CN102127154A - A54-gflg-dox偶联物及其偶联方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种A54-GFLG-DOX偶联物，其结构如式（1）所示，其中，所述A54为肝癌特异性靶向肽，其氨基酸序列为NH2－AGKGTPSLETTP－COOH，所述A54通过连接肽GFLG与阿霉素相偶联。本发明还公开了A54-GFLG-DOX偶联物的制备方法及其在制备治疗肝癌药物中的应用。本发明具有靶向给药、增强药效、毒副作用减轻等有益效果。

Description

A54-GFLG-DOX偶联物及其偶联方法和应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域中治疗肿瘤的偶联靶向药物及其制备方法和应用，特别是涉及一种A54-GFLG-DOX偶联物及其制备方法和应用。
背景技术
肝癌发生于肝脏，可分为原发性肝癌及转移性肝癌。我们通常所说肝癌即指原发性肝癌（hepatocellular carcinoma, HCC）。原发性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一，在肿瘤致死率的病因中占第二位，发病率呈逐年上升趋势，全国每年因肝癌死去的人数占世界肝癌死亡总人数的45%，严重威胁着人们的健康和生命。如何有效地诊断和治疗肝癌一直是全世界特别是中国科学工作者致力于研究和探索的热点。其中肝癌靶向治疗是非常重要的发展方向。肿瘤靶向治疗就是借助于与肿瘤高度特异性结合的药物载体，将细胞毒性物质即弹头（如放射性核素、化疗药物、毒素等）选择性地运送到肿瘤部位，达到定向杀伤肿瘤细胞、同时不伤害正常细胞的治疗目的。靶向药物最显著的特点就是能将药物最大限度地运送到靶区，使药物在靶区浓集，直接作用于病变组织、器官和细胞，延长药物与靶部位的作用时间，使到达需药部位的药量增加，从而减少用药量、药物的毒副作用，达到高效低毒的治疗效果。近年来肿瘤靶向治疗在临床应用中还存在许多有待解决的技术问题，如药物载体的选择以及载体与弹头的偶联方式，这就限制了肝癌靶向治疗的发展。因此，寻找一种更为安全有效的载体是目前肿瘤靶向治疗的研究重点。
肝癌肿瘤组织特异性靶向肽A54，是本发明人在其发明专利（专利号：ZL200410017048.X；发明名称为：体内筛选的肝癌组织特异性粘附肽及其用途）所揭示的，利用体内噬菌体展示肽库技术，筛选到在体内具有特异性结合能力的肝癌肿瘤组织特异性靶向肽A54，用其取代传统靶向治疗领域中单克隆抗体的作用，充分利用多肽靶向载体分子量低、免疫原性小的特点，弥补了单克隆抗体的不足，建立一套切实有效的基于多肽的肝癌鉴定和靶向治疗系统。
阿霉素（Doxorubicin，DOX ）是一种经典的蒽环类广谱抗肿瘤的抗生素类药物，可以与肿瘤细胞DNA交联，通过抑制Ⅱ拓扑异构酶的活性来抑制DNA复制，并阻断RNA聚合酶的作用，抑制RNA的合成，从而到达抑制肿瘤生长的目的，目前已经被广泛地应用于急性淋巴细胞白血病、前列腺癌、肝癌等多种不同肿瘤的治疗，取得了非常好的治疗效果。但是阿霉素在临床应用中最大的问题就是：阿霉素具有较为明显的骨髓抑制、心肌毒性和神经毒性等毒副作用。在用药的初期往往会出现急性的心肌毒性，可能很快减轻，但当阿霉素在人体中的累积用量达到500mg/m2的时候就会出现比较明显的慢性心肌中毒症状，严重危害病人的身体健康，使阿霉素在临床应用时大大受到限制。
GFLG是一个四个氨基酸组成的小肽段，这个肽段在血清中是稳定存在的，不过，一旦进入到肿瘤细胞内，就会被溶酶体内的组织蛋白酶B（Cathepsin B）降解，而溶酶体内的组织蛋白酶B（Cathepsin B）在肿瘤组织中通常是高表达的。
本发明公开的肝癌特异性靶向载体A54加上一段连接肽GFLG得到A54-GFLG后，将阿霉素与其偶联得到A54-GFLG-DOX的偶联产物，不但可以将肿瘤组织局部的药物浓度显著提高，而且在到达肿瘤细胞内部之后，在溶酶体内的组织蛋白酶（Cathepsin B）作用下，会被降解掉，从而释放出有杀伤肿瘤细胞作用的阿霉素，从而增强药物对肿瘤的杀伤能力，还可以相应地减少用药量，并减少药物在非肿瘤组织中的药物分布，明显减轻因阿霉素累积所引起的各种毒副作用，具有十分重要的应用价值。
发明内容
本发明提供了一种A54-GFLG-DOX偶联物，其结构为以下结构式（1）：
式（1）
其中，所述A54为肝癌特异性靶向肽，其氨基酸序列为NH2－AGKGTPSLETTP－COOH，所述A54通过连接肽GFLG与阿霉素相偶联。
本发明中，所述肝癌特异性靶向肽A54的氨基酸序列为NH2－AGKGTPSLETTP－COOH；为噬菌体展示随机12肽库经过亲和淘选、鉴定，扩增和测序，推导而出的氨基酸序列，并经过体内回输，筛选出特异性地与肝癌细胞结合的多肽，见本发明人的发明专利（专利号：ZL200410017048.X；发明名称为：体内筛选的肝癌组织特异性粘附肽及其用途）。
本发明中，所述阿霉素（DOX）为目前临床上经典的蒽环类抗生素，是一种广谱抗肿瘤药物，杀伤作用强，但毒副作用大，其结构式如下图：
Figure 779064DEST_PATH_IMAGE002
本发明中，所述连接肽GFLG为四个氨基酸组成的小肽段，其序列依次是甘氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、甘氨酸。
本发明A54-GFLG-DOX偶联物，既保持了阿霉素对肿瘤细胞的杀伤作用，同时又靶向地作用于肿瘤部位，减少了对正常组织的杀伤作用，实现了在靶向治疗中既能够有效杀伤病变组织，又能够在最大程度上保护正常组织。
本发明还提供了一种A54-GFLG-DOX偶联物的制备方法，其特征在于，先在A54的末端羧基上加上连接肽GFLG，形成多肽A54-GFLG，然后，将阿霉素偶联在多肽A54-GFLG的末端羧基上。
本发明中，是在所述肝癌特异性靶向肽A54的羧基端加上一段连接肽GFLG得到A54-GFLG，再将所述阿霉素偶联在A54-GFLG末尾甘氨酸的羧基上。其中，所述阿霉素与肝癌特异性靶向肽A54-GFLG( NH2－AGKGTPSLETTPGFLG－COOH)的末端羧基进行化学偶联结合。
更进一步的是，本发明用Fmoc保护所述多肽A54-GFLG中间氨基酸上的羧基，从而使偶联反应仅发生在A54-GFLG的末尾甘氨酸的羧基上。
本发明A54-GFLG-DOX偶联物与DOX-A54H比较，两者的合成方式是有差异的。本发明A54-GFLG-DOX偶联物中，阿霉素是偶联在GFLG末端甘氨酸的羧基上的。而在DOX-A54H偶联物中，阿霉素是偶联在A54（AGKGTPSLETTP）这个肽段中谷氨酸的侧链羧基上的。
本发明中A54-GFLG与阿霉素的化学偶联方法，是指在液相中进行偶联阿霉素的方法。其中的常规技术参照《有机化学实验》，其中多肽的保护，比较目前常用的固体肽类化学的方法，本发明采用了液相中进行偶联阿霉素的方法，与传统的固相方法相比，在液相中活化效率更好，增大多肽和阿霉素接触机会，与阿霉素的结合效率更高，目标产物的产率有提高。
本发明还提供了A54-GFLG-DOX偶联物在制备治疗肝癌药物中的应用。
从细胞水平观察，在细胞毒性实验中，本发明A54-GFLG-DOX偶联物体现出了比DOX-A54H更高的细胞毒性作用。而在药物与细胞的靶向性实验中，本发明A54-GFLG-DOX偶联物与DOX-A54H具有相似的细胞结合力。但是在体内实验的结果看来，本发明A54-GFLG-DOX偶联物比DOX-A54H体现出了更为明显的抑制肿瘤作用。
通过细胞毒性实验检测本发明A54-GFLG-DOX偶联物对肝癌细胞株的细胞活力的影响以及荷瘤裸鼠体内实验，从而确定本发明靶向作用更好，杀伤作用更强的药物；通过化学偶联药物对几种细胞株的结合部位的检测，联系阿霉素作用细胞的作用机制，进而确立本发明最佳的靶向药物。
附图说明
图1 ：本发明A54-GFLG-DOX偶联物的合成路线
图2 ：本发明A54-GFLG-DOX偶联物对肝癌细胞Bel-7402细胞存活率的影响
