CN102517278A - 一种植物rna提取样品远距离运输的保存方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种RNA提取样品远距离运输的保存方法,其为用植物RNA提取裂解液研磨植物材料,并将研磨充分的匀浆注入无RNA酶的样品保存管中,至少4℃以下保存运输。本发明的方法无需准备较难运输的液氮,更适于长距离的运输。通过本发明所得到的植物样品尽管在远距离运输的条件下,RNA样品依然无降解或者降解不明显。与用液氮运输这种常规的方法相比,RNA的提取效果相同或相近。
Description
技术领域
本发明属于植物基因工程领域,具体涉及一种植物RNA提取样品远距离运输的保存方法。
背景技术
核糖核酸(缩写为RNA,即RibonucleicAcid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。
RNA酶是一类生物活性非常稳定的酶,除细胞内RNA酶外,环境中的灰尘、各种实验器皿和试剂、人类皮肤的汗液、唾液中均存在RNA酶,且RNA酶耐热、耐酸碱,煮沸也不能使之完全失活,蛋白变性剂可使之暂时失活,但变性剂去除后,又可恢复活性。所以在RNA提取过程中必须避免外源性RNA酶的污染和抑制内源性RNA酶的活性。
鉴于RNA样品易于降解,现有技术中,常常使用液氮速冻RNA保存样品,以备后续试验。但是液氮易于挥发,属于危险用品,难以长距离运输。并且野外操作中,液氮罐比较重,较难携带。
发明内容
本发明的目的在于提供一种植物RNA提取样品远距离运输的保存方法。
为实现本发明的目的,本发明提供一种RNA提取样品远距离运输的保存方法,其为用植物RNA提取裂解液研磨植物材料,并将研磨充分的匀浆注入无RNA酶的样品保存管中,至少4℃以下保存运输。
其中,所述的植物RNA提取裂解液优选为植物RNA提取试剂盒中的裂解液,更优选为Aidlab biotech的Easyspin植物RNA提取试剂盒中的裂解液。
其中,植物材料和裂解液的质量体积比为80~120mg∶0.8~1.2ml。
如果植物材料难以研磨的,可加入常规用量的石英砂促进研磨。
本发明中,将提取RNA的植物材料带到目的地后,立即进行提取或者置于-80℃保存,提取时根据试剂盒说明书进行后续的提取步骤。
本发明的方法无需准备较难运输的液氮,更适于长距离的运输。通过本发明所得到的植物样品尽管在远距离运输的条件下,RNA样品依然无降解或者降解不明显。与用液氮运输这种常规的方法相比,RNA的提取效果相同或相近。而且本发明方法中,研钵无需RNA酶抑制剂处理,清水清洗即可准备下一个样品,操作简单。
附图说明
图1为用本发明方法远距离运输植物样品后的RNA提取图。其中,泳道1~2分别为梅花花瓣和菊花叶片。
图2为用常规的液氮运输法运输植物样品后的RNA提取图。其中,泳道1~2分别为梅花花瓣和菊花叶片。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例1 RNA提取裂解液保存运输
本研究采用Easyspin(Aidlab biotech,北京,中国)植物RNA提取试剂盒的裂解液研磨保存样品,从西藏通麦镇运至湖北武汉。从植物离体至RNA样品提取或超低温保存,历时48h。试验材料为梅花花器官各部分结构及菊花叶片等。
本实施例的具备步骤为:
1)材料准备:
准备无RNA酶的1.5ml的离心管若干、1000μL的移液枪及配套枪头、研钵、研棒、冰盒、冰袋、封口膜;
2)RNA样品处理:
a.野外环境下,干净研钵中注入Easyspin(Aidlab biotech,北京,中国)植物RNA提取试剂中1000μL的裂解液;
b.取100mg左右的植物样品放入研钵中(事先了解该植物样本100mg大约的材料数量),研棒充分研磨至糊状,对于不易研磨的样品可加入常规用量的石英砂,将样品移入无RNA酶的1.5ml的离心管中,充分震荡混匀,用封口膜封口;
e.将样品置于冰盒中保存,至少保证4℃环境,冰袋在具备条件时冻存备用。冰盒减少开合次数,以保证内部温度,温度越低越便于长距离运输;
c.用清水清洗研钵,纸巾擦净,进行下一个样品的预处理。
到达目的地后,按照说明书的步骤,在进行后续的RNA提取,结果如图1所示。从图1中可以看出,所得到的植物样品尽管在远距离运输的条件下,RNA样品依然无降解或者降解不明显。
实施例2液氮保存运输
用本领域熟知的液氮保存法保存实施例1中所述的植物材料,到达目的地后根据并按照Easyspin(Aidlab biotech,北京,中国)植物RNA提取试剂盒说明书进行RNA提取,结果如图2所示。
从图1和图2的结果来看,这两种提取方式提取的RNA效果相同和相近,表明本发明的方法适合用于长距离运输RNA提取样品。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种RNA提取样品远距离运输的保存方法,其为用植物RNA提取裂解液研磨植物材料,并将研磨充分的匀浆注入无RNA酶的样品保存管中,至少4℃以下保存运输。
2.根据权利要求1所述的保存方法,其特征在于,所述的植物RNA提取裂解液为植物RNA提取试剂盒中的裂解液。
3.根据权利要求2所述的保存方法,其特征在于,所述的植物RNA提取试剂盒为Aidlab biotech的Easyspin植物RNA提取试剂盒。
4.根据权利要求1~3任一项所述的保存方法,其特征在于,植物材料和裂解液的质量体积比为80~120mg∶0.8~1.2ml。
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CN104894108A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-09-09 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种rna短期保存方法 |
CN109337902A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-02-15 | 南京林业大学 | 一种用于野外精细化采集植物特定组织样本时的长效稳定保存rna的便捷方法 |
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2011
- 2011-12-16 CN CN201110422220XA patent/CN102517278A/zh active Pending
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