CN102520146A - 去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法 - Google Patents

Abstract

去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，取生长一致的2周龄多花黑麦草36—48株，在温度为18—25℃，每天光照6—8小时的条件下生长8周后，分别检测得到去叶前多花黑麦草根部的平均含碳量、去叶前多花黑麦草茬平均含碳量和后断根避光培养，检测每次去叶后多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的总含碳量，并计算再生多花黑麦草根再生消耗碳水化合物的量。本发明提供的去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，其测定方法简单，操作简单，提高生产效率和工作效益。

Description

去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法

技术领域

本发明涉及一种牧草技术领域的测量方法，具体的说是一种去叶多花黑麦草根系再生消耗体内碳水化合物的测定方法。

背景技术

多花黑麦草被草食动物采食或人为剪割后，在受到牧食或剪割的部位能长出新的叶片，或者受到部分伤害的叶片还能继续生长，多花黑麦草的这种“再生性”对于维持自身生存、抵御草食动物伤害以及提高产草量都具有很重要的意义。

多花黑麦草再生所要面对的一个关键问题是：去叶后再生所需碳水化合物的来源问题。因为多花黑麦草被牧食或剪割后，叶片需要碳、氮、磷、水分等许多物质来维持生长。而去除水分的多花黑麦草叶片中，碳元素的含量大约为34—38%，氮元素的含量大约仅为2%—3%，其它元素的含量则更少。所以碳元素是去叶多花黑麦草叶片再生所需的最关键物质。

碳的来源主要有两种途径：一种是通过叶片的光合作用固定空气中的二氧化碳；另一种是利用其体内贮存的碳水化合物，例如葡萄糖、蔗糖、果聚糖以及淀粉等。多花黑麦草被牧食或被剪割后，由于其叶片大部分被牧食或被剪割，可以进行光合作用的绿色面积非常有限，相应地光合作用所合成的碳水化合物的量也非常有限。另外，牧食或剪割后对多花黑麦草所造成叶片创伤修复，也同样需要消耗大量的碳水化合物。因为创伤修复是一个能量和物质消耗的过程，而碳水化合物不但是碳元素的最直接来源，还是能量的最直接载体。总之，去叶前多花黑麦草体内贮存的碳水化合物，会对其再生产生非常关键的作用。

目前对多花黑麦草利用碳水化合物的研究，仅限于从质的方面明确其会对再生产生有益的影响，或利用同位素技术验证再生所能利用的碳水化合物有部分来自于去叶前所贮存的碳水化合物。多花黑麦草叶片被牧食或被剪割后的再生过程中，不但叶片的再生需要消耗碳水化合物，其根系的生长也同样需要消耗碳水化合物，搞清楚多花黑麦草去叶前贮存的碳水化合物到底会有多少直接参与到其根系生长的过程中，有助于搞清楚多花黑麦草体内贮存的碳水化合物的分配模式，这对于研究多花黑麦草的再生具有重要的意义，截至目前，去叶多花黑麦草根系再生过程中消耗其体内所贮存碳水化合物的测定方法还未见有相关报道。

发明内容

本发明针对上述问题的不足，提供去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，其测量方法简单，利用断根和遮光来测定多花黑麦草根系再生过程中其体内所贮存碳水化合物的消耗量。

本发明为解决上述问题所采用的技术方案是：去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，其测量方法为：

步骤一、花盆处理与基质的配制

1) 选取9个相同的花盆，花盆的盆高为30cm、盆口直径为28cm、盆底直径为25cm，随机选取6个花盆，沿花盆盆高距盆口1/4—3/4的距离进行横切，形成盆筒和盆底，然后通过连接环将盆筒和盆底恢复至原有的花盆形状，盆筒和盆底的连接处形成一个横切面，将含有横切面的花盆分为2组，每组3个，即试验组a和试验组b组，剩余的花盆换盆时用作底盆，即试验组c，备用；

2) 按重量分数比取3份的蛭石和1份的草碳土，混合均匀，形成基质，将基质分别装入试验组a、试验组b和试验组c的花盆中，试验组a和试验组b中基质的装入量比花盆的盆口低3cm，在试验组c中基质的装入量与花盆盆口持平时止，备用；

步骤二、选取生长一致的3周龄多花黑麦草36—48株，以每盆6—8株植入试验组a和试验组b的花盆中，在温度为18—25℃，每天光照6—8小时条件下，培养8周后，剪去多花黑麦草的叶片，所有多花黑麦草均留相同的茬高，茬高为1cm，备用；

步骤三、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组a花盆上的连接环去除，沿试验组a花盆的横切面，将试验组a中多花黑麦草的根系平整断开，丢弃试验组a中的盆底，用水将所有试验组a盆筒中的多花黑麦草根部的基质洗净，将生长在试验组a每个花盆中的多花黑麦草的根部和茬分开，分别得到多花黑麦草根部和多花黑麦草茬，将所有得到的多花黑麦草根部和多花黑麦草茬分别送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物，检测每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物中的生物量和含碳量，后计算得到去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量和多花黑麦草茬中的平均碳贮量，备用；

步骤四、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组b花盆上的连接环去除，沿试验组b花盆的横切面，将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，留下所有试验组b中的盆筒，保持所有试验组b盆筒中的基质不松动，将所有试验组b盆筒的底部放在试验组c花盆的基质上，备用；

步骤五、将步骤四中位于试验组c花盆上方的试验组b中的多花黑麦草进行避光培养，每隔6天在步骤二所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，直至试验组b中的每一株多花黑麦草停止生长时止，沿试验组b花盆的盆筒底部横向将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，将留在试验组c花盆中的新生多花黑麦草根部洗净，送入75℃的烘干箱内，烘干，检测烘干物的生物量和含碳量，得到避光培养下每盆去叶多花黑麦草新生根的总碳贮量，最后得到避光培养下去叶多花黑麦草新生根的平均总碳贮量，备用；

步骤六、利用去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量C_r、去叶前多花黑麦草茬中的平均碳贮量C_s和避光培养下去叶后多花黑麦草新生根的平均总碳贮量C_n，根据公式RI=                                                ，计算多花黑麦草根再生利用碳水化合物的相对最大量RI。

有益效果

a、本发明的测量方法简单，易于操作，便于广泛应用，并且实用性强。

b、本发明测量再生黑麦草根再生利用碳水化合物的方法，在检测碳含量时，所需仪器简单，成本低廉，提高了经济效益。

具体实施方式

去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，其测量方法为：

1) 选取9个相同的花盆，花盆的盆高为30cm、盆口直径为28cm、盆底直径为25cm，随机选取6个花盆，沿花盆盆高距盆口1/4—3/4的距离进行横切，形成盆筒和盆底，然后通过连接环将盆筒和盆底恢复至原有的花盆形状，盆筒和盆底的连接处形成一个横切面，将含有横切面的花盆分为2组，每组3个，即试验组a和试验组b组，剩余的花盆换盆时用作底盆，即试验组c，备用；

2) 按重量分数比取3份的蛭石和1份的草碳土，混合均匀，形成基质，将基质分别装入试验组a、试验组b和试验组c的花盆中，试验组a和试验组b中基质的装入量比花盆的盆口低3cm，在试验组c中基质的装入量与花盆盆口持平时止，备用；

步骤二、选取生长一致的3周龄多花黑麦草36—48株，以每盆6—8株植入试验组a和试验组b的花盆中，在温度为18—25℃，每天光照6—8小时条件下，培养8周后，剪去多花黑麦草的叶片，所有多花黑麦草均留相同的茬高，茬高为1cm，备用；

步骤三、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组a花盆上的连接环去除，沿试验组a花盆的横切面，将试验组a中多花黑麦草的根系平整断开，丢弃试验组a中的盆底，用水将所有试验组a盆筒中的多花黑麦草根部的基质洗净，将生长在试验组a每个花盆中的多花黑麦草的根部和茬分开，分别得到多花黑麦草根部和多花黑麦草茬，将所有得到的多花黑麦草根部和多花黑麦草茬分别送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物，检测每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物中的生物量和含碳量，后计算得到去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量和多花黑麦草茬中的平均碳贮量，备用；

步骤四、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组b花盆上的连接环去除，沿试验组b花盆的横切面，将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，留下所有试验组b中的盆筒，保持所有试验组b盆筒中的基质不松动，将所有试验组b盆筒的底部放在试验组c花盆的基质上，备用；

步骤五、将步骤四中位于试验组c花盆上方的试验组b中的多花黑麦草进行避光培养，每隔6天在步骤二所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，直至试验组b中的每一株多花黑麦草停止生长时止，沿试验组b花盆的盆筒底部横向将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，将留在试验组c花盆中的新生多花黑麦草根部洗净，送入75℃的烘干箱内，烘干，检测烘干物的生物量和含碳量，得到避光培养下每盆去叶多花黑麦草新生根的总碳贮量，最后得到避光培养下去叶多花黑麦草新生根的平均总碳贮量，备用；

步骤六、利用去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量C_r、去叶前多花黑麦草茬中的平均碳贮量C_s和避光培养下去叶后多花黑麦草新生根的平均总碳贮量C_n，根据公式RI=

，计算多花黑麦草根再生利用碳水化合物的相对最大量RI。

实施例1

去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，其测量方法为：

1) 选取9个相同的花盆，花盆的盆高为30cm、盆口直径为28cm、盆底直径为25cm，随机选取6个花盆，沿花盆盆高距盆口1/4的距离进行横切，形成盆筒和盆底，然后通过连接环将盆筒和盆底恢复至原有的花盆形状，盆筒和盆底的连接处形成一个横切面，将含有横切面的花盆分为2组，每组3个，即试验组a和试验组b组，剩余的花盆换盆时用作底盆，即试验组c，备用；

2) 按重量分数比取3份的蛭石和1份的草碳土，混合均匀，形成基质，将基质分别装入试验组a、试验组b和试验组c的花盆中，试验组a和试验组b中基质的装入量比花盆的盆口低3cm，在试验组c中基质的装入量与花盆盆口持平时止，备用；

步骤二、选取生长一致的3周龄多花黑麦草36株，以每盆6株植入试验组a和试验组b的花盆中，在温度为18℃，每天光照6小时条件下，培养8周后，剪去多花黑麦草的叶片，所有多花黑麦草均留相同的茬高，茬高为1cm，备用；

步骤三、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组a花盆上的连接环去除，沿试验组a花盆的横切面，将试验组a中多花黑麦草的根系平整断开，丢弃试验组a中的盆底，用水将所有试验组a盆筒中的多花黑麦草根部的基质洗净，将生长在试验组a每个花盆中的多花黑麦草的根部和茬分开，分别得到多花黑麦草根部和多花黑麦草茬，将所有得到的多花黑麦草根部和多花黑麦草茬分别送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物，检测每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物中的生物量和含碳量，后计算得到去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量和多花黑麦草茬中的平均碳贮量，备用；

步骤四、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组b花盆上的连接环去除，沿试验组b花盆的横切面，将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，留下所有试验组b中的盆筒，保持所有试验组b盆筒中的基质不松动，将所有试验组b盆筒的底部放在试验组c花盆的基质上，备用；

步骤五、将步骤四中位于试验组c花盆上方的试验组b中的多花黑麦草进行避光培养，每隔6天在步骤二所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，剪过3次叶片后，试验组b中的每一株多花黑麦草即停止生长，后沿试验组b花盆的盆筒底部横向将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，将留在试验组c花盆中的新生多花黑麦草根部洗净，送入75℃的烘干箱内，烘干，检测烘干物的生物量和含碳量，得到避光培养下每盆去叶多花黑麦草新生根的总碳贮量，最后得到避光培养下去叶多花黑麦草新生根的平均总碳贮量，备用；

步骤六、利用去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量C_r、去叶前多花黑麦草茬中的平均碳贮量C_s和避光培养下去叶后多花黑麦草新生根的平均总碳贮量C_n，根据公式RI=

，计算多花黑麦草根再生利用碳水化合物的相对最大量RI；

结果表明，留有茬高为1cm的多花黑麦草，其RI为34.17%，即断根后留大约1/4根系的情况下，去叶多花黑麦草叶片根系再生所消耗去叶前其体内贮存碳水化合物的相对最大量为34.17%。

实施例2

测量多花黑麦草叶再生利用贮存碳水化合物的方法，其测量方法为：

1) 选取9个相同的花盆，花盆的盆高为30cm、盆口直径为28cm、盆底直径为25cm，随机选取6个花盆，沿花盆盆高距盆口1/2的距离进行横切，形成盆筒和盆底，然后通过连接环将盆筒和盆底恢复至原有的花盆形状，盆筒和盆底的连接处形成一个横切面，将含有横切面的花盆分为2组，每组3个，即试验组a和试验组b组，剩余的花盆换盆时用作底盆，即试验组c，备用；

2) 按重量分数比取3份的蛭石和1份的草碳土，混合均匀，形成基质，将基质分别装入试验组a、试验组b和试验组c的花盆中，试验组a和试验组b中基质的装入量比花盆的盆口低3cm，在试验组c中基质的装入量与花盆盆口持平时止，备用；

步骤二、选取生长一致的3周龄多花黑麦草42株，以每盆7株植入试验组a和试验组b的花盆中，在温度为21℃，每天光照7小时条件下，培养8周后，剪去多花黑麦草的叶片，所有多花黑麦草均留相同的茬高，茬高为1cm，备用；

步骤三、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组a花盆上的连接环去除，沿试验组a花盆的横切面，将试验组a中多花黑麦草的根系平整断开，丢弃试验组a中的盆底，用水将所有试验组a盆筒中的多花黑麦草根部的基质洗净，将生长在试验组a每个花盆中的多花黑麦草的根部和茬分开，分别得到多花黑麦草根部和多花黑麦草茬，将所有得到的多花黑麦草根部和多花黑麦草茬分别送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物，检测每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物中的生物量和含碳量，后计算得到去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量和多花黑麦草茬中的平均碳贮量，备用；

步骤四、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组b花盆上的连接环去除，沿试验组b花盆的横切面，将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，留下所有试验组b中的盆筒，保持所有试验组b盆筒中的基质不松动，将所有试验组b盆筒的底部放在试验组c花盆的基质上，备用；

步骤五、将步骤四中位于试验组c花盆上方的试验组b中的多花黑麦草进行避光培养，每隔6天在步骤二所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，剪过3次叶片后，试验组b中的每一株多花黑麦草即停止生长，后沿试验组b花盆的盆筒底部横向将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，将留在试验组c花盆中的新生多花黑麦草根部洗净，送入75℃的烘干箱内，烘干，检测烘干物的生物量和含碳量，得到避光培养下每盆去叶多花黑麦草新生根的总碳贮量，最后得到避光培养下去叶多花黑麦草新生根的平均总碳贮量，备用；

步骤六、利用去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量C_r、去叶前多花黑麦草茬中的平均碳贮量C_s和避光培养下去叶后多花黑麦草新生根的平均总碳贮量C_n，根据公式RI=

，计算多花黑麦草根再生利用碳水化合物的相对最大量RI；

结果表明，留有茬高为1cm的多花黑麦草，其RI为29.86%，即断根后留大约1/2根系的情况下，去叶多花黑麦草叶片根系再生所消耗去叶前其体内贮存碳水化合物的相对最大量为29.86%。

