CN102552174A - 一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法 - Google Patents
一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102552174A CN102552174A CN2011103704544A CN201110370454A CN102552174A CN 102552174 A CN102552174 A CN 102552174A CN 2011103704544 A CN2011103704544 A CN 2011103704544A CN 201110370454 A CN201110370454 A CN 201110370454A CN 102552174 A CN102552174 A CN 102552174A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nanoparticle
- polypeptide
- emulsion
- oil phase
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法。本发明所述的方法是:将药物、生理相容性高分子材料、交联剂、表面活性剂溶于水相,将亲油性表面活性剂溶于非极性溶剂作为油相,将水相加入油相中,通过机械分散形成为纳米乳液;在上述乳液中加入冻干保护剂乳液;超低温急速冷冻后冷冻干燥除去水和非极性溶剂,即得多肽/蛋白类药物纳米粒。本方法使用毒性较低的非极性溶剂,具有高凝固点、低沸点,易于除去的特点;无加热过程,多肽或蛋白产品不易失活;制备工艺简单,易于生产放大;产品为高包封率、高载药量、重分散性能良好的多肽/蛋白纳米粒,适合作为药物载体或中间体。
Description
技术领域
本发明属于药品、生物制品及保健品领域,具体地说,本发明涉及一种高载药量、高包封率的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法。
背景技术
近年来,随着基因工程学与生物工程学的发展,大量多肽与蛋白类药物开始应用于临床。由于这类药物具有用量小、稳定性差、在体内易失活等特点,因此,将药物包裹在纳米颗粒中,既可以增加药物在体内的稳定性,又可以维持长时间的血药浓度;如将纳米粒进行修饰,还可达到靶向给药的目的。考虑到生物安全性,制备以生物相容性高的高分子材料为载体的蛋白多肽类药物纳米粒一直为近年来的研究热点及难点之一。
本发明所述的纳米粒,系采用国际上药剂学定义:平均粒径在1-1000nm范围,优选平均粒径在50-500nm的微粒。根据近年科研文献,制备此种纳米粒的方法主要有两亲性聚合物水中自组装法、机械分散法、超声乳化法等;这些方法或多或少存在着包封率低、药物易渗漏、药物在制备过程中易变性失活等问题,同时,制备方法复杂,耗能耗时,不易进行工业化生产。Wang Ting等提出利用乳化-共冻干法制备胰岛素纳米粒,此方法具有方法简单、高包封率的特点,但制备过程中使用了大量的二氯甲烷与乙醚,对操作人员和使用者的健康都会有不利影响;同时,二氯甲烷与乙醚的凝固点很低,冻干除去有机溶剂要消耗大量的能量。本发明克服了以上缺点,并能保留高包封率、高载药量、制备简单的特质,同时采用全新的冻干保护剂加入方法,使冻干品易于重分散。
天然高分子具有来源广泛、生物可降解、生物相容及低成本的特点。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种新的多肽/蛋白药物纳米粒的制备方法,该方法可提供一种制备简单、高包封率、高载药量、易于重分散的多肽/蛋白纳米粒,同时尽量避免使用毒性大的有机溶剂,尽可能保持 蛋白药物活性。
为实现上述目的,本发明采取了以下技术方案:
一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,包括以下步骤:
(1)配制纳米乳液:
将水溶性多肽/蛋白类药物、生理相容性高分子材料、交联剂、亲水性表面活性剂溶解于水中作为水相;亲油性表面活性剂溶解于非极性溶剂中作为油相;将水相加入到油相中,机械分散形成纳米乳液;
其中,所述水溶性多肽/蛋白类药物在水相中的浓度为0.5mg/ml-10mg/ml(w/v);所述亲水性表面活性剂在水相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述亲油性表面活性剂在油相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述水相与油相的体积比为1∶3-1∶5;
(2)配制冻干保护剂乳液:
将饱和浓度的冻干保护剂溶液、亲水性表面活性剂作为水相;亲油性表面活性剂溶解于非极性溶剂中作为油相;将水相加入到油相中,机械分散形成冻干保护剂乳液;
其中,所述冻干保护剂溶液的饱和浓度为当温度为25℃-37℃时的冻干保护剂水溶液的饱和浓度;所述亲水性表面活性剂在水相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述亲油性表面活性剂在油相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述水相与油相的体积比为1∶3-1∶5;
(3)配制混合乳液:
将冻干保护剂纳米乳液加入到多肽/蛋白纳米乳液中,搅拌混匀,得到混合乳液;
其中,冻干保护剂纳米乳液与多肽/蛋白纳米乳液的体积比为1∶1-2∶1;
(4)制备多肽/蛋白类药物纳米粒:
将混合乳液急速冷冻,再冷冻干燥除去水与非极性溶剂,得到含有多肽/蛋白类药物的纳米粒。
优选地,所述生理相容性高分子材料是选自:壳聚糖、透明质酸、海藻酸、葡聚糖、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚丙烯酸的一种或两种以上的组合。
优选地,所述冻干保护剂是选自:蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、聚乙二醇、明胶、甘氨酸的一种或两种以上的组合。
优选地,所述亲水性表面活性剂是HLB值可以是14-16的非离子表面活性剂,例如,吐温80、吐温60、PEG400单月桂酸酯、Atlas-G1441(聚氧乙烯山梨醇羊毛脂衍生物)、Ameroxol(聚氧乙烯油醇醚)、Solulan 25(聚氧乙烯(25EO)羊毛醇醚)、Emulphor(聚氧乙烯脂肪醇)、Myrj 49(聚氧乙烯单硬脂酸酯)的一种或两种以上的组合。
优选地所述亲油性表面活性剂是HLB值可以是3-6的非离子表面活性剂,例如,司盘80、司盘60、Arlacel 80(失水山梨醇单油酸酯)、Emcol D0-50(二乙二醇脂肪酸酯)、Ameroxol(聚氧乙烯(2EO)油醇醚)的一种或两种以上的组合;所述亲油性表面活性剂是HLB值也可以是磷脂类。
以上表面活性剂可以单独使用,亦可使用混合表面活性剂。
根据本发明所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法的进一步特征,步骤(4)中所述急速冷冻是指浸入液氮或干冰或放入超低温冰箱中短时间内凝固为固体;所述冷冻干燥的参数为:冷阱温度-55±2.5℃,真空度0.22-0.25mBar,干燥时间12小时以上。
本发明还提供了根据前述方法制备而得的多肽/蛋白类药物纳米粒。
采用本发明的制备方法制备得到的多肽/蛋白纳米粒为球形或近似球形,平均粒径200nm左右,多分散系数0.10-0.25,包封率均大于90%,载药量接近20%(载药量=药物重量×100%/(载体材料重量+药物重量))。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明通过利用水/非极性溶剂作为水相和油相,非极性溶剂毒性为低毒,避免了使用二氯甲烷、乙醚等中高毒性有机溶剂。
(2)本发明可利用天然和商品化高分子材料作为纳米粒载体。天然聚多糖具有来源广泛、生物可降解、生理相容及低成本的特点,对材料的电荷、分子量无严苛要求,一般药用辅料即可满足需要。
(3)本发明采用全新的冻干保护剂加入方法,避免了冻干保护剂直接加入纳米粒可能对药物突释造成的影响,具有临床应用前景。
(4)本发明制备工艺简单,易于工业化生产放大,利用现行纳米乳和冻干 粉制备生产线即可制备。
附图说明
图1为本发明所制备的药物纳米粒透射电镜图(TEM)。
图2为本发明所制备的药物纳米粒的典型平均粒径和粒径分布图(Z-average=232.3nm,PDI=0.105)。
图3为胰岛素纳米粒的体外释药图,其中,0-120min为模拟人工胃液中(pH=1.2);120-360min为模拟人工肠液(pH=6.8)。
具体实施方式
以下结合实施事例对本发明做进一步说明。
实施例1:胰岛素透明质酸纳米粒的制备
配方如下:
制备方法:
(1)配制油相和水相溶液
称取胰岛素、透明质酸钠放入西林瓶中,加入超纯水溶解后加入吐温80作为水相;称取司盘80放入50ml离心管溶解于环己烷中作为油相;将水相在机械搅拌(10000rpm,3min)作用下缓慢滴入油相中,得到药物纳米乳液。
(2)配制冻干保护剂乳液
称取甘露醇溶解于超纯水中,加入吐温80作为水相;称取司盘80放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相。机械分散后得到乳液。
(3)配制蛋白纳米乳与冻干保护剂纳米乳混合液
将冻干保护剂乳液加入到蛋白纳米乳液中,搅拌混匀。
冻干保护剂乳液与蛋白纳米乳液的体积比为1∶1。
(4)冷冻干燥混合液
将混合液放入超低温冰箱(-80℃)中速冻成固体。放入冷冻干燥机,冷阱温度为-50℃,真空度0.22-0.25mBar,冻干程序为冻干机自带的“main-drying”程序,冻干24h去除水、环己烷得到含有纳米粒的冻干粉。
实施例2:牛血清白蛋白透明质酸/海藻酸纳米粒的制备
配方如下:
制备方法:
(1)配制油相和水相溶液
称取牛血清白蛋白、透明质酸钠、海藻酸放入西林瓶中,加入超纯水溶解后加入吐温80作为水相;称取卵磷脂放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相;将水相在机械搅拌(10000rpm,3min)作用下缓慢滴入油相中,得到药物纳米乳液。
(2)配制冻干保护剂乳液
称取甘露醇溶解于超纯水中,加入吐温80作为水相;称取卵磷脂放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相。机械分散后得到W/O乳液。
(3)配制蛋白纳米乳与冻干保护剂乳液混合液
将冻干保护剂乳液加入到蛋白纳米乳液中,搅拌混匀。
冻干保护剂乳液与蛋白纳米乳液的体积比为2∶1。
(4)冷冻干燥混合液
将混合液放入超低温冰箱(-80℃)中速冻成固体。放入冷冻干燥机,冷阱温度为-50℃,真空度0.22-0.25mBar,冻干程序为冻干机自带的“main-drying”程序,冻干24h去除水、环己烷得到含有纳米粒的冻干粉。
实施例3:胰岛素透明质酸纳米粒的制备
配方如下:
制备方法:
(1)配制油相和水相溶液
称取胰岛素、透明质酸钠放入西林瓶中,加入超纯水溶解后加入PEG400单月桂酸酯作为水相;称取司盘80放入50ml离心管溶解于环己烷中作为油相;将水相在机械搅拌(10000rpm,3min)作用下缓慢滴入油相中,得到药物纳米乳液。
(2)配制冻干保护剂乳液
称取山梨醇溶解于超纯水中,加入PEG400单月桂酸酯作为水相;称取司盘80放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相。机械分散后得到W/O乳液。
(3)配制蛋白纳米乳与冻干保护剂乳液混合液
将冻干保护剂乳液加入到蛋白纳米乳液中,搅拌混匀。
冻干保护剂乳液与蛋白纳米乳液的体积比为1∶1。
(4)冷冻干燥混合液
将混合液放入超低温冰箱(-80℃)中速冻成固体。放入冷冻干燥机,冷阱温度为-50℃,真空度0.22-0.25mBar,冻干程序为冻干机自带的“main-drying”程序,冻干24h去除水、环己烷得到含有纳米粒的冻干粉。
实施例4:牛血清白蛋白聚谷氨酸纳米粒的制备
配方如下:
制备方法:
(1)配制油相和水相溶液
称取牛血清白蛋白、聚谷氨酸放入西林瓶中,加入超纯水溶解后加入聚氧乙烯脂肪醇作为水相;称取聚氧乙烯(2EO)油醇醚放入50ml离心管溶解于环己烷中作为油相;将水相在机械搅拌(10000rpm,3min)作用下缓慢滴入油相中,得到药物纳米乳液。
(2)配制冻干保护剂乳液
称取甘露醇、甘氨酸溶解于超纯水中,加入聚氧乙烯脂肪醇作为水相;称取聚氧乙烯(2EO)油醇醚放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相。机械分散后得到W/O乳液。
(3)配制蛋白纳米乳与冻干保护剂乳液混合液
将冻干保护剂乳液加入到蛋白纳米乳液中,搅拌混匀。
冻干保护剂乳液与蛋白纳米乳液的体积比为1∶1。
(4)冷冻干燥混合液
将混合液放入超低温冰箱(-80℃)中速冻成固体。放入冷冻干燥机,冷阱温度为-50℃,真空度0.22-0.25mBar,冻干程序为冻干机自带的“main-drying”程序,冻干24h去除水、环己烷得到含有纳米粒的冻干粉。
实施例5:牛血清白蛋白壳聚糖/葡聚糖纳米粒的制备
配方如下:
制备方法:
(1)配制油相和水相溶液
称取牛血清白蛋白、壳聚糖、硫酸葡聚糖放入西林瓶中,加入超纯水溶解后加入聚氧乙烯(25EO)羊毛醇醚作为水相;称取司盘60放入50ml离心管溶解于环己烷中作为油相;将水相在机械搅拌(10000rpm,3min)作用下缓慢滴入油相中,得到药物纳米乳液。
(2)配制冻干保护剂乳液
称取蔗糖溶解于超纯水中,加入聚氧乙烯(25EO)羊毛醇醚作为水相;称取司盘60放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相。机械分散后得到W/O乳液。
(3)配制蛋白纳米乳与冻干保护剂乳液混合液
将冻干保护剂乳液加入到蛋白纳米乳液中,搅拌混匀。
冻干保护剂乳液与蛋白纳米乳液的体积比为2∶1。
(4)冷冻干燥混合液
将混合液放入超低温冰箱(-80℃)中速冻成固体。放入冷冻干燥机,冷阱温度为-50℃,真空度0.22-0.25mBar,冻干程序为冻干机自带的“main-drying”程序,冻干24h去除水、环己烷得到含有纳米粒的冻干粉。
实施例6:胰岛素纳米粒透明质酸/壳聚糖的制备
配方如下:
制备方法:
(1)配制油相和水相溶液
称取胰岛素、透明质酸钠、壳聚糖放入西林瓶中,加入超纯水溶解后加入聚氧乙烯单硬脂酸酯作为水相;称取二乙二醇脂肪酸酯放入50ml离心管溶解于环己烷中作为油相;将水相在机械搅拌(10000rpm,3min)作用下缓慢滴入油相中,得到药物纳米乳液。
(2)配制冻干保护剂乳液
称取乳糖溶解于超纯水中,加入聚氧乙烯单硬脂酸酯作为水相;称取二乙二醇脂肪酸酯放入50ml离心管,溶解于环己烷中作为油相。机械分散后得到W/O乳液。
(3)配制蛋白纳米乳与冻干保护剂乳液混合液
将冻干保护剂乳液加入到蛋白纳米乳液中,搅拌混匀。
冻干保护剂乳液与蛋白纳米乳液的体积比为2∶1。
(4)冷冻干燥混合液
将混合液放入超低温冰箱(-80℃)中速冻成固体。放入冷冻干燥机,冷阱温度为-50℃,真空度0.22-0.25mBar,冻干程序为冻干机自带的“main-drying”程序,冻干24h去除水、环己烷得到含有纳米粒的冻干粉。
上述实施例1至6仅仅是优选的实施例,基于相同的原理,其中的生理相容性高分子材料可选自:壳聚糖、透明质酸、海藻酸、葡聚糖、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚丙烯酸的一种或两种以上的组合;冻干保护剂是选自:蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、聚乙二醇、明胶、甘氨酸的一种或两种以上的组合;亲水性表面活性剂是HLB值可以是14-16的非离子表面活性剂,例如,吐温80、吐温60、PEG400单月桂酸酯、Atlas-G1441(聚氧乙烯山梨醇羊毛脂衍生物)、Ameroxol(聚氧乙烯油醇醚)、Solulan 25(聚氧乙烯(25EO)羊毛醇醚)、Emulphor(聚氧乙烯脂肪醇)、Myrj 49(聚氧乙烯单硬脂酸酯)的一种或两种以上的组合;亲油性表面活性剂是HLB值可以是3-6的非离子表面活性剂,例如,司盘80、司盘60、Arlacel 80(失水山梨醇单油酸酯)、Emcol D0-50(二乙二醇脂肪酸酯)、Ameroxol(聚氧乙烯(2EO)油醇醚)的一种或两种以上的组合;所述亲油性表面活性剂是HLB值也可以是磷脂类。以上表面活性剂可以单独使用,亦可使用混合表面活性剂。
试验例1:药物纳米粒形态的观察
取冻干后重分散的纳米粒,混悬分散,取一滴混悬液滴在300目铜载网上,平衡三分钟。用滤纸吸干溶液。用2%的磷钨酸溶液染色,空气中干燥。JEM-1400(日本JEOL公司)透射电镜下观察。
取出实施例1-6中制备得到的胰岛素纳米粒和牛血清白蛋白纳米粒,进行形态学观察,初测粒径。典型胰岛素纳米粒的透射电镜图,见图1。由图可见,载药纳米粒形态为球形或近似球形,粒径范围在100nm-200nm之间,表面圆整光洁,无粘连,分散性良好。
试验例2:药物纳米粒的粒径及其分布测定
纳米粒径采用光子相关谱法(又称为动态光散射)进行测定。仪器为Marlvern Zetasizer Nano ZS90(英国马尔文公司)。所测量粒径为粒子流体动力学粒径(表示为Z-average),采用国际标准对粒径以及多分散系数(PDI)进行累积分析。首先,纳米粒均匀分散于超纯水中,并通过0.22μm滤膜。调节样品浓度,使其在动态光散射中有足够的分析计数率(kcps)。正式测量之前对样品有两分钟的平衡时间,每个样品测定三次。
取实施例1-6的胰岛素、牛血清白蛋白纳米粒,进行粒径测定,粒径分布图,见图2。由图可见,纳米粒的水力学半径在100nm-400nm之间,粒径分布强度最大值在200nm左右。粒径分布为单峰,峰型窄,且无颗粒聚集峰。表明纳米粒粒径大小均匀,且分布集中。
蛋白纳米粒的测定结果见表1。
表1:实施例1-6制备的纳米粒的粒径和分散系数的测定
实验结果表明,实施例1-6制备的纳米粒流体力学粒径范围都在100-200nm之间,多分散系数为0.1-0.2之间,颗粒分布均匀且集中,无粒子聚集发生。透射电镜观察的颗粒均呈球形或近似球形。
试验例3:胰岛素包封率和载药量的测定
色谱条件与系统适应性实验:
用18烷基键合硅胶作为填充剂,C18色谱柱,检测波长:214nm;流动相:乙腈-磷酸盐缓冲盐溶液(27∶73,v/v);流速:1.00ml/min。
测定法:取出取10mg载药纳米粒分散于磷酸盐缓冲液中(pH=7.4),4℃搅拌(100rpm)48小时,16000g离心60分钟,取出上清液利用RP-HPLC进 行测定。
取若干批次样品进行测定,实验结果见表2。
表2:实施例1-6制备的胰岛素纳米粒的包封率和载药量测定
结果表明,胰岛素纳米粒的包封率为90%左右,载药量为20-30%左右(载药量=药物重量×100%/(多聚糖重量+药物重量)),均高于目前大多数的多肽/蛋白纳米粒制剂。
试验例4:实施例1胰岛素纳米粒体外释放的测定
用18烷基键合硅胶作为填充剂,C18色谱柱,检测波长:214nm;流动相:乙腈-磷酸盐缓冲盐溶液(27∶73,v/v);流速:1.00ml/min。
测定法:取含有2.5mg胰岛素的载药纳米粒溶解于模拟人工胃液中(pH=1.2),放入水浴振荡器中(37℃,100rpm),定点取样1ml,补充释放介质,样品离心(30min,18000g),取上清液利用RP-HPLC进行测定。
2h后将释放介质换成模拟人工肠液(pH=6.8),定点取样,同法测定。
取若干批次样品进行测定,实验结果见图3。
结果表明,胰岛素纳米粒在酸中几乎不释放(小于10%),在人工肠液中可迅速、近乎完全释放,具有良好的释放性能。
