CN102119948B - 具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途 - Google Patents

具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途 Download PDF

Info

Publication number
CN102119948B
CN102119948B CN201110059033XA CN201110059033A CN102119948B CN 102119948 B CN102119948 B CN 102119948B CN 201110059033X A CN201110059033X A CN 201110059033XA CN 201110059033 A CN201110059033 A CN 201110059033A CN 102119948 B CN102119948 B CN 102119948B
Authority
CN
China
Prior art keywords
flos carthami
preparation
active component
eluent
active ingredient
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201110059033XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN102119948A (zh
Inventor
程翼宇
王毅
李云飞
葛志伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University ZJU
Original Assignee
Zhejiang University ZJU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University ZJU filed Critical Zhejiang University ZJU
Priority to CN201110059033XA priority Critical patent/CN102119948B/zh
Publication of CN102119948A publication Critical patent/CN102119948A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102119948B publication Critical patent/CN102119948B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明提供一种具有心肌保护作用的红花有效组分，将药材通过加热提取，浓缩，硅胶柱分离，洗脱，洗脱液浓缩干燥，再用制备液相色谱继续分离，收集溶液，溶液经浓缩干燥后得到有效组分。本发明提供的红花有效组分可在制备治疗、预防心血管疾病药物中的应用。本发明方法设计合理，能快速准确地得到有效成分，在生产中更易于药物的质量控制。

