CN102246692B - 一种创造花生新种质的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种创造花生新种质的方法，属于花生遗传育种方法技术领域。该方法通过辐射诱变创造新种质，辐射材料选择成熟种子的胚，诱变结束后，将诱变过的胚进行组织培养，获得组培再生苗，组培再生苗以实生苗为砧木通过嫁接方式移栽到田问。利用本发明获得的新种质有益变异率达到30％以上。解决了传统方法难以创造有益花生新种质的难题，社会效益和经济效益显著。
Description
技术领域
本发明涉及一种创造花生新种质的方法，属于花生遗传育种方法技术领域。
背景技术
花生是我国重要的油料作物、经济作物和食用作物，我国是世界上最大的花生生产、消费和出口国，我国花生产业在调整农业产业结构，增加农民收入、出口创汇、保障国家油脂供应等方面做出了重要贡献。但是，从上个世纪80年代以来，我国花生在产量品质等方面没有获得根本的改变，花生品种的增产潜力没有得到有效提升，我国多个花生高产纪录都是有80年代的主推品种海花1号创造的。油脂含量还没有超过2003年育成的徐花9号的花生新品种。因此在传统系统育种和杂交育种的基础上，必须选择新的育种方法以创造有益变异的新种质，为花生产量和品质的质的提高提供材料基础。
辐射诱变是一种创造花生新种质的有效方法，但是由于花生种子较大，辐射诱变效果不理想，有益变异率一般在0.2％以下，诱变成本太高，诱变后田间选择难度太大。难以在育种上获得广泛的应用，因此必须提供一种新的诱变方法。
发明内容
本发明所要解决的问题就是提供一种通过辐射诱变创造新种质的方法，以克服现有条件下，诱变有益变异率低，诱变成本高，选择难度大的问题。本发明主要提供了一种创造花生新种质的方法，该方法包括如下步骤：将诱变材料用γ射线辐射使其诱变，诱变结束后，将诱变后的胚进行组织培养，获得组培再生苗，以组培再生苗为接穗，在砧木上进行嫁接处理，将嫁接苗移栽到田间，选取有益变异的新种质。
本发明还进一步提供了上述创造花生新种质的方法的优选技术方案：
作为优选，所述诱变材料为成熟花生种子的胚。
作为优选，所述成熟花生种子的胚由下述方法制得：花生成熟后，挑选饱满的种子，用0.05％HgCl消毒30分钟，进行表面消毒，用无菌水漂洗3次，脱掉种皮，去掉两片子叶，得到花生胚。
作为优选，所述γ射线辐射是指60Co-γ射线。
作为优选，所述60Co-γ射线的辐射剂量为3000-5000伦琴。
作为优选，所述组织培养是指将诱变后的胚接种在添加1.5mg/L NAA和5mg/L BAP的MSB5培养基上诱导愈伤组织，20天后转移到添加3mg/L BAP的MSB5芽分化培养基上获得组培再生苗。
作为优选，所述接穗是指胚诱变后的组培再生苗，从芽丛基部切下组培再生苗，在超净台上将接穗下端切成长约0.5-1cm的60°V形伤口，切口平整。砧木为未诱变的同一品种的实生苗，切除距子叶节约3cm以上的主茎部分，用手术刀将砧木上端垂直劈开，切口深约0.5-1cm。将接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成层紧密接触。然后用封口膜缠绕接口，松紧适度。
作为优选，每个胚切组培再生苗5株。
作为优选，所述组培再生苗的苗高3-4厘米；所述实生苗的苗高5-7厘米。
作为优选，所述将嫁接苗移到田间是指在超净台无菌嫁接后，继续无菌培养3-5天，然后移栽到含有灭过菌的营养土的塑料杯中，将成活的嫁接苗置于户外正常日照环境下炼苗3-5天，然后于傍晚移栽到田间，并搭建遮阴网，避免正午时阳光直射。移栽后3-5天内早、晚各浇1次水，3-4周后撤去遮阴网。
利用本发明提供的创造花生新种质的方法获得的新种质有益变异率达到30％以上，大大提升了有益变异率，并有效降低了成本。解决了传统方法难以创造有益花生新种质的难题，社会效益和经济效益显著。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作详细描述。
实施例1
海花1号花生成熟后，挑选100粒饱满的种子，用0.05％HgCl消毒30分钟，进行表面消毒，用无菌水漂洗3次，脱掉种皮，去掉两片子叶，得到花生胚。将花生胚用60Co-γ射线，剂量3000伦琴辐招诱变。将诱变后的胚接种在添加1.5mg/L NAA和5mg/L BAP的MSB5培养基上诱导愈伤组织，20天后转移到添加3mg/L BAP的MSB5芽分化培养基上获得组培再生苗。再生苗长到苗高3-4厘米时，从芽丛基部切下组培再生苗，在超净台上将接穗(胚诱变后的组培再生苗))下端切成长约0.5-1cm的60°V形伤口，切口平整。砧木为未诱变的海花1号的实生苗，苗高5-7厘米，切除距子叶节约3cm以上的主茎部分，用手术刀将砧木上端垂直劈开，切口深约0.5-1cm。将接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成层紧密接触。然后用封口膜缠绕接口，松紧适度，每个胚切组培再生苗5株，做5个嫁接。将嫁接苗在超净台无菌嫁接后，继续无菌培养3天，然后移栽到含有灭过菌的营养土的塑料杯中，将成活的嫁接苗置于户外正常日照环境下炼苗3天，然后于傍晚时分移栽到田间，并搭建遮阴网，避免正午时阳光直射。移栽后3天内早、晚各浇1次水，保持充足的水分，之后可适当浇水。3周后撤去遮阴网，在田间正常生长，秋天收获花生种子，经检测，有益变异率达到32％。
实施例2
花育20号花生成熟后，挑选200粒饱满的种子，用0.05％HgCl消毒30分钟，进行表面消毒，用无菌水漂洗3次，脱掉种皮，去掉两片子叶，得到花生胚。将花生胚用60Co-γ射线，剂量5000伦琴辐招诱变。将诱变后的胚接种在添加1.5mg/L NAA和5mg/LBAP的MSB5培养基上诱导愈伤组织，20天后转移到添加3mg/L BAP的MSB5芽分化培养基上获得组培再生苗。组培再生苗长到苗高3-4厘米时，从芽丛基部切下组培再生苗，在超净台上将接穗下端切成长约0.5-1cm的60°V形伤口，切口平整。砧木为未诱变的海花1号的实生苗，苗高5-7厘米，切除距子叶节约3cm以上的主茎部分，用手术刀将砧木上端垂直劈开，切口深约0.5-1cm。将接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成层紧密接触。然后用封口膜缠绕接口，松紧适度，每个胚切组培再生苗5株，做5个嫁接。将嫁接苗在超净台无菌嫁接后，继续无菌培养5天，然后移栽到含有灭过菌的营养土的塑料杯中，将成活的嫁接苗置于户外正常日照环境下炼苗5天，然后于傍晚时分移栽到田间，并搭建遮阴网，避免正午时阳光直射。移栽后5天内早、晚各浇1次水，保持充足的水分，之后可适当浇水。4周后撤去遮阴网，在田间正常生长，秋天收获花生种子，经检测，获得高油酸花生新种质5份，高油花生新种质3份，总有益变异率达到36％。
以上所列实施例仅为了说明本发明的某些具体实施方式，本领域技术人员在本发明基础上进行的不脱离本发明实质内容的改变亦在本发明保护范围内。
Claims (6)
1.一种创造花生新种质的方法，其特征在于：将诱变材料用γ射线辐射使其诱变，所述诱变材料为花生种子的胚；诱变结束后，将诱变后的胚进行组织培养，获得组培再生苗，以组培再生苗为接穗，在砧木上进行嫁接处理，将嫁接苗移栽到田间，选取有益变异的新种质；所述γ射线辐射是指60Co-γ射线，辐射剂量为3000-5000伦琴；所述组织培养是指将诱变后的胚接种在添加1.5mg /L NAA和5mg/L BAP的MSB5培养基上诱导愈伤组织，20天后转移到添加3mg/L BAP的MSB5芽分化培养基上获得组培再生苗。
2.如权利要求1所述的创造花生新种质的方法，其特征在于：所述诱变材料为成熟花生种子的胚。
3.如权利要求1所述的创造花生新种质的方法，其特征在于：砧木为未诱变的同一品种的实生苗。
4.如权利要求3所述的创造花生新种质的方法，其特征在于：每个胚切组培再生苗5株。
5.如权利要求3所述的创造花生新种质的方法，其特征在于：所述组培再生苗的苗高3-4厘米；所述实生苗的苗高5-7厘米。
6.如权利要求1所述的创造花生新种质的方法，其特征在于：所述将嫁接苗移载到田间是指在超净台无菌嫁接后，继续无菌培养3-5天，然后移栽到含有灭过菌的营养土的塑料杯中，将成活的嫁接苗置于户外正常日照环境下炼苗3-5天；然后于傍晚移栽到田间，并搭建遮阴网，避免正午时阳光直射，移栽田间3-5天内早、晚各浇1次水，3-4周后撤去遮阴网。
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