CN102277405A

CN102277405A - 一种蛇皮活性肽的制备方法

Info

Publication number: CN102277405A
Application number: CN2011102250737A
Authority: CN
Inventors: 唐作安
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2011-08-02
Filing date: 2011-08-02
Publication date: 2011-12-14

Abstract

本发明涉及一种蛇皮活性肽的制备方法，具体涉及以乌梢蛇、蝮蛇、赤练蛇、银环蛇、眼镜蛇、大王蛇、五步蛇、松花蛇、虎尾蛇、中国水蛇等蛇类的鲜蛇皮为原料，经清洗→绞碎→磨浆→调整物料浓度→调整物料温度→加入蛋白酶酶解→离心过滤→灭酶→纳滤脱盐浓缩→超滤提纯→冷冻干燥等工艺流程，得到蛇皮活性肽。产品分子量90％以上分布于200-5000Dalton之间，其中200-2000Dalton(2-10肽)占75％以上，还含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等营养成分，具有良好的水溶性，优良的吸湿保湿功能，较好的酸、热稳定性。可用于医药领域和保健食品生产领域。

Description

一种蛇皮活性肽的制备方法

技术领域

本发明涉及一种蛇皮活性肽的制备方法，具体涉及利用生物蛋白酶水解蛇皮蛋白，再纳滤脱盐浓缩，超滤提纯，冷冻干燥。属于生物技术领域。

背景技术

蛇皮通常被用来制作二胡、京胡等乐器，制作提包、背包、腰带、皮鞋等日用品，制作高档工艺品，也被制作成美味食品、保健食品等。

蛇皮中含有非常丰富的胶原蛋白、优质脂肪、多种矿物质、多种维生素等营养成分，具有修复皮肤、粘膜、血管、韧带、骨骼的作用。由于胶原蛋白的分子量达30000-200000Dalton，甚至更大，因此很难被消化吸收、充分利用。极大地限制了蛇皮的利用效率和应用范围，浪费了大量的优质资源。

随着现代生物技术和膜分离技术的飞速发展和日益成熟，利用这些技术制备蛇皮活性肽就成为可能。本发明旨在探索对蛇皮实现生物酶水解、膜技术分离，确定可工业化生产的工艺流程。

发明内容

本发明是探索提供一种采用生物蛋白酶水解→纳滤脱盐浓缩→超滤提纯→冷冻干燥等工艺流程制备蛇皮活性肽的方法，以期望得到一条可工业化的生产工艺路线。

本发明的技术方案：涉及一种蛇皮活性肽的制备方法，具体涉及以乌梢蛇、蝮蛇、赤练蛇、银环蛇、眼镜蛇、大王蛇、五步蛇、松花蛇、虎尾蛇、中国水蛇等蛇类的鲜蛇皮为原料，经清洗→绞碎→磨浆→调整物料浓度→调整物料温度→加入蛋白酶酶解→离心过滤→灭酶→纳滤脱盐浓缩→超滤提纯→冷冻干燥等工艺流程，得到蛇皮活性肽。产品分子量90％以上分布于200-5000Dalton之间，其中200-2000Dalton(2-10肽)占75％以上，还含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等营养成分，具有良好的水溶性，优良的吸湿保湿功能，较好的酸、热稳定性。可用于医药领域和保健食品生产领域。

具体实施方式

实施例1

水解度(DH)＝15％的蛇皮活性肽粉的制备

选用乌梢蛇、赤练蛇、大王蛇、松花蛇、虎尾蛇的鲜蛇皮各5Kg，清水洗净；用绞肉机绞碎，绞碎程度由φ10mm不锈钢孔板控制；用超微磨磨浆至细度20-30μm；置发酵罐内，以1∶1比例加入纯净水，加温至45-55℃，加入537酸性蛋白酶在PH4.0-5.0、45-50℃条件下进行酶解反应，采用TNBS法控制水解度在15％，反应结束后离心过滤；加温至90℃、保持10分钟灭酶；用聚酰胺纳滤膜进行纳滤脱盐、浓缩，截留分子量采用150Dalton；用超滤膜过滤，截留分子量采用100-5000Dalton；经-10--35℃冷冻干燥，即得到蛇皮活性肽冻干粉。

实施例2

水解度(DH)＝25％的蛇皮活性肽粉的制备

选用乌梢蛇、松花蛇、大王蛇、五步蛇、虎尾蛇的鲜蛇皮各5Kg，清水洗净；用绞肉机绞碎，绞碎程度由φ8mm不锈钢孔板控制；用超微磨磨浆至细度15-25μm；置发酵罐内，以1∶1比例加入纯净水，加温至50-60℃，加入Alcalase碱性蛋白酶在PH8.0-9.0、50-55℃条件下进行酶解反应，采用TNBS法控制水解度在25％，反应结束后离心过滤；加温至95℃、保持8分钟灭酶；用聚乙烯醇纳滤膜进行纳滤脱盐、浓缩，截留分子量采用300Dalton；用超滤膜过滤，截留分子量采用300-5000Dalton；经-10--35℃冷冻干燥，即得到蛇皮活性肽冻干粉。

Claims

1.一种蛇皮活性肽的制备方法，其特征在于利用生物蛋白酶水解蛇皮蛋白，再用纳滤技术脱盐浓缩，用超滤技术提纯，经冷冻干燥即得蛇皮活性肽粉。

2.一种实现权利要求1所述的蛇皮活性肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤和方法：

(1)以乌梢蛇、蝮蛇、赤练蛇、银环蛇、眼镜蛇、大王蛇、五步蛇、松花蛇、虎尾蛇、中国水蛇等蛇类的鲜蛇皮为原料，用清水洗净；用绞肉机绞碎，绞碎程度由φ6-10mm不锈钢孔板控制；用超微磨磨浆至细度10-30μm，所得即蛇皮浆。

(2)蛇皮浆置发酵罐内，以1∶1比例加入纯净水，加温至50-65℃，加入537酸性蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶，酶解2-12小时，控制水解度DH为10-40％，灭酶；离心过滤；即得酶解液。

(3)酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐、浓缩，纳滤膜可选用聚酰胺纳滤膜、聚醚砜纳滤膜、醋酸纤维素纳滤膜、聚乙烯醇纳滤膜等，截留分子量采用100-250Dalton；用超滤膜过滤，截留分子量采用100-5000Dalton；所得即蛇皮活性肽溶液。

(4)蛇皮活性肽溶液经-10--40℃冷冻干燥，即得蛇皮活性肽冻干粉。

3.一种实现权利要求1、2所述的蛇皮活性肽的制备方法，其特征在于所得产品分子量90％以上分布于200-5000Dalton之间，其中200-2000Dalton(2-10肽)占75％以上，还含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等营养成分。作为药品、保健食品的功效成分进行开发利用，具有十分广泛的前景。