实施例3

测量多花黑麦草叶再生利用贮存碳水化合物的方法，其测量方法为：

1) 选取9个相同的花盆，花盆的盆高为30cm、盆口直径为28cm、盆底直径为25cm，随机选取6个花盆，沿花盆盆高距盆口3/4的距离进行横切，形成盆筒和盆底，然后通过连接环将盆筒和盆底恢复至原有的花盆形状，盆筒和盆底的连接处形成一个横切面，将含有横切面的花盆分为2组，每组3个，即试验组a和试验组b组，剩余的花盆换盆时用作底盆，即试验组c，备用；

2) 按重量分数比取3份的蛭石和1份的草碳土，混合均匀，形成基质，将基质分别装入试验组a、试验组b和试验组c的花盆中，试验组a和试验组b中基质的装入量比花盆的盆口低3cm，在试验组c中基质的装入量与花盆盆口持平时止，备用；

步骤二、选取生长一致的3周龄多花黑麦草48株，以每盆8株植入试验组a和试验组b的花盆中，在温度为25℃，每天光照8小时条件下，培养8周后，剪去多花黑麦草的叶片，所有多花黑麦草均留相同的茬高，茬高为1cm，备用；

步骤三、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组a花盆上的连接环去除，沿试验组a花盆的横切面，将试验组a中多花黑麦草的根系平整断开，丢弃试验组a中的盆底，用水将所有试验组a盆筒中的多花黑麦草根部的基质洗净，将生长在试验组a每个花盆中的多花黑麦草的根部和茬分开，分别得到多花黑麦草根部和多花黑麦草茬，将所有得到的多花黑麦草根部和多花黑麦草茬分别送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物，检测每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物中的生物量和含碳量，后计算得到去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量和多花黑麦草茬中的平均碳贮量，备用；

步骤四、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组b花盆上的连接环去除，沿试验组b花盆的横切面，将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，留下所有试验组b中的盆筒，保持所有试验组b盆筒中的基质不松动，将所有试验组b盆筒的底部放在试验组c花盆的基质上，备用；

步骤五、将步骤四中位于试验组c花盆上方的试验组b中的多花黑麦草进行避光培养，每隔6天在步骤二所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，剪过3次叶片后，试验组b中的每一株多花黑麦草即停止生长，后沿试验组b花盆的盆筒底部横向将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，将留在试验组c花盆中的新生多花黑麦草根部洗净，送入75℃的烘干箱内，烘干，检测烘干物的生物量和含碳量，得到避光培养下每盆去叶多花黑麦草新生根的总碳贮量，最后得到避光培养下去叶多花黑麦草新生根的平均总碳贮量，备用；

步骤六、利用去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量C_r、去叶前多花黑麦草茬中的平均碳贮量C_s和避光培养下去叶后多花黑麦草新生根的平均总碳贮量C_n，根据公式RI=

，计算多花黑麦草根再生利用碳水化合物的相对最大量RI；

结果表明，留有茬高为1cm的多花黑麦草，其RI为26.67%，即断根后留大约3/4根系的情况下，去叶多花黑麦草叶片根系再生所消耗去叶前其体内贮存碳水化合物的相对最大量为26.67%；

在上述技术方案中，所用的混合基质较轻便于搬运，经水洗易与根分离，同时具有良好的保水性和透气性，其营养丰富，有利于多花黑麦草根系的发育；

在上述技术方案中，多花黑麦草体内贮存的碳水化合物种类非常多，有葡萄糖、蔗糖、果聚糖以及淀粉等等，这些碳水化合物都含有碳元素，通过测定碳元素，可以反映碳水化合物的相对量；

在上述技术方案中，避光的目的是为了使去叶多花黑麦草根再生利用其体内贮存的碳水化合物，因为避光以后光合作用完全停止，其根再生长只能利用其体内贮存的碳水化合物；

在上述技术方案中，断根的主要目的是为了刺激根系快速生长，换盆的目的是为了使大小不同的黑麦草根系向下生长，因为11周龄的多花黑麦草的根系已经充满了全盆，此时在这些花盆的下部置有未有任何根系的基质，有利于根系的下扎；

在上述技术方案中，避光条件下培养，多花黑麦草的根再生只能利用其体内贮存的碳水化合物，在避光条件下多次去叶让其停止生长，就可以实现对其体内贮存碳水化合物的最大潜能的利用，通过去叶后叶片再生过程中根系生长所利用的去叶前贮存的碳，占与去叶前贮存碳的比值，就可以反映出到底有多大比例的贮存的碳水化合物被用于根系的生长，这样就得到了多花黑麦草再生过程中根系生长所利用的其体内贮存的碳水化合物的相对最大量。

Claims (1)

1.去叶多花黑麦草根再生消耗体内碳水化合物的测定方法，其特征在于：其测定方法为：

步骤一、花盆处理与基质的配制

1）选取9个相同的花盆，花盆的盆高为30cm、盆口直径为28cm、盆底直径为25cm，随机选取6个花盆，沿花盆盆高距盆口1/4—3/4的距离进行横切，形成盆筒和盆底，然后通过连接环将盆筒和盆底恢复至原有的花盆形状，盆筒和盆底的连接处形成一个横切面，将含有横切面的花盆分为2组，每组3个，即试验组a和试验组b组，剩余的花盆换盆时用作底盆，即试验组c，备用；

2）按重量分数比取3份的蛭石和1份的草碳土，混合均匀，形成基质，将基质分别装入试验组a、试验组b和试验组c的花盆中，试验组a和试验组b中基质的装入量比花盆的盆口低3cm，在试验组c中基质的装入量与花盆盆口持平时止，备用；

步骤二、选取生长一致的3周龄多花黑麦草36—48株，以每盆6—8株植入试验组a和试验组b的花盆中，在温度为18—25℃，每天光照6—8小时条件下，培养8周后，剪去多花黑麦草的叶片，所有多花黑麦草均留相同的茬高，茬高为1cm，备用；

步骤三、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组a花盆上的连接环去除，沿试验组a花盆的横切面，将试验组a中多花黑麦草的根系平整断开，丢弃试验组a中的盆底，用水将所有试验组a盆筒中的多花黑麦草根部的基质洗净，将生长在试验组a每个花盆中的多花黑麦草的根部和茬分开，分别得到多花黑麦草根部和多花黑麦草茬，将所有得到的多花黑麦草根部和多花黑麦草茬分别送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物，检测每盆多花黑麦草根烘干物和每盆多花黑麦草茬烘干物中的生物量和含碳量，后计算得到去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量和多花黑麦草茬中的平均碳贮量，备用；

步骤四、将步骤二中所有留有茬高为1cm的试验组b花盆上的连接环去除，沿试验组b花盆的横切面，将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，留下所有试验组b中的盆筒，保持所有试验组b盆筒中的基质不松动，将所有试验组b盆筒的底部放在试验组c花盆的基质上，备用；

步骤五、将步骤四中位于试验组c花盆上方的试验组b中的多花黑麦草进行避光培养，每隔6天在步骤二所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，直至试验组b中的每一株多花黑麦草停止生长时止，沿试验组b花盆的盆筒底部横向将试验组b中多花黑麦草的根系平整断开，将留在试验组c花盆中的新生多花黑麦草根部洗净，送入75℃的烘干箱内，烘干，检测烘干物的生物量和含碳量，得到避光培养下每盆去叶多花黑麦草新生根的总碳贮量，最后得到避光培养下去叶多花黑麦草新生根的平均总碳贮量，备用；

步骤六、利用去叶前多花黑麦草根部的平均碳贮量C_r、去叶前多花黑麦草茬中的平均碳贮量C_s和避光培养下去叶后多花黑麦草新生根的平均总碳贮量C_n，根据公式RI=                                               

，计算多花黑麦草根再生利用碳水化合物的相对最大量RI。