CN102550802A - 一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,啤酒废酵母粉经预处理、高压均质处理、第一次抽提、酶解、第二次抽提、灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。本发明以啤酒厂生产啤酒后的副产物——啤酒废酵母为原料,提取酵母多肽和氨基酸粉,可以减轻污染和实现资源的二次转化,也可产生大的经济效益;本发明采用的是先高压均质,再两次抽提,中间辅之以复合蛋白酶酶解,可以增加酵母细胞壁的通透性和提高酵母细胞内蛋白和氨基酸的溶出率,进而提高酵母抽提物的获得率,增加酵母蛋白的含量;本发明可以作为功能性饲料添加剂和食品添加剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取多肽和氨基酸的的方法,具体涉及一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法。
背景技术
啤酒酵母含有丰富的蛋白质,干酵母的蛋白质含量达50%左右,由18种以上的常见氨基酸组成,氨基酸组成合理,富含人体必需的8种氨基酸,特别是谷物中蛋白质含量较少的赖氨酸含量较高。啤酒酵母中蛋白质的含量和组成基本保持不变,除蛋氨酸含量不多以外,其它含量几乎与动物肌肉蛋白和牛乳蛋白相同,且氨基酸组成也相似。啤酒酵母中氨基酸组成的比例接近联合国粮农组织推荐的理想氨基酸组成。从蛋白质饲用安全性考虑,由于啤酒酵母无病原性和毒性,因而啤酒酵母蛋白质是一种优良的饲用蛋白质。
啤酒废酵母是啤酒生产的副产物,是指啤酒酿造后沉降的酵母泥,主要是由大量的弱细胞和死细胞组成。传统的处理方法是丢弃或作为饲料处理,但因其具有坚韧的细胞壁和特有的酵母臭,适口性差,不易消化和吸收,烘干作为饲料用的经济效益不高。若直接排放,则会照成环境污染,同时也是对财富的浪费。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术的不足,提供了一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法。
为达到上述目的,本发明的多个实施例采取了如下技术方案:
一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,依次包括以下步骤:
步骤一:啤酒废酵母粉经预处理:将啤酒废酵母粉过筛、洗涤后配制成酵母悬浮液;
步骤二:高压均质处理:将预处理过的酵母悬浮液进行均质处理;
步骤三:第一次抽提:将经均质处理后的酵母溶液进行抽提;
步骤四:酶解:利用复合蛋白酶制剂对经第一次抽提后的酵母溶液酶解;
步骤五:第二次抽提:将经酶解后的酵母溶液进行抽提;
步骤六:将经第二次抽提的酵母溶液灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。
进一步的技术方案是,所述预处理具体为:先将啤酒废酵母粉过100目筛两次,加1~5倍体积的0.1%~1%的碳酸氢钠或酒石酸洗涤0.5h~3h,1000~5000rpm离心,再用1~5倍体积的水洗涤至不再有苦味,配成1%~20%的酵母悬浮液。
进一步的技术方案是,所述高压均质处理具体为:将1%~20%的酵母悬浮液在10~100MPa条件下均质1~5次。
进一步的技术方案是,所述第一次抽提具体为:在均质后的1%~20%的酵母悬浮液中,添加0~1%的氯化钠,0~1%的硫酸锌以及0~1%的硫酸钙,并调节pH为4.0~8.0,温度保持在40℃~90℃,抽提10h~48h。
进一步的技术方案是,所述酶解具体为:在经第一次抽提后的1%~20%酵母溶液中,添加复合蛋白酶制剂,酶浓度与酵母浓度之比为1000U/g~100000U/g,酶解时间为10h~24h。
进一步的技术方案是,所述复合蛋白酶制剂为啤酒中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及枯草芽孢杆菌蛋白酶中的至少一种的复合酶制剂。
进一步的技术方案是,所述第二次抽提具体为:温度为60℃~90℃,水解时间为5h~20h。
进一步的技术方案是,所述压滤分离具体为:板框式压滤,筛孔目数为200目。
进一步的技术方案是,所述喷雾干燥具体为:进风温度为140℃,出风温度为80℃,雾化盘转速低于20000r/min。
进一步的技术方案是,所述的酵母多肽和氨基酸粉的灰分含量≤3%,水分含量≤5%,粗蛋白含量≥85%,其中三氯乙酸可溶性氮≥75%,溶解度≥99%。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
(1)本发明以啤酒厂生产啤酒后的副产物——啤酒废酵母为原料,提取酵母多肽和氨基酸粉,可以减轻污染和实现资源的二次转化,也可产生大的经济效益。
(2)本发明的实施方式之一采用的是先高压均质,再两次抽提,中间辅之以复合蛋白酶酶解,可以增加酵母细胞壁的通透性和提高酵母细胞内蛋白和氨基酸的溶出率,进而提高酵母抽提物的获得率,增加酵母蛋白的含量。
(3)利用本发明从啤酒废酵母中提取的酵母多肽和氨基酸粉作为功能性饲料添加剂一方面可以改善饲料的适口性,提高其摄入量,另一方面也可提高牲畜胃肠道对蛋白的消化吸收率,促进动物的生长发育。
(4)利用本发明从啤酒废酵母中提取的酵母多肽和氨基酸粉也可作为食品添加剂,进行美拉德反应,制作食用香精。
具体实施方式
下面的实施例对本发明作进一步说明,但本发明的实施方式不限于此。
实施例一
一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,依次包括以下步骤:
步骤一:啤酒废酵母粉经预处理:将啤酒废酵母粉过筛、洗涤后配制成酵母悬浮液;
步骤二:高压均质处理:将预处理过的酵母悬浮液进行均质处理;
步骤三:第一次抽提:将经均质处理后的酵母溶液进行抽提;
步骤四:酶解:利用复合蛋白酶制剂对经第一次抽提后的酵母溶液酶解;
步骤五:第二次抽提:将经酶解后的酵母溶液进行抽提;
步骤六:将经第二次抽提的酵母溶液灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。
进一步的技术方案是,所述预处理具体为:先将啤酒废酵母粉过100目筛两次,加1倍体积的0.1%的碳酸氢钠洗涤0.5h,1000rpm离心,再用1倍体积的水洗涤至不再有苦味,配成1%%的酵母悬浮液。
进一步的技术方案是,所述高压均质处理具体为:将1%%的酵母悬浮液在10MPa条件下均质1次。
进一步的技术方案是,所述第一次抽提具体为:在均质后的1%的酵母悬浮液中,添加1%的氯化钠,1%的硫酸锌以及1%的硫酸钙,并调节pH为4.0,温度保持在40℃,抽提10h。
进一步的技术方案是,所述酶解具体为:在经第一次抽提后的1%酵母溶液中,添加复合蛋白酶制剂,酶浓度与酵母浓度之比为1000U/g,酶解时间为10h。
进一步的技术方案是,所述复合蛋白酶制剂为啤酒中性蛋白酶。
进一步的技术方案是,所述第二次抽提具体为:温度为60℃,水解时间为5h。
进一步的技术方案是,所述压滤分离具体为:板框式压滤,筛孔目数为200目。
进一步的技术方案是,所述喷雾干燥具体为:进风温度为140℃,出风温度为80℃,雾化盘转速为20000r/min。
进一步的技术方案是,所述的酵母多肽和氨基酸粉的灰分含量为1%,水分含量为3%,粗蛋白含量为90%,其中三氯乙酸可溶性氮为80%,溶解度为99%。
实施例二
一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,依次包括以下步骤:
步骤一:啤酒废酵母粉经预处理:将啤酒废酵母粉过筛、洗涤后配制成酵母悬浮液;
步骤二:高压均质处理:将预处理过的酵母悬浮液进行均质处理;
步骤三:第一次抽提:将经均质处理后的酵母溶液进行抽提;
步骤四:酶解:利用复合蛋白酶制剂对经第一次抽提后的酵母溶液酶解;
步骤五:第二次抽提:将经酶解后的酵母溶液进行抽提;
步骤六:将经第二次抽提的酵母溶液灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。
进一步的技术方案是,所述预处理具体为:先将啤酒废酵母粉过100目筛两次,加5倍体积的1%的酒石酸洗涤3h,5000rpm离心,再用5倍体积的水洗涤至不再有苦味,配成20%的酵母悬浮液。
进一步的技术方案是,所述高压均质处理具体为:将20%的酵母悬浮液在100MPa条件下均质5次。
进一步的技术方案是,所述第一次抽提具体为:在均质后的20%的酵母悬浮液中,添加0.5%的氯化钠,0.5%的硫酸锌以及0.5%的硫酸钙,并调节pH为8.0,温度保持在90℃,抽提48h。
进一步的技术方案是,所述酶解具体为:在经第一次抽提后的20%酵母溶液中,添加复合蛋白酶制剂,酶浓度与酵母浓度之比为100000U/g,酶解时间为24h。
进一步的技术方案是,所述复合蛋白酶制剂为啤酒中性蛋白酶、酸性蛋白酶和胰蛋白酶中的复合酶制剂。
进一步的技术方案是,所述第二次抽提具体为:温度为90℃,水解时间为20h。
进一步的技术方案是,所述压滤分离具体为:板框式压滤,筛孔目数为200目。
进一步的技术方案是,所述喷雾干燥具体为:进风温度为140℃,出风温度为80℃,雾化盘转速为15000r/min。
进一步的技术方案是,所述的酵母多肽和氨基酸粉的灰分含量为3%,水分含量为5%,粗蛋白含量为85%,其中三氯乙酸可溶性氮为85%,溶解度为99.5%。
实施例三
一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,依次包括以下步骤:
步骤一:啤酒废酵母粉经预处理:将啤酒废酵母粉过筛、洗涤后配制成酵母悬浮液;
步骤二:高压均质处理:将预处理过的酵母悬浮液进行均质处理;
步骤三:第一次抽提:将经均质处理后的酵母溶液进行抽提;
步骤四:酶解:利用复合蛋白酶制剂对经第一次抽提后的酵母溶液酶解;
步骤五:第二次抽提:将经酶解后的酵母溶液进行抽提;
步骤六:将经第二次抽提的酵母溶液灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。
进一步的技术方案是,所述预处理具体为:先将啤酒废酵母粉过100目筛两次,加3倍体积的0.5%的碳酸氢钠洗涤2h,3000rpm离心,再用3倍体积的水洗涤至不再有苦味,配成10%的酵母悬浮液。
进一步的技术方案是,所述高压均质处理具体为:将10%的酵母悬浮液在50MPa条件下均质3次。
进一步的技术方案是,所述第一次抽提具体为:在均质后的10%的酵母悬浮液中,添加0.7%的氯化钠,0.5%的硫酸锌以及0.3%的硫酸钙,并调节pH为5.0,温度保持在60℃,抽提24h。
进一步的技术方案是,所述酶解具体为:在经第一次抽提后的10%酵母溶液中,添加复合蛋白酶制剂,酶浓度与酵母浓度之比为50000U/g,酶解时间为12h。
进一步的技术方案是,所述复合蛋白酶制剂为啤酒中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及枯草芽孢杆菌蛋白酶的复合酶制剂。
进一步的技术方案是,所述第二次抽提具体为:温度为80℃,水解时间为15h。
进一步的技术方案是,所述压滤分离具体为:板框式压滤,筛孔目数为200目。
进一步的技术方案是,所述喷雾干燥具体为:进风温度为140℃,出风温度为80℃,雾化盘转速为12000r/min。
进一步的技术方案是,所述的酵母多肽和氨基酸粉的灰分含量为2.5%,水分含量为4.5%,粗蛋白含量为93%,其中三氯乙酸可溶性氮为80%,溶解度为99.6%。
实施例四
一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,依次包括以下步骤:
步骤一:啤酒废酵母粉经预处理:将啤酒废酵母粉过筛、洗涤后配制成酵母悬浮液;
步骤二:高压均质处理:将预处理过的酵母悬浮液进行均质处理;
步骤三:第一次抽提:将经均质处理后的酵母溶液进行抽提;
步骤四:酶解:利用复合蛋白酶制剂对经第一次抽提后的酵母溶液酶解;
步骤五:第二次抽提:将经酶解后的酵母溶液进行抽提;
步骤六:将经第二次抽提的酵母溶液灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。
进一步的技术方案是,所述预处理具体为:先将啤酒废酵母粉过100目筛两次,加2倍体积的0.7%的酒石酸洗涤1h,2000rpm离心,再用2倍体积的水洗涤至不再有苦味,配成15%的酵母悬浮液。
进一步的技术方案是,所述高压均质处理具体为:将15%的酵母悬浮液在80MPa条件下均质3次。
进一步的技术方案是,所述第一次抽提具体为:在均质后的15%的酵母悬浮液中,添加0.6%的氯化钠,0.8%的硫酸锌以及0.5%的硫酸钙,并调节pH为5.0,温度保持在60℃,抽提36h。
进一步的技术方案是,所述酶解具体为:在经第一次抽提后的15%酵母溶液中,添加复合蛋白酶制剂,酶浓度与酵母浓度之比为8000U/g,酶解时间为18h。
进一步的技术方案是,所述复合蛋白酶制剂为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及枯草芽孢杆菌蛋白酶中的复合酶制剂。
进一步的技术方案是,所述第二次抽提具体为:温度为80℃,水解时间为12h。
进一步的技术方案是,所述压滤分离具体为:板框式压滤,筛孔目数为200目。
进一步的技术方案是,所述喷雾干燥具体为:进风温度为140℃,出风温度为80℃,雾化盘转速为12000r/min。
进一步的技术方案是,所述的酵母多肽和氨基酸粉的灰分含量为1.5%,水分含量为3%,粗蛋白含量为90%,其中三氯乙酸可溶性氮为86%,溶解度为99.8%。
Claims (10)
1.一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:依次包括以下步骤:
步骤一:啤酒废酵母粉经预处理:将啤酒废酵母粉过筛、洗涤后配制成酵母悬浮液;
步骤二:高压均质处理:将预处理过的酵母悬浮液进行均质处理;
步骤三:第一次抽提:将经均质处理后的酵母溶液进行抽提;
步骤四:酶解:利用复合蛋白酶制剂对经第一次抽提后的酵母溶液酶解;
步骤五:第二次抽提:将经酶解后的酵母溶液进行抽提;
步骤六:将经第二次抽提的酵母溶液灭酶和压滤分离后,喷雾干燥得到酵母多肽和氨基酸粉。
2.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述预处理具体为:先将啤酒废酵母粉过100目筛两次,加1~5倍体积的0.1%~1%的碳酸氢钠或酒石酸洗涤0.5h~3h,1000~5000rpm离心,再用1~5倍体积的水洗涤至不再有苦味,配成1%~20%的酵母悬浮液。
3.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述高压均质处理具体为:将1%~20%的酵母悬浮液在10~100MPa条件下均质1~5次。
4.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述第一次抽提具体为:在均质后的1%~20%的酵母溶液中,添加0~1%的氯化钠,0~1%的硫酸锌以及0~1%的硫酸钙,并调节pH为4.0~8.0,温度保持在40℃~90℃,抽提10h~48h。
5.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述酶解具体为:在经第一次抽提后的1%~20%酵母溶液中,添加复合蛋白酶制剂,酶浓度与酵母浓度之比为1000U/g~100000U/g,酶解时间为10h~24h。
6.如权利要求5所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述复合蛋白酶制剂为啤酒中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及枯草芽孢杆菌蛋白酶中的至少一种的复合酶制剂。
7.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述第二次抽提具体为:温度为60℃~90℃,水解时间为5h~20h。
8.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述压滤分离具体为:板框式压滤,筛孔目数为200目。
9.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述喷雾干燥具体为:进风温度为140℃,出风温度为80℃,雾化盘转速低于20000r/min。
10.如权利要求1所述的一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,其特征在于:所述的酵母多肽和氨基酸粉的灰分含量≤3%,水分含量≤5%,粗蛋白含量≥85%,其中三氯乙酸可溶性氮≥75%,溶解度≥99%。
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