CN102124973A

CN102124973A - 一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法

Info

Publication number: CN102124973A
Application number: CN2011100430824A
Authority: CN
Inventors: 张俊彬; 蔡泽平
Original assignee: Shanghai Maritime University
Current assignee: Shanghai Maritime University; Shanghai Ocean University
Priority date: 2011-02-23
Filing date: 2011-02-23
Publication date: 2011-07-20

Abstract

本发明涉及一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法，其特征在于，所述的方法在催产剂中加入催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：胆固醇40-50%、丙烯甘油醇酯20-30%、三油酸甘油酯20-30%。本发明还提供一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂。本发明优点在于：通过对金钱鱼野生亲鱼的驯化和亲本培育过程进行营养强化和对水质理化参数的调控以及激素缓释技术，达到亲本同步性成熟和提高生殖配子质量的目标；通过高效人工催产剂和全人工催产技术，实现雌雄生殖配子同步释放，建立稳定的生殖调控技术和高效的金钱鱼人工繁殖技术。

Description

一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法

技术领域

本发明涉及一种水产养殖方法，具体地说，是一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法。

背景技术

金钱鱼（Scatophagus argus）又名金鼓鱼，为广温广盐性的鱼类，我国东海至南海北部沿海水域近岸岩礁、红树林区、海藻丛生地带和河口附近均有分布，为一种兼具观赏性的优质经济鱼类，在深受我国南方喜欢的品种。近年来因海水养殖方式趋向健康环保，其独有的生物学特性引起了海水养殖的极大关注度。金钱鱼不经过驯化就可以直接在淡水中成活，适应性极强，可在海水、咸淡水和纯淡水不同类型的养殖环境中正常生长和发育，目前在南方的养殖已具备一定规模，扩繁后可在我国大面积推广。金钱鱼不仅经济价值高，而且性情温和，环境适应性和抗病抗逆性极强，金钱鱼是以食植性为主、兼有肉食性的杂食性鱼类，饵料食谱广，这种即有食性杂，又有独特的广盐适应性的优良鱼种在我国海水鱼类养殖的物种中不多见，适合我国主要港湾河口水域及各类咸、淡水池塘以及网箱或工厂化养殖环境养殖，其养殖的前景深具潜力。金钱鱼生长较快，两龄养殖的成鱼体重在1-2市斤，强化培养一年即可上市。金钱鱼出肉率高，适合进一步深加工。目前的市场价格在100-150元/公斤，市场需求巨大，但养殖的苗种主要来源于天然采获，因此出现了“一苗难求”的局面。迄今为止，有关金钱鱼繁、养殖生物学基础研究非常少。

金钱鱼生长快，且食性杂，不需要太多的动物蛋白源，符合当下倡导的“低碳养殖”的要求。金钱鱼既可单养，亦可混养来清除池中的藻类，同时，金钱鱼适合高密度的网箱或工厂化养殖，在魚粉价格持续高涨的趋势下，其养殖的前景深具潜力。

Terence P. Barry等分别于1991和1993年对金钱鱼的繁殖生物学的基础理论进行了研究，证明激素能诱导金钱鱼排精和产卵，但并未对金钱鱼的人工繁殖进行系统的研究。兰国宝等于2005年以天然生长的和网箱养殖的怀卵鱼作为亲鱼，用LRH和HCG等激素进行人工催产尝试，但受精率和孵化率却很低，受精率大约为0.5％-1％，而孵化率则低于0.1％，无实用价值。珠海市龙胜良种鱼苗培育基地采用剖解雄鱼获得成熟精子，对几十尾雌鱼实施人工授精获得了一定数量的鱼苗，但大批雄鱼解剖后就会死亡，这对生产单位是一种损失。严格意义讲，这只是一种半人工繁殖技术，因为只是实现了雌鱼的自然产卵，而且受精率和孵化率都不高。

