CN102526583B - 一种用于治疗老年性痴呆的中药组合物及其制法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于治疗老年性痴呆的药物组合物,尤其是一种中药组合物及其制备方法,属于中药领域。该中药组合物是由一定重量配比的鳖甲、牛脊髓、熟地、益智仁、远志、人参、山茱萸和石菖蒲为原料药,采用适当的提取精制工艺制成。动物实验表明该中药组合物可提高模型鼠血清中SOD活力,降低模型鼠血清中MDA含量,并对AD大鼠学习记忆障碍具有改善作用,提示对老年性痴呆具有一定的治疗作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于治疗老年性痴呆的药物组合物,尤其是一种中药组合物及其制备方法,属于中药领域。
背景技术
老年痴呆症,即阿尔茨海默病(AD),是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病,临床表现为认知和记忆功能不断恶化,日常生活能力进行性减退,并有各种神经精神症状和行为障碍。患病率研究显示,美国在2000年的阿尔茨海默病例数为450万例,年龄每增加5岁,阿尔茨海默病病人的百分数将上升2倍,也就是说,60岁人群的患病率为1%,而85岁人群的患病率为30%。虽然这种病在任何年龄都能出现,但是通常在60-70之间出现。当人们被诊断出患有该病时,通常还能活5-10年,然而新的研究显示这种病的存活率正在不断下降,目前,患上该病之后大约还能存活3.3年。
西医认为,AD主要表现为脑细胞的广泛死亡,特别是基底节区的脑细胞。经解剖发现,患者脑中有广泛的神经元纤维缠结,轴突缠结形成老年斑。老年斑中含有坏死的神经细胞碎片、铝、异常的蛋白,阿尔茨海默病患者脑内β-淀粉样蛋白过度积聚。因此,西医治疗AD的药物主要有以下几类:脑循环改善剂,提高胆碱能活性药物,如他克林;非胆碱药物,如司来杏林。其它尚有肽类激素、神经营养因子、抗氧化剂、钙拮抗剂、非甾体类药、抗淀粉蛋白药等,但大多数仍处于临床试验中。由于西药的疗效不肯定,毒副作用大,加上AD病因迄今不十分明确,现代医学在近期找到真正意义上有效防治AD的化学合成药物还十分困难。
中医学认为老年性痴呆的病位在脑,与心肝脾肾有关,与肾的关系尤为密切。其基本病机是脑髓空虚,痰瘀痹阻,火扰神明,诸邪蓄积,蕴生浊毒,元神受损,神机失用。多表现为本虚标实,肾虚为本,痰瘀内生,气血逆乱为标。临床上证型多见肾精亏虚、髓海不足,肝肾亏虚、痰浊血瘀阻窍。临床治疗根据病情不同分别采用补肾益髓、化痰开窍、活血祛瘀、清热泻火等治法;该病多为渐进性加重,病程较长,有早中晚期和轻中重之分,其治疗多在辨病的基础上,结合辨证施治,以填精益髓为主,兼以活血化瘀、祛痰开窍等。鉴于肾为先天之本,能藏精、生髓、通脑,因肾与脑髓关系密切,补肾成为中药治疗AD的重要途径。它以肾藏精,精生髓,髓上充于脑,脑充则思维灵敏为依据,针对AD的病理改变特点进行组方,为AD的防治和研究提供了一个新的科研思路。在整体观念指导下组方,临床疗效日渐显著。因此,从补肾入手研制新方剂对AD的预防和治疗,具有十分重要的科学价值。先后有先后有王平等用中药醒脑益智方(由天麻、胆南星、制何首乌、茯苓、人参等组成)对老年性痴呆鼠海马神经元及超微结构进行形态学机制的研究,周乐天等用补肾益智方(由枸杞子、何首乌、人参、丹皮、冰片等组成)对痴呆模型大鼠进行学习记忆能力的研究,都取得了一定的进展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于治疗老年性痴呆的中药组合物,该中药组合物是由如下重量配比的原料药制成的:鳖甲25-35份、牛脊髓25-35份、熟地18-22份、益智仁18-22份、远志18-22份、人参13-17份、山茱萸8-12份、石菖蒲8-12份。
优选的,上述原料药的组成为:鳖甲30份、牛脊髓30份、熟地20份、益智仁20份、远志20份、人参15份、山茱萸10份、石菖蒲10份。
上述原料药中:牛脊髓为牛科动物黄牛或水牛的脊髓,具有滋肺补肾、填精益髓的功效;其余各原料药均应符合现行中国药典的规定。
该中药组合物可以通过如下工艺步骤制成所需剂型:
步骤一、取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加水煎煮,滤过,滤液冷却至室温,离心分离,上清液浓缩成清膏,备用;
步骤二、取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉;将牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用;
步骤三、将上述清膏与细粉混合,加入制剂所需常规辅料,制成所需制剂。
具体地,该中药组合物可通过如下工艺步骤被制成颗粒剂:
步骤一、取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加6倍量的水,煎煮三次,每次0.5小时,合并煎液,滤过,冷却至室温,离心分离,上清液浓缩至80℃时相对密度1.10~1.30的清膏,备用;
步骤二、取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉,牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用:
步骤三、将上述清膏与细粉混合,加适量的糊精、乳糖和糖粉,以50%乙醇湿润制粒,60℃以下干燥,制成颗粒剂。
有益效果
本发明中药组合物对具有补肾益智的作用,动物药效学研究证明其对老年性痴呆具有一定的治疗效果。以下为主要研究过程及结论。
1材料
1.1动物Wistar大鼠,购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场。雌雄各半共72只,体质量200-250g,随机分为6组。
1.2药物和试剂本发明实施例4所制颗粒剂,用前以水配成含生药2g/ml的水溶液。
2方法
2.1老年痴呆模型制备大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖50mg/(kg·d),连续6周,第7周侧脑室注射Aβ25-35。大鼠戊巴比妥钠(45mg/kg)麻醉后,固定于脑立体定位仪上,头顶部正中切口,暴露前囟,参照大鼠脑立体定位图谱,以前囱为参照点,在前囟点后1.3mm,旁开2mm将用5ml注射针头钻一小孔,垂直插入10μl微量注射器,深度40mm(达侧脑室),缓慢注射5μl聚集态的Aβ25-35,注射时间持续10min,留针5min,注射完毕后,局部撒复方新诺明药粉防止感染,缝合头皮,术后肌肉注射青霉素每只5万单位,连续4d。对照组颈背部皮下注射等量生理盐水,第7周侧脑室注射无菌生理盐水,操作同前。侧脑室注射后,对照组存活11只大鼠,侧脑室注射A β25-35后大鼠共存活58只。
2.2动物分组及给药侧脑室注射后,除对照组外,造模动物随机分为痴呆模型对照组(以下简称模型对照组)、尼莫地平片阳性对照组(以下简称尼莫地平组,15mg/kg)、本发明低剂量组(5g/kg)、本发明中剂量组(10g/kg)、本发明高剂量组(20g/kg)。术后第2天开始灌胃,按20ml/kg;灌胃量计算,1次/d,对照组和模型组给予等量蒸馏水,连续6周。
2.3八臂迷宫行为学测定灌胃第6周开始八臂迷宫训练,放射状八臂(四臂放食物)是一种经典的测定动物空间记忆的方法,它可以同时检测动物的参考记忆和工作记忆。迷宫中央区直径30cm,向四周以等角度和等长度延伸八条臂。训练前大鼠先在迷宫中适应1d,适应时3至4只大鼠同时置于迷宫中,自由活动和摄取食物10min。适应后进行每1次的训练。每次训练时,八臂中只有四臂放置了食物(分别为3、5、6和8臂),整个实验过程均维持此顺序。大鼠放在迷宫中央区,此时中央区四周用门关住15s将门打开,大鼠可选择进入任意一臂,以摄取食物。大鼠进入有食物的臂且摄取了食物为1次正确选择,否则为错误选择。记录参数为错误选择的次数。重新进入放食物臂称为工作记忆错误(working memory error;WME),进入不放食物臂称为参考记忆错误(reference memory error;RME)。连续5次训练,第6次正式检测。结果见表1。
2.4大鼠血清中(超氧化物歧化酶)SOD活力、(丙二醛)MDA含量检测:八臂迷宫检测后,停食12h,乌拉坦(0.8g/kg)腹腔注射麻醉,背位固定,沿腹正中线切开,下腔静脉取血,分离血清,按SOD试剂盒说明书测定血清SOD;按MDA试剂盒说明书测定血清MDA。结果见表2。
2.5大鼠血清及脑中乙酞胆碱酷酶(AchE)含量检测:依上法取血清,按试剂盒说明书测定血清乙酞胆碱酷酶(AchE),结果见表3。取完血后,处死大鼠,取脑组织,去除血膜、嗅球和小脑,用液氮放置5min之后置冰箱-20℃保存,第2天取左半球,按试剂盒说明书测定脑组织乙酞胆碱酷酶(AchE)活力,脑组织蛋白测定用双缩脲法,结果见表3。
2.6脑组织中去甲肾上腺素(NE)多巴胺(DA)5-HT检测:取脑右半球,称重,加入10倍体积的酸性正丁醇做脑组织匀浆,检测去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(AD),5-羟色胺5-(HT),结果见表4.