Description

具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途
技术领域
本发明属中药领域，涉及一种治疗心血管疾病的中药提取物，具体涉及从红花中提取的有效组分，制剂及其制备方法与用途。
背景技术
心血管疾病是危害人类健康的第一杀手，近年来，随着我国人口老年化以及人们工作、生活、饮食结构及环境等的变化，冠心病等心脑血管疾病的发生率也逐年增多，严重威胁着人民的身心健康。天然产物中许多活性物质具有抗心肌缺血、缺氧作用，其中一些已开发成治疗冠心病和心绞痛的新药。因而从天然产物中寻找具有抗心肌缺血、缺氧生理活性的有效物质，是发现、开发新药的有效途径之一。我国药用生物资源十分丰富，其生理活性物质是研究和发现新药先导化学物，开发新药的天然宝库。目前，我国从天然产物中提取活性物质，用于开发成治疗冠心病、安全性好、毒性低的新药还很少，从天然产物中提取活性物质，开发成具有抗心肌缺血，用于治疗冠心病和心绞痛的新药，具有重要应用价值和广阔发展前景。
红花为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的管状花。性味 性温，味辛，具有活血通径、散瘀止痛的功效。含有红花黄色素（Safflor yellow）、红花苷（Carthamin）、15α，20β-二羟基-Δ4-娠烯-3-酮（15α，20β -Dihydroxy-Δ4-pregnen-3-one）、木犀草素-7-葡萄糖苷（Luteolin-7-glucoside）、红花醌苷（carthamone）、新红花苷（neo-cqrthamin）、腺嘌呤核苷(adenosine)、黄色素（safflor yellow A）、山柰酚、槲皮素及槲皮素、槲皮素-3-葡萄糖苷、桷皮素-7-葡萄糖苷、山柰酚 –3-芸香糖苷和芦丁（rutin）、红花多糖等化合物。
现代药理研究表明：红花水提取物及红花水溶性混合物-红花黄色素有增加冠脉血流量及心肌营养性血流量的作用，在兔、大鼠、犬等造成实验性心肌缺血或心肌梗塞的动物模型上，红花及其制剂均有不同程度的对抗作用。红花可使因垂体后叶素引起的大鼠或家兔急性心肌缺血有明显保护作用；可使反复短暂阻断冠状动脉血流造成麻醉犬急性心肌缺血的程度明显减轻，范围缩小，心率减慢，并保护急性心肌梗塞区的边缘，缩小梗塞范围及降低边缘区心电图ST段抬高的幅度，从而改善缺血心肌氧的供求关系。红花具有非常显著地抑制ADP诱导的家兔血小板聚集作用，并对ADP已聚集的血小板也有非常明显的解聚作用。红花尚可明显延长家兔血浆复钙时间、凝血酶原时间和凝血时间。表明它能同时影响体内和体外的凝血系统。此外，红花油有降低血脂作用。红花具有以上对心血管系统的明显药理作用，因此，从红花中分离出有效组分，开发出治疗心血管疾病的现代中药具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有心肌保护作用的红花有效组分，通过以下步骤制备获得：将红花药材加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取得提取液，将提取液浓缩成浸膏，并将其与硅胶进行拌样，用正相硅胶柱对其进行分离，首先用石油醚和乙酸乙酯作为洗脱剂，得洗脱液I，弃之，然后改用氯仿和甲醇作为洗脱剂，得洗脱液II，将洗脱液II浓缩干燥后得样品；用制备液相色谱继续分离得到的样品；制备色谱的分离条件：色谱柱为半制备柱，流动相为水和乙腈，梯度洗脱。
具体制备步骤如下：取红花药材，加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液。将提取液浓缩成浸膏，并将其与硅胶进行拌样，用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50:1的石油醚和乙酸乙酯作为洗脱剂，得洗脱液I，弃之，然后改用体积比为10:1的氯仿和甲醇作为洗脱剂，得洗脱液II，将洗脱液II浓缩干燥后得样品；用制备液相色谱继续分离得到的样品：制备色谱的分离条件：色谱柱为制备柱(ZORBAX SB C18;9.4mm                                                
Figure DEST_PATH_IMAGE002
250mm,5
Figure DEST_PATH_IMAGE004
)，流动相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下：0min时，流动相A 为70%的水，流动相B为30%的乙腈溶液；18 min时，流动相A 为60%的水，流动相B为40%的乙腈溶液；30min时，流动相A 为50%的水，流动相B为50%的乙腈溶液；流速为3ml/min，柱温为室温；经制备液相色谱分离，在17.0~23.8min时间段收集溶液，溶液经浓缩干燥后得到有效组分。
本发明的另一个目的是提供所述红花有效组分在制备治疗心血管疾病的药物中的应用。经药理实验证明，本发明提供的红花有效组分对心肌细胞有保护作用。
本发明的红花有效组分可以作为活性成分，加入药剂学上接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂的制备方法制成制剂。
所述的制剂包括注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、喷雾剂、滴丸剂 、崩解剂、口崩片、微丸等。
本发明的红花有效组分及其制剂可在制备治疗、预防心血管疾病药物中应用。本发明提供的制备方法设计合理，能快速准确地得到有效成分，在药理研究上更易于阐明其作用机制，在生产中更易于药物的质量控制。
具体实施方式
下面将结合实施例进一步详细说明本发明的实质内容和有益效果，该实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。
实施例一 红花有效组分的制备
将红花药材加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取得提取液，将提取液浓缩成浸膏，并将其与硅胶进行拌样，用正相硅胶柱对其进行分离，首先用石油醚和乙酸乙酯作为流洗脱剂，得洗脱液I，弃之，然后改用氯仿和甲醇作为洗脱剂，得洗脱液II，将洗脱液II浓缩干燥后得样品；用制备液相色谱继续分离得到的样品；制备色谱的分离条件：色谱柱为半制备柱，流动相为水和乙腈，梯度洗脱。在17.0~23.8min时间段收集溶液，浓缩干燥后得到有效组分。
实施例二 红花有效组分的制备
取红花药材250g，将其粉碎后加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液。将提取液浓缩成浸膏，并将其与硅胶进行拌样，用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50:1的石油醚和乙酸乙酯作为洗脱剂，得洗脱液I，弃之，然后改用体积比为10:1的氯仿和甲醇作为洗脱剂，得洗脱液II，将洗脱液II浓缩干燥后得样品；用制备液相色谱继续分离得到的样品：制备色谱的分离条件：色谱柱为半制备柱(ZORBAX SB C18;9.4mm 
Figure 457899DEST_PATH_IMAGE002
250mm,5
Figure 251191DEST_PATH_IMAGE004
)，流动相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下：0min时，流动相A 为70%的水，流动相B为30%的乙腈溶液；18 min时，流动相A 为60%的水，流动相B为40%的乙腈溶液；30min时，流动相A 为50%的水，流动相B为50%的乙腈溶液；流速为3ml/min，柱温为室温；经制备液相色谱分离，在17.0~23.8min时间段收集溶液，溶液经浓缩干燥后得到有效组分。
实施例三 滴丸制剂的制备
取红花有效组分0.5g与10.5g聚乙二醇-20000混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸滴灌中，药液滴至6~8℃液体石蜡中，除油，制得滴丸400粒。
实施例四 冻干粉针剂的制备
取红花有效组分0.5g、葡萄糖4.5g、硫代硫酸钠0.9g和蒸馏水1000ml，上述组分混合均匀后，分装400支，冷冻干燥，即得。
实施例五 红花组分的活性评价实验
1．红花组分对H2O2损伤心肌细胞的保护作用
体外培养H9C2心肌细胞，培养液为DMEM(高糖)+10%FBS(G)+1%非必需氨基酸+0.1%双抗。取对数生长期细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养24 h后，加入200μmol/mL H2O2损伤心肌细胞30 min，再加入终浓度为50μg/mL的红花组分孵育24 h，采用MTT法测定细胞活力。结果表明，该组分对H2O2损伤心肌细胞的保护率为16.27%。
2. 红花组分对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用
体外培养H9C2心肌细胞，培养液为DMEM(高糖)+10%FBS(G)+1%非必需氨基酸+0.1%双抗。取对数生长期细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养24 h后，在缺氧小室中培养6 h。缺氧结束后，取出细胞培养板加入经无糖Hank’s稀释的终浓度为50μg/mL的红花组分，在正常培养条件下孵育6 h，取细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果表明，该组分对缺氧复氧损伤的心肌细胞保护率为13.04%。

Claims (4)

1.一种具有心肌保护作用的红花有效组分，其特征在于，通过以下步骤获得：取红花药材加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液；将提取液浓缩成浸膏，并将其与硅胶进行拌样，用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50:1的石油醚和乙酸乙酯作为洗脱剂，得洗脱液I，弃之，然后改用体积比为10:1的氯仿和甲醇作为洗脱剂，得洗脱液II，将洗脱液II浓缩干燥后得样品；用制备液相色谱继续分离得到的样品：制备色谱的分离条件：色谱柱为ZORBAX SB C18；9.4mm ×250mm，5μm的半制备柱，流动相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下：0min，30%B；18min，40%B；30min，50%B；流速为3ml/min，柱温为室温；经制备液相色谱分离，在17.0-23.8min时间段收集溶液，溶液经浓缩干燥后得到有效组分。
2.根据权利要求1所述的一种红花有效组分在制备治疗心血管疾病的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物由红花有效组分加入药剂学上可接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂制备方法制成。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的制剂包括液体制剂或固体制剂。
CN201110059033XA 2011-03-13 2011-03-13 具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途 Expired - Fee Related CN102119948B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110059033XA CN102119948B (zh) 2011-03-13 2011-03-13 具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110059033XA CN102119948B (zh) 2011-03-13 2011-03-13 具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102119948A CN102119948A (zh) 2011-07-13
CN102119948B true CN102119948B (zh) 2012-11-21

Family

ID=44248676

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201110059033XA Expired - Fee Related CN102119948B (zh) 2011-03-13 2011-03-13 具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102119948B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112552358B (zh) * 2020-12-24 2022-02-11 浙江大学 一种红景天苷-生物素小分子探针及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1428170A (zh) * 2002-11-10 2003-07-09 边冬梅 红花有效部位与其粉针剂及制备方法和医药用途
CN101073587A (zh) * 2006-05-18 2007-11-21 天津天士力制药股份有限公司 一种柴胡药材的提取分离方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1428170A (zh) * 2002-11-10 2003-07-09 边冬梅 红花有效部位与其粉针剂及制备方法和医药用途
CN101073587A (zh) * 2006-05-18 2007-11-21 天津天士力制药股份有限公司 一种柴胡药材的提取分离方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吴冬青等.红花黄色素提取工艺研究.《中国野生植物资源》.2004,第23卷(第01期), *
郑为超等.红花总黄素对异丙肾上腺素所致心肌缺血大鼠的保护及机制研究.《中国实验方剂学杂志》.2003,第9卷(第06期), *
陈铎葆等.红花黄素预处理对大鼠心肌缺氧/再给氧损伤的影响.《中国中医急症》.2005,第14卷(第01期), *

Also Published As

Publication number Publication date
CN102119948A (zh) 2011-07-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2829275B1 (en) Total flavone extract of abelmoschus manihot and preparation method thereof
CN102283866A (zh) 一种含高纯度黄酮类成分的蜂胶提取方法
CN103316096A (zh) 一种黑种草子总黄酮提取物及其制备方法和用途
CN106176716B (zh) 瑞香烷型二萜化合物pimelotide C的新用途
CN101278958A (zh) 肺宁滴丸及其制备方法
CN103271978B (zh) 一种用于抗缺氧、缺糖及治疗高原病的银杏叶复方制剂
CN102988529B (zh) 樱桃核中总酚酸的制备方法及新用途
CN102119948B (zh) 具心肌保护作用的红花有效组分及制备方法与用途
CN102125592B (zh) 一种红花有效组分制备方法与用途
CN102119984B (zh) 含羟基红花黄色素a的红花有效组分制备方法和用途
CN102119947B (zh) 一种红花有效组分的制备方法与用途
CN100581539C (zh) 一种白花蛇舌草有效组分及制备方法和应用
CN102125589B (zh) 一种红参有效组分的制备方法与用途
CN104546952B (zh) 一种石上柏活性组分及其制备方法和用途
CN102258587B (zh) 一种赤芍有效组分的制备方法与用途
CN108261435A (zh) 一种诸葛菜生物碱类提取物及其在制备保肝制品中的应用
CN103735689B (zh) 一种天然药物组合物在制备耐缺氧药品及保健品中的应用
CN102125590B (zh) 含人参皂苷Rg1的三七有效组分及制备方法与用途
CN102145046B (zh) 含没食子酸甲酯的赤芍有效组分制备方法与用途
CN101455674A (zh) 用于治疗慢性肝炎的椭圆叶花锚总双苯吡喃酮滴丸及其制备方法
CN102125609B (zh) 具有心肌保护作用的赤芍有效组分及其制备方法
CN104758333B (zh) 徐长卿c21甾体提取物及其制备方法和用途
CN102133262A (zh) 具心肌保护作用的黄芪有效组分制备方法与用途
CN102133277B (zh) 赤芍有效组分及其制备方法与用途
CN102119957B (zh) 一种降香有效组分的制备方法与用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20121121

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee