CN102516306A - 环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途 - Google Patents

环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN102516306A
CN102516306A CN2011104245860A CN201110424586A CN102516306A CN 102516306 A CN102516306 A CN 102516306A CN 2011104245860 A CN2011104245860 A CN 2011104245860A CN 201110424586 A CN201110424586 A CN 201110424586A CN 102516306 A CN102516306 A CN 102516306A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cancer
medicine
endoxan
preparation
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2011104245860A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102516306B (zh
Inventor
宋杨
宋尔群
李效尧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Southwest University
Original Assignee
Southwest University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southwest University filed Critical Southwest University
Priority to CN201110424586.0A priority Critical patent/CN102516306B/zh
Publication of CN102516306A publication Critical patent/CN102516306A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102516306B publication Critical patent/CN102516306B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种环磷酰胺类衍生物的抗肿瘤化合物，该结构具有结构如下：
Figure 2011104245860100004DEST_PATH_IMAGE002
本发明的药物合成方法简单，适合大批量生成。实验证明本发明的环磷酰胺类衍生物对多种肿瘤细胞株具有明显的抑制作用，可以用于制备治疗癌症的药物。

Description

环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途
技术领域
本发明所涉及医药领域，特别是环磷酰胺类抗肿瘤化合物的制备方法及应用。
背景技术
癌症是当前危害人类健康和正常生活的最主要的疾病之一，同时，高效、高选择性和副作用小的抗癌药物的研究开发是非常重要的课题。但是由于癌症发生机制的特殊性和复杂性，寻找高选择性、高效以及低毒副作用的抗癌药物并非易事。
环磷酰胺，在体外并无抗肿瘤活性。进入体内后先在肝脏中经微粒体功能氧化酶转化成醛磷酰胺，而醛酰胺不稳定，在肿瘤细胞内分解成酰胺氮芥及丙烯醛，酰胺氮芥对肿瘤细胞有细胞毒作用。环磷酰胺已证明是临床上最常用的毒性较低的细胞毒类抗癌药。环磷酰胺在体外对肿瘤细胞无效，只有进入体内后，经过氧化产生活性中间体才能发挥作用。但是使用环磷酰胺会带来常见的不良反应，例如胃肠不能耐受、骨髓受抑制、脱发、无菌性膀胱炎以及依赖性的引起肝损伤等。目前比较一致认为这些不良反应是其代谢副产物丙烯醛(acrolein)所致。代谢过程中丙烯醛的产生，导致了严重的膀胱毒性，限制了临床的使用。如能在环磷酰胺发挥抗肿瘤作用的同时，降低丙烯醛的产生，减少膀胱毒性，必将使得环磷酰胺类化合物有更广泛的应用。