图3 ：本发明A54-GFLG-DOX偶联物对肝癌细胞Bel-7402的靶向作用
图4 ：本发明A54-GFLG-DOX偶联物对肝癌细胞Bel-7402荷瘤裸鼠肿瘤的抑制情况
图5 ：本发明A54-GFLG-DOX偶联物对肝癌细胞Bel-7402荷瘤裸鼠肿瘤的抑制情况
图6 ：本发明A54-GFLG-DOX偶联物对肝癌细胞Bel-7402荷瘤裸鼠体重的影响情况
具体实施方式
实施例中所用的实验材料：
（1）试剂：
阿霉素购自浙江海正药业股份有限公司；
MTS（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxy-Methoxyphenyl-2-(4-sulfophenyl) -2H-tetrazolium, inner salt）购自美国Promega公司；
RPMI-1640干粉剂购自美国Invitrogen公司；
新生小牛血清购自美国GIBCO公司；
细胞用二甲基亚砜（DMSO）为美国Amersham-Phamacia公司产品；
胰蛋白酶为Difco进口分装产品；
2-Chlorotrityl Chloride树脂、二甲基亚砜（DMSO）、三乙胺（TEA）、9-芴甲氧羰基(Fmoc)、N-羟基丁二酰亚胺（HOSu）、哌啶、三氟乙酸（TFA）、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）、二环已基碳二亚胺（DCC）和其他常规试剂均为国产分析纯。
（2）实验器材和设备：
96孔细胞培养板（COSTAR ，USA）；
二氧化碳培养箱（SANYO，JAPAN）；
倒置显微镜（OLYMPUS BH-2，JAPAN）；
倒置荧光显微镜（LEICA DMI4000B）；
酶标仪（PowerWave XS，美国Bio-Tek公司）；
-30℃和-80℃冰箱（SANYO，JAPAN）；
高速离心机（日本HITACHI 20PR-52D）；
恒温振荡器（太仓市医疗械厂，TH2-95型）；
台式离心机（上海市离心机械研究所，TL5.0型）；
SPF级动物饲养实验室；
超净工作台（上海上净净化设备有限公司）。
（3）实验细胞株：
肝癌细胞株BEL-7402购自中国科学院上海细胞库。
（4）实验用BALB/C裸鼠：
购自上海斯莱克实验动物有限公司
（5）肝癌特异性靶向肽A54（AGKGTPSLETTP）
由上海强耀生物科技有限公司（ChinaPeptides Co., Ltd）合成。
实施例1： A54-GFLG-DOX偶联物的化学合成
多肽A54（肝癌特异性靶向肽A54，氨基酸序列：AGKGTPSLETTP）的结构中含有两个羧基-COOH，在末端羧基连上四个氨基酸GFLG，得到A54-GFLG。利用Fmoc将肝癌特异性靶向肽A54中间的-COOH进行保护，暴露出GFLG末端-COOH，HoSu活化多肽，使其末端的羧基与三乙胺（Et3N）中和后的盐酸阿霉素的-NH2进行反应后，哌啶除去Fmoc，通过制备型HPLC纯化分离得到产物。
具体操作步骤如下：
1、利用常规多肽合成技术，在多肽A54的末端羧基上依次连接四个氨基酸G、F、L、G，形成多肽A54- GFLG；
2、取阿霉素盐酸盐5.8mg（0.01mmol）先用DMSO溶解，低温下（4℃）用三乙胺中和，调节pH到中性，备用；
3、利用Fmoc将多肽A54 - GFLG中间氨基酸的-COOH进行保护；将带有Fmoc的全保护多肽(命名为A54-GFLG)用三氟乙醇从树脂下切割下来，得纯产品，称取50mg（粗肽）；
4、粗肽用无水DMF/二氯甲烷溶解，低温下加入HOSu活化，分子筛干燥得到活化的多肽；
5、低温下（4℃），缓慢滴加DMSO溶解的阿霉素溶液, 反应过夜（12h），加入哌啶溶液，去掉Fmoc氨基保护剂，然后产品继续切割掉侧链保护的基团；
6、HPLC纯化分离最终的目标产品A54-GFLG-DOX偶联物。
实施例2：A54-GFLG-DOX和DOX-A54H的细胞毒性检测
为了检测合成后的A54-GFLG-DOX是否保持了阿霉素对肝癌细胞的杀伤作用，采用细胞毒性实验，检测药物作用细胞后，相对于未加药的对照组，细胞活力的变化情况。具体操作步骤如下：
1.      0.25%胰酶消化贴壁细胞BEL-7402，将细胞收集到含血清的培养基中；
2.      细胞计数，离心，培养基重悬，调整细胞浓度为1×105个/ml；
3.      在96孔细胞培养板中接种细胞，每孔加入细胞悬液90ul。留出3个空白孔，加入无细胞培养基100ul，作为空白对照；
4.      用培养基稀释药物A54-GFLG-DOX、DOX-A54H、DOX-A54M和DOX，制成一系列，共6个浓度低度，每孔加入10ul药物，每种浓度3个复孔；
DOX-A54M，是指将A54十二肽AGKGTPSLETTP中第五位的T以及第六位的P突变成了两个A，再与阿霉素进行偶联得到的产物。
5.      于37℃，饱和湿度，5%CO2细胞培养箱中培养48小时；
6．48小时后，每孔加入10ul的MTS溶液，将细胞培养板于37℃，饱和湿度，5%CO2细胞培养箱培养1～4小时；
7．用酶标仪读取490nm处的吸光值。
各药物的细胞毒性结果，如图2所示。图2结果表明，本发明A54-GFLG-DOX偶联物保持了DOX对细胞的杀伤作用。和DOX-A54H相比，本发明A54-GFLG-DOX偶联物在A54肽之后所加的一段可降解的肽段GFLG，更增强了本发明A54-GFLG-DOX偶联物对细胞的杀伤作用。图2表明本发明A54-GFLG-DOX偶联物仍然呈明显的剂量-效应关系。
实施例3：A54-GFLG-DOX和DOX-A54H的靶向性检测
阿霉素分子作为经典的抗生素类广谱抗肿瘤药物，通过与肿瘤细胞DNA交联，抑制DNA 复制，并阻断RNA 聚合酶的作用，抑制RNA 的合成，从而达到抑制肿瘤生长的目的。并且阿霉素本身带有红色荧光，根据阿霉素的作用机制及特性，本发明将合成的两种目的药物加入肝癌细胞株中，孵育后通过观测阿霉素的红色荧光，来判定本发明A54-GFLG-DOX偶联物和DOX-A54H的荧光强度，进而判定比较两种药物的活性。
具体操作步骤如下：
1.      在96孔细胞培养板中接种细胞，使细胞数目为1×104个/孔；
2.      于37℃，饱和湿度，5%CO2细胞培养箱中培养，至细胞覆盖率为80%～90%；
3.      配制浓度为1uM的药物，加入各孔中，细胞培养箱中培养30min；
4.      弃去药物，加入4%多聚甲醛100ul/孔，固定10min，PBS洗涤2次；
5.      1ug/ml的DAPI避光染色3min；
6.      弃去染液，PBS洗涤3次；
7.      倒置荧光显微镜下观察，拍照。
结果如图3所示。与DOX一样，合成后的本发明A54-GFLG-DOX偶联物和DOX-A54H经过30min的孵育，结合在肝癌细胞株BEL-7402的细胞核部位。图3表明，A54对肝癌细胞有一定的靶向作用，并且在本发明A54-GFLG-DOX偶联物中，当A54加上一段GFLG之后，既没有影响A54对肝癌细胞的靶向作用，也没有影响药物的入核。
图3还表明，相同浓度，相同孵育时间下，DOX-A54M进入核内的量却明显较少。
实验例4：A54-GFLG-DOX和DOX-A54H对肝癌细胞Bel-7402荷瘤裸鼠肿瘤的抑制情况
具体操作步骤如下：
1. 肝癌细胞株BEL-7402的接种：选用3周龄雌性健康BALB/C裸鼠，于SPF级动物实验室无菌饲养，待用。选取生长状态良好的肝癌细胞株BEL-7402，2.5%胰蛋白酶常规消化后离心，用无菌的无血清培养基重悬细胞，调整浓度至2×107个细胞/ml。用1ml的一次性无菌注射器将重悬好的细胞悬液100ul（约2×106个细胞）注射至裸鼠右侧腋下。约3—4周后，肿瘤大小达到40mm3。