中国专利文献CN：1739345A公开了高位池驯化和养殖方法。该发明涉及鱼类养殖方法，特别涉及金钱鱼和黄斑蓝子鱼的高位池驯化和养殖方法。一种高位池驯化和养殖方法，其包括如下过程：a.捕捉天然苗种或收购；b.水处理及育苗；c.苗种中间培育，该过程包括苗种驯化、分级饲养和苗种人工诱食、驯饵两个阶段；d.成鱼高位池养殖，该过程中包括生态养殖、食饵投喂、病虫害防治和水处理过程。中国专利文献CN：1282483C公开了一种人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂及用途。该发明公开了一种人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂，其配方组分如下：促黄体素释放激素类似物0.1-1％，17α-羟基孕酮3-10％，胆固醇75-95％，纤维素1-19％；在所述配方组分中加1-3％的植物油，均匀混合，用特制的模具制成圆柱状药丸。该发明用于埋植石斑鱼体内，以诱导其性腺发育成熟达到排卵和排精，以适应石斑鱼人工育苗产业化及大规模养殖对种苗的需求。中国专利文献CN：1180842C公开了鱼类催熟激素缓释微球注射剂及其制备方法，该发明公开了鱼类催熟激素缓释微球注射剂，其特征是：微球中含有激素与缓释剂，激素与缓释剂的质量比等于、小于0.01％。优化方案是将激素粉状微球放入棉籽油中混匀，制成悬浮液。但是关于稳定的生殖调控技术和高效的金钱鱼人工繁殖技术目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法。

本发明的再一的目的是，提供一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法，所述的方法在催产剂中加入催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：

胆固醇 40-50%

丙烯甘油醇酯 20-30%

三油酸甘油酯 20-30%。

所述的方法在人工催产一个半月前按每千克鱼体重10-25μg胸腔注射GnRH-A拮抗剂戈舍瑞林Goserelin。

所述的方法中采用水温25-30℃，盐度19-26‰。

所述的方法中每千克鱼体重注射25-30μg 的催产剂LHRH-A₂、1.0-1.5mg 的催产佐剂多巴胺拮抗剂地欧酮DOM 和0.5ml的催产缓释剂。

所述的方法中催产剂、催产佐剂和催产缓蚀剂混合乳化后胸腔注射。

所述的方法中采用胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：

胆固醇 40-50%

丙烯甘油醇酯 20-30%

三油酸甘油酯 20-30%。

本发明优点在于：

1、通过对金钱鱼野生亲鱼的驯化和亲本培育过程进行营养强化和对水质理化参数的调控以及激素缓释技术，达到亲本同步性成熟和提高生殖配子质量的目标；

2、通过高效人工催产剂和全人工催产技术，实现雌雄生殖配子同步释放，建立稳定的生殖调控技术和高效的金钱鱼人工繁殖技术。

附图说明

附图1是金钱鱼发育中的胚胎照片。

附图2是刚出膜的金钱鱼鱼苗照片。

附图3是金钱鱼前期仔鱼鱼苗照片。

附图4是金钱鱼后期仔鱼鱼苗照片。

具体实施方式

下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1 亲本培育和催熟技术

在每年的1-3月，对雌雄亲鱼进行强化培育，基于金钱鱼亲鱼营养需求研究表明维生素A和E、高度不饱和脂肪酸可显著提高金钱鱼的性腺发育，促使雌雄亲鱼进一步成熟。加强对水质理化参数的调控，金钱鱼的雄鱼性腺发育对环境条件苛刻，这是限制金钱鱼人工繁殖的关键之一。正交研究表明，适宜于金钱鱼性腺发育的盐度范围在19-26‰，温度在25-30℃，微流水的环境可促进金钱鱼性腺发育。

实施例2 亲本同步性成熟技术

金钱鱼亲鱼性腺发育不同步，雄鱼往往提早雌鱼成熟，所以受精率低。为了实现金钱鱼亲鱼性腺的同步发育，在人工催产一个半月前按每千克鱼体重10-25μg胸腔注射GnRH-A拮抗剂戈舍瑞林Goserelin（购自英国阿斯利康制药有限公司），可以显著延缓金钱鱼精巢的成熟，而且能保证金钱鱼亲鱼性腺发育同步。

实施例3 高效人工催产剂和全人工催产技术

单纯采用催产激素如促黄体素释放激素类似物LHRH和人体绒毛膜促性腺激素HCG对金钱鱼催产效果并不十分明显，由于金钱鱼对催产激素的反应时间较长，效益时间太长催产激素就会在生物体内降解，这也是其它报道金钱鱼孵化率很低的原因。我们在催产剂中加入了自我研制的催产缓释剂（胆固醇:丙烯甘油醇酯:三油酸甘油酯(质量比)=40-50%：20-30%：20-30%），不同于其它催产缓释方法，他们是将缓释催产剂制成圆柱状药丸和颗粒，埋植于鱼体内。而本研究是将研制的缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。人工催产中添加了催产佐剂多巴胺拮抗剂地欧酮DOM(domperidon)，研究证明，每千克鱼体重注射25-30μg 的LHRH-A₂、1.0-1.5mg 的DOM和0.5ml的催产剂缓释剂，混合激素胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时。人工繁殖的实验证明，金钱鱼的受精率可达60%以上，孵化率大于50%，显著高于其他报道。

请参照附图1、附图2和附图3，附图1是金钱鱼发育中的胚胎照片，附图2是刚出膜的金钱鱼鱼苗照片，附图3是金钱鱼前期仔鱼鱼苗照片，附图4是金钱鱼后期仔鱼鱼苗照片。

实施例4 金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法

（1）亲本培育和催熟技术

在每年的1-3月，对雌雄亲鱼进行强化培育，基于金钱鱼亲鱼营养需求研究表明维生素A和E、高度不饱和脂肪酸可显著提高金钱鱼的性腺发育，促使雌雄亲鱼进一步成熟。加强对水质理化参数的调控，金钱鱼的雄鱼性腺发育对环境条件苛刻，这是限制金钱鱼人工繁殖的关键之一。适宜于金钱鱼性腺发育的盐度范围在19-26‰，温度在25-30℃，微流水的环境可促进金钱鱼性腺发育。

（2）亲本同步性成熟技术

（3）高效人工催产剂和全人工催产技术

在催产剂中加入了自我研制的催产缓释剂（胆固醇:丙烯甘油醇酯:三油酸甘油酯(质量比)=40-50%：20-30%：20-30%），将研制的缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。人工催产中添加了催产佐剂多巴胺拮抗剂地欧酮DOM(domperidon)，研究证明，每千克鱼体重注射25-30μg 的LHRH-A₂、1.0-1.5mg 的DOM和0.5ml的催产剂缓释剂，混合激素胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时。人工繁殖的实验证明，金钱鱼的受精率可达60%以上，孵化率大于50%，显著高于其他报道。

实施例5 不同催产剂条件下的催产和受精实验

关于金钱鱼的人工繁殖, 国外虽已有以激素诱导精卵成熟的研究，但还未见取得成功的报道；国内目前还没有这方面的研究报告。

金钱鱼人工繁殖难以取得成功的主要原因有两个方面，一是雌雄鱼性腺成熟不同步，一般情况下雄性个体较雌性个体提前15-30 d 成熟。二是雌鱼卵巢不能充分发育成熟。在比重为1. 010~ 1. 015 的半咸水中进行人工促熟饲养时，当卵子发育到约200μm 时，如不及时用激素催产，卵巢会很快退化消失。

催产剂1：促黄体素释放激素类似物LHRH-A₂，注射剂量30μg/kg，分两次进行，间隔时间36-48小时；

催产剂2：人体绒毛膜促性腺激素HCG，注射剂量30μg/kg，分两次进行，间隔时间36-48小时；

催产剂3：促黄体素释放激素LHRH-A₂ 0.5%（质量比）、17α-羟基孕酮（17α-hydroxyprogesterone）5.5%、胆固醇（Cholesterol）75%、纤维素（Cellulose）18%及1%植物油混合均匀，制成圆柱状药丸，用推进器推入鱼体背部肌肉内，注射剂量30μg/kg，分两次进行，间隔时间36-48小时；

催产剂4：促黄体素释放激素LHRH-A₂与蒸馏水溶化的明胶按质量比0.01%混匀，制成乳状液并加入戊二醛固化制成微球，注射时用棉籽油混匀，注射剂量30μg/kg，分两次进行，间隔时间36-48小时；

催产剂5：每千克鱼体重注射30μg 的LHRH-A₂ + 1.5mg DOM，混合激素胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时；

催产剂6：每千克鱼体重注射30μg 的LHRH-A₂ + 1.5mg DOM +0.5ml的催产剂缓释剂，混合激素胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时。催产剂缓蚀剂配方为：胆固醇:丙烯甘油醇酯:三油酸甘油酯(质量比)=40-50%：20-30%：20-30%；

催产剂7：每千克鱼体重注射25μg 的LHRH-A₂ + 1.0mg DOM +0.5ml的催产剂缓释剂，混合激素胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时。催产剂缓蚀剂配方为：胆固醇:丙烯甘油醇酯:三油酸甘油酯(质量比)=40-50%：20-30%：20-30%。

请参见表1，表1是不同催产剂条件下的受精率和孵化率。由表1可以看出，人工繁殖的实验证明，采用在催产剂中加入催产缓释剂的方法，金钱鱼的受精率可达60%以上，孵化率大于50%，显著高于其他报道。

表1 不同催产剂条件下的受精率和孵化率

催产剂	激素种类	受精率	孵化率
				1	LHRH-A₂	0.7%	0.1%
2	HCG	1.0%	0.09%
				3	LHRH-A₂圆柱药丸	30%	22%
4	LHRH-A₂微球	35%	25%
				5	LHRH-A₂+DOM	25%	18%
6	LHRH-A₂+DOM+催产剂缓释剂，30μg/kg	65%	54%
				7	LHRH-A₂+DOM+催产剂缓释剂，25μg/kg	61%	52%
8	空白对照组	0.2%	0.09%

实施例6 催产缓释剂的制备（一）

一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：胆固醇40%，丙烯甘油醇酯30%，三油酸甘油酯30%。先用高速搅拌机将胆固醇与三油酸甘油酯混匀，按后加入丙烯甘油醇酯搅拌得到均一体。将催产缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。

实施例7 催产缓释剂的制备（二）

一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：胆固醇50%，丙烯甘油醇酯30%，三油酸甘油酯20%。先用高速搅拌机将胆固醇与三油酸甘油酯混匀，按后加入丙烯甘油醇酯搅拌得到均一体。将催产缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。

实施例8 催产缓释剂的制备（三）

一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：胆固醇45%，丙烯甘油醇酯25%，三油酸甘油酯30%。先用高速搅拌机将胆固醇与三油酸甘油酯混匀，按后加入丙烯甘油醇酯搅拌得到均一体。将催产缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。

实施例9 催产缓释剂的制备（四）

一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：胆固醇50%，丙烯甘油醇酯20%，三油酸甘油酯30%。先用高速搅拌机将胆固醇与三油酸甘油酯混匀，按后加入丙烯甘油醇酯搅拌得到均一体。将催产缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。

实施例9 催产缓释剂的制备（五）

一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：胆固醇50%，丙烯甘油醇酯25%，三油酸甘油酯25%。先用高速搅拌机将胆固醇与三油酸甘油酯混匀，按后加入丙烯甘油醇酯搅拌得到均一体。将催产缓释剂与催产激素LHRH乳化后胸腔注射。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法，其特征在于，所述的方法在催产剂中加入催产缓释剂，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：

胆固醇 40-50%

丙烯甘油醇酯 20-30%

三油酸甘油酯 20-30%。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法在人工催产一个半月前按每千克鱼体重10-25μg胸腔注射GnRH-A拮抗剂戈舍瑞林Goserelin。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的方法中采用水温25-30℃，盐度19-26‰。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法中每千克鱼体重注射25-30μg 的催产剂LHRH-A₂、1.0-1.5mg 的催产佐剂多巴胺拮抗剂地欧酮DOM 和0.5ml的催产缓释剂。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的方法中催产剂、催产佐剂和催产缓蚀剂混合乳化后胸腔注射。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的方法中采用胸鳍基部注射，分两次进行，间隔时间36-48小时。

7.一种金钱鱼生殖调控与全人工繁殖方法所用的催产缓释剂，其特征在于，所述的催产缓释剂按质量百分比由以下组分组成：

胆固醇 40-50%

丙烯甘油醇酯 20-30%

三油酸甘油酯 20-30%。