发明内容
本发明的目的在于发明一种环磷酰胺类似物，能够有效的降低丙烯醛的产生，在抗肿瘤的同时，降低膀胱毒性的发生，增加适用范围。
本发明的化合物结构具有如下通式：
Figure BDA0000121347820000011
其中，R1为H、OH、OCH3、OAc、卤素、SH、NH2、NO2、COOH。R2为H、OH、OCH3、OAc、卤素、SH、NH2、NO2、COOH。
制备本发明的环磷酰胺类衍生物的反应通式如下所示：
Figure BDA0000121347820000021
本发明的药物合成方法简单，适合大批量生成。
本发明进一步提出保护上述化合物在制备抗肿瘤药物中的用途，尤其是在制备治疗白血病、肺癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌的药物中的应用，以及在制备治疗癌症患者并发性炎症药物中的应用。
实验证明本发明的环磷酰胺类衍生物对多种肿瘤细胞株具有明显的抑制作用，可以用于制备治疗癌症的药物，本化合物能够有效的降低丙烯醛的产生，在抗肿瘤的同时，降低膀胱毒性的发生，增加适用范围。
附图说明
图1是环磷酰胺类衍生物(9a，9b)交联线性pBR322DNA的活性实验。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：4，6-二苯基环磷酰胺制备
步骤1：查尔酮(3)制备
苯乙酮1(0.6mol)和苯甲醛2(0.6mol)溶解在300mL乙醇中，向其中加入10％氢氧化钠100mL，混合。室温下反应3h，固体物质过滤，于乙醇中重结晶。得查尔酮(3)75.0g(59.7％)，产物结构经熔点，IR，NMR，MS和元素分析确定。
步骤2：异恶唑(4)制备
查尔酮(3)(2.08g，10mmol)，NH2OH·HCl(0.7g，10mmol)，溶于60mL乙醇中，混合。于氮气氛围下回流5min，随后加入40mL沸水，再加入10％的热KOH溶液20mL。混合体系回流3h，之后反应液于-15℃下静置过夜，过滤。将过滤得到的晶体用10mL水洗2-3次，得到的固体物质于乙醇中重结晶，得到微黄色晶体异恶唑(4)523mg(25％)，产物结构经熔点，IR，NMR，MS和元素分析确定。
步骤3：1，3-二苯基-3-氨基丙醇(5)制备
将0.085g LiAlH4置于三口瓶中，通氮气保护，氯化钙防潮，向其中加入10mL无水乙醚，形成悬浊液，将0.48g异恶唑(4)溶于30mL无水乙醚中，冰浴下将异恶唑溶液滴加进LiAlH4悬液中，将反应体系于35℃水浴回流6h。反应完毕，加水处理过量的LiAlH4(0.7mL 20％NaOH，3.5mL水)。过滤，乙醚洗涤残渣，用氯仿萃取残渣，过滤，取滤液，浓缩得1，3-二苯基-3-氨基丙醇(5)0.16g。产物结构经熔点，IR，NMR，MS和元素分析确定。
步骤4：氮芥磷酰二氯(8)制备
双二氯乙基胺盐酸盐(6)(20g，0.112mol)和52mL(0.60mol)新蒸的POCl3置于200mL的圆底烧瓶中，110℃回流20h至固体双二氯乙基胺盐酸盐消失。减压除去过量的POCl3，所得的固体残渣加乙酸乙酯溶解，过滤除掉不溶物质，浓缩乙酸乙酯滤液，滤液用丙酮∶石油醚(v/v＝1∶5)重结晶，得无色晶体18.0g，收率61％，产物结构经熔点，IR，NMR，MS和元素分析确定。
步骤5：4，6-二苯基环磷酰胺(9)制备
1，3-二苯基-3-氨基丙醇(5)(263mg，0.78mmol)溶解在20mL乙酸乙酯中，向其中加入(241mL，1.71mmol)三乙胺，体系置于0℃冰浴中。将氮芥磷酰二氯(8)(222mg，0.86mmol)溶解在20mL无水乙酸乙酯中。将氮芥磷酰二氯溶液加入1，3-二苯基-3-氨基丙醇反应体系。0℃反应0.5h后，将反应移至室温继续反应48h。过滤除去沉淀物，滤液浓缩，残渣用硅胶柱分离，流动相(hexane/EtOAc＝1∶2)。得两种异构体9a(47mg，14.6％)和9b(38mg，11.8％)，具体构型如下。产物结构经熔点，IR，NMR，MS和元素分析确定。
Figure BDA0000121347820000041
实施例2：体外抗肿瘤实验
选择本发明的9a和9b试验其对细胞株HepG-2，A549，MCF-7和HL-60的细胞毒性，采用MTT法。
1、将9a和9b分别用RPMI-1640培养液配置成不同浓度，4℃保存。
2、癌细胞培养于含10％小牛血清，100kU/L青霉素和100mg/L链霉素的RPMI-1640培养液中，放在5％CO2饱和湿度细胞培养箱中恒温培养。
3、取对数生长期的癌细胞，96孔板中加入5.0×104个/mL细胞悬液100μL。
4、同时设置空白以及环磷酰胺(CP)，5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照空，空白组加入相同体积的培养液，阳性对照组加入4μmol/L，每一浓度设八个平行孔。
5、继续培养48h后，每孔加入MTT(5g/L，20μL)，继续培养5h。
6、吸出孔内培养液(尽量完全)，加入DMSO液(100μL/孔)，置37℃振荡器上摇匀15min，使晶体充分溶解。
7、用酶标仪在波长490nm下，测OD值。
从表-1中可以看出，药物9a和9b具有良好的抗肿瘤活性。
表-1：某些环磷酰胺类衍生物(9a，9b)抗肿瘤活性测试结果(MTT法)
Figure BDA0000121347820000042
实施例3：药物的副作用比较：
临床药物环磷酰胺能引起出血性膀胱炎等泌尿系统毒性，因而影响了它的治疗应用。选择本发明的9a和9b试验其对大鼠出血性膀胱炎的副作用，并和环磷酰胺进行比较。
1、选择SD大鼠作为研究对象，大鼠分成6组，每组6只。第1组ip注射生理盐水作为阴性对照；第2组ip注射环磷酰胺50mg/kg；第3组ip注射9a 50mg/kg；第4组ip注射9a 100mg/kg；第5组ip注射9b 50mg/kg；第6组ip注射9b 100mg/kg。
2、大鼠注射上述药物后停止进食，仅供饮水。诱导24小时后，处死大鼠，使用高剂量腹腔注射盐酸氯胺酮(85毫克/公斤体重)和甲苯噻嗪盐酸盐(12.5毫克/公斤体重)以防止意外膀胱穿刺。疏散残余尿，清理膀胱周围的结缔组织和类脂肪组织，称重。
3、计算膀胱脏器系数。以膀胱脏器系数(膀胱重/体重)增加作为出血性膀胱炎的指标。
4、炎症等级评定。水肿评定标准：
3分(严重)-水肿粘液发生在内、外膀胱壁上
2分(中度)-水肿粘液局限于内部黏膜
1分(轻度)-介于轻度水肿和正常之间
0分(无)-正常。
5、出血等级评定。评定标准：
3分(严重)-膀胱内血块
2分(中度)-黏膜血肿
1分(轻度)-毛细血管扩张症或膀胱血管扩张
0分(无)-正常。
从表-2中可以看出，药物9a和9b相对于对照阳性药物环磷酰胺，较为不易引起出血性膀胱炎，具有更低的毒副作用。
表-2：某些环磷酰胺类衍生物(9a，9b)致大鼠出血性膀胱炎
Figure BDA0000121347820000061
＊，p＜0.01相对生理盐水组；＊＊，p＜0.05相对环磷酰胺组。
实施例4：药物与DNA交联：
选择本发明的9a和9b试验其对质粒pBR322DNA的体外交联活性，采用碱性凝胶电泳法。
1、制备线性pBR322DNA。配制下列体系的混合物(共200μL)：超螺旋型的pBR322DNA(10μL，10μg)，限制性内切酶EcoR I(4μL，40-80u)，10倍EcoR I缓冲溶液(20μL)，乙酰化BSA(20μL，1mg/mL)，二次水(146μL)。将上述混合物在37℃恒温水箱里培育3小时，再加入醋酸钠(20μL，3M)和冰乙醇(440μL)，-20℃静置过夜。取出混合物，以16,000转/分钟离心15分钟，倾倒出乙醇，倒置数分钟以挥发掉残余乙醇。加入30μL二次水备用。浓度约0.25μg/μL。
2、在0.2mL的EP管里加入线性化的pBR322DNA 2μL(0.25μg/μL)，再加入一定量的药物溶液，加入pH＝8的TE缓冲液，调节总体积至10μL，将溶液混合均匀。
3、将EP管置于37℃恒温水箱里，孵育50分钟。
4、孵育完毕后，每个EP管里加入1μL加样缓冲液。
5、将样品置于0.9％琼脂糖凝胶上，40V电压，120mA电流下电泳约2小时，至溴酚兰条带迁移约5cm，停止电泳。然后将凝胶转入溶液(1M Tris pH＝7/1.5MNaCl)里中和30min。
6、将碱性胶置于EB染色液中染色20分钟。
7、取出，用清水漂洗，成像。
由图-1的环磷酰胺类衍生物(9a，9b)交联线性pBR322DNA的活性实验，可见9a和9b具有一定的交联DNA的能力，由此判断其引起细胞毒性和抗肿瘤活性的机理可能为DNA交联作用。

Claims (4)

1.一类抗肿瘤化合物，具有如下的结构式，
                                                
Figure 2011104245860100001DEST_PATH_IMAGE002
R1为H、OH、OCH3、OAc、卤素、SH、NH2、NO2、COOH；R2为H、OH、OCH3、OAc、卤素、SH、NH2、NO2、COOH。
2.如权利要求1所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
3.如权利要求1所述的化合物在制备治疗白血病、肺癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌的药物中的应用。
4.如权利要求1所述的化合物在制备治疗癌症患者并发性炎症药物中的应用。
CN201110424586.0A 2011-12-16 2011-12-16 环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途 Expired - Fee Related CN102516306B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110424586.0A CN102516306B (zh) 2011-12-16 2011-12-16 环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110424586.0A CN102516306B (zh) 2011-12-16 2011-12-16 环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102516306A true CN102516306A (zh) 2012-06-27
CN102516306B CN102516306B (zh) 2014-05-07

Family

ID=46287423

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201110424586.0A Expired - Fee Related CN102516306B (zh) 2011-12-16 2011-12-16 环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102516306B (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090202540A1 (en) * 2008-02-11 2009-08-13 Auspex Pharmaceuticals, Inc. Substituted oxazaphosphorines

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090202540A1 (en) * 2008-02-11 2009-08-13 Auspex Pharmaceuticals, Inc. Substituted oxazaphosphorines

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
D. W. WHITE ET AL.: "Solution Stereochemistry of Cyclophosphamide and Rigid Model Analogues", 《JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY》, vol. 101, no. 8, 11 April 1979 (1979-04-11), pages 1937 - 1942 *
VICTORIA L. BOYD ET AL.: "Synthesis and Antitumor Activity of Cyclophosphamide Analogues. 3.Preparation, Molecular Structure Determination, and Anticancer Screening of Racemic cis- and trans-4-Phenylcyclophosphamide", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 23, no. 4, 31 December 1980 (1980-12-31), pages 372 - 375 *
庄雅云等: "氮芥类抗肿瘤药物研究进展", 《中国药学杂志》, vol. 43, no. 17, 30 September 2008 (2008-09-30), pages 1281 - 1287 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN102516306B (zh) 2014-05-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101137639B (zh) 类黄酮化合物及其用途
CN103044395B (zh) 含有地氯雷他定结构的氨基酸类衍生物、其制备方法和用途
CN107382966B (zh) 一类荜茇酰胺-川芎嗪杂合物、制备方法及医药用途
KR101888779B1 (ko) Ａｍｐｋ 활성을 증진시킬 수 있는 약물을 제조하기 위한 이소퀴놀린 알칼로이드 유도체의 용도
CN106573907A (zh) 新颖的喹啉衍生物及其用于神经退化性疾病的用途
CN102260260B (zh) 8-苯基黄嘌呤类化合物、其制备方法、包含该化合物的药物组合物及其用途
CN103992236B (zh) 一种新型靶向性抗肿瘤药物及其制备方法与应用
CN110041342B (zh) 一种含硒化合物及其用途
CN102627685A (zh) 一氧化氮供体型谷胱甘肽类化合物、其制备方法及医药用途
US20200079805A1 (en) Compounds for treatment of senescence-related disorders
CN101974016A (zh) 酰胺类化合物及其制备方法和用途
CN103864765B (zh) 含有五元杂环的苯并氮杂卓类衍生物、其制备方法和用途
CN102516306A (zh) 环磷酰胺类衍生物及作为抗肿瘤药物的用途
CN101691384A (zh) 含磷的二苯乙烯类化合物及其制备方法和用途
CN104761610A (zh) 一类新型的α-常春藤皂苷衍生物及其制备方法和用途
CN111138449B (zh) 双靶向erk1和erk5抑制剂的制备及其抗肿瘤应用
CN111393421B (zh) 丁烯酸内酯类衍生物及其制备方法与应用
CN102532192B (zh) 一种对乙酰氨基酚—磷酰氮芥抗肿瘤药物及其制备方法
US5182273A (en) Spirocyclic n, o derivatives of cyclotriphosphazenes and their use in therapy
CN102796157B (zh) 告达亭衍生物，其药物组合物及其用途
CN105732758B (zh) 胆酸‑α‑氨基膦酸酯衍生物及其合成方法
CN103880793B (zh) 含呋喃亚胺类化合物及其制备方法和用途
CN106146623B (zh) 胞壁三肽-二脂肪酰磷脂酰乙醇胺衍生物的制备及应用
CN103919770A (zh) 一种含噻喃酮结构的姜黄素类似物s5在制备抗炎药物方面的应用
CN102838652B (zh) 一种具有抗恶性肿瘤作用的齐墩果酸衍生物及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20140507

Termination date: 20171216

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee