CN102432592A

CN102432592A - 具有抗肿瘤作用的芳基脲衍生物及其制备方法

Info

Publication number: CN102432592A
Application number: CN2010102974306A
Authority: CN
Inventors: 易崇勤; 王振国; 狄维
Original assignee: Peking University Founder Group Co Ltd; PKU International Healthcare Group Co Ltd; PKUCare Pharmaceutical R&D Center
Current assignee: Peking University Founder Group Co Ltd; PKU International Healthcare Group Co Ltd; PKUCare Pharmaceutical R&D Center
Priority date: 2010-09-29
Filing date: 2010-09-29
Publication date: 2012-05-02

Abstract

本发明公开了通式I结构表示的芳基脲衍生物，属于药物化学领域，通式I中取代基的定义见说明书。本发明还公开了通式I化合物的制备方法。本发明化合物具有raf激酶抑制剂的作用，可用于制备治疗肿瘤疾病的药物。

Description

具有抗肿瘤作用的芳基脲衍生物及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一组由通式表示的芳基脲化合物，以及它们的制备方法和作为raf激酶抑制剂的用途。

背景技术

p21ras癌基因是人实质癌发生与发展的主要原因之一，30％癌症患者的该基因发生了突变(Bolton等，Ann.Rep.Med.Chem，1994，29，165-74；Bos.Cancer.Res.1989，49，4682-9)。非突变正常形式ras蛋白是几乎所有组织内由生长因子受体指向的信号传导级联中的关键元素(Avruch等，Trends Biochem.Sci.1994，19，279-83)。生物化学上，ras是一种结合鸟嘌呤核苷酸的蛋白质，GTP结合活性态与GDP结合静息态之间的循环受到ras内源性GTP酶活性和其他调节蛋白的严格控制。癌细胞内的突变ras的内源性GTP酶活性提高，于是，该蛋白质下游效应物，例如raf激酶，发出组成性生长信号。因此造成带有这些突变体的细胞癌性生长(Magnuson等，Semin.Cancer Biol.1994，5，247-53)。已知，通过抑制raf激酶信号通路来抑制活性ras的效应，例如通过给予raf激酶的去活化抗体或共表达显性失活raf激酶或作为raf激酶底物的显性失活MEK，可使转化细胞回复到正常的生长表型(参见；Daum等，Trends Biochem，Sci.1994，19，474-80；Fridman等，J.Biol.Chem.1994，269，30105-8)。Kolch等，(自然，1991，349，426-28)进一步指出，在膜相关癌基因中，以反义RNA抑制raf表达可抑制细胞增殖。与此类似，在体外和体内都发现raf激酶抑制(用反义寡脱氧核苷酸)与多种人肿瘤生长抑制相关(Monia等，Nat.Med.1996，2，668-75)。

近来研究的重点集中在寻找强效的raf激酶抑制剂。临床数据显示信号转导通路中抑制剂类药物与传统化疗药物相比，毒性较低，有专家预计此类药物在未来二十年后将成为癌症治疗的标准治疗药物而广泛应用于临床。芳基脲类化合物常常具有肿瘤信号转导通路中其他激酶的抑制活性，这些激酶包括血管内皮生长因子受体2/3(VEGFR-2、VEGFR-3)、血小板衍生生长因子受体β(PDGFR-β)、KIT、FLT-3、RET。使得此类药物不仅可以抑制肿瘤细胞增生，还可以阻止肿瘤新生血管的生成。这进一步增强了这类化合物抑制肿瘤的临床效果和研究价值。

发明内容

本发明利用药效团模型等计算机辅助药物设计手段建立了芳基脲类化合物的构效关系模型和药物筛选模型，在此基础上设计了一系列全新结构的芳基脲化合物。

本发明的芳基脲化合物作为raf激酶抑制剂，用于人或兽的raf激酶路径抑制，例如，用于治疗由raf激酶介导的肿瘤或细胞癌性生长。具体地说，这些化合物可用于治疗人或动物的癌症，这些癌症例如是黑色素瘤、肝癌、肾癌、急性白血病、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、骨髓异常增生综合症、食管癌、胃肠道癌或间皮瘤等。

因此，本发明涉及通式I的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，A选自碳原子或氮原子；

R1为式a表示的取代或未取代的五元芳杂环，其中，R4、R5、R6各自独立地选自碳原子、氮原子、氧原子、或硫原子，取代基R8、R9、R10各自独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、或C1-4烷氧基；

R2选自氢、羟基、硝基、氨基、C1-4烷基、氟、氯、溴、碘、腈基、C1-4烷氧基、或巯基；

R3选自氢、羟基、硝基、氨基、C1-4烷基、氟、氯、溴、碘、腈基、C1-4烷氧基、或巯基。

R1进一步为式a表示的取代或未取代的五元芳杂环，其中，R4、R5、R6各自独立地选自碳原子、氮原子、或硫原子，取代基R8、R9、R10各自独立地选自氢或甲基；

R1进一步选自：

R2进一步选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基。

R3进一步选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基。进一步的，R3选自氢。

通式I的化合物或其药学上可接受的盐：其中，A选自碳原子或氮原子；R1为式a表示的取代或未取代的五元芳杂环，其中，R4、R5、R6各自独立地选自碳原子、氮原子、或硫原子，取代基R8、R9、R10各自独立地选自氢或甲基；R2选自氢、羟基、硝基、氨基、C1-4烷基、氟、氯、溴、碘、腈基、C1-4烷氧基、或巯基；R3选自氢、羟基、硝基、氨基、C1-4烷基、氟、氯、溴、碘、腈基、C1-4烷氧基、或巯基。

通式I的化合物或其药学上可接受的盐：其中，A选自碳原子或氮原子；R1为式a表示的取代或未取代的五元芳杂环，其中，R4、R5、R6各自独立地选自碳原子、氮原子、或硫原子，取代基R8、R9、R10各自独立地选自氢或甲基；R2选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基。R3选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基。

通式I的化合物或其药学上可接受的盐：其中，A选自碳原子或氮原子；R1为式a表示的取代或未取代的五元芳杂环，其中，R4、R5、R6各自独立地选自碳原子、氮原子、或硫原子，取代基R8、R9、R10各自独立地选自氢或甲基；R2选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基。R3选自氢。

通式I的化合物或其药学上可接受的盐：其中，A选自碳原子或氮原子；R1选自：

R2选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基；

R3选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、腈基、甲氧基、或巯基。

R3选自氢。

R2选自氟；R3选自氢。

本发明通式的化合物及其药学上可接受的盐可以是：

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲氧基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氯苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(氰基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(三氟甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-4-吡唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(4-吡唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-3-吡咯基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲；

1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-4-咪唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲。

本发明的特别优选的化合物是：

本发明所述的药学上可接受的盐包括通式I化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸或苯甲酸。

本发明还包括通式I化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与raf激酶抑制剂有关的疾病的药物中的用途。其中Raf激酶抑制剂有关的疾病是黑色素瘤、肝癌、肾癌、急性白血病、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、骨髓异常增生综合症、食管癌、胃肠道癌或间皮瘤。

本发明的部分化合物的制备方法如下：

本发明的化合物都可以使用上述或类似上述的制备方法制备得到，即使用4-氟-2-氯吡啶为原料，通过取代反应合成吡啶4位取代间位氨基苯醚及其类似物，进一步在吡啶环的2位进行suzuki反应得到2位芳香杂环取代吡啶，最后使4位和2位取代的吡啶的氨基与活化的4-三氟甲基苯胺反应制得目标化合物脲，不同的目标产品可以通过使用不同取代基或取代基位置不同的原料制的，同时活化4-三氟甲基苯胺的制备方法包括：使用光气、二光气、三光气及其光气类似物；使用羰基二咪唑和使用4-硝基氯甲酸苯酯及其类似物。

对映体和非对映体混合物的方法是本领域技术人员所熟悉的。本发明包括任何具有raf激酶抑制活性的、分离的消旋或光学活性形式的通式I化合物。

本发明还包括包含通式I化合物和生理学上认可的载体的药物组合物。本发明化合物可通过注射、吸入或喷洒或直肠，经口、皮肤、胃肠外给予，或以单位制剂剂型给予。“注射给予”包括静脉、肌内、皮下和胃肠外注射，以及应用输液技术。皮肽给药包括外用或透皮给予。一种或多种化合物可与一种或多种药学上认可的无毒载体，以及视需要而定的其他活性成分共存。口服组合物可按照任何药物组合物制造领域已知的合适方法制备。为了改善制剂口感，所述组合物可含一种或多种以下试剂：稀释剂，甜味剂，香料，着色剂和防腐剂。片剂含有活性成分，它们与药学上认可的、适合片剂生产的无毒赋形剂混合。所述赋形剂例如惰性稀释剂，例如碳酸钙，碳酸钠，乳糖，磷酸钙或磷酸钠；粒化剂和崩解剂，例如玉米淀粉或藻酸.粘合剂，例如硬脂酸镁，硬脂酸或滑石粉。片剂可以没有包衣，也可以用已知技术进行包裹，以延迟其在胃肠道内的崩解与吸收，提供长期的持续作用。例如，可采用诸如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯之类延时物质。所述化合物也可以制成固体，快释形式。口服制剂还可以是硬明胶胶囊，其中的活性成分与例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土等惰性固体稀释剂相混合，或者是软明胶胶囊，其中的活性成分与水或例如花生油、液体石蜡或橄榄油等油混合。

也可使用含有活性物质与适合制造水性悬浮液的赋形剂混合的水性悬浮液。所述赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟基丙基-甲基纤维素，藻酸钠，聚乙烯基吡咯烷酮，西黄耆胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可以是天然磷脂，例如卵磷脂，或环氧乙烷与脂肪酸的缩合产物，例如硬脂酸聚氧乙烯酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七氧乙烯十六烷醇，或环氧乙烷与脂肪酸与己糖醇所成偏酯的缩合产物，例如单油酸聚氧乙烯山梨醇酯。水性悬浮液还可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种香料，和一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。适合加水成为水性悬浮液的可分散粉末或颗粒中，活性成分与分散剂或润湿剂，悬浮剂和一种或多种防腐剂混合。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂可以上文所述为例。还可以含其他赋形剂，例如甜味剂，香料和着色剂。

本发明药物组合物的形式还可以是非水性液体制剂，例如油性悬浮液，这可以通过将活性成分悬浮在花生油、橄榄油、芝麻油或花生油等植物油或诸如液体石蜡等矿物油中来配制。该油性悬浮液可含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。为了改善口感，可加入上述甜味剂和香料。所述组合物可通过添加诸如抗坏血酸等抗氧化剂来保质。

本发明药物组合物的形式还可以是水包油乳液。油相可以是诸如橄榄油或花生油等植物油或例如液体蜂蜡等矿物油，或它们的混合物。合适的乳化剂可以是西黄耆胶和阿拉伯树胶等天然树胶，或天然磷脂，例如大豆卵磷脂或卵磷脂：脂肪酸与脱水己糖醇形成的偏酯，例如但油酸脱水山梨醇醋；所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如单油酸聚氧乙烯脱水山梨醇酯。所述乳液还可含有甜味剂和香料。

也可用例如甘油、聚丙二醇、山梨醇或蔗糖等甜味剂配制糖浆剂。这类制剂还可含有润药，防腐剂和香料及着色剂。

所述化合物还可以栓剂的形式用于直肠或阴道给药。这类组合物可通过将药物与合适的无刺激赋形剂混合来制备，所述赋形剂常温下是固态，但在直肠温度或阴道温度是液态，因此，它会在直肠或阴道内融化而释放出药物。这样的材料包括可可脂和聚乙二醇。

本发明所有使用通式I化合物的治疗方案中，每日口服剂量以0.01-400mg/kg体重为佳。注射，包括静脉、肌内、皮下和胃肠外注射和应用输入技术的每日剂量以0.01-400mg/kg体重为佳。直肠给药的日剂量以0.01-400mg/kg体重为佳。外用的每日剂量以每日1至4次为佳，每次0.01-400mg/kg为佳。吸入的每日剂量以0.01-400mg/kg体重为佳。

具体的给药方式取决于多种因素，这些都是在常规给药时常考虑的。然而，特定患者的具体剂量取决于包括所用具体化合物的活性、患者年龄、患者体重、患者总体健康状况、患者性别、患者饮食、给药时间、给药途径、排出速度、药物组合和当前所治病情的严重程度等多种因素。

在本发明说明书和权利要求中，化合物的命名都是依据化学结构式，如果表示同一化合物时化合物的命名与化学结构式不符，以化学结构式或化学反应式为准。

现结合实施例，对本发明作进一步描述：

具体实施方式

实施例1：

1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成

1a：2-氯-4-(3-氨基-4-氟苯氧基)吡啶的合成

将3-氨基-4-氟苯酚19.3g(152mmol)溶于120mL的无水二甲基亚砜(DMSO)中，氮气保护下加入17.5g(156mmol)的叔丁醇钾，反应液在室温下搅拌30分钟后，将溶于30mL DMSO中的20.0g(152mmol)的2-氯-4-氟吡啶溶液滴加到上述反应液中，30分钟后滴加完毕，将此反应液缓慢升温到80度继续反应4小时，此时，薄层板(TLC)检测原料已全部反应完毕。反应液冷却到室温后，将100mL的水和200mL的乙酸乙酯加入到反应液中，分出有机层，水层继续使用100mL乙酸乙酯萃取两次，有机层合并后使用100mL水洗涤一次，饱和氯化钠水洗涤一次，无水硫酸钠干燥后，蒸除溶剂，粗产品使用柱层析纯化后得到26.5g(111mmol)类白色固体，产率为73.0％，LC-MS[M+H]239；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.28(d，1H)，7.16-7.02(m，1H)，7.00-6.88(m，2H)，6.53(dd，1H)，6.36-6.24(m，1H)，5.46(s，2H)。

1b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

氮气保护下，将23.8g(100mmol)的2-氯-4-(3-氨基-4-氟苯氧基)吡啶和25.0g(120mmol)1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯溶于200mL的四氢呋喃(THF)中，搅拌下将41.5g(300mmol)的碳酸钾(K₂CO₃)和70mL的水加入的上述反应液，然后将5.80g(5.0mmol)的四三苯基磷钯加入。反应液缓慢升温到80度，继续搅拌15小时，TLC检测原料已全部反应完毕。冷却到室温后，将反应液浓缩，然后加入200mL水和300mL的乙酸乙酯，分出有机相后，将水层再用乙酸乙酯萃取2次，合并有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥后，解压蒸出溶剂。粗产品使用柱层析纯化得到20.8g(73.0mmol)的淡黄色油状物，低温放置后变为黄色固体，产率为73.0％，LC-MS[M+H]285；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.39(d，1H)，7.89(d，2H)，7.12-6.94(m，2H)，6.65(dd，1H)，6.54(dd，1H)，6.50-6.37(m，1H)，3.95(s，4H)，3.88(s，2H)。

1c：4-三氟甲基苯异氰酸酯的合成

冰水浴下，将14.8g(50mmol)的三光气溶于100mL乙酸乙酯中，搅拌下缓慢将16.1g(100mmol)4-三氟甲基苯胺的50mL乙酸乙酯溶液滴入，大概需要30分钟。将反应液的温度缓慢升高，保持回流状态2小时，TLC检测原料反应完毕，降至室温后，将溶剂减压蒸出，得淡黄色液体，产品不需纯化直接用于下一步反应；

1d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

将15.0g(53mmol)的3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)苯胺溶于二氯甲烷(DCM)中，氮气保护下，将溶于DCM中的9.92g的4-三氟甲基苯异氰酸酯缓慢滴入，滴加完毕后，室温下继续搅拌2小时，有大量固体析出，过滤后，使用乙醇进行重结晶，得到17.8g(37.7mmol)白色固体，产率为71.2％，LC-MS[M+H]488。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.87(s，1H)，9.08(s，1H)，8.48(d，2H)，8.17(s，1H)，8.08(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.49(s，1H)，7.44(t，1H)，6.93(d，2H)，3.90(s，3H)。

实施例2：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

2a：2-氯-4-(3-氨基-4-(甲基)苯氧基)吡啶的合成

合成方法同1a，使用的原料为2-氯-4-氟吡啶和3-氨基-4-甲基苯酚。产品为白色固体，产率为86.0％，LC-MS[M+H]235。

2b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]281。

2c与1c相同；

2d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为2b和1c，产品为类白色固体，产率为86.4％，LC-MS[M+H]468。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.85(s，1H)，9.06(s，1H)，8.46(d，2H)，8.15(s，1H)，8.07(dd，1H)，7.62(s，4H)，7.49(s，1H)，7.24(t，1H)，6.83(d，1H)，6.72(d，1H)，3.90(s，3H)，2.95(s，3H)。

实施例3：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲氧基)苯基)脲

3a：2-氯-4-(3-氨基-4-(甲氧基)苯氧基)吡啶的合成

合成方法同1a，使用的原料为2-氯-4-氟吡啶和3-氨基-4-甲氧基苯酚。产品为类白色固体，产率为91.2％，LC-MS[M+H]251。

3b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-甲氧基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为89.0％，LC-MS[M+H]297。

3c与1c相同；

3d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲氧基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为3b和1c，产品为类白色固体，产率为87.0％，LC-MS[M+H]484。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.87(s，1H)，9.08(s，1H)，8.45(d，2H)，8.14(s，1H)，8.06(dd，1H)，7.61(s，4H)，7.45(s，1H)，7.27(t，1H)，6.85(d，1H)，6.76(d，1H)，3.90(s，3H)，3.65(s，3H)。

实施例4：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氯苯基)脲

4a：2-氯-4-(3-氨基-4-氯苯氧基)吡啶的合成

合成方法同1a，使用的原料为2-氯-4-氟吡啶和3-氨基-4-氯苯酚。产品为类白色固体，产率为70.2％，LC-MS[M+H]255。

4b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氯苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为4a和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为78.0％，LC-MS[M+H]301。

4c与1c相同；

4d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氯苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为4b和1c，产品为类白色固体，产率为80.0％，LC-MS[M+H]488。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.87(s，1H)，9.08(s，1H)，8.48(d，2H)，8.17(s，1H)，8.08(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.45(s，1H)，7.40(t，1H)，6.83(d，1H)，6.81(d，1H)，3.90(s，3H)。

实施例5：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

5a：2-氯-4-(3-氨基-4-(硝基)苯氧基)吡啶的合成

合成方法同1a，使用的原料为2-氯-4-氟吡啶和3-氨基-4-硝基苯酚。产品为类白色固体，产率为72.0％，LC-MS[M+H]266。

5b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-硝基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为5a和1-甲基-4吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]312。

5c与1c相同；

5d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为4b和1c，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]499。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.86(s，1H)，9.08(s，1H)，8.47(d，2H)，8.15(s，1H)，8.08(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.48(s，1H)，7.45(t，1H)，6.98(d，2H)，3.90(s，3H)。

实施例6：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(氰基)苯基)脲

6a：2-氯-4-(3-氨基-4-(氰基)苯氧基)吡啶的合成

合成方法同1a，使用的原料为2-氯-4-氟吡啶和3-氨基-4-氰基苯酚。产品为类白色固体，产率为70.2％，LC-MS[M+H]246。

6b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氰基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为6a和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]292。

6c与1c相同；

6d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(氰基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为6b和1c，产品为类白色固体，产率为77.0％，LC-MS[M+H]479。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.85(s，1H)，9.05(s，1H)，8.45(d，2H)，8.14(s，1H)，8.05(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.45(s，1H)，7.40(t，1H)，6.90(d，2H)，3.90(s，3H)。

实施例7：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(三氟甲基)苯基)脲

7a：2-氯-4-(3-氨基-4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶的合成

合成方法同1a，使用的原料为2-氯-4-氟吡啶和3-氨基-4-三氟甲基苯酚。产品为类白色固体，产率为71.0％，LC-MS[M+H]289。

7b：3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-三氟甲基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为7a和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]335。

7c与1c相同；

7d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(三氟甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为7b和1c，产品为类白色固体，产率为80.0％，LC-MS[M+H]522。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.88(s，1H)，9.10(s，1H)，8.51(d，1H)，8.48(d，1H)，8.19(s，1H)，8.10(dd，1H)，7.65(s，4H)，7.48(s，1H)，7.45(t，1H)，6.98(d，2H)，3.92(s，3H)。

实施例8：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成8a同1a；

8b：3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为1a和4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为产品使为类白色固体，产率为70.0％，LC-MS[M+H]271。

8c同1c；

8d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为8b和1c，产品为产率为71.2％，LC-MS[M+H]458。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.0(br s，1H)，9.80(s，1H)，9.01(s，1H)，8.40(d，2H)，8.13(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.45(s，1H)，7.42(t，1H)，6.90(d，2H)。

实施例9：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成

9a同1a；

9b：3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为1a和1-甲基-3-吡咯硼酸频哪醇酯，产品为产品使为类白色固体，产率为70.0％，LC-MS[M+H]270。

9c同1c；

9d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为9b和1c，产品为产率为71.2％，LC-MS[M+H]457。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.78(s，1H)，9.26(br s，1H)，9.00(s，1H)，8.10(s，1H)，8.00(dd，1H)，7.56(s，4H)，7.42-7.38(m，2H)，7.35-7.31(m，3H)，6.90(d，2H)。

实施例10：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成

10a同1a；

10b：3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为1a和1-甲基-3-吡咯硼酸频哪醇酯，产品为产品使为类白色固体，产率为70.0％，LC-MS[M+H]284。

10c同1c；

10d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为10b和1c，产品为产率为71.2％，LC-MS[M+H]471。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.70(s，1H)，9.00(s，1H)，8.09(s，1H)，8.00(dd，1H)，7.56(s，4H)，7.40-7.36(m，2H)，7.32-7.28(m，3H)，6.90(d，2H)，3.90(s，3H)。

实施例11：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成

11a同1a；

11b：3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为1a和4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为产品使为类白色固体，产率为70.0％，LC-MS[M+H]271。

11c同1c；

11d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为11b和1c，产品为产率为71.2％，LC-MS[M+H]458。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.2(br s，1H)，9.80(s，1H)，9.01(s，1H)，8.13(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.45(s，1H)，7.40-7.36(m，2H)，6.90(d，2H)。

实施例12：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成

12a同1a；

12b：3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为1a和1-甲基-4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为产品使为类白色固体，产率为70.0％，LC-MS[M+H]285；

12c同1c；

12d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为12b和1c，产品为产率为71.2％，LC-MS[M+H]472。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.85(s，1H)，9.06(s，1H)，8.14(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.45(s，1H)，7.40-7.36(m，2H)，6.90(d，2H)，3.92(s，3H)。

实施例13：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲的合成

13a同1a；

13b：3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为1a和3-噻吩硼酸频哪醇酯，产品为产品使为类白色固体，产率为70.0％，LC-MS[M+H]287；

13c同1c；

13d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为13b和1c，产品为产率为71.2％，LC-MS[M+H]474。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.70(s，1H)，9.00(s，1H)，8.05(s，1H)，7.95(dd，1H)，7.46(s，4H)，7.38-7.34(m，2H)，7.28-7.24(m，3H)，6.80(d，2H)。

实施例14：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

14a同2a；

14b：3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]267。

14c与1c相同；

14d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为14b和1c，产品为类白色固体，产率为86.4％，LC-MS[M+H]454。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.9(br s，1H)，9.85(s，1H)，9.06(s，1H)，8.46(d，2H)，8.15(s，1H)，8.07(dd，1H)，7.62(s，4H)，7.49(s，1H)，7.24(t，1H)，6.83(d，1H)，6.72(d，1H)，2.95(s，3H)。

实施例15：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

15a同2a；

15b：3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和1-甲基-4-吡咯硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]280；

15c与1c相同；

15d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为15b和1c，产品为类白色固体，产率为86.4％，LC-MS[M+H]467。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.80(s，1H)，9.03(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.52(s，4H)，7.42-7.38(m，2H)，7.20-7.16(m，3H)，6.80(d，1H)，6.68(d，1H)，3.92(s，3H)，2.95(s，3H)。

实施例16：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

16a同2a；

16b：3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]267。

16c与1c相同；

16d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为16b和1c，产品为类白色固体，产率为86.4％，LC-MS[M+H]454。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.5(br s，1H)，9.85(s，1H)，9.06(s，1H)，8.46(d，2H)，8.15(s，1H)，8.07(dd，1H)，7.62(s，4H)，7.49(s，1H)，7.24(t，1H)，6.83(d，1H)，6.72(d，1H)，2.95(s，3H)。

实施例17：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

17a同2a；

17b：3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和1-甲基-4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]281；

17c与1c相同；

17d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为16b和1c，产品为类白色固体，产率为86.4％，LC-MS[M+H]468。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.83(s，1H)，9.05(s，1H)，8.45(d，1H)，8.43(d，1H)，8.15(s，1H)，8.07(dd，1H)，7.62(s，4H)，7.49(s，1H)，7.24(t，1H)，6.83(d，1H)，6.72(d，1H)，3.95(s，3H)，2.95(s，3H)。

实施例18：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

18a同2a；

18b：3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为2a和3-噻吩硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]283。

18c与1c相同；

18d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-噻吩基)-4-吡啶氧基)-6-(甲基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为18b和1c，产品为类白色固体，产率为86.4％，LC-MS[M+H]470。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.80(s，1H)，9.02(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.58(s，4H)，7.38-7.34(m，3H)，7.20-7.17(m，2H)，6.78(d，1H)，6.68(d，1H)，2.95(s，3H).

实施例19：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

19a同5a；

19b：3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-硝基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为5a和4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]298。

19c与1c相同；

19d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为19b和1c，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]485。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.10(br s，1H)，9.86(s，1H)，9，08(s，1H)，8.47(d，2H)，8.15(s，1H)，8.08(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.48(s，1H)，7.45(t，1H)，6.98(d，2H)。

实施例20：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

20a同5a；

20b：3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-硝基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为5a和1-甲基-3-吡咯硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]311。

20c与1c相同；

20d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为20b和1c，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]498。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.80(s，1H)，9.02(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.42-7.37(m，3H)，7.32-7.28(t，2H)，6.80(d，2H)，3.90(s，3H)。

实施例21：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

21a同5a；

21b：3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-硝基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为5a和3-吡咯硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]297；

21c与1c相同；

21d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(3-吡咯基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为21b和1c，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-M5[M+H]484。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.9(br s，1H)，9.79(s，1H)，9.02(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.44-7.38(m，3H)，7.34-7.30(t，2H)，6.80(d，2H)。

实施例22：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

22a同5a；

22b：3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-硝基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为5a和1-甲基-4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]312；

22c与1c相同；

22d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(1-甲基-4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为22b和1c，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]499。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.86(s，1H)，9.08(s，1H)，8.54(d，1H)，8.46(d，1H)，8.15(s，1H)，8.08(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.48(s，1H)，7.45(t，1H)，6.98(d，2H)，3.90(s，3H)。

实施例23：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

23a同5a；

23b：3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-硝基苯胺的合成

合成方法同1b，使用的原料为5a和4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为类白色固体，产率为81.0％，LC-MS[M+H]298；

23c与1c相同；

23d：1-(4-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(4-咪唑基)-4-吡啶氧基)-6-(硝基)苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为23b和1c，产品为类白色固体，产率为76.0％，LC-MS[M+H]485。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.10(br s，1H)，9.87(s，1H)，9.10(s，1H)，8.55(d，1H)，8.48(d，1H)，8.18(s，1H)，8.10(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.48(s，1H)，7.45(t，1H)，6.99(d，2H)。

实施例24：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-4-吡唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

24a：4-(1-甲基-4-吡唑基)-6-氯嘧啶的合成

将4，6-二氯嘧啶14.9g(100mmol)和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯20.8g(100mmol)溶于350mL四氢呋喃和80mL的水中，搅拌下用氮气将溶液中的氧气除去，然后将21.2g(200mmol)的碳酸钠加入，搅拌10分钟后，将催化剂二(三苯基磷)二氯化钯2.1g(3.0mmol)加入到上述溶液中。反应液在室温下反应20分钟后，缓慢升温到70度，并保持2小时，薄层板显示没有原料后，将温度降至室温，然后，将溶剂浓缩后加入200mL乙酸乙酯，此有机层用50mL水洗涤后，再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压除去溶剂。相产品使用柱层析纯化后得16.7g(86.0mmol)白色固体，产率86.0％，LC-MS[M+H]195。¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ8.85(d，1H)，8.04(s，1H)，8.01(s，1H)，7.40(d，1H)，3.98(s，3H)。

24b：4-(1-甲基-4-吡唑基)-6-(3-氨基-4-氟-苯氧基)嘧啶的合成

将3-氨基-4-氟苯酚9.82g(77.3mmol)溶于120mL的无水二甲基亚砜(DMSO)中，氮气保护下加入8.90g(79.3mmol)的叔丁醇钾，反应液在室温下搅拌30分钟后，将溶于50mL DMSO中的15.0g(77.3mmol)的4-(1-甲基-4-吡唑基)-6-氯嘧啶溶液滴加到上述反应液中，30分钟后滴加完毕，将此反应继续在室温下搅拌2.5小时，此时，薄层板(TLC)检测原料已全部反应完毕。将80mL的水和200mL的乙酸乙酯加入到反应液中，分出有机层，水层继续使用100mL乙酸乙酯萃取两次，有机层合并后使用100mL水洗涤一次，饱和氯化钠水洗涤一次，无水硫酸钠干燥后，蒸除溶剂，粗产品使用柱层析纯化后得到15.6g(54.9mmol)类白色固体，产率为71.0％，LC-MS[M+H]286。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ8.64(d，1H)，8.45(s，1H)，8.13(s，1H)，7.26(d，1H)7.00(dd，1H)，6.54(dd，1H)，6.29(m，1H)，5.35(bs，2H)，3.90(s，3H)。

24c同1c；

24d：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-4-吡唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为24b和1c，产品为类白色固体，产率为75.0％，LC-MS[M+H]473。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.52(s，1H)，8.85(s，1H)，8.65(s，1H)，8.48(s，1H)，8.17(s，1H)，8.03(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.46-7.25(m，2H)，6.91(dd，1H)，3.91(s，3H)。

实施例25：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(4-吡唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

25a：4-(4-吡唑基)-6-氯嘧啶的合成

合成方法同24a，使用的原料为4，6-二氯嘧啶和4-吡唑硼酸频哪醇酯，产品为白色固体，产率72.6％，LC-MS[M+H]181。

25b：4-(4-吡唑基)-6-(3-氨基-4-氟-苯氧基)嘧啶的合成

合成方法同24b，使用的原料为25a和3-氨基-4-氟苯酚，产品为白色固体，产率72.6％，，LC-MS[M+H]272。

25c同1c；

25d：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(4-吡唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为25b和1c，产品为类白色固体，产率为75.0％，LC-MS[M+H]459，¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.9(br s，1H)，9.52(s，1H)，8.85(s，1H)，8.65(s，1H)，8.48(s，1H)，8.17(s，1H)，8.03(dd，1H)，7.64(s，4H)，7.46-7.25(m，2H)，6.91(dd，1H)。

实施例26：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-3-吡咯基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

26a：4-(1-甲基-3-吡咯基)-6-氯嘧啶的合成

合成方法同24a，使用的原料为4，6-二氯嘧啶和1-甲基-3-吡咯硼酸频哪醇酯，产品为白色固体，产率72.6％，LC-MS[M+H]194。

26b：4-(1-甲基-3-吡咯基)-6-(3-氨基-4-氟-苯氧基)嘧啶的合成

合成方法同24b，使用的原料为26a和3-氨基-4-氟苯酚，产品为白色固体，产率72.6％，，LC-MS[M+H]285。

26c同1c；

26d：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-3-吡咯基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为25b和1c，产品为类白色固体，产率为75.0％，LC-MS[M+H]472。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.50(s，1H)，8.81(s，1H)，8.60(s，1H)，8.45(s，1H)，8.00(dd，1H)，7.48(s，4H)，7.43-7.38(m，2H)，7.32-7.28(m，2H)，6.81(dd，1H)，3.90(s，3H)。

实施例27：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-4-咪唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

27a：4-(1-甲基-4-咪唑基)-6-氯嘧啶的合成

合成方法同24a，使用的原料为4，6-二氯嘧啶和1-甲基-4-咪唑硼酸频哪醇酯，产品为白色固体，产率72.6％，LC-MS[M+H]195。

27b：4-(1-甲基-4-咪唑基)-6-(3-氨基-4-氟-苯氧基)嘧啶的合成

合成方法同24b，使用的原料为27a和3-氨基-4-氟苯酚，产品为白色固体，产率72.6％，，LC-MS[M+H]286；

27c同1c；

27d：1-(4-(三氟甲基)-苯基)-3-(3-(6-(1-甲基-4-咪唑基)-4-嘧啶氧基)-6-氟-苯基)脲

合成方法同1d，使用的原料为27b和1c，产品为类白色固体，产率为75.0％，LC-MS[M+H]473。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.50(s，1H)，8.83(s，1H)，8.64(s，1H)，8.47(s，1H)，8.32(s，1H)，8.05(dd，1H)，7.60(s，4H)，7.46-7.35(m，2H)，6.91(dd，1H)，3.91(s，3H)。

实验例1：体外raf筛选

通过提供ATP、MEK底物，并测定磷酸部分向MEK残基的转移可测定raf丝氨酸/苏氨酸激酶的各种同种型的活性。通过从人raf重组杆状病毒表达载体感染的sf9昆虫细胞进行纯化，得到raf重组同种型体。重组的激酶失活MEK在大肠杆菌中表达，纯化后用生物素标记。对于各测定，将试验化合物连续在DMSO中稀释，然后在反应缓冲液及ATP(1uM)中与raf(0.50nM)和激酶失活生物素-MEK(50nM)混合。在室温下，反应物继续培育2小时，并通过加入0.5M EDTA停止。将停止的反应混合物转移到涂布neutradavin板(pierce)，并培育1小时。使用兔抗-p-MEK(Cell Signaling)作为第一抗体以及铕标记的抗-兔作为第二抗体，通过DELFIA时间-分辨荧光系统(Wallac)测量磷酸化产物。时间分辨荧光在Wallac 1232 DELFIA荧光计上读出。使用XL拟合数据分析软件通过非线性回归计算各化合物50％抑制(IC50)的浓缩。

使用上述步骤，实施例1-27的化合物均显示具有raf激酶抑制活性，IC50小于5μM。

实验例2：本发明化合物抑制ACHN肾癌生长的研究

1材料与方法

1.1实验材料

雌性BALB/c-nu/nu裸小鼠，4周龄，平均体重13.1g(12.1-15.2)g。ACHN肾癌细胞株购自美国典型物种保藏中心(ATCC)。

1.2实验方法

将ACHN肾癌细胞2.0×106/0.2ml接种于每只裸鼠右侧背部皮下，按体重编号将16只裸小鼠随机分成用药组和对照组。两组体重无显著差异。接种后第3天起，开始隔日给药，用药组给予实施例1化合物(60mg/kg)，对照组给予实施例1化合物溶剂(3％无水乙醇+97％生理盐水)。远离肿瘤皮下注射，每次每只0.2ml。给药期间观察小鼠一般情况，隔日测量小鼠体重，肿瘤大小，肿瘤体积用公式：V＝1/2×a×b2，(a为长径，b为短径)。接种第31天，断颈处死小鼠，解剖前测量肿瘤体积、称鼠重。解剖皮下肿瘤并称重，切取小鼠肺。FAA(冰醋酸+福尔马林+乙醇)固定皮下肿瘤及鼠肺，石蜡包埋。再次计算鼠重(鼠重＝带瘤鼠重-瘤重)。双肺冠状面之最大切面HE染色，显微镜下(100倍视野)计数肺转移结节。

1.3统计学处理

两组间瘤重、体积、鼠重用t检验，肿瘤体积生长曲线用SAS协方差分析，肺转移结节数用精确概率法检验。

2结果

2.1皮下瘤重及肿瘤体积变化

接种第31天时，两组皮下瘤重分别为612.68±116.35mg和257.49±52.91mg，用药组瘤重明显低于对照组(p＜0.01)。31d时，两组皮下瘤体积分别为309.74±54.72mm3和113.26±46.96mm3(p＜0.01)。两组瘤体积-时间变化见表1：

表1：肿瘤体积-时间变化

表1结果表明，用药组肿瘤体积增长显著低于对照组。

2.2肺转移结节

对照组8只鼠中6只发生肺转移，2只为1个转移结节，其余为3-5个转移结节，用药组未发现肺转移结节。经精确概率法检验两组差异有显著性意义(p＜0.05)。对照组不仅转移率高，而且转移结节数也较多。

2.3用药期间副作用观察

用药期间，各小鼠活动良好，未见腹泻等不良反应。

3实验结论

本发明化合物用药组瘤重明显低于对照组，具有统计学意义(p＜0.01)，用药组肿瘤体积增长显著低于对照组，本发明化合物具有明显的肿瘤生长的作用，本发明化合物明显抑制肿瘤转移的发生率，并且，本发明化合物具有较低的毒副作用。

Claims

1.通式I的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，A选自碳原子或氮原子；

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，A选自碳原子；

R1为式a表示的取代或未取代的五元芳杂环，其中，R4、R5、R6各自独立地选自碳原子、氮原子、或硫原子，取代基R8、R9、R10各自独立地选自氢或甲基；

R2选自氢、羟基、硝基、氨基、甲基、氟、氯、溴、碘、睛基、甲氧基、或巯基；

3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R3选自氢。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R1选自：

5.根据权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R1选自：

6.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，A选自氮原子；

7.根据权利要求6所述的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R3选自氢。

8.根据权利要求6或7所述的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R1选自：

9.根据权利要求1或2或6中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R1选自：

R3选自氢。

10.根据权利要求1或2或6中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R1选自：

R2选自氟；R3选自氢。

11.根据权利要求1或2或6中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，选自：

12.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，它是：

13.权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐的制备方法为，使用4-氟-2-氯吡啶为原料，通过取代反应合成吡啶4位取代间位氨基苯醚，进一步在吡啶环的2位进行suzuki反应得到2位芳香杂环取代吡啶，最后使4位和2位取代的吡啶的氨基与活化的4-三氟甲基苯胺反应制得目标化合物脲。

14.根据权利要求13所述的制备方法，其中，活化4-三氟甲基苯胺的制备方法为：使用光气、二光气、三光气、羰基二咪唑、或4-硝基氯甲酸苯酯。

15.权利要求12所述化合物或其药学上可接受的盐的制备方法为：将3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺溶于二氯甲烷中，氮气保护下，将溶于二氯甲烷中的4-三氟甲基苯异氰酸酯缓慢滴入，滴加完毕后，室温下继续搅拌，有大量固体析出，过滤，乙醇重结晶，即得。

16.根据权利要求15所述的制备方法，其中，所述的3-(2-(1-甲基-4-吡唑基)-4-吡啶氧基)-6-氟苯胺的制备方法为：氮气保护下，将2-氯-4-(3-氨基-4-氟苯氧基)吡啶和1-甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯溶于四氢呋喃中，搅拌下将碳酸钾和水加入上述反应液，然后将四三苯基磷钯加入，反应液缓慢升温到80℃，继续搅拌至反应完毕，冷却到室温后，将反应液浓缩，然后加入水和乙酸乙酯，分出有机相后，将水层再用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压蒸除溶剂，柱层析纯化即得。

17.根据权利要求16所述的制备方法，其中，所述的2-氯-4-(3-氨基-4-氟苯氧基)吡啶的制备方法为：将3-氨基-4-氟苯酚溶于无水二甲基亚砜中，氮气保护下加入叔丁醇钾，反应液在室温下搅拌，将溶于二甲基亚砜中的2-氯-4-氟吡啶溶液滴加到上述反应液中，将此反应液缓慢升温到80℃继续反应至反应完毕，反应液冷却到室温后，将水和乙酸乙酯加入到反应液中，分出有机层，水层继续使用乙酸乙酯萃取，有机层合并后使用水洗涤，饱和氯化钠水洗涤，无水硫酸钠干燥后，蒸除溶剂，柱层析纯化，即得。

18.根据权利要求15所述的制备方法，其中，所述的4-三氟甲基苯异氰酸酯的制备方法为：冰水浴下，将三光气溶于乙酸乙酯中，搅拌下缓慢将4-三氟甲基苯胺的乙酸乙酯溶液滴入，将反应液的温度缓慢升高，保持回流状态至反应完毕，降至室温后，将溶剂减压蒸除即得。

19.权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与raf激酶抑制剂有关的疾病的药物中的用途。

20.根据权利要求19所述的用途，其中raf激酶抑制剂有关的疾病是黑色素瘤、肝癌、肾癌、急性白血病、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、骨髓异常增生综合症、食管癌、胃肠道癌或间皮瘤。