CN102550401A - 非洲紫罗兰组织培养配方 - Google Patents

Abstract

本发明非洲紫罗兰组织培养配方。属一种诱导非洲紫罗兰分化的培养基配方，它涉及植物组织培养技术领域，是一种关于非洲紫罗兰诱导再生植株的专用培养基。它解决了非洲紫罗兰获得纯系育种材料的问题，通过植物组织培养技术获得非洲紫罗兰纯系，从而加速优良盆栽花卉非洲紫罗兰的育种进程，并且能够快速扩大繁殖系数，提高工厂化育苗的生产效率。一种诱导非洲紫罗兰分化的培养基由MS培养基、激素和碳源组成。本发明采用非洲紫罗兰叶片作为外植体，采用光照培养，进行诱导分化，并获得再生植株。本发明诱导分化明显，分化率达到95％以上，易形成再生植株，从而加快非洲紫罗兰育种速度，缩短培育周期。

Description

非洲紫罗兰组织培养配方

技术领域

本发明属于农业生产中的生物技术领域(植物组织培养技术)。涉及快速繁育非洲紫罗兰的核心技术，是一种诱导非洲紫罗兰分化的培养基配方，是关于非洲紫罗兰花分化再生植株的专用培养基。

背景技术

在现代社会，城市居民80％-90％的时间是在室内度过。人居建筑物中的室内空气质量对人类健康的影响远较室外空气重要。然而，由于建筑材料的阻隔作用，使得室内空气有别于室外。特别是随着节能和温度舒适要求的提高，建筑物密闭程度不断增大，室内与室外空气交换量减少，使室内外的环境差异更加明显。绿色植物净化作用是利用植物对污染物的持续净化作用，最终达到动态降低污染物的目的。有很多相关报道证明户外植物具有吸附大气中有害气体的能力。植物可以将苯、甲苯等挥发物、蕙等半挥发性物质吸收或降解，或将它们代谢成水和二氧化碳。

非洲紫罗兰(Saintp antia ionanth)又称非洲堇、非洲紫苣苔或圣包罗花，为苦苣苔科非洲紫罗兰属多年生常绿草本植物，原产于非洲坦桑尼亚海拔700-1000m的坦葛尼喀地区的乌桑巴拉山上。非洲紫罗兰株高一般15-30cm，全株表面长有绒毛。叶片基生，卵圆形或长圆状心形，长6-7cm，肉质，全缘，先端钝。叶面暗绿色，叶背浅绿色，略带红晕。总状花序，花序梗较长，高出叶丛。花单生或聚生，花冠阔仲形，花径2-3.5cm，二唇状，上唇2裂，下唇3裂，裂片椭圆形，蒴果有毛。性喜半阴、温暖、湿润环境，生长适宜温度为18-26℃。花期每次1-2月。花卉品种繁多，花色艳丽，包括蓝色、粉红色、红色、紫色、砖红色、绿色及白色等不同色系，园艺品种达2000多个，具有较高的观赏价值，是国际上著名的室内盆栽花卉，被称为室内花卉皇后。

非洲紫罗兰是我国近年来从国外引进的栽培品种，其呈花粉退化趋势，栽培后不易结籽，目前主要是扦插分株繁殖，严重阻碍这一优良品种的推广应用及新品种选育。

植物组织培养的意义：

1，快速繁殖优良种苗。由于组织培养周期短，增殖率高及能全年生产等特点，加上培养材料和试管苗的小型化，这就可使有限的空间培养出大量的植物，在短期内培养出大量的幼苗。组织培养突出的优点是“快”，通过这一方法在较短时期内迅速扩大植物的数量，以一个茎尖或一小块叶片为基数，经组织培养一年内可增殖到10,000～100,000株；

2，无病毒苗的培养。通过组织培养的茎尖诱导，可脱去植株本身的病毒，从而获得无菌苗。

3，在育种上的应用。植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行。如用花药培养单倍体植株；用原生质体进行体细胞杂交和工厂化生产组培苗，是按一定工艺流程规范化程序化生产的，具有繁殖速度快、整齐、一致、无虫少病、生长周期短、遗传性稳定的特点，可以加速产品的发展，尽快获得繁殖无性系。基因转移；用子房、胚和胚珠完成胚的试管发育和试管受精等；种质资源的保存等等；

4，工厂化育苗。工厂化生产组培苗，是按一定工艺流程规范化程序化生产的，具有繁殖速度快、整齐、一致、无虫少病、生长周期短、遗传性稳定的特点，可以加速产品的发展，尽快获得繁殖无性系。

经过1年的研究，利用紫罗兰幼叶作为外植体，进行分化诱导、继代增殖、生根，从而获得再生植株。

发明内容

本发明从筛选基本培养基、调整植物生长调节剂及碳源入手，合理配比各种激素和碳源，目的是提供诱导非洲紫罗兰花的专用培养基，以解决诱导再生植株。

本发明利用正交试验设计筛选基本培养基、激素及碳源水平，并经过各种单因子的多次试验，最终确定适宜的培养基与激素种类及用量。实验表明，本发明培养基诱导增殖明显，易形成再生植株。。

本发明的技术内容包括：

培养基由MS(营养元素)、激素和碳源组成。其中营养元素包括大量元素和微量元素，大量元素包括：NH₄NO₃，KNO₃，KH₂PO₄，MgSO₄.7H₂O，CaCl₂.2H₂O；微量元素包括：KI，H₃BO₃，MnSO₄.4H₂O，ZnSO₄.7H₂O，Na₂MoO₄.2H₂O，CuSO₄.5H₂O，CoCl₂.6H₂O；铁盐包括：Na₂.EDTA，FeSO₄.7H₂O；

有机质包括：C₆H₁₂O₆.2H₂O，NC₅H₄COOH，

C₁₂H₁₇CLN₄OS.HCL，C₈H11O₃N.HCL，NH₂.CN₂.COOH。

激素包括KT(激动素)、NAA(萘乙酸)、IBA(吲哚丁酸)、碳源为蔗糖。

表-1本发明营养元素配方

表-2本发明激素配方

本发明培养基配方如下：

i诱导分化培养基：MS+KT1.0+NAA0.05蔗糖2％，PH＝5.8

ii继代增殖培养基：MS+KT0.5+NAA0..1蔗糖2％，PH＝5.8

iii生根培养基：1/2MS+NAA0.2+IBA0.1蔗糖2％，PH＝5.8

具体实施方式

材料采集与处理：选择无病虫害，生长健壮的非洲紫罗兰植株。通常非洲紫罗兰全年可采集外植体，本发明外植体采集时间再8-10月，采集幼嫩的叶片。将采集的外植体置于冷藏箱内低温处理24小时，备用。

消毒方法及接种：将低温预处理后的叶片取出，先用洗涤剂作表面清洗，然后放在超净工作台用75％己醇灭菌30s，无菌水冲洗后放在滤纸上吸干叶片表面水分。用解剖刀将叶片分割成1cm×1cm，接种到诱导培养基上，每瓶接种6-12个，每个处理重复3次。

培养条件：培养条件采用光照培养。光照培养光源采用日光灯，培养室内的白天温度为24℃-28℃，照明12h-14h，光照强度15μmol·m-²·s-¹-20μmol·m-²·s-¹。

实验结果表明；基本培养基对诱导分化存在明显的差异，MS培养基诱导率较高达43.33％；诱导分化的激素选择KT诱导率达48％；继代增殖激素选择KT；诱导生根选择NAA和IBA，诱导率达95％。

Claims (2)

1.非洲紫罗兰组织培养配方

该配方包括将所述植物繁殖组织培养配方的原料及其培养过程的培养基配比比率和培养方法、具体实施方法。

2.根据权利要求1所述的植物繁殖组织培养配方，其特征在于组织培养配方主体成份的纯度及其含量的比率。本发明培养基配方如下：

i诱导分化培养基：MS+KT1.0+NAA0.05蔗糖2％，PH＝5.8

ii继代增殖培养基：MS+KT0.5+NAA0..1蔗糖2％，PH＝5.8

iii生根培养基：1/2MS+NAA0.2+IBA0.1蔗糖2％，PH＝5.8