CN102119950A - 一种治疗骨损伤的复方接骨木组合物及其制备方法和制药用途 - Google Patents
一种治疗骨损伤的复方接骨木组合物及其制备方法和制药用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种复方接骨木组合物及制备方法和制药用途。本发明的组合物可用于治疗骨损伤等疾病。本发明中药组合物的制备方法包括:将接骨木根皮经95%醇加热回流提取得到乙醇浸膏,混悬于水中进行AB-8大孔树脂吸附,分别用水、10%乙醇、95%乙醇洗脱,将10%乙醇洗脱液浓缩、干燥后制得接骨木有效成分提取物;将牛膝经水煎煮得浸膏,混悬于水中进行D101大孔树脂吸附,分别用水、50%乙醇、95%乙醇洗脱,将50%乙醇洗脱液浓缩、干燥后制得牛膝有效成分提取物;将接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物按比例混合,制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、口服液、注射剂或外用剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种组合物,特别涉及一种治疗骨损伤的中药组合物,该组合物由接骨木和牛膝的有效成分提取物组成,其能够用于治疗骨损伤。
背景技术
骨损伤是临床上的常见病,主要包括:骨折、骨质疏松等,各种形式的骨损伤,均为临床上的高发病。目前,临床上治疗骨损伤的方法很多,大多采用手术或外固定,配合药物治疗的方法。骨损伤愈合时间漫长,病人痛苦大,治疗效果尚有很多不理想之处。以骨折为例,表现为:疗程长、痛苦大、骨折部骨痂大、骨折部位会有不同程度的畸形愈合,功能锻炼时间较晚,骨痂生长慢,有的还需要多次手术等。不仅给病人身心带来极大痛楚,也给家庭和社会造成诸多压力和负担。现在用于治疗骨损伤疾病的药物很多,西药往往组成简单,作用于骨损伤的抗炎、镇痛或促进骨愈合的某一方面,多不专门针对骨损伤的综合治疗,且副作用大;而现在临床中使用的中药制剂,又大都药味众多、疗效不显著、制剂粗糙、质量不易控制、药品稳定性较差等,致使其不能长期应用于临床,真正意义上治疗骨损伤的纯中药制剂仍处于相对缺乏状态。接骨木、牛膝均来自传统中药,在临床中多用于骨损伤的治疗,二者配伍可以发挥协同作用,多途径、多环节综合改善骨损伤的各种指症,二者有效成分的组合物用于骨损伤的治疗还未见报道。
发明内容
本发明提供一种治疗骨损伤的复方接骨木组合物。该组合物由接骨木有效成分提取物和牛膝有效成分提取物组成。该组合物中接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物的重量配比为2∶1、3∶1、4∶1或5∶1,在本发明的优选实施方案中,上述重量配比优选为4∶1。
接骨木,又名接骨草、续骨木、透骨草、接骨风、大叶接骨木、樟木树。性味甘苦,平。功能主治为祛风,利湿,活血,止痛。治风湿筋骨疼痛,腰痛,水肿,风痒,跌打肿痛,骨折,创伤出血。
牛膝,有川牛膝、怀牛膝。性味苦酸平。功能主治为补肝肾,强筋骨,逐瘀通经,引血下行。用于腰膝酸痛,筋骨无力,肝阳眩晕。
本发明还提供了上述复方接骨木组合物的制备方法,包括以下步骤:
将接骨木根皮用15倍量95%乙醇加热回流,提取2次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,回收乙醇得到乙醇提取物,用水溶解后,经AB-8大孔树脂吸附,分别用水、10%乙醇、95%乙醇洗脱,将10%乙醇洗脱液浓缩、干燥,即得接骨木有效成分提取物。
将牛膝用10倍量水煎煮提取2小时,过滤,重复3次,合并水煎液并浓缩到一定体积,经D101大孔树脂吸附,分别用水、50%乙醇、95%乙醇洗脱,将50%乙醇洗脱液浓缩、干燥,即得牛膝有效成分提取物。
将接骨木有效成分提取物和牛膝有效成分提取物按重量配比混合,加入药学上可接受的辅料可进一步制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、口服液、注射剂或外用剂等各种剂型。
本发明的有益效果为:接骨木具有活血接骨、消肿止痛的作用,以此为君药,配伍牛膝,发挥协同作用,增强活血逐瘀通经络的功效,二药合用较之单味药物的使用作用更佳,可以发挥中医药的配伍优势,综合改善骨损伤的各种症状,实验证明在对于骨损伤的镇痛、抗炎作用以及促进骨折愈合上均有独到的优势。本发明是发掘祖国传统医药学宝库,在骨科治疗基础上,选用纯中药,按照中医基础理论组方,经严格筛选,结合现代先进工艺制法组合而成。该组合物可达到治疗骨损伤的药效。具有疗程短、痛苦小,骨痂生长迅速,功能锻炼早,形成稳定性骨痂早,无畸形骨折愈合,骨折痊愈后外观平坦,一次性治愈率高,费用低,毒副作用小,操作简便等特点。
具体实施方式
药理学实验研究
1、不同配伍比例的有效成分组合物对大鼠骨折模型的治疗作用
样品:组合物1(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物2∶1(重量配比))、
组合物2(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物3∶1(重量配比))、
组合物3(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物4∶1(重量配比))、
组合物4(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物5∶1(重量配比))。
对照药:跌打丸
实验动物:Wistar大鼠
实验方法:将大鼠用乌拉坦腹腔注射麻醉,左下肢硫化钠脱毛,无菌条件下切开皮肤,筋膜,沿肌间隙钝性分离肌肉达胫骨中上段,用锯片造成胫骨直径1/2的不完全性骨折,缝合皮下组织及皮肤,用无菌纱布包扎,做出胫骨骨折模型。造模后的大鼠分组,雌雄各半,每组20只,分为组合物1组、组合物2组、组合物3组、组合物4组、阳性药跌打丸组和模型组,增设空白对照组,每日1次,灌胃给药,连续给药21天,空白组、模型组灌服同体积蒸馏水。
观测指标及取材方法:
(1)生化指标
分别于给药后14、21天眼眶取血,离心取血清,-20℃保存,用于血清ALP(碱性磷酸酶)、BGP(骨钙素)、Ca2+及P的测定。
(2)X光片检查
灌药后7、14、21天手术组每组取4只大鼠以清醒状态下摄左下肢X光片。
(3)光镜观察
灌药后7、14和21天手术组每组取4只处死,以骨折处为中心取胫骨段3cm剔除其上的软组织,固定于10%甲醛中,再放入10%硝酸液中脱钙6-8h,流水冲洗24h,放入乙醇中逐级脱水,正丁醇过夜,二甲苯透明,浸蜡,包埋,切片,用于HE染色,光镜观察。
实验结果:
(1)接骨木各组合物对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
结果见表1、2。接骨木与牛膝有效成分各组合物组与阳性药跌打丸组均能提高ALP的活性,但阳性药跌打丸组达到ALP峰值的时间要晚于接骨木与牛膝有效成分各组合物组达到ALP峰值的时间。在骨折14天到21天,与模型组相比,接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组的血清Ca2+浓度逐渐下降(P<0.05),说明具有降低血钙的作用。在骨折愈合过程中,与模型组相比,接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组的血清P浓度逐渐升高(P<0.01),说明具有升高血磷的作用。在骨折愈合的过程中,与模型组相比,接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组均能够促进BGP的活性,具有显著性差异(P<0.01、P<0.05)。
表1:给药第14天对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
表2:给药第21天对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
**为与模型组相比具有极显著差异 *为与模型组相比具有显著差异
(2)X光片检查结果
用药7天即骨折愈合初期,各组血肿已基本吸收,骨折间隙比较明显,但接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组肉芽组织已开始生长。
用药14天即骨折愈合中期,接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组与模型组比较有明显区别,肉芽组织中出现骨样组织和骨小梁,骨折断端边缘均趋于模糊,接近消失,多数有骨膜反应,骨痂量增多、增深,其密度与骨密度相似,以组合物3即4∶1(重量配比)效果最佳。模型组骨折断端趋于模糊,有骨膜反应,但密度淡浅。
用药21天即骨折愈合后期,因大鼠的骨折愈合较快,X光片观察各组无差异。
(3)光镜观察结果
接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组在骨折愈合初期,骨膜在断端覆盖,薄厚不等。由于骨折创伤刺激,吸引了大量细胞聚集在断端周围形成纤维骨痂,可见间充质细胞、成纤维细胞、粒细胞、单核-巨噬细胞,并且有原始骨细胞产生。
在骨折愈合中期,骨膜在断端封盖,有大量新生毛细血管出现,断端附近骨外膜下间充质细胞不断增殖、分化为软骨细胞与成骨细胞,软骨性骨痂形成以取代纤维骨痂,早期纤维骨痂内软骨岛出现,不断扩展,血管周围软骨细胞多为体积较小的圆形幼稚软骨细胞,随着时间的推移,软骨痂周边部位软骨细胞肥大,部分变性坏死,形成原始小梁状骨。
骨折愈合末期,软骨痂周边部位继续不断为原始小梁状骨取代,在新生骨组织表面走行与长骨一致,厚薄均匀。与原骨组织比较,新生骨组织内成骨细胞在切面上观察成圆形或椭圆形,骨细胞嗜碱性明显,原骨质与新生骨组织断端开始模糊不清。
模型组同接骨木与牛膝有效成分各组合物组和阳性药跌打丸组相比,毛细血管生成较少,断端血肿机化较迟缓,原始小梁状骨表面成骨细胞数较少,软骨痂向骨性骨痂转化较慢,愈合速度缓慢。
结论
接骨木与牛膝有效成分配伍的各组合物,可促使骨折大鼠的血清ALP、血清BGP、血清P的含量明显升高,血清Ca2+含量明显降低。生化指标测定、X光片及镜下观察证明,该组合物具有促进骨折愈合的作用,以组合物4∶1的重量配比为最佳配比。
配方比例的改变在一定范围内与效果变化不密切相关,这个范围即接骨木与牛膝的有效部位的重量比为2∶0.3~1.0,尤其是2∶0.4~1.0的范围内,但是,重复上述实验,得到治疗骨折外伤效果最好的接骨木与牛膝有效部位的重量比是4∶1的最佳比例。重量配比2∶0.3~1.0范围之外的组效果相对不及2∶0.3~1.0范围内的组效果。
2、单味药有效成分提取物与配伍后样品对新西兰大白兔骨折模型的治疗作用
样品:组合物(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物4∶1(重量配比))、
接骨木有效成分提取物(JGMT)、
牛膝有效成分提取物(NXT)。
对照药:跌打丸
实验动物:新西兰大白兔
实验方法:新西兰大白兔用戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉。左前肢硫化钠脱毛,无菌条件下切开皮肤、筋膜,沿肌间隙钝性分离肌肉达桡骨,剥离桡骨中下段,用锯片造成宽度约2mm,深度为桡骨直径1/2的不完全性骨折。缝合皮下组织及皮肤,切口用无菌纱布包扎,做出骨折模型。造模后的新西兰大白兔分组,雌雄各半,分为组合物组、接骨木有效成分提取物组(JGMT)、牛膝有效成分提取物组(NXT)、阳性药跌打丸组和模型组,增设空白对照组,灌胃给药,每日1次,连续给药36天,空白组、模型组灌服同体积蒸馏水。
观测指标及取材方法:
(1)生化指标
分别于给药后12、24、36天耳缘静脉取血,离心取血清,-20℃保存,用于血清ALP(碱性磷酸酶)、BGP(骨钙素)、Ca2+及P的测定。
(2)X光片检查
灌药后12、24、36天手术组每组取3只新西兰大白兔以清醒状态下摄左前肢X光片。
(3)光镜观察
灌药后12、24和36天手术组每组取3只处死,以骨折处为中心取桡骨段3cm剔除其上的软组织,固定于10%甲醛中,再放入10%硝酸液中脱钙6-8h,流水冲洗24h,放入乙醇中逐级脱水,正丁醇过夜,二甲苯透明,浸蜡,包埋,切片,用于HE染色,光镜观察。
实验结果:
(1)单味药有效成分提取物与配伍后样品对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
结果见表3、4、5。
表3:给药第12天对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
表4:给药第24天对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
表5:给药第36天对血清ALP、Ca2+、P和骨钙素(BGP)的影响
**与阳性对照药相比具极显著差别 *与阳性对照药相比具显著差别
(2)X光片检查结果
用药12天即骨折愈合初期,组合物组、接骨木有效成分提取物组、牛膝有效成分提取物组血肿已基本吸收,并代之以肉芽组织,骨折间隙比较明显,以组合物组效果最佳;模型组血肿并没有完全吸收,骨折间隙很明显。
用药24天即骨折愈合中期,组合物组与模型组比较有明显区别。组合物组、接骨木有效成分提取物组、牛膝有效成分提取物组肉芽组织中出现骨样组织和骨小梁,骨折断端边缘均趋于模糊,多数有骨膜反应较明显,但密度淡浅,以组合物组效果最佳;模型组血肿完全消失而代之以肉芽组织,有轻微骨膜反应。
用药36天即骨折愈合末期,组合物组、接骨木有效成分提取物组、牛膝有效成分提取物组骨折断端接近消失,骨膜反应密度较深,骨痂量增多、增深,其密度与骨密度相似;模型组骨折断端模糊,骨膜反应密度浅淡,骨痂量少不超过缺损,少数可见骨痂已填满缺损,但较淡且边缘不整齐。
(3)光镜观察结果
组合物组:骨膜在断端封盖,在新生骨组织表面走行与长骨一致,厚薄均匀,骨膜下新生骨组织形成均质的骨小梁,与原骨组织比较,新生骨组织内成骨细胞在切面上观察成圆形或椭圆形,骨细胞嗜碱性明显,原骨质与新生骨组织断端清楚,看不到间隙,新生骨组织对原骨质两端成“工”字形包裹,新生骨质处有较多不同方向的血管即哈费氏管,骨髓腔断端偶见少量炎性细胞,愈合效果最佳。
结论
组合物组对骨折愈合具有显著效果,虽然单独使用接骨木有效成分提取物、牛膝有效成分提取物和阳性药跌打丸也都具有不同程度的接骨作用,但是综合效果不如本发明组合物组。
3、单味药有效成分提取物与配伍后组合物的抗炎作用——对大鼠足肿胀的影响
样品:组合物(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物4∶1(重量配比))、
接骨木有效成分提取物(JGMT)、
牛膝有效成分提取物(NXT)。
对照药:跌打丸
实验动物:Wistar大鼠
实验方法:将大鼠随机分为模型组、阳性药跌打丸组、组合物组、接骨木有效成分提取物组(JGMT)、牛膝有效成分提取物组(NXT),雌雄各半。各组均连续7天灌胃给药,空白对照组给同体积水。实验前先测量每鼠右后肢正常足趾容积,末次给药30min后将大鼠右后肢拉直,自足趾中部皮下注射10%鸡蛋清,0.1ml/爪致炎,致炎后分别在0.5h、1h、2h、4h、6h测定其足跖容积。致炎前肿胀率为0,计算鼠足肿胀率。
实验结果:见表6。
表6:对大鼠足肿胀的影响
**与模型组相比具极显著差别 *与模型组相比具显著差别
结论
组合物组、接骨木有效成分提取物组、牛膝有效成分提取物组和对照药跌打丸组对蛋清所致的大鼠足肿具有显著抑制作用,组合物组、接骨木有效成分提取物组和牛膝有效成分提取物组的效果均优于跌打丸组,其中以组合物组的抗炎效果最显著。
4、单味药有效成分提取物与配伍后组合物的镇痛作用——小鼠热板法
样品:组合物(接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物4∶1(重量配比))、
接骨木有效成分提取物(JGMT)、
牛膝有效成分提取物(NXT)。
对照药:跌打丸
实验动物:昆明种小鼠
实验方法:取健康雌性小鼠,体重20±2g,实验前在热板仪上测鼠痛阈。凡3s内出现舔足或30s不出现舔足者均弃去不用。取筛选合格的小鼠随机分为空白对照组、阳性药跌打丸组、组合物组、接骨木有效成分提取物组(JGMT)、牛膝有效成分提取物组(NXT)。各组均灌胃给药1次,空白对照组给同体积水。分别在给药后0.5h、1h、2h、4h、测定其痛域值。
实验结果:见表7。
表7:对小鼠热板法的镇痛作用
**与模型组相比具极显著差别 *与模型组相比具显著差别
结论
组合物组、接骨木有效成分提取物组、牛膝有效成分提取物组、阳性药跌打丸组均具有一定的镇痛作用,其中以组合物组的镇痛效果最显著,给药1小时时痛域值最高。
综上所述,接骨木有效成分提取物和牛膝有效成分提取物的组合物中二组分有效部位的重量比4∶1是最佳比例。单独接骨木有效成分提取物、牛膝有效成分提取物也具有较好的接骨效果,但是将接骨木有效成分提取物、牛膝有效成分提取物按照上述优选配比得到更好的接骨效果,说明两者联合应用不是简单的治疗相加作用而是协同增强作用。二者的协同作用不仅体现在促进骨折愈合方面,还体现在抗炎作用、镇痛作用等方面,能弥补骨损伤愈合时间漫长,病人痛苦大,治疗效果不理想等缺点。
Claims (4)
1.一种治疗骨损伤的复方接骨木组合物,其特征在于它是由接骨木有效成分提取物和牛膝有效成分提取物组成,其中接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物的重量配比为2∶1、3∶1、4∶1或5∶1。
2.根据权利要求1所述的治疗骨损伤的复方接骨木组合物,其特征在于接骨木有效成分提取物与牛膝有效成分提取物的重量配比为4∶1。
3.根据权利要求1-2所述的治疗骨损伤的复方接骨木组合物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)将接骨木根皮用15倍量95%乙醇加热回流,提取2次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,回收乙醇得到乙醇提取物,用水溶解后,经AB-8大孔树脂吸附,分别用水、10%乙醇、95%乙醇洗脱,将10%乙醇洗脱液浓缩、干燥,即得接骨木有效成分提取物。
(2)将牛膝用10倍量水煎煮提取2小时,过滤,重复3次,合并水煎液并浓缩到一定体积,经D101大孔树脂吸附,分别用水、50%乙醇、95%乙醇洗脱,将50%乙醇洗脱液浓缩、干燥,即得牛膝有效成分提取物。
(3)将接骨木有效成分提取物和牛膝有效成分提取物按重量配比混合即得复方接骨木组合物。
4.权利要求1-2所述的复方接骨木组合物在制备治疗骨损伤药物中的应用,其特征在于在组合物中加入药学上可接受的辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、口服液、注射剂或外用剂。
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GR01 | Patent grant |