CN102524943A - 一种以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法。以大理烟叶、玉溪烟叶或石林烟叶的产香细菌和烟梗作为原料，经一级发酵、二级发酵和提取精制后制成。该方法采用双菌种复合发酵，第一株菌作用于烟梗，消耗木质素和纤维素，第二株菌作用于提取液、代谢产物，产生优雅香气。在保持原料特征香气的同时增加了烟草本香，提升了丰富性。发酵之后产品中苯酚等有害成分明显降低，胺、酚等物质转化成了酸和醇等主要香气成分物质，酯类和内酯类物质明显增多。产品形态为浸膏，可溶性好，应用方便，可直接用于卷烟加香加料。原料为烟草废弃物，节能环保，原料成本较低，工艺操作简便，规范可控，使用设备简单，工艺易行，便于工业化和推广应用。
Description
技术领域
本发明属于卷烟加工技术领域，涉及烟用香料的制备方法，具体是涉及一种以烟梗为原料利用微生物双菌种复合发酵技术生产特色烟用香料的方法。
背景技术
在烟草制品中，烟草的香气和吸味是至关重要的，国家烟草专卖局在“十一五”中国卷烟科技发展纲要中明确指出，要“攻克影响烟叶香气质、香气量的关键技术”，缩小与国外烟叶质量差距，以提高国内外市场竞争力。因此向消费者提供香气和吸味满意的卷烟制品是烟草行业产品设计者追求的目标。
目前，我国烟草中添加的烟用香料大多是采用多种天然提取物单体和合成单体混合调配而成，这样所制得的烟用香料存在一定问题，在配制时单体种类混合较多后会带来不协调，单体种类混合较少又存在香气单调、对烟草改善性不足，容易被模仿，而且改善卷烟抽吸品质效果不明显等缺点。
烟草是茄科烟草属植物，烟梗即是烟叶之粗硬叶脉，是烟草工业的副产物，约占叶重20％～30％。作为烟草生产大国，我国每年约有数十万吨烟梗废弃物被弃置浪费，既造成环境污染，同时也是对自然资源的浪费。经鉴定，烟梗中含有170多种化合物，其中有大量的致香成分和前体物质，可以利用微生物技术，促进前体物质转化和致香成分的生成。烟梗作为一种潜在的烟用香料资源，极具开发利用价值。但目前烟梗主要的利用形式是提取烟碱、茄呢醇、制烟草薄片和制肥料等等。以烟梗为原料制备烟用香料，特别是利用微生物发酵技术双菌种复合发酵生产特色烟用香料的方法在现有技术中尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法，将该香料应用于卷烟加香加料中，以改善卷烟吸味及提升香气品质。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现的。
一种以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法，包括以下步骤：
(1)一级发酵：
①种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的烟叶产香细菌，所述烟叶为大理烟叶、玉溪烟叶或石林烟叶；按细菌∶种子培养液＝1∶100～1000的重量比接种于一级种子培养液，所述的一级种子培养液为LB液体培养基，并于110℃～125℃条件下灭菌20～40min；然后置于摇床培养12～36h，培养条件30℃～40℃、150r/min，得到一级种子液；
②烟梗处理：将烟梗原料粉碎，按烟梗∶溶剂＝1∶10～20的重量比加入溶剂，然后在110℃～125℃条件下包装灭菌20～40min，得到无菌烟梗提取液；所述的溶剂为水、甘油、乙醇、丙二醇或丙三醇；
③发酵：将培养好的一级种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液的重量比＝1∶25～100，并将一级种子液和烟梗提取液混合均匀；将接种好的烟梗提取液置于摇床，在30℃～40℃，150r/min条件下封闭发酵12～36h，得到一级发酵液；
(2)二级发酵：
①种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的烟叶产香细菌，所述烟叶为大理烟叶、玉溪烟叶或石林烟叶；按细菌∶种子培养液＝1∶100～1000的重量比接种于二级种子培养液，所述的二级种子培养液为LB液体培养基，并于110℃～125℃条件下灭菌20～40min；然后置于摇床培养12～36h，培养条件30℃～40℃、150r/min，得到二级种子液；
②发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液的重量比＝1∶25～100，并将二级种子液和一级发酵液混合均匀；将接种好的一级发酵液置于摇床，在30℃～40℃，150r/min条件下封闭发酵12～36h，得到二级发酵液；
(3)提取精制：
①浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏；
②制样：按膏体∶溶剂＝1∶1～5的重量比加入溶剂，所述的溶剂为水、甘油、乙醇、丙二醇或丙三醇；混合均匀后得到烟梗发酵膏，即为所需的特色烟用香料。
所述的烟叶细菌其菌种为菌曲或菌液形式。
所述的烟梗优选为石林或福建的烟梗。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
1、采用双菌种复合发酵，第一株菌作用于烟梗，消耗木质素和纤维素，第二株菌作用于提取液、代谢产物，产生优雅香气。在保持原料特征香气的同时增加了烟草本香，提升了丰富性。发酵之后产品中苯酚等有害成分明显降低，胺、酚等物质转化成了酸和醇等主要香气成分物质，酯类和内酯类物质明显增多。与烟香协调性好，还具有降低刺激，掩盖杂气，改善余味的作用，该方法制取的香料对卷烟的香气和吸味品质改善效果明显，使烟草本香突出，饱满度和丰富性提升。
2、产品形态为浸膏，可溶性好，应用方便，可直接用于卷烟加香加料。
3、原料为烟草废弃物，节能环保，原料成本较低，工艺操作简便，规范可控，使用设备简单，工艺易行，便于工业化和推广应用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，但实施例并不是对本发明技术方案的限定。
实施例1：
一级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的石林烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶100(W/W)接种于一级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养15h，得到一级种子液。
2、原料处理：选取石林烟梗原料粉碎，加入按石林烟梗原料∶水＝1∶10(W/W)的溶剂，包装灭菌(121℃，30min)得到无菌烟梗提取液。
3、发酵：将培养好的一级种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液＝1∶25(W/W)，使一级种子液和烟梗提取液充分混合均匀。将接种好的烟梗提取液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵12h，得到一级发酵液。
二级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的石林烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶100(W/W)接种于二级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养15h得到二级种子液。
2、发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液＝1∶25(W/W)，使二级种子液和一级发酵液充分混合均匀。将接种好的一级发酵液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵12h，得到二级发酵液。
提取精制步骤——
1、浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏。
2、制样：加入丙二醇，膏体∶丙二醇＝1∶1(W/W)，即得到烟梗发酵膏。
实施例2：
一级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的大理烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶100(W/W)接种于一级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养20h，得到一级种子液。
2、原料处理：选取石林烟梗原料粉碎，加入按石林烟梗原料∶水＝1∶20(W/W)的溶剂，包装灭菌(121℃，30min)得到无菌烟梗提取液。
3、发酵：将培养好的一种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液＝1∶50(W/W)，使一级种子液和烟梗提取液充分混合均匀。将接种好的烟梗提取液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵24h，得到一级发酵液。
二级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的大理烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶100(W/W)接种于二级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养20h，得到二级种子液。
2、发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液＝1∶50(W/W)，使二级种子液和一级发酵液充分混合均匀。将接种好的一级发酵液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵24h，得到二级发酵液。
提取精制步骤——
1、浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏。
2、制样：加入甘油，膏体∶甘油＝1∶5(W/W)，即得到烟梗发酵膏。
实施例3：
一级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的玉溪烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶1000(W/W)接种于一级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养24h，得到一级种子液。
2、原料处理：选取石林烟梗原料粉碎，加入按石林烟梗原料∶水＝1∶，15(W/W)的溶剂，包装灭菌(121℃，30min)得到无菌烟梗提取液。
3、发酵：将培养好的一种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液＝1∶100(W/W)，使一级种子液和烟梗提取液充分混合均匀。将接种好的烟梗提取液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵36h，得到一级发酵液。
二级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的玉溪烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶1000(W/W)接种于二级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养24h，得到二级种子液。
2、发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液＝1∶100(W/W)，使二级种子液和一级发酵液充分混合均匀。将接种好的一级发酵液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵36h，得到二级发酵液。
提取精制步骤——
1、浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏。
2、制样：加入丙二醇，膏体∶丙三醇＝1∶2(W/W)，即得到烟梗发酵膏。
实施例4：
一级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的石林烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶500(W/W)接种于一级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养15h，得到一级种子液。
2、原料处理：选取福建烟梗原料粉碎，加入按福建烟梗原料∶水＝1∶10(W/W)的溶剂，包装灭菌(121℃，30min)得到无菌烟梗提取液。
3、发酵：将培养好的一种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液＝1∶50(W/W)，使一级种子液和烟梗提取液充分混合均匀。将接种好的烟梗提取液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵12h，得到一级发酵液。
二级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的石林烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶500(W/W)接种于二级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养15h，得到二级种子液。
2、发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液＝1∶50(W/W)，使二级种子液和一级发酵液充分混合均匀。将接种好的一级发酵液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵12h，得到二级发酵液。
提取精制步骤——
1、浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏。
2、制样：加入丙二醇，膏体∶甘油＝1∶3(W/W)，即得到烟梗发酵膏。
实施例5：
一级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的大理烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶200(W/W)接种于一级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养20h，得到一级种子液。
2、原料处理：选取福建烟梗原料粉碎，加入按福建烟梗原料∶水＝1∶20(W/W)的溶剂，包装灭菌(121℃，30min)得到无菌烟梗提取液。
3、发酵：将培养好的一种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液＝1∶25(W/W)，使一级种子液和烟梗提取液充分混合均匀。将接种好的烟梗提取液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵24h，得到一级发酵液。
二级发酵步骤——
1、种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的大理烟叶细菌，按细菌∶种子培养液＝1∶200(W/W)接种于二级种子培养液(LB液体培养基，121℃灭菌30min)，置于(30℃～40℃、150r/min)摇床培养20h，得到二级种子液。
2、发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液＝1∶25(W/W)，使二级种子液和一级发酵液充分混合均匀。将接种好的一级发酵液置于摇床(30℃～40℃，150r/min)封闭发酵24h，得到二级发酵液。
提取精制步骤——
1、浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏。
2、制样：加入丙二醇，膏体∶丙二醇＝1∶1(W/W)，即得到烟梗发酵膏。
产品检测指标
评吸结果
结论：
对其发酵产物进行分析，发现发酵前后，酮类、醛类、酸类物质含量明显上升，原料中含的苯等一些影响卷烟抽吸品质的成分在发酵过后含量下降或者消除，部分致香成分物质含量提升明显。通过对比评吸，双菌种复合发酵技术制备得到的烟梗发酵膏，具有增加烟草本香、使烟气细腻、饱满的作用。
Claims (3)
1.一种以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法，包括以下步骤：
(1)一级发酵：
①种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的烟叶产香细菌，所述烟叶为大理烟叶、玉溪烟叶或石林烟叶；按细菌∶种子培养液＝1∶100～1000的重量比接种于一级种子培养液，所述的一级种子培养液为LB液体培养基，并于110℃～125℃条件下灭菌20～40min；然后置于摇床培养12～36hrs，培养条件30℃～40℃、150r/min，得到一级种子液；
②烟梗处理：将烟梗原料粉碎，按烟梗∶溶剂＝1∶10～20的重量比加入溶剂，然后在110℃～125℃条件下包装灭菌20～40min，得到无菌烟梗提取液；所述的溶剂为水、甘油、乙醇、丙二醇或丙三醇；
③发酵：将培养好的一级种子液接种于无菌烟梗提取液中，接种比例为一级种子液∶无菌烟梗提取液的重量比＝1∶25～100，并将一级种子液和烟梗提取液混合均匀；将接种好的烟梗提取液置于摇床，在30℃～40℃，150r/min条件下封闭发酵12～36h，得到一级发酵液；
(2)二级发酵：
①种子液配制：取通过常规的微生物分离纯化技术手段保种得到的烟叶产香细菌，所述烟叶为大理烟叶、玉溪烟叶或石林烟叶；按细菌∶种子培养液＝1∶100～1000的重量比接种于二级种子培养液，所述的二级种子培养液为LB液体培养基，并于110℃～125℃条件下灭菌20～40min；然后置于摇床培养12～36hrs，培养条件30℃～40℃、150r/min，得到二级种子液；
②发酵：将培养好的二级种子液接种于一级发酵液中，接种比例为二级种子液∶一级发酵液的重量比＝1∶25～100，并将二级种子液和一级发酵液混合均匀；将接种好的一级发酵液置于摇床，在30℃～40℃，150r/min条件下封闭发酵12～36hrs，得到二级发酵液；
(3)提取精制：
①浓缩：取二级发酵液，减压浓缩成浸膏；
②制样：按膏体∶溶剂＝1∶1～5的重量比加入溶剂，所述的溶剂为水、甘油、乙醇、丙二醇或丙三醇；混合均匀后得到烟梗发酵膏，即为所需的特色烟用香料。
2.根据权利要求1所述的以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法，其特征在于：所述的烟叶细菌其菌种为菌曲或菌液形式。
3.根据权利要求1所述的以烟梗为原料制备特色烟用香料的方法，其特征在于：所述的烟梗优选为石林或福建的烟梗。
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120704 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |