CN102397307A - 一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，该纳米乳组合物粒径在1~100nm之间，由下列质量百分比的原料组成：蛇床子油0.1%～9.0%、丁香酚0.1%～3.5%、双甲脒0.1%～2.0%、表面活性剂20.0%～35.0%、助表面活性剂0.1%～6.0%、余量为蒸馏水，上述原料的质量百分比之和为100%。该复方蛇床子油纳米乳具有杀虫、止痒和杀灭细菌的功效，可以用于动物体表寄生虫（如疥螨、痒螨、蜱、虱等）的治疗。本发明提高了药物的稳定性和生物利用度，减少了药物用量，渗透性好，杀虫范围广，效果显著，且制备方法简单，便于推广应用，在医药领域有广阔的市场前景。

Description

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种可以用于动物体表寄生虫（如疥螨、痒螨、蜱、虱等）治疗的复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物及其制备方法。 

背景技术

螨虫、蜱虫、虱子等是兽医临床上常见的体表寄生虫，常会导致动物皮肤表面潮红、有疹状小结，局部脱毛、发炎、有分泌物和结痂，动物表现奇痒难耐，骚动不安，搔抓、啃咬、摩擦患部皮肤。尽管单纯的体表寄生虫病不会引起动物的死亡，但严重影响了动物的生活质量和生产性能，特别是合并致病性细菌、真菌、病毒等病原体感染时，可能会危及生命。有些寄生虫具有人畜共患性，给人的健康带来威胁。因此，本病不能忽视，需要定期进行预防和及时治疗。 

蛇床子系伞形科一年生草本植物蛇床[Cnidium monnieri(L.) Cusson]的成熟果实，是一味临床常用的具有杀虫止痒、温肾壮阳、祛风燥湿功效的中药材。已知蛇床子具有抗菌，抗病毒，抗变态反应，抗炎抗骨质疏松及补肾壮阳的性激素样作用。临床上主治湿疹瘙痒、肾虚阳痿、宫寒不孕等。从中提取的挥发油即为蛇床子油，临床证明，蛇床子油不但止痒效果显著，本身还具有杀虫的功效，且无毒副作用，可以用于动物体表寄生虫的治疗。 

本发明选用蛇床子油、丁香酚和双甲脒作为组合，是因为蛇床子油是从纯天然植物中提取得到的药用精油，使用安全，无毒副作用，临床实践证明蛇床子油具有极强的止痒效果和杀虫功效，特别针对动物体表的螨、虱等寄生虫效果显著。丁香酚是从桃金娘科植物丁香中提取的挥发油，临床证明丁香酚不但杀菌力很强，还具有局部镇痛和防腐的作用，用在本配方中可以预防和治疗螨虫患部的混合感染，加速疾病康复，其本身也无任何毒副作用，使用安全。双甲脒为新型甲脒类杀虫剂，具有广谱、高效、低毒的特点，对牛、羊、猪、兔，犬的体外寄生虫，如疥螨、痒螨、蜱、虱等各阶段虫体均匀较好的杀灭效果，一次用药能维持药效6~8周，且对人和动物的毒性极小，甚至可用于妊娠、授乳母畜，和蛇床子油配合可以增大本发明的杀虫范围，二者具有协同作用。特别指出对阿维菌素类药敏感的苏格兰（柯利）牧羊犬和喜乐蒂犬，可选用本发明进行治疗，效果理想。 

目前人们对蛇床子油的利用主要局限在原药上，原药虽然有一定疗效，但其外用透皮率低，药物生物利用度不高，其药性未达到充分发挥，杀虫范围有限，病情容易复发。市场上的其他剂型也很少，直接影响了蛇床子油的推广使用。 

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题与缺陷，本发明目的是在于提供一种透皮率高，生物利用度好，稳定性高的用于治疗动物体表寄生虫病的复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物。 实验证明，该组合物安全高效、无毒副作用、疗效持久。 

实现上述发明目的的技术方案是复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，它是由下列质量百分比的物质组成： 

蛇床子油 0.1%～9.0%、丁香酚0.1%～3.5%、双甲脒0.1%～2.0%、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油   20.0%～35.0%、乙醇0.1%～6.0%、余量为蒸馏水，上述总组分为 100%。

本发明复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物的优选配比： 

蛇床子油0.15%～8.6%、丁香酚0.15%～3.2%、双甲脒0.15%～1.9%、表面活性剂23.4%～32.1%、助表面活性剂0.15%～5.5%、余量为蒸馏水， 上述总组分为 100%。

本发明复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物的最佳配比为： 

蛇床子油3.5%、丁香酚3.2%、双甲脒0.5%、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油26.6%、乙醇0.1%、蒸馏水 66.1%。

在表面活性剂的选择上，本发明选用无毒性和生物相容性好的非离子型表面活性剂。非离子型表面活性剂在溶液中比较稳定，不易受强电解质、无机盐类的影响，也不易受酸碱的影响，并且与其他表面活性剂的相容性好，溶血作用较小。理论上，O/W型纳米乳状液的制备需要表面活性剂的HLB值介于8～18之间，考虑到制备工艺的简单性，即纳米乳的易形成性和制备出来的纳米乳的稳定性，本发明选用HLB介于10～15之间的液态非离子型表面活性剂。优选使用聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油。 

本发明所述的助表面活性剂是无水乙醇。纳米乳形成要求有短暂的负表面张力。因此，常需要助表面活性剂的作用。助表面活性剂有三方面作用：协助表面活性剂降低界面张力，降低表面活性剂分子间的排斥力；增加界面流动性，减少纳米乳形成时的界面弯曲能，使纳米乳能自发形成；调节表面活性剂的HLB值，使表面活性剂在油-水界面有较大的吸附。这些要求决定了助表面活性剂必须在油相与界面上都达到一定的浓度。由于醇类表面活性剂可提高载药量、增大药物溶解度，增加纳米乳稳定性，形成的纳米乳区范围大，因此，本组合物优先选用无水乙醇作为助表面活性剂。 

本发明还有一个目的是提供上述复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物的制备方法，具体包括下列步骤： 

1）          称取聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油、蛇床子油、丁香酚、双甲脒、乙醇、蒸馏水，备用；

2）          将所述量的蛇床子油、丁香酚混合搅拌均匀，作为油相；

3）          将所述量的双甲脒加入油相，并搅拌均匀直至其溶解，再加入所述量的乙醇充分搅拌，此时，双甲脒会完全溶解在油相当中；

4）          将所述量的聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油加入到油相当中并搅拌均匀；

5）          将蒸馏水作为水相缓慢滴入油相和聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油混合物中，滴加的同时不断搅拌直至体系呈透明的液体，即得复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物。

本发明经透射电子显微镜检测，液滴直径分布在1～100nm之间，外观为无色或淡黄色的透明液体，具有很好的稳定性: 

1、经时稳定性

经时稳定性是指纳米乳在室温自然变化条件下贮藏时，外观随时间延长而发生变化的程度。该蛇床子油纳米乳组合物经储藏后，经检验外观持久澄清透明，未发现浑浊或沉淀等破乳情况，说明经时稳定性好。

2、热贮稳定性 

将该蛇床子油纳米乳组合物分装于几个玻璃瓶中，密封之后置于50℃恒温箱中贮存15d，每隔5d取样观察。结果表明，该液热贮后检验外观仍保持澄清透明的外观，未发现浑浊或分层等破乳情况，说明热贮稳定性良好。

3、抗冷冻稳定性 

将该蛇床子油纳米乳组合物在冰箱中-10℃保存一周后。恢复至室温。如果纳米乳在-10℃成固体，恢复至室温，经稀释检验后外观仍澄清透明，且放置一周后继续检验，未发现浑浊或沉淀等破乳情况，则认为抗冷冻性好。

4、加速稳定性 

将该蛇床子油纳米乳组合物置于试管，密封，在15000r/min的转速下离心20分钟，没有出现油水分层，经稀释检验后仍澄清透明，未发现浑浊或沉淀等破乳情况。

5、光稳定性实验 

将部分蛇床子油纳米乳组合物装于玻璃瓶中，密封置于日光下，室温光照10d，于1d、3d、5d、10d取样。结果表明，本纳米乳液仍保持澄清透明，无浑浊或分层等破乳情况，表明光稳定性良好。

本发明的复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物具有治疗动物体表寄生虫（如疥螨、痒螨、蜱、虱等）病的功效。 

用法:直接涂抹于患处或稀释后药浴。 

本发明的复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物与现有技术相比，具有以下优点: 

1) 有较高的热力学稳定性。制备的纳米乳在－10℃和50℃之间储存不分相、不沉淀，药物无析出，稳定性提高；

2) 良好的透皮功效。蛇床子油纳米乳组合物乳滴粒径在1~100nm之间，可以透过皮肤杀死在深层组织寄生的螨虫，提高了生物利用度；

3) 降低了原药油的挥发性，延缓蛇床子油的消退时间，药效时间更长；

4) 方法工艺简单，适合规模化生产。

具体实施方式

以下通过药效学试验和对比试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。 

试验例1   复方蛇床子油纳米乳组合物的止痒药效实验 

1实验方法

本实验采用小鼠磷酸组胺致氧法：选取40只健康小白鼠，将其随机分为4组，即阴性对照组、阳性对照组、空白纳米乳组和复方蛇床子油纳米乳组，每组10只。阳性对照组采用白云山牌风油精处理；阴性对照组用等量的生理盐水处理。将各组小鼠的右后足背部脱毛，按0.1ml/cm²的药物剂量均匀涂抹皮肤，2次/d，连续用药5d。实验当天用粗砂纸将每只小鼠的右后足脱毛处擦伤，面积1cm²，然后再用药一次；末次用药30分钟后，在创面出滴加0.01%磷酸组胺生理盐水溶液0.05mL/只，此后每隔5分钟按0.01%、0.02%、0.03%的浓度依次递增磷酸组胺的浓度，每次均为0.05mL，当小鼠出现回头不断舔咬其后足涂药处时即停止，计算所给予的磷酸组胺的总量即为致痒阈值，计算并比较各组用药后的平均致痒阈值。

2实验结果   

表1 复方蛇床子油纳米乳组合物的止痒药效实验

结果表明：复方蛇床子油纳米乳组和阳性对照组相比较，差异显著，对小鼠的止痒效果明显。

试验例2 复方蛇床子油纳米乳与其他制剂治疗动物螨虫病效果对比试验 

选取患有耳螨的成年家兔自然感染病例100例，其病程7~15日之间，主要表现为耳内深部皮肤有结痂，呈黑褐色，严重者可将耳孔堵塞，病兔不断用同侧后脚在耳内搔抓。将患兔随机分为两个治疗组，每组50只。第一组用市场上购买的敌百虫，将其配成3%的溶液涂抹患部，1次/天；第二组用配制的复方蛇床子油纳米乳涂抹患部，方法同上。患兔治疗前，要求对患部清洗消毒，涂抹要均匀，用药期间禁用其他同类外用制剂，疗程为7天。

疗效判定标准： 

痊愈：结痂脱落，皮肤恢复正常，兔子无搔抓表现；

显效：结痂未脱落完全，皮肤接近正常，兔子偶尔仍有搔抓表现；

有效：结痂有部分脱落，皮肤部分恢复，兔子仍有搔抓表现；

无效：结痂基本没脱落，皮肤无改观，症状和治疗前基本没变或者加剧。

表2  3%敌百虫溶液和复方蛇床子油纳米乳治疗兔耳螨药效对比实验 

敌百虫组50例，痊愈19例，痊愈率为38%，显效13例，显效率26%，有效12例，有效率24%，无效6例，无效率12%，总有效率为88%；复方蛇床子油纳米乳组痊愈33例，痊愈率为66%，显效9例，显效率18%，有效7例，有效率14%，无效1例，无效率2%，总有效率98%。从结果可以看出复方蛇床子油纳米乳治疗螨虫的效果优于敌百虫溶液。

以下通过具体实施例来进一步阐述本发明所述药物的组成和制备方法。 

实施例1 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油3.5g、丁香酚3.2g、双甲脒0.5g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油26.6g、乙醇0.1g、蒸馏水66.1g，上述各组分制成复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，包括下列步骤：

1）    按配方准确称取蛇床子油、丁香酚、双甲脒、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油、乙醇、蒸馏水的质量，备用；

2）    将所述量的蛇床子油、丁香酚混合搅拌均匀，作为油相；

3）    将所述量的双甲脒加入油相，并搅拌均匀直至双甲脒溶解，再加入所述量的乙醇充分搅拌，此时，双甲脒会完全溶解在油相当中；

4）    将所述量的聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油加入到油相当中并搅拌均匀；

5）    将蒸馏水作为水相，在室温下迅速搅拌油相和聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油混合物，搅拌的同时缓慢滴加水相，直至体系呈透明的液体，即得复方蛇床子油纳米乳组合物。

实施例2 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油3.1g、丁香酚0.6g、双甲脒0.2g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油27.6g、乙醇5.5g、蒸馏水63.0g。

实施例3 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油2.6g、丁香酚0.7g、双甲脒0.2g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油23.1g、乙醇0.7g、蒸馏水72.7g。

实施例4 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油8.6g、丁香酚0.1g、双甲脒0.1g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油24.9g、乙醇0.1g、蒸馏水66.2g。

实施例5 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油7.9g、丁香酚0.6g、双甲脒1.9g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油23.6g、乙醇1.3g、蒸馏水64.7g。

实施例6 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油0.7g、丁香酚0.7g、双甲脒0.1g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油32.1g、乙醇0.7g、蒸馏水65.7g。

实施例7 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油6.8g、丁香酚0.7g、双甲脒0.2g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油27.2 g、乙醇0.7g、蒸馏水64.4g。

实施例8 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油7.8g、丁香酚1.2g、双甲脒0.3g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油23.4 g、乙醇0.6g、蒸馏水66.7g。

实施例9 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油5.9g、丁香酚0.7g、双甲脒0.3g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油25.0g、乙醇0.7g、蒸馏水67.4g。

实施例10 

一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，各组分的质量：

    蛇床子油2.5g、丁香酚0.6g、双甲脒0.2g、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油27.8g、乙醇0.6g、蒸馏水68.3g。

Claims (4)

1.一种复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，其特征在于，该纳米乳的粒径在1～100nm之间，由下列质量百分比的原料组成：

蛇床子油0.1%～9.0%、丁香酚0.1%～3.5%、双甲脒0.1%～2.0%、表面活性剂20.0%～35.0%、助表面活性剂0.1%～6.0%、余量为蒸馏水，上述原料的质量百分比之和为100%；

所述的表面活性剂是聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油；

所述的助表面活性剂是无水乙醇。

2.根据权利要求1所述的复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，其特征在于，由下列质量百分比的原料组成：

蛇床子油0.15%～8.6%、丁香酚0.15%～3.2%、双甲脒0.15%～1.9%、表面活性剂23.4%～32.1%、助表面活性剂0.15%～5.5%、余量为蒸馏水，上述原料的质量百分比之和为100%。

3.根据权利要求1所述的复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物，其特征在于，由下列质量百分比的原料组成：

蛇床子油3.5%、丁香酚3.0%、双甲脒0.5%、聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油26.6%、乙醇0.1%、蒸馏水66.1%，上述原料的质量百分比之和为100%。

4.权利要求1所述复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物的制备方法，其特征在于，具体包括下列步骤：

称取聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油、蛇床子油、丁香酚、双甲脒、乙醇、蒸馏水，备用；

将蛇床子油、丁香酚混合搅拌均匀，作为油相；

将双甲脒加入油相，并搅拌均匀直至其溶解，再加入所述量的乙醇充分搅拌；

将聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油加入到油相中并搅拌均匀；

将蒸馏水作为水相缓慢滴入油相和聚氧乙烯醚（40）氢化蓖麻油混合物中，滴加的同时不断搅拌直至体系呈透明的液体，即得复方水包油型蛇床子油纳米乳组合物。