2.7统计分析 数据用表示,组间比较采用t检验,P<0.05有统计学意义。
3.结果
3.1行为学(八臂迷宫试验)测定
模型对照组大鼠参考记忆错误(RME)与空白对照组比较显著升高(P<0.05),工作记忆错误(WME)与空白对照组比较有升高趋势,但无显著性差异。本发明高剂量组可显著减少痴呆模型大鼠参考记忆错误(RME)(P<0.05),对工作记忆错误(WME)有降低趋势,但无显著性差异,见表1。结果表明本发明对老年痴呆模型大鼠学习记忆障碍有明显改善作用,能提高学习记忆力。
表1颗粒对AD大鼠学习记忆的影响
组 别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | RME(次) | WME(次) |
空白对照 | 11 | 3.26±1.14△ | 2.12±1.33 | |
模型对照 | 11 | 6.12±2.65 | 2.82±1.10 | |
尼莫地平 | 0.015 | 11 | 4.24±2.85 | 1.98±1.48 |
低剂量组 | 5.0 | 12 | 4.73±2.15 | 2.12±1.38 |
中剂量组 | 10.0 | 12 | 4.06±1.99 | 1.95±1.82 |
高剂量组 | 20.0 | 12 | 3.56±1.78△ | 1.85±1.26 |
注:与模型对照组比较△P<0.05
3.2对老年痴呆模型大鼠血清SOD、MDA的影响
模型对照组大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)与空白对照组比较有降低趋势,血清丙二醛(MDA)与空白对照组比较含量升高(P<0.05)。本发明低、中剂量组均有升高模型鼠血清SOD活力的趋势,高剂量组显著升高模型鼠血清SOD活力(P<0.01);低剂量组有降低模型鼠血清MDA含量的趋势,中、高剂量组显著降低模型鼠血清MDA含量(P<0.01),见表2。结果表明本发明能提高老年痴呆模型大鼠血清中超氧化物歧化酶活力,从而增强机体清除氧自由基的能力,减少丙二醛的生成。
表2颗粒对AD大鼠血清中MDA、SOD的影响
组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | SOD(U/ml) | MDA(nmol/ml) |
空白对照 | - | 11 | 155.36±10.67 | 10.16±2.63△ |
模型对照 | - | 11 | 149.72±11.24 | 12.58±2.55 |
尼莫地平 | 0.015 | 11 | 151.16±10.56 | 10.47±2.02 |
低剂量组 | 5.0 | 12 | 150.81±11.65 | 10.33±2.58 |
中剂量组 | 10.0 | 12 | 156.29±12.36 | 9.69±1.28△△ |
高剂量组 | 20.0 | 12 | 162.28±12.71△△▲▲ | 9.11±2.24△△ |
注:与模型对照组比较△P<0.05,△△P<0.01;与尼莫地平组比较▲▲P<0.013.3对老年痴呆模型大鼠血清及脑组织AchE的影响
模型对照组大鼠血清及脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)与空白对照组比较显著升高(P<0.05);本发明高剂量组能显著降低模型大鼠血清中AchE活力(P<0.05);中剂量组能显著降低模型大鼠脑组织中AchE活力(P<0.01),高剂量组能显著降低模型大鼠脑组织中AchE活力(P<0.001);高剂量组与尼莫地平组比较也有显著性差异(P<0.05),见表3。结果表明本发明能显著降低老年痴呆模型大鼠血清及脑组织中AchE活力。
表3本发明对血清及脑AchE的影响(n=8)
组别 | 剂量(g/kg) | 血清AchE(U/ml) | 脑AchE(U/mgprot) |
空白对照 | - | 61.2±15.3△ | 11.5±6.8△ |
模型对照 | - | 76.9±18.7 | 22.43±12.2 |
尼莫地平 | 0.015 | 62.3±18.4 | 17.6±13.93 |
低剂量组 | 5.0 | 69.25±22.35 | 15.5±12.16 |
中剂量组 | 10.0 | 62.37±22.17 | 9.4±6.21△△ |
高剂量组 | 20.0 | 53.15±19.62△ | 5.6±2.69△△△■ |
注:与模型对照比较△P<0.05,△△P<0.01,△△△P<0.001;与尼莫地平组比较■P<0.
3.4对老年痴呆模型大鼠脑组织NE、DA、5-HT的影响
模型对照组大鼠脑组织中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)与空白对照组比较均有降低趋势。本发明低剂量组能显著升高脑组织5-HT含量(P<0.05),对NE、DA略有升高趋势。尼莫地平可显著升高模型大鼠脑组织中DA、5-HT含量(P<0.01),对NE有升高趋势,见表4。结果表明本发明有提高老年性痴呆模型大鼠脑组织单胺类物质的作用。
表4颗粒对脑NE、DA、5-HT的影响(n=8)
组别 | 剂量(g/kg) | NE(μg/g) | DA(μg/g) | 5-HT (μg/g) |
空白对照 | - | 1.21±0.53 | 2.65±0.43 | 4.26±0.56 |
模型对照 | - | 1.12±0.32 | 2.31±0.19 | 4.11±0.38 |
尼莫地平 | 0.015 | 1.32±0.25 | 3.76±0.57△△ | 4.93±0.52△△ |
低剂量组 | 5.0 | 1.32±0.42 | 2.86±1.23 | 4.98±1.16△ |
中剂量组 | 10.0 | 1.16±0.25 | 2.42±0.45 | 4.44±1.05 |
高剂量组 | 20.0 | 1.13±0.26 | 2.58±1.17 | 4.52±1.36 |
注:与模型对照组比较△P<0.05;△△P<0.01
综上可见,本发明中药组合物可提高模型鼠血清中SOD活力,降低模型鼠血清中MDA含量,并对AD大鼠学习记忆障碍具有改善作用,说明其通过降低自由基水平防止组织过氧化损伤,减少自由基对神经元的损伤,从而达到治疗作用的。同时,本发明中药组合物还能显著降低老年痴呆大鼠脑组织及血清中乙酞胆碱脂酶(AchE)活性,提高乙酞胆碱水平,从而增强胆碱能神经系统功能,改善学习记忆状态。结果提示本发明中药组合物对老年性痴呆具有明显的治疗作用。进一步的研究结果证明,本发明以下实施例所制得的药物均能不同程度的实现上述效果。
具体实施方式
实施例1:
配方:鳖甲25g、牛脊髓25g、熟地18g、益智仁18g、远志18g、人参13g、山茱萸8g、石菖蒲8g。
制备:将上述原料药,煎煮两次,每次加水8倍量,制成汤剂服用。
实施例2:
配方:鳖甲35kg、牛脊髓35kg、熟地22kg、益智仁22kg、远志22kg、人参17kg、山茱萸12kg、石菖蒲12kg。
制备:取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加10倍量水煎2次煮,滤过,合并滤液,冷却至室温,离心分离,上清液浓缩成清膏,备用;取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉;将牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用;将上述清膏与细粉混合,加入制剂所需常规辅料,压制成片剂。
实施例3:
配方:鳖甲35kg、牛脊髓35kg、熟地18kg、益智仁18kg、远志18kg、人参17kg、山茱萸12kg、石菖蒲12kg。
制备:取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加8倍量水煎煮2次,滤过,合并滤液,冷却至室温,离心分离,上清液浓缩成相对密度1.20~1.25(80℃)的清膏,备用;取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉;将牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用;将上述清膏与细粉混合,加入制剂所需常规辅料,填装成胶囊剂。
实施例4:
配方:鳖甲30g、牛脊髓30g、熟地20g、益智仁20g、远志20g、人参15g、山茱萸10g、石菖蒲10g。
制备:取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加6倍量的水,煎煮三次,每次0.5小时,合并煎液,滤过,冷却至室温,离心分离,上清液浓缩至相对密度1.10~1.30(80℃)的清膏,备用;取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉,牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用:将上述清膏与细粉混合,加适量的糊精、乳糖和糖粉,以50%乙醇湿润制粒,60℃以下干燥,制成颗粒剂。
Claims (5)
1.一种用于治疗老年性痴呆的中药组合物,其特征在于该中药组合物的有效成分是由如下重量配比的原料药制成的:鳖甲25-35份、牛脊髓25-35份、熟地18-22份、益智仁18-22份、远志18-22份、人参13-17份、山茱萸8-12份、石菖蒲8-12份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于各原料药的组成为:鳖甲30份、牛脊髓30份、熟地20份、益智仁20份、远志20份、人参15份、山茱萸10份、石菖蒲10份。
3.权利要求1或2所述药物组合物的制备方法,其特征在于该方法包括以下步骤:
A、取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加水煎煮,滤过,滤液冷却至室温,离心分离,上清液浓缩成清膏,备用;
B、取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉;将牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用;
C、将上述清膏与细粉混合,加入制剂所需常规辅料,制成所需制剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于该中药组合物颗粒剂的制备方法包括以下步骤:
A、取熟地、益智仁、远志和石菖蒲加6倍量的水,煎煮三次,每次0.5小时,合并煎液,滤过,冷却至室温,离心分离,上清液浓缩至80℃时相对密度1.10~1.30的清膏,备用;
B、取山茱萸、人参、鳖甲粉碎成粗粉,牛脊髓置沸水中略煮,除去外皮,与上述粗粉拌匀,干燥,粉碎成细粉,备用;
C、将上述清膏与细粉混合,加适量的糊精、乳糖和糖粉,以50%乙醇湿润制粒,60℃以下干燥,制成颗粒剂。
5.权利要求1或2所述中药组合物在制备用于治疗老年性痴呆的药物中的应用。
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