CN102499458A - 海洋藻类多糖及其制备方法和在卷烟中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种海洋藻类多糖及其制备方法和在卷烟中的应用，其制备方法，包括：将海洋藻类洗净后干燥，粉碎后在水中提取，得到提取液，其中，海洋藻类与水的重量比为1∶50-60；提取液冷却后经离心和真空抽滤得到滤液；将滤液醇沉，收集沉淀，冷冻干燥后即得海洋藻类多糖；或者，将滤液用径向流色谱法分离提纯后冷冻干燥得到海洋藻类多糖；所述的海洋藻类为海萝、角叉菜或冈村凹顶藻。该方法操作简单、易于控制且成本低，适于工业化生产。制得的海洋藻类多糖应用到卷烟中，卷烟燃吸时烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，生津感增强，烟香有特色。
Description
技术领域
本发明涉及多糖的制备及应用领域，具体涉及一种海洋藻类多糖及其制备方法和在卷烟中的应用。
背景技术
在卷烟生产过程中，为了改善烟草的物理性能，增强烟草的耐加工性，减少加工时的造碎，通常需要加入具有保润作用的保润剂。在烟叶(叶片)和烟丝中加入保润剂，可改善烟丝的物理性能，增加韧性，保持水分，增加烟叶(叶片)、烟丝的柔软程度，减少加工时的造碎、损耗，且有利于产品香味透发，对烟草品质具有十分重要的作用。
传统的保润剂如丙二醇、甘油和木糖醇等都有各自的不足之处：甘油燃烧分解产生的丙烯醛会使烟气吃味变坏，在烟草中已不多用。而丙二醇很大部分依靠进口，价格也高，不利于降低卷烟成本。木糖醇、山梨醇的价格虽低，但其保润性能不如甘油和丙二醇好，且不易长时间存放。因此如能寻找得出一种保润性良好但价格和生产提取成本低廉的具有较高的使用价值和推广应用价值的烟用海洋生物材料提取物应用于烟草的保润是一条很好的途径。
海萝Gloiopeltis furcata(Post.et Rupr.)J.Ag.藻体紫红色，黄褐色至褐色，软革质，干后韧，高4-10cm，可达15cm，丛生，主枝短，圆柱形或亚圆柱形，宽约4mm，不规则二叉分枝，于分枝处常缢缩，内部组织疏松或中空，故藻体有时扁塌，细胞壁外层为海萝胶，内层为纤维素。目前未见将海萝应用在烟草中的报道。
角叉菜chondrus ocellatus Holmes，为海洋藻类药杉藻科植物角叉菜的全草，属褐藻门，杉藻科，角叉菜属，自然分布于大西洋沿岸和我国东南沿海以及青岛、大连等海域，是中国的一种重要经济海藻。角叉菜不仅是卡拉胶生产的重要原藻，而且近年来越来越多地应用于医药领域，引起人们的广泛关注。目前未见将角叉菜应用在烟草中的报道。
冈村凹顶藻Laurencia okamurai Yamada藻体深紫色，丛生，软骨质。主干圆柱形，及顶，不规则分枝，枝互生，对生或近轮生，体呈圆锥形。最末小枝圆柱形或棍棒形，顶端截形或圆形。固着器假根状。四分孢子囊四面锥形分裂。囊果壶形。生长在中、低潮带的岩石上或石沼中。福建省沿海习见的种类。目前未见将冈村凹顶藻应用在烟草中的报道。
多糖是由10个以上的单糖通过糖苷键连接而成的高分子聚合物，其分子中含有大量的羟基等极性基团，可以通过与水分子形成氢键而减缓水分的散失速率，从而表现出一定的保湿性。目前有些多糖已应用到烟草行业，起到了很好的保润效果，如中国专利ZL200910172520.X中公开的一种仙人掌多糖等，而海萝多糖、角叉菜多糖、冈村凹顶藻多糖在卷烟中的应用还未见报道。
发明内容
本发明提供了一种可应用于卷烟中的海洋藻类多糖。
本发明还提供了一种海洋藻类多糖的制备方法，该方法操作简单、易于控制。
本发明还提供了一种海洋藻类多糖在卷烟中的应用，将海洋藻类多糖应用到卷烟中，可显著提高卷烟的香气质、香气量、生津感和明亮度。
一种海洋藻类多糖的制备方法，包括以下步骤：
a.将海洋藻类洗净后干燥，经粉碎得到海洋藻类粉；
b.将海洋藻类粉在水中提取，得到提取液，其中，海洋藻类粉与水的重量比为1∶50-60；
c.提取液冷却后经离心和抽滤得到滤液；
d.向滤液中加入体积分数为95％-100％的乙醇，使体系中乙醇体积分数达到75％-90％，搅拌，静置8h-12h，离心，收集沉淀，冷冻干燥后即得海洋藻类多糖；或者，将滤液用径向流色谱法分离提纯后冷冻干燥得到海洋藻类多糖；
所述的海洋藻类为海萝、角叉菜或冈村凹顶藻。
所述的海萝全株、角叉菜全株或冈村凹顶藻全株均适用于本发明且采摘方便，因此所述的海萝是海萝全株；或者，所述的角叉菜是角叉菜全株；或者，所述的冈村凹顶藻是冈村凹顶藻全株；均可选用浙江产的海洋藻类。
步骤a中，干燥的方式多种多样，可自然晾干、阴干也可通过烘箱烘干，从节约时间和避免破坏活性成分两方面综合考虑，干燥的温度优选为55℃-65℃。
为进一步保证提取的效果，优选：
所述的海洋藻类粉的目数为20目-100目。
步骤b中，所述的提取的条件为：80℃-100℃回流提取2h-4h；
或者，所述的提取的条件为：采用超声波辅助提取，超声功率为400w-500w，时间20min-30min。
步骤d中，将滤液用径向流色谱法分离提纯的条件为：将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min。
所述的体积分数为95％-100％的乙醇可采用市售产品。
所述的海洋藻类多糖可应用于卷烟中，应用时不需要改变卷烟原有的加工工艺，但可增强卷烟的细腻感和饱和度，降低吸食时的干燥感。
所述的海洋藻类多糖的用量优选为卷烟烟丝质量的0.02‰-0.2‰。
所述的海洋藻类多糖在卷烟中的应用方法，包括：将所述的海洋藻类多糖经水溶解，配制成0.1mg/ml-1mg/ml的溶液喷加到卷烟烟丝上，得到含海洋藻类多糖的烟丝。采用现有的卷烟制备方法如经混丝、平衡、卷烟等工序后，将含海洋藻类多糖的烟丝制成卷烟。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
本发明海洋藻类多糖的制备方法，采用干燥、粉碎→水提取→离心、过滤→醇沉或径向流色谱法分离提纯→冻干→粗多糖，操作简单、易于控制且成本低，无污染，无需改变现有卷烟的加工工艺，适于工业化生产。
本发明海洋藻类多糖可应用到卷烟中，添加本发明海洋藻类多糖的卷烟，燃吸时烟气香气质和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，生津感增强，在一定程度上改善了我国卷烟产品烟气干燥的缺点，具有实际生产意义和价值。
具体实施方式
本发明以下结合实施例做进一步描述。
实施例1
a、将海萝全株洗净后阴干放入烘箱中60℃下烘干粉碎至60目，得到海萝粉；
b、将海萝粉加为海萝粉重量50倍量的水于90℃下提取4h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得海萝多糖。
按照烟丝质量的0.1‰称取海萝多糖，用纯水配成0.1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支1)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加海萝多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A，烟丝与烟支1相同)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、舒适度和生津感增强，烟香有特色。
实施例2
a、将海萝全株洗净后阴干放入烘箱中55℃下烘干粉碎至20目，得到海萝粉；
b、将海萝粉加为海萝粉重量60倍量的水于80℃下提取3h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得海萝多糖。
按照烟丝质量的0.02‰称取海萝多糖，用纯水配成1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支2)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加海萝多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、舒适度和生津感增强，烟香有特色。
实施例3
a、将海萝全株洗净后阴干放入烘箱中65℃下烘干粉碎至100目，得到海萝粉；
b、将海萝粉加为海萝粉重量55倍量的水于100℃下回流提取2h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得海萝多糖。
按照烟丝质量的0.2‰称取海萝多糖，用纯水配成0.5mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支3)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加海萝多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、舒适度和生津感增强，烟香有特色。
实施例4
a、将海萝全株洗净后阴干放入烘箱中60℃下烘干粉碎至40目，得到海萝粉；
b、将海萝粉加为海萝粉重量55倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率480w，超声提取25min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为95％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到85％，静置10h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得海萝多糖。
按烟丝质量的0.1‰称取所得的海萝多糖，经水溶解后配制成1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支4)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加海萝多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、舒适度和生津感增强，烟香有特色。
实施例5
a、将海萝全株洗净后阴干放入烘箱中55℃下烘干粉碎至100目，得到海萝粉；
b、将海萝粉加为海萝粉重量50倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率400w，超声提取30min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为100％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到75％，静置12h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得海萝多糖。
按烟丝质量的0.02‰称取所得的海萝多糖，经水溶解后配制成0.1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支5)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加海萝多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、舒适度和生津感增强，烟香有特色。
实施例6
a、将海萝全株洗净后阴干放入烘箱中65℃下烘干粉碎至20目，得到海萝粉；
b、将海萝粉加为海萝粉重量60倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率500w，超声提取20min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为98％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到90％，静置8h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得海萝多糖。
按烟丝质量的0.2‰称取所得的海萝多糖，经水溶解后配制成0.5mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支6)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加海萝多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、舒适度和生津感增强，烟香有特色。
实施例7
a、将角叉菜全株洗净后阴干放入烘箱中60℃下烘干粉碎至60目，得到角叉菜全粉；
b、将角叉菜全粉加为角叉菜全粉重量50倍量的水于90℃下提取4h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得角叉菜多糖。
按照烟丝质量的0.1‰称取角叉菜多糖，用纯水配成0.1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支7)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加角叉菜多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例8
a、将角叉菜全株洗净后阴干放入烘箱中55℃下烘干粉碎至20目，得到角叉菜粉；
b、将角叉菜粉加为角叉菜粉重量60倍量的水于80℃下提取3h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得角叉菜多糖。
按照烟丝质量的0.02‰称取角叉菜多糖，用纯水配成1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支8)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加角叉菜多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例9
a、将角叉菜全株洗净后阴干放入烘箱中65℃下烘干粉碎至100目，得到角叉菜粉；
b、将角叉菜粉加为角叉菜粉重量55倍量的水于100℃下回流提取2h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得角叉菜多糖。
按照烟丝质量的0.2‰称取角叉菜多糖，用纯水配成0.5mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支9)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加角叉菜多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例10
a、将角叉菜全株洗净后阴干放入烘箱中60℃下烘干粉碎至40目，得到角叉菜粉；
b、将角叉菜粉加为角叉菜粉重量55倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率480w，超声提取25min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为95％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到85％，静置10h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得角叉菜多糖。
按烟丝质量的0.1‰称取所得的角叉菜多糖，经水溶解后配制成1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支10)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加角叉菜多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例11
a、将角叉菜全株洗净后阴干放入烘箱中55℃下烘干粉碎至100目，得到角叉菜粉；
b、将角叉菜粉加为角叉菜粉重量50倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率400w，超声提取30min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为100％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到75％，静置12h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得角叉菜多糖。
按烟丝质量的0.02‰称取所得的角叉菜多糖，经水溶解后配制成0.1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支11)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加角叉菜多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例12
a、将角叉菜全株洗净后阴干放入烘箱中65℃下烘干粉碎至20目，得到角叉菜粉；
b、将角叉菜粉加为角叉菜粉重量60倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率500w，超声提取20min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为98％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到90％，静置8h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得角叉菜多糖。
按烟丝质量的0.2‰称取所得的角叉菜多糖，经水溶解后配制成0.5mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支12)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加角叉菜多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例13
a、将冈村凹顶藻全株洗净后阴干放入烘箱中60℃下烘干粉碎至60目，得到冈村凹顶藻粉；
b、将冈村凹顶藻粉加为冈村凹顶藻粉重量50倍量的水于90℃下提取4h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得冈村凹顶藻多糖。
按照烟丝质量的0.1‰称取冈村凹顶藻多糖，用纯水配成0.1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支13)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加冈村凹顶藻多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例14
a、将冈村凹顶藻全株洗净后阴干放入烘箱中55℃下烘干粉碎至20目，得到冈村凹顶藻粉；
b、将冈村凹顶藻粉加为冈村凹顶藻粉重量60倍量的水于80℃下提取3h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得冈村凹顶藻多糖。
按照烟丝质量的0.02‰称取冈村凹顶藻多糖，用纯水配成1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支14)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加冈村凹顶藻多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例15
a、将冈村凹顶藻全株洗净后阴干放入烘箱中65℃下烘干粉碎至100目，得到冈村凹顶藻粉；
b、将冈村凹顶藻粉加为冈村凹顶藻粉重量55倍量的水于100℃下回流提取2h，得到提取液；
c、提取液冷却至室温后经10000r/min高速离心10min，所得上清液再经真空抽滤后得到滤液；
d、将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液后用径向流色谱法分离提纯：上样量为100ml，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min，收集洗脱液后浓缩，再冷冻干燥即得冈村凹顶藻多糖。
按照烟丝质量的0.2‰称取冈村凹顶藻多糖，用纯水配成0.5mg/ml的溶液喷洒到烟丝上卷制成卷烟烟支(记作烟支15)，恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加冈村凹顶藻多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例16
a、将冈村凹顶藻全株洗净后阴干放入烘箱中60℃下烘干粉碎至40目，得到冈村凹顶藻粉；
b、将冈村凹顶藻粉加为冈村凹顶藻粉重量55倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率480w，超声提取25min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为95％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到85％，静置10h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得冈村凹顶藻多糖。
按烟丝质量的0.1‰称取所得的冈村凹顶藻多糖，经水溶解后配制成1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支16)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加冈村凹顶藻多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例17
a、将冈村凹顶藻全株洗净后阴干放入烘箱中55℃下烘干粉碎至100目，得到冈村凹顶藻粉；
b、将冈村凹顶藻粉加为冈村凹顶藻粉重量50倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率400w，超声提取30min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为100％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到75％，静置12h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得冈村凹顶藻多糖。
按烟丝质量的0.02‰称取所得的冈村凹顶藻多糖，经水溶解后配制成0.1mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支17)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加冈村凹顶藻多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、生津感和回甜感增强，烟香有特色。
实施例18
a、将冈村凹顶藻全株洗净后阴干放入烘箱中65℃下烘干粉碎至20目，得到冈村凹顶藻粉；
b、将冈村凹顶藻粉加为冈村凹顶藻粉重量60倍量的水，放入超声波提取器中，超声功率500w，超声提取20min，得到提取液；
c、将提取液冷却后经10000r/min高速离心10min，上清液经真空抽滤后得到滤液；
d、向滤液中加入体积分数为98％乙醇，不断搅拌，使体系中乙醇体积分数达到90％，静置8h，4000r/min离心15min，收集沉淀，冷冻干燥后即得冈村凹顶藻多糖。
按烟丝质量的0.2‰称取所得的冈村凹顶藻多糖，经水溶解后配制成0.5mg/ml的溶液喷洒到烟丝上，卷制成卷烟烟支(记作烟支18)后恒温(22±1℃)恒湿(相对湿度60±2％)平衡48h后进行感官评吸；感官评吸结果为：与不添加冈村凹顶藻多糖的普通市售卷烟烟支(记作烟支A)比较，烟气香气质提升和香气量增加，烟气的形态好，烟气的干燥感降低，圆润感、细腻柔和度、生津感和回甜感增强，烟香有特色。
评吸要求：每个样品的评吸需七个及以上人员参加，两个卷烟国家评委，五个及以上省级评委；这些资格都需要通过资格考试。
评吸参照中华人民共和国国家标准(GB 5606.4-2005)《卷烟第4部分：感官技术要求》(Cigarettes-Part 4：Technical requirements forsense-evaluation)，2005-6-17发布、2006-1-1实施，由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局和中国国家标准化管理委员会发布。
对照烟支(烟支A)与本发明实施例1-18添加海洋藻类多糖的烟支1-18的感官评吸结果(各项值为具有资质的10位评吸人员评吸结果的平均值)见下表1：
表1
Claims (10)
1.一种海洋藻类多糖的制备方法，包括以下步骤：
a.将海洋藻类洗净后干燥，经粉碎得到海洋藻类粉；
b.将海洋藻类粉在水中提取，得到提取液，其中，海洋藻类粉与水的重量比为1∶50-60；
c.提取液冷却后经离心和抽滤得到滤液；
d.向滤液中加入体积分数为95％-100％的乙醇，使体系中乙醇体积分数达到75％-90％，搅拌，静置8h-12h，离心，收集沉淀，冷冻干燥后即得海洋藻类多糖；或者，将滤液用径向流色谱法分离提纯后冷冻干燥得到海洋藻类多糖；
所述的海洋藻类为海萝、角叉菜或冈村凹顶藻。
2.根据权利要求1所述的海洋藻类多糖的制备方法，其特征在于，所述的海萝是海萝全株；或者，所述的角叉菜是角叉菜全株；或者，所述的冈村凹顶藻是冈村凹顶藻全株。
3.根据权利要求1所述的海洋藻类多糖的制备方法，其特征在于，步骤a中，干燥的温度为55℃-65℃。
4.根据权利要求1所述的海洋藻类多糖的制备方法，其特征在于，所述的海洋藻类粉的目数为20目-100目。
5.根据权利要求1所述的海洋藻类多糖的制备方法，其特征在于，步骤b中，所述的提取的条件为：80℃-100℃回流提取2h-4h；
或者，所述的提取的条件为：采用超声波辅助提取，超声功率为400w-500w，时间20min-30min。
6.根据权利要求1所述的海洋藻类多糖的制备方法，其特征在于，步骤d中，将滤液用径向流色谱法分离提纯的条件为：将滤液配制成滤液浓度为10mg/ml的水溶液，上样流速为2ml/min，用蒸馏水洗脱，洗脱流速为50ml/min。
7.根据权利要求1-6任一项所述的海洋藻类多糖的制备方法制备的海洋藻类多糖。
8.根据权利要求7所述的海洋藻类多糖在卷烟中的应用。
9.根据权利要求8所述的海洋藻类多糖在卷烟中的应用，其特征在于，海洋藻类多糖的用量为卷烟烟丝质量的0.02‰-0.2‰。
10.根据权利要求8或9所述的海洋藻类多糖在卷烟中的应用，其特征在于，所述的应用方法包括：将所述的海洋藻类多糖经水溶解，配制成0.1mg/ml-1mg/ml的溶液喷加到卷烟烟丝上，制备卷烟。
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