CN102134738A - 一种有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法，该方法是以铵根离子作为外界平衡离子参与到配合物中，包括以下步骤：⑴在0~4℃条件下，将偏钒酸铵、氢氧化锂、草酸、盐酸羟胺和水搅拌溶解在容器Ⅰ中，用盐酸溶液调节溶液的pH值，得淡黄绿色澄清溶液；⑵在另一较大的容器Ⅱ中加入无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于其中，将容器Ⅱ密封，置于冰箱中，静置3～7天后，容器Ⅰ底部析出白色针状晶体；⑶取出容器Ⅰ底部晶体，先用去离子水清洗数次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗数次，置于干燥器中得到干燥纯净的晶体即有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体。本发明得到的晶体生物活性好，其制备方法简单，易操作，时间短。

Description

一种有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法

技术领域

本发明涉及晶体的制备方法，具体地说是一种有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法。

背景技术

钒是某些动物体必需的微量元素，可能在葡萄糖的代谢过程中起着非常重要的作用，研究发现：一些无机钒酸盐及钒有机配体的配合物具有很好的类胰岛素活性，目前已有少数钒的化合物投入到临床试验阶段。无机钒酸盐的毒性大、脂溶性小、生物利用度低、所需剂量大，所以它在有机体中的吸收利用率较低，而且大量使用有很大的毒副作用，因而影响了它在药物领域的广泛应用。鉴于此，提高钒化合物的生物利用度并降低它的毒性至关重要，解决这些问题的常用方法是选择合适的有机分子配体，合成具有一定稳定性的钒配合物。晶体的析出时间与混合溶剂中乙醇与水的比例有关，选用扩散法所形成的混合溶剂与直接用乙醇与水混合形成的混合溶剂相比能更好更便捷的找到最适合晶体析出的水和乙醇的比例的混合溶剂，以便能在最短时间得到析出晶体。磷酸酯酶是催化磷酸酯键水解的去磷酸化酶，脱磷酸化就是由磷酸酪氨酸酶1B（PTP1B）催化的，PTP1B酶是胰岛素信号传导路径中的关键的负调因子，任何能抑制PTP1B酶的物质都可以促进胰岛素信号的传导，若有较好的PTP1B酶抑制率，并相应的IC₅₀值较低的情况下就可能成为一种潜在的治疗糖尿病的新药。

发明内容

本发明的目的在于针对极少数的钒的化合物具有很好的类胰岛素活性，提供了一种新的有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法。

为实现本发明的目的，采用以下技术方案：

一种有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法，该方法包括以下具体步骤：

第一步  在控制反应温度为0~4℃条件下，将偏钒酸铵、草酸、氢氧化锂、盐酸羟胺和水按物质的量比为1∶1.37∶6.26∶4.96∶700搅拌溶解在容器Ⅰ中，然后用1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值在6.50~7.50之间，得淡黄绿色澄清溶液；

第二步  在另一较大的容器Ⅱ中加入无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于其中，将容器Ⅱ密封，置于3～4℃的冰箱中，静置3～7天后，容器Ⅰ底部析出白色针状晶体；其中无水乙醇的加入量与第一步反应物中水的量相同；

第三步  取出容器Ⅰ底部晶体，先用去离子水清洗数次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗数次，置于干燥器中，1小时后得到干燥纯净的晶体即有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体。

本发明具有以下显著优点：

（1）合成的新配合物与同类羧酸类羟胺钒配合物相比具有更高的PTP1B酶抑制率（20微克/毫升的配合物浓度，对PTP1B酶的抑制率为73.125%，IC₅₀=4.492微克/毫升）。

（2）方法简单，易操作，时间短；合成的晶体与同类化合物相比具有更好的抗糖尿病活性。

具体实施方式

实施例1

第一步、在冰水浴不断搅拌的条件下，将0.3561g氢氧化锂、0.1587g偏钒酸铵溶解在盛有15ml水的25ml容器Ⅰ中，搅拌让其溶解。再依次加入0.2356g草酸、0.4677g盐酸羟胺，搅拌溶解后，逐滴加入1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值为6.86，得淡黄绿色澄清溶液。

第二步、在另一个100ml的容器Ⅱ中装上15ml的无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于容器Ⅱ中，将其密封，置于4℃的冰箱中，静置3天后，小烧杯底部有白色针状晶体析出。

第三步、取出烧杯底部晶体，先用去离子水清洗三次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中一小时后得到干燥纯净的晶体。

第四步、取一定量的晶体做活性测试和结构分析，测试结果晶体表现出一定程度的活性，对PTP1B酶的抑制率为73.125%，IC₅₀=4.492微克/毫升。

实施例2

第一步、在冰水浴不断搅拌的条件下，将0.3661g氢氧化锂、0.1687g偏钒酸铵溶解在盛有15ml水的25ml容器Ⅰ中，搅拌让其溶解。再依次加入0.2359g草酸、0.4687g盐酸羟胺，搅拌溶解后，逐滴加入1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值为6.64，得淡黄绿色澄清溶液。

第二步、在另一个100ml的容器Ⅱ中装上15ml的无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于容器Ⅱ中，将其密封，置于4℃的冰箱中，静置4天后，小烧杯底部有白色针状晶体析出。

第三步、取出烧杯底部晶体，先用去离子水清洗三次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中一小时后得到干燥纯净的晶体。

第四步、取一定量的晶体做活性测试和结构分析，测试结果晶体表现出一定程度的活性，对PTP1B酶的抑制率为74.125%，IC₅₀=4.472微克/毫升。

实施例3

第一步、在冰水浴不断搅拌的条件下，将0.3581g氢氧化锂、0.1589g偏钒酸铵溶解在盛有15ml水的25ml容器Ⅰ中，搅拌让其溶解。再依次加入0.2358g草酸、0.4678g盐酸羟胺，搅拌溶解后，逐滴加入1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值为6.56，得淡黄绿色澄清溶液。

第二步、在另一个100ml的容器Ⅱ中装上15ml的无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于容器Ⅱ中，将其密封，置于4℃的冰箱中，静置5天后，小烧杯底部有白色针状晶体析出。

第三步、取出烧杯底部晶体，先用去离子水清洗三次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中一小时后得到干燥纯净的晶体。

第四步、取一定量的晶体做活性测试和结构分析，测试结果晶体表现出一定程度的活性，对PTP1B酶的抑制率为73.229%，IC₅₀=4.463微克/毫升。

实施例4

第一步、在冰水浴不断搅拌的条件下，将0.3461g氢氧化锂、0.1487g偏钒酸铵溶解在盛有15ml水的25ml容器Ⅰ中，搅拌让其溶解。再依次加入0.2356g草酸、0.4627g盐酸羟胺，搅拌溶解后，逐滴加入1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值为7.26，得淡黄绿色澄清溶液。

第二步、在另一个100ml的容器Ⅱ中装上15ml的无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于容器Ⅱ中，将其密封，置于4℃的冰箱中，静置5天后，小烧杯底部有白色针状晶体析出。

第三步、取出烧杯底部晶体，先用去离子水清洗三次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中一小时后得到干燥纯净的晶体。

第四步、取一定量的晶体做活性测试和结构分析，测试结果晶体表现出一定程度的活性，对PTP1B酶的抑制率为73.825%，IC₅₀=4.392微克/毫升。

实施例5

第一步、在冰水浴不断搅拌的条件下，将0.3564g氢氧化锂、0.1586g偏钒酸铵溶解在盛有15ml水的25ml容器Ⅰ中，搅拌让其溶解。再依次加入0.2355g草酸、0.4676g盐酸羟胺，搅拌溶解后，逐滴加入1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值为6.96，得淡黄绿色澄清溶液。

第二步、在另一个100ml的容器Ⅱ中装上15ml的无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于容器Ⅱ中，将其密封，置于4℃的冰箱中，静置3天后，小烧杯底部有白色针状晶体析出。

第三步、取出烧杯底部晶体，先用去离子水清洗三次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中一小时后得到干燥纯净的晶体。

第四步、取一定量的晶体做活性测试和结构分析，测试结果晶体表现出一定程度的活性，对PTP1B酶的抑制率为72.127%，IC₅₀=4.473微克/毫升。

实施例6

第一步、在冰水浴不断搅拌的条件下，将0.3528g氢氧化锂、0.1534g偏钒酸铵溶解在盛有15ml水的25ml容器Ⅰ中，搅拌让其溶解。再依次加入0.2345g草酸、0.4638g盐酸羟胺，搅拌溶解后，逐滴加入1mol/l的盐酸溶液调节溶液的PH值为6.90，得淡黄绿色澄清溶液。

第二步、在另一个100ml的容器Ⅱ中装上15ml的无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于容器Ⅱ中，将其密封，置于4℃的冰箱中，静置3天后，小烧杯底部有白色针状晶体析出。

第三步、取出烧杯底部晶体，先用去离子水清洗三次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中一小时后得到干燥纯净的晶体。

第四步、取一定量的晶体做活性测试和结构分析，测试结果晶体表现出一定程度的活性，对PTP1B酶的抑制率为73.734%，IC₅₀=4.456微克/毫升。

Claims (1)

1.一种有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体的制备方法，其特征在于该方法包括以下具体步骤： 

第一步  在控制反应温度为0~4℃条件下，将偏钒酸铵、草酸、氢氧化锂、盐酸羟胺和水按物质的量比为1∶1.37∶6.26∶4.96∶700搅拌溶解在容器Ⅰ中，然后用1mol/l的盐酸溶液调节溶液的pH值在6.50~7.50之间，得淡黄绿色澄清溶液；

第二步  在另一较大的容器Ⅱ中加入无水乙醇，将第一步盛有反应液的容器Ⅰ置于其中，将容器Ⅱ密封，置于3～4℃的冰箱中，静置3～7天后，容器Ⅰ底部析出白色针状晶体；其中无水乙醇的加入量与第一步反应物中水的量相同；

第三步  取出容器Ⅰ底部晶体，先用去离子水清洗数次，然后依次用无水乙醇和乙醚各清洗数次，置于干燥器中，1小时后得到干燥纯净的晶体即有生物活性的草酸羟胺钒配合物晶体。