CN102210849A - 一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备 - Google Patents

一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备 Download PDF

Info

Publication number
CN102210849A
CN102210849A CN201110139684XA CN201110139684A CN102210849A CN 102210849 A CN102210849 A CN 102210849A CN 201110139684X A CN201110139684X A CN 201110139684XA CN 201110139684 A CN201110139684 A CN 201110139684A CN 102210849 A CN102210849 A CN 102210849A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ciclosporin
polyethylene glycol
acid copolymer
lactic acid
organic solvent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201110139684XA
Other languages
English (en)
Inventor
马科
吴雁
张海娟
韩东
徐清
游玉霞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BEIJING INSTITUTE OF OPHTHALMOLOGY
Original Assignee
BEIJING INSTITUTE OF OPHTHALMOLOGY
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BEIJING INSTITUTE OF OPHTHALMOLOGY filed Critical BEIJING INSTITUTE OF OPHTHALMOLOGY
Priority to CN201110139684XA priority Critical patent/CN102210849A/zh
Publication of CN102210849A publication Critical patent/CN102210849A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Landscapes

  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及一种聚乙二醇-聚乳酸共聚物载有环孢素A的纳米滴眼液，通过如下两种方法获得，方法一，将聚合物与环孢素A同溶于有机溶剂中，与含有表面活性剂的水溶液一同磁力搅拌，高压匀质机破碎，制成乳液，再用旋转蒸发仪除去有机溶剂，离心，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；方法二；将聚合物与环孢素A同溶于有机溶剂，缓慢滴加到磁力搅拌的水中，制得载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液。本方法所制备的载药纳米滴眼液可明显提高环孢素A的水溶性。

Description

一种环孢素A纳米粒滴眼液的制备
技术领域
本发明属制药技术领域，特别是涉及一种载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液的制备方法。
技术背景
环孢素A(CsA)作为一种强效的免疫抑制剂，可有效抑制角膜移植术后免疫排斥反应，但因难溶于水，不能配制成水溶性制剂用于眼局部。曾经采取全身给药的方法，如口服环孢素A，根据血液中环孢素A浓度的监测，用药后2小时及24小时均不能达到有效的药物浓度。同时，该药物对T细胞的活化有很强的抑制作用，可导致全身免疫力降低，还可以引起高血压、肝肾毒性、或淋巴瘤等严重副作用。目前临床上最常用的蓖麻油环孢素A滴眼液，因其油状的性状和外观，以及长期放置后的凝固现象，使之不能成为临床上的理想剂型。
为了解决上述问题，研究不含蓖麻油并能提高环孢素A生物利用度的其它液体制剂成为当前的研究热点，其中包括合成环孢素A修饰后的前体药物(Jonathan B.Rothbard1，Sarah Garlington1，Qun Lin2，3，etl， Conjugation of arginine oligomers to cyclosporin A facilitates topical delivery and inhibition of in
以及利用脂质体包载该药物(M.K.Lee，L.Choi，M.H.Kim，C.K.Kim，Pharmacokinetics and organ distribution of cyclosporin A incorporated in liposomes and mixed micelles，Int.J.Pharm.191(1999)87-93.)等。理想的剂型应具有剂量小、毒性小、副作用小、靶向缓释等特点。人们为此探索了多种环孢素A药物输送系统，如注射用乳剂、脂质体、环糊精络合物、水溶性前药，聚合物微米/纳米粒子、胶囊等，其中聚合物纳米粒子具有明显的优势，比如颗粒小、容易进入细胞而实现高疗效；比表面积大、链接或载带的功能基团或活性中心多，可以实现治疗与疗效跟踪同步化；也可以制成靶向药物，输送到人体特定器官，减少药物毒副作用对正常器官或组织的损害；因其具有多孔、中空、多层等结构特性，易于药物缓释控制等，可以制成缓释剂型，改变药物在体内的半衰期，延长药物的作用时间。
聚乙二醇-聚乳酸共聚物具有良好的生物相容性和生物可降解性，可增强穿透作用，因此被研制成为生物大分子药物的运送载体，以增强药物在体内的有效浓度，提高疗效。而与其它种类的高分子药物载体相比，聚乙二醇-聚乳酸共聚物不仅原料丰富，而且具有低成本，可生物降解，良好生物相容性和生物亲和性、无毒、易于化学改性等优点。发明人选用聚乙二醇-聚乳酸共聚物为原料，运用载药纳米粒子可提高难溶药物的溶解性和生物利用度的特点，运用纳米技术构建可高效包载疏水药物CsA的纳米粒子载体的特点，制备纳米粒滴眼液，具有良好的临床应用前景。
发明内容
所解决的技术问题
本发明所要解决的技术问题是提供一种环孢素A纳米滴眼液的制备方法，以克服现有的环孢素A水溶性差，生物利用度低，毒副作用大等缺陷。
技术方案
本发明的技术方案之一是提供一种载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液，通过如下制备方法获得：
(1)将环孢素A溶于有机溶剂，聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于有机溶剂，作为油相；
(2)将表面活性剂溶于水中，作为水相。将油相与水相混合后在恒温下搅拌，制成乳液；
(3)将乳液用高压匀质机进行混匀；
(4)乳液用旋转蒸发仪除去有机溶剂，得到纳米粒子悬液；
(5)离心，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之一为，所述的载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子中聚乙二醇-聚乳酸共聚物与环孢素A的质量比为2.5∶1-100∶1。
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之二为，所述的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子对环孢素A的包封率为32-97％，载药量为0.3-38.8wt％。
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之三为，所述的表面活性剂、油相的质量比为(200-4000)∶(100-5000)。
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之四为，所述的环孢素A溶液为二氯甲烷溶液，所述的聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶液为二氯甲烷溶液。
本发明的技术方案之二是提供一种载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子，依次包括如下步骤：
(1)将环孢素A溶于有机溶剂，聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于有机溶剂，作为油相；
(2)将油相逐滴加入到机械搅拌的水中，搅拌；
(3)乳液用旋转蒸发仪除去有机溶剂(也可不用悬蒸，直接通过搅拌过夜除去有机溶剂)；
(4)离心，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之一为，所述的载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子中聚乙二醇-聚乳酸共聚物与环孢素A的质量比为2.5∶1-100∶1。
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之二为，所述的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子对环孢素A的包封率为32-97％，载药量为0.3-38.8wt％。
上述的环孢素A纳米粒子的优选方案之三为，所述的环孢素A溶液为丙酮溶液，所述的聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶液为丙酮溶液。
本发明的技术方案之三是提供一种免疫抑制剂，由权利要求1所述的载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子和药学上可接受的载体组成。
本发明所制备的聚乙二醇-聚乳酸共聚物/环孢素A纳米粒子可简称为Polymer/CsA NPs。
有益效果
本发明采用生物降解材料聚乙二醇-聚乳酸共聚物制备包裹环孢素A药物的纳米滴眼液，可避免蓖麻油引起的严重的过敏反应以及产生高敏性、神经毒性、肾毒性、心脏毒性等不良反应问题，并且可利用纳米粒子的特性，在一定程度上提高药物在眼部组织的生物利用度，延长药物的角膜滞留时间，减少用药次数，降低药物在眼部或全身的毒副作用。
本发明的载有环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液采用纳米沉淀法及乳化溶剂蒸发法制备，可直接用聚乙二醇-聚乳酸共聚物作为环孢素A药物的载体，避免了繁琐和复杂的修饰步骤，操作过程方便，并降低了生产成本，利于推广。且制备的载药纳米粒子为单分散的规则球体，粒径控制在100-250nm，无团聚现象。
利用本发明的聚乙二醇-聚乳酸共聚物环孢素A纳米滴眼液对白兔进行安全性评价，结果表明所制备的载药纳米滴眼液可明显提高环孢素A的水溶性，使用安全。
附图说明
图1为1％环孢素A纳米粒滴眼液的眼刺激性实验。
图2为1％环孢素A纳米粒滴眼液的高效液相色谱图。9-10min处的特征吸收峰为CsA药物的最大吸收峰，用210nm(λmax)检测。
图3为Polymer/CsA NPs溶于乙腈的高效液相色谱图。在9-10min附近出现了CsA的特征吸收峰，可知CsA被成功地包裹进Polymer中。
图4为Polymer/CsA NPs透射电镜图。图4表明，制成的Polymer/CsA NPs为球形粒子，这些粒子分散均匀，且无团聚现象，粒径范围控制为296.9±32.06nm。
图5为Polymer/CsA NPs粒径分析仪图。图5表明，制成的Polymer/CsA NPs的粒径分布较窄，分散性好，无团聚现象。
图6为聚合物PEG-PLA的体外降解曲线。图6表明，聚合物PEG-PLA经过20天体外降解实验后，剩余重量为55％，聚合物容易降解。
图7为Polymer/CsA NPs的体外释放曲线。图7表明，CsA从制成的Polymer/CsA NPs中缓慢释放，20天左右释放量达总CsA的90％。
本发明的环孢素A纳米粒滴眼液，使用方法是，滴入结膜囊内，一次1滴，一日三次。
本发明的环孢素A纳米粒滴眼液，经家兔单次、多次给药眼刺激性试验、最大耐受量试验，对其毒性进行观察，结果表明：
1.环孢素A纳米粒滴眼液以1％浓度单次滴入家兔结膜囊内，连续观察7天，不引起急性毒性反应，对家兔结膜、角膜、虹膜均无刺激；
2.环孢素A纳米粒滴眼液以1％浓度每日3次，连续14天滴入家兔结膜囊内，并继续观察7天，不引起急性毒性反应，对家兔结膜、角膜、虹膜均无刺激结果见图1；
3.1％环孢素A纳米粒滴眼液以家兔能耐受的最大体积的药量，一日内连续滴眼给药14次，总给药量为1.4ml/kg(14mg/kg)，相当于临床用量的210倍，连续观察7天，动物未发生死亡，在行为、症状、体征等方面未见异常，体重均有增加。
环孢素A纳米粒滴眼液对家兔体重的影响
具体实施方式
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，如：纳米材料技术手册，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1
采用乳化溶剂蒸发法，用聚乙二醇-聚乳酸共聚物对环孢素A药物进行包裹，得到粒径大小约为296.9±32.06nm的球形纳米粒子，载药量为17.02％，包封率为85.10％。具体实施方式如下：
(1)将50mg聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于6mL二氯甲烷溶液，10mg环孢素A溶于0.5mL二氯甲烷，将二者混合，混合液加入到含有0.6％表面活性剂聚乙烯醇(PVA)的20mL水中，在室温下，磁力搅拌10min；
(2)将上述溶液用高压匀质机进行混匀，形成乳液；
(3)乳液用旋转蒸发仪除去二氯甲烷；
(4)以12,500rpm转速离心6min，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
用高效液相色谱(HPLC)、透射电子显微镜(TEM)等测试仪器进行粒子表征。
结果见图2、图3和图4。
实施例2
采用乳化溶剂蒸发法，用聚乙二醇-聚乳酸共聚物对环孢素A药物进行包裹，得到粒径大小约为252.7±27.29nm的球形纳米粒子，载药量为6.98％，包封率为69.80％。具体实施方式如下：
(1)将50mg聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于6mL二氯甲烷溶液，5mg环孢素A溶于0.5mL二氯甲烷，将二者混合，混合液加入到含有0.6％表面活性剂聚乙烯醇(PVA)的20mL水中，在室温下，磁力搅拌10min；
(2)将上述溶液用高压匀质机进行混匀，形成乳液；
(3)乳液用旋转蒸发仪除去二氯甲烷；
(4)以12,500rpm转速离心6min，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
实施例3
采用纳米沉淀法，用聚乙二醇-聚乳酸共聚物对环孢素A药物进行包裹，得到粒径大小约为99.27±18.31nm的球形纳米粒子，载药量为0.84％，包封率为42.26％。具体实施方式如下：
(1)将20mg聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于3mL丙酮溶液，0.4mg环孢素A溶于2mL丙酮溶液，作为油相；
(2)将5mL油相逐滴加入到机械搅拌的10mL水中，搅拌30min；
(3)乳液用旋转蒸发仪除去有机溶剂；
(4)以13,000rpm转速离心10min，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
实施例4
采用纳米沉淀法，用聚乙二醇-聚乳酸共聚物对环孢素A药物进行包裹，得到粒径大小约为180±2.52nm的球形纳米粒子，载药量为11.2％，包封率为45.80％。具体实施方式如下：
(1)将20mg聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于3mL丙酮溶液，2mg环孢素A溶于2mL丙酮溶液，作为油相；
(2)将5mL油相逐滴加入到机械搅拌的10mL水中，搅拌30min；
(3)以13,000rpm转速离心10min，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；

Claims (8)

1.载环孢素A的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液，通过如下两种方法获得：
方法一：
(1)将环孢素A溶于有机溶剂，聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于有机溶剂，作为油相；
(2)将表面活性剂溶于水中，作为水相。将油相与水相混合后在恒温下搅拌，制成乳液；
(3)将乳液用高压匀质机进行混匀；
(4)乳液用旋转蒸发仪除去有机溶剂，得到纳米粒子悬液；
(5)离心，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
方法二：
(1)将环孢素A溶于有机溶剂，聚乙二醇-聚乳酸共聚物溶于有机溶剂，作为油相；
(2)将油相逐滴加入到机械搅拌的水中，搅拌；
(3)乳液用旋转蒸发仪除去有机溶剂(也可不用悬蒸，直接通过搅拌过夜除去有机溶剂)；
(4)离心，生理盐水回溶，得到载有环孢素A聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米滴眼液；
2.根据权利要求1所述的聚乙二醇-聚乳酸共聚物，其特征在于其数均分子量为5000Da。
3.根据权利要求1所述，载有环孢素A的纳米粒子，其特征在于，方法一中所述的有机溶剂为二氯甲烷，方法二中所述的有机溶剂为丙酮溶液。
4.根据权利要求1所述，载有环孢素A的纳米粒子，其特征在于，方法一中，所述的油相为聚乙二醇-聚乳酸共聚物和环孢素A二氯甲烷溶液，水相为不同浓度聚乙烯醇溶液；方法二中的所述的油相为聚乙二醇-聚乳酸共聚物和环孢素A丙酮溶液，水相水溶液。
5.根据权利要求1所述，载有环孢素A的纳米粒子，其特征在于，所述的表面活性剂、油相的质量比为(200-4000)∶(100-5000)。
6.根据权利要求1所述，载有环孢素A的纳米粒子，其特征在于，所述的载有聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子中聚乙二醇-聚乳酸共聚物与环孢素A的质量比为2.5∶1-100∶1。
7.根据权利要求1所述，载有载有环孢素A的纳米粒子，其特征在于，所述的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米粒子对环孢素A的包封率为32-97％，载药量为0.3-38.8wt％。
8.一种纳米滴眼液，其特征在于，所述的药物组合由权利要求1中任何一项所述的方法制备得到。
CN201110139684XA 2011-05-27 2011-05-27 一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备 Pending CN102210849A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110139684XA CN102210849A (zh) 2011-05-27 2011-05-27 一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110139684XA CN102210849A (zh) 2011-05-27 2011-05-27 一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102210849A true CN102210849A (zh) 2011-10-12

Family

ID=44742533

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201110139684XA Pending CN102210849A (zh) 2011-05-27 2011-05-27 一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102210849A (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103656617A (zh) * 2012-09-26 2014-03-26 沈阳兴齐眼药股份有限公司 一种环孢素眼用溶液的制备方法
CN105997863A (zh) * 2016-07-21 2016-10-12 河南省眼科研究所 环孢素a滴眼液及其制备方法
CN107875141A (zh) * 2017-09-18 2018-04-06 浙江大学 两亲性聚合物包裹的吉非替尼和环孢素a纳米颗粒、制备方法及应用
CN107998399A (zh) * 2017-12-22 2018-05-08 北京诺康达医药科技有限公司 一种环孢素复方滴眼液及其制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RUXANDRA GREF ET AL: "evelopment and characterization of CyA-loaded poly(lactic acid)-poly(ethylene glycol) PEG micro- and nanoparticles. Comparison with conventional PLA particulate carriers", 《EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICS AND BIOPHARMACEUTICS》 *
T. RILEY, ET AL: "Physicochemical Evaluation of Nanoparticles Assembled from Poly(lactic acid)-Poly(ethylene glycol) (PLA-PEG) Block Copolymers as Drug Delivery Vehicles", 《LANGMUIR》 *
WOO-KYOUNG LEE ET AL: "I nvestigation of the factors influencing the release rates of cyclosporin A-loaded micro- and nanoparticles prepared by high-pressure homogenizer", 《JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103656617A (zh) * 2012-09-26 2014-03-26 沈阳兴齐眼药股份有限公司 一种环孢素眼用溶液的制备方法
CN105997863A (zh) * 2016-07-21 2016-10-12 河南省眼科研究所 环孢素a滴眼液及其制备方法
CN105997863B (zh) * 2016-07-21 2018-09-04 河南省眼科研究所 环孢素a滴眼液及其制备方法
CN107875141A (zh) * 2017-09-18 2018-04-06 浙江大学 两亲性聚合物包裹的吉非替尼和环孢素a纳米颗粒、制备方法及应用
CN107998399A (zh) * 2017-12-22 2018-05-08 北京诺康达医药科技有限公司 一种环孢素复方滴眼液及其制备方法
CN107998399B (zh) * 2017-12-22 2021-01-12 北京诺康达医药科技股份有限公司 一种环孢素复方滴眼液及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Campardelli et al. Supercritical fluids applications in nanomedicine
Ubrich et al. Oral evaluation in rabbits of cyclosporin-loaded Eudragit RS or RL nanoparticles
Tsai et al. Oral apomorphine delivery from solid lipid nanoparticles with different monostearate emulsifiers: pharmacokinetic and behavioral evaluations
Wischke et al. Development of PLGA-based injectable delivery systems for hydrophobic fenretinide
Zhou et al. Core-shell lipid-polymer nanoparticles as a promising ocular drug delivery system to treat glaucoma
US20080102127A1 (en) Hybrid lipid-polymer nanoparticulate delivery composition
Alsaad et al. Solid lipid nanoparticles (SLN) as a novel drug delivery system: A theoretical review
US20070031504A1 (en) Microdevices comprising nanocapsules for controlled delivery of drugs and method of manufacturing same
Jiang et al. PLGA nanoparticle platform for trans-ocular barrier to enhance drug delivery: a comparative study based on the application of oligosaccharides in the outer membrane of carriers
Farid et al. Lipid-based nanocarriers for ocular drug delivery
CN101926775A (zh) 包载硫酸长春新碱的双功能纳米粒制剂的制备和应用方法
CN102210849A (zh) 一种环孢素a纳米粒滴眼液的制备
US7087246B2 (en) Controlled release preparation of insulin and its method
CN101283982B (zh) 非诺贝特纳米混悬剂及其制备方法
Esmaeili et al. Cellular cytotoxicity and in-vivo biodistribution of docetaxel poly (lactide-co-glycolide) nanoparticles
CN100546579C (zh) 替莫唑胺聚乳酸纳米微球与制剂及其制备方法
CN103690491B (zh) 一种peg-pla/pla复合载药纳米微球的制备方法
NZ529544A (en) Encapsulation of nanosuspensions in liposomes and microspheres
CN113133988A (zh) 一种红细胞膜仿生修饰的新型肾靶向纳米载药系统、制备方法及应用
CN102302447A (zh) 一种新型紫杉醇脂质微球注射液及其制备方法
WO2013060304A1 (zh) 紫杉醇或其同系物的固体分散体及其制备方法
Gokce et al. Nanoparticulate strategies for effective delivery of poorly soluble therapeutics
US20120121510A1 (en) Localized therapy following breast cancer surgery
WO2023274414A1 (zh) 一种平稳释放氟维司群的微球及制备方法
Rezigue Lipid and polymeric nanoparticles: drug delivery applications

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20111012