CN102451183A - 一种孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，包括孕甾双烯醇酮类化合物或含有它们中任何一种的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用，以及含有该化合物或组合物的片剂、注射剂、胶囊剂、口服液等任何一种药学上可接受的剂型在制备抗肿瘤药物中的应用。通过体外研究表明孕甾双烯醇酮类对肿瘤细胞具有细胞毒作用，动物实验证明其具有明显抗肿瘤作用。

Description

一种孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤是当前危害人类健康的重要疾病，手术、化疗及放疗是治疗恶性肿瘤的三大传统疗法，但恶性肿瘤术后复发率一直居高不下，化疗及放疗对患者的毒性及副作用较大，对恶性肿瘤的疗效有限，如何寻找治疗恶性肿瘤更有效的手段或方法是摆在我们人类面前的重要课题。

目前用于治疗恶性肿瘤的有效药物太少，大多数药物不是疗效不好就是毒性太大，寻找疗效好、毒性低的抗肿瘤药物是战胜恶性肿瘤的重要手段之一。孕甾双烯醇酮类化合物为甾体激素类结构的中间体，可制造皮质激素、蛋白同化激素类，雄性激素、雌性激素类、黄体激素类的药物。该类化合物中的16-妊娠双烯醇酮及其醋酸酯国内有市售化学品，主要用于制造甾体激素药物中间体，可制成可的松、泼尼松、黄体酮、睾丸素等激素药物。文献报道16-妊娠双烯醇酮是一种活性较强的17α-hydroxylase及15α-reductase酶抑制剂，另有专利报道16-妊娠双烯醇酮在正常人和高血脂患者体内有显著的降血脂作用(USpatent，1999，99302556.8)。目前未见该类化合物用于制备抗肿瘤药物的研究报道。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明所涉及的孕甾双烯醇酮类化合物，其结构式如(I)所示。

其中R₁是-OH，-OCOCH₃，羰基

R₂是H，-OH，羰基

R₃是H，-OH，-CH₃，-CH₂CH₃

R₄是H，-OH，-F，-Cl，-CH₃，-CH₂CH₃

在以上定义中，含3个碳原子的烷基，可以是直链或支链。

式(I)化合物可以以光学异构体或同分异构体的形式存在，在每种情形，本发明将混合物和分开的个别异构体都包括在内。

其中优选的化合物包括：16-妊娠双烯醇酮，16-妊娠双烯醇酮醋酸酯。

本发明还涉及孕甾双烯醇酮类化合物的药物组合物，其药物组合物指式(I)化合物与其他任何活性或非活性成分配伍形成的组合物。

本发明还涉及孕甾双烯醇酮类化合物的药物组合物制成的片剂、胶囊剂、注射剂、口服液体制剂等任何药学上可接受的制剂。

片剂含有重量比为5～95％的16-妊娠双烯醇酮，5～95％的药用辅料，优选重量比为20～60％的16-妊娠双烯醇酮，40～80％的药用辅料，辅料包括乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉及硬脂酸镁等药学上可使用的任何辅料中的一种或多种。

注射剂包括16-妊娠双烯醇酮及溶剂。使用的溶剂包括水、甘油、丙二醇、聚乙二醇、豆油、花生油、橄榄油等药学上可使用的任何溶剂中的一种或多种。

我们通过对结构已知的孕甾双烯醇酮类化合物研究发现，此类化合物体外具有明显的细胞毒活性，体内具有较强的抗肿瘤活性。

为证明式(I)化合物的抗肿瘤活性，我们对16-妊娠双烯醇酮(购于上海翔辉精细化工有限公司)和16-妊娠双烯醇酮醋酸酯(购于陕西春滋工贸有限公司)采用MTT法进行了体外抗肿瘤试验；且对16-妊娠双烯醇酮和16-妊娠双烯醇酮醋酸酯进行体内抗肿瘤试验。

结果表明：16-妊娠双烯醇酮和16-妊娠双烯醇酮醋酸酯对荷S₁₈₀及H₂₂肉瘤有明显抑制作用。

附图说明

图116-妊娠双烯醇酮对Hela细胞的抑制作用曲线

图216-妊娠双烯醇酮对SGC-7901细胞的抑制作用曲线

图316-妊娠双烯醇酮对BEL-7402细胞的抑制作用曲线

具体实施方式

实施例1体外抗肿瘤试验方法与结果

采用MTT法，Hela、SGC-7901、BEL-7402细胞用培养液稀释到1×10⁵mL^-1，分别接种于96孔培养板中，每孔100μL，8～12小时后，除去培养液，每孔加不同浓度的药液及空白培养液100μL，每组均设3复孔，37℃、5％CO₂、饱湿条件下培养48小时后，除去培养液及药液，并用PBS洗板后，每孔加入5g.L^-1MTT 10μL和培养液100μL，继续培养4小时后，加二甲基亚砜150μL终止反应，用酶标仪在λ_492nm下测定OD值，用下式计算抑制率。

抑制率＝[(1-用药组平均OD值/对照组平均OD值)]×100％

实验结果表明：16-妊娠双烯醇酮和16-妊娠双烯醇酮醋酸酯对Hela，SGC-7901，BEL-7402三种肿瘤细胞均有较强的抑制作用(结果见表1)，且呈剂量-效应和时间-效应依赖关系，以16-妊娠双烯醇酮为例见附图1，附图2，附图3(16-妊娠双烯醇酮浓度为2，10，50μg/ml，作用时间为6，12，24，48，72小时)。

表1体外抗肿瘤试验结果

实施例2体内抗肿瘤试验方法与结果

选择腹腔接种7～9天，生长良好的荷S₁₈₀肉瘤(或H₂₂)细胞株的小鼠，断颈处死，无菌抽取腹水，再用无菌生理盐水稀释成1×10⁷mL^-1瘤细胞悬液。在无菌条件下，于健康小鼠右前肢腋部皮下接种瘤液，每只0.2mL。接种次日，按体重随机分组腹腔注射给药，每日1次，连续10天。阴性对照组腹腔注射等体积无菌生理盐水，阳性对照组腹腔注射环磷酰胺[20m g·(kg·d)^-1]。16-妊娠双烯醇酮和16-妊娠双烯醇酮醋酸酯高、中、低剂量组分别为5，10，20mg·kg^-1，结果见表2、表3、表4、表5。

实验结果表明，16-妊娠双烯醇酮和16-妊娠双烯醇酮醋酸酯对荷S₁₈₀及H₂₂肉瘤有明显抑制作用。

表216-妊娠双烯醇酮对荷S₁₈₀小鼠肿瘤的抑制作用

表316-妊娠双烯醇酮对荷H₂₂小鼠肿瘤的抑制作用

表416-妊娠双烯醇酮醋酸酯对荷S₁₈₀小鼠肿瘤的抑制作用

表516-妊娠双烯醇酮醋酸酯对荷H₂₂小鼠肿瘤的抑制作用

(三)片剂的制备

取16-妊娠双烯醇酮150g，微晶纤维素50g，预胶化淀粉45g，低取代羟丙基纤维20g，十二烷基硫酸钠0.5g，混匀，加10％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液适量，制软材，制粒，烘干，加硬脂酸镁适量，整粒，压制1000片。

(四)注射剂的制备

取16-妊娠双烯醇酮150g在加热条件下溶于1000mL聚乙二醇400中得溶液(I)，将大豆卵磷脂20g和泊洛沙姆40g溶解于注射用水中得溶液(II)9000mL，将溶液(I)缓缓加入溶液(II)，搅拌均匀，过滤，灌封(10ml/支)，115℃高压灭菌30分钟，即得注射剂。

Claims (9)

1.孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的孕甾双烯醇酮类化合物具有如下结构式：

其中R₁是-OH，-OCOCH₃，羰基

R₂是H，-OH，羰基

R₃是H，-OH，-CH₃，-CH₂CH₃

R₄是H，-OH，-F，-Cl，-CH₃，-CH₂CH₃

在以上定义中，含3个碳原子的烷基，可以是直链或支链。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的孕甾双烯醇酮类化合物为16-妊娠双烯醇酮或16-妊娠双烯醇酮醋酸酯。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的孕甾双烯醇酮类化合物包括其光学异构体或旋光异构体、该化合物的组合物和制剂。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的组合物为以孕甾双烯醇酮类化合物为主要成分，辅以药学上接受的赋形剂制备而成。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的制剂为以该化合物的组合物为主要成分，与任何一种药学上可接受的载体结合制备片剂、胶囊剂、注射剂、口服液。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的片剂含有重量比为20～60％的16-妊娠双烯醇酮，40～80％的药用辅料。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，药用辅料包括乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉及硬脂酸镁等药学上可使用的任何辅料中的一种或多种。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的注射剂主要含有16-妊娠双烯醇酮、溶剂及助溶剂，所述的溶剂为水、甘油、丙二醇、聚乙二醇、豆油、花生油、橄榄油中的一种或多种，所述的助溶剂选自大豆卵磷脂和泊洛沙姆中的一种或多种。

Images