本专利所制备的多肽/蛋白类药物纳米粒,其体外释放性质主要取决于载体材料的化学结构、物理化学性质和交联等因素。实施例1、3均为透明质酸纳米粒,为酰胺键交联,故实施例3可取得与实施例1相似的释放效果。实施例2的载体材料为透明质酸和海藻酸的混合物,采用氯化钙交联法,由于海藻酸和透明质酸具有相似的化学结构,且比透明质酸具有更丰富的羧基,故能达实施例1中在人工胃液中低释放速率,而人工肠液中快速释放的释放性能。实施例4中载体材料为聚谷氨酸,为线状高分子,侧链有丰富的羧基,所形成的纳米 粒在胃酸pH条件下(pH=1.2),羧基不解离,纳米粒表面致密,也能达到实施例1相似的释放效果。实施例5和6中载体材料为壳聚糖与硫酸葡聚糖的共混物及壳聚糖与硫酸葡聚糖的共混物,交联方式为正负电荷相互作用,从而使得聚阳离子壳聚糖与聚阴离子硫酸葡聚糖结合成纳米粒。可通过调节聚阳离子和聚阴离子的比例,使所得纳米粒达到实施例1相似的释放效果。
以上所述为本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明的前提下,还是可以做出若干改进和修饰,这些改进和修饰也视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)配制纳米乳液:
将水溶性多肽/蛋白类药物、生理相容性高分子材料、交联剂、亲水性表面活性剂溶解于水中作为水相;亲油性表面活性剂溶解于非极性溶剂中作为油相;将水相加入到油相中,机械分散形成纳米乳液;
其中,所述水溶性多肽/蛋白类药物在水相中的浓度为0.5mg/ml-10mg/ml(w/v);所述亲水性表面活性剂在水相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述亲油性表面活性剂在油相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述水相与油相的体积比为1∶3-1∶5;
(2)配制冻干保护剂乳液:
将饱和浓度的冻干保护剂溶液、亲水性表面活性剂作为水相;亲油性表面活性剂溶解于非极性溶剂中作为油相;将水相加入到油相中,机械分散形成冻干保护剂乳液;
其中,所述冻干保护剂溶液的饱和浓度为当温度为25℃-37℃时的冻干保护剂水溶液的饱和浓度;所述亲水性表面活性剂在水相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述亲油性表面活性剂在油相中的浓度为0.5%-2.0%(w/v);所述水相与油相的体积比为1∶3-1∶5;
(3)配制混合乳液:
将冻干保护剂纳米乳液加入到多肽/蛋白纳米乳液中,搅拌混匀,得到混合乳液;
其中,冻干保护剂纳米乳液与多肽/蛋白纳米乳液的体积比为1∶1-2∶1;
(4)制备多肽/蛋白类药物纳米粒:
将混合乳液急速冷冻,再冷冻干燥除去水与非极性溶剂,得到含有多肽/蛋白类药物的纳米粒。
2.根据权利要求1所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于,所述生理相容性高分子材料是选自:壳聚糖、透明质酸、海藻酸、葡聚糖、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚丙烯酸的一种或两种以上的组合。
3.根据权利要求1所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于,所述冻干保护剂是选自:蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、聚乙二醇、明胶、甘氨酸的一种或两种以上的组合。
4.根据权利要求1所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于:所述亲水性表面活性剂是HLB值为14-16的非离子表面活性剂;所述亲油性表面活性剂是HLB值为3-6的非离子表面活性剂或磷脂类。
5.根据权利要求4所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于,所述HLB值为14-16的非离子表面活性剂是选自:吐温80、吐温60、PEG400单月桂酸酯、Atlas-G1441(聚氧乙烯山梨醇羊毛脂衍生物)、Ameroxol(聚氧乙烯油醇醚)、Solulan 25(聚氧乙烯(25EO)羊毛醇醚)、Emulphor(聚氧乙烯脂肪醇)、Myrj 49(聚氧乙烯单硬脂酸酯)的一种或两种以上的组合。
6.根据权利要求4所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于,所述HLB值为3-6的非离子表面活性剂是选自:司盘80、司盘60、Arlacel80(失水山梨醇单油酸酯)、Emcol D0-50(二乙二醇脂肪酸酯)、Ameroxol(聚氧乙烯(2EO)油醇醚)的一种或两种以上的组合。
7.根据权利要求1所述的多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法,其特征在于,步骤(4)中所述急速冷冻是指浸入液氮或干冰或放入超低温冰箱中短时间内凝固为固体;所述冷冻干燥的参数为:冷阱温度-55±2.5℃,真空度0.22-0.25mBar,干燥时间12小时以上。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法制备而得的多肽/蛋白类药物纳米粒。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201110370454.4A CN102552174B (zh) | 2011-11-18 | 2011-11-18 | 一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201110370454.4A CN102552174B (zh) | 2011-11-18 | 2011-11-18 | 一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102552174A true CN102552174A (zh) | 2012-07-11 |
CN102552174B CN102552174B (zh) | 2015-07-22 |
Family
ID=46399642
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201110370454.4A Active CN102552174B (zh) | 2011-11-18 | 2011-11-18 | 一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102552174B (zh) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107596712A (zh) * | 2017-09-23 | 2018-01-19 | 海南中和药业股份有限公司 | 一种多肽类药物的干燥方法 |
CN107923896A (zh) * | 2015-04-24 | 2018-04-17 | 高露洁-棕榄公司 | 作为活性剂载体的多孔蛋白颗粒 |
CN109528651A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-03-29 | 江苏远恒药业有限公司 | 一种含多肽类药物的w/o/w型复合纳米乳凝胶透皮制剂及其制备方法 |
CN109562193A (zh) * | 2016-06-29 | 2019-04-02 | 首尔大学校产学协力团 | 用于癌病变选择性标志的水凝胶基纳米乳液及其制备方法 |
CN109943613A (zh) * | 2019-03-29 | 2019-06-28 | 吉林大学 | 一种蛋清肽微胶囊及其制备方法 |
CN110325221A (zh) * | 2016-11-18 | 2019-10-11 | 首尔大学校产学协力团 | 用于对癌细胞的选择性荧光标记的纳米载体及其制备方法 |
CN112402621A (zh) * | 2020-11-27 | 2021-02-26 | 中国科学院海洋研究所 | 一种硫酸酯-季铵盐壳聚糖纳米粒作为载体的应用 |
CN114272372A (zh) * | 2021-12-28 | 2022-04-05 | 方坦思(上海)生物医药有限公司 | 一种单克隆抗体冻干粉制剂及其制备工艺 |
CN115252898A (zh) * | 2022-08-19 | 2022-11-01 | 江苏西宏生物医药有限公司 | 一种长效微粒ⅰ型与ⅴ型胶原蛋白复合植入剂 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101428009A (zh) * | 2008-04-09 | 2009-05-13 | 上海医药工业研究院 | 胰岛素经鼻吸入粉雾剂 |
CN102078301A (zh) * | 2009-11-30 | 2011-06-01 | 孙璐 | 以白蛋白与磷脂为载体的多西他赛纳米制剂及其制备方法 |
CN102106821A (zh) * | 2011-02-22 | 2011-06-29 | 四川大学 | 一种新型载蛋白类药物的固体脂质纳米粒给药系统 |
CN102113996A (zh) * | 2011-02-24 | 2011-07-06 | 美迪思生物科技(北京)有限公司 | 一种含有蛋白质或多肽的口服制剂、其制备方法及用途 |
CN102232933A (zh) * | 2011-06-29 | 2011-11-09 | 清华大学 | 具有肿瘤靶向性的白蛋白纳米冻干粉针制剂及其制备方法 |
-
2011
- 2011-11-18 CN CN201110370454.4A patent/CN102552174B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101428009A (zh) * | 2008-04-09 | 2009-05-13 | 上海医药工业研究院 | 胰岛素经鼻吸入粉雾剂 |
CN102078301A (zh) * | 2009-11-30 | 2011-06-01 | 孙璐 | 以白蛋白与磷脂为载体的多西他赛纳米制剂及其制备方法 |
CN102106821A (zh) * | 2011-02-22 | 2011-06-29 | 四川大学 | 一种新型载蛋白类药物的固体脂质纳米粒给药系统 |
CN102113996A (zh) * | 2011-02-24 | 2011-07-06 | 美迪思生物科技(北京)有限公司 | 一种含有蛋白质或多肽的口服制剂、其制备方法及用途 |
CN102232933A (zh) * | 2011-06-29 | 2011-11-09 | 清华大学 | 具有肿瘤靶向性的白蛋白纳米冻干粉针制剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
TING WANG ET AL: "Lyophilization of water-in-oil emulsions to prepare phospholipid-based anhydrous reverse micelles for oral peptide delivery", 《EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCE》 * |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107923896A (zh) * | 2015-04-24 | 2018-04-17 | 高露洁-棕榄公司 | 作为活性剂载体的多孔蛋白颗粒 |
US11643445B2 (en) | 2015-04-24 | 2023-05-09 | Colgate-Palmolive Company | Porous protein particles as carriers for actives |
US11103600B2 (en) | 2016-06-29 | 2021-08-31 | Seoul National University R & Db Foundation | Hydrogel-based nanoenulsion for selectively labeling cancer lesion, and preparation method therefor |
CN109562193A (zh) * | 2016-06-29 | 2019-04-02 | 首尔大学校产学协力团 | 用于癌病变选择性标志的水凝胶基纳米乳液及其制备方法 |
CN110325221B (zh) * | 2016-11-18 | 2022-04-08 | 首尔大学校产学协力团 | 用于对癌细胞的选择性荧光标记的纳米载体及其制备方法 |
CN110325221A (zh) * | 2016-11-18 | 2019-10-11 | 首尔大学校产学协力团 | 用于对癌细胞的选择性荧光标记的纳米载体及其制备方法 |
CN107596712A (zh) * | 2017-09-23 | 2018-01-19 | 海南中和药业股份有限公司 | 一种多肽类药物的干燥方法 |
CN109528651A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-03-29 | 江苏远恒药业有限公司 | 一种含多肽类药物的w/o/w型复合纳米乳凝胶透皮制剂及其制备方法 |
CN109943613A (zh) * | 2019-03-29 | 2019-06-28 | 吉林大学 | 一种蛋清肽微胶囊及其制备方法 |
CN112402621A (zh) * | 2020-11-27 | 2021-02-26 | 中国科学院海洋研究所 | 一种硫酸酯-季铵盐壳聚糖纳米粒作为载体的应用 |
CN114272372A (zh) * | 2021-12-28 | 2022-04-05 | 方坦思(上海)生物医药有限公司 | 一种单克隆抗体冻干粉制剂及其制备工艺 |
CN115252898A (zh) * | 2022-08-19 | 2022-11-01 | 江苏西宏生物医药有限公司 | 一种长效微粒ⅰ型与ⅴ型胶原蛋白复合植入剂 |
CN115252898B (zh) * | 2022-08-19 | 2023-08-18 | 江苏西宏生物医药有限公司 | 一种长效微粒ⅰ型与ⅴ型胶原蛋白复合植入剂 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102552174B (zh) | 2015-07-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102552174B (zh) | 一种高载药量高包封率多肽/蛋白类药物纳米粒的制备方法 | |
Khan et al. | Temozolomide loaded nano lipid based chitosan hydrogel for nose to brain delivery: Characterization, nasal absorption, histopathology and cell line study | |
Liu et al. | Low molecular weight alkyl-polycation wrapped magnetite nanoparticle clusters as MRI probes for stem cell labeling and in vivo imaging | |
Zhang et al. | Preparation, optimization, characterization and cytotoxicity in vitro of Baicalin-loaded mixed micelles | |
CN102327230B (zh) | 一种包裹紫杉烷类药物的蛋白纳米颗粒及其制备方法 | |
Saleh et al. | Redox responsive curcumin-loaded human serum albumin nanoparticles: Preparation, characterization and in vitro evaluation | |
Ahmed et al. | Protein cytoplasmic delivery using polyampholyte nanoparticles and freeze concentration | |
El-Marakby et al. | A novel serum-stable liver targeted cytotoxic system using valerate-conjugated chitosan nanoparticles surface decorated with glycyrrhizin | |
Li et al. | Self-assembled lysozyme/carboxymethylcellulose nanogels for delivery of methotrexate | |
Xu et al. | Uniformly sized iron oxide nanoparticles for efficient gene delivery to mesenchymal stem cells | |
Chen et al. | Glucosamine derivative modified nanostructured lipid carriers for targeted tumor delivery | |
Wang et al. | Therapeutic potential of exosome‐based personalized delivery platform in chronic inflammatory diseases | |
Jiang et al. | One-pot green synthesis of doxorubicin loaded-silica nanoparticles for in vivo cancer therapy | |
Fan et al. | Preparation of 5-fluorouracil-loaded nanoparticles and study of interaction with gastric cancer cells | |
CN102357077B (zh) | 一种包裹难溶性药物的蛋白纳米颗粒及其制备方法 | |
Wu et al. | Facile fabrication of poly (acrylic acid) coated chitosan nanoparticles with improved stability in biological environments | |
Huang et al. | Ultra-small and anionic starch nanospheres: formation and vitro thrombolytic behavior study | |
CN104815333B (zh) | 一种聚离子胶束纳米粒子的制备方法及其应用 | |
CN108938597A (zh) | 一种壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒及其制备和应用 | |
Xuan et al. | Multi-functional lipopeptide micelles as a vehicle for curcumin delivery | |
CN110452390B (zh) | 一种胰岛素智能给药制剂 | |
CN102357076B (zh) | 一种包裹难溶性药物的蛋白纳米颗粒的制备方法 | |
CN107115532A (zh) | 一种双重修饰聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒、其制备方法及用途 | |
CN107625745A (zh) | 一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂及其制备方法 | |
CN103494829A (zh) | 一种抗耐药性的多功能纳米粒制剂及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |