CN102462730B - 一种治疗肿瘤的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗肿瘤的中药组合物，该药物组合物原料药主要由黄芪4-13重量份、鸡血藤1-6重量份组成。本发明作用优于“当归补血汤”，具有益气养血，补虚活血，扶助人体正气，治疗及辅助治疗肿瘤的中药组合物。且能用于多种肿瘤治疗各期，具有治疗与辅助治疗肿瘤的作用。

Description

一种治疗肿瘤的中药组合物

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，特别涉及一种益气养血、补虚活血，扶助人体正气，治疗及辅助治疗肿瘤的中药组合物。

背景技术

“当归补血汤”是一首金元时代李东垣所创造的益气补血方剂，由黄芪和当归两味药以5∶1比分组成的，具有益气生血功效，多用于治劳倦内伤，气血虚，阳浮于外之虚热证。李军昌等通过给纯种新西兰雄兔灌胃给予当归补血汤，于不同时间点收集血清，以MTT法测定上述血清对人肝癌细胞系SMMC7721增殖的抑制作用的影响。结果发现：当归补血汤血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖有抑制作用，当归补血汤经肠道进入体内后，具有一定的抑制肝癌细胞增殖的作用。刁凤声等通过当归补血汤对小鼠肝癌淋巴道转移和脾细胞凋亡的实验发现，当归补血汤具有抑制小鼠肝癌Hca-F25/16A3癌细胞沿淋巴道转移的作用，并能减轻淋巴结转移程度。

但现代的研究发现当归补血汤存在如下问题，一者当归有一些副作用，如用量过大，口服常规用量的当归煎剂，散剂偶有疲倦，嗜睡等反应；当归挥发油穴位注射可使病人出现发热，头痛，口干，恶心等反应；大剂量给药，可使实验动物血压下降，剂量再加大则血压骤降，呼吸停止；当归辛香走窜，月经过多，有出血倾向，阴虚内热，腹泻等症状，临床使用当归不可过量，服药后也应注意有无不良反应。二者当归的半数至死量较低，当归水提取液给小鼠灌服及腹腔注射的半数致死量，分别大于8g/kg和6.58g/kg，其安全性相对较差。其三有研究公开，当归有促进肿瘤细胞生长，促进临床肿瘤病人的复发与转移(参见下述文献：文献1，Lau CB，Ho TC，Chan TW，Kim SC.Use of dong quai(Angelicasinensis)to treat peri-or postmenopausal symptoms in women with breast cancer：is it appropriate？Menopause.2005 Nov-Dec；12(6)：734-40.Epub 2005 Nov 8；文献2，Chang CJ，Chiu JH，Tseng LM，Chang CH，Chien TM，Wu CW，Lui Y Modulationof HER2 expression by ferulic acid on human breast cancer MCF7 cells.Eur J ClinInvest.2006ug；36(8)：588-96..；文献3，Piersen CE Phytoestrogens in botanicaldietary supplements：implications for cancer.Integr Cancer Ther.2003Jun；2(2)：120-38)，这些问题影响了当归补血汤的临床使用，特别是在肿瘤治疗中的运用，许多临床医生对此存有忧虑。在这种背景下如何避免副作用，提高临床疗效，我们开展了相关的研究。

发明内容

本发明目的在于提供一种治疗肿瘤的中药组合物。

本发明目的是通过如下技术方案实现：

方案A：

本发明所述的一种治疗肿瘤中药组合物的原料药主要组成为：

黄芪4-13重量份  鸡血藤1-6重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪5-10重量份  鸡血藤1-5重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪5-8重量份  鸡血藤1-5重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪5重量份  鸡血藤1重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪5重量份  鸡血藤2重量份。

本发明中药组合物的原料药组成最优选为：

黄芪5重量份  鸡血藤3重量份。

黄芪(Astragalus Memeranceus)为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根。鸡血藤为豆科(Leguminosae)密花豆属(Spatholobus)植物密花豆(Spatholobus suberectusDunn)的干燥藤茎。

本发明还提供了上述中药组合物制剂的制备方法，该方法为：黄芪、鸡血藤按上述比例经常规工艺方法提取后加入药学可接受的辅料制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液或滴丸剂；所述常规工艺方法包括水提取或醇提取或先水提取再醇提取或先醇提取后再水提取，经上述常规提取后还可以过大孔树脂柱进一步富集有效成分；

上述常规工艺水提取方法可以为：每次10-30倍量，提取1-4次，每次1-3小时；

上述常规工艺醇提取方法可以为：30-80％乙醇、4-15倍量、分别提取1-3小时；

所述过大孔树脂柱方法为：提取液滤过，滤液通过大孔树脂，先用4-6倍量水或20％以下浓度的乙醇洗脱，洗脱液弃取，再用加50-80％乙醇1-10倍洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，得纯化提取液。

本发明具体提供一种冲剂的制备方法：该方法为黄芪，鸡血藤药材，按上述比例组合，经粉碎后，用8-10倍原料干重的纯净水加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，过滤，减压浓缩，得浸膏，将用上述浸膏置喷雾干燥，其收率为10.2-11.0％。并用干法制粒，得冲剂。

本发明目的还可以通过如下技术方案实现：

方案B：

本发明所述的一种治疗肿瘤中药组合物的原料药主要组成为：

黄芪提取物4-13重量份  鸡血藤提取物1-6重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪提取物5-10重量份  鸡血藤提取物1-5重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪提取物5-8重量份  鸡血藤提取物1-5重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪提取物5重量份  鸡血藤提取物1重量份。

本发明中药组合物的原料药组成优选为：

黄芪提取物5重量份  鸡血藤提取物2重量份。

本发明中药组合物的原料药组成最优选为：

黄芪提取物5重量份  鸡血藤提取物3重量份。

黄芪提取物提取物可以是但不限于醇提过柱精制物、水提过柱精制物、醇提物或水提物中的任意一种或几种的组合；鸡血藤提取物提取物可以是但不限于醇提过柱精制物、水提过柱精制物、醇提物或水提物中的任意一种或几种的组合；

黄芪提取物、鸡血藤提取物可通过市售购买，按照上述组方比例并按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括滴丸、胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液；

所述黄芪、鸡血藤醇提物、水提物、醇提过柱精制物或水提过柱精制物可以但不限于如下方法制备：

水提物提取方法可以为：每次10-30倍量，提取1-4次，每次1-3小时；

醇提物提取方法可以为：30-80％乙醇、4-15倍量、分别提取1-3小时；

所述过过大孔树脂柱方法为：提取液滤过，滤液通过大孔树脂，先用4-6倍量水或20％以下浓度的乙醇洗脱，洗脱液弃取，再用加50-80％乙醇1-10倍洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，得纯化提取液。

本发明黄芪与鸡血藤配伍，能加强其益气补血活血，增强免疫等方面的作用。其作用优于“当归补血汤”，且能用于多种肿瘤治疗各期，具有治疗与辅助治疗肿瘤的作用。

下面实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1  本发明促造血及调节免疫作用研究

下述实验中：组合药物组(FF)为实施例1的方法制备的药品。

当归补血汤(DG)为：黄芪∶当归＝5∶1，制备方法同实施例1。

1、药物对骨髓细胞增殖的影响

1)、颈椎脱臼法处死ICR小鼠，75％酒精浸泡3分钟后，将小鼠置于无菌吸水纸上，腹面朝上；在小鼠股骨下端皮肤剪开一个小口，撕开皮肤，充分暴露股骨及胫骨；用镊子夹住胫骨，用眼科剪沿股骨尽量分离肌肉；在膝关节处剪开股骨与胫骨，用镊子提起股骨，在股骨大转子关节处剪下股骨，如需要可再分离下胫骨，放入无菌RPMI1640培养皿中，迅速转入无菌操作台。

2)、进一步清除股骨及胫骨上肌肉组织；逐次用过量双抗PBS，正常双抗PBS，无双抗PBS，无血清RPMI1640清洗。

3)、鼠齿镊夹住股骨(或胫骨)剪去骨骺，用20号针头刺穿骨末端；用装有培养基的5ml注射器，向骨髓腔内快速推入培养基，冲洗出骨髓细胞，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞；可用注射器反复推拉骨髓细胞悬液几次，即得单细胞悬液。取细胞悬液100g离心5分钟，将细胞悬液定容到5ml，缓缓加到有5ml淋巴细胞分离液的离心管上层，2000rpm离心20min，采集交界面的骨髓有核细胞，无血清RPMI1640培养液洗涤3次，加入10％的FBS，计数细胞密度，按100000/孔接种96孔板。

4)、设置空白对照组，组合药组(FF)(15.625ug/ml，31.25ug/ml，62.5ug/ml，125ug/ml，250mg/ml，500mg/ml)与阳性对照组刀豆素A(ConA 5ug/ml)，置标准体系培养箱中培养24h，48h，用MTT法测定细胞增殖情况；组合药组(FF)为实施例1的方法制备的药品。

6)、与当归补血汤(DG)比较其对骨髓细胞增殖的影响，当归补血汤的药材按原著比例(黄芪∶当归＝5∶1)，制备方法同实施例1。

表1  药物组(FF)对骨髓细胞增殖的影响(用药单位ug/ml)

*P＜0.01vs空白给药组比较，有显著性的差异

表2药物组(FF)与当归补血汤(DG)比较对骨髓细胞增殖的影响(用药单位ug/ml，培养48小时)

注与当归补血汤比较，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。组合物组的效果与对照组有显着性的差异。即组合物有较好地促骨髓细胞增殖的作用。

2、药物对脾淋巴细胞增殖的影响

1)、ICR小鼠颈椎脱臼处死，75％乙醇浸泡3分钟，取出小鼠置于无菌纸上，左腹侧朝上；在小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏；

2)、在脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织取出脾脏。放入盛有5ml RPMI 1640液的培养皿中；转入无菌操作台，逐次用过量双抗PBS，正常双抗PBS，无双抗PBS，无血清RPMI1640清洗。

3)、将脾脏放置于不锈钢网上，用注射器针芯轻轻研压脾脏，制成单细胞悬液(＜5min)，RPMI1640培养液洗涤离心3次(1000rpm，5min)，定容至5ml.

4)、将细胞悬液缓缓加到有5ml淋巴细胞分离液的离心管上层，2000rpmg离心20min，采集交界面的有核细胞，无血清RPMI1640培养液洗涤3次，加入10％的FBS，计数细胞密度，按100000/孔接种96孔板。

5)、设置空白对照组，加药组(15.625ug/ml，31.25ug/ml，62.5ug/ml，125ug/ml，250mg/ml，500mg/ml)与阳性对照组(ConA 5ug/ml)，置标准体系培养箱中培养24h，48h，用MTT法测定细胞增殖情况。

表3  药物组对脾淋巴细胞增殖的影响(ug/ml)

P＜0.01vs模型组

表4  该方与当归补血汤组对脾淋巴细胞增殖的影响(ug/ml，培养48小时)

注：与当归补血汤比较，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。与对照组比较组合物组的效果有显着性的差异。即组合物对脾淋巴细胞增殖的效果明显优于当归补血汤组。

实验例2  黄芪鸡血藤水提物抗肿瘤的作用

组合物的水提取物对MCF-7、HT-29细胞株增殖的抑制作用：采用MTT检测组合物水提取物对MCF-7增殖的抑制作用，发现组合物从50-500ug/ml对癌细胞有明显的抑制作用。48小时IC50该组合物为113.03ug/ml；而当归补血汤的作用不明显。HT-29增殖的抑制作用，发现组合物从50-500ug/ml对癌细胞有明显的抑制作用。IC50该组合物与当归补血汤分别为51.28ug/ml，230.45ug/ml。而在相应浓度对人正常乳腺上皮细胞的增殖抑制无明显作用，可见，其对肿瘤细胞的增殖抑制活性较强，对正常细胞增殖无明显抑制作用。

在体测定组合物对移植肿瘤的影响：用移植肿瘤的方法建立乳腺癌动物模型，将肿瘤切成5毫米大小，植入裸鼠体内，分为不给药组(阴性对照)，多西紫杉醇组(Docetaxel阳性对照5mg/kg/w腹腔注射)，多西紫杉醇加当归补血汤(1.2mg/g每天灌胃给药)组，及该组合物组(1mg/g，每天灌胃给药)，对照裸鼠给双蒸水，给药21天。结果显示，乳腺癌荷瘤裸鼠服用药物水提物的肿瘤比对照组组减少了61.74％。当归补血汤与对照组相比其抑制率不明显(28.3％)。

实验也用单纯鸡血藤提取物从50-500ug/ml对肿瘤细胞MCF-7，HT29也有抑制作用，但48小时IC50分别为131.11；73.28ug/ml，说明其作用不如黄芪与鸡血藤的组合物作用强，结果参见表5中的JXT组。

表5  组合物在细胞水平抗肿瘤作用分析

注：黄芪鸡血藤组合物组较当归补血汤组在半数有效率及肿瘤抑制率方面均有显着性的差异，即黄芪鸡血藤组合物组明显优于当归补血汤组；黄芪鸡血藤组合物组也较独的鸡血藤药物组疗效好，但两者间无显着性的差异。

表6  组合物对化疗药物抗白细胞减少的作用(N＝8)

注*与对照组相比P＜0.05

空白模型组(Negative)比较，当归补血汤组与多西紫杉醇比较有显着性的差异，说明当归补血汤并不能有效地逆转化疗药物所致的白细胞降低；而组合物组与空白模型组(Negative)比较无显着性的差异，结果提示该组合物能抗化疗期间白细胞的减少，促进造血，及升白细胞的作用；单味鸡血藤虽能改善化疗白细胞减少的副作用但疗效不如组合物。

该组合物具有明确的补气养血，增强机体的免疫功能，具有治疗与辅助治疗肿瘤的作用，且疗效优于当归补血汤及单用鸡血藤。

实验例3  黄芪与鸡血藤组方优化研究

根据组合物提取物的作用特点，以组合物对脾细胞的促进作用为指标，用单因素对该组合物的组方比例进行筛选。实验如下：

参实施例1的方法取，对不同比例的组合物进行水提取，比例用黄芪：鸡血藤分别为5∶1；5∶2；5∶3，经粉碎后，用8-10倍原料干重的纯净水加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，过滤，减压浓缩，得浸膏。将上述浸膏进行冷冻干燥，得药粉。

将用上述药粉进行脾细胞刺激实验，方法参照实验例1，考察黄芪，鸡血藤不同比例组合药物对对促进细胞增殖的作用。结果显示5∶3的比例组合物作用较强。

表7  不同比例组合物对脾淋巴细胞增殖的影响(ug/ml，48hours)

注：对组合物药味之间不同比例的研究表明当黄芪与鸡血藤比值为5∶3时具有较好的促脾淋巴细胞增殖的作用。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

具体实施方式

实施例1：

黄芪，鸡血藤药材，按5∶3的比例组合，经粉碎后，用8-10倍原料干重的纯净水加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，过滤，减压浓缩，得浸膏。将用上述浸膏置喷雾干燥，其收率为10.2-11.0％；并用干法制粒，得冲剂。

实施例2：

黄芪500g、鸡血藤200g；

黄芪，鸡血藤药材混合，经粉碎后，用8-10倍原料干重的纯净水加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，过滤，减压浓缩，得浸膏，将用上述浸膏置喷雾干燥，其收率为10.2-11.0％，并用干法制粒，得冲剂。

实施例3：

黄芪500g、鸡血藤300g；

黄芪，鸡血藤药材混合，经粉碎后，用8-10倍原料干重的纯净水加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，过滤，减压浓缩，得浸膏，将用上述浸膏置喷雾干燥，其收率为10.2-11.0％，并用干法制粒，得冲剂。

实施例4：

黄芪500g、鸡血藤300g；

黄芪，鸡血藤药材混合，经粉碎后，30％乙醇、4倍量提取1小时，经常规工艺制成胶囊剂。

实施例5：

黄芪水提取物50g、鸡血藤水提取物20g；

经常规工艺制成胶囊剂。

实施例6：

黄芪醇提取物50g、鸡血藤醇提取物30g；

经常规工艺制成缓释制剂。

实施例7：

黄芪水提取物50g、鸡血藤醇提取物30g。

经常规工艺制成滴丸剂。

实施例8：

黄芪醇提取物50g、鸡血藤水提过柱精致物30g；

经常规工艺制成缓释制剂。

实施例9：

黄芪醇提过柱精致物50g、鸡血藤醇提取物30g。

经常规工艺制成滴丸剂。

实施例10：

黄芪水提过柱精致物50g、鸡血藤水提过柱精致物20g；

经常规工艺制成胶囊剂。

Claims (6)

1.一种益气养血，治疗或辅助治疗肿瘤的中药组合物，其特征在于该组合物的原料药组成为：

黄芪5-8重量份  鸡血藤  1-5重量份。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物的原料药组成为：

黄芪5重量份  鸡血藤  3重量份。

3.如权利要求1或2所述的中药组合物制备方法，其特征在于所述组合物的原料药经常规工艺提取后加入药学可接受的辅料制成药剂学可接受的任意剂型。

4.一种益气养血，治疗或辅助治疗肿瘤的中药组合物，其特征在于该组合物的原料药组成为：

黄芪提取物5-8重量份  鸡血藤提取物  1-5重量份。

5.如权利要求1、2、4任一所述的中药组合物在制备促进造血和/或提高免疫力药物中的应用。

6.如权利要求1、2、4任一所述的中药组合物在制备预防、治疗或辅助治疗肿瘤药物中的应用。