CN102552540B

CN102552540B - 一种用于增强免疫的中药组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN102552540B
Application number: CN 201210005633
Authority: CN
Inventors: 江善祥; 彭麟; 季辉; 万荣峰; 蔡冬; 张军忍; 施宗傲
Original assignee: Nanjing Weitai Fama Veterinary Research Institute Co Ltd
Current assignee: Nanjing Jiangsu Nongda Animal Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2012-01-10
Filing date: 2012-01-10
Publication date: 2013-08-07
Anticipated expiration: 2032-01-10
Also published as: CN102552540A

Abstract

本发明公开了一种用于增强免疫的中药组合物，其组成成分及其重量百分比为：香菇提取物5～30％、枸杞提取物10～30％、莽草酸10～30％，2-脱氧-D-葡萄糖0.5～5％，余量为无水葡萄糖。本发明还公开了该中药组合物的制备方法，以及该中药组合物在增强畜禽免疫力上的用途。本发明中药组合物能显著促进畜禽免疫器官发育，增强畜禽机体免疫力；对免疫抑制性疾病尤其是病毒性疾病引起的免疫抑制及功能低下疗效显著，能显著降低畜禽死亡率；其次，本发明中药组合物能显著提升免疫畜禽体内抗体滴度，延长抗体体内作用时间，增强体液免疫，增强疫苗免疫效果；此外，本发明组合物用原料来源丰富，生产方法简单，使用方便。

Description

一种用于增强免疫的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药制剂领域，主要涉及一种用于增强畜禽机体免疫的中药组合物及其制备方法。

背景技术

免疫抑制是由于免疫系统的损害而导致暂时性或永久性的免疫机能障碍和对病原体敏感性增强的状态。近年来，在畜禽养殖业中，动物免疫抑制现象较为普遍。动物免疫反应性降低，不仅严重影响生产力，并使动物对细菌、病毒、寄生虫等敏感性增高，降低免疫接种效果，增加各种传染病的易感性，使疾病症状加重，甚至死亡(董凤莲等.畜牧兽医科技信息.2004.10(42))。同时，畜禽病毒性疾病如猪瘟、圆环病毒病、蓝耳病、鸡新城疫、鸡法氏囊病、传染性支气管炎等的爆发，也极易损伤畜禽机体免疫系统，造成免疫机能下降或抑制，严重影响畜禽养殖业的发展。抗生素的长期滥用导致细菌耐药性不断增强，加上因畜禽机体免疫机能的下降导致免疫接种失败。目前，兽医临床缺乏有效应对畜禽免疫抑制性疾病的药物。

中药在协调畜禽机体整体平衡、增强机体抗病能力方面具有独特疗效。香菇、枸杞等中药具有扶正或祛邪功效，均具有良好的免疫调节作用，对许多免疫抑制性疾病均有良好的治疗作用(王爱萍等.中国药业.2011.20(3)，75-77)。

香菇(Lentinus edods(Berk)Sing)，又名香菌、花菇，香蕈，俗称中国蘑菇，是一种重要的食药用栽培真菌。香菇有效药用组分之香菇多糖具有重要的免疫药理作用，可改善畜禽机体代谢，增强机体免疫力(李月梅.微生物学通报.32(4)，149-152(2005))。香菇提取物中富含香菇多糖，是一种理想的免疫增强剂。

枸杞为茄科植物枸杞(Lycium chinense MILL.)或宁夏枸杞(Lyciumbarbarum L.)的干燥成熟果实。枸杞具有免疫调节、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂等作用(霍超等.中国食物与营养.2007.11，50-53)。枸杞提取物含枸杞多糖和甜菜碱，具有免疫调节作用，可增强动物机体免疫力。

莽草酸(英文名称为：Shikimic Acid。化学式：3，4，5-三羟基-1-环己烯-1-羧酸)是广泛存在于高等植物和微生物中莽草酸途径的中间产物，具有极好的抗病毒和抗炎效果，是抗病毒和抗癌药物的中间体(沈万成等.兽药研发，9，13-18(2011))。2-脱氧-D-葡萄糖为天然代谢类抗生素，抗病毒谱广、抗病毒机制独特、起效迅速，对各种病毒感染发挥防治作用(于立伟.兽药市场指南.2009.6(17))。

专利申请《提高缺氧耐受力的药物及用途》(公开号为：CN1970005A)公开了由枸杞提取物和香菇提取物组成的用于提高缺氧耐受力的药物组合物。该组合物仅由两种提取物简单混合制成，其针对畜禽临床免疫抑制性疾病尤其是病毒性疾病引起的免疫低下及抑制的治疗效果差。因此，亟需开发新的既能提高畜禽机体免疫力，而且不容易产生细菌耐药性等的药物。

发明内容

本发明目的在于提供一种用于增强畜禽机体免疫力的中药组合物。

本发明另一目的在于提供上述中药组合物的制备方法。

本发明第三目的在于提供了上述中药组合物在制备增强畜禽免疫力药物上的应用，尤其是在制备增强鸡免疫力药物上的应用。

本发明第四目的在于提供上述中药组合物在制备防治鸡法氏囊病药物上的用途。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于增强免疫的中药组合物，其组成成分及其重量百分比为：香菇提取物5～30％、枸杞提取物10～30％、莽草酸10～30％，2-脱氧-D-葡萄糖0.5～5％，余量为无水葡萄糖。

上述中药组合物中所述的香菇提取物的重量百分比优选为10～20％。

上述中药组合物中所述的枸杞提取物的重量百分比优选为10～20％。

上述中药组合物中所述的莽草酸的重量百分比优选为20～30％。

上述中药组合物中所述的2-脱氧-D-葡萄糖的重量百分比优选为1～5％。

上述中药组合物中所述的香菇提取物、枸杞提取物、莽草酸和2-脱氧-D-葡萄糖、无水葡萄糖等皆可于市场上公开购买。

上述用于增强免疫的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)按照等量递增法，按照比例将2-脱氧-D-葡萄糖和与2-脱氧-D-葡萄糖等重量的无水葡萄糖置于混合机内，搅拌混合5min，得预混物A；

(2)按照等量递增法，按照比例将香菇提取物和枸杞提取物置于混合机内，搅拌混合5min，然后再加入莽草酸，搅拌混合5min，得预混物B；

(3)按照等量递增法，将预混物A和预混物B置于混合机内，搅拌混合15min，最后加入剩余量的无水葡萄糖，搅拌混合15min，即得用于增强免疫的中药组合物。

所述的中药组合物在制备增强畜禽免疫力药物上的应用。

所述的中药组合物在制备增强鸡免疫力药物上的应用。

所述的中药组合物在制备防治鸡法氏囊病药物上的应用。

本发明中药组合物的使用方法：以鸡为例，每100g本发明中药组合物兑水100kg，混饮，连用5天。或本发明中药组合物作为饲料添加剂，每50kg饲料中添加本发明中药组合物100g，混匀，混饲，连用5天。

本发明具有的优点和有益效果：(1)本发明中药组合物能显著促进畜禽免疫器官发育，增强畜禽机体免疫力，增强抗病力；(2)本发明中药组合物对免疫抑制性疾病尤其是病毒性疾病引起的免疫抑制及功能低下疗效显著，能显著降低畜禽死亡率；(3)本发明中药组合物能显著提升免疫畜禽体内抗体滴度，延长抗体体内作用时间，增强体液免疫，增强疫苗免疫效果；(4)本发明组合物用原料来源丰富，且生产工艺简便；(5)本发明组合物即可混饮，又可混饲，临床给药简便，适合畜禽群体给药，节省人力物力；(6)本发明药物含量明确，给药准确，质量可控。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明做进一步的说明，但本发明的保护范围不限于此。

实施例1.用于增强免疫的中药组合物的制备

按照如下方法制备：

(1)将2-脱氧-D-葡萄糖(武汉市福德医药化工有限公司，以下同)5g和无水葡萄糖(潍坊三江医药化工有限公司，以下同)5g置于混合机内，搅拌混合5min，得预混物A；

(2)将香菇提取物(西安冠宇生物技术有限公司，规格25％(指香菇多糖含量)，以下同)50g和枸杞提取物(长沙蓝威生物制品有限公司，规格40％(枸杞多糖含量)，以下同)50g置于混合机内，搅拌混合5min，然后加入50g枸杞提取物搅拌混合5min，再加入100g莽草酸(武汉同兴生物科技有限公司，以下同)搅拌混合5min，得预混物B；

(3)将预混物A和预混物B置于混合机内，搅拌混合15min，最后加入剩余量的无水葡萄糖740g，搅拌混合15min，即制得本发明中药组合物1000g。

实施例2.用于增强免疫的中药组合物的制备

按照如下方法制备：

(1)将2-脱氧-D-葡萄糖10g与无水葡萄糖10g置于混合机内，搅拌混合5min，得预混物A；

(2)将香菇提取物100g和枸杞提取物100g置于混合机内，搅拌混合5min，然后加入枸杞提取物100g，搅拌混合5min，再加入莽草酸200g，搅拌混合5min；得预混物B；

