(Ang II)이며, 이는 앤지오텐신-전환 효소(ACE)에 의해 Ang I으로부터 형성된다. RAS는 체적 조절 및 혈압의 유지에 중요한 역할을 수행한다. 그러나, 레닌계의 과도한 활성은 고혈압 및 표적 장기 손상과 관련된다.

최근에, 레닌 앤지오텐신계(RAS)가 혈압 조절 및 염-수분 균형에서의 그들의 전형적인 역할을 넘어서 확대되는 것이 명백해졌다. 심혈관 및 레닌 조직의 생리학적 및 병리생리학적 과정을 조절하는 것 외에, RAS는 뇌, 내분비, 감각, 지방 및 면역 세포를 비롯한 추가의 수많은 조직에서 활동하는 것으로 기재된다. 따라서, RAS는 또한 이들 조직의 생리학적 및 병리생리학적 과정에서 중요한 역할을 수행한다.

RAS의 생리학적 및 병리생리학적 연루가 매우 광범위하기 때문에, RAS를 표적화하는 약제는 고혈압, 심부전 및 당뇨 신장병증과 같은 심혈관 및 신장 질환의 치료에서 주요한 임상 도구가 된다. 더욱이, 상이한 연구에서는 RAS를 차단하는 것이 고혈압과 관련된 심혈관 질환에 영향을 미칠 뿐 아니라, 죽상동맥경화증과 같은 염증 과정과 연결된 심혈관 사건(event)을 감소시킬 수 있음을 보여준다. 이들 기초 연구 및 동물 연구는 죽상경화판 발생 및 심장 리모델링(heart remodeling)을 직접 유도하는 전염증성 매개체로서의 앤지오텐신 II를 강력하게 뒷받침한다.

또한, RAS는 죽상동맥경화증의 염증 양상뿐 아니라, 다발성 경화증과 같은 자가면역 질환에 중추적인 것으로 보인다.

더욱이, 증거에 의해, 레닌-앤지오텐신계의 차단이 새로 발병하는 당뇨병의 발생을 감소시키고, 당뇨병 합병증의 위험을 감소시키는 것이 제시되었다. 다른 연구는 인슐린 내성의 발생을 야기하는 Ang II의 효과 및 당뇨병에 대한 이의 영향에 대한 개관을 제공한다. 레닌-앤지오텐신계의 구성요소(component)는 인슐린 활성, 및 대사 질환의 발생 및 진행과 복잡한 상호작용을 갖는다.

RAS , 염증 장애 및 자가면역 장애( 죽상동맥경화증 및 다발성 경화증)

죽상동맥경화증은 만성 염증 질환이며, 이에는 혈관 세포, 면역계 및 몇몇 장기가 연루된다. 백혈구, 내피 및 평활근 세포가 죽상경화성 염증에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 보일지라도, 최근의 증거는 또한 사이토카인 및 케모카인, 즉 염증 과정을 조절하는 것으로 보이는 인자에 대한 직접적인 활성을 뒷받침한다. 최근의 연구는 이제 펩티드 호르몬 앤지오텐신 II에 대한 새로운 염증 활성을 뒷받침한다. 레닌-앤지오텐신계는 염증을 촉진시키는데 중요한 역할을 제공하는데, 이는 앤지오텐신 II가 죽상경화유발성(proatherosclerotic) 사이토카인 분비를 유도하고 내피 기능장애를 증가시키기 때문이다. 앤지오텐신 II는 동맥벽 내에서 사이토카인, 케모카인 및 성장 인자 분비를 조절할 뿐 아니라 부착 분자(VCAM-1, ICAM-1, P-셀렉틴)의 발현을 조절한다. 이것 외에, 레닌-앤지오텐신계는 죽상동맥경화증 및 신장 손상 둘 모두에서 보체계의 활성화를 조절할 수 있는 것으로 나타났다. 이러한 염증 캐스케이드(cascade)는 내막에 대한 염증 세포 동원을 증가시킴으로써, 혈관 염증 반응을 활성화시킨다. 동원된 세포는 앤지오텐신 II를 생성하여, 양성의 피드백 반응을 야기할 수 있으며, 이러한 양성의 피드백 반응은 이러한 염증 악순환을 유지시킬 수 있다.

최근의 상이한 공보에서는 다발성 경화증(MS)과 유사한 만성 염증 질환 및 모든 인간 만성 질환 중 가장 통상적인 것, 즉 죽상동맥경화증 간의 교차가 그들 둘 모두의 명칭이 공유하는 근원 "경화증"을 초월할 수 있는 것으로 나타났다. 이들은 RAS가 또한, 다발성 경화증(MS) 및 그의 동물 모델, 실험상 자가면역 뇌척수염(EAE)에 의해 예시되는 자가면역에서 주요한 역할을 수행하는 것을 보여준다. 프로테오믹스(proteomics)를 사용하여, 저자는 RAS가 MS의 뇌 병변에서 상향조절되는 것을 관찰하였다. ACE 억제제를 사용한 앤지오텐신 II 생성의 차단 또는 앤지오텐신 II 수용체 차단제(blocker)를 사용한 앤지오텐신 II 신호전달의 억제는 자가반응성(autoreactive) TH1 및 TH17 세포를 억제하고, 항원-특이적 CD4_FoxP3_ 조절 T 세포(Treg 세포)를 증진시켰다. ACE 억제제로의 처리는 마비성 EAE를 역행시키는데 충분한 능력을 갖는 다량의 CD4_FoxP3_T 세포를 유도하였다. 따라서, 저자는 RAS의 조절이 인간 자가면역 질환에 대한 응용에 매력적인 치료 전략이라고 결론지었다.

RAS 및 심혈관 질환 - 고혈압

심혈관 질환(CVD)은 세계적으로 가장 중요한 사망의 원인이다. 세계 보건 기구(WHO)에 따르면, 대략 30%의 모든 전체 사망이 CVD 때문일 수 있다. CVD는 심장 및 혈관의 장애에 의해 야기되며, 다양한 징후(manifestation)를 포함한다. 이들은 심근 경색, 뇌졸중, 심부전 및 말기 신장 질환을 포함한다. CVD에 대한 가장 일반적인 위험 인자는 고혈압이다. 2000년도에, 1/4을 초과하는 세계의 성인 인구에 고혈압이 있었으며, 적절한 조치가 취해지지 않는다면, 이러한 숫자는 계속해서 증가할 것이다.

통상적으로 높은 혈압으로 지칭되는 고혈압은 140 mmHg를 초과하는 수축기 혈압 및/또는 90 mmHg를 초과하는 확장기 혈압을 갖는 만성적으로 상승된 혈압으로 정의된다. 미국 고혈압 예방, 검출, 평가 및 치료 합동 위원회(Joint National Committee on Prevention, Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Pressure)에 의해 규정된 지침에는 120 내지 139 mmHg의 수축기 혈압 및/또는 80 내지 89 mmHg의 확장기 혈압을 갖는 사람이 고혈압 전단계(pre-hypertensive)로 고려되어야 하며, CVD를 예방하기 위한 건강-증진적인 변화를 필요로 하는 것으로 제시되어 있다. 따라서, 혈압을 낮추는 것은 CVD를 예방하기 위한 중요한 전략이다. 제1 단계로서, 혈압 감소는 건강에 해로운 식사, 신체 무활동 및 흡연과 같은 주요 요인을 표적화하는 생활 양식의 변화에 의해 달성될 수 있다. 그러나 근본적인 고혈압의 치료는 특정 치료법을 필요로 한다. 혈압의 주요 조절자는 레닌-앤지오텐신계(RAS)이며, 이는 치료적 개입을 위한 매력적인 표적이 된다. 따라서, RAS의 구성요소상에서 특이적으로 활동하는 약제는 고혈압의 치료에 중요한 임상적 도구가 된다.

RAS 경로는 레닌에 의한 앤지오텐시노겐의 절단으로 시작되는 캐스케이드이다. 레닌은 신장 내의 사구체옆 세포의 과립에서 주로 합성되고 저장되고, 앤지오텐시노겐에 대하여 높은 기질 특이성을 갖는 아스파르틸 프로테아제(protease)이다. 앤지오텐시노겐은 간 세포에 의해 주로 생성되며, 간 세포에 의해 순환계로 항시적으로 분비된다. 이는 레닌에 의해 N-말단에서 절단되어, 데카펩티드 앤지오텐신 I(Ang I; 1-10 펩티드)을 형성하며, 이는 생물학적으로 활성이 있는 옥타펩티드 앤지오텐신 II(Ang II; 1-8 펩티드)로 빠르게 전환된다. Ang II와 반대로, Ang I은 생물학적 활성이 없는 것으로 보이며, 단지 Ang II에 대한 전구체로서 존재한다. Ang I의 절단은 기본적으로 그러나 배타적이지 않게, 앤지오텐신-전환 효소(ACE)에 의해 매개된다. 이러한 막-결합 메탈로프로테이나제(metalloproteinase)는 내피 세포의 표면상에 발현되며, 이와 함께, 가장 높은 농도가 폐의 혈관 상피에서 관찰된다. ACE 외에, 키마아제(chymase)가 Ang II를 생성하는 것으로 나타났다. Ang II는 또한, 토닌 및 카텝신과 같은 효소에 의해 앤지오텐시노겐으로부터 직접 생성될 수 있다. 더욱이, 다른 Ang I- 및 Ang II-유래의 작용성 펩티드가 순환계에서 발견될 수 있다. 이들은 아미노-, 카복시- 또는 엔도펩티다아제에 의해 생성되며, Ang(1-9), Ang(1-7), Ang III(2-8 펩티드) 및 Ang IV(3-8 펩티드)를 포함한다. 앤지오텐신-전환 효소 II(ACE2)로 알려져 있는 카복시펩티다아제(carboxypeptidase)는 Ang I뿐 아니라 Ang II에서 작용한다. ACE2는 Ang I로부터 Ang1-9를 생성하고, Ang II로부터 Ang1-7을 생성한다. 그 다음, Ang1-9는 추가로 ACE에 의해 Ang1-7로 전환될 수 있다. 혈압을 상승시키고, 고혈압에서 혈관 리모델링의 주요 매개체인 것으로 보이는 Ang II와 달리, Ang1-7 펩티드는 혈관확장을 조장하고, 이에 의해 Ang II의 잠재적으로 유해한 활동에 대항할 수 있다. 펩티드 Ang1-7은 그의 수용체를 통해 mas 종양유전자(oncogen) 생성물(MAS)에 작용한다.

Ang II 및 Ang 1-7은 RAS의 주요 이펙터(effector) 펩티드로 고려되는 한편, Ang III 및 Ang IV는 더 적은 활성을 갖는다(Ang II의 활성의 대략 40%). Ang II의 활성은 대개 Ang II 수용체, 1형(AT1; 1a 및 1b 아형) 및 2형(AT2)으로 명명된 2가지의 7회 막관통(transmembrane) 수용체에 의해 매개된다. AT1 및 AT2 아형은 유사하게 Ang II에 결합하나, 세포의 국소화가 상이하며, 다양한 조직에서 달리 발현된다. Ang II 하이퍼텐시노겐(hypertensinogenic) 활동의 대부분은 AT1 수용체에 기인한다.

신체의 도처에서, Ang II는 유력한 혈관수축제(vasoconstrictor)이다. 신장에서, 이는 토리동맥(glomerular arteriole)을 수축시키고, 이에 의해 전신 동맥 혈압을 증가시키고, 혈류를 감소시킨다. 이는 부신 피질에서 알도스테론의 분비를 야기하며, 이는 차례로 신장 내의 세관이 소변으로부터 더 많은 나트륨과 물을 재흡수하게 한다. 이는 또한, 중추신경계에서 작용하여, 소금에 대한 개인의 식욕을 증가시키고, 이들이 갈증을 느끼게 한다. 더욱이, Ang II는 항이뇨 호르몬(ADH)의 분비를 자극한다.

RAS의 구성요소의 통상적인 역할은 내분비 인자로 작용하여, 혈압 및 전해질뿐 아니라 체액 균형을 유지하는 것이다. 이러한 순환하는 RAS에 더하여, 국소의 앤지오텐신-생성 캐스케이드가 몇몇 조직 내에 존재한다. 소위 조직 RAS는 국소적으로 측분비(paracrine) 및/또는 자가분비(autocrine) 인자로 작용할 수 있으며, 전체 또는 부분으로, 순환하는 대응물과는 독립적으로 작용할 수 있다.

현재 고혈압을 치료하기 위한 몇몇의 약물이 시판 중에 있다. 이들은 예를 들어, 이뇨제 및 칼슘-채널 차단제를 포함하며, RAS의 구성요소를 특이적으로 표적화하는 많은 약제를 포함한다. 후자에는 ACE의 활성측(active side)에 대한 결합 및 효소의 기질에 결합하고 절단하는 효소의 능력의 간섭에 의하여 작용하는 ACE 억제제가 포함된다. ACE 억제제의 특징적인 부작용은 마른 기침 및 초회(first dose) 저혈압/혈관신경성 부종이다. RAS를 표적화하는 다른 종류의 약제는 앤지오텐신 수용체(AT1) 차단제(ARB)이다. ARB는 AT1 수용체에 대한 앤지오텐신 II의 결합을 차단함으로써, Ang II의 작용을 특이적으로 간섭한다. 최근에, RAS를 표적화하는 신규한 화합물, 즉 레닌을 억제하는 약물인 알리스케린(Aliskerin)이 시장에 방출되었다.

당업계에서는, 또한 Ang II보다 AT1 수용체에 대한 더 높은 결합 친화성을 보여주는 Ang II 에 대한 길항제를 사용하는 것이 제안되었다. WO 2005/044313 A호에서는, 심장 질환, 섬유증 및 죽상동맥경화증과 관련된 질환의 치료에 사용될 수 있는 화합물이 개시되어 있다. WO 2005/044313 A호에 개시되어 있는 화합물은 일반식 X₁X₂VYIHPX₃을 갖는 옥타펩티드를 포함하며, 여기서, X₁은 임의의 아미노산 잔기일 수 있으며, X₂는 아르기닌 또는 N-알킬화 아르기닌 또는 아르기닌의 미메틱(mimetic)일 수 있고, X₃은 소수성 측쇄를 함유하는 아미노산 잔기일 수 있다. 이들 화합물은 AT1 수용체에 대해 앤지오텐신 II보다 더 높은 결합 친화성을 갖는다(길항 활성).

GB 2001653 A호에서는, 앤지오텐신 II로부터 유래되고, 일반식 XRVYIHPY를 갖는 화합물이 개시되어 있으며, 여기서, X는 α-아미노옥시 지방족 아실기를 나타내며, Y는 류신, 아이소류신, 알라닌 또는 트레오닌일 수 있다. 이러한 화합물은 신장성 고혈압의 치료에 사용될 수 있다.

WO 2002/087504 A호, WO 2001/043761 A호, WO 2001/098325 A호 및 WO 2000/002905 A호는 앤지오텐신 II 유사체로서 기능하는 화합물을 제공한다.

고혈압을 치료하기 위한 상이한 약물을 시장에서 입수할 수 있지만, 고혈압은 여전히 부적절하게 다루어지고 있다. 불량한 전체 치료 성공은 한편으로는 증상이 없는 고혈압의 성질 때문이고, 다른 한편으로는 1일 1회 이상의 자가-투여를 필요로 하는 약제를 사용하는 장기간 치료의 필요 때문이다.

최근에, 능동(active) 면역요법이 고혈압 및 관련 장애를 치료하기 위한 유력한 새로운 전략으로서 관심이 증가되고 있다.

고혈압을 치료하기 위한 RAS의 구성요소에 대한 백신접종의 실용성은 상이한 동물 모델에서 나타났다(Michel-JB et al., Am Heart J. 1989; 117:756). 처음의 방법 중 하나에서, 레닌에 대한 백신접종이 혈압을 낮추는데 효과적인 것으로 나타났다. 그러나, 이러한 방법은 다음 년도에 계속되지 않았는데, 이는 동물들이 자가면역 신장염을 앓기 시작했기 때문이다(Michel-JB et al., Circulation. 1990; 81(6):1899-910). 다른 방법은 ACE 및 AT₁R과 같이 세포 표면상에서 막관통 단백질로서 발현되는 RAS의 구성요소에 대한 면역 반응을 유도하는 것을 목표로 하였다. 몇몇 연구 그룹은 AT₁R에 대한 능동 면역화를 조사하였다. 몇몇 연구는 AT₁R의 N-말단에 대한 항체가 자연발생 고혈압 랫트(rat)에서 고혈압의 발생을 약화시킬 수 있음을 보고하였지만, 대부분의 방법은 혈압에 유의미한 효과가 없었다. ACE에 대한 능동 면역화에 대한 데이터는 매우 제한적이다. 한 보고에서는 토끼의 백신접종에서, 50마리 동물 중 오직 1마리만이 검출가능한 항 ACE 항체를 만들어 냈음이 기재되어 있다(Soffer-RL et al., Fed. Proc. 1983; 42(19):2735-9). 앤지오텐시노겐에 대한 능동 면역화에 대한 기록을 입수할 수 없지만, 몇몇 연구에서는 앤지오텐신 I 및 앤지오텐신 II에 대한 백신접종의 실현가능성을 조사하였다.

담체 단백질(예를 들어, 키홀 림펫 헤모시아닌(KLH))에 컨쥬게이트된(conjugated) Ang I을 사용한 백신접종은 높은 항원-특이적 체액성 면역 반응의 유도를 야기한다. 상이한 동물 모델을 사용하는 실험상 설정에서, 앤지오텐신 I에 대한 백신접종-유도된 항체가 작용성인 것으로 보이는데, 이는 (i) 이들이 웨스턴 블롯(Western blot) 분석에 의해 나타나는 바와 같이 앤지오텐신 I에 결합할 수 있었고, (ii) 혈압이 상당히 감소되어, RAS에 대한 앤지오텐신의 효과가 차단되었음을 나타내었기 때문이다(Downham et al., Br J Clin Pharmacol. 2003; 56:505-12). 반면, 건강한 인간 지원자에서, 혈압 저하 효과는 관찰되지 않았다(Downham et al., 2003). 이러한 관찰은 KLH에 공유 결합되고 알룸(Alum)에 흡수된 Ang I의 12개 아미노산 유사체(PMD3117로 지칭)로 처리하였던 고혈압 환자의 연구에서 추가로 확인되었다(Brown et al., Clin Sci. 2004; 107:167-73). 중요하게는, 이러한 치료 요법이 잘 용인되며, 장기간 지속되는 항원-특이적 체액성 면역 반응을 유도하였다. 또한, 이러한 치료는 레닌 및 알도스테론 수준에서의 변화에 의해 검출되는 바와 같이, 레닌계에서의 효과를 보여주었다. 그러나, PMD3117을 사용한 백신접종은 플라시보(placebo) 대조군에 비해 혈압에서의 영향을 보여주지 않았다(Brown et al., 2004). 그에 반해, 프로테릭스(Protherics)가 개발하고, 알룸을 새로운 애쥬번트(adjuvant), 즉 Co Vaccine HT™으로 대체한 이러한 Ang I 백신의 약간 상이한 추가의 개발에서는 효과를 보여주었다. 이러한 새로운 백신 제형의 투여는 전임상 환경에서 항-앤지오텐신 항체 역가의 10배 증가를 야기하였으며, 건강한 인간 대상체는 수축기 및 확장기 혈압의 변화를 보여주었다. 그러나, 혈압은 오직 약간만 감소되었고, 휴식 기간에만 그러하고, 활동 상태 동안에는 그렇지 않은 것이 더욱 중요할 것이다.

RAS를 차단할 수 있는 항체를 유도하기 위한 다른 방법은 항원으로서 앤지오텐신 II-유래 펩티드를 사용하였다. Ang II-담체 단백질 컨쥬게이트의 주입이 혈압의 저하를 야기하지 않는 이전의 연구와 반대로, 바이러스-유사 입자(VLP)에 커플링된 Ang II를 사용한 백신접종이 높은 항-앤지오텐신 특이적 체액성 면역 반응의 유도를 야기하였으며, 이는 통계적으로 유의미한 혈압의 감소와 병행되었다(Ambuhl et al., J Hypertension. 2007;25:63-72.). 그러나, 최근의 임상 연구에서 이러한 혈압 저하 효과는 바이러스 유사 입자에 커플링된 앤지오텐신 II를 사용한 백신접종시에 모니터링될 수 없었는데, 이는 이러한 펩티드 백신에 의해 유도되는 유도된 체액성 면역 반응이 최적이 아니거나, 충분하지 않을 수 있기 때문이다. 따라서, 당업계에는 앤지오텐신 펩티드를 표적화하는 신규하고 더욱 효과적인 백신을 제공하는 것이 여전히 필요하다.

백신을 기반으로, RAS에 의해 생성되는 상승된 수준의 앤지오텐신 II와 관련된 병상(condition)을 예방하고 치료하기 위한 약제를 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.

약제학적으로 허용되는 담체에 결합된 펩티드를 포함하는 백신이 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애의 치료 및/또는 예방을 위해 적절하게 사용될 수 있음이 드러났고, 상기 펩티드는 하기의 아미노산 서열을 가지며, 상기 펩티드는 DRVYIHPF가 아니다:

(X₁)_m(X₂)_n(X₃)_oX₄X₅HPX₆(화학식 I),

상기 식에서,

X₁은 G 또는 D이고,

X₂는 A, P, M, G 또는 R이며,

X₃은 G, A, H 또는 V이고,

X₄는 S, A, D 또는 Y이며,

X₅는 A, D, H, S, N 또는 I이고,

X₆은 A, L 또는 F이며,

m, n 및 o는, o가 0인 경우에 m 및 n이 0이고, n이 0인 경우에 m이 0이라는 전제 하에, 독립적으로 0 또는 1이다.

화학식 I에 따른 아미노산 서열을 갖는 펩티드뿐 아니라, 화학식 II 및 III에 따른 아미노산 서열을 갖는 펩티드가 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애의 치료 및/또는 예방을 위해 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 다른 태양은 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애의 치료 및/또는 예방을 위한, 약제학적으로 허용되는 담체에 결합된 펩티드를 포함하는 백신에 관한 것이며, 상기 펩티드는 하기의 아미노산 서열을 가지며, 상기 펩티드는 DRVYIHPF가 아니다:

(X₁)_m(X₂)_n(X₃)_oX₄X₅X₆PX₇ (화학식 II),

상기 식에서,

X₁은 G, A 또는 D이고,

X₂는 A, P, M, G 또는 R이며,

X₃은 G, A, H 또는 V이고,

X₄는 S, A, D 또는 Y이며,

X₅는 A, D, H, S, N 또는 I이고,

X₆은 Y 또는 H이며,

X₇은 A, V, L, I 또는 F이며,

본 발명의 특히 바람직한 실시형태에 따르면, 백신은 하기의 아미노산 서열을 가지며, DRVYIHPF가 아닌 펩티드를 포함하며, 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애, 바람직하게는 고혈압 및 고혈압-관련 질환의 치료 및/또는 예방을 위해 사용될 수 있다:

X₁X₂X₃X₄X₅X₆PX₇ (화학식 III)

상기 식에서,

X₁은 G, A 또는 D이고,

X₂는 A, P, M, G 또는 R이며,

X₃은 G, A, H 또는 V이고,

X₄는 S, A, D 또는 Y이며,

X₅는 A, D, H, S, N 또는 I이고,

X₆은 Y 또는 H이며,

X₇은 A, V, L, I 또는 F이다.

본 발명의 백신은 담체 단백질(또는 T 세포 에피토프를 함유하는 펩티드)에 커플링되고 포유류에 투여되는 경우, 앤지오텐신 I 또는 앤지오텐신 II에 대한 항체의 형성을 특이적으로 유도할 수 있다. 화학식 I 내지 III에 약술된 펩티드는 Ang I보다 더 높은 특이성으로 Ang II를 인식하는 항체를 유도할 수 있다. 화학식 I 내지 III에 약술된 바와 같고, 그들의 C-말단에 H 및 L을 갖는, 예를 들어, X₁X₂X₃X₄X₅X₆PX₇HL(둘 모두 Ang I으로부터 유도된 아미노산)의 펩티드를 포함하는 백신은 Ang II보다 더 높은 특이성으로 Ang I을 인식할 수 있는 항체를 유도한다. 이는 앤지오텐신 펩티드 중 오직 한 종류 또는 이들의 조합물 중 어느 하나의 특이적인 표적화를 가능하게 한다. 상기 포유류에서의 앤지오텐시노겐-유래된 펩티드에 대한 이들 항체의 결합 때문에, 앤지오텐신 펩티드의 수준은 유의미하게 영향을 미칠 수 있고, 이에 따라 이들 면역원은 면역치료 방법에서 사용되어, RAS에 의해 또는 기타 프로테아제(예를 들어, 키마아제)에 의해 생성된 상승된 수준의 앤지오텐신 II와 관련된 병상을 퇴치할 수 있다. 분자 활동 방식의 어떠한 특정 이론에 제한하려는 의도 없이, 본 발명의 펩티드 변이체는 1종 초과의 앤지오텐신 펩티드 종에 결합하는 항체를 유도할 수 있는 면역원으로 작용할 것이며, 이에 따라, 모든 관련 앤지오텐신 펩티드 종을 동시에 중화시킨다. 대안적으로, 유도된 항체는 앤지오텐신 II의 C-말단에 특이적으로 결합할 수 있다. 이들 조건 하에서, 유도된 항체는 부가적으로 앤지오텐신 II의 그의 수용체, 즉 AT₁R에 대한 결합을 차단할 것이다.

화학식 I 내지 III에서 동정된 아미노산 잔기는 상기에 나타낸 각각의 아미노산 잔기로 교환할 수 있다. 상기의 변형에 의해 수득되는 아미노산 서열은 원래 앤지오텐신 II 서열(DRVYIHPF)과 동일하지 않은 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 가장 바람직하게는, 화학식 I 내지 III은 앤지오텐신 II 서열과 1개 이상, 더욱 바람직하게는 2개 이상의 아미노산 잔기 및 7개 이하, 바람직하게는 6개 이하, 더욱 바람직하게는 5개 이하, 더욱 바람직하게는 4개 이하, 더더욱 바람직하게는 3개 이하의 아미노산 잔기가 다를 수 있다.

상기에서 동정된 화학식의 펩티드는 5, 6, 7 또는 8개의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다(X₁ 또는 X₂ 또는 X₃에서 시작하여 말단 아미노산 잔기까지).

본 발명에 따른 펩티드는 5, 6, 7 또는 8개 내지 20개, 바람직하게는 5, 6, 7 또는 8개 내지 15개, 특히 5, 6, 7, 8 또는 9개 아미노산을 갖는 펩티드일 수 있다. 본 발명의 펩티드는 또한 300개 이하, 바람직하게는 200개 이하, 더욱 바람직하게는 150개 이하, 더더욱 바람직하게는 100개 이하의 아미노산 잔기를 갖는 폴리펩티드 또는 단백질의 부분일 수 있다.

본 발명의 펩티드는 자연 발생 앤지오텐신 II(DRVYIHPF)와 동일하지 않다. 본 발명의 백신은 앤지오텐신 펩티드에 대해 반응성인 숙주 내의 면역학적 반응을 유도할 것이다.

본 발명의 펩티드는 해당 분야에 잘 알려져 있는 화학 합성 방법에 의해, 단리된 펩티드, 또는 다른 펩티드 또는 폴리펩티드의 부분 중 어느 하나로서, 합성으로 생성될 수 있다. 대안적으로, 펩티드는 펩티드를 생성하는 미생물 내에서 생성될 수 있으며, 이 펩티드는 그 다음 단리되고, 필요에 따라 추가로 정제된다. 펩티드 변이체는 박테리아, 효모 또는 진균류와 같은 미생물에서, 포유류 또는 곤충 세포와 같은 진핵 세포에서, 또는 아데노바이러스, 폭스바이러스, 헤르페스바이러스, 셈리키삼림열 바이러스, 배큘로바이러스, 박테리오파지, 신드비스 바이러스 또는 센다이 바이러스와 같은 재조합 바이러스 벡터에서 생성될 수 있다. 화합물/펩티드를 생성하는데 적합한 박테리아에는 이.콜라이(E. coli), 비.서브틸리스(B. subtilis) 또는 펩티드를 발현할 수 있는 임의의 기타 박테리아가 포함된다. 상기 화합물/펩티드를 발현하는데 적합한 효모 유형에는 사카로미세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae), 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe), 칸디다(Candida), 피키아 파스토리스(Pichia pastoris) 또는 펩티드를 발현할 수 있는 임의의 기타 효모가 포함된다. 해당하는 방법이 해당 분야에 잘 알려져 있다. 또한, 재조합적으로 생성된 펩티드를 단리하고 정제하기 위한 방법이 해당 분야에 잘 알려져 있으며, 예를 들어, 겔 여과, 친화성 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피 등을 포함한다.

펩티드의 단리를 용이하게 하기 위하여, 융합 폴리펩티드가 제조될 수 있으며, 여기서, 펩티드는 친화성 크로마토그래피에 의한 단리를 가능하게 하는 이종 폴리펩티드에 번역적으로(translationally) 융합(공유 결합)된다. 전형적인 이종 폴리펩티드는 His-태그(Tag)(예를 들어, His6; 6개 히스티딘 잔기), GST-태그(글루타티온-S-트랜스퍼라아제) 등이다. 융합 폴리펩티드는 펩티드의 정제를 용이하게 할 뿐 아니라 정제 동안 상기 펩티드의 분해를 방지할 수 있다. 정제 후에 이종 폴리펩티드를 제거하는 것이 바람직하다면, 융합 폴리펩티드는 펩티드와 이종 폴리펩티드 간의 접합부에서 절단 부위를 포함할 수 있다. 절단 부위는 상기 위치에서 아미노산 서열에 특이적인 효소(예를 들어, 프로테아제)로 절단되는 아미노산 서열로 이루어진다.

본 명세서에서 사용되는 "약제학적으로 허용되는 담체에 결합된 펩티드" 및 "담체에 결합된 펩티드"는 담체에 융합되거나 컨쥬게이트된 펩티드를 지칭한다. 본 발명의 펩티드가 (예를 들어, 카복실, 아미노, 설프하이드릴, 하이드록실, 이미다졸릴, 구아니딜 또는 인돌릴기를 통하여) 단백질 담체에 융합되거나 컨쥬게이트된다면, 링커는 펩티드와 단백질 담체 사이에 제공될 수 있다.

본 발명의 특히 바람직한 실시형태에 따르면, 화학식 I의 치환체는 다음과 같을 수 있다:

X₁은 G 또는 D,

X₂는 G, R, A, P 또는 M,

X₃은 A, V 또는 G,

X₄는 Y, A 또는 S,

X₅는 N, I, D, S 또는 A, 및/또는

X₆은 F이다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따라, 화학식 I로부터 유도된 펩티드는 GRVYIHPF, DPVYIHPF, DMVYIHPF, DGVYIHPF, DAVYIHPF, DRGYIHPF, DRAYIHPF, DRHYIHPF, DRVAIHPF, DRVSIHPF, DRVDIHPF, DRVYAHPF, DRVYNHPF, DRVYDHPF, DRVYHHPF, DRVYSHPF, DRVYIHPA, DRVYIHPL, DAAYIHPF, DRAAIHPF, DRVAAHPF, DRAYAHPF, DRAAAHPF, DAAAIHPF, DAGYIHPF, DAHYIHPF, DPGYIHPF, DPAYIHPF, DMGYIHPF, DMAYIHPF, DMHYIHPF, DGGYIHPF, DGAYIHPF, DGHYIHPF, DPVAIHPF, DMVAIHPF, DMVSIHPF, DRGAIHPF, DRHAIHPF, DRGYAHPF, DRGYDHPF, DRGYHHPF, DRGYSHPF, DRGYNHPF, DRAYDHPF, DRAYHHPF, DRAYSHPF, DRAYNHPF, DRHYAHPF, DRHYSHPF, DRHYNHPF, DRHYDHPF, DRHYHHPF, DRGADHPF, DRVAHHPF, DRHADHPF, GRGAIHPF, DPGAIHPF, DPGSIHPF, DMGAIHPF, DMGSIHPF, GPGYIHPF, GPGSIHPF, GMGSIHPF, DRGSIHPF, DPHAIHPF, DMHAIHPF, GPHAIHPF, GMHSIHPF, PVYIHPF, MVYIHPF, GVYIHPF, AVYIHPF, RGYIHPF, RAYIHPF, RHYIHPF, RVAIHPF, RVSIHPF, RVDIHPF, RVYAHPF, RVYNHPF, RVYDHPF, RVYHHPF, RVYSHPF, RVYIHPA, RVYIHPL, AAYIHPF, RAAIHPF, RVAAHPF, RAYAHPF, RAAAHPF, AAAIHPF, AGYIHPF, AHYIHPF, PGYIHPF, PAYIHPF, MGYIHPF, MAYIHPF, MHYIHPF, GGYIHPF, GAYIHPF, GHYIHPF, PVAIHPF, PVSIHPF, MVAIHPF, MVSIHPF, RGAIHPF, RHAIHPF, RGYAHPF, RGYDHPF, RGYHHPF, RGYSHPF, RGYNHPF, RAYDHPF, RAYHHPF, RAYSHPF, RAYNHPF, RHYAHPF, RHYSHPF, RHYNHPF, RHYDHPF, RHYHHPF, RGADHPF, RGAHHPF, RHADHPF, RHSIHPF, PGAIHPF, RHAIHPF, PGSIHPF, MGAIHPF, MGSIHPF, RGSIHPF, PHAIHPF, MHAIHPF, PHSIHPF, MHSIHPF, GYIHPF, AYIHPF, HYIHPF, VYAHPF, VYNHPF, VYDHPF, VYHHPF, VYSHPF, VYIHPA, VYIHPL, AAIHPF, AYAHPF, HYIHPF, GAIHPF, HAIHPF, GYAHPF, GYDHPF, GYHHPF, GYSHPF, GYNHPF, AYDHPF, AYHHPF, AYSHPF, AYNHPF, HYAHPF, HYSHPF, HYNHPF, HYDHPF, HYHHPF, GAIHPF, HSIHPF, GSIHPF, HAIHPF, AIHPF, SIHPF, DIHPF, YAHPF, YNHPF, YDHPF, YHHPF 및 YSHPF로 이루어진 군으로부터 선택된다.

특히 바람직한 펩티드는 DPVYIHPF, DMVYIHPF, DGVYIHPF, DAVYIHPF, DRGYIHPF, DRAYIHPF, DRHYIHPF, DRVAIHPF, DRVYAHPF, DRVYNHPF, DRVYDHPF, DRVYSHPF, DRVYIHPL, DAAYIHPF, DRAAIHPF, DRVAAHPF, DRAYAHPF, DAGYIHPF, DAHYIHPF, DPGYIHPF, DPAYIHPF, DMGYIHPF, DMAYIHPF, DMHYIHPF, DGGYIHPF, DGAYIHPF, DGHYIHPF, DMVSIHPF, DRGAIHPF, DRGYAHPF, DRGYDHPF, DRGYSHPF, DRGYNHPF, DRAYDHPF, DRAYSHPF, DRAYNHPF, DRHYAHPF, DRHYSHPF, DRHYNHPF, DRHYDHPF, GPGYIHPF, GPGSIHPF, DRGSIHPF, PVYIHPF, GVYIHPF, AVYIHPF, RGYIHPF, RAYIHPF, RHYIHPF, RVAIHPF, RVSIHPF, RVDIHPF, RVYAHPF, RVYNHPF, RVYDHPF, RVYSHPF, RVYIHPL, AAYIHPF, RAAIHPF, RVAAHPF, RAYAHPF, AGYIHPF, AHYIHPF, PGYIHPF, PAYIHPF, GGYIHPF, GAYIHPF, GHYIHPF, PVSIHPF, MVSIHPF, RGAIHPF, RGYAHPF, RGYDHPF, RGYSHPF, RGYNHPF, RAYDHPF, RAYSHPF, RAYNHPF, RHYAHPF, RHYSHPF, RHYNHPF, RHYDHPF, RHSIHPF, PGAIHPF, RHAIHPF, PGSIHPF, MGAIHPF, MGSIHPF, MGYIHPF, RGSIHPF, PHAIHPF, MHAIHPF, PHSIHPF, MHSIHPF, GYIHPF, AYIHPF, VYAHPF, VYNHPF, VYDHPF, VYSHPF, AAIHPF, AYAHPF, HYIHPF, GAIHPF, GYAHPF, GYDHPF, GYSHPF, GYNHPF, AYDHPF, AYSHPF, AYNHPF, GAIHPF, GSIHPF이다.

더더욱 바람직한 펩티드는 DPVYIHPF, DMVYIHPF, DGVYIHPF, DAVYIHPF, DRGYIHPF, DRAYIHPF, DRHYIHPF, DRVYIHPL, DAAYIHPF, DRAAIHPF, DRVAAHPF, DRAYAHPF, DAGYIHPF, DAHYIHPF, DPGYIHPF, DPAYIHPF, DMGYIHPF, DMAYIHPF, DMHYIHPF, DGGYIHPF, DGAYIHPF, DGHYIHPF, DMVSIHPF, DRGAIHPF, DRGYAHPF, DRGYDHPF, DRGYSHPF, DRGYNHPF, DRAYDHPF, DRAYSHPF, DRAYNHPF, GPGYIHPF, PVYIHPF, GVYIHPF, RGYIHPF, RAYIHPF, RVSIHPF, RVYIHPL, AAYIHPF, RAAIHPF, RAYAHPF, AGYIHPF, PGYIHPF, PAYIHPF, GAYIHPF, PVSIHPF, MVSIHPF, RGAIHPF, RGYAHPF, RGYSHPF, GYIHPF이며, 여기서 가장 바람직한 펩티드는 DPVYIHPF, DMVYIHPF, DAAYIHPF, DRAAIHPF, DRAYAHPF, DAGYIHPF, DPGYIHPF, DGAYIHPF, DMVSIHPF, DRGAIHPF, DRGYDHPF, DRGYSHPF, PVYIHPF, GVYIHPF, AAYIHPF, RAAIHPF, RAYAHPF, PGYIHPF, PVSIHPF, MVSIHPF, RGAIHPF이다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면,

화학식 II 및 III의 X₁은 G, A 또는 D이고,

화학식 II 및 III의 X₂는 G, A, P, M 또는 R이며,

화학식 II 및 III의 X₃은 G, A, H 또는 V이고,

화학식 II 및 III의 X₄는 S, A, D 또는 Y이며,

화학식 II 및 III의 X₅는 A, D, H, S, N 또는 I이고,

화학식 II 및 III의 X₆은 Y 또는 H이며,

화학식 II 및 III의 X₇은 A, V, L, I 또는 F이다.

상술된 아미노산 잔기는 특히 바람직한 치환체이다.

본 발명의 펩티드는 이들의 N-말단에서의 트렁케이션(truncation)을 포함할 수 있어, 이들 펩티드가 첫번째, 두번째 및/또는 세번째 아미노산 잔기를 소실하게 한다.

펩티드는 바람직하게는 GRVYIHPF, DPVYIHPF, DMVYIHPF, DGVYIHPF, DAVYIHPF, DRGYIHPF, DRAYIHPF, DRHYIHPF, DRVAIHPF, DRVSIHPF, DRVDIHPF, DRVYAHPF, DRVYNHPF, DRVYDHPF, DRVYHHPF, DRVYSHPF, DRVYIYPF, DRVYIHPA, DRVYIHPV, DRVYIHPL, DRVYIHPI, DAAYIHPF, DRAAIHPF, DRVAAHPF, DRAYAHPF, DRAAAHPF, ARAAIHPF, ARVAAHPF, DAAAIHPF, DAAAAHPF, DAVAAHPF, DAGYIHPF, DAHYIHPF, DPGYIHPF, DPAYIHPF, DMGYIHPF, DMAYIHPF, DMHYIHPF, DGGYIHPF, DGAYIHPF, DGHYIHPF, DPVAIHPF, DPVSIHPF, DMVAIHPF, DMVSIHPF, DRGAIHPF, DRHAIHPF, DRGYAHPF, DRGYDHPF, DRGYHHPF, DRGYSHPF, DRGYNHPF, DRAYDHPF, DRAYHHPF, DRAYSHPF, DRAYNHPF, DRHYAHPF, DRHYSHPF, DRHYNHPF, DRHYDHPF, DRHYHHPF, DRHYIYPF, DRGADHPF, DRGAHHPF, DRVAHHPF, DRHADHPF, GRGAIHPF, GRHSIHPF, GRHADYPF, DPGAIHPF, GRHAIHPF, DPGSIHPF, DMGAIHPF, DMGSIHPF, GPGYIHPF, GMGYIHPF, GPGSIHPF, GMGSIHPF, DRGSIHPF, DPHAIHPF, DMHAIHPF, GPHAIHPF, GMHAIHPF, GPHSIHPF 및 GMHSIHPF로 이루어진 군으로부터 선택된다.

첫번째 N-말단 아미노산 잔기를 소실하는 트렁케이션된 형태는 바람직하게는 PVYIHPF, MVYIHPF, GVYIHPF, AVYIHPF, RGYIHPF, RAYIHPF, RHYIHPF, RVAIHPF, RVSIHPF, RVDIHPF, RVYAHPF, RVYNHPF, RVYDHPF, RVYHHPF, RVYSHPF, RVYIYPF, RVYIHPA, RVYIHPV, RVYIHPL, RVYIHPI, AAYIHPF, RAAIHPF, RVAAHPF, RAYAHPF, RAAAHPF, RAAIHPF, RVAAHPF, AAAIHPF, AAAAHPF, AVAAHPF, AGYIHPF, AHYIHPF, PGYIHPF, PAYIHPF, MGYIHPF, MAYIHPF, MHYIHPF, GGYIHPF, GAYIHPF, GHYIHPF, PVAIHPF, PVSIHPF, MVAIHPF, MVSIHPF, RGAIHPF, RHAIHPF, RGYAHPF, RGYDHPF, RGYHHPF, RGYSHPF, RGYNHPF, RAYDHPF, RAYHHPF, RAYSHPF, RAYNHPF, RHYAHPF, RHYSHPF, RHYNHPF, RHYDHPF, RHYHHPF, RHYIYPF, RGADHPF, RGAHHPF, RVAHHPF, RHADHPF, RHSIHPF, RHADYPF, PGAIHPF, RHAIHPF, PGSIHPF, MGAIHPF, MGSIHPF, RGSIHPF, PHAIHPF, MHAIHPF, PHSIHPF 및 MHSIHPF로 이루어진 군으로부터 선택된다.

처음 2개의 N-말단 아미노산 잔기를 소실하는 트렁케이션된 형태는 바람직하게는 GYIHPF, AYIHPF, HYIHPF, VAIHPF, VSIHPF, VDIHPF, VYAHPF, VYNHPF, VYDHPF, VYHHPF, VYSHPF, VYIYPF, VYIHPA, VYIHPV, VYIHPL, VYIHPI, AAIHPF, VAAHPF, AYAHPF, AAAHPF, HYIHPF, GAIHPF, HAIHPF, GYAHPF, GYDHPF, GYHHPF, GYSHPF, GYNHPF, AYDHPF, AYHHPF, AYSHPF, AYNHPF, HYAHPF, HYSHPF, HYNHPF, HYDHPF, HYHHPF, HYIYPF, GADHPF, GAHHPF, VAHHPF, HADHPF, GAIHPF, HSIHPF, HADYPF, GSIHPF 및 HAIHPF로 이루어진 군으로부터 선택된다.

처음 3개의 N-말단 아미노산 잔기를 소실하는 트렁케이션된 형태는 바람직하게는 AIHPF, SIHPF, DIHPF, YAHPF, YNHPF, YDHPF, YHHPF, YSHPF, YIYPF, YIHPA, YIHPV, YIHPL, YIHPI, AAHPF, ADHPF, AHHPF 및 ADYPF로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 하나 이상의 시스테인 잔기는 화학식 I, II 및/또는 III에 따른 아미노산 서열 및 상술된 모든 구체적인 펩티드의 N-말단에 결합된다.

본 발명의 펩티드는 그의 N-말단에 하나 이상의 시스테인 잔기를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 시스테인 잔기는 펩티드를 다른 분자 또는 담체에 결합시키기 위한 반응성 기로 제공될 수 있다. 예를 들어, 이러한 기를 사용하여 펩티드를 담체 단백질에 결합시킬 수 있다. 시스테인 잔기는 대안적으로 본 발명의 펩티드의 C-말단에 결합될 수 있다.

본 발명의 펩티드는 담체, 바람직하게는 단백질 담체에 결합된다.

포유류에서 앤지오텐신 펩티드 특이적인 항체의 생성을 증진시키기 위하여, 본 발명의 화합물은 담체에 결합된다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 담체는 키홀 림펫 헤모시아닌(KLH), 파상풍 톡소이드(TT) 또는 디프테리아 독소(DT) 또는 T 세포 에피토프를 함유하는 임의의 기타 단백질 또는 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 펩티드는 약제학적으로 허용되는 담체, 바람직하게는 KLH(키홀 림펫 헤모시아닌), 파상풍 톡소이드, 알부민-결합 단백질, 소 혈청 알부민, 덴드리머(dendrimer)(MAP; Biol. Chem. 358: 581), 펩티드 링커(또는 플랭킹(flanking) 영역)뿐 아니라 문헌[Singh et al., Nat. Biotech. 17 (1999), 1075-1081(특히 이 문헌의 표 1의 것)] 및 문헌[O'Hagan et al., Nature Reviews, Drug Discovery 2 (9) (2003), 727-735(특히 이 문헌에 기재된 내재성 면역-증강 화합물 및 전달 시스템)]에 기재된 애쥬번트 물질 또는 이들의 혼합물에 커플링된다. 이러한 문맥에서 컨쥬게이트 화학물질은 (예를 들어, GMBS와 같은 헤테로 이작용성(heterobifunctional) 화합물 및 물론, 또한 문헌["Bioconjugate Techniques", Greg T. Hermanson]에 기재된 바와 같은 다른 것을 통하여) 당업자에게 공지되어 있는 반응으로부터 선택될 수 있다. 더욱이, 백신 조성물은 애쥬번트, 바람직하게는 낮은 용해성의 알루미늄 조성물, 특히 수산화알루미늄과 함께 제형화될 수 있다. 물론, MF59 인산알루미늄, 인산칼슘, 사이토카인(예를 들어, IL-2, IL-12, GM-CSF), 사포닌(예를 들어, QS21), MDP 유도체, CpG 올리고, LPS, MPL, 폴리포스파젠, 에멀젼(예를 들어, 프레운트(Freund's), SAF), 리포좀, 비로좀(virosome), 아이스콤(iscom), 코클레이트(cochleate), PLG 마이크로입자, 폴록사머 입자, 바이러스-유사 입자, 이열성 엔테로톡신(LT), 콜레라 독소(CT), 돌연변이 독소(예를 들어, LTK63 및 LTR72), 마이크로입자 및/또는 중합화 리포솜과 같은 애쥬번트가 또한 사용될 수 있다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 펩티드는 애쥬번트와 함께 제형화되고, 바람직하게는 알룸에 흡수된다.

관련 실시형태에서, 본 발명은 고혈압, 뇌졸중, 경색, 신부전, 울혈성 심부전, 혈관 손상 또는 망막 출혈을 포함하나 이에 한정되지 않는 RAS와 관련된 질환, 장애 또는 병상의 예방 또는 치료에 유용하다. 이것에 더하여, 본 발명의 실시형태에 포함된 펩티드를 사용하는 면역화는 죽상경화판 형성, 동맥혈전증 사건 및 혈관 염증과 관련된 사건을 치료하거나 예방하기 위해 사용될 수 있다. 이 외에, 다발성 경화증과 같은 자가면역 질환의 치료가 본 발명의 실시형태에 포함된 펩티드를 사용하여 행해질 수 있다.

본 발명의 백신은 피하로, 근육내로, 진피내로, 정맥내로 투여될 수 있다(예를 들어, 문헌["Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations", Sarfaraz Niazi, CRC Press Inc, 2004]을 참조한다). 투여 경로에 따라, 약제는 각각의 담체, 애쥬번트 및/또는 부형제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 백신은 본 발명에 따른 화합물을 0.1 ng 내지 10 mg, 바람직하게는 10 ng 내지 1 mg, 특히 100 ng 내지 100 ㎍, 또는 대안적으로, 예를 들어 100 fmol 내지 10 μmol, 바람직하게는 10 pmol 내지 1 μmol, 특히 100 pmol 내지 100 nmol의 양으로 함유한다. 본 발명의 화합물 또는 펩티드는 바람직하게는 투여량당 100 ng 내지 1 mg, 더욱 바람직하게는 1 ㎍ 내지 500 ㎍, 더더욱 바람직하게는 10 ㎍ 내지 100 ㎍, 특히 20 내지 40 또는 30 ㎍의 양으로 포유류에 투여된다. 전형적으로, 백신은 또한 보조 물질, 예를 들어, 완충제, 안정화제(stabilizer) 등을 함유할 수 있다.

그렇지만, 본 발명의 다른 태양은 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애, 바람직하게는 고혈압 및 고혈압-관련 질환의 치료 및/또는 예방용 약제를 제조하기 위한 본 발명에 따른 펩티드의 용도에 관한 것이다.

본 발명에 개시된 아미노산 잔기에 대한 약어는 하기의 IUPAC 권고를 따른다:

본 발명은 하기의 도면 및 실시예에 추가로 예시되나, 이에 제한되지 않는다.

도 1은 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 1에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 2는 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 2에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 3은 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 3에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 4는 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 4에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 5는 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 5에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 6은 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 6에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 7은 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 7에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 8은 Ang II 펩티드 CDRVYIHPF의 위치 8에 대한 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 9는 2개 이상의 아미노산이 알라닌으로 교체된 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 10은 3개의 아미노산이 상이한 위치상에서 이들 위치에 대한 바람직한 아미노산 치환체를 사용하여 교체된 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 11은 2 내지 4개의 아미노산이 상이한 위치상에서 이들 위치에 대한 바람직한 아미노산 치환체를 사용하여 교체된 펩티드 변이체의 면역원성을 보여준다.
도 12는 첫번째 N-말단 아미노산이 소실된 트렁케이션된 앤지오텐신 VARIOTOPE 형태의 면역원성을 보여준다.
도 13은 처음 2개 또는 3개의 N-말단 아미노산이 소실된 트렁케이션된 앤지오텐신 VARIOTOPE 형태의 면역원성을 보여준다.
각각의 도면에서, 지정된 펩티드로 면역화된 동물로부터 유래된 X-축 혈청이 열거된다. Y-축에는 유도된 혈청의 상대적인 역가를 나타낸다. Ang II 처리된 동물로부터 유래된 역가를 100%로 설정하였다. 최대 결합의 절반(즉, OD_max/2)을 제공하는 혈청 희석으로 역가를 계산하였다. 백색 막대는 백신접종을 위해 사용된 펩티드에 대한 역가를 나타내는 한편, 흑색 막대는 Ang II 펩티드에 대한 역가를 나타낸다.

실시예:

실시예 1: Ang II 펩티드의 위치 스캐닝(Positional-scanning)

혈압을 조절하는 RAS의 주요 구성성분인 앤지오텐신 II(Ang II)를 백신접종 방법에 대한 표적으로 선택하였다. 따라서, 앤지오텐신 II를 표적화하는 체액성 면역 반응을 유도할 수 있는 펩티드를 동정하고 선택하였다.

용어 "위치 스캐닝"은 특정 단백질 또는 펩티드 영역 내의 각각의 위치의 아미노산(AA) 잔기를 다른 AA로 체계적으로 치환하는 기술을 말한다. 이러한 기술은 지금까지 단백질-단백질 상호작용 연구, 펩티드-단백질 상호작용 연구를 위해 및/또는 펩티드 또는 단백질 도메인의 작용성을 연구하기 위해서만 사용되고 적용되어 왔다.

위치 스캐닝 기술을 이제 면역학의 분야로 옮기고 이에 적용하여, 옥타펩티드 Ang II(DRVYIHPF)에 대한 적절한 VARIOTOPE를 동정하였다. 이러한 실시예의 목적은 Ang II 펩티드를 표적화하는 폴리클로날(polyclonal)/올리고클로날(oligoclonal) 체액성 면역 반응의 유도를 지원하거나 적어도 이를 간섭하지 않는 각각의 위치에 대한 AA를 동정하는 것이었다.

따라서, 제1 세트의 실험에서, Ang II 서열 내의 각 위치를 유사하거나 상이한 특징을 갖는 아미노산으로 체계적으로 교체하였다(위치 2에 대해서는 표 1 참조). 이후에, 이들 모든 펩티드를 추가의 N-말단 시스테인을 통해 단백질 담체 키홀 림펫 헤모시아닌(KLH)에 화학적으로 결합시키고, 애쥬번트로서 알룸과 함께 마우스(BALB/c)에 투여하였다. 백신접종된 마우스로부터의 혈청을 사용하여, 지정된 펩티드의 면역원성을 분석하였다. 이러한 목적을 위하여 펩티드 기반의 ELISA 검정을 사용하여 주입된 펩티드(즉, Ang II 펩티드 변이체, VARIOTOPE)에 대한 혈청 역가를 정의할 뿐 아니라, Ang II 펩티드에 대하여 수득된 혈청의 결합능을 정의하였다.

표 1. 위치 2에 대한 아미노산 치환에 의한 펩티드 변이체

도면(위치 1 내지 위치 8에 대해서는 도 1 내지 8)에는, 이들 실험으로부터 유래된 결과를 나타내었다. X-축에는 지정된 펩티드로 면역화된 동물로부터 유래된 혈청을 열거하였다. Y-축에는 유도된 혈청의 상대적인 역가를 나타내었다. Ang II 처리된 동물로부터 유래된 역가를 100%로 설정하였다. 최대 결합의 절반(즉, OD_max/2)을 제공하는 혈청 희석으로 역가를 계산하였다. 백색 막대는 백신접종을 위해 사용된 펩티드에 대한 역가를 나타내는 한편, 흑색 막대는 Ang II 펩티드에 대한 역가를 나타낸다.

위치 1에 대한 실험한 모든 Ang II 펩티드 변이체가 주입된 펩티드에 결합되는 항체를 유도할 수 있어(도 1), 아미노산 교환이 그들의 면역원성을 완전하게 없애지 못하는 것을 나타냈지만, 몇몇 펩티드 변이체로 유도된 혈청은 유의미하게 더 낮은 역가를 보여주었다(방향족 아미노산 교환을 갖는 펩티드 변이체). 이와 반대로, 위치 1에 G가 있는 펩티드 변이체는 주입된 펩티드에 대하여 Ang II 처리된 동물로부터 유래된 혈청-역가보다 거의 2배 높은 혈청-역가를 유도하는 능력을 갖는 것으로 보인다. 이러한 변이체를 사용함으로써, Ang II에 대한 반응성이 대략 50% 증가한다. 첫번째 위치에 A, T, E, N, R 또는 H를 함유하는 펩티드 변이체로부터 유도된 혈청은 Ang II 펩티드로부터 유래된 혈청과 유의미하게 다르지 않다. 위치 1에서의 방향족 또는 지방족 잔기, 예를 들어, L, F, Y는 Ang II를 인식하는 면역 반응을 유도하는데 덜 바람직한 것으로 보인다.

따라서, 위치 1은 하기의 아미노산을 함유할 수 있다:

- 원래의 아미노산 D

- 아미노산 G, A

- 극성 아미노산, 예를 들어, E, N, R, H.

도 2에 약술된 바와 같이, 위치 2에서의 아르기닌이 P 또는 M으로 교체된 면역화를 위한 펩티드를 사용하여, 역가 및 또한 Ang II에 대한 반응성을 증가시켰다. 예를 들어, R에서 A로, 또는 R에서 K로의 치환을 갖는 펩티드는 Ang II 펩티드에 의해 유도되는 혈청과 동일한 역가를 보여주는 혈청을 야기하였다. 이들 결과는 위치 2에서 R을 대신하는 P 또는 M이 체액성 면역 반응을 유도하는데 더욱 바람직한 것을 나타낸다. 예를 들어, A 및 K는 R만큼 우수한 것으로 보인다.

위치 2는 하기의 아미노산을 함유할 수 있다:

- 원래의 아미노산 R

- 비극성 및 중성 아미노산 P, M, G 및 A

- 극성 아미노산, 예를 들어, E, H, K.

위치 3은 하기의 아미노산을 함유할 수 있다:

- 원래의 아미노산 V

- 아미노산 G 및 H(가장 바람직함)

- 비극성 및 중성 아미노산, 예를 들어, A

- 지방족 아미노산, 예를 들어, L

- 극성 아미노산, 예를 들어, E, H, K.

위치 4에서, 원래의 아미노산 Y는 그들의 특징과 관계없이 모든 아미노산으로 치환될 수 있다.

방향족 아미노산 Y 및 W, 및 아미노산 P는 위치 5에서 원래의 아미노산 I를 치환할 수 없다. 다른 모든 아미노산이 이러한 목적을 위해 사용될 수 있다.

위치 6에서 H가 지정된 아미노산으로 교체된 펩티드로부터 유래된 결과를 도 6에 나타내었다. 방향족 아미노산 H의 다른 방향족 아미노산, 예를 들어, W 및 Y로의 치환은 심지어 백신접종을 위해 사용된 펩티드보다 Ang II를 더 잘 인식하는 것으로 보이는 혈청을 유도하는 능력을 갖는 펩티드를 초래한다. 위치 6에서, 비-방향족 아미노산 치환이 있는 펩티드에 대하여, 유발된 혈청의 Ang II에 대한 반응성이 상당히 감소한다(최대 60%). 이들 결과는 위치 6에서 방향족 아미노산이 배치될 수 있음을 나타낸다(그러나 F는 아님).

위치 6은 하기의 아미노산을 함유할 수 있다:

- 원래의 아미노산 H

- 방향족 측쇄를 함유하는 아미노산, 예를 들어 Y, W.

위치 7은 하기의 아미노산을 함유할 수 있다:

- 원래의 아미노산 P

- 대안적으로 방향족 측쇄를 함유하는 아미노산, 예를 들어, F, W, H가 잠재적으로 사용될 수 있다.

위치 8은 하기의 아미노산을 함유할 수 있다:

- 원래의 아미노산 F

- 아미노산 A, L, I, V, P, M.

실시예 2: 알라닌을 사용하는 Ang II 서열 내의 2개 이상의 아미노산 위치의 조합된 교환

위치 스캐닝 방법이 실행되는 처음의 생체내 실험으로부터 유래된 결과를 입증하고, 상이한 위치에서의 조합된 아미노산 교환이 중립적인 또는 바람직한 아미노산으로 원래 아미노산을 교체하는 경우 가산적(additive)인지 또는 덜 바람직한 아미노산이 조합되는 경우 감산적(subtractive)인지를 시험하기 위하여, Ang II 서열 내의 2개 이상의 아미노산을 교체하였다. 이러한 목적을 위하여, 다음 세트의 실험에서, 아미노산 알라닌을 사용하였다(표 2). 알라닌은 위치 4에 대한 바람직한 교환 아미노산(도 4), 위치 1, 2, 3, 5 및 위치 8에 대한 중립적인 교환 아미노산(도 1 내지 3, 5, 8 및 9)으로 정의되어 있다. 위치 6 및 7을 위하여, 원래의 아미노산 H 및 P 각각의 알라닌으로의 교환이 덜 바람직한 것으로 나타났다(도 6, 7 및 9). 따라서, 1 내지 3, 5 및 8(중립적인 교환)과 조합하여 위치 4에 알라닌(바람직한 교환)을 함유하는 펩티드 변이체는 Ang II 펩티드에 의해 유발되는 혈청으로부터의 역가보다 더 높거나 또는 이와 적어도 동일한 값을 갖는 Ang II에 대한 역가를 유도할 것으로 예상될 수 있다. 위치 1 내지 3, 5 및 8에서 알라닌을 함유하는 펩티드 변이체는 Ang II 펩티드에 의해 유발되는 혈청과 적어도 동일하게 Ang II를 잘 인식하는 면역 반응을 유도할 것이다. 위치 6 및 7에서 알라닌 교환을 갖는 펩티드 변이체(이들 위치에 대하여 덜 바람직한 교환 아미노산)는 Ang II에 대하여 감소된 반응성을 갖는 혈청을 유발할 것으로 예상될 수 있다.

표 2에 나열된 모든 펩티드를 N-말단을 통하여 알룸에 흡수된 KLH에 화학적으로 재결합시키고, 실험 동물(BALB/c 마우스)에 피하 주사하였다. 혈청을 ELISA로 분석하고, 펩티드 변이체에 의해 유도되는 항체 반응을 원래의 펩티드에 의해 유도되는 항체 반응과 비교하였다.

표 2. 아미노산 치환에 의한 펩티드 변이체에 대한 예

모든 알라닌 치환된 펩티드 변이체는 주입된 펩티드에 결합하는 항체를 유도할 수 있었으며, 이는 아미노산 교환이 이들의 면역원성을 없애지 않았음을 나타낸다(도 9). 그러나, C-DAVYIAAF에 의해 유도되는 혈청의 역가는 다른 항원에 의해 유도되는 역가에 비해 더 낮았으며, 이는 지정된 아미노산의 알라닌에 의한 조합된 치환이 펩티드의 면역원성에 덜 바람직한 것을 나타낸다(도 9).

Ang II에 대한 펩티드 변이체-유도된 혈청(도 2)의 반응성의 분석에 의하여, 하기의 펩티드에 의해 유도된 혈청이 Ang II에 대해 감소된 반응성을 나타내는 것이 드러났다: C-DRVYAAPF, C-DRVYIHAA, C-DRAAAHAF, C-DAVYIAPF, C-DAVYIAAF, C-DAVYIAAA(도 9). 이들 결과는 위치 6 또는 위치 7에서 하나 이상의 알라닌 치환(이들 위치에 대하여 바람직하지 않은 아미노산 교환으로서의 알라닌)을 갖는 Ang II-펩티드-변이체가 Ang II에 대해 감소된 반응성을 보여주는 혈청을 유도하는 것을 나타낸다. 이는 위치 스캐닝 실험에서 얻은 결과와 일치한다.

Ang II 분자의 위치 1 내지 5에서의 알라닌 치환(위치 A에 대하여 중립적이거나 바람직한 아미노산 교환으로 정의됨)은 Ang II에 대한 반응성을 간섭하지 않는다. 이들 위치에서의 알라닌-치환은 Ang II로 수득된 역가를 초과하는 역가의 유도를 야기한다. 이러한 효과는 특히 위치 4에서의 Y가 알라닌으로 교체되었을 때 관찰되었다(도 9).

비스타(Wistar) 랫트에서 다양한 알라닌-변형된 Ang II 에피토프의 조사는 유사한 결과를 보여주었다. 이는 결과가 마우스에 제한되지 않고, 다른 종으로 옮겨질 수 있음을 나타낸다.

실시예 3: 앤지오텐신 VARIOTOPE의 선택을 위한 상이한 위치에서의 바람직한 아미노산의 조합

다음 실험에서, 각 위치에 대한 바람직한 및/또는 중립적인 아미노산의 아미노산 조합을 시험하였다. 도 10 및 11에서 관찰될 수 있는 바와 같이, 위치 스캐닝 실험 동안 선택된 바람직한 아미노산을 사용하는 상이한 위치에서의 아미노산 교환은 앤지오텐신 II에 의해 유도된 체액성 면역 반응과 유사하거나 이보다 더 높은 앤지오텐신 II에 대한 체액성 면역 반응을 유도할 수 있는 VARIOTOPE의 형성을 야기하였다.

실시예 4: 첫번째 N-말단 아미노산 잔기를 소실한 트렁케이션된 앤지오텐신 VARIOTOPE 형태

다음 실험에서, 앤지오텐신 VARIOTOPE의 트렁케이션된 형태를 시험하였다. 도 12 및 13에서 관찰될 수 있는 바와 같이, 그들의 N-말단에서 단축된 앤지오텐신 VARIOTOPE(상기에 약술된 바와 같이 선택)는 앤지오텐신 II에 의해 유도된 체액성 면역 반응과 유사하거나 이보다 더 높은 앤지오텐신 II에 대한 체액성 면역 반응을 유도하는 그들의 능력을 없애지 않았다.

SEQUENCE LISTING <110> Affiris AG <120> Vaccine <130> R 56221 <150> AT A 1162/2009 <151> 2009-07-23 <160> 244 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = (Xaa)m, wherein Xaa is G or D and m is 0 or 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = (Xaa)n, wherein Xaa is A, P, M, G or R and n is 0 or 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = (Xaa)o, wherein Xaa is G, A, H or V and o is 0 or 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is S, A, D or Y <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is A, D, H, S, N or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is A, L or F <400> 1 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa His Pro Xaa 1 5 <210> 2 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = (Xaa)m, wherein m is 0 or 1 and Xaa is G, A or D <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = (Xaa)n, wherein n is 0 or 1 and Xaa is A, P, M, G or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = (Xaa)o, wherein o is 0 or 1 and Xaa is G, A, H or V <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is S, A, D or Y <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is A, D, H, S, N or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Y or H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is A, V, L, I or F <400> 2 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa 1 5 <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is G, A or D <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is A, P, M, G or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is G, A, H or V <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is S, A, D or Y <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is A, D, H, S, N or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Y or H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is A, V, L, I or F <400> 3 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa 1 5 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 5 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is an amino acid residue selected from the group consisting of D, G, A, T, S, Q, E, K, R and H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is an amino acid residue selected from the group consisting of R, P, M, G, A, S, T, N, Q, D, E, K and H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is an amino acid residue selected from the group consisting of V, G, H, A, L, I, N, Q, D, E, K and R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is any amino acid residue <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is an amino acid residue other than P, F, W <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is an aromatic amino acid residue <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is an amino acid residue selected from the group consisting of F, L, I, P, M, V, A, H, a non acidic amino acid residue and a non basic amino acid residue <400> 5 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa His Leu 1 5 10 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 6 Gly Arg Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 7 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 7 Asp Pro Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 8 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 8 Asp Met Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 9 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 9 Asp Gly Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 10 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 10 Asp Ala Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 11 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 11 Asp Arg Gly Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 12 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 12 Asp Arg Ala Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 13 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 13 Asp Arg His Tyr Ile His Pro Phe 1 5 <210> 14 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 14 Asp Arg Val Ala Ile His Pro Phe 1 5 <210> 15 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 15 Asp Arg Val Ser Ile His Pro Phe 1 5 <210> 16 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 16 Asp Arg Val Asp Ile His Pro Phe 1 5 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 17 Asp Arg Val Tyr Ala His Pro Phe 1 5 <210> 18 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 18 Asp Arg Val Tyr Asn His Pro Phe 1 5 <210> 19 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 19 Asp Arg Val Tyr Asp His Pro Phe 1 5 <210> 20 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 20 Asp Arg Val Tyr His His Pro Phe 1 5 <210> 21 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 21 Asp Arg Val Tyr Ser His Pro Phe 1 5 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 22 Asp Arg Val Tyr Ile Tyr Pro Phe 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 23 Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Ala 1 5 <210> 24 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 24 Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Val 1 5 <210> 25 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 25 Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Leu 1 5 <210> 26 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Artificial Sequence <400> 26 Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Ile 1 5 <210> 27 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 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Claims

레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애(physical disorder)의 치료 및/또는 예방을 위한, 약제학적으로 허용되는 담체에 결합된 펩티드를 포함하는 백신으로서,
상기 펩티드가 하기의 아미노산 서열을 가지며, 상기 펩티드가 DRVYIHPF가 아닌 백신:
(X₁)_m(X₂)_n(X₃)_oX₄X₅HPX₆ (화학식 I),
상기 식에서,
X₁은 G 또는 D이고,
X₂는 A, P, M, G 또는 R이며,
X₃은 G, A, H 또는 V이고,
X₄는 S, A, D 또는 Y이며,
X₅는 A, D, H, S, N 또는 I이고,
X₆은 A, L 또는 F이며,
m, n 및 o는, o가 0인 경우에 m 및 n이 0이고, n이 0인 경우에 m이 0이라는 전제 하에, 독립적으로 0 또는 1이다.
제1항에 있어서, 상기 펩티드가 GRVYIHPF, DPVYIHPF, DMVYIHPF, DGVYIHPF, DAVYIHPF, DRGYIHPF, DRAYIHPF, DRHYIHPF, DRVAIHPF, DRVSIHPF, DRVDIHPF, DRVYAHPF, DRVYNHPF, DRVYDHPF, DRVYHHPF, DRVYSHPF, DRVYIHPA, DRVYIHPL, DAAYIHPF, DRAAIHPF, DRVAAHPF, DRAYAHPF, DRAAAHPF, DAAAIHPF, DAGYIHPF, DAHYIHPF, DPGYIHPF, DPAYIHPF, DMGYIHPF, DMAYIHPF, DMHYIHPF, DGGYIHPF, DGAYIHPF, DGHYIHPF, DPVAIHPF, DMVAIHPF, DMVSIHPF, DRGAIHPF, DRHAIHPF, DRGYAHPF, DRGYDHPF, DRGYHHPF, DRGYSHPF, DRGYNHPF, DRAYDHPF, DRAYHHPF, DRAYSHPF, DRAYNHPF, DRHYAHPF, DRHYSHPF, DRHYNHPF, DRHYDHPF, DRHYHHPF, DRGADHPF, DRVAHHPF, DRHADHPF, GRGAIHPF, DPGAIHPF, DPGSIHPF, DMGAIHPF, DMGSIHPF, GPGYIHPF, GPGSIHPF, GMGSIHPF, DRGSIHPF, DPHAIHPF, DMHAIHPF, GPHAIHPF, GMHSIHPF, PVYIHPF, MVYIHPF, GVYIHPF, AVYIHPF, RGYIHPF, RAYIHPF, RHYIHPF, RVAIHPF, RVSIHPF, RVDIHPF, RVYAHPF, RVYNHPF, RVYDHPF, RVYHHPF, RVYSHPF, RVYIHPA, RVYIHPL, AAYIHPF, RAAIHPF, RVAAHPF, RAYAHPF, RAAAHPF, AAAIHPF, AGYIHPF, AHYIHPF, PGYIHPF, PAYIHPF, MGYIHPF, MAYIHPF, MHYIHPF, GGYIHPF, GAYIHPF, GHYIHPF, PVAIHPF, PVSIHPF, MVAIHPF, MVSIHPF, RGAIHPF, RHAIHPF, RGYAHPF, RGYDHPF, RGYHHPF, RGYSHPF, RGYNHPF, RAYDHPF, RAYHHPF, RAYSHPF, RAYNHPF, RHYAHPF, RHYSHPF, RHYNHPF, RHYDHPF, RHYHHPF, RGADHPF, RGAHHPF, RHADHPF, RHSIHPF, PGAIHPF, RHAIHPF, PGSIHPF, MGAIHPF, MGSIHPF, RGSIHPF, PHAIHPF, MHAIHPF, PHSIHPF, MHSIHPF, GYIHPF, AYIHPF, HYIHPF, VYAHPF, VYNHPF, VYDHPF, VYHHPF, VYSHPF, VYIHPA, VYIHPL, AAIHPF, AYAHPF, HYIHPF, GAIHPF, HAIHPF, GYAHPF, GYDHPF, GYHHPF, GYSHPF, GYNHPF, AYDHPF, AYHHPF, AYSHPF, AYNHPF, HYAHPF, HYSHPF, HYNHPF, HYDHPF, HYHHPF, GAIHPF, HSIHPF, GSIHPF, HAIHPF, AIHPF, SIHPF, DIHPF, YAHPF, YNHPF, YDHPF, YHHPF 및 YSHPF로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 백신.
제1항 또는 제2항에 있어서, 하나 이상의 시스테인 잔기가 화학식 I에 따른 아미노산 서열의 N-말단에 결합되는 것을 특징으로 하는, 백신.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 담체가 단백질 담체인 것을 특징으로 하는, 백신.
제4항에 있어서, 상기 단백질 담체가 키홀 림펫 헤모시아닌(KLH), 파상풍 톡소이드(TT) 또는 디프테리아 독소(DT)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 백신.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이 애쥬번트(adjuvant)와 함께 제형화되고, 바람직하게는 알룸(alum)에 흡수되는 것을 특징으로 하는, 백신.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애가 고혈압, 뇌졸중, 경색, 신부전, 울혈성 심부전, 죽상동맥경화증, 혈관 손상, 망막 출혈 및 자가면역 질환, 바람직하게는 다발성 경화증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 백신.
레닌-활성화된 앤지오텐신계와 관련된 신체의 장애, 바람직하게는 고혈압 및 고혈압-관련 질환의 치료 및/또는 예방용 백신의 제조를 위한, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 펩티드의 용도.