CN102138909B - 门冬酰胺酶冻干粉针剂及其制备方法以及门冬酰胺酶溶解液 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种门冬酰胺酶冻干粉针剂，包括门冬酰胺酶、缓冲剂、表面活性剂、药用辅料以及在制备过程中用作溶剂并最终少于加入量的5%的注射用水，其中表面活性剂是非离子型表面活性剂；通过在处方中加入缓冲剂和非离子型表面活性剂，使得门冬酰胺酶溶解后转移到注射液中时，不会出现微细可见异物超标的情况。本发明还公开了一种门冬酰胺酶溶解专用溶液，所述溶液溶剂为注射用水，溶质包括缓冲剂、表面活性剂；在不改变已有冻干粉针剂处方的情况下，将冻干粉先溶解在上述溶液中，再转移至氯化钠或葡萄糖注射液中时，同样不会出现微细可见异物超标的情况，使用时减小了对人体的刺激性，提高了临床用药安全性。

Description

门冬酰胺酶冻干粉针剂及其制备方法以及门冬酰胺酶溶解液

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种门冬酰胺酶冻干粉针剂及其制备方法，以及一种门冬酰胺酶溶解所用的溶剂。

背景技术

门冬酰胺酶（也有如下别名L-门冬酰胺酶、天冬酰胺酶、天门冬酰胺酶等）是一种对肿瘤细胞具有选择性抑制作用的药物，尤其对急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效最好，对急性粒细胞型白血病、急性单核细胞白血病、恶性淋巴瘤也有一定疗效。

门冬酰胺酶（以下简称L-ASP）能将血清中的门冬酰胺水解为门冬氨酸和氨，而门冬酰胺是细胞合成蛋白质及增殖生长所必须的氨基酸，正常细胞有自身合成门冬酰胺的功能，但是急性白血病等肿瘤细胞无此功能；因而当用L-ASP使门冬酰胺急剧缺失时，肿瘤细胞因既不能从血液中获取足够的门冬酰胺，亦不能自身合成，就会出现蛋白质合成受障碍，增殖受抑制的情况，由此肿瘤细胞就会大量破坏而不能生长存活。另外，L-ASP亦能干扰细胞DNA、RNA的合成，可能作用于细胞G1增殖周期中，是抑制该期细胞分裂的细胞周期特异性药。

目前，国内临床使用的注射用门冬酰胺酶均采用冻干粉针剂型，主要由日本协和发酵工业株式会社、美国默克等公司生产，以每支5000单位或10000单位的规格为主。该注射用门冬酰胺酶冻干粉针剂由门冬酰胺酶和甘露醇组成。注射用无菌粉末使用前应采用适宜溶剂进行溶解，溶解后应为澄清、透明的溶液。门冬酰胺酶使用时一般采用氯化钠注射液或葡萄糖注射液溶解。但在临床使用中发现，当门冬酰胺酶稀释液加入到氯化钠或葡萄糖注射液中时会有微粒析出，且多为1mm以上的细小蛋白质絮状物或蛋白质颗粒，导致可见异物超标，增加输液对人体的刺激性，对病人生命安全造成威胁。

在2006年06期的《海峡药学》第18至19页公开的文献“L-门冬酰胺酶的稳定性研究”中，对相关问题进行了研究，说明为何L-ASP 与含盐输液混合会发生盐析，同时考虑到10%葡萄糖注射液（GS）含糖量过高，临床应用并不广泛，故选择5%的GS 作为L-ASP 的最佳溶媒，具体配置方法如下：在每100m的l 5%的葡萄糖注射液中加入0.19mL的5%的碳酸氢钠溶液以调整溶媒pH值为7.5，以调整好pH值的葡萄糖注射液作为溶媒与冻干粉针剂配制L-ASP 静脉滴注液， 配置好的输液应在4小时内使用完毕，未能及时使用的输液应低温避光保存。

但是由于生产的5%葡萄糖注射液的pH值不确定，且“每100ml 的GS （5% ）加入0.19mL的 5% 的NaHCO₃，调整溶媒pH值为7.5”的溶媒配置操作繁琐，并不利于实际操作。同时我们通过实际试验发现，上述单纯靠NaHCO₃调节输液的pH值的方法，还是不能解决门冬酰胺酶在输液中的析出问题。

中国专利文献CN100502944C（申请号200510102992.X）公开了一种天门冬酰胺酶注射液，其主要组成是：10-80mg的天门冬酰胺酶、2-30mmol/L的L-半胱氨酸、10-30mmol/L磷酸缓冲液、0.5-5mmol/L的乙二胺四乙酸二钠（EDTA）和0.5%-2%的氯化钠；但是注射液的形式不方便贮存和运输，并且组成中的L-半胱氨酸性质不稳定，而且注射液的保质时间短，故而该种配方的注射液存在缺陷。

发明内容

本发明所要解决的是门冬酰胺酶稀释液加入到氯化钠或葡萄糖注射液中时，微细可见异物超标的问题，为此本发明的第一目的是提供一种临床使用方便、复溶迅速、稳定性好的门冬酰胺酶冻干粉针剂及其制备方法，本发明的第二目的是提供一种临床使用方便、复溶迅速、稳定性好的门冬酰胺酶溶解溶剂。

实现本发明第一目的的技术方案是：本发明的门冬酰胺酶冻干粉针剂包括门冬酰胺酶和甘露醇，还包括缓冲剂、表面活性剂，其中表面活性剂是非离子型表面活性剂；在制备所述的门冬酰胺酶冻干粉针剂的过程中具有用作溶剂并最终少于加入量的5%的注射用水。

相对于上述门冬酰胺酶冻干粉针剂中的10000单位门冬酰胺酶来计算，甘露醇为40～100mg，缓冲剂为3～15mg，非离子型表面活性剂为2～8mg；制备过程中用作溶剂的注射用水为0.8～2.4g。

在制备上述门冬酰胺酶冻干粉针剂的过程中，冻干前溶液的pH值为7.1～7.5。

上述门冬酰胺酶冻干粉针剂所包括的缓冲剂为碳酸氢钠、甘氨酸盐、组氨酸盐或TRIS-HCl，或者是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的磷酸盐缓冲体系。

上述门冬酰胺酶冻干粉针剂所包括的非离子型表面活性剂为泊洛沙姆188、聚氧乙烯醚（35）蓖麻油、聚乙二醇硬脂酸酯15、吐温20或吐温80。

相对于上述门冬酰胺酶冻干粉针剂中的10000单位门冬酰胺酶来计算，甘露醇为40～80mg，其余成分的加入量为缓冲剂4～6mg，非离子型表面活性剂4～6mg；制备过程中用作溶剂的注射用水1.4～2.4g。

上述门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法具有以下步骤：①将按照处方量准确称取的甘露醇、缓冲剂、非离子型表面活性剂加入预冷至10℃以下的注射用水中溶解，再加入氢氧化钠调节溶液pH值为7.1～7.5；②向步骤①得到的溶液中加入处方量的门冬酰胺酶，混合均匀，用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH值为7.1～7.5；③向步骤②得到的溶液中加水至处方规定，加水后的溶液用孔径为0.22                                                

的微孔滤膜过滤除菌而得到滤液；④按每瓶10000单位门冬酰胺酶将步骤③得到的滤液分装于管制瓶中，半加塞后置于冷冻干燥机中冻干，待干燥后真空压塞，轧盖，贴标签，即得冻干粉针剂，保存在2～8℃温度下。

上述门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法的步骤④中，滤液分装于相应管制瓶中半加塞后冻干时，预冻至-25℃后，保持120min，抽真空，在660min内升华至0℃，保温270min，并在150min内升温至25℃，保温240min，至门冬酰胺酶冻干粉针剂的水分在5%以内，从而完成冻干程序。

实现本发明第二目的的技术方案是：本发明的门冬酰胺酶溶解液的溶剂为注射用水，溶质包括缓冲剂和非离子型表面活性剂；所述的缓冲剂为碳酸氢钠、甘氨酸盐、组氨酸盐或TRIS-HCl，或者是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的磷酸盐缓冲体系；所述的非离子型表面活性剂为泊洛沙姆188、聚氧乙烯醚（35）蓖麻油、聚乙二醇硬脂酸酯15、吐温20或吐温80。

上述门冬酰胺酶溶解液使用时，相对于每 10000单位待溶解的门冬酰胺酶冻干粉针剂，所用门冬酰胺酶溶解液中的缓冲剂为3～15mg，非离子型表面活性剂为2～8mg，溶剂水为1～15g。

本发明具有积极的效果：（1）本发明的冻干粉针剂包括在处方中加入的缓冲剂和非离子型表面活性剂，因而在将少量氯化钠注射液或葡萄糖注射液注入该门冬酰胺酶冻干粉针剂中而得到含有门冬酰胺酶的混合体系后，再将该混合体系转移到氯化钠或葡萄糖注射液中时，不会出现微细可见异物超标的情况；使用时减小了对人体的刺激性，提高了临床用药安全性。（2）本发明的门冬酰胺酶冻干粉针剂临床使用方便、复溶迅速、稳定性好。（3）本发明制备门冬酰胺酶冻干粉针的工艺简单，生产成本低，适合工业化大生产。（4）本发明的门冬酰胺酶溶解液，用于已有的门冬酰胺酶冻干粉针剂，先将处方量的本发明的门冬酰胺酶溶解液注入该已有的冻干粉针剂中，使得其中的门冬酰胺酶溶解在其中后，再转移至氯化钠或葡萄糖注射液中时，同样不会出现微细可见异物超标的情况。

附图说明

图1为本发明冻干粉针剂的形态图。

图2为对照组制成冻干粉针剂后的形态图，其中（a）图为对照组1制成冻干粉针剂后的形态图，（b）图为对照组2制成冻干粉针剂后的形态图。

具体实施方式

（实施例1、门冬酰胺酶冻干粉针剂）

本实施例门冬酰胺酶冻干粉针剂的处方如下：

门冬酰胺酶1000万单位，泊洛沙姆188（F68）4.0g，甘露醇（20%w/v）300g，二水合磷酸二氢钠6.24克， 0.1mol/L 的NaOH水溶液（适量调节体系的pH为7.5±0.2），注射用水加至2000g，共制成1000支。

本实施例门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法如下：

将按照上述处方量准确称取的二水合磷酸二氢钠、泊洛沙姆188（F68）（CAS号：9003-11-6）、甘露醇（20%w/v）加入300g预冷至10℃以下的注射用水中溶解后，用0.1mol/L 的NaOH调节溶液pH值为7.3～7.5；再向上述溶液中加入处方量的门冬酰胺酶混合均匀，用0.1mol/L的 NaOH溶液或0.1 mol/L 的HCl调节pH值为7.3±0.2（本实施例为7.5）；加水至2000g，溶液用0.22

微孔滤膜过滤除菌；按每瓶2.0g将滤液分装于管制瓶中，半加塞后置于冷冻干燥机中冻干，待干燥后真空压塞，轧盖，贴标签，即得冻干粉针剂1000支，保存在2～8℃温度下，并作为样品S1。

见图1，所示为按照本实施例处方制得的随机抽取的五支冻干粉针剂，肉眼观察性状为白色冻干块状物，符合2010年版《中国药典》二部注射用门冬酰胺酶项下其外观为白色冻干块状物或粉末的规定。

所制得的门冬酰胺酶冻干粉使用时，采用如下方式进行溶解：

临床使用时，每支门冬酰胺酶冻干粉先用3～5mL灭菌注射用水溶解，然后转移至500mL葡萄糖注射液或氯化钠注射液中，按正常方式使用。

上述2.0g滤液分装于相应管制瓶中半加塞后冻干时，预冻至-25℃后，保持120min，抽真空，在660min内升华至0℃，保温270min，并在150min内升温至25℃，保温240min，至门冬酰胺酶冻干粉针剂的水分在5%以内，从而完成冻干程序。

上述门冬酰胺酶冻干粉针剂处方中的缓冲剂除磷酸氢二钠和磷酸二氢钠外（本实施例的磷酸氢二钠是经磷酸二氢钠和氢氧化钠反应得到；也可以直接在处方中包括磷酸氢二钠和磷酸二氢钠），还可以由碳酸氢钠、甘氨酸盐、组氨酸盐或TRIS-HCl代替；处方中的表面活性剂除泊洛沙姆188外也可以是聚氧乙烯醚（35）蓖麻油（CAS号：61791-12-6）、聚乙二醇硬脂酸酯15 (Solutol HS15，CAS号：9004-99-3)、吐温20或吐温80等其他非离子型表面活性剂；大量的正交试验表明，上述辅料对注射用门冬酰胺酶有很好的稳定作用。

上述门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法的各步骤的一些参数是可以适当调整的，如溶解活性物质和辅料的注射用水在本实施例规定量的40%～120%之间都是允许的；滤液灌装的规定量也可以根据分装的门冬酰胺酶的单位进行变化，比如每瓶中灌装1g滤液，则每瓶中包含门冬酰胺酶5000单位。

本实施例制备的冻干粉针剂，在成品中不包含配置过程中的注射用水，或者说成品中只有少量的注射用水残留，因为由于本实施例的制备方法的特殊性，作为溶媒的注射用水在冻干过程中已经除去了；但是由于终产品的性能与溶媒及其用量密切相关，因此制备过程中用作溶剂并最终除去的注射用水的量需控制在一定的范围内。

本实施例制备时处方中的磷酸氢二钠溶解于注射用水，再与氢氧化钠反应后形成磷酸盐缓冲体系，使加水至2000g前溶液pH值在7.1～7.5之间，加水至2000g后限定冻干前溶液的pH值为7～8；当然可以理解的是，只有在终产品中加入与配置过程中使用的同样量的注射用水，溶解后溶液的pH值才与冻干前溶液pH值一致或接近；但是冻干前溶液的pH值影响冻干后成品重新用注射用水溶解的稳定性，而处方中的缓冲剂及其用量则保证了冻干后成品重新用注射用水溶解的稳定性。

本实施例根据处方，所用的门冬酰胺酶来源于常州千红生化制药股份有限公司；二水合磷酸二氢钠、氢氧化钠来源于国药集团上海化学试剂公司；甘露醇注射液规格为50g：250mL，来源于江苏四环生物股份有限公司；泊洛沙姆188（F68）来源于巴斯夫（中国）有限公司。

（实施例2至实施例5、门冬酰胺酶冻干粉针剂）

实施例2至实施例5门冬酰胺酶冻干粉针剂的处方见下表1。

表1

  实施例2至实施例5按照上表中的各处方，制备方法与实施例1门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法相同。

按照实施例2至实施例5的处方及制备方法制得的冻干粉针剂依次作为样品S2、S3、S4、S5。

（实施例6、门冬酰胺酶溶解液）

本实施例的门冬酰胺酶溶解液的配置方法如下：

首先准确称取二水合磷酸二氢钠6.24g，表面活性剂泊洛沙姆188（F68）4.0g；将上述准确称取的二水合磷酸二氢钠、泊洛沙姆188（F68）加入300g注射用水中溶解后，用0.1mol/L 的NaOH溶液调节溶液pH值为7.1～7.5（本实施例为7.5）；然后加注射用水至溶液总重为5000g，所得溶液用0.22 

微孔滤膜过滤除菌；按每瓶5.0g将滤液分装于安瓿中，加塞轧盖，贴标签，即得专用溶剂1000支，常温保存，并作为样品S6。

本实施例门冬酰胺酶溶解液的缓冲体系由磷酸氢二钠和磷酸二氢钠构成，其中的磷酸氢二钠是由磷酸二氢钠和氢氧化钠反应得到；除了上述磷酸盐缓冲体系外，缓冲剂还可选择碳酸氢钠、甘氨酸盐、组氨酸盐或TRIS-HCl中的任意一种。

本实施例的表面活性剂除泊洛沙姆188外也可以是聚氧乙烯醚（35）蓖麻油、聚乙二醇硬脂酸酯15(Solutol HS15)、吐温20或吐温80等其他非离子型表面活性剂。

临床使用时，各取一支市售门冬酰胺酶冻干粉针剂和按照上述方法制备的溶解液，用针筒将溶解液转移入门冬酰胺酶冻干粉针剂瓶中后，摇晃震荡使冻干粉完全溶解，最后然后将溶液转移至500mL葡萄糖注射液或氯化钠注射液中，按正常方式使用。

（实施例7至实施例10、门冬酰胺酶溶解液）

实施例7至实施例10的溶解液的处方见下表2：

表2

  上述各实施例的溶解液配置时，按照表2的处方量准确称取泊洛沙姆188和二水合磷酸二氢钠，溶解在300g注射用水后，用0.1mol/L 的NaOH溶液调节溶液pH值为7.1～7.5，然后加注射用水至溶液总重为5000g，之后的操作与实施例6相同。

按照实施例7至实施例10的处方及制备方法制得的溶解液作为样品S7、S8、S9、S10。

（试验例1、门冬酰胺酶输液稳定性—门冬酰胺酶冻干粉针剂）

为了证明本发明冻干粉针剂处方的合理性，我们首先对溶解后输液的稳定性进行考察，取实施例1～5制备的门冬酰胺酶冻干粉针剂各5支，分别用5mL注射用水溶解，接着分别抽取其中的2mL注入到100mL输液(葡萄糖注射液或氯化钠注射液)中，混合均匀，然后按照2010版《中国药典》二部附录IX H可见异物检查法测定，分别在1、3、6小时后在澄明度检查仪上对输液进行观察，其中观察指标及结果判断标准如下表3，检测结果见表4和表5。

表3 观察指标及结果判断标准

 　关于表3中细微可见异物的说明：

（1）白点：系指不能辨清平面或棱角的白色物体。

（2）细小蛋白质絮状物或蛋白质颗粒：系指半透明的小于约1mm的絮状沉淀或蛋白质颗粒。

（3）少量絮状物或蛋白质颗粒：系指在规定检查时间内，较难计数的蛋白质絮状物或蛋白质颗粒。

（4）微量沉积物：系指静置后供试品中的微小沉积物，轻轻转动后有烟雾状沉淀浮起，轻摇即散失者。

（5）摇不散的沉淀：系指久置后蛋白质溶液出现的少量沉积物，轻轻摇动后不能分散消失者。

表4 葡萄糖注射液中可见异物测定结果

表5  氯化钠注射液中可见异物测定结果

 由表4和表5的测定结果可知，室温下本发明门冬酰胺酶稀释液加入到氯化钠或葡萄糖注射液中时，不存在可见异物超标的问题。

（试验例2、门冬酰胺酶输液稳定性—门冬酰胺酶溶解液）

为了证明本发明的门冬酰胺酶溶解液的可行性，在溶解液溶解冻干粉后，对门冬酰胺酶的输液的稳定性进行考察，取实施例6～10制备的门冬酰胺酶溶解液各5支，分别抽取注入市售门冬酰胺酶冻干粉针剂瓶中，摇晃震荡完全溶解后，分别抽取其中的2mL注入到100mL输液(葡萄糖注射液或氯化钠注射液)中，混合均匀，然后按照2010版《中国药典》二部附录IX H可见异物检查法测定，分别在1、3、6小时后在澄明度检查仪上对输液进行观察，其中观察指标及结果判断标准如下表3，检测结果见表6。本实施例所述的市售门冬酰胺酶冻干粉针剂来源于常州千红生化制药股份有限公司，其中除门冬酰胺酶外，辅料为甘露醇。

表6 葡萄糖注射液中可见异物测定结果

 另外，按照上述检测方法，分别抽取其中的2mL注入到100mL氯化钠注射液中后，各样品的检测结果与其在葡萄糖注射液中的结果相同。

由表6的测定结果及氯化钠注射液中的检测结果可知，室温下在不改变已有门冬酰胺酶冻干粉针剂处方的情况下，将冻干粉针剂溶解在其中后，再转移至氯化钠或葡萄糖注射液中时，同样不会出现微细可见异物超标的情况。

（试验例3、门冬酰胺酶存放稳定性--—门冬酰胺酶冻干粉针剂）

本试验例考察样品在高温试验、加速试验和长期试验条件下样品的外观性状、pH值、可见异物、活性、纯度、输液观察；其中重点考察了活性指标、纯度、存放后输液中可见异物检测；检测方法采用《中国药典》二部中门冬酰胺酶项下及其附录中描述的方法；试验样品来自市售包装的实施例1制备的三批（批号：S1-1,S1-2,S1-3）门冬酰胺酶冻干粉针剂样品。

高温试验条件为40±2℃/RH60±5%，检测结果如下：

表7    S1-1高温试验

表8    S1-2 高温试验

表9     S1-3 高温试验

加速试验条件为25±2℃/ RH 60±5%，检测结果如下：

表10     S1-1 加速试验

表11   S1-2 加速试验

表12     S1-3 加速试验

长期试验条件为5±3℃，检测结果如下：

表13    S1-1 长期试验

表14    S1-2 长期试验

    表15   S1-3 长期试验（5±3℃）

 通过上述实验可以看出，本发明的冻干粉针剂在40±2℃的高温试验条件下放置5周，各项指标稳定，且在输液过程中稳定；在25±2℃加速试验12月内，指标稳定，且在输液过程中稳定；在5±3℃长期试验12月内，指标稳定，且在输液过程中稳定；尤其三项试验，最后一星期或最后一月的各项指标与最初的指标相比基本无明显变化，由此说明本发明冻干粉针剂的处方具有优异的稳定性，临床试验安全。

（对照例1）

本对照例按照中国专利文献CN100502944C（申请号200510102992.X）公开的一种天门冬酰胺酶注射液的处方，来制备冻干粉针剂，并考察所制备的冻干粉的外观性状及稳定性。

其中该对照例的处方（以1000支计）如下：

 

 按照制药工业中冻干粉针剂的常规制备方法，将按照上述处方量准确称取的十二水合磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、L-半胱氨酸、羟丙基-β-环糊精（样品1中不加）加入注射用水中溶解，再向上述溶液中加入处方量的门冬酰胺酶混合均匀，加水至处方量，溶液用0.22

微孔滤膜过滤除菌；按处方规定量将滤液分装于相应容量规格的管制瓶中，半加塞后置于冷冻干燥机中冻干，真空压塞，轧盖，即得不同处方的样品1和样品2各1000支，保存在-20℃温度下。

本对照例所用试剂的纯度和来源如下：所用的门冬酰胺酶来源于常州千红生化制药股份有限公司；L-半胱氨酸为试剂级纯度，批号为20100831，分子量为157.5，来源于国药集团上海化学试剂公司；二水合磷酸二氢钠、十二水合磷酸氢二钠、氢氧化钠为注射级纯度，来源于国药集团上海化学试剂公司；羟丙基-β-环糊精为试剂级，来源于昆山瑞斯克化工原料有限公司。

见图2，其中（a）图为按照对照组1的处方制成冻干粉针剂后的形态图，（b）图为按照对照组2的处方制成冻干粉针剂后的形态图；由图中我们看到，制得的冻干粉针剂的外观明显不符合“白色冻干块状物”的药典规定，已没有必要进行其他稳定性试验。

不过我们还是考察了对照组1和对照组2的输液稳定性，取对照组1和对照组2的样品各5支，用5mL注射用水溶解（一次溶解），接着分别抽取其中的2mL注入到100mL葡萄糖注射液或氯化钠注射液中（二次溶解），混合均匀，然后按照2010版《中国药典》二部附录IX H可见异物检查法测定，分别在1、3、6小时后在澄明度检查仪上对输液进行观察，观察指标及结果判断如下表16。

表16

 因此由冻干粉外观及稳定性试验结果可知，按照天门冬酰胺酶注射液的处方制备的冻干粉针剂不合格，不能用于临床使用。

Claims (6)

1.一种门冬酰胺酶冻干粉针剂，包括门冬酰胺酶和甘露醇，其特征在于：还包括缓冲剂、表面活性剂，其中表面活性剂是非离子型表面活性剂；在制备所述的门冬酰胺酶冻干粉针剂的过程中具有用作溶剂并最终少于加入量的5%的注射用水；相对于10000单位门冬酰胺酶来计算，甘露醇为40～100mg，缓冲剂为3～15mg，非离子型表面活性剂为2～8mg，制备过程中用作溶剂的注射用水的加入量为0.8～2.4g；制备过程冻干前溶液的pH值由NaOH溶液调节为7.1～7.5；其中所述缓冲剂为碳酸氢钠、甘氨酸盐、组氨酸盐或TRIS-HCl，或者是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的磷酸盐缓冲体系；所述非离子型表面活性剂为泊洛沙姆188、聚氧乙烯醚（35）蓖麻油、聚乙二醇硬脂酸酯15、吐温20或吐温80。

2.根据权利要求1所述的门冬酰胺酶冻干粉针剂，其特征在于：相对于10000单位门冬酰胺酶来计算，甘露醇为40～80mg，缓冲剂为4～6mg，非离子型表面活性剂为4～6mg；制备过程中用作溶剂的注射用水1.4～2.4g。

3.一种如权利要求1所述的门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法，其特征在于具有以下步骤：

①将按照处方量准确称取的甘露醇、缓冲剂和非离子型表面活性剂加入预冷至10℃以下的注射用水中溶解，再加入氢氧化钠调节溶液pH值为7.1～7.5；

②向步骤①得到的溶液中加入处方量的门冬酰胺酶，混合均匀，用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH值为7.1～7.5；

③向步骤②得到的溶液中加水至处方规定，加水后的溶液用孔径为0.20～0.25μm的微孔滤膜过滤除菌而得到滤液；

④按每瓶10000单位门冬酰胺酶将步骤③得到的滤液分装于管制瓶中，半加塞后置于冷冻干燥机中冻干，待干燥后真空压塞，轧盖，贴标签，即得冻干粉针剂，保存在2～8℃温度下。

4.根据权利要求3所述的门冬酰胺酶冻干粉针剂的制备方法，其特征在于：步骤④中，滤液分装于相应管制瓶中半加塞后冻干时，预冻至-25℃后，保持120min，抽真空，在660min内升华至0℃，保温270min，并在150min内升温至25℃，保温240min，至门冬酰胺酶冻干粉针剂的水分在5%以内，从而完成冻干程序。

5.一种门冬酰胺酶溶解液，其特征在于：溶解液的溶剂为注射用水，溶质包括缓冲剂和非离子型表面活性剂；所述的缓冲剂为碳酸氢钠、甘氨酸盐、组氨酸盐或TRIS-HCl，或者是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的磷酸盐缓冲体系；所述的非离子型表面活性剂为泊洛沙姆188、聚氧乙烯醚（35）蓖麻油、聚乙二醇硬脂酸酯15、吐温20或吐温80；其中每5.0g的溶解液中包括缓冲剂3～15mg，非离子型表面活性剂2～8mg；溶解液的pH值由NaOH溶液调节为7.1～7.5。

6.根据权利要求5所述的门冬酰胺酶溶解液，其特征在于：使用时相对于每 10000单位待溶解的门冬酰胺酶冻干粉针剂，所用的门冬酰胺酶溶解液中的缓冲剂为3～15mg，非离子型表面活性剂为2～8mg，溶剂注射用水为1～15g。 

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