(3)将预混物A和预混物B置于混合机内，搅拌混合15min，最后加入剩余量的无水葡萄糖480g，搅拌混合15min，制得本发明中药组合物1000g。

实施例3.用于增强免疫的中药组合物的制备

按照如下方法制备：

(1)将2-脱氧-D-葡萄糖20g与无水葡萄糖20g置于混合机内，搅拌混合5min，得预混物A

(2)将香菇提取物200g与枸杞提取物200g置于混合机内，搅拌混合5mi n，然后加入莽草酸300g，搅拌混合5min，得预混物B；

(3)将预混物A和预混物B置于混合机内，搅拌混合15min，最后加入剩余量的无水葡萄糖260g，搅拌混合15min，即得本发明中药组合物1000g。

实施例4.用于增强免疫的中药组合物的制备

按照如下方法制备：

(1)将2-脱氧-D-葡萄糖50g与无水葡萄糖50g置于混合机内，搅拌混合5min，得预混物A；

(2)将香菇提取物300g与枸杞提取物300g置于混合机内，搅拌混合5min；然后加入莽草酸300g，搅拌混合5min，得预混物B；

(3)将预混物A和预混物B置于混合机内，搅拌混合15min，即得本发明中药组合物1000g。

实施例5.本发明中药组合物增强鸡免疫力的对比试验

按照如下方法进行：

(一)药物与试剂

试验药物：实施例1、2、3、4所制备的中药组合物；

对照药物I：香菇提取物(西安冠宇生物技术有限公司，规格25％)。

对照药物II：枸杞提取物(长沙蓝威生物制品有限公司，规格40％)。

其它：新支二联弱毒苗、新城疫(ND-IV)弱毒苗、新支二联油苗、鸡新城疫HI(ND-HI)测试抗原(购自天津一方科技公司)；

鸡红细胞悬液：1％鸡红细胞悬液，自行制备。

(二)试验方法

(1)试验设计

将420只罗曼蛋公鸡(购自南京市江宁区青龙山动物繁殖场)随机分为7组，每组60只，其中第1、2、3、4组为每50kg饲料(全价配合饲料，下同)中分别对应添加实施例1、2、3、4制备的中药组合物100g；药物对照I组为每50kg饲料中添加香菇提取物30g；药物对照II组每50kg饲料中添加30g枸杞提取物；阴性对照组为饲料中不添加任何药物。采用混饲方式，连续用药5天。每组60只鸡中的30只用于检测免疫器官脾和法氏囊指数，30只用于检测ND抗体效价。

(2)饲养管理和用药方法

各组鸡群均采用相同饲养管理标准，包括饲养方法、饲料品种、饲喂次数及免疫程序等。14日龄时用1只份的新支二联弱毒苗点眼滴鼻。第1-4组在免疫的同时按照日粮中添加本实施例1、2、3、4制备的中药组合物进行饲喂，每天早上和中午各饲喂1次，连续5天。药物对照I组和II组给药时间同第1-4。阴性对照组只免疫不给药。24日龄用1只份的新城疫IV弱毒苗二免，同时肌肉注射新支二联油苗0.3mL/只。

(3)检测项目

(a)抗体效价测定：分别于ND第一次免疫后第7d、14d、21d、28d、35d、42d每组随机抽取10只鸡，翼下静脉采血，分离血清，采用红细胞凝集抑制试验法(HI)检测ND抗体效价。

(b)免疫器官指数的测定：ND第一次免疫后第35d每组随机抽取4只鸡，空腹称重后放血致死，小心取出胸腺、脾，用吸水纸吸干血迹，分别称取胸腺、脾、法氏囊重量，分别计算其指数。各指数的计算公式为：胸腺指数＝胸腺重(mg)/体重(kg)；脾指数＝脾重(mg)/体重(kg)；法氏囊指数＝法氏囊重(mg)/体重(kg)。

(四)实验结果

(1)ND抗体效价(log2)结果(见表1)第1-4组和药物对照I组和II组抗体滴度先升高后降低，均在28d时达到峰值。第1-4组抗体滴度显著高于药物对照组和阴性对照组，且第1-4组抗体效价下降缓慢、持续时间长于药物对照组和阴性对照组。说明本发明中药组合物能提高血清中抗体水平，延长抗体体内作用时间，能增强疫苗的免疫效果，是一种效果好、副作用小的新型免疫增强剂。

表1各组ND抗体效价测定结果

(2)各组鸡免疫器官指数测定结果(见表2)：第1-4组和及药物对照I和II组的免疫器官指数均明显高于阴性对照组。而第1-4组免疫器官指数均高于药物对照组。说明本发明中药组合物能促进机体免疫器官发育，提高动物机体免疫力。

表2不同药物对免疫器官脾指数和法氏囊指数(mg/kg)影响试验结果

实施例6.本发明中药组合物对鸡法氏囊病的疗效对比试验

(一)试验动物

河南郑州某蛋鸡场，25～70日龄蛋鸡，饲喂全价日粮，按常规免疫程序接种疫苗，常规管理。

(二)试验药剂

试验药物：实施例1、2、3、4所制备的中药组合物。

(三)试验方法

(1)临床诊断及病例收集

鸡群突然发病，精神沉郁，羽毛蓬乱无光泽，活动减少，蹲于角落里或卧地不动。病鸡食欲减退，饮水增加，嗉囊中充满稀薄的液状物，排白色奶油状粪便。发病鸡死亡较快，耐过鸡贫血、消瘦，发病后3～4天有明显的死亡高峰。

病死鸡脱水，皮下干燥，眼球下陷，严重者胸肌和两腿外侧肌肉出血。剖检发现：法氏囊肿大、发黄，浆膜下水肿、出血，严重者外观呈紫葡萄状。囊腔黏膜出血，腔内充满浑浊的粘液或干酪样渗出物。肾脏肿大、苍白，小叶成灰白色，有尿酸盐沉积。

取病死鸡法氏囊、脾脏加生理盐水磨碎，反复冻融，取悬液作被检抗原，与法氏囊标准阳性血清进行琼脂扩散试验，呈阳性反应。综合临床症状、剖检变化及琼脂扩散试验结果，可判定为法氏囊病。

(2)试验鸡分组及给药

试验于2011年6～8月在河南郑州某蛋鸡场进行。随机用栅栏将经临床确诊为法氏囊病的鸡群隔离成6组，每组200只鸡；其中第1、2、3、4组为按照每50kg饲料中对应添加实施例1、2、3和4所制备的中药组合物100g；药物对照I组为每50kg饲料中添加30g香菇提取物；药物对照II组为每50kg饲料中添加30g枸杞提取物；混饲，用药时间为5天。

(3)疗效判定及考核指标

死亡率：死亡鸡只数占试验鸡只总数的百分比，即为死亡率。

治愈率：随着用药持续，临床症状消失直至恢夏正常。每组鸡中治愈鸡数占发病鸡只总数的百分比，即为治愈率。

有效率：随着用药持续或耐过，临床症状减轻直至恢复，而未死亡的判定为有效。试验结束后每组存活鸡占发病鸡只总数的百分比，即为有效率。

(四)试验结果

(1)临床观察结果：第1、2、3、4组用药后鸡群临床表现明显好转，用药当天病鸡死亡率得到有效控制，到用药第3天无鸡只死亡，用药第4天鸡群已基本痊愈，精神、饮水、采食恢复正常。药物对照I组在用药后鸡群临床表现有所好转，用药后第2天鸡群精神好转，食欲增加，用药后第3天病鸡零星死亡，鸡群无扎堆现象；到用药后第5天鸡群已基本痊愈，精神、饮水、采食恢复正常，死亡率高于第1-4组。药物对照II组用药后鸡群临床症状有所缓和，用药后第3天起鸡只零星死亡，到用药后第5天无鸡只死亡，鸡群精神状态有所恢复，食欲增加，死亡率较第1-4组高。

(2)本发明中药组合物对患病鸡只疗效：结果(见表3)第1-4组死亡率显著低于药物对照组，而治愈率则显著高于药物对照组。说明本发明中药组合物各组对鸡法氏囊病有较好的疗效，本发明中药组合物能增强动物机体免疫力，能有效减少鸡因病毒病引起机体免疫机能低下而导致的死亡。

表3本发明中药组合物对法氏囊病的疗效对比效果

Claims

1.一种用于增强免疫的中药组合物，其特征在于其组成成分及其重量百分比为：香菇提取物5～30％、枸杞提取物10～30％、莽草酸10～30％，2-脱氧-D-葡萄糖0.5～5％，余量为无水葡萄糖；所述的中药组合物，按照如下方法制备：

（1）按照等量递增法，按照比例将2-脱氧-D-葡萄糖和与2-脱氧-D-葡萄糖等重量的无水葡萄糖置于混合机内，搅拌混合5min，得预混物A；

（2）按照等量递增法，按照比例将香菇提取物和枸杞提取物置于混合机内，搅拌混合5min，然后再加入莽草酸，搅拌混合5min，得预混物B；

(3)按照等量递增法，将预混物A和预混物B置于混合机内，搅拌混合15min，最后加入剩余量的无水葡萄糖，搅拌混合15min。

2.按照权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述的香菇提取物的重量百分比为10～20％。

3.按照权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述的枸杞提取物的重量百分比为10～20％。

4.按照权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述的莽草酸的重量百分比为20～30％。

5.按照权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述的2-脱氧-D-葡萄糖的重量百分比为1～5％。

6.权利要求1～5任一所述的中药组合物在制备增强畜禽免疫力药物上的应用。

7.权利要求1～5任一所述的中药组合物在制备增强鸡免疫力药物上的应用。

8.权利要求1～5任一所述的中药组合物在制备防治鸡法氏囊病药物上的应用。