2. 将肿瘤直径大小约为40mm3的荷瘤裸鼠一只，颈椎脱臼法处死。用镊子和剪刀小心剥离出腋下肿块，剪去瘤块表面的薄膜，PBS清洗干净后，放入含无血清RPMI-1640培养基中，保持瘤块表面的湿润。用剪刀将瘤块剪成为1 mm3的均匀小块，接种至裸鼠右侧腋下，共计45只。分为5组，分别为PBS、DOX、A54-GFLG-DOX、DOX-A54H以及DOX-A54M组，每组9只。
DOX-A54M，是指将A54十二肽AGKGTPSLETTP中第五位的T以及第六位的P突变成了两个A，再与阿霉素进行偶联得到的产物。
3. 待肿瘤大小达到40mm3，通过尾静脉分别注射浓度为3mM的DOX、A54-GFLG-DOX、DOX-A54H以及DOX-A54M，每只裸鼠100ul。
4. 每6天用游标卡尺测量一次肿瘤的长直径（a）和短直径（b），用公式V=π（a×b2）/6计算出肿瘤的体积（mm3）。共给药5次，比较5组实验动物的肿瘤大小。每6天称量裸鼠的体重（g），比较5组实验动物的体重大小。
实验结果如图 4、图 5、图6。
图4结果表明， A54-GFLG-DOX对荷瘤裸鼠的肿瘤都有明显的抑制作用，与DOX-A54H相比，A54-GFLG-DOX抑制肿瘤的作用更明显。本发明A54-GFLG-DOX偶联物中的GFLG，当药物进入肿瘤部位之后，在溶酶体内组织蛋白酶的降解下，DOX被释放出来，从而更好地起到杀伤肿瘤细胞的作用。
图5所示A54-GFLG-DOX，DOX-A54H，DOX-A54M对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制影响。图5表明，A54-GFLG-DOX对荷瘤裸鼠的肿瘤生长有明显的抑制作用。与DOX-A54H、DOX-A54M相比较，A54-GFLG-DOX抑制肿瘤生长的作用更加明显。
图6结果表明，DOX对荷瘤裸鼠的的体重下降有非常明显的作用，表明DOX对裸鼠各组织的毒副作用比较强。图6表明，注射了A54-GFLG-DOX的裸鼠的体重未见明显下降。同样，注射了DOX-A54H或DOX-A54M的裸鼠的体重亦未见明显下降。
以上结果表明，阿霉素对于肿瘤具有很好的抑制作用，但是对于裸鼠的毒副作用比较强，裸鼠的体重下降较为明显。而本发明A54-GFLG-DOX具有和DOX相似的抑制肿瘤的作用，但对于裸鼠的体重影响不明显。本发明A54-GFLG-DOX中，其中的A54对于肝癌细胞的靶向作用，将药物靶向到了肝癌部位。另一方面，当本发明A54-GFLG-DOX 到达肝癌部位之后，GFLG在溶酶体内的组织蛋白酶的作用下发生了降解，从而释放出DOX，使肿瘤部位的具有杀伤作用的DOX的浓度达到比较大的剂量，从而更好地杀伤肿瘤细胞。与DOX-A54H相比，本发明A54-GFLG-DOX抑制肿瘤的效果非常明显。

Claims (4)

1.一种A54-GFLG-DOX偶联物，其结构为以下结构式（1）：
Figure 304069DEST_PATH_IMAGE001
式（1）
其中，所述A54为肝癌特异性靶向肽，其氨基酸序列为NH2－AGKGTPSLETTP－COOH，所述A54通过连接肽GFLG与阿霉素相偶联。
2.如权利要求1所述A54-GFLG-DOX偶联物的制备方法，其特征在于，先在A54的末端羧基上加上连接肽GFLG，形成多肽A54-GFLG，然后，将阿霉素偶联在多肽A54-GFLG的末端羧基上。
3.如权利要求2所述A54-GFLG-DOX偶联物的制备方法，其特征在于，用Fmoc保护所述多肽A54-GFLG中间氨基酸上的羧基。
4.如权利要求1所述A54-GFLG-DOX偶联物在制备靶向治疗肝癌药物中的应用。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104800858A (zh) * 2015-04-27 2015-07-29 中国医学科学院基础医学研究所 Hsp90抑制肽偶联物及其在肿瘤治疗中的应用
CN107216392A (zh) * 2016-03-17 2017-09-29 华东师范大学 蟾蜍毒素衍生物的抗体药物偶联物及其制备方法和应用
CN109692334A (zh) * 2018-12-09 2019-04-30 华东交通大学 具有靶向和响应缓释特性的抗骨髓瘤载药微球及制备方法
CN110193086A (zh) * 2019-05-22 2019-09-03 首都医科大学 一种la-gflg-dox偶联物及其制备方法与用途
CN111514309A (zh) * 2019-02-03 2020-08-11 重庆阿普格雷生物科技有限公司 一种聚乙二醇偶联药物、其制备方法及用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1563077A (zh) * 2004-03-19 2005-01-12 华东师范大学 体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1563077A (zh) * 2004-03-19 2005-01-12 华东师范大学 体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
《J Control Release》 20071204 A. Malugin, et al. Liberation of Doxorubicin from HPMA Copolymer Conjugate is Essential for the Induction of Cell Cycle Arrest and Nuclear Fragmentation in Ovarian Carcinoma Cells ，第2-4页，图1 1-4 第124卷, *
《现代免疫学》 20100521 孟姣等 肝癌特异性黏附肽A54体外靶向治疗研究 第217-220页 1-4 第30卷, 第3期 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104800858A (zh) * 2015-04-27 2015-07-29 中国医学科学院基础医学研究所 Hsp90抑制肽偶联物及其在肿瘤治疗中的应用
CN104800858B (zh) * 2015-04-27 2017-11-21 中国医学科学院基础医学研究所 Hsp90抑制肽偶联物及其在肿瘤治疗中的应用
US10918731B2 (en) 2015-04-27 2021-02-16 Institute Of Basic Medical Sciences, Chinese Academy Of Medical Sciences HSP90 inhibitory peptide conjugate and application thereof in treating tumor
CN107216392A (zh) * 2016-03-17 2017-09-29 华东师范大学 蟾蜍毒素衍生物的抗体药物偶联物及其制备方法和应用
CN109692334A (zh) * 2018-12-09 2019-04-30 华东交通大学 具有靶向和响应缓释特性的抗骨髓瘤载药微球及制备方法
CN109692334B (zh) * 2018-12-09 2022-03-25 华东交通大学 具有靶向和响应缓释特性的抗骨髓瘤载药微球及制备方法
CN111514309A (zh) * 2019-02-03 2020-08-11 重庆阿普格雷生物科技有限公司 一种聚乙二醇偶联药物、其制备方法及用途
CN111514309B (zh) * 2019-02-03 2021-09-17 重庆阿普格雷生物科技有限公司 一种聚乙二醇偶联药物、其制备方法及用途
CN110193086A (zh) * 2019-05-22 2019-09-03 首都医科大学 一种la-gflg-dox偶联物及其制备方法与用途
CN110193086B (zh) * 2019-05-22 2022-09-02 首都医科大学 一种la-gflg-dox偶联物及其制备方法与用途

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