CN102372788B - 四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法 - Google Patents
四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102372788B CN102372788B CN 201010261457 CN201010261457A CN102372788B CN 102372788 B CN102372788 B CN 102372788B CN 201010261457 CN201010261457 CN 201010261457 CN 201010261457 A CN201010261457 A CN 201010261457A CN 102372788 B CN102372788 B CN 102372788B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- glycosaminoglycan
- alcohol precipitation
- liquid
- mactra veneriformis
- homogenate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明提供一种四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法，其特征在于将四角蛤蜊软体部分称重，加水制成匀浆液，水料比为3∶1，在匀浆液中加入枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶酶解，枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶比例为4∶3，复合酶添加量为1％，酶解时间为3-5h，将酶解液煮沸离心得清液，加活性炭脱色，真空抽滤，硅藻土助滤，醇沉得粗糖胺聚糖，得率达1.3％以上，配制3％糖液，离心除去酸性、中性蛋白质，上清液经透析后醇沉，配制1％糖液，加入5％十六烷基三甲基溴化铵，离心，将沉淀溶于氯化钾溶液中，得解离液，再醇沉，透析，醇沉获得高纯度糖胺聚糖。该方法反应条件温和、得率及纯度高，在提取糖胺聚糖的同时还可大量回收蛋白质，提取的物质对于清除自由基、抗氧化性及抗凝血具有重要作用，粗糖胺聚糖得率达1.3％以上，糖胺聚糖纯度达95％以上。
Description
技术领域
本发明涉及用于糖胺聚糖的提取方法，特别涉及一种四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法。
背景技术
目前糖胺聚糖的提取方法主要有三种：第一非降解法，指用水或盐溶液从动、植物组织中提取糖胺聚糖的方法；第二碱提取法，基于蛋白多糖中糖肽键对碱的不稳定性，用碱提法使糖与蛋白质分开；第三酶降解法，蛋白酶将蛋白聚糖的蛋白质部分降解使糖链得到分离。三种方法中以酶降解法应用最广泛，关于贝类中的糖胺聚糖提取，已有部分文献报道，但不同贝类中的糖胺聚糖的组成、含量和功能活性不同，从其它贝类糖胺聚糖的提取制备来看，普遍存在得率和纯度较低的缺陷，为此本发明能够弥补以上缺陷。
发明内容
根据以上问题，本发明提供一种以渤海湾常见的低值贝类四角蛤蜊为原材料，提取、分离、纯化糖胺聚糖，并对其功能活性进行阐述，以期为保健品业提供优质保健品，为海珍动物养殖业提供优良的免疫增强剂。四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法，其特征在于将四角蛤蜊软体部分称重，加水制成匀浆液，水料比为3∶1，在匀浆液中加入枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶酶解，枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶比例为4∶3，复合酶添加量为1％，酶解时间为3-5h，煮沸离心，得清液，清液加活性炭脱色，真空抽滤，硅藻土助滤，清液醇沉得粗糖胺聚糖，得率达1.3％以上，配制3％糖液，离心除去酸性、中性蛋白质，上清液经透析后醇沉，配制1％糖液，加入5％CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)，离心，将沉淀溶于氯化钾溶液中，得解离液，再醇沉，透析，醇沉，获得高纯度糖胺聚糖。该方法反应条件温和、得率及纯度高，在提取糖胺聚糖的同时还可大量回收蛋白质，有利于四角蛤蜊的综合利用，提取的物质对于清除自由基、抗氧化性及抗凝血具有重要作用，粗糖胺聚糖得率达1.3％以上，糖胺聚糖纯度达95％以上。
具体实施方式
实施例1
将贝类的软体部分加入3倍体积的蒸馏水匀浆，向匀浆液中加入稀HCL溶液调pH至7.0～7.5，加枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶混合双酶，45℃水浴条件下酶解，酶解液煮沸10min，10000r/min离心10min，取上清液，加1％(w/v)活性炭(预先在65℃下活化2h)，不断搅拌吸附30min，硅藻土助滤，除去活性炭及其吸附的蛋白质、色素等杂质，得清液，醇沉，得粗糖胺聚糖，配成3％糖液，用HCL调pH至2.0，离心除去沉淀，再用NaOH调pH至7.0，离心除去沉淀，清液注入透析袋，于30倍蒸馏水中，透析48h(每6h换一次蒸馏水)，透析结束后，收集透析液，加入乙醇-乙酸钠试剂(乙醇与5％乙酸钠混合，醇量80％，v/v)，使醇量达60％(v/v)，于4℃下静置24h，移去上清液，离心回收多糖，将多糖溶于蒸馏水，配成1％糖液，加入3倍体积的5％CTAB，40℃下沉淀1-2h，12000r/min离心15min，收集沉淀，40℃下将沉淀溶于4mol/L氯化钾溶液，使GAG-CTAB络合物解离，过滤得解离液，加入乙醇，使醇量达60％，10000r/min，离心15min收集沉淀，将沉淀溶于蒸馏水，透析48h，透析液加入乙醇-乙酸钠试剂，使醇量达60％，回收多糖，将沉淀物冷冻干燥即制得四角蛤蜊糖胺聚糖。本发明提取的四角蛤蜊糖胺聚糖质量纯度高达95％以上。
Claims (1)
1.一种四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法，其特征在于将四角蛤蜊软体部分称重，加水制成匀浆液，水料比为3∶1，在匀浆液中加入枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶酶解，枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶比例为4∶3，复合酶添加量为1％，酶解时间为3-5h，将酶解液煮沸，离心，清液加活性炭脱色，真空抽滤，硅藻土助滤，得清液，醇沉，得粗糖胺聚糖，得率达1.3％以上，配成3％糖液，离心除去酸性、中性蛋白质，上清液经透析后醇沉，配制1％糖液，加入5％十六烷基三甲基溴化铵，离心，将沉淀溶于氯化钾溶液中，得解离液，再醇沉，透析，醇沉获得高纯度糖胺聚糖。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010261457 CN102372788B (zh) | 2010-08-25 | 2010-08-25 | 四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010261457 CN102372788B (zh) | 2010-08-25 | 2010-08-25 | 四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102372788A CN102372788A (zh) | 2012-03-14 |
| CN102372788B true CN102372788B (zh) | 2013-09-18 |
Family
ID=45792056
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201010261457 Expired - Fee Related CN102372788B (zh) | 2010-08-25 | 2010-08-25 | 四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102372788B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102618614B (zh) * | 2012-04-13 | 2013-07-31 | 天津高蜚生物科技发展有限公司 | 一种同时制备单环刺螠糖胺聚糖和抗菌肽的方法 |
| CN103130904A (zh) * | 2013-01-07 | 2013-06-05 | 天津科技大学 | 一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法 |
| CN110128560B (zh) * | 2019-05-06 | 2021-03-09 | 大连工业大学 | 一种具有增强免疫活性的青蛤多糖及其制备方法和应用 |
| CN116675784B (zh) * | 2023-06-07 | 2024-01-30 | 自然资源部第三海洋研究所 | 具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的牡蛎糖胺聚糖及制备方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1746191A (zh) * | 2004-09-07 | 2006-03-15 | 青岛大学 | 栉孔扇贝糖胺聚糖的提取制备方法 |
| CN1994107A (zh) * | 2005-12-31 | 2007-07-11 | 大连玉璘企业集团有限公司 | 一种多肽营养物质的制备方法 |
| CN101607997A (zh) * | 2009-07-22 | 2009-12-23 | 广州城市职业学院 | 中药决明子多糖类化合物的提取方法 |
| CN101787084A (zh) * | 2010-02-12 | 2010-07-28 | 青岛市市立医院 | 一种刺参糖胺聚糖的制备方法 |
-
2010
- 2010-08-25 CN CN 201010261457 patent/CN102372788B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1746191A (zh) * | 2004-09-07 | 2006-03-15 | 青岛大学 | 栉孔扇贝糖胺聚糖的提取制备方法 |
| CN1994107A (zh) * | 2005-12-31 | 2007-07-11 | 大连玉璘企业集团有限公司 | 一种多肽营养物质的制备方法 |
| CN101607997A (zh) * | 2009-07-22 | 2009-12-23 | 广州城市职业学院 | 中药决明子多糖类化合物的提取方法 |
| CN101787084A (zh) * | 2010-02-12 | 2010-07-28 | 青岛市市立医院 | 一种刺参糖胺聚糖的制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 4种天津近海产贝类牛磺酸和糖胺聚糖的粗提及含量比较;孙晓朋等;《水生态学杂志》;20100331;第3卷(第02期);80-83 * |
| 刘义等.糖胺聚糖的提取、分离方法.《海洋水产研究》.2005,第26卷(第04期),89-93. |
| 孙晓朋等.4种天津近海产贝类牛磺酸和糖胺聚糖的粗提及含量比较.《水生态学杂志》.2010,第3卷(第02期),80-83. |
| 糖胺聚糖的提取、分离方法;刘义等;《海洋水产研究》;20050830;第26卷(第04期);89-93 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102372788A (zh) | 2012-03-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101544999B (zh) | 高纯度低分子量肝素钠的生产纯化方法 | |
| CN101812496B (zh) | 一种高纯度鱼鳞胶原蛋白的制备方法 | |
| CN102146144B (zh) | 一种菊粉的提取精制方法 | |
| CN101805774B (zh) | 一种提取燕麦多肽、燕麦葡聚糖的综合提取方法 | |
| CN101402984A (zh) | 生物酶辅助提取菊粉的方法 | |
| CN103613674A (zh) | 一种黄芪多糖的提取方法 | |
| CN102372788B (zh) | 四角蛤蜊糖胺聚糖的提取制备方法 | |
| CN101659714B (zh) | 一种提取肝素钠并联产氨基酸的方法 | |
| CN103834713B (zh) | 一种剑麻皂素的提取方法 | |
| CN103130904A (zh) | 一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法 | |
| CN103214595B (zh) | 硫酸软骨素钠的制备方法 | |
| CN103266154A (zh) | 制备高活性茶皂甙的生物转化方法 | |
| CN110616237A (zh) | 一种汽爆植物纤维原料制备低聚木糖的方法 | |
| CN101747661A (zh) | 一种利用酶制剂提高红米红色素品质的工艺 | |
| CN102603915A (zh) | 一种提取燕麦β-葡聚糖的方法 | |
| KR101170685B1 (ko) | 쌀가공 부산물로부터 수용성 식이섬유의 제조방법 | |
| WO2012068832A1 (zh) | 制备罗汉果苷ⅳ的方法 | |
| CN102492666A (zh) | 一种酶制剂及其用于提取葛根总黄酮的应用和方法 | |
| US20120095204A1 (en) | Method to prepare d-glucosamine hydrochloride | |
| CN110241155A (zh) | 一种酶解法提取高纯度d-氨基葡萄糖的生产工艺及其制品 | |
| CN101759731B (zh) | 亚麻籽胶和开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的提取方法 | |
| CN105463040A (zh) | 一种提高低聚木糖产率的方法 | |
| CN1233664C (zh) | 一种制备水溶性壳聚糖的方法 | |
| CN102276751B (zh) | 一种从泥螺中提取糖胺聚糖的方法 | |
| CN107236054B (zh) | 一种低分子量泡叶藻聚糖的制备方法及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130918 Termination date: 20140825 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |